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関人 関人 ORDIST ORDIST 関人 関人 ORDIST ORDIST 社会連携部 産学官連携センター、知財センター 研究概要・成果 応用分野、実用化可能分野 足場材料としてのβ-ターン構造を有する ペプチドの合成と機能評価 (戦略基盤)スマートバイオマテリアル開発ユニット ○波多野寛(院生)、平野義明(化学生命工学部 化学・物質工学科 教授) 問合せ先: 関西大学 化学生命工学部 平野義明 E-mail:[email protected] 組織工学 (Tissue Engineering) 細胞 (Cell) 足場 (Scaffold) 増殖因子 (Growth factor) 足場材料に求められる因子 生体適合性 細胞接着性 三次元構造体 フィブロネクチン (Fibronectin) N H H N H 2 O N H N H N H OH O O H H O OH O O N H 2 NH N H 2 N N H O OH O N H O OH O H H O O N H N H 2 NH H Arg-Pic(3)-Asp-Ser (RNiDS) (RGDS mimetic peptide) Arg-Gly-Asp-Ser (RGDS) 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 460 480 500 520 540 560 580 600 620 640 660 680 700 720 740 760 780 800 Mass/Charge 605.5 GGGRGDS C 21 H 36 N 10 O 11 Fw.604.57 [M+H]0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 400 440 480 520 560 600 640 680 720 760 800 840 Mass/Charge 659.8 GGGRNiDS C 25 H 42 N 10 O 11 Fw.658.66 [M+H]ペプチドの同定 Figure 1 MALDI-TOF MS and HPLC spectrum of GGGRG/NiDS peptides. ペプチド濃度. : 100 μM 溶媒 : 超純水 積算回数 : 8 測定条件 GGGRGDSRandom coil GGGRNiDSTypeβ-bend Temperature pH Figure 2 CD spectra of 100 μM GGGRNiDS peptide at various temperature, or pH. 円二色性(CD)測定 peptide : GGGRG/NiDS peptide Polyvinyl alcohol (PVA) PVA-HMDI PVA-HMDI-peptide OCN(CH 2 ) 6 NCO hexamethylene diisocyanate (HMDI) pH 3.0 dibutyltin dilaurate Binding energy (eV) 280 290 300 C 1s C= O Binding energy (eV) 390 400 410 N 1s Figure 3 ESCA spectra of PVA, PVA-HMDI and PVA-HMDI-peptide surface. PVA表面へのペプチド固定化 PVA or PVA-peptide film coat L929 passage 7 10%(W/V)FBS 含有EMEM培地 Trypsin/EDTA 上澄み除去 1.0×10 5 cells/well 無血清EMEM培地 Figure 4 L-929 cells attached and spreaded onto RG/NiDS-immobilized PVA film. 細胞接着活性試験 Turn部分をRGDSまたはRNiDSと置換することで生理活性の向上を目指す 組織工学用足場材料として応用が可能となる 関西大学先端科学技術推進機構 ※無断複写・転載・加工等は 禁じます。

足場材料としてのβ-ターン構造を有する ペプチドの … › ... › news › asset › poster17 › 40.pdfFigure 4 L-929 cells attached and spreaded onto RG/Ni DS-immobilized

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関人関人ORDISTORDIST関人関人ORDISTORDIST 先 端 科 学 技 術 推 進 機 構

社会連携部 産学官連携センター 、知財センター

研究概要・成果

応用分野、実用化可能分野

足場材料としてのβ-ターン構造を有するペプチドの合成と機能評価

(戦略基盤)スマートバイオマテリアル開発ユニット○波多野寛(院生)、平野義明(化学生命工学部化学・物質工学科教授)

問合せ先: 関西大学 化学生命工学部 平野義明 E-mail:[email protected]

組織工学

(Tissue Engineering)

細胞(Cell)

足場(Scaffold)

増殖因子

(Growth factor)

足場材料に求められる因子

• 生体適合性

• 細胞接着性

• 三次元構造体

フィブロネクチン(Fibronectin)

NH

HNH2

O

NH

NH

NH

OH

O

OH

H

O

OHOO

NH2

NH

NH2N N

H

O

OH

O

NH

O

OH

OH

HOO

NH

NH2

NH

H

Arg-Pic(3)-Asp-Ser (RNiDS)(RGDS mimetic peptide)

Arg-Gly-Asp-Ser (RGDS)

0102030405060708090100

460480500520540560580600620640660680700720740760780800Mass/Charge

605.5GGGRGDS

C21H36N10O11

Fw.604.57

[M+H]⁺

0102030405060708090100

400 440 480 520 560 600 640 680 720 760 800 840Mass/Charge

659.8GGGRNiDS

C25H42N10O11

Fw.658.66

[M+H]⁺

ペプチドの同定

Figure 1 MALDI-TOF MS and HPLC spectrum of GGGRG/NiDS peptides.

ペプチド濃度. : 100 μM

溶媒 : 超純水

積算回数 : 8 回

測定条件

GGGRGDS→Random coil

GGGRNiDS→TypeⅡβ-bendTemperature

pH

Figure 2 CD spectra of 100 µM GGGRNiDS peptide at various temperature, or pH.

円二色性(CD)測定

peptide : GGGRG/NiDS

peptide

Polyvinyl alcohol

(PVA)PVA-HMDI PVA-HMDI-peptide

OCN(CH2)6NCO

hexamethylenediisocyanate

(HMDI)

pH 3.0dibutyltin dilaurate

Binding energy (eV)280290300

C1s

C=O

Binding energy (eV)390400410

N1s

Figure 3 ESCA spectra of PVA, PVA-HMDI and PVA-HMDI-peptide surface.

PVA表面へのペプチド固定化

PVA or PVA-peptide film coat

L929 passage 7

10%(W/V)FBS含有EMEM培地

Trypsin/EDTA上澄み除去

1.0×105 cells/well

無血清EMEM培地

Figure 4 L-929 cells attached and spreaded onto RG/NiDS-immobilized PVA film.

細胞接着活性試験

Turn部分をRGDSまたはRNiDSと置換することで生理活性の向上を目指す

組織工学用足場材料として応用が可能となる

  関西

大学

先端

科学

技術

推進

機構

※無

断複

写・転

載・加

工等

禁じま

す。