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UNIVERSIDAD NACIONAL FEDERICO VILLARREAL
FACULTAD DE ODONTOLOGÍA
PROTOCOLO DE TESIS PARA OBTENER EL TITULO DE CIRUJA NO
DENTISTA
EVALUACIÓN HISTOLOGICA DEL PROCESO DE CICATRIZACIO N DE LA
MUCOSA BUCAL UTILIZANDO ACEITE DE JOJOBA EN COMPAR ACIÓN
CON EL ALOE VERA EN RATAS ALBINAS.
Presentado por:
LUIS ALBERTO SANCHEZ SANCHEZ
Código : 2002237552
LIMA – PERÚ
2009
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I.-TITULO
EVALUACIÓN HISTOLÓGICA DE LA CICATRIZACION DE LA MUCOSA BUCAL UTILIZANDO ACEITE DE JOJOBA EN COMPARACIÓN C ON EL ALOE VERA EN RATAS ALBINAS.
II.- INVESTIGADOR : LUIS ALBERTO SANCHEZ SANCHEZ
III.- LUGAR DE LA INVESTIGACIÓN :
ANÁLISIS DE LAS LAMINAS:LABORATORIO HISTOLO GIA FO-UNFV.
PREPARACION DE LAMINAS : LABORATORIO OFELIA PAGAN
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IV.- DESCRIPCIÓN DEL PROYECTO.-
La cicatrizacion de heridas de la mucosa bucal y la evolución lenta de la misma
son un gran problema para el cirujano dentista .muchos son los agentes que
determinan que este proceso resulte lento como los agentes locales y los
generales. La inflamación lleva también a un retraso en la cicatrización y cierre
de la misma. Muchas investigaciones se han realizado en búsqueda de
mejores resultados ya sea a través de mejores sustancias o técnicas en el
manejo de las heridas quirúrgicas o infectadas a nivel de la mucosa palatina .
Muchas han sido las técnicas que se han intentado y que se siguen intentando
, tales como rayos laser, la sangre de grado, uña de gato, ,corticoides , , etc.
Es curioso como la Naturaleza siempre otorga la medicina en el propio lugar
dependiendo del clima y otros factores. Pero esto más que un aceite se trata
de una especie de cera que a temperatura ambiente es líquida,
presentándose con aspecto grasosa a diferencia de otros aceites de presión en
frío.
El aceite de jojoba en su compleja composición hay un 96% de ceramida, lo
que hace que resulte extremadamente estable al calor y a la oxidación
conservándose perfectamente con el paso del tiempo y manteniendo íntegras
sus propiedades. Las ceramidas son sustancias las cuales recubren las células
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de la epidermis regulando su hidratación. Las ceramidas del aceite de jojoba
son muy similares a las de la piel y actúan allí donde se necesita, ejerciendo
una profunda hidratación y reestructurando el equilibrio graso de la piel y
mucosas. En su composición también encontramos vitamina E, la cual elimina
las radicales libres de la piel que son responsables del envejecimiento
prematuro. Otro de sus componentes es el ácido linoléico el cual actúa
regenerando las células de la piel y mucosas.
Es conocido en la actualidad que por los múltiples estudios realizados del Aloe
vera ,que posee un efecto anti – inflamatorio, analgésico, cicatrizante e
inmunomodulador (dentro de los más importantes) Los trabajos de
investigación realizados, tanto in vitro como in vivo , nos dan la suficiente
justificación y motivación para aplicarlo en nuestra profesión odontológica
dirigido específicamente al campo de la cirugía donde luego de una
intervención buscamos con diversos terapéuticos efectos anti - inflamatorios ,
cicatrizantes y analgésicos óptimos
¿Cuál es la respuesta histológica de heridas de l a mucosa bucal al ser
tratadas con aceite de jojoba en comparación con e l aloe vera en ratas
albinas ?
ANTECEDENTES.-
Joan Sisa Sentis. menciona que el aceite de jojoba en su compleja
composición hay un 96% de ceramida, lo que hace que resulte
extremadamente estable al calor y a la oxidación conservándose perfectamente
con el paso del tiempo y manteniendo íntegras sus propiedades. Las ceramidas
son sustancias las cuales recubren las células de la epidermis regulando su
hidratación. Las ceramidas del aceite de jojoba son muy similares a las de la
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piel y actúan allí donde se necesita, ejerciendo una profunda hidratación y
reestructurando el equilibrio graso de la piel. En su composición también
encontramos vitamina E, la cual elimina las radicales libres de la piel que son
responsables del envejecimiento prematuro. Otro de sus componentes es el
ácido linoléico el cual actúa regenerando las células de la piel. El aceite de
jojoba tiene la capacidad de disolver el sebum, una especie de cera que se
deposita en los folículos pilosos y que es causante de la caspa y la seborrea
del cabello. En ese sentido, el aceite de jojoba penetra y disuelve los depósitos
siendo importante para la regulación de la secreción sebácea excesiva de la
piel y del cabello. (13)
Armando Yañez ha investigado el aceite de jojoba y demostró que ,los
estudios de absorción percutánea muestran que la jojoba penetra rápidamente
en la piel. Aparentemente la absorción se realiza a través de los poros y
folículos. Desde los poros y folículos pilosos parece ser que se esparce por la
capa córnea de la piel a través de un mecanismo pilosebáceo, permitiendo que
los aceites suavicen la piel desde el interior. Desde allí actúa con lípidos
intercelulares para reducir la pérdida de agua. El resultado de esta rápida
absorción es que los poros y folículos pilosos permanecen abiertos y pueden
funcionar libremente. La aplicación rutinaria de jojoba suaviza la piel, aumenta
su elasticidad y firmeza y facilita los procesos de regeneración celular de la piel
y mucosas.(1)
La jojoba es un excelente emoliente, completamente capaz de mezclarse con
el sebum. A diferencia de las sustancias altamente oclusivas, reduce
significativamente la pérdida de agua transepidérmica sin bloquear totalmente
el transporte de gases y vapor de agua, permitiendo de este modo el
funcionamiento óptimo de las glándulas sudoríparas.(1)
El aceite de jojoba es muy efectivo para controlar la exfoliación, escamación y
sequedad de la piel. Debido a su capacidad de mezclarse con el sebum, añade
una capa lipídica no grasa a la piel que retarda la escamación hasta el punto de
que se aproxima a la eficacia del aceite mineral. Tiene enormes propiedades
de lubricidad y extensibilidad y deja un tacto aterciopelado en la piel.
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La jojoba se utiliza especialmente en el caso de personas que sufren de
deshidratación y sequedad extrema en la piel, en personas mayores y aquellas
con afecciones de la piel que presentan escamación y desequilibrios de sebum.
Las cualidades anti-inflamatorias de la jojoba la hacen adecuada para tratar
alteraciones de la piel provocadas por inflamación.
Se desconoce cuál es el efecto de la jojoba en el crecimiento de patógenos de
la piel. Se analizó la capacidad de crecer en un preparado de aceite de jojoba
de cinco especies de bacterias y cuatro especies de hongos. Se analizó cada
organismo en al menos uno de cuatro métodos de cultivo. Ninguno de los
métodos empleados mostró evidencias de crecimiento de bacterias u hongos
en el aceite e jojoba; sin embargo no parece que la jojoba fuera directamente
tóxico para los organismos analizados. Parece que la muerte de las células se
debió a su incapacidad de usar el aceite de jojoba como fuente primaria de
energía y/o nutrición.
Estudios recientes han probado la actividad antioxidante de la jojoba. Esta
actividad está relacionada con su contenido de tocoferoles.(1)
León en 1998 realizo un estudio en el que utilizó 12 conejos
donde se procedió a realizar exodoncia de los Incisivos Centrales
Superiores, los I.C. Izquierdo fueron grupo problema y los I.C.
Derechos fueron el grupo control. A los alvéolos izq. (problema) se le
administró en forma tópica el gel de aloe Vera con una jeringa. Estos
grupos fueron evaluados histológicamente a los 2, 7, 15 y 30 días.
Concluyó que la aplicación tópica del gel de Aloe vera muestra
actividad anti-inflamatoria inmediatamente respecto al alveolo control
y presenta actividad fibroblástica mayor al ser aplicado tópicamente
en alvéolos problemas respecto a los alvéolos control (20)
Llana en 1999 en un estudio realizado en 12 conejos buscaron el
proceso de reparación ósea con aplicación de Aloe Vera y
Hemocolágeno, donde concluyeron que en cavidades con aloe Vera
presenta menor inflamación que el hemocolágeno, así como menor
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persistencia de inflamación con el transcurrir de los días que el
hemocolágeno (19)
El propósito de este estudio fue determinar los efectos del Aloe,
su potencial de cicatrización de heridas, la contracción en excisión
de heridas con tópicos antimicrobianos(19).
Heggers y colaboradores en 1996 para su estudio se usaron
ratas Sprague-Dawley divididas en 5 grupos de 10 cada uno; (1)
Aloe; (2) solución de NaCl (0,025%), (3) Acetato de mafenide (4)
Acetato de mafenide + aloe, y (5) control. La adición de aloe en
combinación y exclusivamente en heridas incrementó la energía a la
ruptura cuando se comparó a los control (p<0,05). Este efecto parece
ser debido a un aumento de la actividad del colágeno, el cual se
refuerza por un lectin, consecuentemente mejorando la matriz de
colágeno y reforzando la fuerza de ruptura (14)
En un estudio en ratones realizado por Zhang en 1996 se observó
que el acemannan (fracción principal de carbohidratos del gel de
Aloe Vera) podría estimular la activación de macrófagos ( 2)
Según Chithra en su trabajo se informo la influencia del Aloe Vera
en el colágeno y sus características en la cicatrización de heridas.
Se observó el aumento de tejidos de granulación de colágeno,
también de aldehídos y disminución de la solubilidad ácida. Se vió
reforzamiento del colágeno tipo III. Las heridas fueron tratadas
tópicas y administración oral en ratas encontrándose resultados
similares (3,4,5)
El trabajo anterior se realizó en Abril, los mismos autores en junio
observaron una influencia positiva del Aloe Vera en la síntesis de
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glucosaminoglycanos en la matriz de la cicatrización de heridas
dérmicas en ratas. En la fase temprana de la cicatrización de
heridas se forma matriz provisional seguida por tejido de granulación
y síntesis de colágeno y elastina.
La matriz provisional contiene glucosaminoglicanos y
proteoglucanos; se encontró un aumento de ácido hialurónico y
dermatán sulfato. (5)
Y en setiembre del mismo año demostraron el mismo trabajo,
donde se observó aumento en la excreción urinaria de hidroxiprolina.
Heggers y colaboradores en 1997 ;realizaron un estudio donde
observaron el efecto del Aloe Vera, nitroglicerina (NO) y
nitroglicerina inhibidor (L-NANE) en la cicatrización de heridas de
escisiones de ratas. Se observó que el Aloe Vera promovía mas
rápido la cicatrización que los otros, incluso los grupos que estaban
combinados con aloe. Parece que el aloe previene la isquemia
dérmica por inversión de los efectos del tromboxamo sintetasa
(TXA2) puede actuar sinergicamente con el óxido nítrico o podría ser
un radical de oxígeno desechado (14)
Se han realizado investigaciones donde aplican el aloe como
tratamiento para el dolor; en la mucosa oral aparecen infecciones
agudas como la gingivoestomatitis herpética aguda (GEHA) y la
estomatits aftosa recurrente (EAR) estas fueran tratadas con el Aloe
vera con vaselina y lanclina formando una pomada; se aplicó a 342
pacientes don GEHA y 250 con EAR, en el 100% se logró acortar el
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ciclo que pudiera extenderse en ambas infecciones hasta 14 días.
Se redujo en ambos casos entre 4 a 6 días en la mayoría de casos
(26)
Luego se reportó que la manosa 6-fosfato, azúcar presente en el
Aloe-gel actúa inhibiendo la inflamación en ratones a dosis
300mg/Kg. de peso (10)
Somboonwong en el 2000 ;quisieron demostrar los efectos
circulatorios y curativos del Aloe vera en heridas de segundo grado
producidas en ratas de laboratorio. Método: Un total de 48 ratas
Wistar fueron igualmente divididas en cuatro grupo como sigue:
Falso control, ratas con quemaduras sin tratar, ratas tratadas una vez
al día con una solución salina simple (NSS) y un grupo tratado una
vez al día con una solución liofilizada de gel Aloe vera. Los animales
en cada grupo fueron a su vez divididos en 2 sub grupos para el
estudio de la microcirculación cutánea y la curación de la herida en
los días séptimo y décimo cuarto después de producida la
quemadura. Dorsal skin chamber preparation an intravital
fluorecense microscopic thecnique fueron realizados a fin de
examinar cambios microvasculares ,dérmicos, incluídos diámetro
anterior, permeabilidad venular post capilar, y adhesión leucocítica
en venas post capilar. Resultados; en el séptimo día la vasodilatación
e incrementación postcapilar de vénulas que se hallaron en las
heridas sin tratar fueron encontradas significativamente reducidas
(p<0.05) en ambos (los NSS y los del Aloe vera) aunque en este
último el efecto se vió en mayor medida. La adhesión de los
10
leucocitos no fue diferente en el grupo sin tratar, los del NSS y los del
aloe. Al decimocuarto día, la vasoconstricción se dio después de
dejar las heridas sin tratar. Sólo el grupo del aloe vera presentó un
incremento hasta niveles normales de su diámetro arterial y su
permeabilidad poscapilar venular fue igual al grupo del falso control.
La adhesión de falsos leucocitos se observó también en menor
cantidad comparando al grupo sin tratar y al del NSS.
Además , la curación del área de las heridas del grupo del aloe vera
fue mejor que los del grupo sin tratar y el grupo del NSS al séptimo y
décimo cuarto día. Conclusiones: Aloe vera exhibe acciones
promotoras de antinflamación y curación de heridas al ser aplicadas
en quemaduras de segundo grado (26)
Así escribio el Doctor Heggers , de la Facultad de Medicina de la
Universidad de Texas en el año 1997 ;”El aloe vera es una sustancia
de enorme potencial terapéutico” continua el Doctor Heggers en
nombre de su equipo investigador “ penetra en los tejidos heridos
,alivia el dolor , es antinflamatorio y dilata los vasos capilares,
incrementando así el suministro de sangre a la región afectada” .Una
de las explicaciones mas científicas que se puede ofrecer es que el
Aloe contiene complejas enzimas que funcionan como catalizadores
o tal vez se los pueda describir como agentes provocadores que
causan diversas reacciones en el organismo y principalmente
benéficas, como la rápida cicatrización de heridas .El aloe es doble
benéfico : alivia dolores y acelera la cicatrización. (14)
11
Heggers con su equipo demostraron que el aloe contiene
inhibidores de una sustancia peligrosamente vasoconstrictora
conocida como TxA2 , e impide su producción en el cuerpo
mientras mantiene un equilibrio saludable entre varias
prostaglandinas , hormonas de fuerte impacto en la sensación del
dolor y en la reconstrucción de tejidos.( 15)
El Dr. Robert Davis ,informa en el Journal of the American
Podiatric Medical Association en el año 1989, que en ratones de
laboratorio que recibieron aloe en el agua de beber se noto una
reducción de un 62,5 % del tamaño de las heridas en
comparación con el grupo control. En otro grupo semejante se
observo una reducción de 50,8% en el tamaño de las heridas que
recibieron una solución tópica con 25 % de aloe . ( 7)
El Dr. Hendler ; dice que hay varias maneras de las cuales pueda
el aloe prestar servicios terapéuticos , pues contiene salicilatos
que además de ser desinflamantes son analgésicos , para calmar
, descongestionar y aliviar el dolor .Explica que una de las
enzimas del aloe inhibe el efecto de una sustancia llamada
bradiquinina , culpable del dolor en los tejidos inflamados.(8 )
Durante el proceso curativo el estímulo del aloe vera sobre el
fibroblasto hace que produzca y agregue el nuevo colágeno al
tejido .Sin embargo , nosotros debemos notar que los macrófagos
también pueden secretar sustancias que pueden estimular al
fibroblasto semejantemente .Si el efecto es directo (de aloe) o
12
indirecto (del macrófago), el nuevo colágeno se forma entre los
márgenes de las herida cuando el aloe está presente.(8 )
El Aloe-vera contiene aminoácidos como la fenilalanina y el
triptofano que tienen actividad antiinflamatoria ( 9 )
Chupando un trozo de pulpa de Aloe Vera con constancia, es un buen remedio
para los dientes que sangran y que estén hinchados. Aligera el dolor de muelas
y rebaja los flemones. También es preventivo de las caries y protege de los
elementos agresivos que desgastan, a lo largo del tiempo, el esmalte de los
dientes. El afta, es una inflamación que afecta a las membranas de la boca,
especialmente en los niños y en jóvenes; es tan doloroso que interfiere en la
alimentación. Se recomienda que después de tener la pulpa de Aloe en la
boca, se mastique y que se lo traguen, para que beneficie el paladar, el
esófago y el estómago. Se ha de hacer más de una vez al día. Para el herpes
labial, hemos de aplicar el aloe, sin el sérver, ya que este es cáustico. Para
eliminarlo, nada más hay que lavarlo con agua, frotándolo con los dedos.( 24 )
13
MARCO TEORICO.-
La curación de una herida no sería posible sin la participación de los
macrófagos. Los macrófagos tienen su origen en los monocitos, cuya
diferenciación y activación en macrófagos tiene lugar en la zona de la herida.
Atraídos mediante estímulos quimiotácticos provocados por toxinas bacterianas
y la activación adicional a través de los granulocitos neutrófilos, las células
migran en densas filas desde la sangre en circulación hasta llegar a la herida.
En el marco de sus funciones fagocitadoras, que representan el máximo grado
de actividad de las células, los macrófagos no limitan sus funciones a la mera
acción directa sobre los microorganismos, sino que también ayudan en la
presentación de antígenos a los linfocitos.
Los antígenos que son capturados y parcialmente modificados por los
macrófagos son puestos a disposición de los linfocitos en una forma
reconocible.
Los macrófagos liberan además citocinas que fomentan las inflamaciones
(interleucina-1, IL-1, factor de necrosis tumoral α, TNF-α) y diversos factores de
crecimiento (bFGF = basis fibroblast growth factor = factor básico de
crecimiento fibroblástico, EGF = epidermal growth factor = factor de crecimiento
epidérmico, PDGF = platelet-derived growth factor = factor de crecimiento
trombocítico, así como también TGF-α y –β). Estos factores de crecimiento son
polipéptidos que influyen de diversas maneras sobre las células que intervienen
en la curación de la herida: atraen células y fomentan la circulación en el sector
de la herida (quimio-taxis), estimulan la proliferación y diferenciación celular.
• LA FASE PROLIFERATIVA O DE PROLIFERACIÓN
En la segunda fase de la curación de la herida predomina la proliferación
celular con el fin de alcanzar la reconstitución vascular y de volver a rellenar la
zona defectuosa mediante el tejido granular. Esta fase comienza
aproximadamente a partir del cuarto día desde que se produjo la herida, las
condiciones necesarias ya han sido previamente establecidas en la fase
inflamatoria-exudativa: los fibroblastos ilesos de los tejidos colindantes pueden
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migrar al coágulo y a la retícula de fibrina que ha sido formados mediante la
coagulación sanguínea y utilizarla como matriz provisoria, las citocinas, y los
factores de crecimiento estimulan y regulan la migración y proliferación de las
células encargadas de la reconstitución de tejidos y vasos.
Reconstitución vascular y vascularización. La curación de la herida no puede
progresar sin nuevos vasos, ya que éstos deben garantizar un aporte adecuado
de sangre, oxígeno y substancias nutritivas. La reconstitución vascular se inicia
desde los vasos intactos que se encuentran en el borde de la herida. Gracias a
la estimulación de los factores de crecimiento, las células de la capa epitelial. ,
que revisten las paredes vasculares (endotelio), están capacitadas para
degradar su membrana basal, para movilizarse y proceder a migrar a la zona
lesionada y al coágulo sanguíneo colindante. A través de sucesivas divisiones
celulares en este lugar se origina una figura canaliculada, la cual se vuelve a
dividir en su final adquiriendo una forma de botón. Estos botones vasculares
individuales crecen uno encima de otro y se unen formando asas vasculares,
que a su vez se seguirán ramificando, hasta que se topen con un vaso aún
mayor en el que pueden finalmente desembocar. Sin embargo, recientemente
se han descubierto en la sangre células germinales endoteliales, las cuales
ponen en entredicho la doctrina vigente hasta el momento.
• Epitelización
Se trata de una de las fases fundamentales, puesto que constituye la
regeneración de la barrera de protección. Su función en la curación de
las heridas adquiere el papel protagonista en la cicatrización de heridas
de espesor pacial o abrasiones, así como en las quemaduras
superficiales.
La secuencia de eventos que acaban en la epitelización sería el
engrosamiento de la membrana basal, la elongación de las células, la
liberación de la membrana basal, la migración en monocapa, la
proliferación y la diferenciación.
Para conseguir la migración celular, las células expresan filamentos de
actina que actúan como el motor. Los desmosomas y los
15
hemidesmosomas desaparecen. La expresión de receptores de
integrinas en las células epiteliales permite que se desplacen sobre la
matriz de la herida, si bien no son conocidos las señales que estimulan
estos movimientos.
Cuando la membrana basal está íntegra, las células migran sobre ella;
ahora bien, cuando ésta está dañada, las células migran sobre la matriz
provisional sin laminina ni colágeno IV, pero rica en fibrina, fibronectina y
vironectina, al tiempo, que la célula epitelial aporta nuevos componentes
a la matriz. Estos movimientos ceden cuando las células entran en
contacto unas con otras, iniciándose la formación de la membrana basal
y las conexiones con ésta mediante hemidesmosomas. El último paso es
la proliferación de éstas células para conseguir un epitelio
poliestratificado.
Estos procesos están controlados mediante citokinas del tipo: EGF,
TGFa, HBEGF, IGF, FGF, KGF, TGFb (sólo actúa sobre la migración).
Los queratinocitos a su vez están capacitados para la síntesis de
metaloproteasas, que facilita la migración; y cuya secreción cesa cuando
se produce la inhibición por contacto.
Finalmente, es necesario tener en cuenta que la epidermis neoformada
no es igual a la intacta puesto que las crestas epidérmicas no son
visibles; el epitelio es más grueso en los márgenes de la herida y en la
zona central del área reepitelizada. ( 2,11 )
Síntesis de colágeno
Se llama fibroplasia al proceso de síntesis de las fibras que componen la
matriz, y que sustituirán la red inicial de fibrina. El mayor componente en
proporción es el colágeno, no sólo en la piel normal, sino también en el
tejido de granulación y la cicatriz madura. Su síntesis aumenta de
manera progresiva hasta la cuarta semana, momento en el que
disminuye debido a que aumenta la destrucción mediante colagenasas.
Distintos factores afectan a la síntesis de colágeno como son la edad, la
tensión, la presión y el estrés. También las citokinas influyen en la
fibroplasia como son el TGFb (estimulante potente de su síntesis e
16
inhibidor de la actividad de las proteasas), PDGF que influencia la
expresión de TGFb, así como la síntesis de tejido de granulación; FGF y
EGF estimulan la síntesis, y se inhibe mediante glucocorticoides.
Las fibras individuales de colágeno son solubles en suero salino, en
cambio, cuando forman enlaces electrostáticos durante la formación
fibrilar, disminuye la solubilidad. Estas fibras sólo serán solubles a altas
temperaturas y con ácidos fuertes. (2 )
Las investigaciones relacionadas con la cicatrización del hueso se
remontan a más de dos siglos, pero hasta comienzos de este siglo los
siglos, pero hasta comienzos de este siglo los estudios se referían en
particular a los huesos largos y las observaciones se aplicaban a la
cicatrización de las heridas de extracción sobre la base de conjeturas. En
1923 Euler hizo en perros el primer estudio histológico experimental sobre
la cicatrización de las cavidades alveolares. Szabo realizó experimentos
similares en 1927 y en 1928 investigó los efectos de las raíces retenidas
sobre el curso de la cicatrización. En 1929 Schram también trabajó con
perros para comparar la cicatrización de heridas de extracción no
perturbadas con la de las extracciones que comprendían la eliminación de
una parte de la lámina vestibular del hueso maxilar. Su experimento reveló
que las heridas quirúrgicas cicatrizan más pronto que las heridas de
extracción con pinza. Esto lo explicó basándose en el área, más pequeña
de coágulo sanguíneo que debe organizarse y en el menor grado de
epitelización necesario en los casos quirúrgicos. Simpson (1960, 1961,
a,b,c) también publicó una serie de trabajos sobre la cicatrización de los
alvéolos normales y sobre la curación consecutiva a la extracción quirúrgica
con fresas y escoplos en el mono.( 16 )
17
En 1936 Claflin realizó una extensa investigación en perros sobre la
curación de alvéolos normales e infectados. Clickman, Pruzansky y Ostrach
publicaron en 1947 sus observaciones sobre heridas de extracción en ratas
en presencia de raíces y fragmentos óseos retenidos. Simpson hizo un
estudio similar en monos en 1958, Glickman y col. y Simpson hallaron que
las pequeñas puntas radiculares vitales retenidas no comprometen la
cicatrización del alvéolo.
El primer estudio histológico sobre la cicatrización de heridas de extracción
en maxilares humanos fue publicado por Steinhardt en 1932, quién basó
sus observaciones en tres piezas necrópsicas en las cuales se conocía el
tiempo transcurrido desde la extracción hasta la muerte. Claflin (1936)
también publicó sus observaciones sobre una pieza humana que tenía una
herida de extracción de 6 semanas. Con posterioridad también publicaron
trabajos Mangos (1941). Christopher (1942), Amler, Johnson y Salman
(1960) y Amler (1969, 1973, 1977). Merced a la labor de estos
investigadores se estableció una concordancia entre los hallazgos
experimentales y el proceso de cicatrización en el ser humano. Aunque de
acuerdo con estos estudios se propusieron momentos en los cuales
ocurren los diversos acontecimientos, téngase en cuenta que los datos no
son exactos porque se determinaron con una muestra limitada y pueden
variar en función de factores como la edad, la salud del paciente, el tamaño
de la cavidad alveolar y lo apropiado de la irrigación sanguínea. Sin
embargo, ofrecen una base razonable para establecer juicios clínicos.( 16 )
18
ALOE VERA.-
Historia. El Aloe es una planta originaria del Norte de África y sus usos medicinales
datan de muy antiguo. Los sumerios lo usaban desde el año 1700 a.c. en la zona del
Tigris y Eufrates y poco después consta su uso por los egipcios. En Persia e India se
usa por sus propiedades catárticas, estomáquicas emenagogas y antihelmínticas. En
China y Rusia se viene usando para quemaduras, en Japón para el mismo fin ,así
como para heridas, trastornos gastrointestinales, picaduras de insectos y pie de atleta.
Griegos y romanos lo conocieron un siglo a.c. y fue descrito por Dioscórides como
purgante cicatrizante, en infecciones de la boca, picaduras y llagas. Hoy es usado
ampliamente para variadas afeccione. Ha sido una planta muy estudiada desde el
punto de vista científico pero no ha interesado a los grandes laboratorios
farmacéuticos por la dificultad de ser protegida con patentes.
Desde el punto de vista científico ;sabemos que; la estructura de una hoja
vegetal está organizada para tener una máxima superficie y captar un máximo
de luz y por tanto de energía. La hoja debe luchar contra la gravedad por lo
cual necesita una estructura fuerte, fibras para mantener la forma y nervios
para transportar la savia con minerales, fitohormonas, etc. Las plantas deben
conservar el agua para lo cual están protegidas por una cutícula de material
graso algo parecido a la cera. El aloe que crece en climas secos está
especialmente adaptado para evitar la pérdida de agua. Su parénquima, tejido
situado debajo de la cutícula, está especialmente constituído para retener un
máximo de agua.
Los constituyentes del aloe están principalmente en la hoja. Es muy importante
qué parte de la hoja se usa ya que los principales activos no están igualmente
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repartidos en la misma. Se distingue claramente entre el exudado y el gel, con
usos muy diferentes.
El exudado es un fluído amarillento que fluye por los nervios de las hojas.
Contiene componentes de carbono de tipo aromático con anillos de benceno
como compuestos fenólicos y quinólicos. Son moléculas de bajo peso
molecular, y por tanto pequeñas, lo que facilita que se diluyan fácilmente en el
agua. Tienen una mayor actividad molecular, son sustancias con muchas
propiedades y a este exudado se le llama aloína. La aloína produce activación
celular pero también puede dañar los mecanismos celulares. Tiene poder
antihelmíntico, antibacteriano y antifúngico. El exudado es laxante pero irrita en
exceso y no se debe usar para este fin. Su acción como emenagogo se debe a
la aloína. Hoy ya no se usa el exudado.
El gel es el parénquima de la hoja especializado en reservar agua. Para
obtenerlo se quitan las capas de arriba y abajo y se extrae el gel. Este gel es
reforzante, revitalizante y no produce reacciones adversas como la aloína. Sus
efectos activadores celulares son más suaves y no fuerza excesivamente a las
células. Tiene un efecto antiinflamatorio notable sobre los tejidos y una vez
combatida la inflamación ayuda a conservar bien los tejidos. Otro efecto
importante muy comprobado es su acción regeneradora, curando tejidos
dañados como úlceras y heridas. El aloe induce a la replicación celular allí
donde hay posible respuesta vital. Es un estimulante general del sistema
inmunológico con una acción fagocitaria marcada, fagocita células muertas y
toxinas, por tanto desintoxica y limpia. Especialmente útil en enfermedades
crónicas. Es eficaz en muchas enfermedades debido a que su beneficio se
centra en pocas acciones que tienen que ver con muchas enfermedades. Se
20
piensa que el pequeño resto de aloína que contiene el gel puede tener relación
con las acciones positivas del gel y en esas cantidades no tiene efectos
secundarios.
Calidad del aloe : La medida de los polisacáridos y de la fracción de los sólidos
solubles de la planta (sólidos precipitables en metanol) nos dan una idea de la
calidad de la planta. Parece ser que el segundo método es más fiable por que
considera una fracción de sólidos solubles que precipitan en forma sólida
cuando se añade metanol. Estos sólidos contienen la fracción de mayor peso
molecular del aloe. Esta fracción comprende: polisacáridos sin proteína,
glicoproteínas y proteoglicanos y ácidos orgánicos (cítricos y málico) de peso
molecular bajo adheridos a otras moléculas. Un contenido alto de estas
sustancias es una medida buena de la actividad biológica del aloe.
Otra medida podría ser determinar su poder antiinflamatorio pero no nos
aportaría nada respecto a otras propiedades. Su poder global todavía no se
puede medir.
La recolección es un proceso delicado: Tiene mucha importancia la manera en
que el aloe es recolectado. La planta debe estar madura, proceso que tarda de
1,5 a 3 años. Después de cosechar se pueden activar enzimas que degradan el
producto y que no pueden detectarse en pruebas analíticas. En 24 horas puede
echarse a perder el aloe. Sólo es estable durante unas horas después de la
cosecha. Este proceso degenerativo se frena por medio de la refrigeración. El
gel es más estable cuando se separa de la hoja. Hay que evitar la acción de
bacterias desde la superficie que es tratada convenientemente para ello. Se
21
quita la piel de la hoja, los extremos y la estructura vascular que contiene la
aloína. Se extrae por tanto el parénquima de forma manual o mecánica. Este
parénquima no es todo gel, se parece a una red de pescar y es rígido. Se le
quitan las fibras de celulosa y el resultado es un líquido viscoso. Todo este
proceso debe llevarse a cabo en menos de 36 horas.
Otro método mejor de obtención del gel es el proceso de hoja entera. En este
proceso se somete el aloe a la acción de la enzima celulosa que rompe las
fibras y se separa posteriormente por filtración. La aloína se separa por medio
de carbón activo. Con este método sólo se quitan los extremos de la hoja y el
resultado es una recuperación mejor de todas las sustancias del aloe. Se
extrae así un líquido claro teñido de amarillo que se refrigera y pasteuriza a
65°. La concentración para la obtención de extracto s se hace a vacío para no
dañar los principios activos. Por tanto el gel de hoja entera es más completo y
más activo biológicamente. Es este último método el que se aplica en el aloe
que comercializa Equisalud.(7)
Actuación del aloe en relación con el sistema inmun e: Las investigaciones
demuestran que el aloe es estimulante y regulador general de la acción del
sistema inmune.
La fracción de polisacáridos ricos en manosa del aloe estimula la actividad
membrana externa de las células de nuestro sistema inmune. Estos receptores
están caracterizados por cadenas de proteínas preparadas para unirse con una
sustancia específica que se ajuste a su propia secuencia de aminoácidos. A
ellos se une el polisacárido gracias a su molécula de manosa terminal que está
fosforilada y ejerce por sí misma cierto efecto estimulante sobre las células. Así
22
se desencadena la respuesta de las células del sistema inmune, especialmente
de linfocitos, neutrófilos y macrófagos, que son inducidos a actuar.
Los neutrófilos y macrófagos incrementan su actividad fagocítica, atacan y
luego engullen las bacterias y productos de desecho. Este aumento en la
actividad, contribuye a limpiar y proteger el organismo produciendo
considerables beneficios.
Asimismo, parece que las células T tienden a activarse y que hay un aumento
de la producción de anticuerpos lo que evidentemente va a intensificar el
proceso inmune.
Estos procesos, junto con un incremento del número de células debido al
efecto mitogénico del aloe, son responsables de las respuestas inmune general
de esta planta.
Además, los componentes de bajo peso molecular del aloe contienen
sustancias que pueden inhibir la liberación de potentes agentes oxidantes de
los neutrófilos, superóxido, peróxido de hidrógeno, etc., que son producidos
para eliminar las bacterias ingeridas. Fuera de la célula estas especies con
oxígeno pueden reaccionar con cualquier sustancia o estructura con las cuáles
entre en contacto, por lo que podrían producirse lesiones en células y tejidos
vecinos. De esta manera el aloe favorece la eficacia de las células del sistema
inmune y evita que los tejidos de alrededor sean dañados.
Otros estudios recientes llevados a cabo en animales demuestran que el aloe
incrementa la producción de óxido nítrico en los macrófagos. Esta sustancia es
utilizada para neutralizar las bacterias dañinas. Obviamente, un aumento en la
producción de óxido nítrico hace que los macrófagos aumenten la efectividad
de su actividad fagocitaria (6,8, 22,23, 24)
23
Ya en 1941 Thomas D. Rowe , profesor de la Escuela Medica de la
Universiodad de Virginia ,publicó su estudio “Nuevas observaciones en el uso
del aloe vera” sobre el tratamiento de quemaduras de tercer grado producidas
por radiaciones de rayos X, en el que se narra cómo, tras la ocupación de
Japón , oficiales del Ejercito Americano comprobaron que los habitantes de
Hiroshima y Nagasaki afectados por las explosiones atómicas notaron una
rápida mejoría , en muchos casos sin evidencias de cicatrices , tras ser
tratados con jugo de aloe vera.( 9 )
Laboratorios como el del Instituto de Ciencia y Medicina Luis Pauling de Palo
Alto California ; el Consejo Internacional de la Sábila y la Universidad de
Oklahoma , trabajan en estudios formales sobre la sábila .Estos estudios han
demostrado apoyados por pruebas de laboratorio que la sábila posee las
siguientes propiedades:
• Inhibidor del Dolor.- Bloque el dolor en las capas profundas de
la piel debido a sus componentes activos y su poder desinflamante .
• Desinflamante.- Tiene una opción similar a los esteroides
como es la cortisona pero sin los efectos nocivos de ella. Para un mejor efecto
sobre la piel , aplique un algodón empapado con sabila y cúbralo con plástico
para evitar que se evapore.
• Coagulante .-Por su alto contenido de calcio y potasio , la
sábila provoca la formación de una red de fibras que atrapan a los eritrocitos
de la sangre ayudando así a obtener la coagulación y cicatrización requerida
.Además ,el calcio es un elemento muy importante para la buena función del
sistema nervioso y para la acción muscular, es un gran cicatrizador en toda
curación.
24
• Acción queratolitica.- Esta acción es las que permite que se
desprenda la piel dañada o herida renovándose con células nuevas .Permite
que exista un mayor flujo sanguíneo por venas y arterias despegándolas de
pequeñas coagulaciones. ( 7 )
Composición química del gel
Su composición y propiedades físico-químicas y farmacológicas pueden variar
en función de la lluvia o el riego, del terreno, de la época de recolección de las
hojas y de su edad y almacenamiento, y según la forma de obtención del gel y
su almacenamiento. Un 99,4% del peso del gel de aloe vera es agua. Más del
60% de los sólidos totales son polisacáridos mucilaginosos ligados a azúcares
como glucosa, manosa, ramnosa, xilosa, arabinosa, galactosa y ácidos
urónicos. El mucílago está compuesto de diferentes polisacáridos neutros,
ácidos y acetilados (mananos, glucomananos, galactomananos,...),
responsables de la gran capacidad que tiene la planta para retener agua y
gracias a la cual puede sobrevivir en condiciones de sequía. Los polisacáridos
mucilaginosos son los principios activos responsables de la actividad biológica
del gel de aloe vera. Entre ellos destacan el acemanano y el aloérido por tenerr
las mas grandes propriedades. Los restantes sólidos que componen el gel de
aloe vera, son sales orgánicas y ácidos (glutámico, málico, salicílico, cítrico,
lactato magnésico, oxalato cálcico, ...), enzimas (celulasa, carboxipeptidasa,
bradikininasa, catalasa, amilasa, oxidasa,tirosinasa), sapogénicas, taninos,
esteroles, triglicéridos, aminoácidos (lisina, histidina, glutamina, arginina, ácido
aspártico, asparagina, treonina, serina, ácido glutámico, glicina, alanina, valina,
metionina, isoleucina, leucina, tirosina, fenilalanina y triptófano), RNA y trazas
de alcaloides, de vitaminas (betacaroteno, B1, B2, B3, B6, C, E, colina, ácido
25
fólico) y de minerales (aluminio, boro, bario, calcio, cromo, cobre, hierro,
potasio, magnesio, sodio, fósforo, estroncio, silicio). No debe contener nunca
en cantidades apreciables derivados hidroxiantracénicos o antraquinonas de
acción laxante
Las heridas constituyen lesiones abiertas caracterizadas por una pérdida de la
continuidad e integridad establecida en la piel o mucosa, que se producen
cuando un objeto o cuerpo físico con su fuerza supera la resistencia mecánica
de aquellos tejidos sobre los que actúan.Una vez producidas, se desencadena
de forma inmediata y espontánea una cascada de procesos biológicos
destinados a formar el tejido reparador que ocupará el espacio de lesión y unirá
sus bordes de forma estable y definitiva. En cualquier herida este tejido
reparador es de carácter conectivo-vascular y su resultado final será una
cicatriz más o menos evidente.
El modo en que las heridas se producen y sus cuidados determinan en gran
medida el proceso de cicatrización; aún en pacientes en los que la herida está
apreciablemente influenciada por su estado general. Una buena técnica
operatoria y un correcto tratamiento postquirúrgico permiten una cicatrización
óptima bajo esas circunstancias.Las heridas que comprenden los tejidos
blandos de la región facial son muy comunes y de todos los traumatismos, tal
vez ninguno sea de mayor preocupación para el paciente, por lo tanto, todos
los esfuerzos deberán dirigirse hacia la restauración de los tejidos injuriados
para volverlos tan normales como sea posibles y el tratamiento temprano es de
suprema importancia para impedir el desfiguramiento facial.
Tradicionalmente, la sutura ha sido el método clásico para el afrontamiento de
los bordes de la herida con vista a favorecer la rápida cicatrización de los
tejidos. Sin embargo, actualmente en el mundo se utilizan adhesivos tisulares
basados en ésteres cianoacrílicos como una técnica alternativa a la sutura en
el tratamiento de las heridas, tanto traumáticas como quirúrgicas.
26
HIPÓTESIS.-
Siendo el aceite de jojoba una sustancia natural y en cuya composición
encontramos presencia de ceramidas que ayudan a penetrar el epitelio es
probable que exista una mejor regeneración celular para la cicatrización de
heridas de la mucosa bucal tratados con aceite de jojoba en comparación
con heridas tratadas con aloe vera en ratas albinas.
IV.- OBJETIVOS.-
4.1.- Objetivo General.-
Comparar la respuesta histologica de la cicatrización de heridas de
la mucosa bucal tratadas con aceite de jojoba en comparación con aloe vera
en ratas albinas.
4.2.- Objetivos Específicos.-
• Evaluar las características histológicas de la cicatrización de
heridas de la mucosa bucal tratadas con aceite de jojoba a las 24
horas , 3 días y 7 días .
27
• Evaluar las características histológicas de la cicatrización de
heridas de la mucosa palatina tratadas con aloe vera a las 24
horas , 3 días y 7 días
• Evaluar las características histológicas de la cicatrización de
heridas de la mucosa palatina en el grupo control a las 24 horas ,
3 días y 7 días
• Comparar las características histológicas de los grupos de estudio.
.
28
V.- MATERIALES Y MÉTODOS
5.1.- Tipo de Estudio
• Experimental
• Prospectivo
• Longitudinal
• Comparativo .
5.2.- Muestra.-
Se utilizaran 18 ratas albinas
Criterios de inclusión.-
- Ratas en buen estado general.
- Que estén vacunados.
- Que estén dentro de los rangos de peso y edad .
- Ambos sexo.
Criterios de exclusión.-
- Ratas enfermas.
- Que no estén vacunados.
- Que no estén dentro de los rangos de peso y edad mencionados.
- Que no se ajuste a la alimentación ad livitum.
29
La muestra será dividida de la siguiente manera .
GRUPO DE TTO CON ACEITE DE JOJOBA - 15 RATAS a las cuales
se les someterá a realizar la herida en la mucosa palatina de lado derecho
, se le aplicara aceite de jojoba y luego sacrificados a intervalos de 24
horas ,3 días y 7 días ;respectivamente.
GRUPO DE TTO CON ALOE VERA .- 15 RATAS a las cuales se les
someterá a realizar la herida en la mucosa palatina de lado IZQUIERDO ,
se le aplicara gel de aloe vera y luego sacrificados a intervalos de 24
horas ,3 días y 7 días ;respectivamente.
GRUPO DE CONTROL.- 3 RATAS a los cuales se les someterá a realizar
la herida en la mucosa palatina en ambos lados y luego sacrificados a
intervalos de 24 horas ,3 días y 7 días ;respectivamente; solo se lava con
suero fisiológico.
5.3.- VARIABLES Y OPERACIONALIZACION.-
Variable Independiente.-
- Tratamiento con aceite de jojoba . en topicaciones diarias (3/día)
Tratamiento con aloe vera, topicaciones diarias (3/día)
Variable Dependiente.- Respuesta Histológica de la cicatrización.
30
Operacionalización.-
Dimensión Indicador Escala valor
Respuesta
Histopatológica.
- Células :PMN
,linfocitos
,macrófagos,
fibroblastos,
epitelización.
Fibras colagenas
Ordinal
0 :ausente
1 :pocos
2 :regular
3
:aumentados.
Referencia : GRADO DE INFLAMACION (SEGÚN EL ESTUDIO DE
COTRAN ,2000)
5.4.- Recolección de los datos .-
Procedimiento.-
• Los especimenes previamente seleccionados serán pesados y se
llenaran sus datos en una ficha de identificación . ( Ficha No 1)..A
cada uno se le colocará un código que lo llevara con una cinta a
nivel del cuello .
31
• Serán anestesiados con tiopentothal sodico al 1 % por via
intraperitoneal..
• Se esperara cinco minutos para proceder a realizar la herida en la
mucosa palatina del lado derecho . De la misma manera se
procederá con todos los especimenes de cada grupo de estudio.
• El aceite de jojoba ,se mantendrá en un frasco estéril .
• El aceite de jojoba con la ayuda de una cureta y se lleva a la herida
cubriéndola por completo , procedimiento que se repetirá tres veces;
mediante topicaciones esperando el tiempo de sacrificio.
• Todos los especimenes serán mantenidos con alimentación ad
livitum hasta el tiempo de sacrificio.
• Los sacrificios serán a las 24 horas 3 días y 7 días, se utilizara
cloroformo ,se obtendrán las muestras y serán colocadas en
frascos de vidrio con formol al 10% previamente codificados.
• El tiempo seleccionado para el sacrificio es de acuerdo a las células
que aparecen en el proceso de cicatrización en su fase aguda .
• Para el grupo con aloe vera se procederá de la misma manera pero
en el lado izquierdo.
• Las muestras serán llevadas al laboratorio para su descalcificación
con ácido nítrico, luego procesados con la técnica de parafina y
coloración con hematoxilina eosina.
32
Recolección de datos.-
Se realizará mediante las lecturas de las láminas histológicas
codificadas de acuerdo a la muestra; dichas lecturas se realizaran con
un microscopio óptico a mediano y mayor aumento 400X. Los datos
obtenidos serán colocados en la ficha No 2. (de acuerdo al tiempo).
Análisis.-
Se realizaran mediante pruebas porcentuales, chi cuadrado y la prueba
de Kruskal Wallis.
5.5.- Recursos.-
• R. Materiales.-
- Especimenes.
- Aceite de jojoba .
- Aloe vera
- Bisturí.
- Curetas quirúrgicas.
- Suero fisiológico.
33
- Algodón y gasa.
- Jeringas descartables.
- Jaulas.
- Campos quirúrgicos.
- Pinzas.
- Tiopenthotal sodico al 1 %.
- Microscopio.
- Frascos de vidrio.
- Acido cítrico.
- Formol al 10%.
- Fichas.
• Recursos Humanos:
- Investigador (bachiller)
- Asesor.
- Técnico en histopatología.
- Veterinario.
34
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38
FICHA No 1.-
Ficha de Identificación.-
- Espécimen No.-......................................
- Peso.- .......................................
- Color.-........................................................
Fecha de intervención............................Hora.............................
Fecha de Sacrificio...............................Hora..............................
Tiempo de duración del trabajo Quirúrgico:
Lado derecho..................................
Lado Izquierdo....................................
Curso clínico Post operatorio :
� Positivo.
� Negativo.
¿Por qué?....................................................................
39
HERIDAS QUIRÚRGICAS:
No 1 : Localizada.............................................
No 2 : Localizada.........................................
No 3 : Localizada .........................................
No 4 : Localizada..........................................
Herida PMN Linf Macrófagos fibroblastos Epitelización.
No 1
No2
No 3
No 3
