EFECTO INMUNOMODULADOR DE Cannabis sativa L, SOBRE LA POLARIZACIÓN DE MACRÓFAGOS M1, OBTENIDOS DE PACIENTES CON ARTRITIS REUMATOIDE.

Xandy M. Rodríguez M 1,2., Andrés F. Moreno V 1,2., Natalia Guevara M 1,2., Antonio L. Mejía P 3., Luis M. Pombo O 3 ., Renato A. Guzmán M 4 ., Sandra P. Santander G 1,2,3 *1 Grupo de investigación de Fitoinmunomodulación. 2 Semillero de Inmunomodulación y actividad antitumoral de productos de origen natural. 3 Grupo de Investigación en Farmacología Vegetal y Terapéuticas Alternativas (GIFVTA). 4 Instituto de Enfermedades

Autoinmunes Renato Guzmán (IDEARG).Facultad de Medicina. Fundación Universitaria Juan N. Corpas, Carrera 111 No.159 A 6. E-mail: paola.santander@juanncorpas.edu.co*

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INTRODUCCIÓNLa artritis reumatoide (AR) es una enfermedad autoinmune, crónica e inflamatoria, y aunque actualmente existen diferentes esquemas terapéuticos, los efectos secundarios asociados con el tratamiento; han llevado a buscar nuevas alternativas terapéuticas. En este aspecto, se ha venido investigando la importancia del sistema endocannabinoide (SEC) y su capacidad de regular el sistema inmune, a través de receptores de este, como el CB1, CB2, PPAR y TRPV1, que pueden interactuar con metabolitos obtenidos de Cannabis sativa L, como los cannabinoides: THC, CBD, CBG y terpenos (α-pinene y caryophyllene), entre otros. Con base en estas observaciones, el objetivo de este trabajo es el de analizar la actividad inmunomoduladora de diferentes quimiotipos de Cannabis, sobre macrófagos activados (M1), obtenidos de pacientes con AR.

JUSTIFICACIÓNEn este tipo de enfermedades que son altamente prevalentes e incapacitantes en la población, es importante encontrar una forma de modular la respuesta autoinmune sin generar daños colaterales en el organismo. Diversas investigaciones se han venido realizando para determinar la modulación en AR en diferentes líneas celulares, pero pocos sobre macrófagos pro-inflamatorios humanos, el cual es determinante en el desarrollo y mantenimiento de esta enfermedad. Aunque se ha demostrado inmunomodulación en AR por parte de CBD, THC y terpenos del Cannabis, no se ha comprobado si efectivamente, puede modular la diferenciación del fenotipo macrófago tipo M1 hacia a tipo M2, el cual es antiinflamatorio.

Cannabis sativa L

Citometría de Flujo

Pacientes con Artritis Reumatoide

n: 6 Tto Biológicos n: 6 Tto No Biológicos

Controles sanos

DiferenciaciónMacrófagos

Obtención de Mononucleares

de Sangre periférica.

Extracción por fluidos supercríticos

Análisis gases masasThermo Trace 1300

Espectrómetro de masas ISQ LT

ExtractosCannabisTHC:CBD

LPSCpG

FSC-GM

Análisis de actividad Inmunomoduladora sobre

PBMC+PHA

MTT

Figura 1. Determinación de la actividad inmunomoduladora sobre PBMCs de los extractos M1 y M4.

Tabla 1. Tabla comparativa de la actividad anti-proliferativa (IC50) de los extractos M1 a M4 sobre PBMCs.

Figura 2. Determinación de la actividad inmunomoduladora de M1 y M4 sobre PBMCs de tres pacientes.

Figura 3. Análisis del contenido de metabolitos de los extractos M1 y M4 de Cannabis sativa L, con mayor actividad inmunomoduladora.

M1THC:CBD

1:2,3

M4THC:CBD

1:2,5

Los extractos de Cannabis analizados, tienen efecto antiinflamatorio en las células de pacientes con AR. Este efecto inmunomodulador concuerda con lo que previamente se ha observado en la literatura, en el que la presencia de metabolitos como el CBD y terpenos, regulan la actividad de diferentes células del Sistema inmune 1. Fernández-Ávila DG, Rincón-Riaño DN, Bernal-Macías S, Gutiérrez Dávila JM, Rosselli D. Prevalencia de la artritis reumatoide en Colombia según información del Sistema Integral de Información de la Protección Social. Rev Colomb Reumatol. 2019 Apr 1;26(2):83–7.2. Atakan Z. Cannabis, a complex plant: different compounds and different effects on individuals. Ther Adv Psychopharmacol. 2012 Dec;2(6):241–54.3. Mbvundula EC, Bunning RAD, Rainsford KD. Arthritis and cannabinoids: HU-210 and Win- 55,212-2 prevent IL-1alpha-induced matrix degradation in bovine articular chondrocytes in-vitro. J Pharm Pharmacol. 2006 Mar;58(3):351–8.

BIBLIOGRAFÍA

RESULTADOS PRELIMINARESLos Extractos M1 y M4 tienen actividad antiproliferativa en PBMC de controles, con una IC50 entre 44 y 67 ug/ml y de 50 a 58 ug/ml , respectivamente. De forma importante se observó, que estos mismos extractos tienen mayor actividad sobre los PCBMCs de pacientes con AR, con una IC50 de 25 y 50 ug/ml y de 12,5 a 50 ug/ml, respectivamente. En cuanto a la composición de metabolitos de los extractos, pudimos establecer que el efecto inmunomodulador está determinado al parecer por la cantidad de cannabinoides como THC, CBD y así como terpenos quienes tienen efecto antiinflamatorio.

RESULTADOS ESPERADOSMETODOLOGÍAPoblación estudio

CONCLUSIONES

Aspectos éticos: INVESTIGACIÓN CON RIESGO MÍNIMO, sustentado en la Resolución N° 008430 de 1993 (4 de octubre de 1993) del Minsalud de la República de Colombia y se acoge a lo estipulado en la ley 1787 de 2016, título 11 de la Parte 8 del Libro 2 del Decreto 780 de 2016.