DIAGNOSTICA GENETICA

PRENATALEAnalisi cromosomica

Ricerca di mutazioni puntiformi in singoli geni

POST NATALE

Rischio riproduttivo (popolazione, familiari di malati)

Conferma di diagnosi

Tumori

FarmacogeneticaDiagnosi predittiva

Medicina legale

Problemi tecnici

Problemi biologici

Problemi etici

Le basi genetiche delle malattie

nascita pubertà età adulta

Anomalie cromosomiche Malattie

multifattoriali

Malattie monogeniche

Anomalie cromosomiche

Identificabili dall’analisi del cariotipo

CARIOTIPO UMANO MASCHILE46, XY

23 COPPIE CROMOSOMI:22 COPPIE DI AUTOSOMI2 CROMOSOMI SESSUALI

1 2 3 4 5

6 7 8 9 10 11 12

13 14 15 16 17 18

19 20 21 22 X Y

GF

ED

C

A B

CONDENSAZIONE E DECONDENSAZIONE DEI CROMOSOMI NELLE VARIE FASI DEL CICLO

ReplicazioneDNA

Divisionecellulare

DIMENSIONI DEI CROMOSOMI

CR 1

Mb METAFASE INTERFASE

CR 21

250Mb 10 8.5cm

55Mb 2 1.7cm

N. GENI

3000

400

COLORAZIONE CON BANDEGGIO

BANDE COMPOSIZIONE REPLICAZIONE CROMATINA TRASCRIZIONE

SCURE

CHIARE

AT

GC

TARDI

PRESTO

CONDENS

ESPANSA(GENI)

INATTIVA

ATTIVA

DIVERSA RISOLUZIONE DEL BANDEGGIO

Risoluzione massima : 1Mb

FISH: ibridizzazione fluorescente in situ

FISH: ibridizzazione fluorescente in situ

Fluorescence In Situ Hybridisation: FISH

CHROMOSOME PAINTING

TRASLOCAZIONE

FISH

• Delezione crom 15 nella s.di Prader Willi

Permette di visualizzare anomalie cromosomiche di dimensione > 10kb

5% DI TUTTI I DIFETTI CARDIACI CONGENITI5% DI TUTTI I DIFETTI CARDIACI CONGENITI

40% DELLE TETRALOGIE DI FALLOT E ATRESIA40% DELLE TETRALOGIE DI FALLOT E ATRESIA POLMONAREPOLMONARE

60% DELLE TETRALOGIE DI FALLOT CON 60% DELLE TETRALOGIE DI FALLOT CON ASSENZA DI VALVOLA POLMONAREASSENZA DI VALVOLA POLMONARE

5-8% DELLE PALATOSCHISI5-8% DELLE PALATOSCHISI

Delezione cromosoma 22q nellaDelezione cromosoma 22q nellaSINDROME DI Di GEORGE / VELOCARDIOFACCIALESINDROME DI Di GEORGE / VELOCARDIOFACCIALE

T’s Deletions

22q11

(

(

(

(

(

((

(

(

( (( (

(

(

(

(3000 KB)(3000 KB)

FISH Risoluzione: 10kb

This Aneuploid Screen test shows a female fetus with trisomy-21. The nucleus on the left has been hybridized to probes for chromosomes 13 (green), and 21 (red) and clearly has three red signals. The nucleus on the right has been hybridized to probes for chromosomes 18 (aqua), X (green), and Y (red). Since it has two green signals and no red signal it is female

Analisi con FISH di cellule in interfase

Interphase nuclei from amniotic fluid cells have been combined with DNA probes for chromosomes 13, 18, 21, X, and Y. The nucleus on the left has been hybridized to probes for chromosomes 13 (green), and 21 (red). The nucleus on the right has been hybridized to probes for chromosomes 18 (aqua), X (green), and Y (red).

VANTAGGI DELLA FISH

• Rapida e sensibile•Non è necessaria cultura cellulare (colora nuclei in interfase)•Risultati relativamente facili da interpretare.

SVANTAGGI DELLA FISH

Fornisce informazioni specifiche per la sonda utilizzata. Non permette di vedere altre anomalie