diagnóstico de procesos nerviosos en porcinoPulmones: congestivos y con marcado patrón lobulillar. En los pulmones 1 y 2 se observa fibrina en la superficie del pulmón Digestivo:

diagnósticode procesos nerviososen porcino

procesos no infecciosos

intoxicacionessalselenioureamonóxido de carbonoorganocloradosmicotoxinas

deficiencias nutricionaleshipoglucemiahipocalcemiadeficiencia de ácido pantoténicodeficiencia de vitamina Afalta de agua

causas congénitas tremor congénitohidrocefalia

procesos infecciosos

lechones

Meningitis bacterianasStreptococcus suisGlaesserella parasuisSalmonella sp.

Encefalitis víricasPCV2Enfermedad de AujeszkyPRRSAtypical pestivirus

animales de transición - cebo

Meningitis bacterianasStreptococcus suisGlaesserella parasuisSalmonella sp.

Encefalitis víricasEnfermedad de AujeszkyVirus de la encefalomiocarditis

Enfermedad de los edemas (STEC)

cuadro etiológico

toma de muestras

Es fundamental hacer una buena toma de muestras para poder llegar a un diagnóstico certero. Hay que seleccionar animales con sintomatología nerviosa, a poder ser que no hayan sido tratados con antibióticos y que hayan sido sacrificados o hayan muerto recientemente.

En Exopol recomendamos enviar las cabezas enteras para evitar la contaminación durante la extracción y el transporte.

Para poder diagnosticar más animales otra opción es introducir un hisopo estéril con medio de transporte por el agujero magno de varios animales.

Si existe sospecha de enfermedad de los edemas, es imprescindible el envío de paquetes digestivos completos.

En función del diagnóstico clínico presuntivo y las lesiones observadas seleccionaremos las muestras a enviar:

Sospecha de Escherichia coli verotoxigénico: es imprescindible el envío del paquete digestivo completo junto a la muestra del encéfalo

o +

Sospecha de Streptococcus suis o Glaesserella parasuis: envío de encéfalos, pulmones, corazón y articulaciones o líquido articular

Las muestras se deben enviar refrigeradas y entregar en el laboratorio en un plazo máximo de 24 horas.

técnicas de diagnóstico

cultivo microbiológico

permite la obtención de la cepa para realizar estudios de sensibilidad antibiótica, tipado, autovacunas, etc.

concentración mínima inhibitoria (CMI)

muestra la concentración más pequeña de antibiótico que impide la multiplicación de la bacteria. nos permite conocer cuál es el antibiótico más efectivo en la dosis adecuada, evitando subdosificar o sobredosificar

antibiograma

realizado mediante la técnica de Kirby Bauer (antibiograma en disco) dónde se indica si una bacteria es sensible, resistente o tiene sensibilidad intermedia frente a un antibiótico

real time PCR

permite confirmar la presencia de virus y bacterias implicadas

histopatología

de gran interés para valorar la importancia de cada uno de los agentes implicados en el complejo respiratorio ovino

tipado de cepas

se puede realizar el tipado por qPCR tanto de las cepas aisladas como directamente de la muestra obtenida del encéfalo. El tipado es de gran interés a la hora de realizar estudios epidemiológicos en la explotación, elección de vacunas o diseños de autovacunas

oferta de diagnóstico

panel nervioso


serotipado de Glaesserella parasuis

qPCR: 1/2/11, 2, 3, 4, 5/12, 6, 7, 9, 11, 13, virulento, no virulento

serotipado de Streptococcus suis

qPCR: 1-14, 2-1/2, 3, 4, 5, 7, 8, 9

factores de virulencia de cepas de Streptococcus suis

qPCR: suilysin, ORF102, muramidase-released protein, extracellular protein factor

qPCR:Glaesserella parasuisStreptococcus suis

E. coli F18E. coli Stx2e

antibiograma de bacterias de interés

casos clínicos

caso 1: meningitis estreptocócica

caso 3: enfermedad de los edemas

caso 2: meningitis por Glaesserella parasuis

caso 4: meningitis por Streptococcus suis y Glaesserella parasuis

muestras recibidas

recibimos 5 pulmones y 5 encéfalos de animales destetados de 5-8 semanas de vida

meningitis estreptocócicacaso1

observaciones macroscópicas

Pulmones: presentan congestión con ausencia de consolidación excepto el pulmón 5, que no presenta lesiones aparentes.

Encéfalos: congestión vascular y turbidez de meninges.

diagnóstico solicitado: panel nervioso

histopatologíadiagnóstico emitido por Micros Veterinaria

Encéfalo: Intensa meningitis purulenta aguda, caracterizada por la presencia de un infiltrado inflamatorio purulento con abundantes neutrófilos, acompañad os de macrófagos e histiocitos.

Presencia de intensa congestión en vasos, microhemorragias y extravasación de líquido de edema. En la sustancia blanca del encéfalo se observa espongiosis (edema), y cierta gliosis y manguitos perivascurales, principalmente en áreas paraventriculares y córtex. No se observan bacterias en las secciones examinadas.

Pronóstico y observaciones:

Las lesiones meníngeas son muy graves y justifican una clínica nerviosa en el animal, y la muerte del mismo. Se trata de lesiones compatibles con un origen bacteriano. La ausencia de bacterias en las secciones examinadas se relaciona con el carácter agudo de las lesiones o con tratamientos antibióticos previos a la muerte del animal.


crotal

Pulmón 1

Pulmón 2

Pulmón 3

Pulmón 4

Pulmón 5

Encéfalo 1

Encéfalo 2

Encéfalo 3

Encéfalo 4

Encéfalo 5

identificación

Streptococcus sp.*

Streptococcus suis*

Staphylococcus coagulasa negativo* Enterobacterias*

Streptococcus suis***Bordetella bronchiseptica*

Staphylococcus coagulasa negativo*Bacillus sp.*Bordetella bronchiseptica*

Streptococcus suis*

Enterobacterias*Proteus

Streptococcus suis**

Contaminada

Streptococcus suis**

concentración mínima inhibitoria (CMI): Bacterial y crotal: Streptococcus suis aislado en Encéfalo 3

Antibiótico Resultado Sensible - Resistente

D- Amoxicilina <0,016 ≤4 ≥16

D- Ampilicina ≤0,25 ≤8 ≥32

D- Penicilina 1 ≤0,25 ≥1

D- Trimetroprima - sulfametoxazol >2 ≤2

D- Tetraciclina >8 ≤0,5 ≥2

C- Gentamicina 16 ≤2 ≥8

C- Florfenicol 4 ≤2 ≥8

C- Clindamicina >16 ≤0,5 ≥4

C- Gamitromicina >8 ≤4 ≥16

C- Tildipirosina >16 ≤4

C- Tilmicosina >16 ≤16 ≥32

C- Tulatromicina >64 ≤16 ≥64

C- Tilosina Tartare >32 ≤8 ≥16

C- Tiamulina 8 ≤16 ≥32

B- Ceftiofur 1 ≤2 ≥8

B- Enrofloxacina 1 ≤0,5 ≥1

B- Danofloxacina >1 ≤0,25 ≥1

B- Marbofloxacina 0,25 ≤1 ≥4

real time PCR

determinaciones

Glaesserella parasuis

Streptococcus suis

muestras

P 1+2

Neg.

Positivo (28,16)

E 1-5

Cepa E1

Cepa E3

Cepa E5

S. suis serotipo 9 (29,45)

S. suis serotipo 9S. suis suilysin (sly)S. suis muramidase-released protein (mrp)



muestras resultado

serotipado y factores de virulencia de Streptococcus suis

comentario del caso

En este caso la sospecha clínica de estreptococia se confirmó tanto mediante cultivo microbiológico, como por PCR y por las lesiones histopatológicas.

Los resultados sobre los encéfalos analizados confirmaron una meningitis bacteriana por Streptococcus suis. El único serotipo detectado en el pool de encéfalos fue el 9 y todos los aislamientos obtenidos se confirmaron como serotipo 9. Respecto a los factores de virulencia, se localizaron sly y mrp en las tres cepas.

Se completó el diagnóstico descartando Glaesserella parasuis en los encéfalos.

caso2meningitis por Glaesserella parasuis

muestras recibidas


Encéfalo: congestión vascular

Corazón: presenta fibrina en pericardio

Pulmón: congestivo y con lóbulos adheridos entre sí con presencia de fibrina

Bazo: con zona oscurecida

Resto de órganos: sin lesiones aparentes


órganos de un animal recién destetado (25 días de vida) con meningitis


crotal

Encéfalo

Pulmón

Corazón

Bazo

identificación

Glaesserella parasuis**Enterobacterias

Glaesserella parasuis**Escherichia coli*

Glaesserella parasuis**

Glaesserella parasuis*

real time PCR

determinaciones


Streptococcus suis

muestras

E1

Positivo (30,61)

Neg.


E 1

Cepa E1

G. parasuis serotipo 6 (30,06)

G. parasuis serotipo 6

muestras resultado

comentario del caso

En el caso actual los resultados mostraron la presencia de Glaesserella parasuis en diversos órganos, agente etiológico de la enfermedad de Glässer, lo que justifica las lesiones y clínica observada.

La detección de serotipos de G. parasuis sobre muestras indicaba la presencia de únicamente el serotipo 6. Se aisló la cepa de dicho serotipo que se mantuvo en conservación para posteriores análisis o producción de autovacunas.

Se descarta la presencia de S. suis, tanto por cultivo como por PCR.

Se recomendó el análisis de más animales para confirmar el proceso a nivel de explotación. Dada la edad de los animales es de interés valorar otras causas de procesos nerviosos como Enfermedad de los Edemas por E. coli verotoxigénico, para ello es imprescindible enviar intestino delgado.

enfermedad de los edemascaso3

muestras recibidas


digestivos de animales de 7 semanas de vida

sospecha de Enfermedad de los Edemas, presentan síntomas nerviosos y baja súbita

gran congestión del intestino delgado, no se aprecian edemas


antibiograma: Bacteria y crotal: Escherichia coli beta hemolítico aislada en ID 4

Antibiótico Resultado Diámetro (mm) Referencia (mm)

D-Ampilicina Resistente 11 13 17

D-Penicilina Resistente 20 29 29

D-Bacitracina Resistente 0 8 13

D- Trimetoprim/sulfametoxazol Sensible 0 11 14

D-Tetraciclina Resistente 10 14 19

C-Apramicina Resistente 16 19 23

C-Gentamicina Resistente 10 12 16

C-Neomicina Resistente 8 12 17

C-Espectinomicina Sensible 18 10 14

C-Estreptomicina Sensible 15 10 11

C-Amoxicilina + ácido clavulánico Resistente 11 13 18

C-Florfenicol Sensible 23 18 22

C-Tianfenicol Resistente 11 12 18

C-Cefalotina Sensible 19 14 18

C-Clindamicina Resistente 10 14 21

C-Eritromicina Resistente 12 13 23

C-Gamitromicina Resistente 9 16 16

C-Tilmicosina Resistente 8 11 11

C-Tiamulina Sensible 10 9 9

B-Cefquinoma Sensible 31 18 22

B-Ceftiofur Sensible 23 17 21

B-Colistina-sulfato Sensible 13 8 11

B-Enrofloxacina Resistente 12 18 23

B-Marbofloxacina Resistente 11 14 20

B-Marbofloxacina Sensible 21 14 20


crotal

ID 1

ID 2

ID 3

ID 4

identificación

Escherichia coli beta hemolítico***




real time PCR

determinaciones

E. coli F18

E. coli Stx2e

muestras

ID 1-4

Positivo (21,9)

Positivo (23,64)

comentario del caso

En este caso se ha evidenciado la presencia de E.coli verotoxigénico o productor de Shiga toxina (STEC) por la presencia de los factores de virulencia F18 y Stx2e.

En caso de bajas por STEC, no siempre se observan edemas macroscópicamente, por lo que es imprescindible un diagnóstico laboratorial para confirmarlo o descartarlo.

En problemas nerviosos es importante el envío de encéfalo para descartar una posible meningitis. En la enfermedad de los edemas, las lesiones histopatológicas a nivel del tronco de encéfalo (polioencefalomalacia bilateral simétrica) son características, confirmando la enfermedad si se observan.

También es interesante el envío de otros órganos (hígado, bazo, pulmón) para descartar una posible septicemia como causa de las bajas producidas.

meningitis por Streptococcus suis y Glaesserella parasuiscaso4


muestras recibidas


Encéfalos: congestivos

Pulmones: congestivos y con marcado patrón lobulillar. En los pulmones 1 y 2 se observa fibrina en la superficie del pulmón

Digestivo: con contenido amarillento

órganos de un animal de transición de cinco semanas de vida con meningitis


crotal

ID 1

ID 2

ID 3

ID 4

E1

E2

E3

E4

P1

P2

P3

P4

identificación

Escherichia coli**

Escherichia coli**Proteus

Escherichia coli**

Escherichia coli beta hemolitico*Escherichia coli*

Escherichia coli*

Streptococcus suis*

Streptococcus suis*

Glaesserella parasuis**


Glaesserella parasuis*Escherichia coli*


Glaesserella parasuis*Escherichia coli*

real time PCR

determinaciones


Streptococcus suis

E. coli F18

E. coli Stx2e

muestras

E 1-4

Positivo (30,03)

Positivo (32,9)

ID 1-4

Neg.

Neg.

E 1-5

Cepa E2

Cepa E3

E 1-5

Cepa E1Cepa E2Cepa E3

S. suis serotipo 2-1/2 (31,36)

S. suis serotipo 2-1/2S. suis suilysin (sly)S. suis muramidase-released protein (mrp)S. suis extracellular protein factor (epf)

S. suis serotipo 2-1/2S. suis suilysin (sly)S. suis muramidase-released protein (mrp)S. suis extracellular protein factor (epf)

G. parasuis serotipo 5/12 (35,68)G. parasuis serotipo 13 (26,53)

G. parasuis serotipo 13G. parasuis serotipo 13G. parasuis serotipo 5/12

muestras

muestras

resultado

resultado

serotipado y factores de virulencia de Streptococcus suis


comentario del caso

Los resultados del panel nervioso sobre los encéfalos analizados confirman una meningitis bacteriana, estando implicados tanto Glaesserella parasuis como Streptococcus suis.

Glaesserella parasuis: se detecta serotipo 13 en alta concentración en muestras de encéfalo. Además, la cepa ha sido localizada. También ha sido aislado el serotipo 5/12 en baja concentración sobre las muestras de encéfalo y se ha localizado la cepa serotipo 5/12 en una de las muestras de pulmón.

Streptococcus suis: se ha aislado por cultivo en 2 de los encéfalos, identificando las dos cepas como perteneciente al serotipo 2-1/2.

Se descarta enfermedad de los edemas al ser negativas las muestras de digestivo para F18 y Stx2e.

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diagnóstico de procesos nerviosos en porcinoPulmones: congestivos y con marcado patrón lobulillar. En los pulmones 1 y 2 se observa fibrina en la superficie del pulmón Digestivo: