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CromossomosCromossomos
Estrutura e identificação
do Cariótipo
Prof. Priscilla RussoBiologia - Farmácia
CromossomoCromossomo
• Filamentos espiralados de cromatina, composto por DNA e proteínas
• Durante o ciclo celular, os cromossomos passam por estágios ordenados de condensação e descondensação.
DNA - histonasDNA - histonas
EstruturaEstrutura
• Centrômero: constrição primária que divide o cromossomo em dois braços. É o ponto de ligação de cromátides irmãs
• Telômero: extremidade dos braços cromossômicos.
• Satélite: porção terminal do cromossomo separado por uma constrição secundária.
CentrômeroCentrômero
• Metacêntrico –centrômero central–braços aproximadamente iguais
• Submetacêntrico –centrômero não central –braços de comprimento diferentes
• Acrocêntrico –centrômero próximo a extremidade
CentrômeroCentrômero
Obs. Os cromossomos acrocêntricos humanos (13, 14, 15, 21, 22) possuem satélites
Sexuais e AutossomosSexuais e Autossomos
Técnicas de análiseTécnicas de análise
• Citogenética: estudo dos cromossomos e sua estrutura
• Os cromossomos de uma célula humana em divisão são mais facilmente analisados na metáfase.
• Nesta fase, os cromossomos estão dispersos e apresentam duas cromátides, unidas pelo centrômero.
• Obtém-se uma amostra de sangue• Centrifuga para os leucócitos
sedimentarem • Estes são colocados em meio de
cultura e estimulados a dividir-se, com adição da fito-hemaglutinina, agente mitogênico (estimula mitose)
TécnicaTécnica
TécnicaTécnica
• Incuba para multiplicação celular• Acrescenta solução de colchicina,
para impedir a conclusão da divisão celular (inibindo a formação do fuso e retardando a separação dos centrômeros)
• Então, as células paradas na metáfase acumulam-se na cultura
TécnicaTécnica
• Em seguida, adiciona solução hipotônica para tumefar as células, lisando e liberando os cromossomos, mas mantendo-os intactos
TécnicaTécnica
• Os cromossomos são fixados, espalhados em lâminas e corados por várias técnicas.
BandeamentoBandeamento
• Vários métodos de bandeamento são utilizados nos laboratórios de citogenética para identificação e análise dos cromossomos – Coloração convencional– Bandeamento G– Bandeamento R– Bandeamento C
Coloração convencionalColoração convencional
Bandeamento GBandeamento G
• Os cromossomos são tratados com tripsina (desnaturação de proteínas) e corados com Giemsa.
• Cada par de cromossomos cora-se num padrão típico de bandas claras e escuras.
Bandeamento GBandeamento G
Bandeamento GBandeamento G
Bandeamento RBandeamento R
• Os cromossomos recebem pré-tratamento com calor antes da coloração Giemsa.
• Nesse caso, as bandas claras e escuras resultantes (bandas R) são o inverso das produzidas por bandeamento G.
Bandeamento CBandeamento C
• Coloração da região centrômérica
CariótipoCariótipo
Masculino (15 cromossomos no grupo Masculino (15 cromossomos no grupo C e 5 cromossomos no grupo G)C e 5 cromossomos no grupo G)
Feminino (16 cromossomos no grupo Feminino (16 cromossomos no grupo C e 4 cromossomos no grupo G)C e 4 cromossomos no grupo G)
FISHFISH
• Detecta segmentos específicos de DNA, e um software de computador é capaz discriminar 27 diferentes tons.
• "Chromosome Painting“
• Permite detectar melhor os rearranjos cromossômicos complexos e simples e, ainda pode-se caracterizar muitas anormalidades cromossômicas que não eram detectadas pelas técnicas de bandeamento tradicionais.
FISHFISH
FISHFISH
Ex.: Sd. EdwardsEx.: Sd. Edwards
AtividadesAtividades
1. Montagem do cariótipo
(anexo)
2. Analise o cariótipo e responda:
• Qual é o tipo de bandeamento?
• Qual o sexo do paciente?
• Qual a síndrome destacada?
• Como representamos este cariótipo?
3. Este cariótipo é normal?
( ) Sim
( ) Não
4. Classifique os cromossomos
Metacêntrico:
Submetacêntrico:
Acrocêntrico: