Dosage Radioimmunologique De La Testostérone Dans Le Plasma, Les Gonades Et Les Surrénales De Foetus En Fin De Gestation Et De Nolveau-Nés, Chez Le Lapin

Archives Internationales de Physiologie et de Biochimie, 1975, 83, 667-682 667

R e y le 15 juin 1975.

DOSAGE RADIOIMMUNOLOGIQUE DE LA TESTOSTERONE DANS LE PLASMA, LES GONADES ET LES SURRENALES

DE FOETUS EN FIN DE GESTATION ET DE NOUVEAU-NES, CHEZ LE LAPIN

PAR

G. VEYSSIERE, M. BERGER, Ch. JEAN-FAUCHER, M. DE TURCKHEIM

(Physiologie Comparie et Endocrinologie, Universiti de Ciermont, AubiPre) et C1. JEAN

(1 figure)

INTRODUCTION

I1 est bien Ctabli que les hormones sexuelles influencent le dkveloppement et la maturation du fetus. Les travaux classiques de JOST (1947 & 1970), chez le lapin, ont montrC que les skcrktions du testicule fetal contrdlent I’organogenbse de l’appareil gknital m2le en stabilisant le dCveloppement du canal de Wolff et en induisant la rkgression du canal de Muller; l’ovaire, par contre, ne jouerait aucun rdle dans la diffkrenciation sexuelle du fetus femelle. On sait, par ailleurs, que la maturation et la sexualisation de certaines parties du systbme nerveux central sont contrdlCes, pendant la pCriode pCrinatale, par des hormones stCro’ides (GORSKI, 1971). L’Ctude de la nature des stkroi’des impliquks dans ces processus a etC abordke rCcemment et la testostkrone a pu Ctre mesurte dans la gonade fetale chez le mouton (ATTAL, 1969), le rat (WARREN et al., 1973; BLOCH et al., 1974), l’homme (HUHTANIEMI et al., 1970; REYES et al., 1973) et le singe (RESKO, 1970). Les travaux relatifs au dosage de la testostkrone circulante chez le fetus, sont Cgalement peu nombreux : le singe (RESKO et al., 1973), l’homme (MIZUNO et al., 1968; ABRAMOVICH & ROWE, 1973; REYES et al., 1974), les bovins (CHALLIS et al., 1974)’ les ovins (STROTT et al., 1974) et les porcins (MEUSY-DESSOLLE, 1974). Chez les espbces dans lesquelles le rdle du testicule embryonnaire dans la differenciation sexuelle a 6te le mieux CtudiC : lapin (JOST, 1947), souris (RAYNAUD & FRILLEY, 1947)’ rat (WELLS & FRALICK, 1951), la mesure des androgknes

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circulants n’a pu Ctre rCalisCe, probablement en raison de la taille des embryons. Chez le lapin, par exemple, si I’aptitude du testicule fetal A synthktiser des androgknes, et notamment de la testostCrone a CtC bien Ctablie par LIPSETT & TULLNER (1965), GOLDMAN et al. (1972) et WILSON & SIITERI (1973), il n’existe pas de donnCes concernant leur dosage dans les gonades ou le plasma.

La prCsente Ctude a pour objet de mesurer, chez le fetus de lapin des deux sexes, en fin de gestation et chez les nouveau-nCs, les variations quantitatives de la testostkrone dans les gonades et le plasma.

MAT~RIEL ET M~~THODES

Aniniaux. - Les expkriences sont rCalisCes sur des lapins nCo- zklandais Clevis au laboratoire dans des conditions dCja dCcrites (BERGER et a/., 1974). Les femelles gestantes sont sacrifiCes exacte- ment 28, 29, 30 et 31 jours apres la mise au mhle (la parturition intervenant gCnCralement le 32e jour) et leur sang est prClevC par section des jugulaires et des carotides. Aprks laparotomie, les fetus sont rapidement extraits des cornes utCrines; leur sang artCrio-veineux recueilli sur anticlot, aprks dkcapitation, est centri- fugC et le plasma conservC a -25 OC ainsi que les gonades et les surrknales. Les animaux du l e r jour sont sacrifies de 4 24 heures apres leur naissance. Compte-tenu des limites de la mCthode et des variations individuelles importantes, les dosages sont effectues dans le plasma de 2 individus et les 2 gonades de chaque animal (mgles). Cette Ctude porte sur 108 fetus (62 mhles, 4.6 femelles) provenant de I8 mkres, et sur 35 nouveau-nCs (21 mAles, 14 femelles).

Mesure de la testosfdrone. - Elle est effectuCe par radioimmunologie.

1 . Pre‘paration des anticorps. - 11s sont obtenus par injection au lapin d’un complexe testosterone-3-0 (carboxymethyl) oxime- albumine bovine (8 ?t 10 molCcules de testostkrone par molCcule de proteine) prCparC selon la methode de MAHOUDEAU & BRICAIRE (1972). L’immunisation des lapines (Fauve de Bourgogne de 3 mois) est rCalisCe en une seule fois par voie intradermique multiple comme le prkconisent VAITUKAITIS et al. (1971). Le sang est prelevC entre le 43e et le 46e jour suivant l’immunisation, le taux d’anti-

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corps etant trks Clevk durant cette pCriode. Le plasma est dilue au 1/100e dans du tampon phosphate de sodium (0.05 M; pH 7.4) contenant 1 g/litre de gklatine et conge16 B -25 OC en parties ali- quotes de 0.4 ml. 0.3 ml de cet immunskrum, diluC au 1/45 OOOe, lient 7 500 dks./min de testosterone [jH] lorsqu’on le met en prksence de 15 000 dks./min.

2. Dosage. - 11 est effectuk d’aprks la mCthode de MAHOUDEAU & BRICAIRE (1972) avec les mCmes solvants et les mCmes rkactifs. La testosterone [1-23H] (43 Ci/mmole - New England Nuclear) est repurifike rCguli&rement par chromatographie sur papier (systkme benzhe-hexane ( I : 1)-formamide) puis par chromatographie sur colonne de cClite. Les stkroides non radioactifs (SteraloIds Inc. ou Merck) sont recristallisks 2 fois. La radioactivitk est comptke dans un spectrom6tre B scintillation liquide dont le rendement est de 45 % avec les liquides scintillants suivants : milieux non aqueux, solution de PPO-POPOP (4 g de PPO, 40 mg de POPOP, 1 litre de tolukne); milieux aqueux, solution de dioxane (700 ml), tolukne (300 ml), naphtalhe (20 g), POPOP (0.1 g), PPO (4 g). Les tubes et Ies colonnes utilisCs dans le dosage sont siIanisCs apres lavage par un mklange sulfochromique.

Extraction : le plasma (2 A 3 mi), les gonades ou les surrenales (homoghat diluk dans 2.5 ml de strum physiologique), sont mis en contact avec 2 000 db./min de testostCrone [3H] et extraits une seule fois par 6 ml d’un mklange acetate d’kthyle-isooctane (3/7). Aprks lavage B I’eau distillee et skchage par du sulfate anhydre de sodium, la phase organique est kvaporee et reprise par 2 ml de mklange heptane-benzkne (98 : 2).

Chromatographie sur colonne de cdite : cette ktape est nkcessaire pour Ccarter la dihydrotestostkrone qui est fixCe B des taux non nkgligeables par notre anticorps. Chaque colonne contient 0.5 g de cClite 535 (prkalablement activke B 800 OC) imbibke de 0.25 ml de formamide et saturee d’heptane. Aprks dkpbt de l’echantillon, la fraction contenant la DHT est CliminCe par 10 ml de melange heptane-benzkne (98 : 2) et la testostkrone est CluCe par 2.2 ml de benzkne.

Dosage radioimmunologique : les 2.2 ml de benzkne sont rtpartis en une fraction de 1 ml servant B I’kvaluation des pertes (extraction et chromatographie) et deux fractions de 0.5 ml transfkrkes dans des tubes contenant 15 000 dCs./min de testostkrone r3H J et Cvapories.

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Paralldement, des tubes contenant, en double, des quantitks connues de testosterone (de 0 a 1 ng) et 15 000 dCs./min de testosterone [3H] sont evaporks. 300 ,ul d'anticorps, diluC au 1/45000e, sont ajoutes a tous les tubes et laissks en contact une nuit a 4 OC. Apres incubation, les fractions libres et IiCes de la testosterone [3H] sont separkes par adjonction de charbon-dextran et, apres centrifuga- tion, le surnageant est decant6 dans des fioles de comptage.

3 . Validite' de la me'thode : Exactitude : Pour des quantites connues de testosterone pure,

ajoutees a de l'eau, le degrC d'exactitude varie de 5.3 pour 2 000 pg a 18.7 "/o pour 50 pg (valeur sensiblement surestirnee); ajoutee du plasma sanguin, la testosterone est retrouvke avec une variation moyenne de 6.2 %. 11 existe une corrilation linkaire, hautement significative (r = 0.998; P < 0.001) entre la quantitC d'hormone mesurCe et le volume de plasma extrait.

. DCterminCe en dosant Deviation standard x 100

valeur moyenne ___ _ _ _ _ _ ~ ~ - ~-

8 fois dans la m&me serie et dans 6 series conskcutives le mCme Cchantillon plasmatique, elle est de 5.6 % dans le ler cas, de 9.5 % dans le 2e cas. Dans un m&me dosage, la precision est fonction de la quantitk d'hormone prksente (de 3.5 "/o a 10.7 "/, pour 100 et 800 pl d'un meme echantillon).

Sensibilite'. - La courbe standard (fig. 1) est trks reproductible et la lecture s'effectue entre 30 et 500 pg. Dans les conditions actuelles, la valeur de 50 pg represente la limite infkrieure de la sensibilite de la mkthode.

Spe'cificite'. - Elle depend essentiellement de la specificite propre de l'anticorps a 1'Cgard des stkroi'des autres que la testosterone. Le degrC de fixation, par I'anticorps, des 18 stboides contr8lb (tableau I) est CvaluC par le pourcentage de reaction croisCe avec la testostkrone d'aprks la mkthode d'ABRAHAM (1 969). L'anticorps lie essentiellement la testosterone mais la 5a-dihydrotestosterone presente une interference importante, ce qui necessite son Climina- tion par chromatographie (MAHOUDEAU & BRICAIRE, 1972). Les androstanediols ne sont pas separCs par la colonne de cClite mais leur interference est rkduite (7.8 %). Un argument supplementaire, en faveur de la specificit6 de la mCthode, est fourni par la compa- raison avec la chromatographie gazeuse (BERGER et al., 1975).

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FIG. I . Reproductibilitk de la courbe standard de testost&one (moyenne et dkviation standard pour 10 dosages successifs).

B = Coups/rnin de testosterone li& dans chaque tube. 9, = Coupsimin de testostkrone like dans les tubes ne contenant que le traceur.

Diffkrents Cchantillons plasmatiques sont dosCs simultankment par les deux mkthodes (tableau 11). Les rksultats obtenus varient en moyenne de 12 % et la corrtlation ( r = 0.87) est hautement significative.

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TABLEAU I . Spdcificite de I‘anticorps (dilue au 1/45 OWe).

Steroldes (denomination courante)

Testosterone . . . . . . . . . . . . . . . . . 5a-dihydrotestosterone . . . . . . . .

5a-androstane-3b, I7B-diol . . . . . 5-androstene-3D. 17b-diol . . . . . Androstenedione . . . . . . . . . . . . . Oestradiol . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Androsterone . . . . . . . . . . . . . . . .

5a-androstane-3a, 17B-diol . . . . .

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Epitestoserone Epiandrosterone Etiocholanolone 5a-andros tanedione Deh ydroepiandrosterone I 7n-hydroxyprogesterone

Oestrone Cortisol Cortisone Pregnenolone Progesterone

CR 50 % (1

100 69

7.8 7.8 L 1.8 0.5 0.4

< 0.4

‘1 reactions croisees (‘4).

TABLEAU 11. Mesure par radioitnmunologie (RIA) et chromatographie en phase gazeii.w (GLC) de la testostkrone contenue duns diffFrents plasmas.

_. ~ - - -

Valeur mesurCe par RIA

(Pg)

616 687 960 926 710 678 630 400 690 590 743

1070

~-

Valeur mesuree par GLC

(Pg)

706 700

I 187 I162

662 687 625 550 540 656 987

I 094

Coefficient de correlation = 0.87

Variation ( %)

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19 20 7 1 I

27 28 10 25 2

Moyenne : 13

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R~SULTATS

I. - Fetus et nouveau-nb mriles.

A. Dkveloppement pondkral. - I1 est rapport6 dans les tableaux 111 et IV. La croissance corporelle est relativement lente en fin de gestation et les augmentations du poids corporel, entre chaque stade, comprises entre 8 % et 27.1 %, ne sont significatives que du 30e au 3 1 ejour. La faible rkduction observke a la naissance (-2.9 %) n’est pas significative. La croissance testiculaire est parallile a celle du corps comme le montrent les variations faibles et non significatives (de : -9.4 % a f2.6 %) du poids testicuIaire reiatif.

B. TestostProne plusmutique. - Elle a kte mesuree dans tous les Cchantillons Ctudies (plasma de 2 individus) oii elle prisente des fluctuations de grande amplitude (de 66 a 1041 pg/ml; tableau I). La testostkronkmie moyenne oscille de 133 & 20 a 387 f 73 pg/ml, valeurs sensiblement infkrieures A celles mesurkes chez des lapins impubires de 30 jours (730 pg/ml) et des lapins adultes de 6 mois (1 720 pg/ml; BERGER et al., 1974). L’ktude comparative (tableau III), montre que les seules variations significatives de la testostkronkmie sont observkes entre 28 et 29 jours (f63.1 %), 28 et 31 jours (+171.4 %) et du 28e au ler jour (+191.0 %). Le taux de la testostkrone circulante, chez le nouveau-ne (387 & 73 pg/ ml) est comparable a celui des fetus de 31 jours (361 f 119 pg/ml).

C. TestostProne testiculaire. - Elle a Cte dkterminke, a tous les stades, dam les deux testicules de chaque individu. Quel que soit le mode d’expression utilisk, la testosterone, dans le testicule, prksente d’importantes variations individuelles (tableau V). Le contenu des deux testicules en testosterone varie de 1 539 a 2 229 pg. Aucune des variations observkes entre les diffkrents stades n’est significative. La concentration de la testostkrone testiculaire est comprise entre 1 382 f 282 (31e jour) et 2 317 & 333 pg/lO mg (28e jour). La seule variation significative intervient entre 28 et 31 jours ( 4 9 . 3 %). Les concentrations de la testosterone testiculaire, observCes chez le fetus ou le nouveau-nC sont infkrieures a celles du lapin de 30 jours (6 570 pg/lO mg) mais supkrieures a celles du lapin adulte (950 pg/lO mg; rksultats non publits).

Chez le nouveau-nC, les teneurs absolues et relatives du testicule en testosterone sont respectivement accrues de 27.4 et 40.4 % par

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rapport au 31e jour de la gestation; toutefois, les diffkrences ne sont pas significatives.

TABLEAU V. Evolution de la testostirone testiculaire et plasrnatique chez le fetus et fe nouveau-ne male de lupin (Valeurs extrhes entre parentheses).

Testosterone Stades 1 Nombre 1 plasmatique (Jours) d’animaux (pg/mU

133 5 20 ” 1 l 9 1 (66-233)

- 14 217 34 I (93-351)

170 & 32 I (112-352) 30 I 361 5 119

31 1 l4 I (75-1 041) ----j.-l 21 p- ( 1 11-687)

Testosterone testiculaire

Pg/ 10 mg pg/2 testicules testicule

I

2229* 353 2317 * 333 (740-5 100) (947-5 402)

1 697 i 335 1 832 i 327 (451-5 150) (677-5 508)

I 539 & 373 I 595 = 357 (3 10-4 500) (283-4 174)

I 6 2 8 i 326 1382 i 218 (250-4 700) 1 (257-3 490)

2 0 7 4 i 331 1940+ 304 (372-4 660) (494-4 194)

1 1 . - Fmus et nouveau-ne‘s femelles.

A. De‘veloppement ponde‘ral. - Le poids corporel subit des variations significatives du 29e au 30e jour (+29.3 %) et du 31e au l er jour de la vie post-natale (+23.7 %). Le poids ovarien relatif

100 g de poids corporel varie significativement du 30e au 3Ie jour (-14.2 %) et du 31e au le r jour (+25.2 %).

B . TestostProne plasmatique. - Comme chez les mdes, elle a pu ttre mesurke dans tous les pools sanguins analysks contenant le plasma de 2 individus. Pour les 5 stades CtudiCs la testostCronCmie varie peu, ses valeurs moyennes Ctant comprises entre 21 et 42 pg/ml. Ces taux sont significativement infkrieurs a ceux que l’on mesure chez les mdles aux mtmes stades.

Pour tenter de prkciser l’origine de la testostkrone plasmatique des fe tus femelles, nous avons effectuk un certain nombre de mesures dans le sang maternel et dans l’ovaire et la surrenale des fetus. La testostkronemie, dkterminke chez toutes les m&res dont

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les embryons ont CtC utilisCs dans cette Ctude reste pratiquement constante (de 64 f 5 75 f 13 pg/ml), 1Cgkement supkrieure a celle des fetus femelles correspondants (tableau VI) et tres infC- rieure a celle des fetus miiles (tableau IV). A chaque stade, la testosterone a CtC dosCe dam un pool comprenant les 10 ovaires de 5 fetus femelles (tableau VI). Au cours de la vie embryonnaire, les valeurs observCes (de 37 a 97 pg) sont tres faibles comparkes a la teneur des deux testicules en testostkrone (de 1 539 a 2 229 pg). La concentration de la testostkrone ovarienne est comprise entre 13 et 34 pg/lO mg, valeurs infimes par rapport a celles du testicule (de 1 382 a 2 317 pg/lO mg). Chez la femelle nouveau-nCe, la testosterone ovarienne semble ICgerement accrue tant en valeur absolue que relative.

TABLEAU VI. Evolution de la testostdrone plasmatique et ovarienne chez le fetus et le nouveau-ne femelle de lapin (Valeurs extr&mes entre parenthtses).

Testosterone plasmatique Testosttrone ovarienne fcetale

Stades Nombre (jours) d’animaux

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Maternelle 1 Fetale ! I i I I I

29 12 7 5 i 1 3 3 7 * 9 37 1 3 I I (35-122) I (11-64) I ~

64 & 5 23 1 (56-73) 1 %23:) 1 12 30 I -

6 5 i 11 41 & 1 1 34 1 l2 1 (34-87) I (18-90) 1 93 31

le’ I l 4 1 -

La testosterone a Cgalement CtC mesurke dans les surrCnales de fetus femelles de 29 et 31 jours et chez les fetus m5les de 29 jours. Chez les femelles, les teneurs absolues de 4 surrtnales oscillent entre 42 et I40 pg, soit de 34 A 147 pg/lO mg de tissu surrCnalien. Des valeurs comparables (de 37 A 77 pg pour 4 surrCnales, soit de 43 a 93 pg/lO mg) sont retrouvies chez les m5les de 29 jours.

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DISCUSSION

I. - Fcetus et nouveau-nds rndles. Nos rksultats montrent qu’en fin de gestation, il existe, chez le

fe tus mgle de lapin, de la testostkrone circulante, i des concentrations apprkciables. La testostkronkmie trks basse observke chez la mkre et les fe tus femelles aux mCmes stades, la concentration Clevke de cette hormone dans la gonade mgle, et les faibles teneurs de la surrenale sont en faveur d’une activitk du testicule fetal au cours de cette periode. A I’exception du singe (RESKO et al., 1973), dans les autres espkces ktudikes, telles que les bovins (KIM et al., 1972; CHALLIS et al., 1974), les porcins (MEUSY-DESSOLLE, 1974), les ovins (STROTT et al., 1974) et l’homme (Mlzrr~o et a!., 1968; ABRAMOVICH & ROWE, 1973; REYES et al., 1974), il n’existe pas, en fin de gestation, de diffkrences sexuelles concernant la testoste- ronemie fcetale et donc probablement plus d’activitk testiculaire. Ces diffkrences sont peut-&re en rapport avec la durke de la gestation, beaucoup plus courte chez le lapin que chez les espkces prk- cedemment dkcrites.

La presence de quantitis importantes de testostkrone dans le testicule, en fin de gestation, chez le lapin, est en accord avec les observations faites chez le rat (WARREN et al., 1973; BLOCH et al., 1974). Notre travail dkmontre que les facteurs responsables de la biosynthkse des stkroides, mis en evidence dans le testicule du fetus de lapin par LIPSETT & TULLNER (1965), GOLDMAN et al. (1972) et WILSON & SIITERI (1973), sont effectivement fonctionnels et produisent, in vivo, de la testosterone qui est donc bien, comme chez I’adulte, un des androgknes synthetisk et libtre par le testicule embryonnaire. Des ktudes en cours permettront d’etendre ces resultats aux stades anterieurs du developpement, particulikrement A ceux concomittants de la diffkenciation sexuelle.

Chez le lapin nouveau-ne, ni la testosterone plasmatique, ni la testosterone testiculaire ne sont diminuees, contrairement B ce qui a CtC rapport6 chez le rat (WARREN et al., 1973) et le cobaye (BERGER et al., 1971). Toutefois, des Ctudes complCmentaires sont necessaires pour dkterminer si une chute de la testostkrone, dans le testicule ou le plasma, n’intervient pas, comme chez le singe (RESKO, 1970), au cours des jours qui suivent la naissance.

La presence de testosterone dans le testicule et le plasma du fe tus de lapin pose un certain nombre de problkmes concernant

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notamment sa regulation et son rdle. Pour ce qui est de la regulation de sa sCcrCtion, les travaux de JOST (1951) semblent montrer que, chez le lapin, la fonction testiculaire est sous la dkpendance de l’hypophyse fetale, probablement par l’intermkdiaire des gonado- stimulines qui, ricemment, ont Cte mises en evidence dans le plasma des fetus chez l’homme (REYES et al., 1974), les bovins (CHALLIS et al., 1974), les ovins (FOSTER et al., 1972; ALEXANDER et al., 1973) et Ie cobaye (DONOVAN et a/., 1975). Le fait que chez le lapin nouveau-nC la testostkrone testiculaire et plasmatique ne soit pas modifiie significativement est un argument en faveur d’une rCgula- tion par l’hypophyse du fetus et du nouveau-nC plut6t que par l’intermkdiaire des gonadotrophines maternelles ou placentaires (les nouveau-nb ont CtC sacrifiks de 4 21 24 heures aprbs la naissance).

Le r61e de la testosterone chez le fetus mile en fin de gestation est inconnu. La differenciation sexuelle Ctant achevCe aux stades CtudiCs, la testostkrone prCsente pourrait intervenir dans les processus de maturation et de sexualisation de l’hypothalamus et dans la croissance des Cbauches mhles rkcemment mises en place.

11. - Fetus et nouveau-nks femelles.

Chez les femelles, Ies taux de testosterone mesurks dans le plasma, l’ovaire et la surrCnale sont faibles et dans certains cas probablement 1Cgkrement surestimks et voisins de la sensibilitk de la mCthode (tableau I). Compte-tenu des resultats obtenus, la testosterone plasmatique peut Ctre d’origine fetale (ovarienne et/ou surrena- lienne), maternelle ou placentaire. L’existence, chez le nouveau-nC, d’une testostCronCmie comparable a celle du fetus plaide en faveur d’une origine fetale de cette hormone. Les quantitCs de testostkrone mesurCe dans les ovaires fetaux sont faibles (37 a 93 pg dans 10 ovaires). Toutefois, la valeur plus forte (198 pg), observke chez le nouveau-nC va dans le sens d’une production ovarienne de testostkrone. Dans la littkrature, 1’CventualitC d’une sCcrCtion d’androgknes et d’estrogknes par les ovaires fetaux reste discutCe. Pour GOLDMAN et al. (1972), l’existence, dans l’ovaire du fetus de lapin en fin de gestation, d’un maximum dans les activites de la d5-38- hydroxy-stCroide-dkshydroginase, serait l’indice d’une synthbe hormonale, observation en accord avec le fait que ces mCmes ovaires peuvent utiliser la pregnenolone pour produire de la testostkrone (LIPSETT & TULLNER, 1965). Par contre, dans d’autres

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espkces comme I’homme (BLOCH, 1964) et le rat (WARREN et a/., 1973)’ les ovaires fetaux seraient inaptes a synthktiser de la testostkrone a partir de differents prkcurseurs. Les ktudes rkcentes, concernant la mise en evidence de testostkrone dans le plasma des fetus femelles, chez les bovins (CHALLIS et al., 1974), les porcins (MEUSY-DESSOLLE, 1974), le singe (RESKO et al., 1973) et I’homme (REYES et al., 1974), ne permettent pas de savoir si I’ovaire embryonnaire contribue ou non a sa production.

La mise en Cvidence d’une synthkse de testosterone par la surrt- nale des fe tus de lapin des deux sexes est en accord avec la prC- sence d’une activitC maximale de la As-3B-hydroxy-stkroide-dCs- hydrogknase dans la surrknale des fe tus de la mCme espkce a 29 et 30 jours (GOLDMAN et al., 1972). Des recherches complk- inentaires sont necessaires pour dCterminer si la testosterone surrC- nalienne contribue a I’Ctablissement de la testostkronkmie. Toute- fois, les diffkrences significatives observkes entre la testostkronkmie des fetus des deux sexes montrent que, chez le miile, la testostirone est essentiellement d’origine testiculaire.

La testosterone est dosCe par radioimmunologie dans le plasma, les gonades et les surrknales de fetus des deux sexes 2gks de 28, 29, 30 et 31 jours ainsi que chez le nouveau-nC.

II existe des diffkrences sexuelles trks marqukes dans les teneurs plasmatiques et les concentrations gonadiques de cet androgkne alors que les teneurs surrhaliennes sont faibles dans les deux sexes (de 34 a 147 pg/lO mg tissu). La testostkronkmie du mBle s’accroit d u 28e jour (133 & 20 pg/ml) au 3Ie jour (361 ,J, 119 pg/ml), elle est alors identique a celle du nouveau-nC (387 rt 73 pg/ml); a tous les stades elle est trks supkrieure celle du fetus (de 21 -j= 6 41 & 11 pg/ml) ou du nouveau-nC femelle (42 i 6 pg/ml). De mCme, les concentrations testiculaires du fetus, comprises entre I 382 -j= 218 et 2 317 333 pg/lO mg tissu, sont voisines de celles du nouveau-ne (1 940 i 304 pg/lO mg) et beaucoup plus ClevCes que les concentrations ovariennes fetale (de 13 a 34 pg/lO mg) ou nConatale (44 pg/lO mg).

Ces rksultats sont en faveur d’une activitt endocrine du testicule fetal durant cette pkriode.

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TESTOST~RONE CHEZ LE FCETUS DE LAPIN 68 I

SUMMARY

A radioimmunoassay was used for measuring testosterone in the plasma, gonads and adrenals of 28, 29, 30 and 31-day-old rabbit fetuses of both sexes and newborns. A marked sex difference was shown in the concentrations of testosterone in plasma and in gonads whereas in adrenals the levels of testosterone were low in both sexes (34 to 147 pg/lO mg). In male fetuses, plasma testosterone levels increased from the 28th (133 f 20 pg/ml) to the 31st day (361 f 119 pg/ml) of intrauterine life, reaching then the values observed in the newborns (387 f 73 pg/ml). Plasma from males, on the other hand contained, at all stages studied, signifi- cantly more testosterone than plasma from female fetuses (21 & 6 to 41 & 11 pg/ml) and female newborns (43 f 6 pg/ml). In the same way, fetal testicular testosterone concentrations varying from 1382 & 218 to 2 317 i 333 pg/lO mg were similar to those measured in the newborns (1 940 f 304 pg/lO mg) and signifi- cantly higher than fetal (13 to 34 pg/lO mg) or neonatal (44 pg/ 10 mg) ovarian concentrations.

These results showed at evidence the endocrine activity of the fetal testis during this period.

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Dosage Radioimmunologique De La Testostérone Dans Le Plasma, Les Gonades Et Les Surrénales De Foetus En Fin De Gestation Et De Nolveau-Nés, Chez Le Lapin