Upload
nguyenduong
View
225
Download
6
Embed Size (px)
Citation preview
UNIVERSIDADE FEDERAL DO CEAR
FACULDADE DE MEDICINA
DEPARTAMENTO DE FISIOLOGIA E FARMACOLOGIA
PROGRAMA DE PS-GRADUAO EM FARMACOLOGIA
JOO HENRIQUE CHAVES
Efeito tipo antidepressivo e ansioltico do extrato etanlico de egletes viscosa e
de seu metablito Conizaleucolideo A: Envolvimento de mecanismos
monoaminrgicos, antioxidantes e anti-inflamatrios
FORTALEZA-CE
2016
EFEITO TIPO ANTIDEPRESSIVO E ANSIOLTICO DO EXTRATO ETANLICO DE
Egletes viscosa E DE SEU METABLITO CONIZALEUCOLIDEO A: ENVOLVIMENTO
DE MECANISMOS MONOAMINRGICOS, ANTIOXIDANTES E ANTI-
INFLAMATRIOS
Resultados da tese apresentada Coordenao do
Programa de Ps-Graduao em Farmacologia, da
Universidade Federal do Cear, como requisito parcial
para obteno do grau de doutor em Farmacologia.
Orientadora: Profa. Dra. Danielle Macdo Gaspar
FORTALEZA-CE
JOO HENRIQUE CHAVES
EFEITO TIPO ANTIDEPRESSIVO E ANSIOLTICO DO EXTRATO ETANLICO DE
Egletes viscosa E DE SEU METABLITO CONIZALEUCOLIDEO A: ENVOLVIMENTO
DE MECANISMOS MONOAMINRGICOS, ANTIOXIDANTES E ANTI-
INFLAMATRIOS
Esta tese foi submetida como requisito parcial obteno do grau de Doutor em
Farmacologia, outorgado pela Universide Federal do Cear
Aprovada em : 05/08/2016
BANCA EXAMINADORA
___________________________________________________
Profa. Dra. Danielle Macdo Gaspar (Orientadora)
Universidade Federal do Cear
___________________________________________________
Profa. Dra. Edna Maria Camelo Chaves
Universidade Estadual do Cear
___________________________________________________
Prof. Dr. Ccero Francisco Bezerra de Felipe
Universidade Federal da Paraba
___________________________________________________
Prof. Dr. Jos Eduardo Ribeiro Honrio Jnior
UNICHRISTUS
___________________________________________________
Profa. Dra. Maria Rose Jane Ribeiro Albuquerque
UNIVERSIDADE ESTADUAL VALE DO ACARA
Dedico essa tese aos meus pais,
famlia e amigos
AGRADECIMENTOS
Agradeo primeiramente Deus, por ter me permitido fazer parte dessa grande famlia que o
Laboratrio de Neurofarmacologia da UFCE.
minha famlia, que me deu a base para conseguir chegar at aqui.
Aos meus colegas de laboratrio, que me ajudaram de todas as formas. Sem eles certamente no teria
conseguido os resultados alcanados.
minha orientadora, que me auxiliou em todos os momentos dessa jornada, e que me inspirou e inspira
a sempre buscar o melhor no campo profissional e pessoal.
todos os professores do grupo de pesquisa do Laboratrio de Neurofarmacologia e aos membros das
bancas de qualificao e defesa pelo carinho e ateno para com o trabalho realizado.
CAPES pelo apoio financeiro.
Universidade Federal do Cear, por fazer parte da minha vida desde a graduao, mestrado e agora
concedendo-me o ttulo de Doutor.
A todos o meu muito obrigado!
RESUMO
EFEITO TIPO ANTIDEPRESSIVO E ANSIOLTICO DO EXTRATO ETANLICO DE Egletes viscosa E DE SEU METABLITO CONIZALEUCOLIDEO A: ENVOLVIMENTO DE MECANISMOS MONOAMINRGICOS, ANTIOXIDANTES E ANTI-INFLAMATRIOS
A espcie Egletes viscosa, da famlia Asteraceae, uma erva silvestre frequente no serto e litoral
nordestino do Brasil, popularmente designada por macela verdadeira. A planta apresenta como
principais usos problemas digestivos e intestinais, clicas, gases, azia, m digesto, diarreia e
enxaqueca. Estudos prvios levaram a relacionar possveis efeitos centrais a esta espcie vegetal.
Visando a busca por melhores alternativas teraputicas para tratamentos de depresso e ansiedade
em humanos, avaliou-se seus possveis efeitos centrais nos modelos pr-clnicos em
camundongos. Foram utilizados modelos clssicos de triagem para agentes sedativo/hipntico e
antidepressivos, como o campo aberto (CA), rota rod (RR), Labirinto em cruz elevado ou plus
maze (LCE), nado forado (TNF) e preferncia por sacarose (PS). Para esse estudo, utilizou-se o
extrato etanlico nas doses de 100 e 200 mg/kg, alm do constituinte majoritrio isolado desse
extrato, um diterpeno furnico denominado colizaleucoldeo A (CZA), nas doses de 25 e 50
mg/kg. No modelo do LCE demonstrou-se que as drogas apresentaram atividade ansioltica com
envolvimento do receptor benzodiazepnico, pois o efeito foi revertido pelo Flumazenil.
Posteriormente, foram realizados testes de avaliao do efeito antidepressivo com dois modelos
comportamentais, o TNF e PS, sendo a depresso induzida pela administrao intraperitoneal de
LPS 0,5 mg/kg. Atravs desses modelos, foi observado um efeito antidepressivo no relacionado
a ao psicoestimulante, e que parece ser mediado, pelo menos em parte, por uma interao com
os sistemas dopaminrgico (receptores D1 e D2), noradrenrgico (receptor 1) e serotonrgico
(receptores 5-HT1A). Tambm foi analisado o efeito anti-inflamatrio e antioxidante, sabidamente
relacionados fisiopatologia da depresso. Usando o lipopolissacardeo como indutor do estado
depressivo, o mesmo atuou alterando os nveis de nitrito, espcies reativas de cido tiobarbitrico
(TBARS), da enzima mieloperoxidase (MPO), bem como reduzindo os nveis de glutationa
reduzida (GSH), efeitos condizentes com o estado depressivo. Verificou-se a atuao dos
materiais extrados de E. viscosa na preveno e na reverso de alteraes no crtex pr-frontal,
hipocampo e ncleos da base de camundongos conseguiu reverter os efeitos do
Lipopolissacardeo nos parmetros estudados. Foi utilizada a imipramina na dose de 10 mg/kg
como droga padro tanto na preveno quanto na reverso do estado depressivo em animais. Os
dados obtidos sugerem efeito antidepressivo do extrato etanlico de E. viscosa assim como seu
constituinte majoritrio, CZA.
Palavras-chave: Lipopolissacardeo. Egletes viscosa. Ansiedade. Depresso.
ABSTRACT
ANTIDEPRESSANT AND ANXIOLYTIC LIKE EFFECT OF ETHANOLIC EXTRACT
OF Egletes viscosa AND ITS METABOLITE CONYZALEUCOLIDE A:
INVOLVEMENT OF MONOAMINE, ANTIOXIDANTS AND ANTI- INFLAMMATORY
MECHANISMS
The Egletes viscosa specie, from Asteraceae family, is a common wild grass in the wilderness
and the northeastern coast of Brazil, popularly known as true macela. The plant has as main uses
digestive and intestinal problems, cramps, gas , heartburn, indigestion, diarrhea and headache.
Previous studies have led to relate possible central effects of this plant species. Aiming to search
for better therapeutic alternatives for treatment of depression and anxiety in humans, it evaluated
its possible central effects in preclinical models of mice. Classic models were used in screening
for sedative / hypnotic and antidepressant agents, such as the open field (CA), rota rod (RR), plus
maze (LCE), forced swimming test (TNF) and suppression of sucrose (SC). For the study, we
used the ethanolic extract at doses of 100 and 200 mg / kg, besides the isolated major constituent
of this extract, a diterpene furan called colizaleucoldeo A, at doses of 25 and 50 mg / kg. It has
been shown that drugs presented anxiolytic and antidepressant activity. A target site to the related
anxiolytic effects is the GABA receptor, which was shown in the plus maze test with the GABA
antagonist flumazenil. Following, evaluation tests of antidepressant effect with two behavioral
models were performed, the forced swimming test (TNF) and the suppression of sucrose (SC),
having de LPS (lipopolysaccharide) intraperitoneal as the inductor of similar to depression
behaviour. Through these models, it was observed an antidepressant effect not related to
psychostimulant actions, and that seems to be mediated, at least in part by an interaction with the
dopaminergic system (D1 and D2 receptors), noradrenergic (receptor 1) and serotonin (receptor
5-HT1A). It was also analyzed the anti-inflammatory and antioxidant effects, known to be related
to the pathophysiology of depression. Using lipopolysaccharide as an inducer of the depressive
state, it changed the nitrite levels, reactive thiobarbituric acid (TBARS), the enzyme
myeloperoxidase (MPO ) as well as reduced the levels of reduced glutathione (GSH), all the
effects consistent with the depressive state. The performance of the materials extracted from E.
viscosa was found in the prevention and reversal of changes in the prefrontal cortex,
hippocampus and nucleus of base, where it could reverse the effects of lipopolysaccharide in the
studied parameters. Imipramine was used as a standard drug both in prevention and in reversing
the depressive state in animals. The data suggest the use of E. viscosa ethanol extract and the
diterpene colizaleucoldeo A as antidepressant.
Keywords: Lipopolysaccharide. Egletes viscosa. Anxiety. Depression.
LISTA DE ILUTRAES
FIGURA 1 Circuitos neuronais da ansiedade e medo 26
FIGURA 2 Ansiedade patolgica: hiperativao de circuitos ligados
amgdala
27
FIGURA 3 Receptor GABAA. 29
FIGURA 4 Correspondncia entre sintomas depressivos e circuitos 31
FIGURA 5 Esquema da composio do LPS na parede celular de bactrias
gram-negativas.
43
FIGURA 6 Mecanismo de ao simplificado do LPS em um macrfago,
culminando com a liberao de citocinas pr-inflamatrias:
45
FIGURA 7 Fotografia de Egletes viscosa Les