Cultivo Micelial Masivo de Hongos Del Género Ganoderma

8/18/2019 Cultivo Micelial Masivo de Hongos Del Género Ganoderma

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INSTITUTO TECNOLÓGICO

SUPERIOR DE MISANTLA

INGENIERÍA BIOQUÍMICA

Cultivo micelial masivo de hongos del géneroGanoderma.

INFORME FINAL

QUE PRESENTA

EDITH GONZÁLEZ CRUZ

ASESORES EXTERNOS

Director: Dr Á!"e# R Tri"o$ L%!&%

Co&irectore$: Dr C'$%r E$(i!o)% R%*+re)

Dr G,i##er*o Me!&o)% Cer-%!te$

ASESOR NTERNO

Dr G,$t%-o M%rt+!e) C%$te##%!o$

!SANT"A# $ERACRU%. ENERO &E '()*.


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'


3/48

. Re$,*e!

!eta+olitos derivados de los car,-oros de Ganoderma recientemente han sido

o+tenidos ,or técnicas de cultivo micelial# /a 0ue tanto los cultivos l10uidos como s-lidos son

una alternativa ,ara la ,roducci-n de estos com,uestos.

El género Ganoderma ,osee una ta2onom1a com,le3a# de+ida al en-meno de la

,lasticidad enot1,ica / 0ue muchas de sus es,ecies se encuentran ,arcial o

su,ericialmente descritas# ,or lo 0ue la identiicaci-n a nivel de es,ecie es com,licada.

En este tra+a3o# se llev- a ca+o la recolecci-n de car,-oros en las Ciudades de

Xala,a Enr10ue4# "as $igas de Ram1re4 / Tla,aco/an# en el Estado de $eracru4 de gnacio

de la "lave / en +ase a la morolog1a se determin- cuales ,ertenec1an a es,ecies de

Ganoderma# se evalu- en un inicio la ,roducci-n de +iomasa de la ce,as em,leando cultivos

s-lidos# 0ue ueron las técnicas de cultivo en ca3a Petri utili4ando medio de cultivo P&A.

Posteriormente se tra+a3- ,ara ,reservar las ce,as en tu+os inclinados con el mismo medio

de cultivo / des,ués se utili4- medio l10uido ,ara llevar a ca+o los ,rein-culos e in-culos de

las ce,as o+tenidas 5!endo4a et al# '())6.

&e lo anterior# el cultivo l10uido em,leando el medio de cultivo 7ang / %hong result-

ser eiciente ,ara la ,roducci-n de +iomasa# con el 0ue se reali4- el cultivo masivo de lasce,as de Ganoderma.

8


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/ Í!&ice

). Resumen..........................................................................................................................iii

'. 9ndice............................................................................................................................... iv

8. ntroducci-n......................................................................................................................:*. ;ustiicaci-n......................................................................................................................<

=. O+3etivo >eneral...............................................................................................................?

@. O+3etivos Es,ec1icos.......................................................................................................?

:. &escri,ci-n de la Em,resa...............................................................................................?

:.) Antecedentes ist-ricos................................................................................................. ?

:.' !acrolocali4aci-n.........................................................................................................)(

:.8 !icrolocali4aci-n..........................................................................................................))

:.* "ATEX# S.C.................................................................................................................. )':.*.) Qué es "ATEX# S.C............................................................................................... )'

:.*.' !isi-n# $isi-n# O+3etivo / Pol1tica de Calidad........................................................)'


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)'.@ Cultivo masivo............................................................................................................ 8(

)8. Resultados......................................................................................................................8(

)8.) "ocali4aci-n de los e3em,lares de Ganoderma..........................................................8(

)8.8 &eterminaci-n del medio / ti,o de cultivo ,ara la ,roducci-n de +iomasa.................8)

)8.* Cultivo micelial masivo de las ce,as de Ganoderma..................................................8<)*. Conclusiones / Recomendaciones.................................................................................*(

)=. Reerencias i+liogrBicas.............................................................................................. *)

)@. A,éndice.........................................................................................................................**

)@.) !edios de cultivo........................................................................................................**

)@.).) !edio de 7ang / %hong 5'(('6............................................................................ **

)@.).' !edio agar ,a,a de2trosa 5P&A6.........................................................................**

):. Ane2os............................................................................................................................*=

Í!&ice &e Fi",r%$

7igura ). 7otogra1a satelital de la Ciudad de Xala,a Enr10ue4# $eracru4.............................)(

7igura '. Acercamiento de la otogra1a satelital de Xala,a Enr10ue4 a la %ona de u+icaci-n

de "ATEX# S. C...................................................................................................................... ))

7igura 8. 7otogra1a satelital de la u+icaci-n de "ATEX# S.C.................................................))

7igura *. Car,-oros de GanodermaD a6 lacado# n-tese la ca,a resinosa +6 no lacado........)=

7igura =. !eta+olitos secundarios de hongosD a6 ,enicilina ># +6 ciclos,orina A# c6

lovastatina# d6 ,ravastatina#................................................................................................... )<

7igura @. Ti,os de cultivo ,ara desarrollo micelial de hongos. a6 Cultivo l10uido# +6 Cultivo

s-lido.....................................................................................................................................')

7igura :. Cinética de crecimiento t1,ica de los microorganismos a6 ase de latencia o de

ada,taci-n +6 ase de crecimiento e2,onencial o logar1tmica c6 ase estacionaria d6 ase de

muerte celular........................................................................................................................ ''

7igura "F(8. Car,-oro# micelio en medio P&A / ,rein-culo en medio l10uido.....88

7igura )). Ce,a >"F(=. Car,-oro# micelio en medio P&A / ,rein-culo en medio l10uido.....8*

7igura )'. Ce,a >"F(@. Car,-oro# micelio en medio P&A / ,rein-culo en medio l10uido.....8*

=


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7igura )8. Ce,a >"F(:. Car,-oro# micelio en medio P&A....................................................8*

7igura )*. Ce,a >"F("F(?. Car,-oro# micelio en medio P&A / ,rein-culo en medio l10uido.....8=

7igura )@. Ce,a >"F)(. Car,-oro# micelio en medio P&A / ,rein-culo en medio l10uido.....8=

7igura ):. Ce,a >"F)'. Car,-oro# micelio en medio P&A / ,rein-culo en medio l10uido.....8@7igura )"F)8. Car,-oro# micelio en medio P&A / ,rein-culo en medio l10uido.....8@

7igura )?. Ce,a >"F)*. Car,-oro# micelio en medio P&A / ,rein-culo en medio l10uido.....8@

7igura '(. Ce,a >"F)=. Car,-oro# micelio en medio P&A / ,rein-culo en medio l10uido.....8:

7igura '). Ce,a>"F)@. Car,-oro# micelio en medio P&A / ,rein-culo en medio l10uido......8:

7igura ''. Ce,a >"F)"F''. Car,-oro# micelio en medio P&A / ,rein-culo en medio l10uido.....8<

7igura '=. Cultivo micelial masivo de las ce,as de Ganoderma en medio l10uido a : d1as5ase de agitaci-n6.................................................................................................................8?

7igura '@. Cultivo micelial masivo de las ce,as de Ganoderma en medio l10uido a )* d1as

5ase estBtica6........................................................................................................................ 8?

Í!&ice &e T%0#%$

Ta+la ). Princi,ales com,onentes de los medios de cultivos ,ara hongos............................'(

Ta+la '. !edios de cultivo utili4ados ,ara es,ecies de >anoderma......................................'@

Ta+la 8. Com,araci-n de los meta+olitos identiicados en car,-oros / micelio de G. lucidum.

...............................................................................................................................................':

Ta+la *. Ce,as de Ganoderma aisladas / ,reservadas.........................................................8'

Ta+la =. Com,osici-n del medio de 7ang / %hong 5'(('6.....................................................**

Ta+la @. Com,osici-n del medio s-lido P&A..........................................................................**

@


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1 I!tro&,cci2!

El género Ganoderma es uno de los géneros con ma/or nGmero de es,ecies del

orden de los Polyporales / con una ta2onom1a com,le3a# de+ido a 0ue su clasiicaci-n

tradicional estB +asada en las caracter1sticas del car,-oro# morolog1a de las hias / tamaHode la +asidioes,oras# las cuales ,ueden variar +a3o dierentes condiciones de crecimiento#

aunado a 0ue ha/ varias es,ecies 0ue se encuentran ,arcial o su,ericialmente descritas#

,or lo 0ue la identiicaci-n a nivel de es,ecie es com,licada / conusa 5Utomo et al# '((=6

"a im,ortancia del género Ganoderma radica en 0ue es uente de ,roductos

medicinales / nutricéuticos. Por ello# e2tractos crudos de los car,-oros de Ganoderma#

es,ecie Gngica de ma/or interés / demanda comercial# han sido usados desde hace '(((

aHos ,ara el tratamiento de enermedades cr-nicas como he,ato,at1as# hi,ertensi-n#hi,ercolesteremia# gastritis# dia+etes# +ron0uitis# artritis / neo,lasias 5Chen et al# '()(6.

Actualmente# las investigaciones se enocan en la elucidaci-n de los meta+olitos

res,onsa+les de la +ioactividad# destacando los triter,enoides ti,o lanostano altamente

o2igenados# de los 0ue hasta ahora han sido aislados mBs de '(( a ,artir de miem+ros del

género Ganoderma. Entre estos triter,enos se encuentran los Bcidos ganodéricos#

meta+olitos secundarios 0ue ,oseen im,ortantes actividades armacol-gicas# 0ue inclu/e

citoto2icidad# actividad antihistam1nica# inhi+ici-n de la s1ntesis de colesterol# estimulaci-n dela agregaci-n ,la0uetaria# eectos antitumorales# anti $F) e inhi+en la actividad de la

,roteasa del $F) 5Adams et al# '()(6

Aun0ue# la ma/or1a de los estudios 0u1micos / armacol-gicos re,ortan ha+er

tra+a3ado con car,-oros de es,ecies de Ganoderma# recientemente# se han incrementado

muchas investigaciones en su cultivo micelial# /a 0ue en com,araci-n con el cultivo de los

car,-oros# ,uede me3orar los ,roceso de calidad / eiciencia / ha sido visto como una

alternativa ,rometedora ,ara la ,roducci-n de meta+olitos# como los Bcidos ganodéricos5ParI / "ee# '()(6

Se sa+e# 0ue todas las es,ecies del género Ganoderma son ,roductoras de

meta+olitos de interés armacol-gico# en !é2ico no e2isten estudios 0u1micos de estas

:


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es,ecies# ,or lo 0ue el estudio 0u1mico de algunos e3em,lares de la regi-n# de los cual no se

encontraron re,ortes# nos ,ermitirB sa+er el ti,o de meta+olitos 0ue ,roducen.

Por todo lo anterior# el O+3etivo >eneral del siguiente tra+a3o ueD Recolectar / reali4ar

el cultivo micelial de ce,as de hongos del género Ganoderma.

3 4,$ti5ic%ci2!

!uchos de los ,roductos comerciales derivados de los car,-oros de Ganoderma#

recientemente han sido o+tenidos ,or técnicas de cultivo micelial# /a 0ue tanto los cultivos

l10uidos como s-lidos son una alternativa ,ara la ,roducci-n de meta+olitos de hongos

su,eriores / tienen venta3as so+re el cultivo tradicional de los car,-oros.

Entre las venta3as# tenemos el tiem,o de o+tenci-n de ,roductos de interés 0ue va de

' a 8 semanas en cultivos miceliales a dierencia de los 8 a = meses 0ue lleva el cultivo

tradicional de los car,-oros# ,or otro lado# las técnicas tradicionales no garanti4an una

estandari4aci-n en los ,roductos /a 0ue la com,osici-n del sustrato# ,uede aectar la

com,osici-n de los car,-oros# en cam+io el cultivo micelial tiene la gran venta3a de

adicionar al cultivo dierentes nutrimentos /Jo variar sus concentraciones# ,ara o,timi4ar su

crecimiento micelial / la o+tenci-n de ,roductos de interés 5Xu et al# '()(6.

Para llevar a ca+o la ,roducci-n a nivel micelial de las )@ ce,as identiicadas

,ertenecientes al género Ganoderma se tra+a3- con un ,roceso de cultivo en dos eta,as# la

com+inaci-n de la ermentaci-n agitada con una segunda eta,a en el ,roceso de cultivo

estBtico.

&e+ido a lo anterior# / a,rovechando el a,o/o 0ue se tiene del "a+oratorio de Alta

Tecnolog1a de Xala,a 5"ATEX# S.C.6 / la e2,eriencia 0ue este tiene en el estudio de los

meta+olitos de dierentes hongos 5Trigos et al# '())6# se ,ro,one reali4ar un ce,ario dehongos del género Ganoderma ,rovenientes de la regi-n / llevar a ca+o su cultivo micelial

masivo.


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6 O07eti-o Ge!er%#

&esarrollar el cultivo micelial masivo de hongos del género Ganoderma o+tenidos de

la regi-n.

8 O07eti-o$ E$(ec+5ico$

Recolectar car,-oros de hongos Ganoderma en la regi-n.

Aislar / esta+lecer cultivos de hongos del género Ganoderma.

9 De$cri(ci2! &e #% E*(re$%

L%0or%torio &e A#t% Tec!o#o"+% &e %#%(%; SC

9. A!tece&e!te$ Hi$t2rico$

"ATEX se und- en )??


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oto2idaci-n del ergosterol. En otras ,ala+ras# es el logro del enve3ecimiento acelerado de

hongos mediante reacciones oto0u1micas.

"ate2 es un modelo conce+ido del todo en la U$ donde se com+inan tres esuer4os

dis1m+olos en a,ariencia. Como sociedad civil# el socio ma/oritario es la U$# con la Asociaci-n Nacional de Universidades e nstituciones de Educaci-n Su,erior / la Asociaci-n

de ndustriales del Estado de $eracru4. Seme3ante modelo no ha ,ermeado otras

instituciones# tal ve4 ,or las com,licaciones resultantes de la unci-n de un centro ,rivado en

una universidad ,G+lica. Pero el +uen mane3o austero / res,onsa+le de los ,ocos recursos

le ha hecho merecedor de conian4a.

9/ M%cro#oc%#i)%ci2!

"ATEX se encuentra en !é2ico en Xala,a Enr10ue4# la Ca,ital del Estado de

$eracru4 de gnacio de la "lave.

7igura ). 7otogra1a satelital de la Ciudad de Xala,a Enr10ue4# $eracru4.

)(


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7igura '. Acercamiento de la otogra1a satelital de Xala,a Enr10ue4 a la %ona de u+icaci-n de "ATEX# S. C.

91 Micro#oc%#i)%ci2!

Calle !édicos No. =. Col. Unidad del os0ue. Xala,a Enr10ue4# $eracru4. C.P. ?)()(

7igura 8. 7otogra1a satelital de la u+icaci-n de "ATEX# S.C.

))


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93 LATE; SC

93. Q,' e$ LATE; SC

Es un centro de investigaci-n cient1ica / tecnol-gica# incluido en el Registro Nacional

de nstituciones / Em,resas Cient1icas / Tecnol-gicas del CONACKT# 0ue orece servicios /

a,o/o al sector ,roductivo / a la ormaci-n de recursos humanos.

El la+oratorio se encuentra acreditado ante la Entidad !e2icana de Acreditaci-n

5E!A6 / a,ro+ado ante la Secretar1a de Agricultura# >anader1a# &esarrollo Rural# Pesca /

Alimentaci-n 5SA>ARPA6 en el Brea de 7itosanidad.

93/ Mi$i2!; eneral de nvestigaciones de la

Universidad $eracru4ana con el sector ,roductivo / de servicios# a través de la generaci-n#

,romoci-n / transerencia de servicios / conocimientos de calidad en las Breas de recursos

naturales# am+iente / ,rocesos +iotecnol-gicos.


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> Di%"!2$tico &e #% Sit,%ci2! Act,%#

El desarrollo de la eta,a del ,ro/ecto a0u1 descrito se llev- a ca+o en el Brea de

Estudios Es,eciales en el "a+oratorio de Alta Tecnolog1a de Xala,a# S.C.

"a unci-n de "ATEX# S. C. es coad/uvar a la vinculaci-n de la &irecci-n >eneral de

nvestigaciones de la Universidad $eracru4ana con el sector ,roductivo / de servicios# a

través de la generaci-n# ,romoci-n / transerencia de conocimiento# en el Brea de recursos

naturales / medio am+iente 5agua# alimentos# estudios es,eciales# agroservicios# ormaci-n

de recursos humanos# seguridad alimentaria / ,rinci,almente# diagn-stico itosanitario6.

"ATEX# S. C. es el ,rimer la+oratorio en el sureste 0ue o,era como la+oratorio

integral de diagn-stico itosanitario.

"ATEX# S. C.# cuenta con un catBlogo de servicios de+idamente estructurado# en los

0ue se indican costos com,etitivos# tiem,os de entrega / condiciones es,ec1icas.

Constituido ,or mBs de '(( determinaciones dierentes# +asado en un Sistema de Calidad#

regido ,or las normas SOF?((( / la Acreditaci-n ante la E!A. Todo ello# +rinda a los

usuarios una inormaci-n adecuada / seguridad en la emisi-n de resultados.

nvestigaci-n A,licadaD El modelo de "ATEX S.C. +rinda asesor1a a estudiantes de

"icenciatura / de Posgrado en las Breas como Qu1mica 7armacéutica iol-gica# iolog1a#

ngenier1a Qu1mica# Ciencias Agr1colas# Qu1mica Cl1nica# !aestr1a en Ciencias Am+ientales /

&octorados en iotecnolog1a / Ecolog1a / Ciencias iomédicas. !otivando en cada uno de

ellos el interés ,or la nvestigaci-n Cient1ica / omentando tam+ién el intercam+io

académico.

? Pro0#e*@tic%

aciendo +uen uso de las herramientas de "ATEX# S.C.# tanto materiales como

humanas# se tra+a3- ,ara llevar a ca+o el cultivo micelial de hongos del género Ganoderma

recolectados en la regi-n montaHosa del Estado de $eracru4 de gnacio de la "lave#

o,timi4ando los tiem,os / medios de cultivo utili4ados ,ara la ,roducci-n a gran escala del

)8


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micelio de los car,-oros /a 0ue uno de los ,ro+lemas 0ue se han encontrado al tra+a3ar con

este ti,o de hongos en un cultivo tradicional es el tiem,o en 0ue se o+tienen ,roductos de

interés 0ue va de los 8 a = meses ,or otro lado# las técnicas utili4adas en este tra+a3o

minimi4aron ese la,so a un ,eriodo de ' a 8 semanas en los cultivos o+teniéndose con gran

é2ito la ,roducci-n micelial de )@ ce,as recolectadas.

. A#c%!ce$ = Li*it%cio!e$

El desarrollo de la eta,a corres,ondiente a este tra+a3o ue com,letamente via+le# las

uentes de inormaci-n ,ara ,oder llevar a ca+o la identiicaci-n / técnicas ,ara el cultivo de

las ce,as de Ganoderma ueron dadas ,or "ATEX# S.C. a la ve4 0ue se tuvo la asesor1a ,or

,arte de los &octores César Es,ino4a Ram1re4 / >uillermo !endo4a Cervantes# as1 como

todo el material / reactivos re0ueridos ,ara llevar a ca+o el ,ro/ecto# no se re0uiri- de algGn

inanciamiento e2tra ,or ,arte del la+oratorio / el Brea de Estudios Es,eciales as1 como el

cuarto de mB0uinas# el cuarto estéril / el cuarto de agitaci-n estuvieron dis,oni+les durante

los * meses de tra+a3o.

.. M%rco Te2rico

... Ge!er%#i&%&e$ &e# "'!ero Ganoderma

El estudio de la +iodiversidad es de gran im,ortancia ,ara entender la estructura /

unci-n de la vida en nuestro ,laneta lamenta+lemente# en las Gltimas décadas la diversidad

+iol-gica se ha visto aectada ,roundamente# ,rinci,almente a través de la ,érdida

acelerada de es,ecies. En cuanto a hongos# la ,érdida de +iodiversidad tam+ién es mu/

grande# ,ero no evidente# de+ido al +a3o nGmero de es,ecies descritas en relaci-n con las

0ue se calcula 0ue e2isten 5aLIsLorth# )??)6. Esta ,érdida# ha motivado a muchos

cient1icos de dierentes Breas a o+tener mBs inormaci-n so+re estos organismos / Breas

como la sistemBtica / la genética a,ortan técnicas Gtiles ,ara la o+tenci-n de los datos

necesarios ,ara el conocimiento de los distintos gru,os de hongos. Uno de los géneros mBs

variados del orden de los Pol/,orales / ,ro+a+lemente el mBs com,le3o morol-gicamente

es Ganoderma 5M +rillante# V ,iel6.

)*


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El género Ganoderma se descri+i- ,or ,rimera ve4 ,or Warsten en )anoderma# de los cuales s-lo una tercera ,arte son vBlidos. "os

estudios en este género tro,ie4an con la ,lasticidad enot1,ica# en-meno documentado ,or

)=

http://www.index/http://www.index/


16/48

varios autores 5a44alo / right# )?éneroD Ganoderma

Su+géneroD Ganoderma Elfvingia

Algunas caracter1sticas morol-gicas utili4adas ,ara identiicar a los miem+ros del

género son 5>u4mBn# )?


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8. Consistencia dura# ,esada / leHosa.

*. En ocasiones ormados ,or varios som+reros unidos en una gran masa o solitarios.

=. Tienen su,ericies contrastantes 5castaHo o,aco o la0ueado en la ,arte su,erior /

+lanca a amarillenta en la inerior6 con el Brea himenial re,leta de ,e0ueHos ,oros.

../ Biotec!o#o"+% &e o!"o$

"a +iotecnolog1a se deine como la a,licaci-n de organismos vivos como ,or e3em,lo

los hongos / sus com,onentes su+celulares# dentro de ,rocesos tecnol-gicos 0ue ,uedan

ser em,leados en servicios de manuacturaci-n industrial / desarrollo am+iental# entre otras

a,licaciones. El mane3o e2itoso de los ,rocesos +iotecnol-gicos asociados con los hongos

es llevado a ca+o a través de la com+inaci-n e integraci-n de un nGmero de disci,linas

cient1icas / tecnol-gicas# 0ue inclu/e la micro+iolog1a# la +io0u1mica / la 0u1mica.

As1# los ,rocesos +iotecnol-gicos# en donde se utili4an ,or e3em,lo los hongos#

normalmente involucran la ,roducci-n e2itosa de ,roductos +io0u1micos del meta+olismo

intermedio tales como en4imas# vitaminas# aminoBcidos# alcoholes# ,urinas / ,irimidinas#

l1,idos# ,olisacBridos# as1 como ,roductos del meta+olismo secundario 57igura @6# tales como

anti+i-ticos como la a6 ,enicilina ># agentes inmunosu,resores como la +6 ciclos,orina A#

agentes hi,ocolesterémicos como la c6 lovastatin / d6 ,ravastatina# agentes antitumorales

como el e6 ta2ol# micoto2inas# ,igmentos como la 6 monascoru+rina / g6 ru+ro,unctatina#Bcidos grasos ,oliinsaturados como el h6 Bcido ara0uid-nico 5Adrio / &emain# '((86.

a6 +6 c6

):


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d6 e6 6

g6 h6

7igura =. !eta+olitos secundarios de hongosD a6 ,enicilina ># +6 ciclos,orina A# c6 lovastatina# d6 ,ravastatina#

e6 ta2ol# 6 monascoru+rina# g6 ru+ro,unctatina# h6 Bcido ara0uid-nico.

..1 C%r%cter+$tic%$ &e #o$ o!"o$

Tradicionalmente# los hongos / otros eucariotas aines ueron clasiicados como un

su+reino dentro del reino Plantae# en las divisionesD Myxomycota 5,ara las ormas

,lasmodiales6 o Eumycota 5,ara las ormas miceliales6 sin em+argo# actualmente se sa+e

0ue los hongos no s-lo no son vegetales sin cloroila 5como se cre1a antes6# sino 0ue de

hecho son mBs cercanos a los animales 0ue a las ,lantas# / se les reconoce como ,arte de

un reino en s1 mismo 5%aIaria et al# '((?6.

Actualmente# se em,lea el término hongo 5lat. Fungus# del gr. &p"ongosD es,on3a6

,ara designar un gru,o vasto / variado de organismos 0ue constitu/en el reino 7ungi# uno de

los seis reinos de organismos vivientes# introducido como tal ,or ;ahn / ;ahn en )?*? /

,osteriormente ,or hittaIer en )?=? 5R/varden / >il+ertson # )??86.

Estos organismos tienen las siguientes caracter1sticas 5Chen# )??86D

)


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). Eucariontes.

'. eter-troos.

8. Re,roducci-n se2ual o ase2ual.

*. "a ma/or1a de ellos son mes-ilos 5)= a 8( [C6.

=. Crecen en , 0ue van de 8 a :.@. Res,iraci-n aero+ia aun0ue ,ueden ser anaero+ios acultativos.

Ta2on-micamente# solo se considera como ,arte del reino 7ungi a los organismos

incluidos dentro de las divisiones Ascomycota# %asidiomycota# C"ytridiomycota /

'ygomycota# /a 0ue las divisiones Myxomycota# $ictyosteliomycota / (omycota# si +ien

siguen siendo estudiadas ,or los mic-logos# han sido e2cluidas del reino ,or tener distintos

or1genes ilogenéticos. Por su ,arte# la clasiicaci-n de los hiomicetes 5mal llamados hongos

im,erectos6# en +ase al sistema de Saccardo# si +ien se sigue utili4ando a nivel técnico# seconsidera inadecuada desde el ,unto de vista ta2on-mico 5CastaHeda Ru14# '(()6.

Se estima 0ue e2isten cerca de )*( ((( es,ecies de hongos macrosc-,icos en

nuestro ,laneta# de las cuales a,enas han sido estudiadas entre )* ((( / '' (((# es decir

a,ro2imadamente el die4 ,or ciento 5"inde0uist et al# '((=6. &e estas )* ((( es,ecies

conocidas de hongos macrosc-,icos cerca de la mitad es comesti+le en diversos grados#

mientras 0ue al menos :(( es,ecies tienen ,ro,iedades armacol-gicas reconocidas 5"ull et

al# '((=6. "a ,resencia de meta+olitos Gtiles ,roducidos ,or hongos macrosc-,icos seencuentra am,liamente documentada 5asser / eis# )???6. Tan s-lo dentro del gru,o de

los hongos Pol/,orales 5,reviamente conocidos como a,h/llo,orales o ,oli,orBceos# / al

cual ,ertenecen los hongos del género Ganoderma6# el :=\ de las es,ecies estudiadas han

mostrado ,oseer actividad +iol-gica /a sea antimicro+iana# antiviral# inmunomodulatoria#

analgésica# antidia+ética# antio2idante# citot-2ica /Jo antineo,lBsica 5%3aLion/# '((*6.

..3 Re,eri*ie!to$ !,tri*e!t%#e$

"os hongos como organismos 0uimioheter-troos estrictos# son inca,aces de

otosinteti4ar / ,or consiguiente necesitan sustratos ricos en car+ohidratos ,ara alcan4ar sus

re0uerimientos de energ1a / +iomasa. Estos ,roducen una am,lia variedad de en4imas

e2tracelulares# ,rinci,almente o2idasas e hidrolasas 0ue degradan la ma/or ,arte de los

)?


20/48

sustratos orgBnicos 0ue e2isten naturalmente# inclu/endo la celulosa# la 0uitina# el almid-n#

a4Gcares# hemicelulosas / lignina 5ainLright# )??=6.

"os hongos generalmente crecen en el la+oratorio so+re medios deinidos 0ue

contienen a4Gcares# como glucosa / sacarosa o so+re ,ol1meros# como celulosa. Elnitr-geno inorgBnico generalmente se suministra a los medios en orma de amonio# nitrato#

amidas o aminoBcidos. En algunos ,rocesos de ermentaci-n industrial tam+ién ,ueden

utili4arse uentes de nitr-geno orgBnicas tales como e2tracto de levadura# ,e,tona o case1na

57ang / %hong# '(('6. Otros nutrientes minerales im,ortantes re0ueridos ,or los hongos

,ara un mB2imo rendimiento inclu/en al 7-soro# A4ure# Potasio / !agnesio. Tam+ién son

necesarios ,ara el uncionamiento de las en4imas en condiciones de crecimiento rB,ido#

nutrientes menores como el %inc# Co+re# !oli+deno / vitaminas 5ainLright# )??=6. "os

,rinci,ales nutrimentos ,ara los hongos se resumen / clasiican en la Ta+la ).

Ta+la ). Princi,ales com,onentes de los medios de cultivos ,ara hongos.

M%cro!,trie!te$ Micro!,trie!te$Car+ono Cromo

idr-geno Co+altoO21geno Co+re

Nitr-geno !anganeso7-soro !oli+deno A4ure N10uel

Calcio Selenioierro Tungsteno

$anadio

7uenteD !endo4a# '((@

..6 Ti(o$ &e c,#ti-o

En el la+oratorio los hongos se desarrollan en dos ti,os de cultivoD

C,#ti-o #+,i&o Se ,uede deinir como un cultivo de células micro+ianas dis,ersas

en orma homogénea en un reci,iente agitado 0ue ,uede o no ser aireado ,or medios

mecBnicos. El cultivo l10uido mBs usado en los la+oratorios de investigaci-n es el matra4

agitado# cu/o desarrollo ha sido im,ortante# de+ido a 0ue ha ,ermitido el cultivo de

organismos aer-+icos en condiciones homogéneas# con una densidad moderada de la

'(


21/48

+iomasa# lo 0ue ha sim,liicado el estudio de la isiolog1a de los organismos 5en4ler /

Schedel# )??)6.

C,#ti-o $2#i&o Puede ser deinido como un cultivo de microorganismos adheridos a

un so,orte s-lido liso como el agar# o ,oroso / humedecido# en el cual el medio l10uido estBe2tendido en una ca,a mu/ ina en contacto con una interase aérea# como ,or e3em,lo la

es,uma de ,oliuretano 5PU7# un material inerte6# o so+re sustratos naturales como granos de

arro4# trigo# etc.# 5Romero# '(()6.

a6 +6

7igura @. Ti,os de cultivo ,ara desarrollo micelial de hongos. a6 Cultivo l10uido# +6 Cultivo s-lido.

..8 Ci!'tic% &e creci*ie!to

El crecimiento# en un sentido estricto# ,uede ser deinido como un incremento

+alanceado en el nGmero de células o ormaci-n de +iomasa con res,ecto al tiem,o. "a

cinética de crecimiento 57igura


22/48

d)

c)

b)

Tiempo

a)

Log del número de células o Peso seco

7igura :. Cinética de crecimiento t1,ica de los microorganismos a6 ase de latencia o de ada,taci-n +6 ase de

crecimiento e2,onencial o logar1tmica c6 ase estacionaria d6 ase de muerte celular.

Ahora +ien# el crecimiento no solo trae como consecuencia la ,rolieraci-n celular

sino tam+ién una actividad meta+-lica. Si se considera la actividad meta+-lica de un cultivo

micro+iano a lo largo de toda la curva de crecimiento# se o+serva la dierencia 0ue e2iste

entre los ,rocesos meta+-licos asociados al crecimiento celular / a0uellos 0ue tienen lugar

en la ase estacionaria 5Es,ino4a# '((


23/48

conormados ,or com,uestos tales como la acetil CoA# la malonil CoA# el ,iruvato / el

acetoglutarato# as1 como ciertos coactores# como ATPJA&P# NA&JNA& / NA&PJNA&P.

Colectivamente# dichos com,uestos intermediarios constitu/en el sustrato ,ara la vasta

diversidad de meta+olitos secundarios 5Turner# )?:)6.

Met%0o#i$*o $ec,!&%rio Que im,lica la e2istencia de un ,roceso dierente /

distinto del ,rimario# siendo mBs activo cuando se restringe el crecimiento normal# es decir#

en la ase estacionaria. Estos com,uestos no son necesarios ,ara la +ios1ntesis celular / no

tienen# ,or tanto# un ,a,el directo en el meta+olismo energético / en consecuencia# no se

conoce con claridad la ra4-n de su e2istencia# ni de su a,arici-n 5Arora et al# )??'. 6.

Ca+e seHalar 0ue si +ien en condiciones ideales la tro,oase / la idioase de+er1an

ocurrir en momentos se,arados de un cultivo en lotes# en la ,rBctica es mu/ recuente 0ue elinal de la tro,oase / el inicio de la idioase ocurran simultBneamente# ,or lo 0ue no se

recomienda deinir a un meta+olito secundario e2clusivamente en +ase a su momento de

,roducci-n. Por otra ,arte# tam,oco es ,osi+le distinguir a los meta+olitos secundarios de los

,rimarios a ,artir de su estructura 0u1mica u origen +iosintético 5Croteau et al # '(((6.

"os hongos ,ueden ,roducir una e2tensa variedad de meta+olitos secundarios# los

cuales se caracteri4an ,or la com,le3idad / diversidad de sus estructuras la ma/or ,arte son

,olimeri4aciones de unidades sim,les de construcci-n# tales como acetato# a4Gcares#aminoBcidos# nucle-tidos o una com+inaci-n de estos 5Trigos# '(((6. "as ,rinci,ales v1as de

los meta+olitos secundarios son 5Turner# )?:)6D

a6 !eta+olitos secundarios derivados de intermediarios del Bcido tricar+o21lico.

+6 !eta+olitos secundarios derivados de la intervenci-n de acetato.

c6 !eta+olitos secundarios derivados de Bcidos grasos.

d6 !eta+olitos secundarios derivados de aminoBcidos.

e6 Policétidos.6 Ter,enos / esteroides.

g6 !iscelBneos.

'8


24/48

..> C,#ti-o *ice#i%# &e e$(ecie$ &e Ganoderma

!uchos de los ,roductos comerciales derivados de los car,-oros de Ganoderma#

recientemente han sido o+tenidos ,or técnicas de cultivo micelial# /a 0ue tanto los cultivos

l10uidos como s-lidos son una alternativa ,ara la ,roducci-n de meta+olitos de hongossu,eriores / tienen venta3as so+re el cultivo tradicional de los car,-oros. Entre las venta3as#

tenemos el tiem,o de o+tenci-n de ,roductos de interés 0ue va de ' a 8 semanas en cultivos

miceliales a dierencia de los 8 a = meses 0ue lleva el cultivo tradicional de los car,-oros#

,or otro lado# las técnicas tradicionales no garanti4an una estandari4aci-n en los ,roductos

/a 0ue la com,osici-n del sustrato# ,uede aectar la com,osici-n de los car,-oros# en

cam+io el cultivo micelial tiene la gran venta3a de adicionar al cultivo dierentes nutrimentos

/Jo variar sus concentraciones# ,ara o,timi4ar su crecimiento micelial / la o+tenci-n de

,roductos de interés 5Russell / Paterson# '((@6.

Al igual 0ue en el caso de los estudios 0u1micos / armacol-gicos# la ma/or ,arte de

las investigaciones acerca del cultivo de los car,-oros / del cultivo micelial l10uido / s-lido

de hongos del género Ganoderma re,ortan ha+er tra+a3ado con G. lucidum 5Kang / "iau#

)??


25/48

agitaci-n de )(( r,m. Por otro lado# Tang / %hong 5'(('6 estudiaron la ,roducci-n de

e2o,olisacBridos en un cultivo de G. lucidum en un +iorreactor ,or lotes alimentados#

em,leando lactosa como uente de car+ono. El uso de lactosa# indu3o la actividad ^F

galactosidadasa / Fosoglucomutasa de los e2tractos celulares rescos del hongo. El

mB2imo de densidad celular alcan4ado en este estudio ue de '' gJ"# mientras 0ue la,roducci-n de e2o,olisacBridos lleg- a ser de ).'= gJ". As1# 7ang / %hong 5'(('6#

desarrollaron una técnica de cultivo l10uido de G. lucidum# ,ara incrementar la ,roducci-n de

derivados o2igenados del lanosterol# la cual es considerada hasta el d1a de ho/ como el

me3or método de ,roducci-n de Bcidos ganodéricos 5Xu et al# '()(6. &icho ,roceso consiste

en cultivar el micelio en matraces Erlenme/er en agitaci-n rotatoria durante cuatro d1as /

,osteriormente de3ar el cultivo estBtico durante ocho d1as mBs# lo cual disminu/e el o21geno

disuelto en el caldo de cultivo# incrementa el tamaHo de ,ellet del hongo / ,roduce una

cantidad hasta tres veces ma/or de Bcidos ganodéricos 0ue el cultivo con agitaci-n continua57ang / %hong# '(('6.

Kang / cola+oradores 5'((*6# demostraron 0ue la adici-n de etanol al ).=\ 5vJv6

aumenta+a el crecimiento micelial de una ce,a de G. lucidum# mientras 0ue la adici-n de

etanol al '\# incrementa+a su ,roducci-n de ,olisacBridos. Por su ,arte# "iu / %hang 5'((:6#

me3oraron la ,roducci-n tanto de +iomasa como de ,olisacBridos# agregando el e2tracto en

acetato de etilo de los insectos medicinales Eupolyp"aga sinensis / Cat"arsius molossus. "a

,roducci-n de +iomasa / e2o,olisacBridos tam+ién demostr- ser aectada ,ositivamente ,or la adici-n de aceite de ma14 al '\# alcan4ando )'.? gJ" )8( / ).(8< gJ" res,ectivamente#

durante )8 d1as de cultivo sumergido 5uang et al# '((


26/48

Ta+la '. !edios de cultivo utili4ados ,ara es,ecies de >anoderma

E$(ecie N,tri*e!to$ Co!&icio!e$ Met%0o#ito$G. australe E2tracto de malta '\ !. Erlenme/er "acasa

Pe,tona de so/a (.=\ ':]C)= d1as

G. adspersum >lucosa )( gJ" !. Erlenme/er "acasaPe,tona ' gJ" , @.(W'PO* (.< gJ" '@]C!gSO*_:'O (.'= gJ" )*( r,mE2tr. "evadura ) gJ" )* d1as

G. lucidum >lucosa )( gJ" !. Erlenme/er PolisacBridosPe,tona 8 gJ" , *.(F@.(W'PO* ) gJ" '=F8(]C!gSO*_:'O (.'= gJ" )(( r,mE2tr. !a14 ' gJ" < d1as

G. lucidum Suero de leche =:.) gJ" 7ermentador PolisacBridos, *.'

'


27/48

Ta+la 8. Com,araci-n de los meta+olitos identiicados en car,-oros / micelio de G. lucidum.

C%r(25oro$ Mice#io. `cido ganodérico 5`cido :^#)=Fdihidro2iF8#))#'8Ftrio2oF=FlanostFanoderiol C .> `cido ganodérico R 5`cido lanostaF

:#?5))6#'*FtienF8#)=Fdiaceto2iF'@F-ico6/ >anoderiol &/. >anoderiol E// >anoderiol 7/1 >anoderiol >/3 >anoderiol

':


28/48

Cultivo micelial masivo

Condiciones del cultivo micelial masivo

Aislamiento micelial en tu+o inclinado

Aislamiento micelial en P&A

dentiicaci-n ta2on-mica de la ce,a

Colecta de muestras

/6 >anoderiol

7uenteD Cole / SchLeiIert# '((8.

./ De5i!ici2! &e #% Meto&o#o"+%

A continuaci-n se muestra el diagrama de lu3o con los ,asos de la estrategia

e2,erimental a seguir ,ara llevar a ca+o el cultivo micelial masivo de las ce,as de

Ganoderma.

7igura 50ue indica el género Ganoderma6 / "

'


29/48

50ue indica el nom+re de "ATEX6# as1 como un nGmero 0ue corres,onde al orden en 0ue se

reci+1a el car,-oro.

.// Ai$#%*ie!to *ice#i%# &e #%$ ce(%$ &e Ganoderma

"os car,-oros se lavaron con agua destilada / se reali4aron secciones delgadas con

nava3as estériles en lBminas de a,ro2imadamente ) mm de grosor# 0ue ueron desinectadas

con hi,oclorito de sodio al ' \ / agua destilada / colocados en ca3as Petri con agar ,a,a

de2trosa 5P&A6. "os cultivos se incu+aron a '< ]C durante )( d1as ,ara inducir el desarrollo

micelial. "as ce,as se resguardaron en el ce,ario de "ATEX.

./1 C,#ti-o e! t,0o i!c#i!%&o

Una ve4 0ue se tuvo el cultivo micelial en ca3a Petri utili4ando medio P&A se ,rocedi-

al cultivo de las ce,as en tu+o inclinado utili4ando el mismo medio de cultivo# esto se reali4-

con la inalidad de tener un resguardo seguro en el ce,ario de "ATEX de cada una de las

muestras recolectadas# cada ce,a de Ganoderma se sem+r- en tu+o inclinado ,or tri,licado

/ se incu+aron a '< ]C durante el tiem,o necesario ,ara el desarrollo micelial / hasta su uso

se mantuvieron en rerigeraci-n.

./3 Pre(%r%ci2! &e# (rei!2c,#o

Transcurrido el ,eriodo de incu+aci-n se cortaron con una agu3a de disecci-n cuadros

de agar con micelio de a,ro2imadamente ) cm b'# con los 0ue se inocularon dos matraces

Erlenme/er de '=( ml ,or cada ce,a# conteniendo cada uno =( ml de medio 7ang / %hong

5$er a,éndice )8.).).6. "os matraces ueron incu+ados en un agitador de matraces 5!arcaD

"A"NE# !odeloD '=':6 a una tem,eratura de '< ]C b' a ))= r,m durante )( d1as. El

cuarto de agitaci-n se mantuvo en ausencia de lu4.

./6 Pre(%r%ci2! &e# i!2c,#o

Concluido el ,eriodo de incu+aci-n de los ,rein-culos# se ragment- el micelio del

hongo con un homogenei4ador manual / la sus,ensi-n micelial resultante se utili4- ,ara

inocular los distintos cultivos.

'?


30/48

./8 C,#ti-o *%$i-o

Para cada ce,a se tra+a3- con un total de )) matraces Erlenme/er de )((( ml#

conteniendo cada uno )(( ml de medio# los matraces ueron inoculados con 8 ml de

sus,ensi-n del ,rein-culo corres,ondiente Se incu+aron a '< b' [C# los ,rimeros : d1as enagitaci-n a ))= r,m en un agitador de matraces / el resto del cultivo ue estBtico en ausencia

de lu4.

.1 Re$,#t%&o$

Para llevar a ca+o este ,ro/ecto se recolectaron '' car,-oros en la regi-n

montaHosa del Estado de $eracru4# de estos s-lo se ,udo tener cultivo micelial en medio

P&A de )@ ce,as con las cuales se tra+a3- ,ara tener su cultivo en tu+o inclinado#

,rein-culos e in-culos.

"as @ 0ue no se ,udieron cultivar se descartaron ,or com,leto del tra+a3o# /a 0ue

de+ido a ,ro+lemas de contaminaci-n +acteriana o nulo crecimiento no se ,udieron aislar.

.1. Loc%#i)%ci2! &e #o$ e7e*(#%re$ &e Ganoderma

"os car,-oros de las es,ecies de Ganoderma en estudio se colectaron durante los

meses de se,tiem+re# octu+re / noviem+re de '()8# de troncos / ra1ces su,ericiales de

Br+oles tanto vivos como muertos locali4ados en los !unici,ios de Xala,a Enr10ue4# "as

$igas de Ram1re4 / Tla,aco/an# $eracru4.

.1/ Ai$#%*ie!to *ice#i%# &e#%$ ce(%$ &e Ganoderma

"a ,ro,agaci-n de las )@ ce,as in vitro# ,ermiti- el desarrollo micelial de los

Ganoderma# con ormaci-n de micelio de color +lanco# su,ericial# de consistencia dura /

a,ariencia seca# 0ue conorme se desarrolla ad0uiere tonos amarillos / ausente de

clamidos,oras 5a44alo / right# )?


31/48

.11 Deter*i!%ci2! &e# *e&io = ti(o &e c,#ti-o (%r% #% (ro&,cci2! &e 0io*%$%

"a ma/or ,roducci-n de +iomasa se o+tuvo en los cultivos l10uidos en com,araci-n

con los s-lidos# destacando de manera im,ortante cuando se em,le- el medio l10uido de7ang / %hong 5'(('6 com,arado con el medio agar ,a,a de2trosa 5P&A6. Este medio en

cultivo l10uido de dos eta,as desarrollado ,or estos mismos autores ue un gran ,roductor de

+iomasa. Ca+e mencionar 0ue este ,rocedimiento es la técnica de elecci-n ,ara la

,roducci-n de Bcidos ganodéricos.

En el desarrollo del cultivo ocurrieron dos eta,as# la ,rimera con agitaci-n 0ue

,ermiti- la ormaci-n de ,ellets / la segunda estBtica 0ue increment- el tamaHo del ,ellet /

ocasion- la ormaci-n de una ca,a gruesa de micelio en la su,ericie l10uida.

En términos generales# se considera 0ue el incremento en el tamaHo del ,ellet / la

ormaci-n de una ca,a gruesa de micelio en la su,ericie l10uida son limitantes de o21geno

en el cultivo lo 0ue ,romueve la s1ntesis de Bcidos ganodéricos 5agner et al# '((86.

A,arentemente# el incremento en la ,roducci-n de Bcidos ganodéricos durante el

cultivo estBtico# se de+e al eecto de la limitaci-n de o21geno so+re la e2,resi-n de la en4ima

escualeno sintetasa 5Xu et al# '((?6.

En la Ta+la * se resume un listado de las ce,as de Ganoderma aisladas as1 como se

muestra a detalle su origen / las técnicas a,licadas ,ara su conservaci-n.

Ta+la *. Ce,as de Ganoderma aisladas / ,reservadas.

Ce(% Ori"e! S,$tr%to

C,#ti-o

PDAC%7%Petri

C,#ti-o

PDA t,0oi!c#i!%&o

Prei!2c,#o I!2c,#o

GL/ Xala,a Enr10ue4#$er.

Toc-n

GL1 Xala,a Enr10ue4#$er.

Pinussylvestris

8)


32/48

GL6 El Encanto#Tla,aco/an# $er.

Toc-n


Toc-n


Gliricidia

sepium F F

GL> "as $igas deRam1re4# $er.

Toc-n

GL? "as $igas deRam1re4# $er.

$elonix regia

GL. "as $igas deRam1re4# $er.

Pinussylvestris

GL./ El Encanto#Tla,aco/an# $er.

Toc-n

GL.1 El Encanto#Tla,aco/an# $er.

Toc-n

GL.3 "as $igas deRam1re4# $er.

Toc-n

GL.6 Xala,a Enr10ue4#$er.

Toc-n

GL.8 Xala,a Enr10ue4#$er.

Pinussylvestris

GL.> Xala,a Enr10ue4#$er.

Toc-n

GL.? Xala,a Enr10ue4#$er.

Toc-n

GL// Xala,a Enr10ue4#$er.

Toc-n

Parte del tronco de un Br+ol 0ue 0ueda unida a la ra14 cuando lo cortan ,or el ,ie# en este caso se usa ,ara

reerirse a un Br+ol muerto.

A continuaci-n se muestra una serie de otogra1as de las )@ ce,as de Ganoderma

aisladas. "a ,rimera imagen corres,onde al car,-oro al ser encontrado ,or el analista en su

hB+itat natural / antes de ser e2tra1do ,ara llevarlo a "ATEX# la segunda imagen ,ertenece a

la ce,a en medio P&A en ca3a Petri con crecimiento micelial# la tercera es el cultivo en medio

P&A ,ero en tu+o inclinado ,ara la conservaci-n de las ce,as / la cuarta imagen es el

,rein-culo de cada ce,a.

8'


33/48

7igura ?. Ce,a >"F('. Car,-oro# micelio en medio P&A / ,rein-culo en medio l10uido.

7igura )(. Ce,a >"F(8. Car,-oro# micelio en medio P&A / ,rein-culo en medio l10uido.

88


34/48

7igura )). Ce,a >"F(=. Car,-oro# micelio en medio P&A / ,rein-culo en medio l10uido.

7igura )'. Ce,a >"F(@. Car,-oro# micelio en medio P&A / ,rein-culo en medio l10uido.

7igura )8. Ce,a >"F(:. Car,-oro# micelio en medio P&A.

"a ce,a >"F(: s-lo se tiene en cultivo s-lido P&A de+ido a 0ue su crecimiento

micelial ha sido mu/ lento com,arado con el de los demBs car,-oros.

8*


35/48

7igura )*. Ce,a >"F("F(?. Car,-oro# micelio en medio P&A / ,rein-culo en medio l10uido.

7igura )@. Ce,a >"F)(. Car,-oro# micelio en medio P&A / ,rein-culo en medio l10uido.

8=


36/48

7igura ):. Ce,a >"F)'. Car,-oro# micelio en medio P&A / ,rein-culo en medio l10uido.

7igura )"F)8. Car,-oro# micelio en medio P&A / ,rein-culo en medio l10uido.

7igura )?. Ce,a >"F)*. Car,-oro# micelio en medio P&A / ,rein-culo en medio l10uido.

8@


37/48

7igura '(. Ce,a >"F)=. Car,-oro# micelio en medio P&A / ,rein-culo en medio l10uido.

7igura '). Ce,a>"F)@. Car,-oro# micelio en medio P&A / ,rein-culo en medio l10uido.

7igura ''. Ce,a >"F)


38/48

7igura '8. Ce,a >"F)?. Car,-oro# micelio en medio P&A / ,rein-culo en medio l10uido.

7igura '*. Ce,a >"F''. Car,-oro# micelio en medio P&A / ,rein-culo en medio l10uido.

.13 C,#ti-o *ice#i%# *%$i-o &e #%$ ce(%$ &e Ganoderma

Con todos los datos anteriores se reali4- el cultivo micelial masivo de las ce,as de

Ganoderma# el cual ue en cultivo l10uido# em,leando ).) " de medio de 7ang / %hong

5'(('6 5,or cada ce,a6 a )* d1as de incu+aci-n 5: en agitaci-n a ))= r,m / : estBtico6 a '<

b'[C# en com,leta oscuridad.

8


39/48

7igura '=. Cultivo micelial masivo de las ce,as de Ganoderma en medio l10uido a : d1as 5ase de agitaci-n6.

7igura '@. Cultivo micelial masivo de las ce,as de Ganoderma en medio l10uido a )* d1as 5ase estBtica6.

8?


40/48

.3 Co!c#,$io!e$ = Reco*e!&%cio!e$

Con este tra+a3o no se ,retende 3ustiicar la de,redaci-n de hongos Ganoderma# sino

dar a conocer# sus ,osi+les a,licaciones tera,éuticas ,ara un uturo a,rovechamiento

racional. No o+stante# el mane3o +iotecnol-gico# a través del cultivo micelial# mostr- nuevas

,osi+ilidades al encontrar dierencias sutiles entre micelios ,rocedentes de los car,-oros

cultivados lo cual su,one tam+ién la o+tenci-n de meta+olitos secundarios diversos. &ichas

dierencias ,odr1an am,liar el es,ectro de acci-n de Ganoderma# ,ara el tratamiento de

diversas enermedades. Por lo 0ue se tienen las siguientes recomendacionesD

En ,rimer lugar# serB de sumo interés reali4ar un estudio ecol-gico / ta2on-mico

,roundo a in de conocer los dierentes ti,os de Ganoderma e2istentes en !é2ico.

AdemBs# serB necesario continuar con estudios +iol-gicos# armacol-gicos /

to2icol-gicos de los meta+olitos 0ue se aislarBn ,ara su utili4aci-n nutracéutica / medicinal.

Por Gltimo# se recomienda# reali4ar otros estudios 0u1micoF+iol-gicos# tanto de los

car,-oros como del cultivo micelial de las es,ecies encontradas.

*(


41/48

.6Re5ere!ci%$ Bi0#io"r@5ic%$

Adams# !.# !. Christen# . Plit4Io# S. %immermann# R. run# !. Waiser / !. am+urger.

5'()(6. Anti,lasmodial "anostanes rom the >anoderma lucidum !ushroom. )ournal

of *atural Products# :8D


42/48

Es,ino4a# C. 5'((anoderma lucidum.

%iotec"nology Progress# )u4mBn# >. 5)?.# >. >u4mBn# 7. Ram1re4F>uillen# !. "una / `. Trigos. 5'())6. >anodermaoerstedii 57r.6 !urrill 5igher asidiom/cetes6# a Tree Parasite S,ecies in !é2icoD

Ta2onomic &escri,tion# r&NA Stud/# and RevieL o its !edical A,,lications.

nternational )ournal of Medicinal Mus"rooms# )8D=*=F=='.

*'


43/48

ParI# E.;. / .K. "ee. . 5'()(6. r/,to,han Enhanced Accumulation o Phenolic Com,ounds

via Chorismate !utase Activation in the >anoderma neoF3a,onicum !/celia. &ociety

for Applied%iological C"emistry # =8D8@*F8:(.

PeIsen# A. / >. KaIu,oglu. . 5'((?6. Tea Laste as a su,,lement or the cultivation o

>anoderma lucidum. 1orld )ournal of Microiology and %iotec"nology # '=D@))F@)anodermaA thera,eutic ungal +ioactor/.

P"ytoc"emistry # @:D)?


44/48

Xu# ;. .# K.N. Xu / ;.;. %hong. 5'((?6. Production o individual ganoderic acids and

e2,ression o +ios/nthetic genes in li0uid static and shaIing cultures o >anoderma

lucidum. Applied Microiology and %iotec"nology .

Xu# ;..# K.N. Xu / ;.;. %hong. 5'()(6. Production o individual ganoderic acids and

e2,ression o +ios/nthetic genes in li0uid static and shaIing cultures o >anodermalucidum. Applied Microiology and %iotec"nology #


45/48

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Cultivo Micelial Masivo de Hongos Del Género Ganoderma