Efeitos Morfofuncionais do AVE 0991 em Corações

Isolados de Ratos Tratados com Isoproterenol

Aluna: Thauana Luiza de OliveiraOrientador: Prof. Dr. Anderson José

Ferreira

PAD-MorfologiaLaboratório de Biologia do Desenvolvimento

Introdução

Angiotensinogen

Angiotensin I

Angiotensin II Angiotensin-(1-7)

Angiotensin III

Angiotensin IV

Angiotensin-(1-9)

Renin

ACEChymase

ACE 2

ACE, NEP PEP, NEP

ACE2, PEP, PCP

AMP

AMP

Angiotensin-(1-5)

ACE

RENIN-ANGIOTENSIN SYSTEM

ANGANG--(1(1--7)7)

FacilitaçãoFacilitação do do BarorreflexoBarorreflexoLiberaçãoLiberação de AVPde AVPModulaçãoModulação do do tonotono simpáticosimpático

AntiAnti--proliferativaproliferativaAntiAnti--arritmogênicaarritmogênica

VasodilataçãoVasodilatação periféricaperiféricaPotenciaçãoPotenciação dada BKBKEfeitoEfeito liberadorliberador de NOde NOEfeitoEfeito liberadorliberador dede prostaglandinasprostaglandinasAntiAnti--proliferativaproliferativaAntiAnti--angiogênicaangiogênica

AumentoAumento do do fluxofluxo sangüíneosangüíneo renalrenalEfeitoEfeito variávelvariável nana reabsorçãoreabsorção de Nade Na++

AntiAnti--diuréticadiurética ouou natriuréticanatriurética((espécieespécie animal/ animal/ modelomodelo experimental/experimental/anestesiaanestesia))

ATAT22MasMasAA--779779

DD--ProPro77--AngAng--(1(1--7)7)AVE 0991AVE 0991

AVE 0991

Agonista não-peptídico do receptor Mas da ANG-(1-7);

Estimula liberação de NO pelas células endoteliais de aorta bovina e compete com a 125I-ANG-(1-7) pela ligação ao receptor Mas (Wiemer et al., 2002);

AVE 0991 Efeito similar ao da ANG-(1-7) em

camundongos que receberam sobrecarga hídrica e liberação de NO por células CHO que expressam o receptor Mas (Pinheiro et al.,

2004); Estimula a liberação de NO e promove

vasodilatação dependente do endotélio em segmentos de aorta de camundongos, e essas ações são completamente abolidas por antagonistas do receptor Mas ou por sua deleção (Lemos et al., 2005).

IsoproterenolUm modelo de hipertrofia e

insuficiência cardíaca

Agonista β-adrenérgico não-seletivo: vasodilatação periférica e aumento da freqüência cardíaca;

Aumento do consumo de oxigênio predispõe o coração a danos isquêmicos (Grimm et al., 1998);

Edema, infiltrado celular e fibrose: déficit de contratilidade (Beznak et al., 1963);

Acentuada necrose dos cardiomiócitos: insuficiência cardíaca (Grimm et al., 1998).

ObjetivosObjetivo geral :• Estudar os efeitos morfofuncionais do

AVE 0991 em corações isolados de ratos tratados com isoproterenol.

Objetivos específicos :• Determinar os efeitos do agonista do

receptor Mas da ANG-(1-7), AVE 0991, na função cardíaca de ratos tratados com isoproterenol.

• Avaliar o papel do NO na ação do AVE 0991 na função cardíaca de ratos tratados com o isoproterenol.

• Analisar qualitativamente o colágeno perivascular e intersticial em ventrículo esquerdo de corações de ratos controle, tratados com isoproterenol e com isoproterenol + AVE 0991 utilizando -se a coloração Picro Sírius;

• Analisar qualitativamente o colágeno perivascular e intersticial em ventrículo esquerdo de corações de ratos controle, tratados com isoproterenol e com isoproterenol + AVE 0991 utilizando-se a coloração Tricrômico de Masson;

Metodologia

Salina0,1 ml/Kg

i.p.

Água0,5 ml

gavagem

Isoproterenol2,0 mg/Kg

i.p.

AVE 09911,0 mg/Kg

gavagem

Grupo 1

n=9 X X

Grupo 2

n=5 X X

Grupo 3

n=5 X X

Salina0,1 ml/

Kg

i.p.

Água0,5 ml

gavagem

Isoproterenol2,0 mg/Kg

i.p.

AVE 0991

1,0 mg/Kg

gavagem

L-NAME10 mg/Kg

gavagem

Grupo 4

n=8X X X

Grupo 5

n=5X X X

Sistema de Perfusão

Registros

• Tensão máxima e tensão mínima

• dT/dt máxima e dT/dt mínima

• Pressão de Perfusão

• Freqüência Cardíaca

Transdutor de Pressão

Transdutor de Força

Resultados

EFEITOS FUNCIONAIS DO AVE 0991 EM CORAÇÕES ISOLADOS DE RATOS

TRATADOS COM ISOPROTERENOL

Tensão Máxima

0 10 20 30 400

5

10

15

ControleIsoproterenol

Isoproterenol + AVE 0991AVE 0991

***

*#

***

min

gram

as (

g)

* p<0,05, **p<0,001 e ***p<0,0001 (comparado ao

controle); # p<0,001 (comparado ao isoproterenol).

Tensão Mínima

0 10 20 30 400.4

0.8

1.2

ControleIsoproterenol

Isoproterenol + AVE 0991AVE 0991

*****

min

gra

mas

(g

)

**p<0,001 e ***p<0,0001

(comparado ao controle)

dT/dt Máxima

0 10 20 30 400

50

100

150

200

250

ControleIsoproterenol

Isoproterenol + AVE 0991

****

AVE 0991

#

***

min

gra

mas

/seg

* p<0,05 e ***p<0,0001

(comparado ao controle); #

p<0,001 (comparado ao isoproterenol)

dT/dt Mínima

0 10 20 30 400

50

100

150

200

250

ControleIsoproterenol

Isoproterenol + AVE 0991AVE 0991

***

****#

min

gra

mas

/seg

* p<0,05 e ***p<0,0001

(comparado ao controle); #

p<0,001 (comparado ao isoproterenol)

Pressão de Perfusão

0 5 10 15 20 25 30 350

25

50

75

100

ControleIsoproterenol

Isoproterenol + AVE 0991AVE 0991

****#

min

mm

Hg

* p<0,001 ,**p<0,0001 (comparado ao controle); # p<0,05 (comparado ao isoproterenol)

Freqüência Cardíaca

0 10 20 30 40100

150

200

250

ControleIsoproterenol

Isoproterenol + AVE 0991AVE 0991

*#

min

bp

m

* p<0,0001 (Controle comparado ao isoproterenol) e # p<0,05 (Controle comparado ao Isoproterenol + AVE 0991)

PAPEL DO ÓXIDO NÍTRICO NOS EFEITOS FUNCIONAIS AVE 0991 EM CORAÇÕES ISOLADOS DE

RATOS TRATADOS COM

ISOPROTERENOL

Tensão Máxima

0 10 20 30 400

5

10

15

ControleL-NAMEIsoproterenolIsoproterenol+AVE0991Isoproterenol+AVE0991+L-NAME

***

****

**

min

gra

mas

(g

)

***p<0,0001 (comparado ao

controle); **p<0,001 (comparado ao

isoproterenol), *p<0,01 (comparado ao

isoproterenol + AVE 0991)

Tensão Mínima

0 10 20 30 400.6

0.7

0.8

0.9

1.0

1.1

ControleL-NAMEIsoproterenolIsoproterenol+AVE0991Isoproterenol+AVE0991+L-NAME

***

#

min

gra

mas

(g

)

***p<0,0001 (comparado ao controle) e #p<0,05 (comparado ao isoproterenol + AVE 0991)

dT/dt Máxima

0 10 20 30 400

50

100

150

200

250

L-NAMEControle

IsoproterenolIsoproterenol+AVE0991Isoproterenol+AVE0991+L-NAME

***

***

#

*

min

gra

mas

/seg

***p<0,0001 (comparado ao controle); *p<0,001 (comparado ao isoproterenol); #p<0,001 (comparado ao isoproterenol + AVE 0991)

dT/dt Mínima

0 10 20 30 4050

100

150

200

ControleL-NAMEIsoproterenolIsoproterenol+AVE0991Isoproterenol+AVE0991+L-NAME

***

*

***

##

min

gra

mas

/seg

***p<0,0001 (comparado ao controle); *p<0,001

(comparado ao isoproterenol) e

##p<0,0001 (comparado ao isoproterenol + AVE

0991)

Pressão de Perfusão

0 10 20 30 4020

45

70

95

120

ControleL-NAMEIsoproterenolIsoproterenol+AVE0991Isoproterenol+AVE0991+L-NAME

***

***#

min

mm

Hg

***p<0,0001 e **p<0,001

(comparado ao controle); *p<0,05

(comparado ao isoproterenol);

#p<0,0001(comparado ao isoproterenol +

AVE 0991)

Freqüência Cardíaca

0 10 20 30 40180

200

220

240

ControleL-NAMEIsoproterenolIsoproterenol+AVE0991Isoproterenol+AVE0991+L-NAME

****

min

bp

m

***p<0,0001 e

* p<0,05 (comparado ao

controle)

ANÁLISE QUALITATIVA DO COLÁGENO PERIVASCULAR

EM VENTRÍCULO ESQUERDO DE CORAÇÕES DE RATOS

Fotomicrografias evidenciando colágeno perivascular de ventrículo esquerdo de ratos controle (A), isoproterenol (B) e isoproterenol + AVE 0991 (C). Coloração: Picro Sírius. Aumento de 40x.

A B

C

Fotomicrografias evidenciando colágeno perivascular de ventrículo esquerdo de ratos controle (A), isoproterenol (B) e isoproterenol + AVE 0991(C). Coloração: Tricrômico de Masson. Aumento de 10x.

A B

C

ANÁLISE QUALITATIVA DO COLÁGENO INTERSTICIAL EM VENTRÍCULO ESQUERDO DE

CORAÇÕES DE RATOS

Fotomicrografias evidenciando colágeno intersticial do ventrículo esquerdo de rato controle (A), isoproterenol (B) e isoproterenol + AVE 0991 (C). Coloração: Tricrômico de Masson. Aumento de 40x.

A B

C

Conclusões

O AVE 0991 apresentou efeito cardioprotetor, atenuando a insuficiência cardíaca induzida pelo isoproterenol. Essa ação foi independente do NO.

O efeito vascular do AVE 0991 em vasos de corações de ratos tratados com isoproterenol foi dependente da liberação de NO.

O AVE 0991 exerceu atividade anti-fibrótica em corações de ratos tratados com o isoproterenol.

Muito Obrigada!