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関人関人ORDISTORDIST関人関人ORDISTORDIST 先 端 科 学 技 術 推 進 機 構
社会連携部 産学官連携センター 、知財センター
研究概要・成果
応用分野、実用化可能分野
足場材料としてのβ-ターン構造を有するペプチドの合成と機能評価
(戦略基盤)スマートバイオマテリアル開発ユニット○波多野寛(院生)、平野義明(化学生命工学部化学・物質工学科教授)
問合せ先: 関西大学 化学生命工学部 平野義明 E-mail:[email protected]
欠
損
部
位
組織工学
(Tissue Engineering)
細胞(Cell)
足場(Scaffold)
増殖因子
(Growth factor)
足場材料に求められる因子
• 生体適合性
• 細胞接着性
• 三次元構造体
フィブロネクチン(Fibronectin)
NH
HNH2
O
NH
NH
NH
OH
O
OH
H
O
OHOO
NH2
NH
NH2N N
H
O
OH
O
NH
O
OH
OH
HOO
NH
NH2
NH
H
Arg-Pic(3)-Asp-Ser (RNiDS)(RGDS mimetic peptide)
Arg-Gly-Asp-Ser (RGDS)
0102030405060708090100
460480500520540560580600620640660680700720740760780800Mass/Charge
605.5GGGRGDS
C21H36N10O11
Fw.604.57
[M+H]⁺
0102030405060708090100
400 440 480 520 560 600 640 680 720 760 800 840Mass/Charge
659.8GGGRNiDS
C25H42N10O11
Fw.658.66
[M+H]⁺
ペプチドの同定
Figure 1 MALDI-TOF MS and HPLC spectrum of GGGRG/NiDS peptides.
ペプチド濃度. : 100 μM
溶媒 : 超純水
積算回数 : 8 回
測定条件
GGGRGDS→Random coil
GGGRNiDS→TypeⅡβ-bendTemperature
pH
Figure 2 CD spectra of 100 µM GGGRNiDS peptide at various temperature, or pH.
円二色性(CD)測定
peptide : GGGRG/NiDS
peptide
Polyvinyl alcohol
(PVA)PVA-HMDI PVA-HMDI-peptide
OCN(CH2)6NCO
hexamethylenediisocyanate
(HMDI)
pH 3.0dibutyltin dilaurate
Binding energy (eV)280290300
C1s
C=O
Binding energy (eV)390400410
N1s
Figure 3 ESCA spectra of PVA, PVA-HMDI and PVA-HMDI-peptide surface.
PVA表面へのペプチド固定化
PVA or PVA-peptide film coat
L929 passage 7
10%(W/V)FBS含有EMEM培地
Trypsin/EDTA上澄み除去
1.0×105 cells/well
無血清EMEM培地
Figure 4 L-929 cells attached and spreaded onto RG/NiDS-immobilized PVA film.
細胞接着活性試験
Turn部分をRGDSまたはRNiDSと置換することで生理活性の向上を目指す
組織工学用足場材料として応用が可能となる
関西
大学
先端
科学
技術
推進
機構
※無
断複
写・転
載・加
工等
は
禁じま
す。