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R. Bras. Ci. Solo, 33:563-570, 2009 EFEITO DA INTERAÇÃO DO NICOSULFURON E CHLORPYRIFOS SOBRE O BANCO DE SEMENTES E OS ATRIBUTOS MICROBIANOS DO SOLO (1) Taciane Almeida de Oliveira (2) , José Barbosa dos Santos (3) , Gessimar Nunes Camelo (4) , Rafael Grossi Botelho (5) & Thiago Magalhães de Lázari (6) RESUMO Considerando o período de competição de plantas daninhas e a incidência da lagarta-do-cartucho na cultura do milho, há necessidade de aplicação, em curto intervalo de tempo, de herbicidas e de inseticidas, principalmente o nicosulfuron e o chlorpyrifos. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da aplicação sequencial do nicosulfuron e do chlorpyrifos sobre a emergência de plântulas do banco de sementes, a taxa de desprendimento de CO 2 (respiração basal) e o C da biomassa microbiana (CBM) do solo. Foi realizada aplicação sequencial, em solo, do nicosulfuron (doses de 0 a 64 g ha -1 ) associado ou não ao chlorpyrifos (0 e 240 g ha -1 ). Aos 20, 40 e 60 dias após a aplicação (DAA) dos produtos, todas as plântulas emergidas do banco de sementes foram identificadas em nível de espécie, sendo estimadas a frequência, densidade e abundância, além do índice de valor de importância (IVI). Aos 60 DAA, determinou-se também a taxa de desprendimento de CO 2 , o CBM e o quociente metabólico (qCO 2 ), por meio da relação entre o CO 2 acumulado e o CBM total do solo. A aplicação alterou severamente a massa de plântulas secas e o número de espécies nas doses superiores a 20 g ha -1 do nicosulfuron. Na presença do herbicida, as espécies com maior IVI foram Boehavia diffusa e Commelina benghalensis. Quanto aos bioindicadores do solo, foi observado decréscimo na taxa da respiração basal do solo com o aumento da dose aplicada do nicosulfuron associado ao chlorpyrifos, sem efeito na ausência do inseticida. Houve decréscimo linear no CBM em todos os casos, independentemente da aplicação do chlorpyrifos; entretanto, observou-se uma taxa de decréscimo 4,5 vezes maior para o solo que recebeu esse inseticida em conjunto com o nicosulfuron. A avaliação do qCO 2 confirmou o efeito negativo da aplicação do inseticida e do herbicida. (1) Recebido para publicação em setembro de 2008 e aprovado em março de 2009. (2) Mestranda em Entomologia, Laboratório de Pedobiologia, Instituto Nacional de Pesquisas da Amazônia – INPA. Av. Efigênio Sales 2239, Aleixo, CEP 69060-020 Manaus (AM). E-mail: [email protected] (3) Professor do Departamento de Agronomia da Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri – UFVJM. Campus II, Rod. MGT 367, Km 583, CEP 39100-000 Diamantina (MG). E-mail: [email protected] (4) Mestrando em Fitotecnia, Departamento de Fitotecnica, Universidade Federal de Viçosa – UFV. Av. PH Rolfs s/n. CEP 36570- 000 Viçosa (MG). E-mail: [email protected] (5) Pós-Graduando do curso de Ciências Biológicas, Universidade Vale do Rio Doce – UNIVALE. Rua Israel Pinheiro 2000, CEP 35020-520 Governador Valadares (MG). E-mail: [email protected] (6) Engenheiro-Agrônomo, UNIVALE. E-mail: [email protected]

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    R. Bras. Ci. Solo, 33:563-570, 2009

    EFEITO DA INTERAO DO NICOSULFURON E

    CHLORPYRIFOS SOBRE O BANCO DE SEMENTES

    E OS ATRIBUTOS MICROBIANOS DO SOLO(1)

    Taciane Almeida de Oliveira(2), Jos Barbosa dos Santos(3), Gessimar Nunes

    Camelo(4), Rafael Grossi Botelho(5) & Thiago Magalhes de Lzari(6)

    RESUMO

    Considerando o perodo de competio de plantas daninhas e a incidncia da

    lagarta-do-cartucho na cultura do milho, h necessidade de aplicao, em curto

    intervalo de tempo, de herbicidas e de inseticidas, principalmente o nicosulfuron

    e o chlorpyrifos. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da aplicao sequencial

    do nicosulfuron e do chlorpyrifos sobre a emergncia de plntulas do banco de

    sementes, a taxa de desprendimento de CO2 (respirao basal) e o C da biomassa

    microbiana (CBM) do solo. Foi realizada aplicao sequencial, em solo, do

    nicosulfuron (doses de 0 a 64 g ha-1) associado ou no ao chlorpyrifos (0 e 240 g ha-1).

    Aos 20, 40 e 60 dias aps a aplicao (DAA) dos produtos, todas as plntulas

    emergidas do banco de sementes foram identificadas em nvel de espcie, sendo

    estimadas a frequncia, densidade e abundncia, alm do ndice de valor de

    importncia (IVI). Aos 60 DAA, determinou-se tambm a taxa de desprendimento

    de CO2, o CBM e o quociente metablico (qCO2), por meio da relao entre o CO2acumulado e o CBM total do solo. A aplicao alterou severamente a massa de

    plntulas secas e o nmero de espcies nas doses superiores a 20 g ha-1 do

    nicosulfuron. Na presena do herbicida, as espcies com maior IVI foram Boehavia

    diffusa e Commelina benghalensis. Quanto aos bioindicadores do solo, foi observado

    decrscimo na taxa da respirao basal do solo com o aumento da dose aplicada do

    nicosulfuron associado ao chlorpyrifos, sem efeito na ausncia do inseticida. Houve

    decrscimo linear no CBM em todos os casos, independentemente da aplicao do

    chlorpyrifos; entretanto, observou-se uma taxa de decrscimo 4,5 vezes maior para

    o solo que recebeu esse inseticida em conjunto com o nicosulfuron. A avaliao do

    qCO2 confirmou o efeito negativo da aplicao do inseticida e do herbicida.

    (1) Recebido para publicao em setembro de 2008 e aprovado em maro de 2009.(2) Mestranda em Entomologia, Laboratrio de Pedobiologia, Instituto Nacional de Pesquisas da Amaznia INPA. Av. Efignio

    Sales 2239, Aleixo, CEP 69060-020 Manaus (AM). E-mail: [email protected](3) Professor do Departamento de Agronomia da Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri UFVJM. Campus II,

    Rod. MGT 367, Km 583, CEP 39100-000 Diamantina (MG). E-mail: [email protected](4) Mestrando em Fitotecnia, Departamento de Fitotecnica, Universidade Federal de Viosa UFV. Av. PH Rolfs s/n. CEP 36570-

    000 Viosa (MG). E-mail: [email protected](5) Ps-Graduando do curso de Cincias Biolgicas, Universidade Vale do Rio Doce UNIVALE. Rua Israel Pinheiro 2000,

    CEP 35020-520 Governador Valadares (MG). E-mail: [email protected](6) Engenheiro-Agrnomo, UNIVALE. E-mail: [email protected]

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    Conclui-se que a aplicao de chlorpyrifos + nicosulfuron promove impacto

    negativo sobre o banco de sementes e sobre a atividade microbiana do solo.

    Termos de indexao: agrotxico, carbono da biomassa microbiana, impacto

    ambiental, sinergismo.

    SUMMARY: EFFECT OF SEQUENTIAL NICOSULFURON ANDCHLORPYRIFOS APPLICATION ON SEED BANK AND SOIL

    MICROBIAL CHARACTERISTICS

    In the period of competition of weeds and the incidence of fall armyworm in the corn cropthere is a need for herbicide and insecticide such as nicosulfuron and chlorpyrifos applicationwithin short time intervals. The aim of this study was to evaluate the effect of sequentialapplications of nicosulfuron and chlorpyrifos on the emergence of seedlings of the seed bank inthe soil, the basal CO2 emission rate, and the microbial biomass carbon (MBC) of soil.Sequential applications of nicosulfuron (doses from 0 to 64 g ha-1) with or without chlorpyrifos(0 and 240 g ha-1) were performed. At 20, 40 and 60 days after application (DAA) of theproducts, the species of all seedlings that emerged from the seed bank were identified, and thefrequency, density and abundance estimated, as well as the importance value IV. Sixty DAAthe CO2 emission rate and CBM were were also determined, and based on the relationshipbetween the accumulated CO2 and total soil MBC the metabolic coefficient (qCO2) was estimated.The application of nicosulfuron rates of over 20 g ha-1 severely affected the seedling dry weightand number of species. In the presence of the herbicide, the species with highest IV wereBoehavia diffusa and Commelina bengalensis. There was a decrease in the basal soilrespiration rate with increasing nicosulfuron doses, in the presence as well as in the absence ofthe insecticide chlorpyrifos. There was a linear decrease in MBC in all cases regardless of thechlorpyrifos application, although the reduction was 4.5 times greater in soil that received thecombined application of the insecticide and nicosulfuron. The qCO2 confirmed the negativeeffect of the application of insecticide and herbicide. It was concluded that the application ofchlorpyrifos + nicosulfuron causes a negative impact on the seeds in the soil and the soil

    microbial activity.

    Index terms: pesticides, microbial biomass carbon, environmental impact, synergism.

    INTRODUO

    Plantas, animais e microrganismos que vivem emdeterminada rea esto estreitamente ligados por umarede complexa de relaes, afetadas direta ouindiretamente pelas atividades agrcolas, nos seusmais diferentes segmentos (Moreira et al., 1996).Nesse sentido, a aplicao de agrotxicos nocompartimento solo tem papel marcante na mudanade ecossistemas. Considerando o perodo crtico decompetio de plantas daninhas e a incidncia dalagarta-do-cartucho na cultura do milho, observadaa necessidade de aplicao, em curto intervalo detempo, de herbicidas e de inseticidas, com destaquepara o nicosulfuron e o chlorpyrifos, respectivamente(Silva et al., 2005). Com a introduo do sistema deintegrao lavoura-pecuria e demais sistemas deconsorciao, esses produtos vm sendo utilizados demaneira integrada, em razo da necessidade dediminuio dos custos de aplicao.

    Nesse contexto, pesquisas j apresentaramresultados negativos da aplicao da mistura entre oherbicida nicosulfuron e o inseticida chlorpyrifos,quando aplicados simultaneamente sobre plantas demilho em consrcio com braquiria (Pereira et al.,2005; Silva et al., 2005; Nicolai et al., 2006). Pelo efeito

    sinergstico da mistura, o herbicida, antes seletivo aomilho, apresenta efeitos txicos sobre este. No entanto,no foram avaliadas as consequncias dessa prticano que se refere s espcies presentes na rea sob aforma de sementes no solo (banco de sementes do solo).O banco de sementes fornece informaes sobre ascondies ambientais e prticas culturais anteriores,sendo importante fator na determinao do suprimentode novos indivduos para as comunidades locais(Templeton & Levin, 1979a; Monquero & Christoffoletti,2005).

    Uma proposta para predizer os efeitos negativosde prticas agrcolas no solo e na gua o uso debioindicadores, preferencialmente os microbianos(Ttola & Chaer, 2002). Nesse sentido, a atividademicrobiana do solo pode fornecer informaes sobre aestabilidade da comunidade de organismos, visto a suacomprovada sensibilidade a distrbios no solo provo-cados por diferentes sistemas de manejo (Chaer &Ttola, 2007; Pereira et al., 2007; Rangel & Silva,2007).

    A avaliao da taxa de respirao, e a quantificaoda biomassa microbiana e da relao entre estes,denominada quociente metablico (qCO2), estodiretamente relacionadas ao fato de que, medida queos microrganismos do solo se tornam mais eficientesna utilizao dos recursos do ecossistema, menor

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    quantidade de C se perde como CO2 pela respirao emaior proporo incorporada s clulas microbianas(Anderson & Domsch, 1985). O efeito txico dosprodutos nicosulfuron e chlorpyrifos nosmicrorganismos do solo j foi relatado em outrostrabalhos (Oliveira et al., 2003; Jakelaitis et al., 2007).

    Dessa forma, o objetivo deste trabalho foi avaliar oefeito da aplicao sequencial do nicosulfuron e dochlorpyrifos sobre a emergncia de plntulas do bancode sementes e sobre os microrganismos do solo.

    MATERIAL E MTODOS

    O trabalho foi realizado em casa de vegetao elaboratrio pertencente Faculdade de CinciasAgrrias-FAAG da Universidade Vale do Rio Doce UNIVALE. Amostras de solo foram coletadas em reacom histrico de cultivo do milho, porm sem resduode herbicidas e, ou, inseticidas nos ltimos trs anos.Por ocasio dessa coleta, a vegetao predominantefoi constituda por Boehavia diffusa, Commelinabenghalensis e Euphorbia heterophylla, todas emestdio inicial de desenvolvimento. Aps a coleta dasamostras, na profundidade de 010 cm e peneiramentoem malha de 4 mm2, foram preenchidos vasos de PVCcom capacidade para 2 L, previamente forrados comsacos plsticos. Visando expresso dos resultadosem nmero de plntulas por m2, estabeleceu-se, paracada unidade experimental (vaso), uma profundidadede 10 cm de substrato, correspondendo quela camadaretirada no campo. Os tratamentos foram compostospela combinao de seis doses do herbicida nicosulfuron(0, 8, 16, 32, 48 e 64 g ha-1) e duas doses do inseticida(0 e 240 g ha-1), aplicadas separadamente. Odelineamento adotado foi inteiramente casualizado,com quatro repeties, totalizando 48 vasos.

    Para aplicao dos agrotxicos, foi utilizado umpulverizador costal pressurizado com CO2, aplicandoo equivalente a 200 L ha-1 de calda. Aos 20, 40 e 60 diasda aplicao, as plntulas emergidas foram coletadase classificadas quanto a famlia, gnero e espcie,sendo, posteriormente, secas em estufa (75 C/72 h) epesadas, com valores de massa total expressos emgramas por unidade de rea. Aps cada avaliao, aos20 e 40 dias, os substratos nos vasos eram revolvidos,possibilitando, assim, a emergncia de novasplntulas.

    Aps a classificao final das plantas, a partir dosdados de espcies totais presentes por tratamento,foram estimados frequncia (distribuio das espciesnas unidades experimentais), densidade (quantidadede plantas de cada espcie por unidade de rea,abundncia (concentrao das espcies em funo dostratamentos), frequncia relativa, densidade relativae abundncia relativa (relao de cada espcie com asoutras espcies encontradas na rea) e ndice de valorde importncia (importncia das espcies dentro darea estudada) (Mueller-Dombois & Ellenberg, 1974).

    Aos 60 DAA, foram retiradas amostras de solo emcada unidade experimental, para determinao dosindicadores microbianos. A atividade microbiana foiestimada a partir da quantidade de CO2 liberado poramostras de 150 g do solo de cada vaso, o qual foicapturado em frascos contendo 20 mL de NaOH (0,5mol L-1), em sistema fechado. As amostras de solo,aps secas ao ar e peneiradas em malha de 4 mm2,foram submetidas determinao do teor de gua eincubadas por 17 dias com umidade em torno de 65 %da capacidade de campo. Aps incubao, procedeu-se titulao do NaOH com HCl (0,25 mol L-1),determinando-se o excesso de NaOH que no reagiucom o CO2 liberado (Anderson, 1982).

    No final do perodo de incubao das amostras desolos, foram determinados o C da biomassa microbiana(CBM), pelo mtodo descrito por Vance et al. (1987),utilizando, em lugar do clorofrmio (fumigao), fornode micro-ondas (irradiao) (Islam & Weil, 1998;Ferreira et al., 1999), e o quociente metablico (qCO2),por meio da relao entre o CO2 acumulado e o C totalda biomassa microbiana.

    Com as mdias obtidas dos tratamentos, fez-seanlise de varincia, sendo determinadas regressesrelacionando doses do herbicida na presena e ausnciade inseticida, produo de massa seca de plntulas eindicadores microbiolgicos do solo. As significnciasdas equaes de regresso foram testadas pelo teste t(1 %).

    RESULTADOS

    Considerando as trs pocas de amostragem dasplntulas (20, 40 e 60 dias), em relao ao aumentoda dose de herbicida aplicada, foi observado decrscimoexponencial na massa total seca, sendo maior que 50 %a partir da dose aproximada de 8 g ha-1 (Figura 1). A

    Figura 1. Massa total de plntulas secas provenientes

    do banco de sementes, coletadas aos 20, 40 e

    60 dias aps a aplicao de doses do nicosulfuron

    com e sem a aplicao simultnea do inseticida

    chlorpyrifos.

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    mistura ao chlorpyrifos no provocou grande mudananesse comportamento at a dose aproximada de20 g ha-1, a partir da qual a massa seca foi reduzidaacentuadamente (Figura 1).

    Quanto s caractersticas fitossociolgicas(Quadro 1), pode-se observar o efeito residual doherbicida, considerando a acentuada diminuio donmero total de indivduos (NTI) das parcelas que

    Quadro 1. Principais espcies de plantas daninhas e respectivas caractersticas fitossociolgicas,

    provenientes do banco de sementes, emergidas em solo submetido a diferentes doses do nicosulfuron

    com e sem a aplicao simultnea do inseticida chlorpyrifos. Avaliao resultante do somatrio de trs

    pocas de amostragem (20, 40 e 60 dias aps aplicao dos produtos)

    (1) Plntulas: total de espcies presentes por tratamento avaliado, evidenciando-se duas com maior ndice de valor de importncia(IVI). NTI: nmero total de indivduos, NPP: nmero de parcelas presentes, FRE: frequncia, DEN: densidade, ABU: abundn-cia, FRR: frequncia relativa, DER: densidade relativa, ABR: abundncia relativa e IVI: ndice de valor de importncia; NTI:unidades; NPP: unidades; FRE: ocorrncia/total de parcelas; DEN: plntulas/m2; ABU: NTI/NPP; FRR: (FRE x 100) FRE; DER:(DEN x 100) DEN; ABR: (ABU x 100) ABU; IVI: FRR + DER + ABR.

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    continham o produto, mesmo na menor dose testada.Entre as observaes, destaca-se a densidade (DEN)das espcies vegetais, varivel esta que foi maisimportante na determinao da importncia dasespcies. Optou-se pela apresentao das duas espciesde maior importncia em cada tratamento, sendo asdemais agrupadas como outras espcies (Quadro 1).Em solo sem aplicao de inseticida, B. diffusa (erva-tosto) foi a espcie mais frequente, apresentandotambm densidade superior em todas as parcelas como herbicida, resultando no maior ndice de valor deimportncia (IVI = 136). Neste trabalho, as demaisespcies de maior importncia (IVI > 30) foramMollugo verticillata (molugo), Commelina benghalensis(trapoeraba), Euphorbia heterophylla (leiteiro) eAmaranthus hybridus (caruru-roxo) (Quadro 1). Entreessas, C. benghalensis aparece com maior frequnciaque as demais.

    Foi observado decrscimo na taxa de respiraobasal do solo com o aumento da dose aplicada donicosulfuron associado ao chlorpyrifos, sem efeito naausncia do inseticida. Com o aumento de cada unidade(g) na dose do herbicida aplicado ao solo, a respiraodiminuiu a uma taxa de 0,0011 mg dia-1, evidenciadopelo coeficiente angular da reta (p < 0,05) (Figura 2).Para o solo isento de inseticida, no foi observadavariao nos valores de CO2, permanecendo a taxafixa de 0,185 mg de C na forma de CO2 por dia,independentemente da dose aplicada do nicosulfuron(Figura 2).

    Avaliando o C da biomassa microbiana (CBM),verificou-se efeito negativo do herbicida sobre osmicrorganismos do solo, de maneira mais acentuadaquando em mistura com o chlorpyrifos. Em ambos oscasos, o decrscimo no CBM foi linear, porm a umataxa 4,5 vezes maior para as amostras de solo quereceberam a aplicao simultnea de inseticida eherbicida (Figura 3). Enquanto para as amostras

    Figura 2. Atividade respiratria basal do solo

    determinada em amostras de solo, 75 dias aps

    a aplicao de doses do herbicida nicosulfuron,

    combinadas ou no com o inseticida chlorpyrifos

    (240 g ha-1). D = doses; *: significativo pelo teste t

    a 5 %.

    Figura 3. Carbono da biomassa microbiana (CBM) de

    amostras de solo, 75 dias aps a aplicao de

    doses do herbicida nicosulfuron em diferentes

    doses, isolado ou simultaneamente ao insetici-

    da chlorpyrifos (240 g ha-1). D = doses; *: signifi-

    cativo pelo teste t a 5 %.

    Figura 4. Quociente metablico de amostras de solo

    determinado 75 dias aps a aplicao de doses

    do herbicida nicosulfuron em diferentes doses,

    isolado ou simultaneamente ao inseticida

    chlorpyrifos (240 g ha-1). D = doses; ** e *: signifi-

    cativo pelo teste t a 10 e 5 %, respectivamente.

    isentas de agrotxicos o valor de CBM foi de 321,45mg g-1 de C, no solo que recebeu a maior combinao(64 g ha-1 de nicosulfuron + 240 g ha-1 de chlorpyrifos)esse valor diminuiu para cerca de 29 mg g-1 de C(Figura 3).

    Relacionando-se o C-CO2 com o CBM (qCO2), paraamostras de solo tratadas com o nicosulfuron echlorpyrifos, observou-se aumento linear de 3 x 10-6unidades por g ha-1 de nicosulfuron adicionado ao solo(Figura 4). Na ausncia do inseticida observou-se aumen-to nesse indicador, porm a uma taxa 10 vezes menor(Figura 4), indicando maior perda de C quando o in-seticida e herbicida em estudo foram aplicados emsequncia.

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    DISCUSSO

    A mistura chlorpyrifos e nicosulfuron no provocoumudanas na produo de massa secas total deplntulas avaliadas at a dose aproximada de 20 g ha-1do herbicida, a partir da qual a massa foi reduzida(Figura 1). No entanto, esse resultado pode ser poucoimportante se for considerado que no sistema deintegrao lavoura-pecuria o nicosulfuron recomendado na dose de 4 a 8 g ha-1 para retardar ocrescimento da braquiria (Jakelaitis et al., 2005;Alvarenga et al., 2006). Todavia, ao considerar arecomendao de uso desse produto de 40 g ha-1 parao controle de plantas daninhas (Rodrigues & Almeida,2005), a aplicao simultnea do chlorpyrifos alteranegativamente a reinfestao da rea a partir deplntulas do banco de sementes do solo.

    O elevado ndice de valor de importncia (IVI) daespcie B. diffusa pode ser devido ao aumento daconcentrao do nicosulfuron no solo (Quadro 1),impedindo a germinao de outras espcies ediminuindo a competio interespecfica. Nessacircunstncia, a diminuio do nmero de espciesna rea faz com que aquelas predominantes tenhammaior capacidade de crescimento e desenvolvimento e,consequentemente, maior produo de biomassa. Poroutro lado, no se descarta a hiptese de que o herbicidatenha efeito negativo sobre algum fator estressante germinao e emergncia de B. diffusa, funcionandocomo um estimulante indireto na germinao.

    Com a aplicao do chlorpyrifos, o IVI de B. diffusafoi baixo (IVI = 41) somente na dose zero denicosulfuron (Quadro 1). Fica claro o efeito txicoresidual do herbicida quando so comparadas asparcelas que receberam o produto com aquelas isentasdeste. O nmero total de indivduos (NTI) nos doistratamentos sem herbicida foi de 397 e 518 plntulaspor vaso, respectivamente, para amostras com e semaplicao do inseticida. Nas parcelas com nicosulfuron,o NTI no ultrapassou 150 plntulas (Quadro 1). Demaneira geral, o grupo qumico ao qual este produtopertence (sulfonilureias) apresenta persistnciamoderada a longa no solo, agindo em baixas doses,fisiologicamente, por meio da inibio da sntese dosaminocidos valina, leucina e isoleucina (Bridges,2003; Thill, 2003).

    Em outros trabalhos j foram observados efeitostxicos em plantas sob efeito da aplicao deinseticidas fosforados aps os herbicidas inibidores daALS (Diehl et al., 1995; Trezzi et al., 2005). As causasincluem a possvel reduo na deposio de ceraepicuticular em folhas de plantas sob efeito doinseticida fosforado (Diehl et al., 1995) ou reduo daatividade da citocromo P450, enzima responsvel pelametabolizao do nicosulfuron (Brown, 1990).

    A aplicao de agrotxicos no solo influencia todaa dinmica do ecossistema, agindo sobre as formas devida e suas relaes. O decrscimo na taxa derespirao basal do solo a partir da aplicao das doses

    do nicosulfuron, associadas ao chlorpyrifos (Figura 2),pode ser interpretado como impacto indicativo deelevada atividade biolgica, caracterstica desejvel porsignificar degradao de resduos orgnicos (incluindoagrotxicos) a nutrientes disponveis para as plantas;ou, ainda, como impacto negativo, resultado de estressemetablico na microbiota, devido presena demolculas txicas, sendo desfavorvel para muitosprocessos fsico-qumicos, como agregao, capacidadede troca de ctions e reteno de gua (Ttola & Chaer,2002). Assim, o maior desprendimento de C-CO2 podeindicar tanto um distrbio ecolgico como um alto nvelde produtividade do ecossistema (Ttola & Chaer,2002). Nesta pesquisa, a aplicao somente doherbicida no provocou mudanas na taxa derespirao basal, independentemente da dose utilizada.Esse resultado no significa ausncia de efeitos sobreos microrganismos do solo, e sim constatao de queesta varivel taxa de respirao basal do solo noconstitui indicador sensvel presena do herbicida,devendo, portanto, ser avaliada em conjunto comoutros indicadores.

    Em outros trabalhos tambm foi observado que aaplicao de herbicidas ao solo, apesar de no alterara taxa de respirao basal, provocou mudanas naquantidade de microrganismos (Santos et al., 2007).Isso pode ser devido ao estresse promovido peloxenobitico biomassa de microrganismos, fazendocom que aumentem a respirao enquanto perdemmassa na forma de CO2 (Ttola & Chaer, 2002). Dessaforma, com a diminuio da massa de microrganismose o aumento da respirao, tem-se menor eficinciano uso do C sem alteraes no desprendimento de CO2.

    Para contornar possveis interpretaes errneasa partir dos resultados da respirao basal, faz-senecessria sua avaliao juntamente com outrosindicadores, principalmente a biomassa demicrorganismos C da biomassa microbiana (CBM).Assim, observou-se decrscimo no CBM em todos ostratamentos com os produtos, porm de maneira maisacentuada para as amostras de solo tratadas com amistura de inseticida ao herbicida (Figura 3).

    Esse efeito negativo do herbicida sobre a biomassados microrganismos pode ser o resultado direto daintoxicao do princpio ativo testado (nicosulfuron)sobre seu metabolismo e, ou, efeito dos constituintesdo produto comercial. Nesse caso, a mistura dosprodutos provoca efeito sinergstico, pois a soma dosefeitos de diminuio na biomassa entre doses doherbicida e do inseticida menor do que o valorobservado no primeiro caso (Figura 3). SegundoMalkones (2000), h incoerncia nos ensaios biolgicospara testes toxicolgicos de molculas de agrotxicosa organismos no alvo, uma vez que so realizadoscom o produto tcnico e, aps registro deste no rgocompetente, o que se lana no ambiente so produtosformulados. Em trabalho realizado por Santos et al.(2005), testando a sensibilidade de trs estirpes deBradyrhizobium a oito formulaes comerciais de

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    glyphosate, foi observado que o ingrediente ativo, isentode qualquer adjuvante, causou menor intoxicao,comparado a qualquer produto formulado. Outrapossibilidade j apresentada para explicar osresultados observados em plantas a alteraoenzimtica provocada pelo inseticida ao complexocitocromo P450, como ocorre na constituio da famliade heme protenas presentes tambm em bactrias efungos (Berger, 2002).

    Para melhor entender o efeito dos produtos sobre aatividade microbiana, prope-se a avaliao conjuntado desprendimento de CO2 e do CBM, em forma derelao, por meio do quociente metablico (qCO2)(Anderson & Domsch, 1985). A avaliao do qCO2confirmou o efeito negativo da aplicao sequencial doinseticida e do herbicida. A relao entre C-CO2 e CBMaumentou a uma taxa linear de 3 x 10-5 unidadespor g ha-1 de nicosulfuron adicionado ao solo(Figura 4). Na ausncia do inseticida observou-seaumento nesse indicador, porm com acrscimo beminferior, de 3 x 10-6 unidades por g ha-1 (Figura 4).Comparando-se os coeficientes (angular da reta), emambas equaes ajustadas para os valores observadospara qCO2, observa-se taxa superior para ostratamentos com aplicao seqencial de produtos.Dessa forma, percebe-se uma ineficincia no uso do Cpelos microrganismos, porm, com taxa 10 vezessuperior quando se faz a aplicao seqencial dosprodutos (Figura 4).

    Como sugesto de manejo, a substituio donicosulfuron em lavouras onde se pretende utilizar oinseticida chlorpyrifos para controle de insetos, emfuno do resduo do herbicida no solo, pode ser umaprtica eficiente, desde que as alternativas de uso nopromovam efeito residual ao solo. Outra sugesto oestudo de novos inseticidas (triflumuron e tebufenozid,entre outros) para as aplicaes sequenciais aherbicidas pertencentes ao grupo qumico dassulfonilureias.

    CONCLUSES

    1. A aplicao de nicosulfuron e chlorpyrifostestados ao solo promove alterao na composiofitossociolgica das plntulas emergidas.

    2. O nicosulfuron, independentemente da dosetestada, no altera a respirao basal do solo, pormdiminui o C da biomassa microbiana.

    3. A aplicao sequencial do nicosulfuron echlorpyrifos apresenta efeito sinergstico, alterandonegativamente a respirao basal e o C da biomassamicrobiana do solo.

    4. A ineficincia dos microrganismos em utilizar oC do meio maior quando ao solo se faz a aplicaosequencial dos produtos testados, comparado somados efeitos da aplicao isolada.

    AGRADECIMENTOS

    Fundao de Amparo Pesquisa do Estado deMinas Gerais (FAPEMIG) e ao Conselho Nacional deDesenvolvimento Cientfico e Tecnolgico (CNPq), peloapoio financeiro realizao desta pesquisa.

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