Upload
ceceiang
View
4
Download
0
Embed Size (px)
DESCRIPTION
wkwkwkwk
Citation preview
7/16/2019 Dna Fingerprint
http://slidepdf.com/reader/full/dna-fingerprint-568bd168bc425 1/9
Chintia Armelia Golf
102012265
Fakultas Kedokteran, Universitas Kristen Krida Wacana, Jakarta.
Jl. Arjuna Utara no.6 Jakarta !".
#ele$on % "&'!6() &"6* Fa+ % "&'!6 -
DNA Fingerprint
(Darmono)
Seperti halnya sidik jari (fingerprint) yang telah lama digunakan oleh detektif
dan laboratorium kepolisian sejak tahun 1930 pada tahun 19!9 telah ditemukan
mengenai sidk "#$ yang terdapat pada setiap indi%idu&orang yang la'im disebut
"#$ ingerprint yang unik dan selalu berbeda untuk setiap orang atau indi%idu
idak seperti sidik jari biasa atau fingerprint kon%ensional yang terdapat pada ujung jari seseorang dan dapat dirubah dengan operasi* "#$ fingerprint mempunyai
kesamaan pada setiap sel* jaringan dan organ pada setiap indi%idu "#$ ingerprint
tidak dapat dirubah oleh siapapun dan dengan alat apapun +leh karena itu "#$
ingerprint adalah metoda yang sangat akurat untuk mengidentifikasi perbedaan
diantara satu orang dengan orang lainnya
$plikasi teknologi "#$ fingerprint merupakan diagnosis yang kuat untuk
penyakit keturunan pada orang de,asa* anak dan bayi yang belum dilahirkan
eknologi tersebut sangat bagus sekali dan dapat dilakukan pada sampel seke-il
apapun dan dalam selang ,aktu yang lama* misalnya pada pe,arnaan darah beku
presiden $merika Serikat $braham .in-oln dapat dianalisis adanya kelainan genetik
yang disebut /arfans disesease
Struktur DNA
iri khas dari makhluk hidup termasuk manusia adalah terdapat informasi
biologik yang terdapat didalam "#$nya* yang diturunkan dari kedua orang tuanya
Struktur molekul dari "#$ dapat digambarkan seperti resliting yang gigi4giginya
7/16/2019 Dna Fingerprint
http://slidepdf.com/reader/full/dna-fingerprint-568bd168bc425 2/9
saling bertaut disimbulkan sebagai huruf dari huruf yaitu **$ dan * dimana gigi
yang berla,anan terbentuk satu atau dua pasang* baik $4 atau 4 7uruf $**
dan adalah singkatan dari asam amino $denin* ytosin* uanin dan hymin* yang
terbentuk merupakan bangunan dasar dari "#$ "imana $denin dan uanin adalah
kelompok purine* sedangkan hymin dan ytosin adalah kelompok pyrimidin
8nformasi yang ada dalam "#$ dideterminasi primer oleh seuens dari huruf
sepanjang untaian tersebut isalnya seuen $ menunjukkan informasi yang
berbeda dengan seuen $ Seperti pada kata /:+S artinya berbeda dengan
/S+: atau /:+S ,alaupun kata4kata tersebut menggunakan huruf yang sama
iri khas pada "#$ orang adalah informasi yang mengandung kode "#$ ;angunan
dasar dari "#$ adalah nukleotida* yang komposisinya terdiri dari < gula
desoksiribosa* kelompok fosfat dan nitrogen dasar ($denin* ytosin* uanin danhymin& $) =omposisi dasar tersebut berkombinasi pada jalur yang sangat
spesifik :asangan $denin ($) hanya berkombinasi dengan hymim () yaitu $4
Sedangkan uanin () hanya berpasangan dengan ytosin () yaitu 4 8nformasi
dalam "#$ dapat dideterminasi oleh seuen pasangan dasar sepanjang kerangka gula
fosfat tersebut :erbedaan seuen "#$ akan membedakan diantara makhluk hidup
atau karakter mereka* karena mereka menyediakan perbedaan bangunan asam amino
yang membentuk protein
7/16/2019 Dna Fingerprint
http://slidepdf.com/reader/full/dna-fingerprint-568bd168bc425 3/9
akhluk hidup yang tampak berbeda atau
berbeda karakternya juga akan berbeda pula seuen
"#$ nya akin ber%ariasi suatu organisme maka makin ber%ariasi pula seuen
"#$nya "#$ ingerprint adalah -ara yang paling -epat dan tepat untuk
membedakan seuen "#$ dari organisme yang berbeda
Prosedur pemeriksaan DNA Fingerprint
>ji "#$ ingerprint adalah menunjukkan pekerjaan laboratorium yang
mengikuti beberapa prosedur yang dilakukan melelui 6 tahapan
ahap 1< 8solasi "#$
"#$ harus diperoleh dari sel atau jaringan tubuh 7anya dalam jumlah sedikit
jaringan seperti darah* rambut atau kulit yang bila perlu dapat dilakukan penggandaan
dengan /:olimerase hain ?ea-tion (:?) etapi biasanya satu helai rambut sudah
-ukup untuk uji "#$ fingerprint ini
7/16/2019 Dna Fingerprint
http://slidepdf.com/reader/full/dna-fingerprint-568bd168bc425 4/9
ahap 2< emotong* mengukur dan mensortir
@n'im yang khusus disebut en'im restriksi digunakan untuk memotong
bagian4bagian tertentu isalnya en'im @-o ?i* yang ditemukan dalam bakteri akan
memotong "#$ yang mempunysi seuen $$ :otongan "#$ disortir menurut
ukuran dengan teknik penyaringan disebut /elektrophoresis :otongan "#$
dile,atkan gel yang dibuat dari agarose (diproduksi dari rumput laut) eknik ini
adalah setara dengan bioteknologi untuk s-reening memisahkan pita4pita menurut
berat molekulnya
ahap 3< ransfer "#$ ke nylon
"istribusi potongan "#$ ditransfer pada sehelai nylon dengan menempatkan
nylon diatas gel dan direndam selama 1 malam
ahap dan 5< :robing
"engan menambahkan radioakti% atau pe,arna probe pada sehelai nylon
menghasilkan "#$ fingerprint* Setiap probe seperti batang pendek (pita) hanya 1
atau 2 tempat yang khas pada helaian nylon tersebut
ahap 6< "#$ ingerprint
ahapan akhir "#$ fingerprint dibuat dengan menggunakan beberapa probe
(5410 atau lebih) ;iasanya menyerupai pita4pita "#$
Polymerase Chain Reaction (PCR)
7/16/2019 Dna Fingerprint
http://slidepdf.com/reader/full/dna-fingerprint-568bd168bc425 5/9
:? dikembangkan dan hak patennya masih dimiliki oleh /?o-he ole-uler
System 8n- A 7offman4 .a ?o-he .td Seperti halnya proses fotokopi* daerah
"#$ dapat dikopi dan dilipat gandakan :olymerases adalah en'im yang ada se-ara
normal dalam tubuh makhluk hidup :eran en'im tersebut adalah mengkopi materi
genetik* meneliti dan mengkoreksi kopian dari "#$ Setelah en'im melekat pada
"#$* "#$ dobel heliB tersebut terbentuk dua singel strand "#$ Salah satu molekul
"#$ polimerase mengikat salah satu strand "#$* kemudian ikatan tersebut bergerak
sepanjang strand dan kemudian mensintesis strand nukleotida dan setelah strand
dikopi* dobel heliB menutup kembali "iperlukan "#$ original untuk dikopi* dua
molekul primer yang berbeda untuk mengurung "#$ yang utuh #ukleotida
diperlukan untuk kerangkanya* larutan buffer dan ta "#$ poymerases "ua primer
diperlukan untuk mengkomplement* satu strand "#$ pada a,al daerah target dan
primer kedua untuk mengkomplement strand lainnya pada akhir daerah target
:ada kondisi tertentu* daerah "#$ akan berlipat ganda menjadi jumlah yang
besar dalam ,aktu singkat :roses pen-ampuran :? mengikuti 3 tahapan yaitu<
denaturasi* annealing primer dan replikasi "#$* detailnya adalah sebagai berikut<
a Satu potong "#$ original didenaturasi pada suhu 9496o* dobel heliB strand
dipisahkan menjadi single strand
b :rimer mengikat masing4masing strand "#$ pada suhu sekitar 50465o
- Suhu dinaikkan sampai C2o untuk replikasi "#$
7/16/2019 Dna Fingerprint
http://slidepdf.com/reader/full/dna-fingerprint-568bd168bc425 6/9
7/16/2019 Dna Fingerprint
http://slidepdf.com/reader/full/dna-fingerprint-568bd168bc425 7/9
$pabila sampel "#$ telah -ukup dilipatgandakan* maka dilanjutkan dengan proses
elektroporesis (lihat tahap 2 proses analisis "#$ ingerprint)
Penggunaan aplikasi DNA Fingerprint
"#$ ingerprint banyak digunakan dalam berbagai bidang ilmu baik untuk
kesehatan manusia* penelitian biologi* dunia medis dan untuk pembuktian peristi,a
kriminal& forensik
i) >ntuk mendiagnosis kelainan keturunanSuatu program penelitian kelainan genetik yang diturunkan dapat dilakukan pada
janin yang belum dilahirkan maupun bayi yang baru dilahirkan* telah dikembangan
pada berbagai rumah sakit didunia =elainan tersebut meliputi kejadian -ystik
fibrosis* haemophilia* 7untingtons disease* famili al'hemers* si-kle -ell anemia*
thalasemia dan lain4lainnya
:endeteksian kelainan tersebut lebih a,al akan memudahkan dokter atau ahli
medis untuk melakukan pengobatan padak anak yang menderita kelainan tersebut
Suatu program pengobatan kelainan genetik menggunakan "#$ fingerprint sebagai
informasi untuk orang tuanya mengenai resiko dari kelainan tersebut pada anaknya
:ada program lain informasi pada orang tuanya mengenai "#$ fingerprint pada bayi
yang masih dalam kandungan mengalami kelainan genetik dan tindakan apa yang
akan dilakukan
ii) :engembangan penelitian mengenai kelainan genetik
:rogram penelitian difokuskan pada gangguan kelainan yang diturunkan pada
kromosom* hal ini perlu diinformasikan apa yang terdapat pada "#$ fingerprint
7/16/2019 Dna Fingerprint
http://slidepdf.com/reader/full/dna-fingerprint-568bd168bc425 8/9
"engan mempelajari "#$ fingerprint pada orang yang menderita kelainan tertentu
atau membandingkan dengan kelompok orang noraml atau penderita kelainan akan
dapat diidentifikasi bentuk "#$ yang berhubungan dengan kelainan tersebut
iii) ;ukti biologik
;arang bukti "#$ ingerprint telah sering digunakan pada laboratorium kriminal
kepolisian yaitu darah* rambut* semen dan sebagainya Seperti peristi,a teror bom
;ali banyak bukti bahan biologik telah diuji "#$ fingerprintnya untuk menentukan
korban dan identifikassi korban "#$ fingerprint juga dapat untuk identifikasi korban
pembunuhan maupun pelaku pembunuhan ataupun perkosaan
!aria"le Num"er #andem Repeat (!N#R)
:ada kromosom manusia* seuen pendek dari "#$ selalu diulang beberapa
kali :ada kromosom tertentu jumlah pengulangnannya tersebut ber%ariasi dari stu
sampai 30 kali ulangan Selama daerah ulangan tersebut terikat pada en'im tertentu
yang terbatas* akan memungkinkan dapat dilakukan pemotongan seuen dari
kromosom tersebut yang mengandung %ariasi jumlah /tandem repeat atau D#?
yang dapat di /runing total "#$ pada gel dan diidentifikasi D#? seuennya
dengan -ara hybridisasi dengan probe yang spesifik untuk seuen "#$ dari
ulangannya
=ata /tandem artinya pengulangan seuen yang langsung dari setiap segmen
ontoh dari 3B ulangan tandem pendek pada 9 pasangan nukleotida sebagai berikut<
$#AAGGGCCA#AAGGGCCA#AAGGGCCA%
:ada gambar diba,ah menunjukkan kromosom dari sepasang orang tua (atas)
dan indi%idu garis keturunannya (ba,ah) +rang tua pertama (mis<bapak) mempunyai
satu kromosom dengan kali seuen ulangan dan satu kromosom dengan 6 kali
seuen ulangan +rang tua lainnya (mis<ibu) mempunyai satu kromosom dengan 3
kali seuen ulangan dan satu kromosom dengan 5 kali seuen ulangan aka garis
keturunannya pada gambar ba,ah adalah orang anakny yang mempunyai %ariasi
ulangan seuen yang mirip dengan kedua orang tuanya "#$ dari setiap anak setelah
dianalisis pada /D#? repeat number pada gel terlihat setiap indi%idu
memperlihatkan genotype yang berbeda tetapi mempunyai padanan mirip dengan
kedua orang tuanya :erlu diperhatikan bah,a setiap orang dari jumlah 6 orang
tersebut (2 orang tua* anak) masing4masing berbeda berdasarkan D#? pada satu
lo-us genetik
7/16/2019 Dna Fingerprint
http://slidepdf.com/reader/full/dna-fingerprint-568bd168bc425 9/9
Singel lo-us ulti lo-us