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DETERMINACION DE GRUPO SANGUINEOABO y Rh
PREPARACION DE LAS MUESTRAS DESTINADAS AL ESTUDIO INMUNOHETOLOGICO
RECOLECCION DE LA MUESTRA
• Las muestras de sangre deben ser extraídas con y sin anticoagulante
• Deben estar correctamente identificadas
• No presentar coágulos ni hemolisis
• De las muestras sin anticoagulantes se debe separar el suero
no debe contener restos de fibrina
LAVADO DE GLOBULOS ROJOS (MANUAL)
• En un tubo de hemolisis colocar 2 gotas de suero anticoagulada
• Añadir 4 ml. de solución fisiológica
• Centrifugar
• Decantar la solución sobrenadante.
• Realizar 3 ciclos de lavado
• Del concentrado celular preparar una suspensión celular al 3 % con solución salina
- PREPARACION DE PANELES DE GLOBULOS ROJOS TESTIGO
-
PRINCIPIO DEL PROCEDIMIENTO
La aglutinación de los glóbulos rojos con sueros tipificadores anti A, anti B
Y anti AB indican la presencia del correspondiente antígeno, la ausencia de
aglutinación indica ausencia de este.
La aglutinación resulta de la fijación de los anticuerpos a los antígenos de varios
Eritrocitos, que forman una red o trama que mantiene unidas a las células.
PRUEBA DIRECTA PARA DETERMINACION DE GRUPO SANGUINEO
Reacción de las células lavadas con el antisuero
GRACIAS........
PRUEBA INVERSA
Procedimiento para detectar anticuerpos anti ABO en el suero o plasma
Método directoReacciones de Células con antisuero
Método inversoReacciones del suero con células testigo Interpretación
Anti A Anti B Anti AB Células A Células B CélulasO
Grupo
0 0 0 + + 0 O
+ 0 + 0 + 0 A
0 + + + 0 0 B
+ + + 0 0 0 AB
Los resultados de la prueba directa e inversa deben coincidir, sino lo hicieran
se debe repetir la prueba de bolsa y en tubo nuevo.
DETERMINACION DE FACTOR Rh
• Rotular un tubo de hemólisis con el código del donante y la letra D.
• Rotular otro tubo de hemólisis con el código del donante, que servirá de controlnegativo para la determinación de grupo Rh.
• Agregar 1 gota de suspensión de glóbulos rojos lavados al 3% del donante enambos tubos y 1 gota de suero anti-D en el primero, y al segundo agregaruna gota de reactivo Rhesus control o suero control negativo anti D.
• Mezclar y centrifugar a velocidad y tiempo establecido para cada centrífuga,Leer y consignar los resultados registrando la intensidad de la reacción de 1 a4 cruces.
INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS
• Si hay aglutinación igual o mayor a 2+ en el Tubo, la persona presenta elantígeno D en los eritrocitos, por lo tanto es D positivo.
• Si la aglutinación es 1+ o negativo en el tubo de centrifugación inmediata,incubar en Baño María a 37º durante 30 minutos, luego centrifugar y leer. Sies negativo debe continuarse el estudio en busca de expresiones más débileso variantes del antígeno D para definir así la presencia o ausencia delantígeno Rh, en el eritrocito.
• En el tubo control los eritrocitos deben presentar reacción negativa con elreactivo Rhesus control. En caso de reacción positiva, los resultados de ladeterminación son inválidos.
INVESTIGACION DEL ANTIGENO D DEBIL
• Usar el mismo tubo que dio resultado negativo para Rh
• Lavar los eritrocitos de los tubos con abundante solución fisiológica
• Después del último lavado eliminar el suero fisiológico dejando los eritrocitosresuspendidos.
• Agregar dos gotas de suero Antiglobulina Humana.
• Mezclar y centrifugar
• Realizar la lectura
INTERPRETACIÓN
Anti D InvestigaciónAg D débil
Test AGHDirecto
Informe
+--- ----
Rh positivo
O O O Rh negativo
O + O Rh positivo débil
O + + No i