CULTIVO DE SECRECIÓN FARINGEA Y EXUDADO DE HERIDAS

GENERALIDADES

MICROBIOLOGÍA DE LA SECRECIÓN FARÍNGEA.

Los microorganismos que causan enfermedad en el tracto respiratorio superior, la

nasofaringe y faringe deben entrar en contacto con el epitelio de la mucosa, adherirse y

multiplicarse. N. meningitidis, Bordetella pertussis, Corynebacterium diphtheriae y

muchos virus son transportados por aerosoles formados por las secreciones y llegan al

nuevo huésped mediante contacto íntimo, condiciones de hacinamiento o de falta de

higiene. Los Mycoplasma y Streptococcus pyogenes con frecuencia se adquieren también

de esta manera. Aunque se puede aislar gran número de especies de bacterias y hongos a

partir de muestras tomadas del tracto respiratorio superior, son muy pocos los

microorganismos que provocan una verdadera patología en esta área.

El S. pyogenes o estreptococo betahemolítico del grupo A es la bacteria más comúnmente

aislada; este agente causa secuelas postestreptocócicas como fiebre reumática aguda y

glomerulonefritis. No es infrecuente que el microorganismo provoque infecciones

supurativas (piogénicas) de los senos paranasales y del oído medio y celulitis como una

secuela piógena secundaria luego de un episodio de faringitis. En consecuencia, la

faringitis estreptocócica usualmente se trata para prevenir tanto las secuelas supurativas

como no supurativas, así como para disminuir la morbilidad. También se han observado

casos poco frecuentes de faringitis debidos a estreptococos grupos B, C y G y a miembros

no hemolíticos de estos grupos (incluyendo el grupo A). Si bien una faringitis puede

deberse a otras bacterias además de los estreptococos grupo A, esto ocurre con muy poca

frecuencia y por lo tanto los laboratorios no deben investigar otros agentes, excepto en

circunstancias especiales y luego de una discusión con el clínico que atiende al paciente.

Si bien mucho menos común que la faringitis estreptocócica, el C. diphtheriae aun puede

ser aislado de pacientes con dolor de garganta o con enfermedades sistémicas más severas,

otros Corynebacterium (C. ulcerans, C. hemolyticum y C. pyogenes) pueden provocar

faringitis con formación o no de membrana o exantema asociado, pero estas infecciones

son poco frecuentes. Neisseria meningitidis puede ser aislada de la nasofaringe de

portadores aunque no causa patología en esta localización, pero Neisseria gonorrhoeae

puede provocar una faringitis exudativa con predominio sobre todo en los hombres

homosexuales. En un proceso gonocócico diseminado el organismo también puede ser

aislado de garganta. La faringitis gonocócica no siempre es sintomática. Aunque

Haemophylus influenzae, Staphylococcus aureus y Streptococcus pneumoniae se aíslan

con frecuencia de cultivos de materiales de nasofaringe y de garganta no se ha demostrado

que causen faringitis, excepto en el caso de S. aureus en el paciente inmunosuprimido. La

condición de portador de alguno de estos microorganismos así como de N. meningitidis

puede tener importancia clínica para algunos pacientes o sus contactos . En particular, en

pacientes con fibrosis quística, los cultivos de materiales de garganta pueden permitir el

aislamiento de agentes etiológicos de neumonía que no pueden ser recuperados de esputo

debido al sobrecrecimiento de las otras bacterias presentes. Como en todas las situaciones

dudosas, la comunicación entre el microbiólogo y el clínico aclara la importancia de estos

aislamientos. En el cultivo de muestras de la zona anterior de los orificios nasales a

menudo se puede encontrar S. aureus. La frecuencia de portadores de este microorganismo

es especialmente alta en el personal del área de salud.

Mycoplasma pneumoniae puede causar faringitis de escasa aparición, siendo aislada

entonces de hisopos de nasofaringe. Un hisopo de este tipo también es el espécimen de

elección para el aislamiento de Chlamydia trachomatis a partir de casos de neumonía,

especialmente en lactantes muy pequeños. Diversos virus pueden causar faringitis o rinitis

exudativa, entre ellos los virus rino, adeno, sincicial respiratorio, influenza, parainfluenza,

corona, coxsackie, de la citomegalia y Epstein-Barr. Además, el H. influenzae (y en

ocasiones otros microorganismos) causan una epiglotitis grave que puede llevar

rápidamente a la obstrucción de las vías aéreas si no es tratada. La acción conjunta de

cierta flora oral anaeróbica causa una faringitis exudativa denominada angina de Vincent

que puede ser caracterizada por una lesión membranosa del tipo de la difteria (el olor

desagradable que se presenta en los pacientes con angina de Vincent diferencia un

síndrome de otro). En este síndrome son comunes los abscesos peritonsilares. La evidencia

disponible sugiere que Fusobacterium necrophorum es el patógeno clave de este cuadro,

pero también pueden estar implicados otros anaerobios.

Los pacientes inmunosuprimidos, incluyendo los neonatos, pueden desarrollar una

candidiasis oral denominada muguet. El muguet oral puede extenderse y producir una

esofagitis, un hallazgo común en pacientes con SIDA u otras inmunodeficiencias. En los

pacientes granulocitopénicos, las Enterobacteriaceae, S. aureus o Candida pueden

provocar mucositis oral o faringitis, que se manifiesta por edema, dolor de garganta y en

algunos casos por exudado o ulceración. El virus herpes simple causa lesiones dolorosas en

la boca y la orofaringe, otra condición que predomina entre los pacientes

inmunosuprimidos.

El rinoescleroma es una forma rara de una infección crónica, granulomatosa de los pasajes

nasales, incluyendo los senos y en ocasiones la faringe y laringe, asociada con la Klebsiella

rhinoscleromatis. Está caracterizada por obstrucción nasal que se desarrolla lentamente

debido a un crecimiento de tipo tumoral con diseminación local. También puede

recuperarse otra especie, la Klebsiella ozaenae de infecciones del tracto respiratorio

superior. Este microorganismo contribuiría a una condición denominada ocena,

caracterizada por una descarga crónica mucopurulenta (con frecuencia de olor fétido

debido a infección secundaria por anaerobios).

MICROBIOLOGÍA DEL EXUDADO DE HERIDAS

Las heridas son injurias a tejidos del cuerpo causadas por eventos tales como, quemaduras,

perforaciones y mordeduras animales y humanas. Las heridas o abscesos también ocurren

dentro de los tejidos del cuerpo como resultado de la cirugía o procedimientos dentales. Las

heridas llegan a infectarse cuando los microorganismos del ambiente externo o de dentro

del cuerpo de la persona, entran a la herida abierta y se multiplican. Si una herida está

infectada ésta se presenta enrojecida, dolorosa, inflamada y drenando pus; un proceso

febril luego de un procedimiento quirúrgico indica una infección en el lugar de la cirugía.

La colonización de heridas es frecuentemente polimicrobiana e involucra numerosos

microorganismos que son potencialmente patogénicos por lo que implica siempre algún

riesgo el llegar a infectarse. Las bacterias involucradas pueden ser agrupadas en dos

categorías aerobias y anaerobias. Las heridas profundas, son ambientes ideales para que

desarrolle una infección anaerobia siendo el mal olor, la producción de gas o gangrena en el

lugar de la infección, signos de un proceso infeccioso causado por una bacteria anaerobia.

Los cultivos de rutina típicamente sólo descubren bacterias aerobias. Si el médico pide al

laboratorio incluir cultivos para anaerobios, una porción de la muestra será sembrada en

placas de cultivo o en tubos con caldo nutritivo apropiado e incubados en una estufa sin

oxígeno.

Las infecciones de piel pueden ser primarias o secundarias. Las infecciones primarias

tienen características propias y son iniciadas por un único organismo, y usualmente ocurren

sobre la piel normal. Son frecuentemente causados por Staphylococcus aureus,

Streptococcus pyogenes, y bacterias corineformes. Los ejemplos más comunes son

impétigo, foliculitis y eritrasma. Las infecciones sistémicas pueden también tener

manifestaciones en la piel. Las infecciones secundarias dan lugar a una piel enferma como

una condición superimpuesta. Intertrigo y las infecciones de los tejidos de los dedos de los

pies son ejemplos de infecciones secundarias.

Para mejorar la curación y prevenir la diseminación de la infección a otros tejidos del

cuerpo, los microorganismos infectantes deben ser eliminados. Un cultivo de las heridas

descubre no sólo que tipo de microorganismo es el causante de la infección sino que

también mediante una prueba de susceptibilidad a antibióticos nos indica cuál es el mejor

para eliminarlo.

En caso se sospeche que la herida esté infectada con mohos o levaduras deberá realizarse

un cultivo para hongos así como las pruebas bioquímicas y tinciones que son utilizadas para

la identificación micótica. Microorganismos más inusuales como Mycobacterium leprae

pueden ser causa de infecciones de heridas, generalmente la solicitud para la investigación

de este microorganismo debe ser realizada por el médico.

Los resultados de la coloración Gram deben estar disponibles el mismo día o en menos de

una hora si así es requerido por el médico. Se hace necesario que al día siguiente se tenga

un reporte preliminar, éste dirá si se ha encontrado algún microorganismo y cuál es su

reacción al Gram. El reporte final usualmente está disponible en tres días el cual incluye

una identificación completa un estimado de la cantidad de microorganismos, más una lista

de los antibióticos para los cuales son sensibles. Cuando se realizan cultivos para hongos o

bacterias anaerobias el análisis puede tomar de dos a tres semanas.

El cultivo de heridas es llamado también cultivo de tejidos blandos, cultivo de abscesos o

cultivo de tejidos y sensibilidad.

OBJETIVO

- Confirmar la sospecha de infección nasofaríngea y determinar al agente

causante.

- Aislar e identificar el o los agentes etiológicos de una herida infectada.

- Determinar la sensibilidad o resistencia de las bacterias aisladas a diferentes

agentes antimicrobianos.

METODOLOGÍA DE ESTUDIO DE LA SECRECIÓN FARÍNGEA:

MATERIALES

- Muestra de secreción nasofaríngea

- Medio de transporte Amies con gel de agar y carbón

- Placas con Agar sangre, Chocolate, Sangre Azida, Mac Conkey, Manitol

Salado, y Sabouraud con Cloranfenicol.

- Tubo con medio Tioglicolato.

- Batería bioquímica.

- Batería Gram.

- Láminas porta y cubre objeto

- Solución salina estéril.

- Hisopos de rayón.

RECOLECCIÓN DE LA MUESTRA

Tomar la muestra con hisopo de rayón y si permanece húmedo no deben tomarse

otras precauciones para muestras que serán inoculadas dentro de las 4 h de la

recolección. Luego de este período debe agregarse el medio de transporte indicado

para mantener la viabilidad y evitar el sobrecrecimiento de los contaminantes.

Para la detección de B. pertussis la mejor muestra es el aspirado de secreciones

nasofaríngeas recogidas con un bulbo de goma. Los materiales para aislamiento de

B. pertussis debieran ser inoculados directamente en los medios de cultivo frescos,

al lado de la cama del enfermo; si esto es imposible, es aceptable el transporte no

más de 2 h.

Se coloca la cabeza del paciente en hiperextensión y se iluminan las fauces en

forma conveniente. Con hisopo estéril se frotan ambas amígdalas (o ambos pilares

en pacientes amigdalectomizados) . Si existiera un exudado visible se debería tratar

de tocarlo con la punta del hisopo. En cualquier caso se deberá evitar el contacto

del hisopo con el paladar o la lengua, es por ello que resulta imprescindible

ayudarse con un bajalenguas. El hisopo se deberá colocar en un tubo con gotas de

solución fisiológica estéril o con medio de transporte (Amies con gel de agar y

carbón). Como alternativa recomendada sólo ante una emergencia se puede

conservar seco en un tubo de ensayo estéril. El hisopo seco puede conservar la

viabilidad de los estreptococos ß-hemolíticos en un alto porcentaje de casos. La

conservación de estas muestras se deberá efectuar a temperatura ambiente durante

el menor tiempo posible.

METODOLOGÍA DE ESTUDIO DE LOS EXUDADOS DE HERIDAS

MATERIALES

- Muestra de exudado de heridas

- Placas con Agar Sangre, Agar MacConkey y Agar Manitol Salado.

- Tubos con Medio Tioglicolato fluido.

- Hisopos de rayón con medio de transporte

- Batería Gram

- Batería Bioquímica

- Láminas porta y cubre objeto.

- Solución Salina estéril

- Solución KOH

- Jeringa estéril

RECOLECCIÓN DE LA MUESTRA.

Se prefiere que la muestra sea un aspirado o una biopsia. Cuando sea posible, tome

un trozo de pared del absceso, si no lo es tome una muestra de pus de la herida.

No está permitido tocar el área circundante a la herida debido a que muchos

microorganismos viven en la piel. Para este fin se debe limpiar primero la superficie

de la lesión utilizando alcohol. Si hubiere costra sobre la herida ésta debe ser

retirada con la hoja de un bisturí. Usando una jeringa se succiona tanto pus como

sea posible a partir de la herida, si la muestra es insuficiente, instilar suero

fisiológico y aspirarlo nuevamente en la jeringa. Si los procedimientos anteriores no

son factibles entonces puede realizarse un frotis de las partes profundas de la herida

con una torunda.

Si bien es posible que el médico pueda comenzar el tratamiento antibiótico antes del

cultivo y de las pruebas de sensibilidad a antibióticos, sin embargo la muestra para

el cultivo debe ser colectada antes del consumo de antibióticos.

La muestra del material debe ser colocada en un contenedor estéril y enviado

directamente al laboratorio. Para el caso de las muestras tomadas con torundas éstas

pueden ser transportadas en tubos con medio de transporte (medio de Amies con

agar y carbón).

Para el estudio de hongos se pueden obtener además raspados de piel o uñas

infectadas en una placa de Petri estéril o un sobre limpio.

Las muestras deben ser procesadas en ≤ 2 h a temperatura ambiente.