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Bruno Rafael A. da Silva Bruno Rafael A. da Silva –– Especialista em Soluções EnzimáticasEspecialista em Soluções Enzimáticas
DETERGENTES ENZIMÁTICOS PARA O DETERGENTES ENZIMÁTICOS PARA O PROCESSAMENTO DE ARTIGOS HOSPITALARESPROCESSAMENTO DE ARTIGOS HOSPITALARES
1. ENZIMAS1. ENZIMAS
O QUE SÃO? COMO AGEM? O QUE SÃO? COMO AGEM?
2. LIMPEZA2. LIMPEZA
O QUE É?; ÁGUA; DETERGENTES;O QUE É?; ÁGUA; DETERGENTES;
TópicosTópicos
O QUE É?; ÁGUA; DETERGENTES;O QUE É?; ÁGUA; DETERGENTES;
3. DETERGENTES ENZIMÁTICOS3. DETERGENTES ENZIMÁTICOS
AÇÃO; QUALIDADE OU QUANTIDADE? AÇÃO; QUALIDADE OU QUANTIDADE?
4. CONSIDERAÇÕES FINAIS4. CONSIDERAÇÕES FINAIS
5. DÚVIDAS5. DÚVIDAS
Enzimas são....Enzimas são....
•• SubstânciasSubstâncias naturaisnaturais envolvidasenvolvidas emem todostodos osos processosprocessosbioquímicosbioquímicos queque ocorremocorrem nasnas célulascélulas vivasvivas convertendoconvertendonutrientesnutrientes emem energia,energia, criandocriando novasnovas estruturasestruturas celularescelulares..
NÃO SÃO VIVAS!!!NÃO SÃO VIVAS!!!
�� São proteínas.São proteínas.
�� São específicas... São específicas...
�� São TOTALMENTE BIODEGRADÁVEISSão TOTALMENTE BIODEGRADÁVEIS
GENERICAMENTE....GENERICAMENTE....
�� São catalisadoresSão catalisadores
BiodegradávelBiodegradável
�� Obtidas por processos biológicosObtidas por processos biológicos
Principal capacidade que lhe confere aplicação comercial !!!Principal capacidade que lhe confere aplicação comercial !!!
Normalmente fermentação de microorganismos.Normalmente fermentação de microorganismos.
�� Enzimas são EXTREMAMENTE EFICIENTES...Enzimas são EXTREMAMENTE EFICIENTES...
…se tratadas corretamente ! …se tratadas corretamente !
�� São TOTALMENTE BIODEGRADÁVEISSão TOTALMENTE BIODEGRADÁVEIS BiodegradávelBiodegradávelSubstância que se decompõe pela ação de microorganismos.Substância que se decompõe pela ação de microorganismos.
Mais detalhes a seguir...Mais detalhes a seguir...
�� Possuem condições brandas para aplicaçãoPossuem condições brandas para aplicação
� Polímeros de aminoácidos ligados entre si por ligações peptídicas
PROTEÍNASPROTEÍNAS
� Aumentando o número de aminoácidos na seqüência – formam-se estruturas
complexas.
Aminoácidos – Compostos químicos que apresentam em sua formula um grupo amino e um carboxilíco.
� Estrutura primária: Seqüência dos aminoácidos;
� Estrutura secundária: Organização espacial dos aminoácidos
(Interações de curta distância);
� Estrutura terciária: Enrolamento das cadeias, devido interações internas como
pontes de ‘H’ ou de ‘S’. (Interações de longa distância).
Esta estrutura traz propriedades biológicas.
PROTEÍNASPROTEÍNAS
� Estrutura quaternária: A junção de 2 ou mais cadeias polipeptídicas traz um
desenho tridimensional específico para cada enzima.
Esta estrutura é guiada e estabilizada pela estrutura terciária.
DESNATURAÇÃO DE PROTEÍNASDESNATURAÇÃO DE PROTEÍNAS
• Interações estruturais espaciais das proteínas são muito sensíveis.
• Alterações bruscas do meio como temperatura, força iônica e pH podem
proporcionar alteração deste equilíbrio, ocasionando rompimento das
estruturas tridimensionais da Proteína, precipitando-a.
• A precipitação forma um composto de característica sólida.
Exemplo: Ovo Frito. Exemplo: Ovo Frito.
Diminui a energia de ativação para ocorrência de uma reação química,
aumentando assim a velocidade desta reação, sem ser consumido durante
o processo.
ENZIMASENZIMAS têm a capacidade de catalisar a reação de degradação de
matéria orgânica.
CATALISADORCATALISADOR
matéria orgânica.
...Ilustração da diminuição de energia de ativação para ocorrência de uma reação,
a qual é conseguida pela inclusão de um catalisador
• De acordo com o tipo de reação em que catalisam:
Oxidorredutases; Transferases, Hidrolases*; Liases; Isomerases e Ligases
*Hidrolase é a classe das enzimas utilizadas em detergentes. Refere
a toda enzima que catalisa uma ligação de hidrólise.
CLASSIFICAÇÃO DAS ENZIMASCLASSIFICAÇÃO DAS ENZIMAS
a toda enzima que catalisa uma ligação de hidrólise.
Hidrólise – Quebra de uma ligação química com a inclusão de uma molécula de água.
• Nomenclatura:
O substrato preferente + o tipo de reação catalizada + terminação “ase”
Ex: Proteína Hidrolase = Protease
...Exemplo de uma reação de hidrólise.
ESPECIFICIDADEESPECIFICIDADE•• CapacidadeCapacidade catalisarcatalisar somentesomente umum tipotipo dede reaçãoreação..
•• DeveDeve--sese aa umauma regiãoregião emem suasua superfíciesuperfície conhecidaconhecida comocomo sítiosítio dede ligaçãoligação aoao
substrato,substrato, ouou ‘Sítio‘Sítio Ativo’Ativo’..
SítioSítio ativoativo:: RegiãoRegião nana enzimaenzima queque ageage atravésatravés dede interaçõesinterações iônicasiônicas // eletrostáticaseletrostáticas
comcom oo substratosubstrato promovendopromovendo aa açãoação catalíticacatalítica.. AA indicaçãoindicação maismais simplessimples parapara oo
sítiosítio ativoativo éé aa dodo sistemasistema chavechave fechadurafechadura.. AssimAssim comocomo aa fechadurafechadura ‘reconhece’‘reconhece’
aa chavechave correta,correta, aa enzimaenzima tambémtambém oo fazfaz comcom seuseu substratosubstrato..
AA integridadeintegridade dada moléculamolécula enzimáticaenzimática éé essencialessencial àà atividadeatividade catalíticacatalítica..
SubstratoSubstratoS
SubstratoSS
CLASSE CLASSE ENZIMÁTICAENZIMÁTICA
PEPTIDASESPEPTIDASES
NO DIANO DIA--AA--DIA:DIA:
SangueSangue ((HemoglobinaHemoglobina e e FibrinaFibrina), ), pelepele
REMOÇÃO DEREMOÇÃO DE
ProteínaProteína
ENZIMASENZIMAS
PROTEASESPROTEASES((SavinaseSavinase e e LiquanaseLiquanase))
Como é a ação específica das Enzimas?Como é a ação específica das Enzimas?
GLICOSIDASESGLICOSIDASES(CARBOHIDRASES)(CARBOHIDRASES)
ESTEARASESESTEARASES
MucoMuco, , SecreçõesSecreções
FezesFezes / bolo fecal, bolo / bolo fecal, bolo alimentaralimentar
GordurasGorduras
AmidoAmido
CeluloseCelulose
LipídeosLipídeos
AMILASESAMILASES((TermamylTermamyl e e DuramylDuramyl) )
CELULASESCELULASES((EndolaseEndolase))
LIPASELIPASE
Enzimas Enzimas –– Carbohidrases (Slide especial)Carbohidrases (Slide especial)
AMILASES / CELULASES
Hidrolise de Carbohidratos
CARBOHIDRASES
Amilase
Amido Monossacarídeos solúveis em água
Celulose (insolúvel em água)
CelulaseCelulose (solúvel em água)
•• AsAs enzimasenzimas trabalhamtrabalham emem condiçõescondições brandasbrandas ee bastantebastante abrangenteabrangente dede pHpH
ee temperaturatemperatura::
TemperaturaTemperatura ~~ 1010 àà 6060ºCºC pH ~ 5 à 11
APLICAÇÃOAPLICAÇÃO
Variação da atividade enzimática x pHVariação da atividade enzimática x temperatura
CUIDADOSCUIDADOS
Os aminoácidos em Os aminoácidos em azulazul estão localizados perto uns dos outros na forma ativa, estão localizados perto uns dos outros na forma ativa, porém não estão assim na forma desnaturadaporém não estão assim na forma desnaturada
Os aminoácidos em Os aminoácidos em azulazul estão localizados perto uns dos outros na forma ativa, estão localizados perto uns dos outros na forma ativa, porém não estão assim na forma desnaturadaporém não estão assim na forma desnaturada
SubstratoSubstratoS
SubstratoSS
Alta Alta temperaturtemperaturaaAlta Alta temperaturtemperaturaa
Se alterar a estrutura, perde sua função.... Se alterar a estrutura, perde sua função.... ((ovoovo fritofrito) ) Se alterar a estrutura, perde sua função.... Se alterar a estrutura, perde sua função.... ((ovoovo fritofrito) )
SSSAlta Alta temperaturtemperaturaa
AtaqueAtaque químicoquímico (PH, (PH, oxidaçãooxidação,…),…)
Alta Alta temperaturtemperaturaa
AtaqueAtaque químicoquímico (PH, (PH, oxidaçãooxidação,…),…)
AÇÃOAÇÃO
15
P = Componentes de uma cadeia protéica.P = Componentes de uma cadeia protéica.
E = Enzimas (Proteases) agindoE = Enzimas (Proteases) agindo
LimpezaLimpeza
Primeira e mais importante etapa para a eficácia dos procedimentosde desinfecção e esterilização.
Obtida através da lavação* dos artigos / instrumentais.
*Lavação: Limpar banhando, tirar com água as impurezas de....*Lavação: Limpar banhando, tirar com água as impurezas de....
*Fonte: (http://michaelis.uol.com.br/moderno/portugues/)
LimpezaLimpeza
POR QUÊ NÃO LAVAR O INSTRUMENTALUSANDO SOMENTE ÁGUA?
Por causa da tensão superficial !
Gota de água (líquido de alta tensão superficial)
O
O
O
O
O
O
O O
O
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OO
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Superfície do líquido
Moléculas da superfície são atraídas para dentro da solução
Força resultante para o interior do líquido.
Aumentar a
Ar
Tensão SuperficialTensão Superficial
OO
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O OOO
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Moléculas do interior sofrem atração de todos os lados
Aumentar a superfície do líquido vai contra esta força.
Tensão superficial.Água
Média tensão superficial
Alta tensão superficial
Baixa umectação
Tensão SuperficialTensão Superficial
19
Média tensão superficial
Média umectação
Baixa tensão superficial
Alta umectação
1.1. TensoativasTensoativas::
Tensoativos AniônicosTensoativos Aniônicos
Tensoativos Não IônicosTensoativos Não Iônicos
Tensoativos CatiônicosTensoativos Catiônicos
Matérias Primas de um DetergenteMatérias Primas de um Detergente
2. Coadjuvantes:2. Coadjuvantes:
EspessantesEspessantes
SequestrantesSequestrantesTensoativos CatiônicosTensoativos Catiônicos SequestrantesSequestrantes
EstabilizantesEstabilizantes
ConservantesConservantes
AditivosAditivos
SolventesSolventes
EnzimasEnzimas
Corantes, EssênciaCorantes, Essência
DetergenteDetergente comumcomum –– AçãoAção
�� OO sanguesangue éé compostocomposto porpor proteínasproteínasdede altoalto pesopeso molecular,molecular, garantindogarantindoforteforte atraçãoatração aoao instrumental,instrumental,dificultandodificultando aa formaçãoformação dede umaumadificultandodificultando aa formaçãoformação dede umaumamicelamicela completacompleta pelospelos tensoativostensoativos e,e,conseqüentemente,conseqüentemente, comprometendocomprometendoaa suasua remoçãoremoção dodo instrumentalinstrumental
! OU SEJA, INSTRUMENTAL TOTALMENTE LIMPO!
Detergentes Enzimáticos Detergentes Enzimáticos -- AçãoAção
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E AS ENZIMAS CONTINUAM ATIVAS
QUANTIDADEQUANTIDADEOU OU
Detergentes EnzimáticosDetergentes Enzimáticos
2 Enzimas
20% de Enzimas
50% de Enzimas
OU OU QUALIDADEQUALIDADE
5 Enzimas
1 Enzimas3 Enzimas4 Enzimas
10% de Enzimas
60% de Enzimas
• Boa procedência das matérias-primas;
Produção de acordo com legislações Pertinentes;
• Quanto maior o desenvolvimento tecnológico, melhor o resultado prático;
• Atividade da enzima pura conhecida e QuantidadeQuantidade
QualidadeQualidade
• Atividade da enzima pura conhecida e documentada.
• Testes de comprovação de estabilidade e manutenção de atividade enzimática.
• A quantidade usada na formulação vai depender da “qualidade” da enzima utilizada. Do respeito aos procedimentos indicados.
• O maior teor adicionado não garante maior qualidade.
QuantidadeQuantidade
•• MATÉRIA ORGÂNICA PRESENTE EM INSTRUMENTAISMATÉRIA ORGÂNICA PRESENTE EM INSTRUMENTAIS
A MAIOR QUANTIDADE DE MATÉRIA A MAIOR QUANTIDADE DE MATÉRIA ORGÂNICA É ORIUNDA DE SANGUE ORGÂNICA É ORIUNDA DE SANGUE ––PROTEÍNA.PROTEÍNA.
PROTEÍNAPROTEÍNA SANGUE / PELE / SANGUE / PELE / TECIDOSTECIDOS
Quantas enzimas usar?Quantas enzimas usar?
AMIDOAMIDO SECREÇÕES / SECREÇÕES / MUCOMUCO
O SANGUE É COMPOSTO POR O SANGUE É COMPOSTO POR DIFERENTES TIPOS DE PROTEÍNAS DIFERENTES TIPOS DE PROTEÍNAS ––FIBRINA E HEMOGLOBINAFIBRINA E HEMOGLOBINA
CELULOSECELULOSE BOLO ALIMENTAR BOLO ALIMENTAR / BOLO FECAL/ BOLO FECAL
LIPÍDEOSLIPÍDEOS GORDURASGORDURAS
CADA PROTEASE TEM AÇÃO CADA PROTEASE TEM AÇÃO MELHOR SOBRE UMA MELHOR SOBRE UMA PROTEÍNA.PROTEÍNA.
DESTE MODO INDICADESTE MODO INDICA--SE A SE A CONJUGAÇÃO DAS PROTEASES CONJUGAÇÃO DAS PROTEASES
PROTEASE 1
PROTEASE 2
Diferentes proteases...Diferentes proteases...
CONJUGAÇÃO DAS PROTEASES CONJUGAÇÃO DAS PROTEASES VISANDO REMOÇÃO MAIS VISANDO REMOÇÃO MAIS EFICAZ DE TODO O SANGUE.EFICAZ DE TODO O SANGUE.
DifferentDifferent NovozymesNovozymes proteasesproteases werewere testedtested atat roomroom temperaturetemperature ((2222C)C) forfor bloodblood removalremoval efficiencyefficiency usingusing thethe TOSITOSI testtest.. TheThe testtest waswas carriedcarried outout inin bufferedbuffered waterwater
atat pHpH88 andand detergentdetergent pHpH88.. AfterAfter 3030 minutesminutes thethe testtest waswas stoppedstopped asas thethe timetime forfor removalremoval ofof bloodblood waswas consideredconsidered tootoo longlong.. TheThe testtest waswas carriedcarried outout underunder
acceleratedaccelerated conditionsconditions withwith aa inin useuse concentrationconcentration ofof proteasesproteases ofof 1010%% FibrinFibrin andand hemoglobinhemoglobin removalremoval waswas assessedassessed byby HemocheckHemocheck testtest..
PROTEASE 3
PROTEASE 4
• É necessária utilização de detergente profissional, desenvolvido especificamente para opropósito;
• Limpeza ineficaz acarreta em contaminação do instrumental. (Não há desinfecção deinstrumental sujo)
• Tensoativos não conseguem emulsionar (solubilizar) eficazmente matéria orgânica comoproteína, gordura e polissacarídeos.
• ENZIMAS DEGRADADAS = ENZIMAS INATIVAS = DETERGENTE COMUM. (Lembrar doOvo Frito !);
• Enzimas são facilitadores do processo de limpeza, degradam a matéria orgânica que é
Recordar é viver.....Recordar é viver.....
• Enzimas são facilitadores do processo de limpeza, degradam a matéria orgânica que émais facilmente removida pelo detergente.
• A quantidade de enzima expressa (%), não corresponde a atividade da enzima nasolução (Atividade Enzimática);
• A conjugação de duas proteases pode trazer incremento na remoção de sangue (fibrinae hemoglobina);
• O número de diferentes enzimas e a quantidade de cada enzima depende da finalidade eda formulação de cada detergente. Mito: ‘Mais do que três enzimas é apenas apelo demarketing’;
PERGUNTAS ???PERGUNTAS ???
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MUITO OBRIGADO !!!MUITO OBRIGADO !!!
Bruno Rafael A. da Silva Bruno Rafael A. da Silva –– Especialista em Soluções EnzimáticasEspecialista em Soluções EnzimáticasContato: [email protected]: [email protected]
Fone: 11Fone: 11--9643.82179643.8217