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高感度、高分離能、優れたS/N比のハイエンド卓上フローサイトメーター
CellStream™
・�低ノイズで微弱蛍光・微粒子を超高感度に検出
・�最大 7レーザー、22チャネルまで拡張可能
・�96ウェルプレート用オートサンプラーを標準搭載
・�蛍光像を確認して正確なシングルセル解析が可能
2
Amnis テクノロジーの活用
ニーズに沿って拡張可能
サンプル数に柔軟に対応
正確なイベント取得
扱いやすいソフトウェア
TDI�CCDによる卓越した検出感度と広いダイナミックレンジ
96ウェルプレートとマイクロチューブの測定フォーマットを搭載
最大 7レーザー、22チャネルまで増設可能
イベントギャラリーでダブレットや
サンプル凝集を確認可能
優れた操作性と高い信頼性のソフトウェア(21�CFR�Part�11 に準拠)
CellStreamの特長
比類なき検出感度と分離能
Forward Scatter (FSC)
Side
Sca
tter
(SSC
)
0
0100
1e+3
1e+4
1e+5
100 1e+3 1e+4
900 nm
500 nm
300 nm
粒子サイズ別蛍光ビーズを用いた測定結果直径 300 nm, 500 nm, 900 nm の粒子サイズ別蛍光ビーズを 4:2:1 の量比で混合した溶液を CellStream で測定した結果。
3
赤血球および血小板由来の細胞外小胞の解析例様々な細胞種から能動的に分泌される Extracellular vesicles(EVs:細胞外小胞)は生体内の情報伝達物質として機能する一方、疾患バイオマーカーとしても注目されています。
EVs は直径数十~数百 µm の微小粒子であるため、試料中に含まれるノイズ(デブリや不純物)と EVs を見分けて測定することが重要です。CellStream は TDI CCD による優れたS/N比と高感度かつ広いダイナミックレンジを有するフローサイトメーターとして、かつてない精度とスループットで EVs 研究を推進させます。
Population: All
Population: Potential EVs
300
200 300
200
100
-100
-500-500
-100 100
0
0
SSC
PE-IntensityFSC
APC-Intensity
Population: Potential EVs
Population: Potential EVs
Freq
uenc
y
1
0.800
0.600
0.400
0.200
0
1
0.800
0.600
0.400
0.200
0
0
0
01e+3
1e+3
1e+31e+4
1e+4
1e+4
0 1e+3 1e+4
PE+
PE-Intensity
APC-
Inte
nsit
y
Freq
uenc
y
APC+
Potential EVs
Population: All
Population: Potential EVs
300
200 300
200
100
-100
-500-500
-100 100
0
0
SSC
PE-IntensityFSC
APC-Intensity
Population: Potential EVs
Population: Potential EVs
Freq
uenc
y
1
0.800
0.600
0.400
0.200
0
1
0.800
0.600
0.400
0.200
0
0
0
01e+3
1e+3
1e+31e+4
1e+4
1e+4
0 1e+3 1e+4
PE+
PE-Intensity
APC-
Inte
nsit
y
Freq
uenc
y
APC+
Potential EVs
Population: All
Population: Potential EVs
300
200 300
200
100
-100
-500-500
-100 100
0
0SS
CPE-IntensityFSC
APC-Intensity
Population: Potential EVs
Population: Potential EVs
Freq
uenc
y
1
0.800
0.600
0.400
0.200
0
1
0.800
0.600
0.400
0.200
0
0
0
01e+3
1e+3
1e+31e+4
1e+4
1e+4
0 1e+3 1e+4
PE+
PE-IntensityAP
C-In
tens
ity
Freq
uenc
y
APC+
Potential EVs
EVs 計数平均値(Ave)を指標にした希釈直線性
赤血球および血小板由来のEVsを CellStreamを用いて測定した結果赤血球および血小板由来の EVs を混合し(以下、混合サンプル)、そこに PE-Anti-CD235 抗体と APC-Anti-CD41 抗体を添加して1 時間反応させた後、各 EVs の平均値を測定した(EV Ave)。陰性コントロール試料には、抗体溶液のみ(Antibody Ave)、抗体溶液に Triton-X 100 を加えた溶液(TX + Antibody Ave)、混合サンプルに Triton-X 100 を加えた溶液(TX + EV Ave)、バファーのみ
(Buffer Ave)を各々用意して比較した。
30 - 100 nm 100 nm - 1 µm 1 µm - 5 µm 8 - 12 µm
タンパク質アグリゲーション
バクテリア
血小板
細胞アポトーシス小体
微小粒子エクソソーム
ウイルス
使用レーザー ● 488 nm ● 642 nm 使用抗体 ● PE-Anti-CD235 抗体 ● APC-Anti-CD41 抗体 (赤血球由来の EVs を検出) (血小板由来の EVs を検出)
Dilution
PE-Anti-CD235
-500
0
500
1000
1500
2000
2500
3000
3500
1:60 1:120 1:240 1:480 1:960
Obj
ects
/µL
EV Ave
Antibody Ave
TX+Antibody Ave
TX+EV Ave
Buffer Ave
Dilution
APC-Anti-CD41
-500
0
500
1000
1500
2000
2500
1:60 1:120 1:240 1:480 1:960
Obj
ects
/µL
EV Ave
Antibody Ave
TX+Antibody Ave
TX+EV Ave
Buffer Ave
Population: All
Population: Potential EVs
300
200 300
200
100
-100
-500-500
-100 100
0
0
SSC
PE-IntensityFSC
APC-Intensity
Population: Potential EVs
Population: Potential EVs
Freq
uenc
y
1
0.800
0.600
0.400
0.200
0
1
0.800
0.600
0.400
0.200
0
0
0
01e+3
1e+3
1e+31e+4
1e+4
1e+4
0 1e+3 1e+4
PE+
PE-IntensityAP
C-In
tens
ity
Freq
uenc
y
APC+
Potential EVs
ヒト末梢血単核細胞を用いたマルチパラメータ解析例
ヒト末梢血単核細胞を用いたマルチパラメータ解析の結果50 µL のヒト末梢血単核細胞(2 x107 個 /ml)と上記 10 種類の蛍光標識抗体を用いて 20 分間染色して洗浄後、CellStream にて10,000 個の細胞を取得し解析を実施した。
Side
Sca
tter
CD14 BV421 CD15 BV650 Si
de S
catt
er
CD45 APC-Cy7
Side
Sca
tter
CD3 PE-Cy5.5
Side
Sca
tter
CD4 PE-Cy7
CD8
BV51
0
CD19
BUV
496
CD45+
CD3- CD3+
CD62L FITC
CD45
RA A
PC
CD4+
CD62L FITC
CD45
RA A
PC
CD8+
CD4+ or CD8+
Side
Sca
tter
Forward Scatter
CD16 +CD56 PE
150K
150K
100K
100K
50K
50K
0
150K
100K
50K
0
100 101 102 103 104 105 106 100 101 102 103 104 105 106 100 101 102 103 104 105
102 103 104 105
106
102 103 104 105 106102101 103 104 105 106102
103
103
104
104
105
105
106
106
102
103
104
105
106
102
103
104
105
106
102
103
103
104
104
105
105
106
106
150K
100K
50K
0
150K
100K
50K
0
150K
100K
50K
0
0
4
使用レーザー ● 405 nm ● 488 nm ● 561 nm ● 642 nm
使用抗体 ● CD14 BV 421 (単球) ● CD4 PE-Cy7 (CD4 T 細胞)(括弧内は同定細胞) ● CD15 BV 650 (顆粒球) ● CD19 BUV 496 (B 細胞)
● CD45 APC-Cy7 (リンパ球) ● CD16 + CD56 PE (NK 細胞) ● CD3 PE-Cy5.5 (T 細胞) ● CD45RA APC (ナイーブメモリー T 細胞) ● CD8 BV 510 (CD8 T 細胞) ● CD62L FITC (ナイーブメモリー T 細胞)
5
光学システム
Amnisテクノロジー
CellStream は光学フィルターをフィルタースタックに、蛍光検出器を TDI CCD にそれぞれ一体化することで、コンパクトな構造を図っています。
1
2
3
4
励起レーザーによる蛍光物質からの蛍光放出
FSC 用 LED
TDI�CCD の実写真
フィルタースタックによる特定波長領域への分離
励起レーザーTDI�CCDによる蛍光検出
(合計 22 チャネルの検出)
レーザー サンプルフロー CCD TDI CCD による統合イメージ
レーザー照射幅
CellStesam のレーザーは一般的なフローサイトメーターに比べて数十倍のレーザー照射幅を有するため、励起効率に優れています。また、蛍光検出器に Time Delay Integration CCD(TDI CCD)を採用し、高速で流れる細胞が発する蛍光を TDI CCD 上のピクセルで捉え、次のピクセルにシグナルを受け渡して蓄積し統合します(下絵左図)。そのため、光電子増倍管(PMT)を用いる一般的なフローサイトメーター(下絵右図)に比べて高感度で、優れた S/N 比を示します。
PMT 検出器
細胞
レーザーレーザー幅約 20 µm
TDI�CCDによる検出(CellStream) PMTによる検出(一般的なフローサイトメーター)
6
8ピークビーズを用いたCellStreamの分離能テスト8 ピークバリデーションビーズ(Spherotech 社)を用いて CellStream で実施した分離データです。
CellS
trea
m™
Las
ers
CellStream™ Instrument Channels
456/51 528/46 583/24 611/31 702/87 773/56
375 nm 1e3 1e4 1e5 1e6
456/51
1.81.51.20.90.60.3
0
Coun
t
1e3 1e4 1e5 1e6528/46
1.81.51.20.90.60.3
0
Coun
t
583/241e3 1e4 1e5
Coun
t
2
1.5
1
0.5
0
561 nm
583/241e3 1e4 1e5 1e6
Coun
t
3
2
1
0
611/311e3 1e4 1e5 1e6
012345
Coun
t
702/871e3 1e4 1e5 1e6
Coun
t
3
2
1
0
773/561e3 1e4 1e5 1e6
Coun
t
3
2
1
0
642 nm
32.5
21.5
10.5
0
Coun
t
702/871e3 1e4 1e5 1e6
405 nm
528/461e3 1e4 1e5 1e6
01
2
3
4
Coun
t
583/241e3 1e4 1e5 1e6
01
2
3
4
Coun
t
611/311e3 1e4 1e5 1e6
01
2
3
4
Coun
t
702/871e3 1e4 1e5 1e6
0
1
2
3
Coun
t
456/511e3 1e4 1e5 1e6
01
2
3
4
Coun
t
2.52
1.51
0.50
Coun
t
773/561e3 1e4 1e5
488 nm
528/461e3 1e4 1e5 1e6
32.5
21.5
10.5
0
Coun
t
583/241e3 1e4 1e5 1e6
Coun
t
3
2
1
0
611/311e3 1e4 1e5 1e6
Coun
t
3
2
1
0
702/871e3 1e4 1e5 1e6
Coun
t
3
2
1
0
773/561e3 1e4 1e5
2.52
1.51
0.50
Coun
t
7
7レーザー、22チャネルまでアップグレード可能CellStream は 488 nm の Blue レーザーと 785nm の SSC レザーを標準装備しています。オプションで UV レーザー(375 nm)、Violet レーザー(405 nm)、Green レーザー(532 nm)、 Yellow レーザー(561 nm)、Red レーザー(642 nm)、NIR レーザー(730 nm)の増設が可能です。
搭載可能な励起レーザー�(nm) SSCレーザー FSC
375 405 488 532 561 642 730 785 450�LED
チャネル
検出チャネル(nm) B2 A2 D2
456/51�(431~ 482)
AF350, AF405, BV421, Cascade Blue, DAPI, DyeCycle Violet, eFluor450, Hoechest, Live/Dead Violet, Marina Blue, Pacific Blue
AF405, BV421, Cascade Blue, CFP, DAPI, DyLight405, eFluor405, Hoechest, Live/Dead Violet, Pacific Blue
FSC
検出チャネル B3 A3 C3
528/46�(505~ 551)
BUV496, BV510, Live/Dead Aqua, Pacific Orange, QD525, QD545
AF430, BDHorizonV550, BV510, Cascade Yellow, Live/Dead Aqua, Pacific Orange, QD525, QD545
AF488, BB515, Calcein-AM, CFSE, Dylight488, FITC, GFP, Live/Dead Green, LysoTracker Green, MitoTracker Green, PKH67, Spectrum Green, SYTO13, YFP
検出チャネル B4 A4 C4 D4 D4
583/24�(571~ 595)
BUV563, BV570, QD565, QD585
BV570, QD565, QD585
AF555, Cy3, DSRed, PE, PKH26, SYTOX Orange
AF532, AF555, Cy3, PE, SYTOX Orange
AF546, DsRed, dTomato, Dylight549, DyLight550, PE, PKH26, Spectrum Orange
検出チャネル B5 A5 C5 D5 D5
611/31�(596~ 627)
BV605, eFluor625, QD605, QD625
BV605, eFluor625, QD605, QD625
Fura Red, PE-AF610, PE-CF594, PE-Dazzle594, PE-TexRed, PI, RFP
7-AAD, ECD, PE-AF610, PE-CF594, PE-Dazzle594, PE-TexRed, TexRed
7-AAD, AF568, AF594, DyLight 594, ECD, Live/Dead Red, mCherry, PE-CF594, PE-Dazzle594, PE-TexRed, RFP, TexRed
検出チャネル B6 A6 C6 D6 D6 B6
702/87�659~ 746
BUV661, BV650, BV711, eFluor650, eFluor700, QD655, QD705
BV650, BV711, eFluor650, eFluor700, QD655, QD705
7-AAD, BB700, DRAQ5, Fura Red, PE, PE-AF647, PE-Cy5, PE-Cy5.5, PerCP, PerCP-Cy5.5, PI
7-AAD, DRAQ5, Dylight633, mPlum, PE, PE-AF647, PE-Cy5, PE-Cy5.5, PI
DRAQ5, mPlum, PE, PE-AF647, PE-Cy5, PE-Cy5.5
AF647, AF660, AF680, AF700, APC, APC-Cy5.5, Cy5, Dylight633, Dylight649, Dylight680
検出チャネル B1 A1 C1 D1 D1 B1 C1 A1
773/56�(705~ 761)
BV786, QD800
BV786, QD800 PE-Cy7, PE-Fire780
PE-AF750, PE-Cy7, PE-Fire780
PE-AF750, PE-Cy7, PE-Fire780
AF750, APC-AF750, APC-Cy7, APC-Fire750, APC-H7
AF-750, AF790, APC-AF750, APC-Cy7, APC-Fire750, CF790, Cy7, Dylight750, PE-AF750
SSC
上記表で同番号の検出チャネル同士は共有されます。例:励起波長 532nm による蛍光検出チャネル D4 と、励起波長 561nm による蛍光検出チャネル D4( で表示されています) 励起波長 375nm による蛍光検出チャネル B1 と、励起波長 642nm による蛍光検出チャネル B1( で表示されています)蛍光色素の詳細は該当メーカーの製品情報を必ずご確認ください。
8
データ取得と解析用ソフトウェア
■データ取得ソフトウェア
■解析ソフトウェア
データ取得ソフトウェアには、煩雑さを回避する様々な工夫が施されており、ボタンひとつで装置の立ち上げやキャリブレーションが可能です。また、測定サンプルの蛍光像がリアルタイムで表示されるため、画面上で確認しながら測定条件の最適化を実施いただけます。
21CFRPart11 に対応
サンプルロードと計測●��測定フォーマットの選択
・マイクロチューブ・オートサンプラー
セッティング操作●��パラメータ:�カウント数、流速●��レーザー出力●��蛍光色素表の表示
サンプルリスト
スタートアップ/シャットダウン●��ワンクリックの簡単操作
・スタートアップ・シャットダウン●��キャリブレーション
・レーザー調整・バックグランドノイズ除去・フローコア調整等
解析用ディスプレイドットプロットバックゲーティング、マルチファイル分析、コンペンセーション補正、統計値の算出と PDF 出力、ヒストグラム、密度勾配表示、オーバーレイ等を解析ディスプレイ上で実施いただけます。
ツールバー●��測定ファイルのオープン●��イベントギャラリーの確認●��各操作アイコンへのアクセス
ドットプロットバックゲーティング
マルチファイル分析 コンペーンセーション補正
統計値の算出と PDF 出力
アイコンで視覚化された操作ボタン自動キャリブレーション
9
~データ取得時の便利機能~
蛍光像からダブレット・凝集体の判別が可能
イベントギャラリーはフローセル中を流れる測定物の蛍光像を示すインターフェースです。蛍光像からダブレットや凝集体を確認しながらイベント取得することで、正確なシングルセル解析を実施いただけます。各測定物の蛍光情報は数値化され、一般的なパラメータである Intensity に加えて、3 種類の形態パラメータ(Aspect ratio, Area, Raw max. pixel:下記参照)をご利用いただけます。
Aspectratio解析対象領域に外接する楕円を設定し、その短径 / 長径比の数値を算出します。短径 / 長径比が 1 に近いほど対象物が円形に近いことを表します。
Area対象物の面積を算出します。
Rawmax.pixel検出感度の調整時に蛍光飽和度の指標として用います。
イベントギャラリー
便利な3つの形態パラメータ
1
0.8
0.6
0.4
0.2
0
0 2e+4 4e+4
FSC
Aspe
ct R
atio
6e+4 8e+4 1e+5
Singlet93.78%
Aggregate0.44%
Doublet2.48%
1
0.8
0.6
0.4
0.2
0
0 2e+4 4e+4
FSC
Aspe
ct R
atio
6e+4 8e+4 1e+5
Singlet93.78%
Aggregate0.44%
Doublet2.48%
1
0.8
0.6
0.4
0.2
0
0 2e+4 4e+4
FSC
Aspe
ct R
atio
6e+4 8e+4 1e+5
Singlet93.78%
Aggregate0.44%
Doublet2.48%
1
0.8
0.6
0.4
0.2
0
0 2e+4 4e+4
FSC
Aspe
ct R
atio
6e+4 8e+4 1e+5
Singlet93.78%
Aggregate0.44%
Doublet2.48%
シングレット
ダブレット
凝集体(アグリゲーション)
FSC Area
イベント数
Jurkat K562
0
0
1
2
3
300 600
10
ご注文情報
製品仕様基本システム 488 nm レーザー , 785 nm レーザー(SSC 用), 450 nm LED (FSC 用)オートサンプラー , TDI CCD
追加搭載可能な励起レーザーオプション 375 nm, 405 nm, 532 nm, 561 nm, 642 nm, 730 nm の各励起レーザー
チャネル数 最大 22 チャネル(20 種類の蛍光と FSC, SSC)
イベント数 20,000 cells/ 秒(トリ赤血球核を用いた測定)
蛍光検出感度 FITC <10 MESFPE <5 MESF
散乱光解像度 FSC <300 nm (FSC 用 LED(450 nm)を用いた場合)SSC <200 nm (SSC 用レーザー(785 nm)を用いた場合)
流速 3.66 µL/min (Low speed/high sensitivity)14.64 µL/min (High speed)
絶対数カウント 可能
CV (precision) <3%
パラメータ 4種類(Intensity, Area, Aspect ratio, Raw max. pixel)
サンプルフォーマット 1.5 mL マイクロチューブ及び 96 ウェルプレート
ダイナミックレンジ 7 decades
寸法(W × D × H) 44.0 × 62.5 × 49.5 cm
重量 48 kg
ご注文情報ご注文の際は据付設置費を併せてご注文ください。
CellStream�システム カタログ番号CellStream 1 レーザーシステム(基本システム)※ 1
CS-100196 標準装備: 488 nm レーザー , 785 nm レーザー(SSC 用), 450 nm LED (FSC 用)オートサンプラー , TDI CCD据付設置費 CS-600200
※ 1 励起レーザーの増設により最大 22 チャネルまでご使用いただけます。
オプション製品名 カタログ番号Custom Option 375 nm Laser CS-200375Custom Option 405 nm Laser CS-200405Custom Option 532 nm Laser CS-200532Custom Option 561 nm Laser CS-200561Custom Option 642 nm Laser CS-200642Custom Option 730 nm Laser CS-200730CellStream ™ IQOQ Document CS-600250
キャリブレーション試薬製品名 カタログ番号CellStream ™ Calibration Reagent CS-400104
11
サービスプラン
サービスプランは、CellStream の性能を維持し、安心してご使用いただくため、定期的な保守と修理サポートを提供するものです。
2年目 3年目 4年目 5年目 6年目1年目ご購入
保証期間
最長6年間(購入時保証1年+1年単位で最長5年間)のサポートをご提供します。
サービスプラン対象期間
サービスプラン内容 /対象製品 ご購入後の1年間の保証期間 トータルサポートプラン サポートプラン 点検プラン
定期点検作業 なし 年 1 回 年 1 回 年 1 回
年1回の基本的な修理 なし なし 年 1 回 なし
修 理:作業費・交通費1 年間無償 1 年間無償
すべて有償 すべて有償
修 理:修理部品費 すべて有償 すべて有償
・各サービスプランの希望販売価格はレーザー搭載数ごとに異なります。 ・トータルサポートプランまたはサポートプランを年単位で 2 年分以上を一括でご購入いただくと、お求め安い希望販売価格を提案させていただきます。 (例:2 年分を一括でご購入の場合:希望販売価格から 5%OFF、3 年分以上を一括でご購入の場合:希望販売価格から 10%OFF)
各サービスプランについては別途お見積りをいたしますので、弊社までご連絡ください。(TEL:03-5545-7444)
ご注意・ 故障による試薬や実験消耗品および測定データの補償は含まれません。 ・ 使用上の不注意・不慮の災害や異常環境下での使用による不具合および移設の対応は含まれません。 ・ 付属のコンピュータについては各社の保証期間に従います。このため弊社のサービスプランには含まれません。 ・ 原則として弊社休業日を除く午前 9 時から午後 5 時の対応といたします。 ・ サービスプラン対象機種は日本にて使用、設置されている機器に限らせていただきます。
44 cm
62.5 cm
49.5 cm
約120 cm
44 cm
17cm
55 cm
47 cm
45 cm
61 cm
Flowsight
49 . 5 cm
Windows コンピュータ 制御コンピュータ
34 cm
・同梱されている電源コード等は本製品以外の電気機器では使用出来ません。 ・機器および付属 PC の仕様は予告なく変更する場合があります。予めご了承ください。
FCM006-1907-LNXJP
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