Upload
truongdieu
View
253
Download
4
Embed Size (px)
Citation preview
EFEK ANALGESIK INFUSA DAUN
PADA MENCIT BETINA GALUR SWISS
Disusun untuk Memenuhi Salah Satu SMemperoleh G
EFEK ANALGESIK INFUSA DAUN Macaranga tanarius
PADA MENCIT BETINA GALUR SWISS
SKRIPSI
Disusun untuk Memenuhi Salah Satu SyaratMemperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S. Farm)
Program Studi Farmasi
Oleh :
Dina Wulandari
NIM : 078114089
FAKULTAS FARMASIUNIVERSITAS SANATA DHARMA
YOGYAKARTA2010
Macaranga tanarius L.
PADA MENCIT BETINA GALUR SWISS
elar Sarjana Farmasi (S. Farm)
EFEK ANALGESIK INFUSA DAUN
PADA MENCIT BETINA GALUR SWISS
Disusun untuk Memenuhi Salah Satu SMemperoleh G
i
EFEK ANALGESIK INFUSA DAUN Macaranga tanarius
PADA MENCIT BETINA GALUR SWISS
SKRIPSI
Disusun untuk Memenuhi Salah Satu SyaratMemperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S. Farm)
Program Studi Farmasi
Oleh :
Dina Wulandari
NIM : 078114089
FAKULTAS FARMASIUNIVERSITAS SANATA DHARMA
YOGYAKARTA2010
Macaranga tanarius L.
PADA MENCIT BETINA GALUR SWISS
elar Sarjana Farmasi (S. Farm)
ii
iii
iv
HALAMAN PERSEMBAHAN
”Aku bisa karna aku percaya”
Kupersembahkan skripsi ini untuk
Allah SWT karena Engkau adalah sumber kekuatanku
Keluarga tercinta atas kasih sayang, dukungan, doa dan semangat
Sahabatku semua
Almamaterku
v
vi
PERNYATAAN KEASLIAN KARYA
vii
PRAKATA
Puji dan syukur penulis panjatkan ke hadirat Tuhan Yang Maha Esa atas
berkat dan rahmat-Nya, sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi dengan judul
“Efek Analgesik Infusa Daun Macaranga tanarius L. pada Mencit Betina Galur
Swiss” ini.
Skripsi ini disusun untuk memenuhi salah satu syarat untuk memperoleh gelar
Sarjana Farmasi (S. Farm.) Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.
Penyelesaian skripsi ini tentunya tidak lepas dari bantuan dari berbagai pihak,
baik secara langsung maupun secara tidak langsung. Oleh karena itu penulis hendak
mengucapkan terima kasih kepada :
1. Dekan Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma.
2. Phebe Hendra, M.Si., Ph.D., Apt., selaku pembimbing skripsi ini atas segala
kesabaran untuk selalu membimbing, memberi motivasi, dan memberi masukan
kepada penulis dalam menyusun skripsi ini.
3. Ipang Djunarko, M.Sc., Apt., selaku penguji skripsi atas bantuan dan masukkan
kepada penulis demi kemajuan skripsi ini.
4. Yohanes Dwiatmaka, M.Si., selaku penguji skripsi dan pembimbing akademik
penulis atas bantuan, masukkan, pendampingan dan dukungan kepada penulis
demi kemajuan skripsi ini.
viii
5. Mas Parjiman, Mas Heru dan Mas Kayat selaku laboran bagian farmakologi serta
Mas Wagiran, selaku laboran farmakognosi fitokimia, atas segala bantuan dan
dinamika selama di laboratorium.
6. Ibu dan Bapak, atas dukungan, kasih sayang dan perjuangan untuk terus
memberikan yang terbaik bagiku, baik secara materi maupun non-materi sehingga
aku tetap bersemangat dalam penyusunan skripsi ini.
7. Rekan-rekan penelitian tim macaranga, Aryanti Prima Andini, Elisa Eka, Ary
Widya Nugraha dan Andreas Arry Mahendra atas bantuan, kerjasama, perjuangan
dan suka duka yang telah kita alami bersama selama penelitian.
8. Ignatius Mariandrianto Saputra, semangatku ketika aku sedang merasa lengah,
atas kesabaran, dukungan, semangat dan doa sehingga penyusunan skripsi ini
dapat berlangsung dengan baik.
9. Teman-teman seperjuangan, sano, ticubiz, yesia, ririn, fenny, sisca, mami dewi,
mba paol, inonk, tante xaxa, atas persahabatan, suka duka dan kebersamaan kita.
10. Teman-teman FKK B angkatan 2007 atas kebersamaan kita.
11. Pihak-Pihak lain yang turut membantu penulis namun tidak dapat disebutkan satu
persatu.
Penulis menyadari bahwa setiap manusia tidak ada yang sempurna. Oleh
karena itu, penulis mengharapkan adanya kritik, saran dan masukan demi kemajuan
di masa yang akan datang.
Akhir kata, penulis berharap bahwa skripsi ini dapat bermanfaat bagi semua
pihak, baik mahasiswa, lingkungan akademis, masyarakat serta memberikan
ix
x
DAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL………………………………………………………........ i
HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING……………………………...... ii
HALAMAN PENGESAHAN……………………………………………......... iii
HALAMAN PERSEMBAHAN……………………………………………...... iv
LEMBAR PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI KARYA
ILMIAH UNTUK KEPENTINGAN AKADEMIS…………………………… v
PERNYATAAN KEASLIAN KARYA……………………………………...... vi
PRAKATA…………………………………………………………………....... vii
DAFTAR ISI………………………………………………………………........ x
DAFTAR TABEL…………………………………………………………........ xiii
DAFTAR GAMBAR.....................................................................................…. xiv
DAFTAR LAMPIRAN…………………………………………….................. xv
INTISARI……………………………………………………………............... xvi
ABSTRACT…………………………………………………………………….. xvii
BAB I. PENGANTAR…………………………………………….................... 1
A. Latar Belakang…………………………………………..………………...... 1
1. Perumusan masalah.......…………………………………......………....... 3
2. Keaslian penelitian…………………………………………….......……... 3
3. Manfaat penelitian…………………………………………………..…..... 4
B. Tujuan Penelitian...................................................................................... …. 4
BAB II. PENELAHAAN PUSTAKA............................................................ 6
xi
A. M. tanarius.................................................................................................... 6
1. Keterangan botani.............................................................................. … 6
2. Morfologi... .................................................................................. …… 6
3. Kandungan kimia..……………………..……………………….............. 6
4. Khasiat dan kegunaan ……………………………………………….... 8
5. Ekologi penyebaran dan budidaya …………………………………... 8
B. Infusa ...................................................................................................... ….. 8
1. Definisi…………………………………………………………………. 8
2. Pembuatan……………………………………………………………… 9
C. Nyeri ........................................................................................................ ….. 9
1. Pengertian nyeri…….………………………………………………….. 9
2. Terjadinya nyeri..………………………………………………………. 10
3. Jenis nyeri……………………………………………………………….. 11
4. Mekanisme nyeri………………………………………………………... 11
D. Analgesik ................................................................................................. …… 13
1. Analgetika non narkotik……..…………………………………………. 13
2. Analgetika narkotik……………………………………………………… 13
E. Metode Pengujian Efek Analgesik ............................................................. 14
F. Asetosal ................................................................................................. ....... 15
G. Landasan Teori..........................................................................................…... 15
K. Hipotesis ................................................................................................. …… 17
BAB III. METODE PENELITIAN.................................................................. 18
xii
A. Jenis dan Rancangan Penelitian.................................................................. 18
B. Variabel dan Definisi Operasional ............................................................ 18
C. Bahan Penelitian........................................................................................ 20
D. Alat Penelitian………………………………………………………………. 21
E. Tata Cara Penelitian .................................................................................. 22
BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN ........................................................ 28
A. Penyiapan Bahan...................................................................... ................... 28
B. Uji Pendahuluan........................................................................................ 29
C. Uji Analgesik Infusa Daun M. tanarius……............................................... 35
D. Perhitungan ED50 Infusa Daun M. tanarius……. ....................................... 46
BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN........................................................... 48
A. Kesimpulan............................................................................................... 48
B. Saran..................................................................... …..................................... 48
DAFTAR PUSTAKA...................................................................................... 49
LAMPIRAN.................................................................................................... 52
BIOGRAFI PENULIS..................................................................................... 73
xiii
DAFTAR TABEL
Tabel I Rata-rata jumlah geliat pada orientasi dosis asam asetat........................ .30
Tabel II Hasil uji Scheffe data geliat mencit pada uji pendahuluan penetapan
dosis asam asetat...................................................................................... 31
Tabel III Rata-rata jumlah geliat pada berbagai selang waktu pemberian asam
asetat dosis 50 mg/kgBB…................................................................... 32
Tabel IV Hasil uji Scheffe jumlah geliat pada penetapan selang waktu pemberian
asam asetat............................................................................................... 33
Tabel V Rata-rata jumlah geliat pada kelompok perlakuan infusa daun
M. tanarius……………………………………………………………... 35
Tabel VI Persen proteksi geliat pada kelompok perlakuan infusa daun
M. tanarius……………………………………………………………... 37
Tabel VII Hasil uji Scheffe persen proteksi geliat pada kelompok perlakuan
infusa daun M. tanarius………………………………………………... 38
Tabel VIII Perubahan persen proteksi geliat pada kelompok perlakuan infusa daun
M. tanarius……………………………………………………………... 40
Tabel IX Hasil uji Scheffe perubahan persen proteksi nyeri pada kelompok
perlakuan infusa daun M. tanarius………………..…………………..... 42
xiv
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1. Struktur senyawa dalam tanaman M.tanarius...................................... 7
Gambar 2. Struktur asetosal………..................................................................... 15
Gambar 3. Diagram batang rata-rata jumlah geliat pada orientasi dosis asam
asetat.................................................................................................... 30
Gambar 4. Grafik rata-rata jumlah geliat pada orientasi selang waktu pemberian
asam asetat dosis 50 mg/kgBB............................................................ 32
Gambar 5. Diagram batang rata-rata kumulatif jumlah geliat kelompok perlakuan
infusa daun M. tanarius....................................................................... 36
Gambar 6. Diagram batang persen proteksi geliat kelompok perlakuan infusa daun
M. tanarius…………………………………...................................... 37
Gambar 7. Diagram batang perubahan persen proteksi nyeri kelompok perlakuan
infusa daun M. tanarius....................................................................... 40
Gambar 8. Perpindahan elektron ikatan α-β unsaturated pada macarangioside A
dan mallophenol B……………………………………………………44
Gambar 9. Gambar mekanisme pelepasan mediator nyeri dan inflamasi……… 45
Gambar 10. Grafik log dosis vs % proteksi geliat infusa daun M. tanarius……….47
xv
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Foto daun M. tanarius...........................................................................53
Lampiran 2. Foto infusa daun M. tanarius……........................................................53
Lampiran 3. Foto geliat mencit yang memenuhi syarat............................................ 54
Lampiran 4. Hasil analisis statistik jumlah geliat pada penetapan dosis asam
asetat..................................................................................................... 54
Lampiran 5. Hasil analisis statistik jumlah geliat pada penetapan selang waktu
pemberian…………….......................................................................... 56
Lampiran 6. Hasil analisis statistik jumlah geliat pada uji efek analgesik infusa daun
M. tanarius ........................................................................................... 58
Lampiran 7. Data persen proteksi geliat pada uji efek analgesik berserta hasil analisis
statistiknya............................................................................................ 61
Lampiran 8. Data perubahan persen proteksi geliat terhadap asetosal dosis 91
mg/kgBB pada uji efek analgesik......................................................... 65
Lampiran 9. Perhitungan penetapan peringkat dosis infusa daun M. tanarius pada
kelompok perlakuan...............................................................……….... 68
Lampiran 10. Penetapan kadar air serbuk daun M. tanarius..................................... 70
Lampiran 11. Surat keterangan hewan uji………………………………………..... 71
Lampiran 12. Surat pengesahan determinasi tanaman M. tanarius……………….. 72
xvi
INTISARI
Nyeri merupakan perasaan yang tidak menyenangkan dan biasanyamerupakan gejala suatu penyakit. Peran tanaman obat dalam penanganan nyerisemakin meningkat belakangan ini, terlebih dengan adanya issue back to nature.Macaranga tanarius L. merupakan tanaman yang jarang dimanfaatkan di Indonesia.Secara tradisional, dilaporkan khasiat M. tanarius sebagai obat diare, luka danpencegahan peradangan. Oleh karena itu dimungkinkan M. tanarius digunakansebagai pengobatan alternatif analgesik. Tujuan dari penelitian ini adalah untukmengetahui apakah infusa daun M. tanarius mempunyai efek analgesik; berapapersen proteksi geliat; berapa perubahan proteksi geliat dan berapa ED50 infusa daunM. tanarius.
Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental murni dengan rancanganacak lengkap pola searah. Metode yang digunakan adalah metode rangsang kimiadengan asam asetat sebagai penginduksi nyeri. Mencit betina sehat, galur Swisssecara acak dibagi menjadi 5 kelompok, setiap kelompok terdiri dari 5 hewan uji.Kelompok I-III diberikan infusa dosis 666,68; 3333,4 dan 16667 mg/kgBB,kelompok IV diberikan aquadest dosis 16667 mg/kgBB dan kelompok V diberikanasetosal dosis 91 mg/kgBB. Asam asetat (1% v/v) diberikan secara intraperitonealuntuk semua kelompok, setelah 15 menit setelah pemberian senyawa uji. Geliatdiamati setiap 5 menit selama 1 jam. Data dievaluai dengan ANOVA satu arah,dilanjutkan dengan Uji Scheff euntuk membandingkan rata-rata dari setiap kelompokdosis dengan kelompok kontrol. P<0,05 menunjukkan tingkat signifikansi secarastatistik.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa infusa daun M. tanarius memiliki efekanalgesik. Persen proteksi geliat infusa daun M. tanarius pada dosis 666,68; 3333,4dan 16667 mg/kgBB berturut-turut adalah 57,6 %; 64,5% dan 73,7%. Sedangkanperubahan persen proteksi geliat infusa daun M. tanarius pada dosis 666,68; 3333,4,dan 16667 mg/kgBB berturut-turut adalah -9,7%; 1,2% dan 15,6% dan ED50 infusadaun M. Tanarius yaitu sebesar 154,88 mg/kgBB.
Kata kunci: analgesik, infusa daun M. tanarius
xvii
ABSTRACT
Pain was an upleasant feel and it usually a symptom of a disease. Recently therole of medicine plant increasingly important in pain treatment, in fact, it mainlypromoted by back to nature issue. Macaranga tanarius L. is a plant that rarelyexploited Indonesia people. Traditionally, reported that the efficacy as a curediarrhoea, injuries and prevention of inflammation. Therefore, it is possible M.tanarius used as alternative analgesic treatment. This study aimed at knowingwhether the aqueous extract of M. tanarius leaf has analgesic effect, the percentprotection, the change in percent protection and ED50 of the aqueous extract of M.tanarius leaf.
This was a experimental study with one way-complete-random design. Thestudy method used was acetic acid induced. Healthy female mice of Swiss strain wererandomly divided into 5 group of 5 animals in each. Group I, II and III receivedrespectively, aqueous extract of M. tanarius leaf at dose of 666.68; 3333.4 and 16667mg/kgBW. Group IV received distilled water at dose of 16667 mg/kgBW. Group Vreceived asetosal at dose of 91 mg/kgBW. Acetic acid (1% v/v) was administredintraperitoneally to all the group 15 min after administration of test compounds.Writhings were counted for a period of 5 min for 1 hour. Data were evaluated by one-way ANOVA, followed by Scheffe test to compare the mean of each dose group withthe control group. P<0.05 was the possibility level used to determine statisticalsignificance.
Result of the study suggesting that the aqueous extract of M. tanarius leafhaving analgesic effect. Percent protection of the aqueous extract of M. tanarius leafat doses of 666.68; 3333.4 and 16667 mg/kgBW were 57.6; 64.5 and 73.7 percent,respectively. The change in percent protection the aqueous extract of M. tanarius leafat doses of 666.68; 3333.4 and 16667 mg/kgBW were -9.7; 1.2 and 15.6 percent,respectively and the ED50 of the aqueous extract of M. tanarius leaf were 154.88mg/kgBW.
Keywords: analgesic effect, the aqueous extract of M. tanarius leaf
1
BAB IPENGANTAR
A. Latar Belakang
Nyeri merupakan perasaan sensoris dan emosional yang tidak nyaman,
berkaitan dengan (ancaman) kerusakan jaringan (Tjay dan Rahardja, 2007). Rasa
nyeri dalam kebanyakan hal merupakan suatu gejala yang menandakan adanya
gangguan pada jaringan. Nyeri merupakan gejala umum dan sering kali mengikuti
salah satu penyakit, salah satunya adalah inflamasi. Walaupun nyeri dapat digunakan
sebagai petunjuk adanya suatu penyakit, namun nyeri memerlukan penanganan
karena penderita merasakannya sebagai hal yang tidak menyenangkan.
Seiring dengan perkembangan jaman serta teknologi, peran tanaman obat
masih menjadi pilihan bagi masyarakat ketika menderita sakit terlebih dengan adanya
issue back to nature. Tanaman obat menjadi alternatif pengobatan karena semakin
tingginya biaya pengobatan. Selain itu tanaman obat diyakini mempunyai efek
samping yang relatif lebih kecil daripada menggunakan obat sintetik (Pramono,
2003).
Pengembangan obat bahan alam untuk mengatasi rasa nyeri semakin
ditingkatkan sebagai salah satu upaya pengobatan. Salah satu bahan alam yang
berpotensi sebagai alternatif untuk mengatasi rasa nyeri adalah M. tanarius. Hal ini
didasarkan pada penelitian sebelumnya disebutkan bahwa salah satu konstituen dari
ekstrak n-heksan dan kloroform dari daun M. tanarius berupa flavonoid mempunyai
aktivitas penangkapan radikal terhadap DPPH dan nymphaeol B sebagai agen
2
antiinflamasi pada uji siklooksigenase-2 (Phommart, Sutthivaiyakit, Chimnoi,
Ruchirawat, Sutthivaiyakit, 2005).
Matsunami, Takamori, Shinzato, Aramoto, Kondo, Otsuka et al. (2006) dan
Matsunami, Otsuka, Kondo, Shinzato, Kawahata, Yamaguchi et al. (2009)
melaporkan adanya senyawa glikosida yaitu macarangioside A-C dan mallophenol B
yang diisolasi dari ekstrak metanol M. tanarius menunjukkan aktivitas penangkapan
radikal terhadap DPPH.
Radikal bebas memegang peranan dalam timbulnya nyeri. Radikal bebas
lazimnya hanya bersifat perantara yang bisa dengan cepat diubah menjadi substansi
yang tidak lagi membahayakan bagi tubuh. Namun, apabila radikal bebas bertemu
dengan enzim atau asam lemak tak jenuh ganda, maka hal tersebut merupakan awal
dari kerusakan sel. Tjay dan Rahardja (2007) menyatakan bahwa ada kaitan antara
penangkapan radikal bebas dengan penghambatan mediator-mediator nyeri dan
peradangan. Bila radikal bebas tersebut dapat ditangkap maka kemungkinan proses
terjadinya nyeri dan peradangan juga dapat terhambat.
Robinson (1995) mengatakan bahwa senyawa glikosida merupakan senyawa
yang kurang larut dalam pelarut organik dan lebih mudah larut dalam air. Oleh karena
itu dalam penelitian ini akan dilakukan uji efek analgesik infusa daun M. tanarius
pada mencit betina galur Swiss. Pada penelitian ini digunakan bentuk sediaan infusa
yang menggunakan penyari berupa air sehingga diharapkan senyawa-senyawa
glikosida yang mempunyai aktivitas penangkapan radikal bebas yang terdapat pada
penelitian sebelumnya dapat tertarik lebih banyak ke dalam infusa sehingga
3
menimbulkan efek penangkapan radikal bebas yang semakin besar pula yang
akhirnya dapat menghambat terjadinya nyeri.
1. Perumusan Masalah
Permasalahan yang akan diteliti adalah :
a. Apakah infusa daun M. tanarius memiliki efek analgesik pada mencit betina
galur Swiss?
b. Berapa persen proteksi geliat infusa daun M. tanarius pada mencit betina galur
Swiss?
c. Berapa perubahan persen proteksi geliat infusa daun M. tanarius pada mencit
betina galur Swiss?
d. Berapa nilai ED50 infusa daun M. tanarius pada mencit betina galur Swiss?
2. Keaslian Penelitian
Sejauh pengetahuan penulis, penelitian tentang efek analgesik infusa daun
M. tanarius pada mencit betina galur Swiss belum pernah dilakukan.
Phommart et al. (2005) melaporkan kandungan senyawa baru yaitu
tanarifuranonol, tanariflavanon C dan tanariflavanon D bersama dengan 7 kandungan
yang telah diketahui yaitu nymphaeol A, nymphaeol B, nymphaeol C, tanariflavanon
B, blumenol A (vomifoliol), blumenol B (7,8 dihydrovomifoliol) dan annuionone
yang antara lain dapat digunakan sebagai antiinflamasi, antioksidan dan antitumor
yang diperoleh dari ekstraksi menggunakan pelarut n-heksan dan kloroform dari daun
M. tanarius.
4
Selain itu penelitian mengenai M. tanarius juga dilakukan oleh Matsunami et
al. (2006; 2009). Dari penelitian tersebut diketahui bahwa kandungan pada daun
M. tanarius yang diisolasi dari esktrak metanol mempunyai aktivitas penangkapan
radikal terhadap DPPH. Puteri dan Kawabata (2010) melaporkan ekstrak metanol
daun M. tanarius mempunyai aktivitas penghambatan terhadap α-glukosidase.
3. Manfaat Penelitian
a. Manfaat teoritis
Penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi mengenai khasiat daun
M. tanarius yang dapat digunakan sebagai analgesik.
b. Manfaat praktis
Penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi kepada masyarakat tentang
ada tidaknya efek analgesik dari infusa daun M. tanarius, persen proteksi geliat
infusa daun M. tanarius, perubahan persen proteksi geliat infusa daun M. tanarius
dan ED50 dari infusa daun M. tanarius.
B. Tujuan Penelitian
1. Untuk mengetahui apakah infusa daun M. tanarius memiliki efek analgesik pada
mencit betina galur Swiss.
2. Untuk mengetahui berapa persen proteksi geliat infusa daun M. tanarius pada mencit
betina galur Swiss.
3. Untuk mengetahui berapa perubahan persen proteksi geliat infusa daun
M. tanarius pada mencit betina galur Swiss.
5
4. Untuk mengetahui berapa nilai ED50 infusa daun M. tanarius pada mencit betina galur
Swiss?
6
BAB IIPENELAAHAN PUSTAKA
A. M. tanarius
1. Keterangan botani
Tanaman Macaranga tanarius termasuk dalam famili euphorbiaceae.
Tanaman ini dikenal di beberapa daerah dengan nama Tutup ancur (Jawa), Mapu
(Batak) dan Mara (Sunda) (Anonim, 2010a).
2. Morfologi
Tanaman M. tanarius merupakan pohon kecil sampai sedang dengan dahan
agak besar. Daun berseling, agak membundar dengan stipula besar yang luruh.
Perbungaan bermalai di ketiak, bunga ditutupi oleh daun gagang. Buah kapsul
berkokus 2, ada kelenjar kekuningan di luarnya. Biji membulat, menggelembur. Jenis
ini juga mengandung tanin yang cukup untuk menyamak jala dan kulit (Anonim,
2010a).
3. Kandungan Kimia
Kandungan kimia dari M. tanarius antara lain macarangioside A-D,
mallophenol B, lauroside E, methyl brevifolin carboxylate, hyperin dan isoquercitrin
(Matsunami et al., 2006). Phommart et al. (2005) melaporkan kandungan M. tanarius
yaitu tanarifuranonol, tanariflavanon C, dan tanariflavanon D bersama dengan 7
kandungan yang telah diketahui yaitu nymphaeol A, nymphaeol B, nymphaeol C,
tanariflavanon B, blumenol A (vomifoliol), blumenol B (7,8 dihydrovomifoliol, dan
annuionone). Matsunami et al. (2009) melaporkan adanya lignan glukosida, (+)-
7
pinoresinol 4-O-[600-O-galloyl]-b-D-glucopyranoside dan 2 megastigman glukosida,
yang dinamakan macarangioside E dan F. Berikut ini merupakan struktur senyawa
tanariflavanon C dan D, nymphaeol A, B dan C, macarangioside A-C dan
mallophenol B (gambar 1).
tanariflavanon C tanariflavanon D nymphaeol A
nymphaeol B nymphaeol C mallophenol B
macarangioside A macarangioside B macarangioside C
Gambar 1. Struktur senyawa dalam tanaman M. tanarius(Phommart et al., 2005) dan (Matsunami et al., 2006)
8
4. Khasiat dan kegunaan
Tanaman M. tanarius dimanfaatkan antara lain sebagai antipiretik dan
antitusif yaitu pada bagian akar tanaman dengan bentuk sediaan berupa dekokan.
Akar kering dari tanaman ini digunakan sebagai agen emetik, sementara daun
segarnya digunakan sebagai penutup luka pencegah terjadinya inflamasi (Phommart
et al., 2005). Secara tradisional daun M. tanarius digunakan sebagai fermentasi pada
tempe dan pakan hewan (Puteri dan Kawabata, 2010).
5. Ekologi penyebaran dan budidaya
M. tanarius tersebar luas, dari Kepulauan Andaman dan Nicobar, Indo-Cina,
Cina Selatan, Taiwan dan Kepulauan Ryukyu, seluruh Malesia, sampai ke Australia
Utara dan Timur dan Melanesia. Jenis ini umum dijumpai di daratan Asia Tenggara
(Thailand Selatan, Semenanjung Malaya) dan pada banyak pulau di Malesia
(Sumatra, Borneo, Kepulauan Sunda Kecil, Sulawesi, Nugini, seluruh Kepulauan
Filipina) (Anonim, 2010a).
B. Infusa
1. Definisi
Infusa didefinisikan sebagai sediaan cair yang dibuat dengan mengekstraksi
simplisia nabati dengan air pada suhu 90°C selama 15 menit (Depkes RI, 1995). Pada
umumnya infundasi digunakan untuk menyari zat kandungan aktif yang larut dalam
air dari bahan-bahan nabati. Penyarian dengan cara ini menghasilkan sari yang tidak
9
stabil dan mudah tercemar oleh kuman dan kapang. Oleh sebab itu, sari yang
diperoleh dengan cara ini tidak boleh disimpan lebih dari 24 jam (Depkes RI, 1986).
2. Pembuatan
Infusa dapat dibuat dengan cara mencampur simplisia dengan derajat halus
yang sesuai dalam panci dengan air secukupnya, dipanaskan di atas tangas air selama
15 menit terhitung mulai suhu mencapai 90°C sambil sekali-kali diaduk. Kemudian
diserkai selagi panas melalui kain flannel, ditambahkan air panas secukupnya melalui
ampas hingga diperoleh volume infus yang dikehendaki (Depkes RI, 1995).
C. Nyeri
1. Pengertian nyeri
Nyeri merupakan perasaan yang dipicu oleh sistem saraf. Nyeri dapat
menyakitkan atau membahayakan bagi penderitanya. Rasa nyeri mungkin dapat
datang dan pergi seketika atau juga mungkin konstan. Penderita mungkin merasa
nyeri di satu daerah tubuh, seperti punggung, perut atau dada atau mungkin merasa
sakit di sekujur tubuh. Nyeri dapat digunakan untuk membantu dalam mendiagnosis
suatu masalah kesehatan. Setelah penderita diterapi, rasa nyeri biasanya hilang.
Namun, terkadang rasa nyeri itu berlangsung selama minggu, bulan atau bahkan
tahunan. Kondisi ini disebut nyeri kronis. Nyeri kronis disebabkan oleh penyebab
yang berkelanjutan, seperti kanker atau arthritis atau terkadang penyebabnya tidak
diketahui. Ada banyak cara untuk mengobati rasa nyeri. Pengobatan bervariasi
10
tergantung pada penyebab rasa nyeri, seperti obat penghilang rasa nyeri, akupunktur
dan operasi (Dugdale, 2009).
Nyeri adalah perasaan sensoris dan emosional yang tidak nyaman, berkaitan
dengan (ancaman) kerusakan jaringan. Nyeri merupakan suatu perasaan yang
subyektif dan ambang toleransinya berbeda-beda bagi setiap orang. Rasa nyeri dalam
kebanyakan hal hanya merupakan suatu gejala yang berfungsi sebagai isyarat bahaya
tentang adanya gangguan pada jaringan, seperti peradangan, infeksi atau kejang otot
(Tjay dan Rahardja, 2007).
2. Terjadinya nyeri
Nyeri timbul dari sejumlah kondisi. Cedera merupakan penyebab utama,
tetapi rasa nyeri mungkin juga merupakan hasil dari suatu penyakit. Nyeri dapat
menyertai kondisi psikologis seperti depresi atau mungkin terjadi bahkan tanpa
adanya pemicu yang dikenali (Anonim, 2010b). Menurut Tjay dan Rahardja (2007)
nyeri disebabkan oleh rangsangan mekanis, kimiawi dan fisis (kalor listrik) yang
dapat menimbulkan kerusakan pada jaringan. Rangsangan tersebut memicu pelepasan
zat-zat tertentu yang disebut mediator nyeri, antara lain histamin, bradikinin,
leukotrien dan prostaglandin. Semua mediator nyeri itu merangsang reseptor nyeri
(nociceptor) di ujung saraf bebas di kulit, mukosa serta jaringan lain dan dengan
demikian menimbulkan antara lain reaksi radang dan kejang. Nociceptor juga
terdapat di seluruh jaringan dan organ tubuh terkecuali SSP. Dari tempat ini
rangsangan disalurkan ke otak melalui jaringan yang kemudian diteruskan ke pusat
nyeri di otak dimana dirasakan sebagai nyeri.
11
3. Jenis nyeri
Menurut DiPiro, Tabert, Yee, Matzke, Wells, dan Posey (2008) nyeri
digolongkan menjadi :
a. Nyeri akut
Nyeri akut dapat menjadi proses peringatan fisiologis individu dari adanya
penyakit dan situasi berbahaya. Penyebab umum nyeri akut adalah pembedahan,
penyakit akut, trauma, akivitas dan prosedur medis.
b. Nyeri kronik
Dalam kondisi normal, nyeri akut menghilang cepat karena adanya proses
penyembuhan dengan mengurangi produksi rangsangan nyeri. Namun, dalam
beberapa kasus, nyeri tetap terjadi selama berbulan-bulan sampai bertahun-tahun,
yang mengarah ke keadaan nyeri kronis dengan karakteristik yang sangat berbeda
dengan nyeri akut.
4. Mekanisme nyeri
Menurut DiPiro et al. (2008) proses penghantaran nyeri terdiri atas 4 tahap
yaitu stimulasi, transmisi, persepsi nyeri dan modulasi.
a. Stimulasi
Sensasi nyeri diawali dengan pembebasan reseptor nyeri akibat adanya
rangsangan mekanis, panas, dan kimia. Adanya rangsangan tersebut (noxius stimuli)
akan menyebabkan lepasnya mediator-mediator seperti bradikinin, K+, prostaglandin,
histamin, leukotrien, serotonin dan substansi P. Aktivasi reseptor menimbulkan aksi
12
potensial yang ditransmisikan sepanjang serabut saraf aferen menuju sumsum tulang
belakang (DiPiro et al., 2008).
b. Transmisi
Transmisi rangsang nyeri terjadi pada serabut aferen A dan C. Serabut
saraf aferen tersebut merangsang serabut nyeri di berbagai lamina spinal cord’s
dorsal horn melepaskan berbagai neurotransmiter termasuk glutamat, substansi P,
dan kalsitonin (DiPiro et al., 2008).
c. Persepsi nyeri
Persepsi nyeri merupakan titik utama transmisi impuls nyeri. Otak akan
mengartikan sinyal nyeri dengan batas tertentu, sedangkan fungsi kognitif dan
tingkah laku akan memodifikasi nyeri sehingga tidak lebih parah. Relaksasi,
pengalihan, meditasi dan berkhayal dapat mengurangi rasa nyeri. Sebaliknya,
perubahan biokimia saraf yang terjadi pada keadaan seperti depresi dan stres dapat
memperparah rasa nyeri (DiPiro et al., 2008).
d. Modulasi
Modulasi nyeri melalui sejumlah proses yang kompleks. Telah diketahui
bahwa sistem opiat endogen terdiri atas neurotransmiter-neurotransmiter (seperti
enkhepalin, dinorfin, dan -endorfin dan reseptor-reseptor ( seperti μ, , dan ) yang
ditemukan dalam sistem saraf pusat. Opioid endogen berikatan dengan reseptor
opioid dan mengantarkan transmisi rangsang nyeri (DiPiro et al., 2008).
13
D. Analgesik
Analgesik adalah zat-zat yang pada dosis terapeutik menghilangkan atau
menekan rasa nyeri (senyawa yang dalam dosis terapeutik meringankan atau
menekan rasa nyeri (Schmitz, Lepper and Heidrich, 2009). Berdasarkan kerja
farmakologisnya, analgesik dapat dibagi menjadi 2 golongan, yaitu:
1. Analgesik non narkotik (perifer) yang terdiri dari obat-obat yang tidak bersifat
narkotik dan tidak bekerja sentral. Analgesik antiradang termasuk ke dalam
kelompok ini.
2. Analgesik narkotik, khusus digunakan untuk menghalau rasa nyeri hebat seperti
fractura dan kanker. Atas dasar cara kerjanya, obat ini dibagi dalam 3 kelompok
yaitu:
a. Agonis opiat, cara kerja obat ini sama dengan morfin hanya berlainan mengenai
potensi dan lama kerjanya, efek samping dan resiko akan ketergantungan fisik.
b. Antagonis opiat, bila digunakan sebagai analgesik, obat ini dapat menduduki
salah satu reseptor.
c. Campuran, obat ini dengan kerja campuran juga mengikat pada reseptor opioid,
tetapi tidak atau hanya sedikit mengaktivasi daya kerjanya (Tjay dan Rahardja,
2007).
14
E. Metode Pengujian Efek Analgesik
Metode-metode pengujian aktivitas analgetika secara in vivo dilakukan
dengan menilai kemampuan zat uji untuk menekan atau menghilangkan rasa nyeri
yang diinduksi pada hewan uji (mencit, tikus, marmot), yang meliputi induksi secara
mekanik, termik, elektrik dan secara kimia (Phytomedika, 1991).
Turner (1965) mengatakan bahwa metode rangsang kimia menggunakan zat
kimia yang diinjeksikan pada hewan uji secara intraperitoneal, sehingga akan
menimbulkan nyeri. Beberapa zat kimia yang biasanya digunakan antara lain asam
asetat dan fenil kuinon. Metode ini sederhana, reproducible (dapat diulang-ulang
hasilnya) dan cukup peka untuk menguji senyawa analgesik dengan daya analgesik
lemah, namun mempunyai kekurangan yaitu masalah kespesifikasinya. Oleh karena
itu metode ini sering digunakan untuk penapisan (screening). Efek analgesik dapat
dievaluasi menggunakan persen proteksi geliat.
% proteksi geliat = (100 – [(P/K) x 100])%
P : jumlah kumulatif geliat mencit yang diberi perlakuanK: jumlah kumulatif geliat mencit kelompok kontrol
15
F. Asetosal
Gambar 2. Struktur asetosal (Helmenstine, 2010)
Asetosal (gambar 2) merupakan ester salisilat dari asam yang berbentuk
kristal putih seperti batang atau jarum, berbau, sedikit larut dalam air dan sangat larut
dalam alkohol. Asetosal termasuk dalam golongan analgesik non narkotik. Indikasi
dari asetosal adalah sebagai pereda nyeri, sakit kepala, nyeri-nyeri ringan lain yang
berhubungan dengan adanya inflamasi, nyeri ringan sampai sedang setelah operasi,
melahirkan, sakit gigi dan dismenore (Anonim, 2010c).
G. Landasan Teori
Nyeri merupakan suatu gejala yang umum dan seringkali mengikuti salah
satu penyakit atau lebih. Rasa nyeri menyebabkan perasaan yang tidak enak dan
keberadaannya sangat mengganggu bahkan kadang-kadang terasa menyiksa dan
biasanya menandakan adanya kerusakan jaringan oleh karena itu dibutuhkan suatu
penanganan.
16
Matsunami et al. (2006) melaporkan adanya senyawa glikosida, yaitu
macarangioside A-C dan mallophenol B yang diisolasi dari ekstrak metanol
M. tanarius menunjukkan aktivitas penangkapan radikal terhadap DPPH.
Pendekatan dari penelitian ini adalah dilaporkan adanya senyawa glikosida
yang memiliki aktivitas penangkapan radikal terhadap DPPH (Matsunami et al.,
2006) yang dapat diperoleh dari ektrak metanol. Glikosida merupakan senyawa yang
kurang larut dalam pelarut organik dan lebih mudah larut dalam air (Robinson, 1995).
Oleh karena itu, diharapkan dengan menggunakan air sebagai pelarut infusa, dapat
diperoleh lebih banyak senyawa yang memiliki aktivitas dalam menangkap radikal
bebas.
Radikal bebas memegang peranan dalam timbulnya nyeri. Radikal bebas
lazimnya hanya bersifat perantara yang bisa dengan cepat diubah menjadi substansi
yang tidak lagi membahayakan bagi tubuh. Namun, apabila radikal bebas bertemu
dengan enzim atau asam lemak tak jenuh ganda, maka hal tersebut merupakan awal
dari kerusakan sel. Tjay dan Rahardja (2007) menyatakan bahwa ada kaitan antara
penangkapan radikal bebas dengan penghambatan mediator-mediator nyeri dan
peradangan. Bila radikal bebas tersebut dapat ditangkap maka kemungkinan proses
pengubahan asam arakidonat menjadi endoperoksida dan asam hidroperoksida
melalui jalur siklooksigenase dan lipooksigenase juga akan terhambat sehingga
mediator-mediator nyeri dan peradangan tidak akan terbentuk dan tidak menimbulkan
nyeri ataupun peradangan.
17
Banyak metode yang dapat digunakan untuk menguji efek analgesik namun
untuk skrining awal untuk penapisan farmakologi cukup menggunakan metode
rangsang kimia. Pada metode ini asam asetat merupakan iritan yang dapat merusak
jaringan secara lokal. Setelah pemberian secara intraperitoneal, asam asetat akan
menyebabkan perubahan pH di dalam rongga perut akibat pembebasan ion H+ dari
asam asetat dan menyebabkan luka pada membran sel. Fosfolipid dari membran sel
akan melepaskan asam arakhidonat yang pada akhirnya akan membentuk
prostaglandin dan menimbulkan nyeri (Wilmana,1995). Metode ini dipilih karena
cakupan untuk menguji efek analgesik cukup luas, sehingga sekalipun belum
diketahui secara spesifik bagaimana mekanisme namun efeknya tetap dapat terlihat.
H. Hipotesis
Infusa daun M. tanarius memiliki efek analgesik pada mencit betina galur Swiss.
18
BAB IIIMETODE PENELITIAN
A. Jenis dan Rancangan Penelitian
Penelitian efek analgesik infusa daun M. tanarius pada mencit betina galur
Swiss termasuk penelitian eksperimental murni dengan rancangan acak lengkap pola
searah.
B. Variabel dan Definisi Operasional
1. Variabel utama
a. Variabel bebas
Variabel bebas dari penelitian ini adalah dosis infusa daun M. tanarius.
b. Variabel tergantung
Variabel tergantung dari penelitian ini adalah persen proteksi geliat yang
dihasilkan setelah perlakuan dengan infusa daun M. tanarius.
2. Variabel pengacau
a. Variabel pengacau terkendali
1) Hewan uji adalah mencit dengan galur Swiss.
2) Jenis kelamin hewan uji adalah betina.
3) Umur hewan uji adalah dua sampai tiga bulan.
4) Berat badan hewan uji antara 20 sampai 30 gram.
5) Pemberian infusa dilakukan secara peroral.
6) Rangsang nyeri diberikan secara intraperitoneal.
19
7) Waktu pemanenan daun M. tanarius pada bulan Maret 2010.
8) Tempat pemanenan daun M. tanarius yaitu Kebun Obat Fakultas Farmasi
Universitas Sanata Dharma.
b. Variabel pengacau tak terkendali
1) Ketahanan mencit, yaitu kemampuan individu mencit dalam menahan rasa
sakit.
2) Kemampuan absorpsi, yaitu kemampuan absorpsi infusa daun M. tanarius
oleh individu mencit.
3. Definisi operasional
a. Infusa daun M. tanarius adalah infusa dengan konsentrasi 100% yang diperoleh
dengan cara mencampur serbuk kering daun M. tanarius dalam panci dengan
air, dipanaskan di atas heater selama 15 menit terhitung mulai suhu mencapai
90°C sambil sekali-kali diaduk dan diserkai selagi panas.
b. Dosis infusa daun M. tanarius adalah sejumlah berat infusa daun M. tanarius
tiap satuan berat badan hewan uji dengan satuan mg/kgBB.
c. Persen proteksi geliat adalah seratus dikurangi jumlah kumulatif geliat
kelompok perlakuan dibagi rata-rata jumlah kumulatif geliat kelompok kontrol
dikali 100 persen.
d. Metode induksi secara rangsang kimia adalah metode yang digunakan untuk
mengukur efek analgesik zat uji terhadap subyek uji dengan cara memberi
20
rangsang nyeri dengan pemberian asam asetat 1% yang diberikan secara
intraperitoneal.
e. Penetapan kriteria geliat mencit
Kriteria geliat mencit yang diamati dan dihitung adalah gerakan menggeliat
dengan menarik satu atau kedua kaki ke belakang serta menempelkan perut
pada alas tempat berpijak mencit tersebut (kotak kaca pengamatan geliat).
C. Bahan Penelitian
1. Bahan utama
a. Hewan uji : mencit betina galur Swiss dengan berat badan 20-30 gram dengan
umur 2-3 bulan yang diperoleh dari Lembaga Pusat Penelitian dan Teknologi
(LPPT) Universitas Gadjah Mada Yogyakarta.
b. Bahan senyawa uji, yaitu daun M. tanarius yang diperoleh dari Kebun Obat
Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta yang dipanen pada
bulan Maret 2010.
2. Bahan kimia
Bahan-bahan kimia yang digunakan dalam penelitian antara lain:
a. Asetosal diproduksi oleh Merck dan diperoleh dari Laboratorium Farmakologi-
Toksikologi Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.
b. CMC-Na (Dai-Ichi Seiyaku., Ltd) diperoleh dari Laboratorium Farmakologi-
Toksikologi Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.
21
c. Asam asetat glasial diproduksi oleh Merck dan diperoleh dari Laboratorium
Biokimia Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.
d. Aquadest diperoleh dari Laboratorium Farmakologi-Toksikologi Fakultas
Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.
D. Alat Penelitian
Alat yang digunakan dalam penelitian ini meliputi:
1. Oven
2. Mesin penyerbuk
3. Timbangan elektrik
4. Panci lapis alumunium
5. Heater
6. Termometer
7. Gelas ukur
8. Stopwatch (Olympic)
9. Kotak kaca tempat pengamatan geliat
10. Jarum yang digunakan untuk pemberian peroral (Terumo)
11. Spuit injeksi yang memiliki ujung runcing dan digunakan untuk pemberian secara
intraperitoneal (Terumo)
12. Neraca analitik (Mettler Toledo AB 204, Germany)
13. Moisture balance
22
E. Tata Cara Penelitian
1. Determinasi tanaman
Determinasi tanaman M. tanarius dilakukan di Fakultas Farmasi
Universitas Sanata Dharma Yogyakarta. Determinasi dilakukan di Laboratorium
Farmakognosi Fitokimia Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma
Yogyakarta sesuai dengan buku acuan (Koordes and Valeton, 1918).
2. Pengumpulan bahan
Daun M. tanarius yang digunakan dalam penelitian ini berasal dari
tanaman M. tanarius yang diperoleh dari Kebun Obat Fakultas Farmasi
Universitas Sanata Dharma Yogyakarta. Daun yang dikumpulkan adalah daun
yang segar berwarna hijau dan dipanen pada bulan Maret 2010.
3. Pembuatan simplisia daun M. tanarius
Daun M. tanarius yang telah terkumpul kemudian dicuci dengan air
mengalir, ditiriskan kemudian dikeringkan dengan menggunakan oven pada suhu
45°-50°C selama 24 jam dan diserbuk dengan menggunakan mesin penyerbuk di
Laboratorium Farmakognosi-Fitokimia Fakultas Farmasi Universitas Sanata
Dharma Yogyakarta. Serbuk simplisia kemudian diayak dengan menggunakan
ayakan nomor 40.
4. Penetapan kadar air serbuk daun M. tanarius
Penetapan kadar air dilakukan dengan Metode Gravimetri dengan
menggunakan alat moisture balance. Sebanyak 5 gram serbuk daun M. tanarius
dimasukkan ke dalam alat dan diratakan kemudian bobot serbuk ditimbang
23
sebagai bobot sebelum pemanasan. Serbuk dipanaskan pada suhu 110° C selama
15 menit dan ditimbang bobot serbuk setelah pemanasan. Selisih bobot serbuk
sebelum dan setelah pemanasan merupakan kadar air dari serbuk yang diselidiki.
5. Penetapan dosis infusa daun M. tanarius
Dasar penetapan peringkat:
a. Bobot tertinggi mencit = 30 gram
b. Pemberian infusa menggunakan ½ dari volume maksimal pemberian secara
peroral
c. Konsentrasi infusa daun M. tanarius yang digunakan yaitu 100%
Penetapan dosis tertinggi infusa daun M. tanarius yaitu:
D x BB = C x V
D x 0,03 g = 1000 mg/ml x 0,5 ml
D = 16,667 mg/g
D = 16667 mg/kg
Dua dosis lainnya diperoleh dengan membagi 5 dosis 16667 mg/kg
kemudian dibagi 5 lagi sehingga diperoleh 3 peringkat dosis yaitu: 16667
mg/kg; 3333,4 mg/kg dan 666,68 mg/kg.
6. Penyiapan hewan uji
Hewan uji yang digunakan dalam penelitian ini adalah mencit betina
galur Swiss, usia 2-3 bulan dan memiliki berat badan 20-30 gram. Mencit yang
digunakan sebanyak 25 ekor yang terbagi secara acak dalam 5 kelompok
perlakuan. Kelompok I-III adalah kelompok perlakuan infusa daun M. tanarius
24
yang diberikan secara peroral dengan peringkat dosis 666,68 mg/Kg BB; 3333,4
mg/kg BB dan 16667 mg/kg BB. Kelompok IV adalah kelompok kontrol negatif
aquadest dosis 16667 mg/kgBB. Kelompok V adalah kelompok kontrol positif
asetosal dosis 91 mg/kgBB. Sebelum digunakan, mencit dipuasakan terlebih
dahulu selama 24 jam dengan tetap diberi minum.
7. Pembuatan sediaan
a. Pembuatan larutan asam asetat 1% v/v sebanyak 25,0 ml
Larutan asam asetat 1% dibuat dari larutan asam asetat glasial 100%
v/v dengan menggunakan rumus V1C1 = V2C2. Dengan menggunakan rumus
tersebut, larutan asam asetat 1% dapat dibuat dengan mengambil asam asetat
glasial 100% sebanyak 0,250 ml dilarutkan dengan menggunakan aquadest
sampai diperoleh volume 25,0 ml dengan menggunakan labu ukur 25 ml.
b. Pembuatan larutan CMC Na 1% sebanyak 100,0 ml
Larutan CMC Na 1% dibuat dengan cara menimbang 1,0 gram serbuk
CMC Na kemudian ditaburkan di atas air panas sedikit demi sedikit hingga
mengembang sambil diaduk. Setelah terbentuk larutan kemudian dimasukkan
dalam labu ukur 100 ml dan ditambah aquadest hingga 100,0 ml lalu digojog.
c. Pembuatan suspensi asetosal 1%, 25,0 ml dalam CMC Na 1%
Suspensi asetosal 1% dibuat dengan mensuspensikan 250,0 mg
asetosal dalam CMC Na 1% sampai 25,0 ml.
25
d. Pembuatan infusa daun M. tanarius 100%, 10,0 ml
Infusa daun M. tanarius dengan konsentrasi 100% dibuat dengan
mencampur 10,0 gram serbuk kering daun M. tanarius dengan 40 ml air.
Campuran ini kemudian dipanaskan di atas heater pada suhu 90°C selama 15
menit. Waktu 15 menit dihitung ketika suhu pada campuran mencapai 90°C.
Campuran kemudian diserkai selagi panas.
8. Penetapan dosis asam asetat 1%
Penetapan dosis asam asetat dilakukan pada konsentrasi 1%, dimana
larutan ini dibuat dengan cara pengenceran asam asetat glasial. Larutan ini diuji
pada 3 peringkat dosis yaitu 25 mg/kgBB; 50 mg/kgBB dan 75 mg/kgBB. Dari
ketiga dosis tersebut, dicari dosis optimal dalam menghasilkan geliat .
9. Penetapan selang waktu pemberian asam asetat
Sebanyak 9 ekor mencit digunakan dalam penetapan waktu pemberian
yang dibagi ke dalam 3 kelompok. Masing-masing kelompok yang terdiri dari 3
ekor mencit betina galur Swiss dengan berat antara 20-30 gram, umur 2-3 bulan
yang telah dipuasakan selama 24 jam, diinjeksi dengan asam asetat 1% secara
intraperitoneal menggunakan dosis efektif yang didapatkan dari penetapan dosis
asam asetat dengan selang waktu 5, 10 dan 15 menit setelah pemberian suspensi
asetosal dosis 91 mg/kgBB secara peroral.
10. Penetapan dosis asetosal
Asetosal digunakan sebagai kontrol positif sehingga harus memberikan
respon pengurangan geliat. Dosis asetosal yang digunakan dalam penelitian ini
26
adalah dosis lazim 500 mg. Jika dikonversikan pada manusia dengan berat badan
70 kg maka : (70/50) x 500 mg = 700 mg. Konversi dosis ke mencit dengan berat
badan 20 gram dengan faktor konversi manusia dengan berat badan 70 kg ke
mencit 20 gram adalah 0,0026 maka dosisnya dapat dihitung sebagai berikut:
Dosis = 700 mg x 0,0026
= 1,82 mg/20 gramBB
= 91 mg/kgBB
Dosis asetosal yang digunakan menurut Handara (2006); Riadiani (2006) dan
Tusthi (2007) adalah 91 mg/kgBB.
11. Perlakuan hewan uji
Dua puluh lima ekor mencit dibagi menjadi 5 kelompok secara acak dan
dipuasakan selama 24 jam dengan tetap diberi minum. Kelompok I-III merupakan
kelompok perlakuan dengan pemberian infusa daun M. tanarius yang diberikan
secara peroral dengan peringkat dosis 666,68 mg/kgBB; 3333,4 mg/kgBB dan
16667 mg/kgBB. Kelompok IV merupakan kelompok kontrol negatif aquadest
dosis 16667 mg/kgBB dan kelompok V diberi suspensi asetosal dalam CMC-Na
1% dosis 91 mg/kgBB sebagai kontrol positif. Kemudian seluruh kelompok pada
waktu sesuai orientasi setelah pemberian praperlakuan diberi rangsang kimia
asam asetat dengan dosis sesuai orientasi secara intraperitoneal kemudian respon
geliat diamati dengan selang waktu 5 menit selama 1 jam.
27
12. Perhitungan % proteksi geliat
Besarnya proteksi geliat dihitung dengan persamaan yaitu :
% proteksi geliat = (100 – [(P/K) x 100])%
Keterangan :P= jumlah kumulatif geliat hewan uji setelah pemberian senyawa ujiK= jumlah rata-rata kumulatif geliat hewan uji kontrol negatif
Data persen proteksi geliat tersebut kemudian dianalisis menggunakan
analisa variansi satu arah dengan taraf kepercayaan 95%.
Perubahan persen proteksi geliat terhadap kontrol positif dihitung
menggunakan rumus :
Perubahan % proteksi geliat = [(A-B)/B] x 100
Keterangan :A = % proteksi geliat pada tiap kelompok perlakuanB = rata-rata proteksi geliat pada kontrol positif
13. Analisis hasil
Setelah didapatkan hasil, data dianalisis dengan Kolmogorov-Smirnov
untuk melihat distribusi data. Analisis dilanjutkan dengan ANOVA satu arah
dengan taraf kepercayaan 95% untuk mengetahui apakah terdapat perbedaan antar
kelompok. Selanjutnya dilakukan uji Scheffe untuk mengetahui perbedaan
tersebut bermakna atau tidak.
28
BAB IVHASIL DAN PEMBAHASAN
A. Penyiapan Bahan
1. Hasil determinasi tanaman
Tanaman yang dipergunakan dalam penelitian ini adalah M. tanarius.
Determinasi tanaman dilakukan dengan tujuan untuk memastikan bahwa tanaman
maupun bagian tanaman yang akan digunakan memang benar sesuai dengan yang
diharapkan, sehingga tidak ada kesalahan mengenai bahan yang dipakai. Determinasi
tanaman dilakukan di Laboratorium Farmakognosi Fitokimia, Fakultas Farmasi
Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.
Determinasi dilakukan hingga tingkat spesies pada bagian daun, bunga,
batang, biji dan buah dan terbukti bahwa tanaman yang dipakai merupakan tanaman
M. tanarius.
2. Penetapan kadar air serbuk daun M. tanarius
Pada penelitian ini, penetapan kadar air dilakukan dengan metode
Gravimetri dengan menggunakan alat moisture balance. Pemanasan serbuk dilakukan
pada suhu 110° selama 15 menit. Digunakan suhu 110° dimaksudkan agar kandungan
air telah menguap dan waktu 15 menit dianggap bahwa kadar air telah memenuhi
persyaratan parameter standarisasi non spesifik. Hasil pengujian menunjukkan bahwa
serbuk daun M. tanarius memiliki kadar air sebesar 8,18%. Dari pengujian ini,
menunjukkan bahwa kadar air sebuk daun M. tanarius telah memenuhi persyaratan
kadar air yaitu kurang dari 10% (Anonim, 2010d). Penetapan kadar air ini dilakukan
29
sebagai jaminan kualitas dari serbuk daun M. tanarius yang akan dilakukan untuk
penelitian selanjutnya.
B. Uji Pendahuluan
1. Penetapan dosis asam asetat
Uji analgesik yang dilakukan dalam penelitian ini menggunakan metode
rangsang kimia. Dalam metode ini, senyawa penginduksi nyeri, dalam penelitian ini
adalah asam asetat diinjeksikan secara intraperitoneal pada mencit putih betina galur
Swiss dengan selang waktu tertentu.
Orientasi dosis asam asetat dilakukan dengan tujuan untuk mendapatkan
dosis optimal asam asetat dalam menimbulkan jumlah geliat sehingga dapat
memudahkan pengamatan. Asam asetat adalah suatu iritan yang merusak jaringan
secara lokal, yang menyebabkan nyeri pada rongga perut pada pemberian
intraperitoneal. Hal itu disebabkan oleh kenaikan ion H+
akibat turunnya pH di bawah
6 yang menyebabkan luka pada membran. Luka pada membran sel ini akan
mengaktifkan enzim fosfolipase pada fosfolipid membran sel sehingga menghasilkan
asam arakidonat yang akhirnya akan terbentuk prostaglandin. Terbentuknya
prostaglandin ini akan meningkatkan sensitivitas reseptor nyeri sehingga mencit akan
memberikan respon dengan cara menggeliat untuk menyesuaikan keadaan yang
dirasakannya.
30
Konsentrasi yang digunakan didasarkan pada penelitian yang telah dilakukan
sebelumnya, yaitu 1% (Putra, 2003). Dosis yang digunakan dalam penelitian ini
adalah, 25; 50; dan 75 mg/kgBB. Hasil orientasi berupa geliat pada tiga peringkat
dosis dapat dilihat pada tabel I dan gambar 3.
Tabel I. Rata-rata jumlah geliat pada orientasi dosis asam asetatKelompok Perlakuan
(mg/kgBB)Rata-rata jumlah geliat
(X ± SE)25 28,0 ± 4,050 85,0 ± 6,275 87,7 ± 1,7
Keterangan :X = Mean (Rata-rata)SE = Standard Error (SD/n)
Dosis Asam Asetat
dosis 75 mg/kgBBdosis 50 mg/kgBBdosis 25 mg/kgBB
Ra
ta-r
ata
jum
lah
ge
lia
t
100.00
80.00
60.00
40.00
20.00
0.00
Error Bars: +/- 1 SE
Orientasi Dosis Asam Asetat
Gambar 3. Diagram batang rata-rata jumlah geliatpada orientasi dosis asam asetat
Dari analisis variansi satu arah diketahui nilai probabilitasnya 0,000 (< 0,05).
Hal ini menunjukkan bahwa antara ketiga kelompok terdapat perbedaan. Untuk
31
mengetahui kebermaknaan perbedaan antar kelompok maka dilanjutkan dengan uji
Scheffe. Data dan analisisnya dapat dilihat di tabel II.
Tabel II. Hasil uji Scheffe data geliat mencitpada uji pendahuluan penetapan dosis asam asetat
Kelompok Dosis(mg/kgBB)
25 50 75
25 - B B50 B - TB75 B TB -
Keterangan :B = Berbeda bermakna (p < 0,05)TB = Berbeda tidak bermakna (p > 0,05)
Dari tabel II, diketahui bahwa pemberian asam asetat pada dosis 25
mg/kgBB berbeda bermakna dengan dosis 50 dan 75 mg/kgBB. Dosis 50 mg/kgBB
berbeda bermakna dengan dosis 25 mg/kgBB dan berbeda tidak bermakna dengan
dosis 100 mg/kgBB. Hal ini berarti bahwa asam asetat dosis 50 mg/kgBB dan 100
mg/kgBB sudah dapat memberikan jumlah geliat yang cukup. Oleh karena itu, asam
asetat dosis 50 mg/kgBB dipilih sebagai penginduksi nyeri untuk percobaan
selanjutnya agar mempermudah pengamatan.
2. Penetapan selang waktu pemberian asam asetat
Selang waktu pemberian asam asetat merupakan jeda antara pemberian zat
uji secara peroral dengan pemberian injeksi asam asetat secara intraperitoneal. Pada
saat selang waktu tersebut, zat uji diharapkan telah diabsorbsi sehingga dapat
memberikan efek analgesik secara optimal.
32
Pada penentuan selang waktu pemberian asam asetat ini digunakan asetosal
dosis 91 mg/kgBB. Selang waktu yang diujikan adalah 5 menit, 10 menit, dan 15
menit. Rata-rata jumlah geliat pada berbagai selang waktu dapat dilihat pada tabel III
dan gambar 4.
Tabel III. Rata-rata jumlah geliatpada berbagai selang waktu pemberian asam asetat dosis 50 mg/kgBB
Kelompok Jumlah Geliat (X ± SE)5 menit 67,7 ± 3,3
10 menit 45,0 ± 1,715 menit 37,3 ± 1,3
Keterangan :X = Mean (Rata-rata)SE = Standard Error (SD/n)
Dari tabel III, selang waktu 15 menit menghasilkan jumlah geliat yang lebih
sedikit dibandingkan dengan selang waktu 5 dan 10 menit. Untuk melihat perbedaan
antar kelompok maka dilakukan analisis variansi satu arah dan uji Scheffe. Hasil
analisis dapat dilihat pada tabel IV.
Gambar 4. Grafik rata-rata jumlah geliatpada orientasi selang waktu pemberian asam asetat dosis 50 mg/kgBB
33
Berdasarkan hasil analisis variansi satu arah diperoleh probabilitasnya
adalah 0,000 (˂0,05). Hal ini menunjukkan bahwa pada ketiga kelompok tersebut
terdapat perbedaan. Kemudian dilakukan uji Scheffe untuk mengetahui perbedaan
tersebut bermakna atau tidak.
Tabel IV. Hasil uji Scheffe jumlah geliatpada penetapan selang waktu pemberian asam asetatKelompok
(menit)5 10 15
5 - B B10 B - TB15 B TB -
Keterangan :B = Berbeda bermakna (p < 0,05)TB = Berbeda tidak bermakna (p > 0,05)
Dari hasil uji Scheffe diketahui bahwa kelompok selang waktu pemberian 5
menit berbeda bermakna dengan selang waktu pemberian 10 menit dan 15 menit.
Kelompok selang waktu pemberian 10 menit berbeda bermakna dengan selang waktu
pemberian 5 menit dan berbeda tidak bermakna dengan selang waktu pemberian 15
menit. Kelompok selang waktu pemberian 15 menit berbeda bermakna dengan selang
waktu pemberian 5 menit dan berbeda tidak bermakna dengan selang waktu
pemberian 10 menit.
Dilihat dari grafik, jumlah geliat pada kelompok selang waktu pemberian 5
menit masih terlalu banyak. Hal ini mungkin disebabkan asetosal belum bekerja
secara optimal. Jumlah geliat pada kelompok selang waktu 15 menit menghasilkan
34
jumlah geliat yang paling sedikit. Pada selang waktu 10 menit dan 15 menit
menunjukkan perbedaan jumlah geliat yang tidak bermakna secara statistik. Hal ini
berarti bahwa selang waktu 10 menit dan selang waktu 15 menit memberikan hasil
yang sama. Namun untuk penelitian selanjutnya digunakan selang waktu pemberian
15 menit karena dilihat dari rata-rata jumlah geliat pada selang waktu 15 menit lebih
kecil daripada selang waktu 10 menit.
3. Penetapan dosis asetosal
Kontrol positif yang digunakan dalam penelitian ini adalah asetosal.
Asetosal telah terbukti memiliki efek analgesik sehingga digunakan sebagai
pembanding terhadap senyawa uji. Penentuan dosis asetosal dilakukan dengan tujuan
untuk mendapatkan dosis yang optimal dalam menurunkan geliat.
Asetosal digunakan sebagai kontrol positif sehingga harus memberikan
respon pengurangan geliat. Dosis asetosal yang digunakan dalam penelitian ini adalah
dosis lazim 500 mg. Jika dikonversikan pada manusia dengan berat badan 70 kg
maka : (70/50) x 500 mg = 700 mg. Konversi dosis ke mencit dengan berat badan 20
gram dengan faktor konversi manusia dengan berat badan 70 kg ke mencit 20 gram
adalah 0,0026 maka dosisnya dapat dihitung sebagai berikut:
Dosis = 700 mg x 0,0026
= 1,82 mg/20 gramBB
= 91 mg/kgBB
35
Selain itu, penetapan dosis asetosal ini didasarkan pada penelitian sebelumnya
yaitu menurut Handara (2006); Riadiani (2006) dan Tusthi (2007) adalah 91 mg/kg
BB.
C. Uji Analgesik Infusa Daun M. tanarius
Pengujian efek analgesik dilakukan setelah seluruh uji pendahuluan selesai
dilakukan. Dari uji pendahuluan yang telah dilakukan, diperoleh zat penginduksi
nyeri yang digunakan adalah asam asetat 1% dengan dosis 50 mg/kgBB. Kontrol
positif yang digunakan adalah asetosal dosis 91 mg/kgBB, yang diberikan 15 menit
sebelum pemberian asam asetat. Dengan menggunakan hasil orientasi, diperoleh rata-
rata kumulatif jumlah geliat pada kelompok perlakuan dengan infusa daun M.
tanarius beserta kelompok kontrol negatif dan kontrol positif. Hasilnya dapat dilihat
pada tabel V dan gambar 5.
Tabel V. Rata-rata jumlah geliat pada kelompok perlakuan infusa daunM. tanarius
Kelompok Uji Jumlahsubjek uji
Rata-rata jumlah geliat(X ± SE)
IDM dosis 666,68 mg/kgBB 5 45,2 ± 1,4IDM dosis 3333,4 mg/kgBB 5 37,8 ± 3,3IDM dosis 16667 mg/kgBB 5 28,0 ± 0,4
Aquadest dosis 16667 mg/kgBB 5 106,6 ± 5,4Asetosal dosis 91 mg/kgBB 5 38,6 ± 2,3
Keterangan :X = Mean (Rata-rata)SE = Standard Error (SD/n)IDM = Infusa Daun M. tanarius
36
Kelompok perlakuan
Asetosal dosis 91mg/kgBB
Aquadest dosis16667 mg/kgBB
IDM dosis 16667mg/kgBB
IDM dosis 3333,4mg/kgBB
IDM dosis 666,68mg/kgBB
Rata
-rata
geli
at
120.00
100.00
80.00
60.00
40.00
20.00
0.00
Error Bars: +/- 1 SE
Gambar 5. Diagram batang rata-rata kumulatif jumlah geliatkelompok perlakuan infusa daun M. tanarius
Keterangan :IDM = Infusa Daun M. tanarius
Berdasarkan tabel V, rata-rata jumlah geliat berkurang seiring dengan
kenaikan dosis infusa daun M. tanarius , mulai dosis 666,68 mg/kgBB, dosis 3333,4
hingga dosis 16667 mg/kgBB. Rata-rata jumlah geliat kelompok infusa daun M.
tanarius dengan peringkat dosis terendah sampai dosis tertinggi berturut-turut adalah
45,2; 37,8 dan 28,0. Hal ini berarti bahwa semakin besar dosis infusa daun M.
tanarius maka semakin besar pula kemampuan infusa daun M. tanarius tersebut
untuk menghambat nyeri yang ditunjukkan dengan pengurangan jumlah geliat.
Setelah diperoleh jumlah kumulatif geliat pada kelompok perlakuan, maka
data tersebut diolah secara statistik untuk mengetahui persen proteksi geliat pada
kelompok perlakuan yang dibandingkan dengan kontrol negatif serta perubahan
37
persen proteksi geliat kelompok perlakuan yang dibandingkan dengan kontrol positif.
Hasilnya dapat dilihat pada tabel VI dan gambar 6.
Tabel VI. Persen proteksi geliat pada kelompok perlakuan infusa daunM. tanarius
Kelompok Uji Jumlah subjekuji
Rata-rata persen proteksi geliat(X + SE)
IDM dosis 666,68 mg/kgBB 5 57,6 ± 1,3IDM dosis 3333,4 mg/kgBB 5 64,5 ± 3,1IDM dosis 16667 mg/kgBB 5 73,7 ± 0,4
Aquadest dosis 16667 mg/kgBB 5 0,00 ± 5,0Asetosal dosis 91 mg/kgBB 5 63,8 ± 2,2
Keterangan :X = Mean (Rata-rata)SE = Standard Error (SD/n)IDM = Infusa Daun M. tanarius
Kelompok perlakuan
Asetosal dosis 91mg/kgBB
Aquadest dosis16667 mg/kgBB
IDM dosis 16667mg/kgBB
IDM dosis 3333,4mg/kgBB
IDM dosis 666,68mg/kgBB
Ra
ta-r
ata
%P
rote
ksi
Ge
liat
80.00000
60.00000
40.00000
20.00000
0.00000
-20.00000
Error Bars: +/- 1 SE
Gambar 6. Diagram batang persen proteksi geliat kelompok perlakuan infusadaun M. tanarius
Keterangan :IDM = Infusa Daun M. tanarius
38
Persen proteksi geliat pada masing-masing kelompok uji kemudian dianalisis
menggunakan analisis variansi satu arah dengan taraf kepercayaan 95%. Dari analisis
variansi satu arah yang dilakukan, diperoleh nilai probabilitasnya 0,000 yang berarti
lebih kecil dari 0,05. Hal ini menunjukkan bahwa pada kelompok uji terdapat
perbedaan. Selanjutnya untuk mengetahui perbedaan antar kelompok tersebut
bermakna atau tidak, pengujian dilanjutkan dengan uji Scheffe. Data dan analisis uji
Scheffe dapat dilihat pada tabel VII.
Tabel VII. Hasil uji Scheffe persen proteksi geliat pada kelompok perlakuaninfusa daun M. tanarius
Kelompok IDM dosis666,68
mg/kgBB
IDM dosis3333,4
mg/kgBB
IDM dosis16667
mg/kgBB
Aquadestdosis16667
mg/kgBB
Asetosaldosis 91
mg/kgBB
IDM dosis 666,68mg/kgBB
- TB B B TB
IDM dosis 3333,4mg/kgBB
TB - TB B TB
IDM dosis 16667mg/kgBB
B TB - B TB
Aquadest dosis16667 mg/kgBB
B B B - B
Asetosal dosis 91mg/kgBB
TB TB TB B -
Keterangan :TB = Berbeda tidak bermakna (p > 0,05)B = Berbeda bermakna (p < 0,05)IDM = Infusa Daun M. tanarius
Berdasarkan tabel VI, persen proteksi geliat meningkat seiring dengan
kenaikan dosis infusa daun M. tanarius, mulai dosis 666,68 mg/kgBB sampai pada
dosis 16667 mg/kgBB. Persen proteksi geliat kelompok infusa daun M. tanarius
dengan peringkat dosis terendah sampai dosis tertinggi berturut-turut adalah 57,6%;
39
64,5% dan 73,7%. Hasil uji Scheffe menunjukkan bahwa kelompok kontrol negatif
(aquadest) memiliki perbedaan persen proteksi geliat yang bermakna dengan kontrol
positif (asetosal) dan ketiga kelompok senyawa uji (infusa daun M. tanarius ). Hal ini
menunjukkan bahwa aquadest tidak mempunyai efek analgesik yang ditunjukkan
dengan rata-rata jumlah geliat yang paling besar dibandingkan dengan kelompok lain
(106,6 ± 5,4) dan persen proteksi geliat yang paling kecil (0,0 ± 5,0).
Pada kelompok kontrol positif asetosal dan ketiga kelompok perlakuan
infusa daun M. tanarius memiliki proteksi terhadap nyeri yang ditunjukkan dengan
berkurangnya respon geliat dari mencit.
Hasil uji Scheffe menunjukkan bahwa antara kelompok kontrol positif
asetosal dengan kelompok infusa dosis 666,68 mg/kgBB, dosis 3333,4 mg/kgBB, dan
dosis 16667 mg/kgBB terdapat perbedaan persen proteksi geliat yang tidak
bermakna. Oleh karena itu dapat dikatakan bahwa ketiga peringkat dosis infusa daun
M. tanarius memberikan efek yang sebanding dengan asetosal.
Suatu senyawa uji dikatakan memiliki efek analgesik jika mampu
mengurangi ≥ 50% dari jumlah geliat pada kelompok kontrol negatif (Phytomedika,
1991). Oleh karena itu, ketiga peringkat dosis infusa daun M. tanarius memenuhi
syarat untuk dapat dikatakan memiliki efek analgesik karena memiliki persen
analgesik lebih dari 50%.
Berdasarkan hasil perhitungan persen proteksi geliat kemudian dihitung
perubahan persen proteksi geliat infusa daun M. tanarius terhadap kontrol positif
(asetosal). Data rata-rata perubahan persen proteksi geliat kelompok kontrol negatif
40
dan kelompok infusa daun M. tanarius terhadap kontrol positif dapat dilihat pada
tabel VIII dan gambar 7.
Tabel VIII. Perubahan persen proteksi geliat terhadap asetosal dosis 91mg/kgBB pada kelompok perlakuan infusa daun M. tanariusKelompok Uji Jumlah subjek uji Perubahan % proteksi nyeri
(X ± SE)IDM dosis 666,68 mg/kgBB 5 -9,7 ± 2,1IDM dosis 3333,4 mg/kgBB 5 1,2 ± 4,8IDM dosis 16667 mg/kgBB 5 15,6 ± 0.7
Aquadest dosis 16667 mg/kgBB 5 -100,0 ± 7,9Asetosal dosis 91 mg/kgBB 5 0,0 ± 3,4
Keterangan :X = Mean (Rata-rata)SE = Standard Error (SD/n)IDM = Infusa Daun M. tanarius
Kelompok perlakuan
Asetosal dosis 91mg/kgBB
Aquadest dosis16667 mg/kgBB
IDM dosis 166667mg/kgBB
IDM dosis 3333,4mg/kgBB
IDM dosis 666,68mg/kgBB
Ra
ta-r
ata
Pe
rub
ah
an
%P
rote
ks
iG
elia
t
0.00000
-30.00000
-60.00000
-90.00000
-120.00000
Error Bars: +/- 1 SE
Gambar 7. Diagram batang perubahan persen proteksi geliat terhadapasetosal dosis 91 mg/kgBB kelompok perlakuan infusa daun M. tanarius
Keterangan :IDM = Infusa Daun M. tanarius
41
Berdasarkan tabel VIII, kontrol negatif dengan perubahan persen proteksi
geliat sebesar -100,0 ± 7,9% memiliki perbedaan 100 % dengan kontrol positif. Hal
ini disebabkan tidak terjadi proteksi rangsang nyeri oleh kontrol negatif. Dengan kata
lain, kontrol negatif tersebut dikatakan tidak memiliki efek analgesik.
Besar perubahan persen proteksi geliat ketiga peringkat dosis infusa daun M.
tanarius dari dosis terendah hingga dosis tertinggi terhadap kontrol positif berturut-
turut adalah -9,7%; 1,2% dan 15,6%.
Nilai negatif yang terjadi pada kelompok infusa dosis 666,68 mg/kgBB
menunjukkan penurunan persen proteksi geliat dibandingkan asetosal (dosis 666,68
mg/kgBB terjadi penurunan persen proteksi geliat sebesar 9,7 % dari asetosal).
Sementara itu perubahan persen proteksi geliat infusa dosis 3333,4 mg/kgBB dan
16667 mg/kgBB mengalami peningkatan jika dibandingkan dengan asetosal (dosis
3333,4 mg/kgBB terjadi peningkatan persen proteksi geliat sebesar 1,2 % dari
asetosal dan dosis 16667 mg/kgBB terjadi peningkatan persen proteksi geliat sebesar
15,6 % dari asetosal). Hal ini berarti untuk dosis 3333,4 mg/kgBB memiliki potensi
analgesik yang hampir sama dengan asetosal namun untuk dosis 16667 mg/kgBB
memiliki potensi analgesik yang lebih tinggi daripada asetosal.
42
Tabel IX. Hasil uji Scheffe perubahan persen proteksi geliat terhadap asetosaldosis 91 mg/kgBB pada kelompok perlakuan infusa daun M. tanarius
Kelompok IDM dosis666,68
mg/kgBB
IDM dosis3333,4
mg/kgBB
IDM dosis16667
mg/kgBB
Aquadestdosis16667
mg/kgBB
Asetosaldosis 91
mg/kgBB
IDM dosis 666,68mg/kgBB
- TB B B TB
IDM dosis 3333,4mg/kgBB
TB - TB B TB
IDM dosis 16667mg/kgBB
B TB - B TB
Aquadest dosis16667 mg/kgBB
B B B - B
Asetosal dosis 91mg/kgBB
TB TB TB B -
Keterangan :TB = Berbeda tidak bermakna (p > 0,05)B = Berbeda bermakna (p < 0,05)IDM = Infusa Daun M. tanarius
Hasil uji Scheffe menunjukkan bahwa ketiga peringkat dosis infusa daun M.
tanarius (dosis 666,68 mg/kgBB; dosis 3333,4 mg/kgBB dan dosis 16667 mg/kgBB)
memiliki perubahan persen proteksi geliat yang berbeda tidak bermakna dengan
asetosal. Hal ini berarti bahwa ketiga peringkat dosis memiliki potensi analgesik yang
sebanding dengan asetosal 91 mg/kgBB.
Pada penelitian ini, pengujian efek analgesik infusa daun M. tanarius
merupakan skrining awal farmakologi untuk mengatahui ada tidaknya efek analgesik
infusa daun M. tanarius pada mencit betina galur Swiss. Dosis yang digunakan
merupakan dosis yang diperoleh dengan menggunakan konsentrasi terpekat sehingga
dosis tertinggi merupakan dosis maksimal dan range dosis yang digunakan masih
terlalu lebar yang apabila dikonversikan pada manusia 50 kg masih terlalu tinggi
43
(92,36 g). Dengan demikian tidak menutup kemungkinan adanya efek toksik yang
dapat ditimbulkan setelah penggunaan infusa daun M. tanarius sehingga perlu
dilakukan pengujian mengenai toksisitas akut dari infusa daun M. tanarius untuk
mengetahui batas keamanan penggunaan infusa daun M. tanarius. Dosis yang terlalu
tinggi juga dapat dihindari dengan cara pengujian efek analgesik daun M. tanarius
dengan bentuk sediaan maupun penyari yang berbeda. Phommart et al. (2005)
melaporkan bahwa salah satu konstituen dari ekstrak n-heksan dan kloroform dari
daun M. tanarius berupa flavonoid mempunyai aktivitas penangkapan radikal
terhadap DPPH dan nymphaeol B sebagai agen antiinflamasi pada uji
siklooksigenase-2 sehingga tidak menutup kemungkinan dapat dilakukan pengujian
efek analgesik dengan bentuk sediaan yang berbeda.
Efek analgesik dari infusa daun M. tanarius diduga karena adanya
kandungan senyawa glikosida yaitu macarangioside A dan mallophenol B yang larut
dalam air yang dapat diisolasi dari ekstrak metanol M. tanarius yang menunjukkan
aktivitas penangkapan radikal terhadap DPPH (Matsunami et al., 2006). Dilihat dari
pendekatan struktur, senyawa-senyawa tersebut dapat memiliki aktivitas
penangkapan radikal bebas karena adanya gugus karbonil (C=O) dengan ikatan
rangkap terkonjugasi dan memiliki ikatan α-β unsaturated. Ciri khas dari ikatan α-β
unsaturated yaitu mempunyai ikatan sigma dan phi, dimana elektron pada ikatan
sigma kuat sedangkan elektron pada ikatan phi lemah, sehingga elektron pada ikatan
phi dapat melompat atau berpindah. Jika ikatan α-β unsaturated terprotonasi, maka
akan terjadi perpindahan elektron seperti pada gambar 8.
44
Gambar 8. Perpindahan elektron ikatan α-β unsaturated pada macarangioside Adan mallophenol B
Atom C pada posisi β akan bermuatan positif. Hal ini dikarenakan adanya
lompatan elektron pada ikatan phi. Kemungkinan besar, atom C pada posisi β inilah
yang akan menangkap radikal bebas.
Sumber utama radikal bebas pada mamalia di antaranya pada proses sintesis
prostlagandin. Radikal bebas yang berlebihan akan menyebabkan kerusakan jaringan
sehingga menimbulkan nyeri. Dalam proses nyeri dan peradangan, radikal bebas
terbentuk ketika asam arakidonat dikonversi menjadi endoperoksida melalui jalur
siklooksigenase dan hidroperoksida melalui jalur lipooksigenase sehingga terjadi
pelepasan mediator nyeri dan inflamasi (gambar 9).
O O
+- -OH
a
b
α
β
45
Fosfolipida(membran sel)
Fosfolipase
Radikal bebas Siklooksigenase Lipooksigenase Radikal bebas
COX-1 COX-2
-vasokonstriksi -proteksi lambung -peradangan-bronkokonstriksi -vasodilatasi -peradangan -vasokonstriksi-agregasi -antiagregasi -permeabilitas
meningkat
Gambar 9. Gambar mekanisme pelepasan mediator nyeri dan inflamasi
Ketika terjadi kerusakan jaringan, jumlah radikal bebas meningkat seiring
dengan peningkatan produksi peroksida, padahal tubuh memproduksi antioksidan
endogen tang terbatas seperti superoksida dismutase (SOD) yang bekerja
menstabilkan radikal. Apabila jumlah radikal bebas makin banyak, antioksidan
endogen tak mampu lagi mengatasinya secara efektif sehingga dibutuhkan
antioksidan dari luar (eksogen). Adanya senyawa macarangioside A dan mallophenol
Asam arakidonat
Asam hidroperoksidaEndoperoksida
tromboksan prostasiklin prostaglandin
Leukotrien
LTB4 LTC4-LTD4-LTE4
46
B dapat menangkap radikal bebas tersebut yang diduga dapat menghambat jalur
siklooksigenase dan lipooksigenase. Dengan demikian mediator-mediator nyeri dan
peradangan tidak dapat terbentuk dan tidak terjadi nyeri (Tjay dan Rahardja, 2007).
Penelitian skrining awal farmakologi untuk mengetahui ada tidaknya efek
analgesik dari infusa daun M. tanarius pada mencit betina galur Swiss ini
membuktikan bahwa infusa daun M. tanarius memiliki efek analgesik pada mencit
betina galur Swiss namun informasi yang terkait dengan senyawa yang bertanggung
jawab terhadap efek analgesik serta bagaimana mekanisme efek analgesik dari infusa
daun M. tanarius tersebut belum pernah dilaporkan. Oleh karena itu perlu dilakukan
pengujian lebih lanjut untuk mengetahui senyawa yang bertanggung jawab terhadap
aktivitas analgesik dari infusa daun M. tanarius.
D. Perhitungan ED50 Infusa daun M. tanarius
Dosis efektif median atau ED50 merupakan dosis yang dapat menimbulkan
efek terapi pada 50% individu. ED50 ini biasa digunakan untuk menentukan indeks
terapi, dimana indeks terapi suatu obat merupakan ukuran keamanan obat.
Pada penelitian ini, ED50 yang ditetapkan merupakan ED50 infusa daun M.
tanarius yang memiliki efek analgesik. ED50 dari infusa daun M. tanarius berarti
bahwa dosis efektif dari infusa daun M. tanarius yang dapat menimbulkan efek
analgesik pada 50% individu.
47
Nilai ED50 infusa daun M. tanarius dapat diperoleh dengan persamaan
regresi antara log dosis infusa daun M. tanarius dengan persen proteksi geliat.
Hasilnya dapat dilihat pada gambar 10.
Gambar 10. Grafik log dosis vs % proteksi geliat infusa daun M.tanarius
Dari gambar 10 dapat diketahui bahwa persamaan regresi yang diperoleh
adalah y = 11,52x + 24,73. Dari persamaan tersebut maka dapat diperoleh nilai ED50
dari infusa daun M. tanarius adalah sebesar 154,88 mg/kgBB. Hal ini berarti bahwa
dosis infusa daun M. tanarius sebesar 154,88 mg/kgBB telah dapat menimbulkan
efek analgesik pada 50% individu pada mencit betina galur Swiss.
48
BAB VKESIMPULAN DAN SARAN
A. Kesimpulan
Berdasarkan penelitian yang dilakukan dapat disimpulkan bahwa :
1. Infusa daun M. tanarius memiliki efek analgesik pada mencit betina galur Swiss.
2. Persen proteksi geliat infusa daun M. tanarius pada mencit betina galur Swiss pada
dosis 666,68 mg/kgBB, dosis 3333,4 mg/kgBB, dan dosis 16667 mg/kgBB
berturut-turut adalah 57,6 %; 64,5% dan 73,7%.
3. Perubahan persen proteksi geliat infusa daun M. tanarius pada mencit betina galur Swiss
pada dosis 666,68 mg/kgBB, dosis 3333,4 mg/kgBB, dan dosis 16667 mg/kgBB
berturut-turut adalah -9,7%; 1,2% dan 15,6%.
4. ED50 infusa daun M. tanarius pada mencit betina galur Swiss adalah 154,88 mg/kgBB.
B. Saran
Berdasarkan penelitian yang dilakukan, perlu dilakukan penelitian tentang :
1. Penelitian mengenai pengujian efek analgesik daun M. tanarius dengan bentuk
sediaan yang berbeda.
2. Penelitian lanjutan untuk mengetahui senyawa yang bertanggung jawab terhadap
aktivitas analgesik dari infusa daun M. tanarius.
3. Penelitian mengenai toksisitas akut dari infusa daun M. tanarius.
49
DAFTAR PUSTAKA
Anonim, 2010a, Prosea-Macaranga tanarius,
http://www.proseanet.org/prohati4/browser.php?docsid=162, diakses
tanggal 19 Maret 2010
Anonim, 2010b, Pain, http://medical-dictionary.thefreedictionary.com/Pain, diakses
tanggal 24 November 2010
Anonim, 2010c, Informasi Obat Asetosal,
http://diskes.jabarprov.go.id/index.php?mod=pubInformasiObat&idMenuKi
ri=45&idSelected=1&idObat=18&page, diakses tanggal 24 November 2010
Anonim, 2010d, Teknologi Penyiapan Simplisia Terstandar Tanaman Obat,
http://balittro.litbang.deptan.go.id/ind/index.php?option=com_content&vie
w=article&id=75:teknologi-penyiapan-simplisia-terstandar-tanaman-
obat&catid=19:artikel, diakses tanggal 20 November 2010
Depkes RI, 1986, Sediaan Galenik, 8-25, Departemen Kesehatan Republik Indonesia,
Jakarta
Depkes RI, 1995, Farmakope Indonesia, edisi IV, 31, Departemen Kesehatan
Republik Indonesia, Jakarta
DiPiro, J.T., Tabert, R.L., Yee, G.C., Matzke, G.R., Wells, B.G., and Posey, M.,
2008, Pharmacotherapy: A Patophysiologic Approach, 989-1002, McGraw-
Hill, USA
Dugdale, D.C., 2009, Pain, http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/pain.html, diakses
tanggal 22 November 2010
Handara, P. D., 2006, Efek Analgesik Infusa Batang Brotowali (Tinospora crispa (L)
Miers.) Pada Mencit Putih Betina, Skripsi, Universitas Sanata Dharma
Yogyakarta
50
Helmenstine, A. M., 2010, Aspirin or Acetylsalicylic Acid,
http://chemistry.about.com/od/medicalhealth/ig/Drug-Photo-
Gallery/Aspirin.-1VJ.htm, diakses tanggal 24 November 2010
Koorders dan Valeton, 1918, Atlas Der Baumarten Von Java, Buch und
Steindruckerei von Fa. P. W. M. TRAP, Leiden
Matsunami, K., Takamori, I., Shinzato, T., Aramoto, M., Kondo, K., Otsuka, H., et
al., 2006, Radical-Scavenging Activities of New Megastigmane Glucosides
from Macaranga tanarius (L.) MÜL(L.)-ARG., Chem. Pharm. Bul(L.)
54(10) 1403-1407
Matsunami, K., Otsuka, H., Kondo, K., Shinzato, T., Kawahata, M., Yamaguchi, K.,
et al., 2009, Absolute configuration of (+)-pinoresinol 4-O-[600-O-galloyl]-
b-D-glucopyranoside, macarangiosides E, and F isolated from the leaves of
Macaranga tanarius, Phytochemistry 70 (2009) 1277–1285
Phytomedika, 1991, Penapisan Farmakologi Pengujian Fitokimia dan Pengujian
Klinik, 49, Yayasan Pengembangan Obat Bahan Alami Phytomedika, Jakarta
Phommart, S., Sutthivaiyakit, P., Chimnoi, N., Ruchirawat, S., dan Sutthivaiyakit, S.,
2005, Constituents of the Leaves of Macaranga tanarius, J. Nat. Prod., 68,
927-930
Pramono, S., 2003, Bahan Obat Alami Ditinjau dari Prospek Bisnis, Makalah
seminar, 25 Mei 2003, Yogyakarta
Puteri, M.G., dan Kawabata, J., 2010, Novel alfa-glucosidase inhibitors from
Macaranga tanarius leaves, Food Chemistry, 123 (2010), 384-389
Putra, D.A.G., 2003, Efek Analgesik Air Perasan Umbi Wortel (Daucus carota L.)
pada Mencit Putih Betina, Skripsi, Fakultas Farmasi Universitas Sanata
Dharma, Yogyakarta
51
Riadiani, R.P., 2006, Efek Analgesik Ekstrak Petroleum Eter Daun Senggani
(Melastoma polyanthum BI.) Pada Mencit Putih Betina, Skripsi, Universitas
Sanata Dharma Yogyakarta
Robinson, T., 1991, The Organic Constituents of Higher Plants, 6th edition,
diterjemahkan oleh Padmawinata, K., 1995, Kandungan Organik Tumbuhan
Tinggi, 191, Penerbit ITB, Bandung
Schmitz, G., Lepper, H., and Heidrich, M., 2009, Pharmacards: Lernkartensystem
Pharmakologie und Toxikologie, diterjemahkan oleh Setiadi, L.,
Farmakologi dan Toksikologi, Edisi 3, 226-268, Penerbit Buku kedokteran
EGC, Jakarta
Tjay, T. H., dan Rahardja, K., 2007, Obat-obat Penting: Khasiat penggunaan dan
Efek-efek Sampingnya, Edisi VI, Cetakan ke-1, 312, Departemen Kesehatan
Republik Indonesia, Jakarta
Turner, R. A., 1965, Screening Method in Pharmacology, Vol I, 160, Academic
Press, New York
Tusthi, G.N.T., 2007, Uji Efek Analgesik Ekstrak Etanol Daun Senggani (Melastoma
polyanthum BI.) Pada Mencit Putih Betina, Skripsi, Universitas Sanata
Dharma Yogyakarta
Wilmana, E. M., 1995, Analgesik Anti inflamasi Non Steroid dan Obat Pirai, dalam
Ganiswara, S. G., 1995, Farmakologi dan Terapi, Edisi IV, 210-212, Bagian
Farmakologi Fakutas Kedokteran Universitas Indonesia, Jakarta
52
LAMPIRAN
53
Lampiran 1. Foto daun M. tanarius (Anonim, 2010a)
Lampiran 2. Foto infusa daun M. tanarius
54
Lampiran 3. Foto geliat mencit yang memenuhi syarat
Lampiran 4. Hasil analisis statistik jumlah geliat pada penetapan dosis asamasetat
Descriptive Statistics
9 2.0000 .86603 1.00 3.00dosis_asam_asetatN Mean Std. Deviation Minimum Maximum
One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test
9
2.0000
.86603
.209
.209
-.209
.628
.826
N
Mean
Std. Deviation
Normal Parameters a,b
Absolute
Positive
Negative
Most ExtremeDifferences
Kolmogorov-Smirnov Z
Asymp. Sig. (2-tailed)
dosis_asam_asetat
Test distribution is Normal.a.
Calculated from data.b.
55
Oneway
Descriptives
jumlah_geliat
3 28.0000 7.00000 4.04145 10.6110 45.3890 20.00 33.00
3 85.0000 10.81665 6.24500 58.1299 111.8701 76.00 97.00
3 87.6667 3.05505 1.76383 80.0775 95.2558 85.00 91.00
9 66.8889 29.93094 9.97698 43.8819 89.8958 20.00 97.00
dosis 25 mg/kgBB
dosis 50 mg/kgBB
dosis 75 mg/kgBB
Total
N Mean Std. Deviation Std. Error Lower Bound Upper Bound
95% Confidence Interval forMean
Minimum Maximum
ANOVA
jumlah_geliat
6816.222 2 3408.111 58.314 .000
350.667 6 58.444
7166.889 8
Between Groups
Within Groups
Total
Sum ofSquares df Mean Square F Sig.
Post Hoc Tests
Multiple Comparisons
Dependent Variable: jumlah_geliat
Scheffe
-57.00000* 6.24203 .000 -77.0198 -36.9802
-59.66667* 6.24203 .000 -79.6865 -39.6469
57.00000* 6.24203 .000 36.9802 77.0198
-2.66667 6.24203 .914 -22.6865 17.3531
59.66667* 6.24203 .000 39.6469 79.6865
2.66667 6.24203 .914 -17.3531 22.6865
(J) dosis_asam_asetatdosis 50 mg/kgBB
dosis 75 mg/kgBB
dosis 25 mg/kgBB
dosis 75 mg/kgBB
dosis 25 mg/kgBB
dosis 50 mg/kgBB
(I) dosis_asam_asetatdosis 25 mg/kgBB
dosis 50 mg/kgBB
dosis 75 mg/kgBB
MeanDifference
(I-J) Std. Error Sig. Lower Bound Upper Bound
95% Confidence Interval
The mean difference is significant at the .05 level.*.
56
Homogeneous Subsets
jumlah_geliat
Scheffea
3 28.0000
3 85.0000
3 87.6667
1.000 .914
dosis_asam_asetatdosis 25 mg/kgBB
dosis 50 mg/kgBB
dosis 75 mg/kgBB
Sig.
N 1 2
Subset for alpha = .05
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000.a.
Lampiran 5. Hasil analisis statistik jumlah geliat pada penetapan
selang waktu pemberian
NPar Tests
Descriptive Statistics
9 2.0000 .86603 1.00 3.00selang_waktu_pemberian
N Mean Std. Deviation Minimum Maximum
One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test
9
2.0000
.86603
.209
.209
-.209
.628
.826
N
Mean
Std. Deviation
Normal Parameters a,b
Absolute
Positive
Negative
Most ExtremeDifferences
Kolmogorov-Smirnov Z
Asymp. Sig. (2-tailed)
selang_waktu_
pemberian
Test distribution is Normal.a.
Calculated from data.b.
57
Oneway
Descriptives
jumlah_geliat
3 67.6667 5.77350 3.33333 53.3245 82.0088 61.00 71.00
3 45.0000 3.00000 1.73205 37.5476 52.4524 42.00 48.00
3 37.3333 2.30940 1.33333 31.5965 43.0702 36.00 40.00
9 50.0000 14.08900 4.69633 39.1702 60.8298 36.00 71.00
5 menit
10 menit
15 menit
Total
N Mean Std. Deviation Std. Error Lower Bound Upper Bound
95% Confidence Interval forMean
Minimum Maximum
ANOVA
jumlah_geliat
1492.667 2 746.333 46.972 .000
95.333 6 15.889
1588.000 8
Between Groups
Within Groups
Total
Sum ofSquares df Mean Square F Sig.
Post Hoc Tests
Multiple Comparisons
Dependent Variable: jumlah_geliat
Scheffe
22.66667* 3.25463 .001 12.2282 33.1051
30.33333* 3.25463 .000 19.8949 40.7718
-22.66667* 3.25463 .001 -33.1051 -12.2282
7.66667 3.25463 .140 -2.7718 18.1051
-30.33333* 3.25463 .000 -40.7718 -19.8949
-7.66667 3.25463 .140 -18.1051 2.7718
(J) selang_waktu_pemberian10 menit
15 menit
5 menit
15 menit
5 menit
10 menit
(I) selang_waktu_pemberian5 menit
10 menit
15 menit
MeanDifference
(I-J) Std. Error Sig. Lower Bound Upper Bound
95% Confidence Interval
The mean difference is significant at the .05 level.*.
58
Homogeneous Subsets
jumlah_geliat
Scheffea
3 37.3333
3 45.0000
3 67.6667
.140 1.000
selang_waktu_pemberian15 menit
10 menit
5 menit
Sig.
N 1 2
Subset for alpha = .05
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000.a.
Lampiran 6. Hasil analisis statistik jumlah geliat pada uji efek
analgesik infusa daun M. tanarius
Descriptive Statistics
25 3.0000 1.44338 1.00 5.00perlakuanN Mean Std. Deviation Minimum Maximum
One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test
perlakuan
N 25NormalParameters(a,b)
Mean3.0000
Std. Deviation 1.44338Most ExtremeDifferences
Absolute.156
Positive .156Negative -.156
Kolmogorov-Smirnov Z .779Asymp. Sig. (2-tailed) .579
a Test distribution is Normal.b Calculated from data.
59
Descriptives
jumlah_geliat
5 45.2000 3.19374 1.42829 41.2344 49.1656 41.00 49.00
5 37.8000 7.32803 3.27719 28.7011 46.8989 30.00 49.00
5 28.0000 1.00000 .44721 26.7583 29.2417 27.00 29.00
5 106.6000 11.99166 5.36284 91.7104 121.4896 96.00 126.00
5 38.6000 5.17687 2.31517 32.1721 45.0279 34.00 47.00
25 51.2400 29.47496 5.89499 39.0733 63.4067 27.00 126.00
IDM dosis666,68 mg/kgBB
IDM dosis3333,4 mg/kgBB
IDM dosis16667 mg/kgBB
Aquadest
Asetosal
Total
N Mean Std. Deviation Std. Error Lower Bound Upper Bound
95% Confidence Interval forMean
Minimum Maximum
ANOVA
jumlah_geliat
19908.560 4 4977.140 105.672 .000
942.000 20 47.100
20850.560 24
Between Groups
Within Groups
Total
Sum ofSquares df Mean Square F Sig.
60
Multiple Comparisons
Dependent Variable: jumlah_geliat
Scheffe
7.40000 4.34051 .584 -7.2965 22.0965
17.20000* 4.34051 .016 2.5035 31.8965
-61.40000* 4.34051 .000 -76.0965 -46.7035
6.60000 4.34051 .682 -8.0965 21.2965
-7.40000 4.34051 .584 -22.0965 7.2965
9.80000 4.34051 .313 -4.8965 24.4965
-68.80000* 4.34051 .000 -83.4965 -54.1035
-.80000 4.34051 1.000 -15.4965 13.8965
-17.20000* 4.34051 .016 -31.8965 -2.5035
-9.80000 4.34051 .313 -24.4965 4.8965
-78.60000* 4.34051 .000 -93.2965 -63.9035
-10.60000 4.34051 .243 -25.2965 4.0965
61.40000* 4.34051 .000 46.7035 76.0965
68.80000* 4.34051 .000 54.1035 83.4965
78.60000* 4.34051 .000 63.9035 93.2965
68.00000* 4.34051 .000 53.3035 82.6965
-6.60000 4.34051 .682 -21.2965 8.0965
.80000 4.34051 1.000 -13.8965 15.4965
10.60000 4.34051 .243 -4.0965 25.2965
-68.00000* 4.34051 .000 -82.6965 -53.3035
(J) perlakuanIDM dosis3333,4 mg/kgBB
IDM dosis16667 mg/kgBB
Aquadest
Asetosal
IDM dosis666,68 mg/kgBB
IDM dosis16667 mg/kgBB
Aquadest
Asetosal
IDM dosis666,68 mg/kgBB
IDM dosis3333,4 mg/kgBB
Aquadest
Asetosal
IDM dosis666,68 mg/kgBB
IDM dosis3333,4 mg/kgBB
IDM dosis16667 mg/kgBB
Asetosal
IDM dosis666,68 mg/kgBB
IDM dosis3333,4 mg/kgBB
IDM dosis16667 mg/kgBB
Aquadest
(I) perlakuanIDM dosis666,68 mg/kgBB
IDM dosis3333,4 mg/kgBB
IDM dosis16667 mg/kgBB
Aquadest
Asetosal
MeanDifference
(I-J) Std. Error Sig. Lower Bound Upper Bound
95% Confidence Interval
The mean difference is significant at the .05 level.*.
61
jumlah_geliat
Scheffea
5 28.0000
5 37.8000 37.8000
5 38.6000 38.6000
5 45.2000
5 106.6000
.243 .584 1.000
perlakuanIDM dosis16667 mg/kgBB
IDM dosis3333,4 mg/kgBB
Asetosal
IDM dosis666,68 mg/kgBB
Aquadest
Sig.
N 1 2 3
Subset for alpha = .05
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
Uses Harmonic Mean Sample Size = 5.000.a.
Lampiran 7. Data persen proteksi geliat pada uji efek analgesik beserta hasilanalisis statistiknya
Perlakuan Replikasi
1
Replikasi
2
Replikasi
3
Replikasi
4
Replikasi
5
Rata-rata
IDM dosis
16667
mg/kgBB
74.6717 72.7955 74.6717 72.7955 73.7336 73.7336
IDM dosis
3333,4
mg/kgBB
69.0432 62.4765 54.0338 71.8574 65.2908 64.54034
IDM dosis
666,68
mg/kgBB
56.848 61.5385 55.9099 54.0338 59.6623 57.5985
Aquadestdosis 16667mg/kgBB
2.439 -18.1989 -2.2514 8.0675 9.9437 0
Asetosal
dosis 91
mg/kgBB
55.9099 62.4765 66.2289 66.2289 68.1051 63.78986
62
NPar Tests
Descriptive Statistics
25 3.0000 1.44338 1.00 5.00perlakuanN Mean Std. Deviation Minimum Maximum
One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test
25
3.0000
1.44338
.156
.156
-.156
.779
.579
N
Mean
Std. Deviation
Normal Parametersa,b
Absolute
Positive
Negative
Most ExtremeDifferences
Kolmogorov-Smirnov Z
Asymp. Sig. (2-tailed)
perlakuan
Test distribution is Normal.a.
Calculated from data.b.
Oneway
Descriptives
persen_proteksi
5 57.59850 2.99602139 1.339861 53.8784481 61.3185519 54.03380 61.53850
5 64.54034 6.87432040 3.074290 56.0047438 73.0759362 54.03380 71.85740
5 73.73360 .93810000 .41953107 72.5687950 74.8984050 72.79550 74.67170
5 -.0000200 11.24921342 5.030801 -13.9677633 13.9677233 -18.1989 9.94370
5 63.78986 4.85638272 2.171840 57.7598644 69.8198556 55.90990 68.10510
25 51.93246 27.65006833 5.530014 40.5190688 63.3458432 -18.1989 74.67170
IDM dosis666,68 mg/kgBB
IDM dosis3333,4 mg/kgBB
IDM dosis16667 mg/kgBB
Aquadest dosis16667 mg/kgBB
Asetosal dosis91 mg/kgBB
Total
N Mean Std. Deviation Std. Error Lower Bound Upper Bound
95% Confidence Interval forMean
Minimum Maximum
63
ANOVA
persen_proteksi
17519.664 4 4379.916 105.672 .000
828.967 20 41.448
18348.631 24
Between Groups
Within Groups
Total
Sum ofSquares df Mean Square F Sig.
Post Hoc TestsMultiple Comparisons
Dependent Variable: persen_proteksi
Scheffe
-6.9418400 4.071773 .584 -20.7284610 6.8447810
-16.135100* 4.071773 .016 -29.9217210 -2.3484790
57.598520* 4.071773 .000 43.8118990 71.3851410
-6.1913600 4.071773 .682 -19.9779810 7.5952610
6.94184000 4.071773 .584 -6.8447810 20.7284610
-9.1932600 4.071773 .313 -22.9798810 4.5933610
64.540360* 4.071773 .000 50.7537390 78.3269810
.75048000 4.071773 1.000 -13.0361410 14.5371010
16.135100* 4.071773 .016 2.3484790 29.9217210
9.19326000 4.071773 .313 -4.5933610 22.9798810
73.733620* 4.071773 .000 59.9469990 87.5202410
9.94374000 4.071773 .243 -3.8428810 23.7303610
-57.598520* 4.071773 .000 -71.3851410 -43.8118990
-64.540360* 4.071773 .000 -78.3269810 -50.7537390
-73.733620* 4.071773 .000 -87.5202410 -59.9469990
-63.789880* 4.071773 .000 -77.5765010 -50.0032590
6.19136000 4.071773 .682 -7.5952610 19.9779810
-.75048000 4.071773 1.000 -14.5371010 13.0361410
-9.9437400 4.071773 .243 -23.7303610 3.8428810
63.789880* 4.071773 .000 50.0032590 77.5765010
(J) perlakuanIDM dosis3333,4 mg/kgBB
IDM dosis16667 mg/kgBB
Aquadest dosis16667 mg/kgBB
Asetosal dosis91 mg/kgBB
IDM dosis666,68 mg/kgBB
IDM dosis16667 mg/kgBB
Aquadest dosis16667 mg/kgBB
Asetosal dosis91 mg/kgBB
IDM dosis666,68 mg/kgBB
IDM dosis3333,4 mg/kgBB
Aquadest dosis16667 mg/kgBB
Asetosal dosis91 mg/kgBB
IDM dosis666,68 mg/kgBB
IDM dosis3333,4 mg/kgBB
IDM dosis16667 mg/kgBB
Asetosal dosis91 mg/kgBB
IDM dosis666,68 mg/kgBB
IDM dosis3333,4 mg/kgBB
IDM dosis16667 mg/kgBB
Aquadest dosis16667 mg/kgBB
(I) perlakuanIDM dosis666,68 mg/kgBB
IDM dosis3333,4 mg/kgBB
IDM dosis16667 mg/kgBB
Aquadest dosis16667 mg/kgBB
Asetosal dosis91 mg/kgBB
MeanDifference
(I-J) Std. Error Sig. Lower Bound Upper Bound
95% Confidence Interval
The mean difference is significant at the .05 level.*.
64
Homogeneous Subsets
persen_proteksi
Scheffea
5 -.0000200
5 57.59850
5 63.78986 63.78986
5 64.54034 64.54034
5 73.73360
1.000 .584 .243
perlakuanAquadest dosis16667 mg/kgBB
IDM dosis666,68 mg/kgBB
Asetosal dosis91 mg/kgBB
IDM dosis3333,4 mg/kgBB
IDM dosis16667 mg/kgBB
Sig.
N 1 2 3
Subset for alpha = .05
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
Uses Harmonic Mean Sample Size = 5.000.a.
65
Lampiran 8. Data perubahan persen proteksi geliat terhadap asetosal dosis 91
mg/kgBB pada uji efek analgesik
Perlakuan Replikasi 1 Replikasi 2 Replikasi 3 Replikasi 4 Replikasi 5 Rata-rata
IDM dosis
16667
mg/kgBB
17.058914.1177 17.0589 14.1177 15.5884 15.5883
IDM dosis
3333,4
mg/kgBB
8.2354 -2.0585 -15.2941 12.6471 2.3531.1766
IDM dosis
666,68
mg/kgBB-10.8824 -3.5293 -12.353 -15.2941 -6.4706 -9.7059
Aquadestdosis16667
mg/kgBB
-96.1766 -128.53 -103.529 -87.353 -84.4118 -100
Asetosal
dosis 91
mg/kgBB
-12.353
-2.0585 3.8236 3.8236 6.7648 0
NPar Tests
Descriptive Statistics
25 -18.5882 43.34558212 -128.530 17.05890perubahan_persen_proteksi_geliat
N Mean Std. Deviation Minimum Maximum
66
One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test
25
-18.5882080
43.34558212
.330
.205
-.330
1.651
.009
N
Mean
Std. Deviation
Normal Parametersa,b
Absolute
Positive
Negative
Most ExtremeDifferences
Kolmogorov-Smirnov Z
Asymp. Sig. (2-tailed)
perubahan_persen_proteksi_
geliat
Test distribution is Normal.a.
Calculated from data.b.
Oneway
Descriptives
perubahan_persen_proteksi_geliat
5 -9.70588 4.69672289 2.100438 -15.5376317 -3.8741283 -15.2941 -3.52930
5 1.1764800 10.77653850 4.819415 -12.2043599 14.5573199 -15.2941 12.64710
5 15.58832 1.47060000 .65767231 13.7623289 17.4143111 14.11770 17.05890
5 -100.000 17.63480940 7.886527 -121.8965679 -78.1035521 -128.530 -84.4118
5 .0001000 7.61308716 3.404676 -9.4527962 9.4529962 -12.3530 6.76480
25 -18.5882 43.34558212 8.669116 -36.4803849 -.6960311 -128.530 17.05890
IDM dosis666,68 mg/kgBB
IDM dosis3333,4 mg/kgBB
IDM dosis16667 mg/kgBB
Aquadest
Asetosal
Total
N Mean Std. Deviation Std. Error Lower Bound Upper Bound
95% Confidence Interval forMean
Minimum Maximum
ANOVA
perubahan_persen_proteksi_geliat
43054.943 4 10763.736 105.672 .000
2037.205 20 101.860
45092.148 24
Between Groups
Within Groups
Total
Sum ofSquares df Mean Square F Sig.
67
Post Hoc Tests
Multiple Comparisons
Dependent Variable: perubahan_persen_proteksi_geliat
Scheffe
-10.882360 6.383111 .584 -32.4949404 10.7302204
-25.294200* 6.383111 .016 -46.9067804 -3.6816196
90.294180* 6.383111 .000 68.6815996 111.9067604
-9.7059800 6.383111 .682 -31.3185604 11.9066004
10.882360 6.383111 .584 -10.7302204 32.4949404
-14.411840 6.383111 .313 -36.0244204 7.2007404
101.17654* 6.383111 .000 79.5639596 122.7891204
1.17638000 6.383111 1.000 -20.4362004 22.7889604
25.294200* 6.383111 .016 3.6816196 46.9067804
14.411840 6.383111 .313 -7.2007404 36.0244204
115.58838* 6.383111 .000 93.9757996 137.2009604
15.588220 6.383111 .243 -6.0243604 37.2008004
-90.294180* 6.383111 .000 -111.9067604 -68.6815996
-101.17654* 6.383111 .000 -122.7891204 -79.5639596
-115.58838* 6.383111 .000 -137.2009604 -93.9757996
-100.00016* 6.383111 .000 -121.6127404 -78.3875796
9.70598000 6.383111 .682 -11.9066004 31.3185604
-1.1763800 6.383111 1.000 -22.7889604 20.4362004
-15.588220 6.383111 .243 -37.2008004 6.0243604
100.00016* 6.383111 .000 78.3875796 121.6127404
(J) perlakuanIDM dosis3333,4 mg/kgBB
IDM dosis16667 mg/kgBB
Aquadest
Asetosal
IDM dosis666,68 mg/kgBB
IDM dosis16667 mg/kgBB
Aquadest
Asetosal
IDM dosis666,68 mg/kgBB
IDM dosis3333,4 mg/kgBB
Aquadest
Asetosal
IDM dosis666,68 mg/kgBB
IDM dosis3333,4 mg/kgBB
IDM dosis16667 mg/kgBB
Asetosal
IDM dosis666,68 mg/kgBB
IDM dosis3333,4 mg/kgBB
IDM dosis16667 mg/kgBB
Aquadest
(I) perlakuanIDM dosis666,68 mg/kgBB
IDM dosis3333,4 mg/kgBB
IDM dosis16667 mg/kgBB
Aquadest
Asetosal
MeanDifference
(I-J) Std. Error Sig. Lower Bound Upper Bound
95% Confidence Interval
The mean difference is significant at the .05 level.*.
68
Homogeneous Subsets
perubahan_persen_proteksi_geliat
Scheffea
5 -100.000
5 -9.70588
5 .0001000 .0001000
5 1.1764800 1.1764800
5 15.58832
1.000 .584 .243
perlakuanAquadest
IDM dosis666,68 mg/kgBB
Asetosal
IDM dosis3333,4 mg/kgBB
IDM dosis16667 mg/kgBB
Sig.
N 1 2 3
Subset for alpha = .05
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
Uses Harmonic Mean Sample Size = 5.000.a.
Lampiran 9. Perhitungan penetapan peringkat dosis infusa daun M. tanarius
pada kelompok perlakuan
Dasar penetapan peringkat
Bobot tertinggi mencit = 30 g
Konsentrasi infusa daun M. tanarius = 100%
Pemberian infusa menggunakan ½ volume maksimal pemberian per oral yaitu
0,5 ml
Dengan dasar tersebut maka ditetapkan dosis tertinggi infusa daun M. tanarius
D x BB = C x V
Dosis x Berat badan = Konsentrasi x Volume pemberian
D x 30 g = 1000 mg/ml x 0,5 ml
D = 16,667 mg/g
69
D = 16667 mg/kg (dosis tertinggi)
Untuk dua peringkat dosis di bawahnya, dosis 16667 mg/kg dibagi 5 kemudian dibagi
5 lagi sehingga diperoleh 3 peringkat dosis yaitu : 16667 mg/kg; 3333,4 mg/kg dan
666,68 mg/kg.
Perhitungan konversi dosis dari mencit ke manusia
Faktor konversi dari mencit 20 gram ke manusia 70 kg = 387,9
Rata-rata berat badan manusia Indonesia = 50 kg
Dosis untuk mencit = 16667 mg/kgBB (untuk mencit 20 gram)
= 16,667 g/kg BB mencit
= 0,016667 g / g BB mencit
= 0,33334 g/ 20g BB mencit
Dosis untuk manusia = 387,9 x 0,33334
= 129,30 / 70 kgBB manusia
= 92,36 g / 50 kgBB manusia
70
Lampiran 10. Penetapan kadar air serbuk daun M. tanarius
Penentuan kadar air dilakukan dengan Gravimetri dengan menggunakan alat
moisture balance. Pemanasan sampel dilakukan pada suhu 110° selama 15 menit.
Hasil penetapan kadar air:
Replikasi I Replikasi II Replikasi IIIBobot sebelum
pemanasan 5,015 gram 5,008 gram 5,004 gram
Kadar air 7,92 % 8,21% 8,40%
Rata-rata kadar air = 8,18%
Kadar air serbuk yang dipersyaratkan = kurang dari 10% (Anonim, 2010d) sehingga
kadar air serbuk M. tanarius memenuhi persyaratan.
71
Lampiran 11. Surat keterangan hewan uji
72
Lampiran 12. Surat pengesahan determinasi tanaman M. tanarius
73
BIOGRAFI PENULIS
Penulis skripsi dengan judul “Efek Analgesik Infusa Daun
Macaranga tanarius L. pada Mencit Betina Galur Swiss”
memiliki nama lengkap Dina Wulandari, merupakan anak
kedua dari lima bersaudara pasangan Supardi dan Surtilah.
Penulis dilahirkan di Yogyakarta pada tanggal 5 juli 1989.
Pendidikan formal yang telah ditempuh, yaitu TK PKK
Maguwoharjo (1994-1995), kemudian melanjutkan pendidikan tingkat Sekolah Dasar
di SDN Mustokorejo (1995-2001). Pendidikan Sekolah Menengah Pertama ditempuh
oleh penulis di SMPN 1 Depok (2001-2004), kemudian melanjutkan pendidikan
tingkat menengah atas di SMAN 1 Depok (2004-2007). Penulis kemudian
melanjutkan pendidikan sarjana di Universitas Sanata Dharma Yogyakarta pada tahun
2007. Semasa menempuh kuliah, penulis aktif dalam berbagai kepanitiaan baik dalam
fakultas maupun di luar fakultas. Penulis pernah menjadi Redaktur Pharmaholic
(2008-2009), Bendahara I Hari AIDS Sedunia (2008), Sie Dana dan Usaha Titrasi
(2008), Panitia Khusus (Pansus) INSADHA (2009), Bendahara Bidang Acara
INSADHA (2009), Sie Konsumsi Open House Universitas Sanata Dharma (2009).
Penulis pernah menjadi Pemenang Program Kreativitas Mahasiswa Bidang Penelitian
(2009). Penulis juga pernah menjadi asisten Praktikum Biokimia (2008 dan 2009) dan
Praktikum Toksikologi Dasar (2010).