Curs 3 Actiunea Factorilor Fizici Si Chimici Asupra Bacteriilor

8/13/2019 Curs 3 Actiunea Factorilor Fizici Si Chimici Asupra Bacteriilor

1/26

Actiunea factorilor fizici sichimici asupra bacteriilor


2/26

Obiective Definirea termenilor Actiunea agenilor fizici:

Temperatura

Cldura.Cldura umed. Cldura uscat. Controlul sterilizarii prin caldura Frigul. Refrigerarea. Congelarea. Liofilizarea

Radiaiile Ultravioletele Radiaiile ionizante.

Ultrasunetele. Presiunea mecanic Presiunea osmotic.

Agenii chimici Substante antiseptice, substante dezinfectante.

Substane cu aciune asupra membranei citoplasmice: fenolul i derivaiifenolici, detergenii

Substane care denatureazproteinele: acizii. bazele. alcoolii. Substane care inhibenzimele: agenii alchilani, metalele grele i srurile

acestora Substanele oxidante


3/26

Definitii Septic - contaminat sau infectat cu microorganisme (viabile, in general

patogene) Aseptic - lipsit de microorganisme (patogene sau nepatogene) viabile steril

Asepsie - ansamblul de metode prin care se previne contaminarea cumicroorganisme sau prin care se menine sterilitatea esuturilor, mediilor decultur, medicamentelor injectabile etc.

Antisepsie - nlturarea sau distrugerea formelor vegetative microbiene de pesubstraturi vii ex. tegumente, mucoase sau din plgi ; cu ajutorul substanelor antiseptice netoxice pentru tegument

ex. alcool etilic 70, tinctur de iod 5%, KMnO4 0,1%, detergenicationici etc.

Contaminare microbiana - este un termen utilizat n instituiile sanitare carese refer, n general, la contactul cu microorganisme condiionat patogene saupatogene (capabile sproducinfecii sau boli infecioase).

deosebita de contaminarea chimica si cearadioactiv

Decontaminare orice procedeu utilizat pentru ndeprtarea i/sau omorreamicroorganismelor.

acelai termen se aplici pentru ndeprtarea sau neutralizarea substanelorchimice periculoase i a materialelor radioactive.


4/26

Definitii CuratenieCuratenie - este metoda de decontaminare care asigura

ndepartarea microorganismelor de pe suprafete, obiecte sautegumente, odata cu ndepartarea prafului si a substantelor

organice. Aplicarea corecta a metodelor de curatenie asuprafetelor, obiectelor si echipamentelor poate realiza odecontaminare de 95-98 %, foarte apropiata de cea obtinutaprin dezinfectie.

DezinfectieDezinfectie - este procesul prin care sunt distruse cele maimulte sau toate microorganismele patogene (n proportie de99,99%) cu exceptia sporilor bacterieni, de pe obiectele dinmediul inert.

SterilizareaSterilizarea - este operatiunea prin care sunt eliminate sauomorte microorganismele, att cele aflate n starevegetativa ct si cele sub forma de spori, de peobiecteleinerte contaminate, rezultatul acestei operatiuni fiind stareade sterilitate care, conform EN 556, este starea unui produs

liber de microorganisme viabile


5/26

Definitii Antimicrobian - un agent care omoar microorganismele sau le

suprim(inhiba reversibil) creterea i multiplicareaefect bactericid - distrugerea microorganismelor

efect bacteriostatic- inhibarea reversibila multiplicrii microorganismelor Antiseptic o substan care inhib creterea i dezvoltarea

microorganismelor fr s le omoare neaprat. Antisepticele seaplicuzual pe suprafaa corpului.

Biocidun termen general care se aplic oricrui agent care ucideorganismele Germicid chimic o substan chimic sau un amestec de

substane chimice utilizat pentru omorrea microorganismelor. Microbicid o substan chimic sau un amestec de substane

chimice care omoar microorganismele. Acest termen se utilizeazadesea n loc de biocid, germicid, sau antimicrobian.

Sporocid - o substan chimic sau un amestec de substanechimice care omoarmicroorganismele i sporii.


6/26

ACTIUNEA FACTORILOR FIZICITemperatura

Psihrofile - optim la 20C dar i sub aceasttemperatur

Mezofile - optim ntre 20-40C. Sunt cele patogene deoarece se nmul

esc la

temperatura organismului Termofile, care se nmulesc optim la peste 45C

Temperaturile ridicate distrug bacteriile, aplicaia practica acestuiaspect fiind sterilizarea

Celulele bogate in apa sunt mai sensibile (formele vegetative)


7/26

Metode de sterilizareprin mijloace fizice

Caldura uscata

Caldura umeda

Filtrarea

Radiatii


8/26

CALDURA USCATA Incinerarea materiale contaminate, de unica folosinta, deseuri

medicale

Incalzirea la incandescenta (la rosu) - firul ansei de platina Flambarea gatul recipientelor, manerul ansei

Sterilizarea cu aer cald - Etuva (Poupinel) 180 -1 orsau 160C - 2 ore

DA - obiecte de sticl, porelan- instrumentar metalic (atentie la decalire)

- pulberi inerte i termostabile, uleiuri anhidre

NU - soluiile apoase

- obiectele de plastic, cauciuc, vat, bumbac, fibrsintetic- materiale termolabile

- materiale contaminate

Controlul sterilizarii: indicatori fizici (temp, timp), chimici (zaharoza),biologici (spori de Bacillus subtilis)


9/26

CALDURA UMEDA

MAI EFICIENTA DECAT CALDURA USCATA (aer cald) AUTOCLAVAREA (ABUR SUB PRESIUNE)

Relatie presiune - temperatura 0,5 atm 115oC

1 atm 121oC 2 atm 145oCDA - obiecte de sticl, instrumentar metalic

- medii de cultura- obiectele de plastic, cauciuc, vat, bumbac, fibrsintetic

- materiale termolabile- materiale contaminate

Controlul sterilizarii: indicatori fizici (presiune, temp, timp), chimici (benziindicatoare si integratori), biologici (spori de Bacillus stearothermophilus)

TINDALIZAREA (Pasteurizare repetata) medii si solutii 56-100Ctimp de 30-60 minute, 3 pnla 8 zile succesiv

PASTEURIZAREA medii de cultura, lapte (joasa, medie, inalta)

FIERBEREA NU ESTE O METODA EFICACE DE STERILIZARE


10/26


11/26

Autoclave


12/26

Frigul temperaturile moderat sczute, de +4oC din frigidere, nu

distrug bacteriile dar opresc nmulirea lor prelungindu-le

viabilitatea. Tulpini criofile!!!

ngheul la temperaturi nu prea mici fade 0oC determincristalizarea apei ce determinleziunea structurilormembranare a celulelor bacteriene.

Conservarea prin congelare. Temperatura optimeste cearealizatde CO2 (-78C) sau de azotul lichid (-180C).

Liofilizarea deshidratare in vid, la temperaturi scazute


13/26

Durata mentinerii sterilitatii

24 h - materialele ambalate n cutii

metalice perforate sau casolete cu colier,mentinute inchise

2 luni - n pungi de hrtie plastic sudate


14/26

Materiale supuse sterilizarii1. Materiale care se sterilizeaza cu aer cald- sticlaria si instrumentarul care nu suporta sterilizarea cu aburi sub presiune

(otel neinoxidabil: cromat).ATENTIE ! Sterilizarea cu aer cald este contraindicata pentru materiale textile,lichide, cauciuc, lemn, si plastic care nu rezista la temperatura de 180oC(combustie sau deteriorarea materialelor).

2. Materiale care se sterilizeaza cu abur sub presiune- deseuri infectioase lichide si solide, materiale contaminate cu agenti biologici.

Dupa sterilizare acestea fie se elimina ca deseuri menajere, fie recipientelesi instrumentarul care nu sunt de unica folosinta se spala si seresterilizeaza.

- medii de cultura, solutii

- materiale curate (recipiente si instrumentar de sticla si metal inox, materialedin cauciuc, plastic si textile)

ATENTIE ! Daca se utilizeaza un singur autoclav se sterilizeaza in cilcuriseparate, intai materialele curate si in ciclul urmator deseurile contaminate.


15/26

Evaluarea eficacitatii sterilizarii

Indicatori fizici: temp., durata, presiunea

Indicatori chimici: benzi impregnate, fiolecu s. chimice, integratori

Indicatori biologici: spori Bacillus stearothermophilus(autoclav)

Bacillus subtilis(Poupinel)

Bacillus pumilis(radiatii gamma)


16/26

FILTRARE

SOLUTII, MEDII LICHIDE

filtre clasice (porelan, sticlporoas, azbestimpregnat cu caolin, pmnt de infuzori

Membrane filtrante Millipore, Sartorius

Capsule filtrante

AER - Filtre HEPA, ULPA


17/26

RADIATII

IONIZANTE

GAMA, X SERINGI, DISPOZITIVE IMPLANTABILE,MEDII DE CULTURA

UV - C SUPRAFETE, AER

Ultrasunetelenu sunt eficiente pentru sterilizare In cercetare, biotehnologie


18/26


19/26

Substante chimice (biocide)

Antisepticele pot fi utilizate pe tegumente imucoase. Sunt nocive daca se administreaza

intern

Dezinfectantele pot fi utilizate numai pesuprafee i structuri inerte (care nu sunt vii).

concentraia

timp de contact (actiune)

termenul de garanie

durata de valabilitate dupa preparare

Au actiune neselectiva alterand structuri si functii comune microorganismelorsi organismelor superioare


20/26

Prezervanti Agenti bacteriostatici utilizati pentru inhibarea cresterii

microorganismelor, cel mai frecvent in alimente, produse

medicamentoase de origine biologica (ex vaccinuri). Nusunt toxici daca sunt consumati o data cu alimentele sausunt introdusi in organism o data cu produsulmedicamentos. Ex.: propionatul de calciu, benzoatul de

sodiu, respectiv merthiolat de sodiu pt vaccinuri


21/26

Nivele de dezinfectie necesare

pentru diferite materiale

Majorit. bac., unelevirusuri, unii fungi, NU

M. tuberculosissi spori

Piele intacta, obiecteNivel jos(NJ)(necritic)

Compusi cuaternari de amoniu

(0,4 1,6% in apa)

Mycobacteriumtuberculosis, bacteriiveg., majorit. virusi,

fungi; NU SPORI

Instrumentar utilizatpentru mucoase, pielelezata

Nivel intermediar (NI)

(semicritic)

Derivati fenolici 0,4-5%

Alcool etilic, izopropilic60-95%

Iodofori 30-50 ppm

H202stabilizat 3%

Toate formele,

exceptand sporiiincantitate mare

Instrumentar utilizat

intravascular,intraarticular,interventii tesuturi,biopsie

Nivel inalt (NINA) (critic)

Acid peracetic,

Oxid etilen, Formaldehida 1%,Glutaraldehida 2%,

Hipoclorit Na 100-5000 ppm,

H2

02

stabilizat 6%

Toate formeledemicroorganisme,inclusiv sporii

Instrumentarinterventii speciale,imunodeprimatietc.

Sterilizare chimica(nivel inaltprelungit)


22/26

Clasificare Substane cu aciune asupra membranei citoplasmice:fenolul i derivaii fenolici, detergenii (anionici, cationici,

amfolitici, neionici); indice fenolicSubstane care denatureazproteinele: acizii. bazele. Alcoolii(70), actiune bactericida

Substane care inhib enzimele: agenii alchilani, metalelegrele (saruri de Hg - merthiolat i srurile acestora, saruri de Ag,Ag coloidal, formaldehida, glutaraldehida, oxid de etilen

Substanele oxidante Cl, I, Br si derivatii, hipermanganat de

K 1%, peroxid de Hidrogen 3%Substante care altereaza acizii nucleici (colorantii bazici ex.violet de gentiana, derivati de acridina rivanol)


23/26

Hipocloriii soluiile de hipoclorit se preparperiodic (se inactiveaz

dupmai mult de 24 ore),

concentraia n clor activ este diferitn funcie de scopulurmrit (ex. 2.500 ppm clor activ pentru dezinfectareapipetelor contaminate);

au efect dezinfectant asupra bacteriilor n form

vegetativ, sporilor bacterieni, fungilor (100 ppm n 1or), virusurilor (200 ppm n 10 minute); efectul este diminuat considerabil n prezena

substanelor organice (n special proteine), maselor

plastice, detergenilor.


24/26

Derivaii fenolici din cauza toxicitii, potenialului carcinogenetic i

corozivitii, fenolii nu se folosesc ca atare, ci sub formaderivailor fenolici;

soluiile fenolice se preparperiodic (dupcel mult 24 ore);

concentraia poate fi diferitn funcie de scopul urmrit (de

obicei este de 2-5%); au efect dezinfectant asupra bacteriilor n form vegetativ,

fungilor, unor virusuri (ex. HIV este inactivat de soluia0,5%);

efectul este diminuat pe suprafeele de cauciuc, lemn saumaterial plastic.


25/26

Glutaraldehida cel mai frecvent este utilizatconcentraia de 2%, la un

pH alcalin;

are efect dezinfectant asupra bacteriilor n formvegetativ(n cazul mycobacteriilor este necesar un timpmai lung de expunere), fungilor, virusurilor;

datorit faptului c nu corodeazmetalele (aa cum se

ntmpl n cazul substanelor prezentate mai sus) sepoate folosi i la dezinfectarea suprafeelor metalice; nu poate fi folosit pentru suprafee, datorit vaporilor

iritani i timpului mare de expunere; ideal pentru

dezinfectarea echipamentelor contaminate ce pot fiimersate o perioada mai mare de timp n containeremeninute nchise.


26/26

Iodoforii

sunt substane care complexeaz iodul pe care

l elibereazn soluii apoase; au efect dezinfectant asupra bacteriilor n form

vegetativ, unor spori bacterieni, fungilor, unor

virusuri (ex. virusuri cu nveli lipidic); sunt inactivai de substane organice (n special

proteice), mase plastice, detergeni;

pot fi utilizai pentru dezinfecia suprafeelor,dezinfecia pipetelor contaminate

Documents

Curs 3 Actiunea Factorilor Fizici Si Chimici Asupra Bacteriilor