EKSTRAKSI DENGAN METODE PERKOLASI

BAB IPENDAHULUAN1.1. Latar Belakang            Penggunaan tanaman sebagai obat sudah dikeanal luas baik di Negara berkembang maupun Negara maju. Di Asia dan Afrika 70-80% populasi masih tergantung pada obat tradisional sebagai pengobatan primer. Penggunaan obat tradisional disebabkan kepercayaan masyarakat bahwa obat tradisional berbahan alami, lebih aman dan tidak menimbulkan efek samping.Indonesia merupakan negara yang memiliki kekayaan alam yang berlimpah. Contoh dari kekayaan alam tersebut adalah banyaknya jenis spesies tanaman di Indonesia. Kurang lebih terdapat 30.000 – 40.000 spesies tanaman ada di Indonesia. Berbagai tanaman tersebut sebagian telah dimanfaatkan sebagai obat tradisional oleh masyarakat. Tanaman yang dapat digunakan sebagai obat tradisional tersebut adalah Pala. Pala merupakan tanaman tradisional yang sering digunakan selain sebagai bumbu masak juga sebagai obat tradisional. Seiring berkembangnya zaman, permintaan masyarakat akan pala pun semakin tinggi. Berkat perkembangan ilmu pengetahuan pun kini pala dapat diekstraksi sehingga penggunaannya semakin mudah dan efisien.Ekstraksi adalah proses pemisahan suatu zat berdasarkan perbedaan kelarutannya terhadap dua cairan tidak saling larut yang berbeda, biasanya air dan yang lainnya pelarut organik. Sedangkan ekstrak (Extracta) adalah sedian kering, kental, atau cair dibuat dengan menyari simplisia nabati atau hewani menurut cara yang cocok diluar  pengaruh matahari langsung  ektrak kering harus mudah di gerus menjadi serbuk. Salah satu metode ekstraksi yang dapat digunakan untuk mengekstraksi pala adalah perkolasi.Perkolasi adalah cara penyarian yang dilakukan dengan mengalirkan cairan penyari melalui serbuk simplisia yang telah dibasahi. Kekuatan yang berperan pada perkolasi antara lain: gaya berat, kekentalan, daya larut, tegangan permukaan, difusi, osmosa, adesi, daya kapiler dan daya geseran (friksi). Cara perkolasi lebih baik dibandingkan dengan cara maserasi karena aliran cairan penyari menyebabkan adanya pergantian larutan yang terjadi dengan larutan yang konsentrasinya lebih rendah, sehingga meningkatkan derajat perbedaan konsentrasi. Dan juga karena ruangan diantara serbuk-serbuk simplisia membentuk saluran tempat mengalir cairan penyari.karena kecilnya saluran kapiler tersebut,maka kecepatan pelarut cukup untuk mengurangi lapisan batas, sehingga dapat meningkatkan perbedaan konsentrasi. Untuk menghindari kehilangan minyak atsiri pada pembuatan sari,maka cara perkolasi diganti dengan cara reperkolasi. Pada perkolasi dilakukan pemekatan sari dengan pemanasan pada reperkolaso tidak dilakukan pemekatan. Reperkolasi dilakukan dengan cara sinplisia dibagi dalam beberapa percolator.

1.2. Tujuan Percobaan1. Mahasiswa mampu memahami penyarian simplisia dengan cara perkolasi serta hal-hal yang harus diperhatikan dalam menyari simplisia dengan cara perkolasi.

2.    Mahasiswa mampu membuat ekstrak cair dengan cara perkolasi.BAB IITINJAUAN PUSTAKA

2.1. Pala (Myristica fragrans Houtt)2.1.1. Klasifikasi Ilmiah            Klasifikasi ilmiah atau taksonomi dari tanaman pala adalah (Myristica fragrans Houtt) adalah sebagai berikut :Kingdom              : Plantae (Tumbuhan)Subkingdom        : Tracheobionta (Tumbuhan berpembuluh)Super Divisi         : Spermatophyta (Menghasilkan biji)Divisi                   : Magnoliophyta (Tumbuhan berbunga)Kelas                   : Magnoliopsida (berkeping dua / dikotil) Sub Kelas            : MagnoliidaeOrdo                      : MagnolialesFamili                    : MyristicaceaeGenus                   : MyristicaSpesies                 : Myristica fragrans Houtt

2.1.2. Morfologi Tanaman            Bentuk pohon pala berpenampilan indah, tinggi 10-20 m, menjulang tinggi ke atas dan ke pinggir, mahkota pohonnya meruncing, berbentuk piramidal (kerucut), lonjong (silindris) dan bulat dengan percabangan relatif teratur. Berdasarkan informasi dari para petani pala di Maluku, penentuan pohon pala jantan dan betina secara dini (bibit) dapat diduga dari sudut percabangan. Percabangan mendatar diduga pohon betina dan sudut percabangannya meruncing diduga pohon jantan. Daunnya berwarna hijau mengkilap dan gelap, panjang 5-4 cm dengan lebar 3-7 cm, panjang tangkai daun 0,4-1,5 cm. Penentuan jenis kelamin secara dini dapat diduga dari bentuk helaian daun. Bentuk helaian daun lebih terkulai merupakan ciri pala betina. Sedangkan bentuk helaian daun yang relatif lebih kecil dengan letak daun lebih tegak, menunjukan pala jantan.            Cara pembungaan pada pala unisexual-dioecious, walaupun terdapat juga yang polygamous/ hermaphrodite. Pala merupakan tanaman berumah dua (dioecous) dimana bunga jantan dan bunga betina terdapat pada individu/pohon yang berbeda. Salah satu masalah dalam pengembangan pala adalah penentuan jenis pohon kelamin jantan dan betina harus menunggu sampai tanaman berbunga (lebih kurang 5 tahun). Dari 100 biji atau pohon pala rata-rata terdapat 55 pohon betina, 40 pohon jantan dan 5 pohon yang hermaphrodite.Pohon jantan dicirikan oleh habitus yang lebih kecil dari betina, cabang lebih tegak, daun lebih kecil dan menghasilkan banyak bunga jantan dalam bentuk rangkaian yang membawa 3 sampai 15 bunga per kuntum sedangkan bunga betina sekitar 1 sampai 3 per kuntum. Bunga keluar dari ujung cabang dan ranting. Bunga betina mempunyai kelopak dan mahkota meskipun perkembangannya tidak sempurna. Warna bunga kuning, dengan diameter ± 2,5 mm serta panjangnya ± 3 mm.Mahkota bunga betina bersatu mulai dari bagian pangkal dan pada bagian atas terbuka menjadi 2 bagian yang sistematis. Kelopak kecil dan menutup sebagian kecil

dari bagian bawah mahkota. Di dalam mahkota terdapat pistil yang bersatu dengan bakal bunga. Kepala putik terbelah pada bagian ujungnya.Di dalam bakal buah terdapat bakal kulit biji dan bakal biji. Bentuk bunga jantan agak berbeda dengan bunga betina walaupun warna bunganya juga kuning, dengan diameter 1,5 mm dan panjang ± 3 mm. Mahkota dari bunga jantan bersatu dari pangkal pada 5/8 bagian dan kemudian terbagi menjadi 3 bagian. Kelopak berkembang tidak sempurna, bentuknya seperti cincin yang melingkar pada bagian pangkal mahkota.Benang sari berbentuk silindris merupakan tangkai bersatu, panjangnya ± 2 mm. Sari melekat pada tangkai tersebut membentuk baris-baris yang jumlahnya 8 buah dan berpasangan. Antara baris dibatasi oleh jalur kecil ± 1/10 mm lebarnya.            Bentuk buah pala bulat sampai lonjong, berwarna hijau kekuning-kuningan, apabila masak akan berbelah dua, diameter 3-9 cm. Daging buahnya/ pericarp tebal dan rasanya asam. Biji berbentuk bulat sampai lonjong, panjangnya 1,5-4,5 cm dengan lebar 1-2,5 cm. Warnanya coklat dan mengkilap pada bagian luarnya. Kernel bijinya berwarna keputih-putihan. Fulinya merah gelap dan ada pula yang putih kekuning-kuningan dan membungkus biji menyerupai jala.

2.1.3. Jenis Tanaman PalaFamili Myristicaceae hanya memiliki satu genus dengan ± 200 species yang tersebar di daerah tropis. Terdapat 8 jenis pala yang ditemukan di Maluku yaitu:1.      Myristica succedawa BL., di Ternate disebut pala Patani,2.      M. speciosa Warb, disebut pala Bacan atau pala Hutan,3.      M schefferi Warb, disebut pala Onin atau Gosoriwonin,4.      M. fragrans Houtt, merupakan pala asli Indonesia atau nutmeg tree yang berasal dari pulau Banda dan disebut pala Banda,5.      M. fatua Houtt disebut pala Hutan (Ambon),6.      M. argantea Warb disebut pala Irian atau pala Papua,7.      M. tingens BL. dikenal dengan nama pala Tertia,8.      M. sylvetris Houtt dikenal dengan nama pala Burung atau pala Mendaya (Bacan) atau pala Anan (Ternate).Jenis Myristica fragrans HOUTT yang dibudidayakan di Indonesia, India, Grenada dan Malaysia karena kualitas biji dan fulinya mengandung meristerin terbaik dan kandungannya tinggi.Deskripsi jenis – jenis tanaman pala :1. Myristica fragrans Houtt (Pala Banda)Bentuk percabangan teratur, daunnya kecil sampai sedang, buahnya bulat. Biji besar dan fulinya tebal dan keduanya berkualitas baik, tebal dan harum khas pala, tersebar diberbagai sentra produksi.2. M. argentea (Pala Papua)Bentuk pohon bulat, tinggi, besar dan rimbun. Percabangan tidak teratur, daunnya tebal dan lebar. Ciri khas yang paling menonjol adalah bentuk buahnya lonjong dan besar. Daging buah yang tebal dan besar cocok untuk bahan manisan, asinan, minuman dan bahan-bahan makanan serta minuman lainnya. Melihat keragaan pohonnya, pala jenis ini cocok sebagai pohon pelindung dan penghijauan. Pala jenis ini hanya terdapat di Papua dan Kep. Maluku.

3. M. speciosa (Pala Hutan)Bentuk pohonnya bulat dan rimbun, percabangan tidak teratur, daunnya lebar dan agak tipis. Ciri khasnya adalah buah dan bijinya kecil sebesar biji kacang tanah, fulinya yang paling tipis diantara jenis pala yang lain. Pala jenis ini hanya cocok sebagai pohon pelindung dan penghijauan, banyak ditemukan di hutan kep. Maluku dan Papua.4. M. succedawa (Pala Patani)Bentuk pohon piramidal sampai lonjong, bentuk buahnya agak lonjong sedangkan bijinya bulat sampai lonjong dan fulinya agak tebal. Kualitas biji dan fulinya agak kurang dibandingkan pala Banda. Banyak dibudidayakan di Maluku Utara. Hasil eksplorasi dari berbagai daerah dan sentra produksi pala di kepulauan Maluku, Irian Jaya dan sulawesi Utara, telah terkumpul 430 nomor aksesi pala.dan telah dilakukan penelitian di KP. Cicurug Bogor, Jawa Barat diketahui ada dua aksesi yang mempunyai tingkat produksi yang paling tinggi yaitu turunan F1 pala Banda nomor 11 dan pala Patani nomor 33.

2.1.4. Manfaat Tanaman PalaSelain sebagai rempah-rempah, pala juga berfungsi sebagai tanaman penghasil minyak atsiri yang banyak digunakan dalam industri pengalengan, minuman dan kosmetik.1.      Kulit batang dan daunBatang/kayu pohon pala yang disebut dengan “kino” hanya dimanfaatkan sebagai kayu bakar. Kulit batang dan daun tanaman pala menghasilkan minyak atsiri.2.      FuliFuli adalah benda untuk menyelimuti biji buah pala yang berbentuk seperti anyaman pala, disebut “bunga pala”. Bunga pala ini dalam bentuk kering banyak dijual didalam negeri.3.      Biji palaBiji pala tidak pernah dimanfaatkan oleh orang-orang pribumi sebagai rempahrempah. Buah pala sesungguhnya dapat meringankan semua rasa sakit dan rasa nyeri yang disebabkan oleh kedinginan dan masuk angin dalam lambung dan usus. Biji pala sangat baik untuk obat pencernaan yang terganggu, obat muntahmuntah dan lain-lainya.4.      Daging buah palaDaging buah pala sangat baik dan sangat digemari oleh masyarakat jika telah diproses menjadi makanan ringan, misalnya: asinan pala, manisan pala, marmelade, selai pala, kKristal daging buah pala.

2.1.5. Kandungan Kimia dan TransformasinyaBuah pala mengandung zat-zat : minyak terbang (myristin, pinen, kamfen (zat membius), dipenten, pinen safrol, eugenol, iso-eugenol, alkohol), gliseda (asam-miristinat, asam-oleat, borneol, giraniol), protein, lemak, pati gula, vitamin A, B1 dan C. Minyak tetap mengandung trimyristinBiji pala dikenal sebagai Myristicae Semen yang mengandung biji Myristica Fragrans dengan lapisan kapur, setelah fulinya disingkirkan. Bijinya mengandung minyak

terbang, dan memiliki wangi dan rasa aromatis yang agak pahit. Sebanyak 8 - 17% minyak terbang yang ditawarkan merupakan bahan yang terpenting pada fuli.Kandungan senyawa utama yang terdapat pada biji pala adalah trimiristin. Trimiristin adalah suatu trigliserida , yaitu ester yang terbentuk dari gliserol dan asam miristat. Trimiristin adalah padatan yang berwarna putih kekuningan yang tidak larut dalam air. Trimiristin dapat larut dalam etanol, benzena, eter, diklorometana dan kloroform. Isolasi trimiristin dapat dilakukan dengan ekstraksi sederhana dan kemudian dihablurkan.

2.2. Ekstrak2.2.1. Pengertian Ekstrak            Ekstrak adalah suatu produk hasil pengambilan zat aktif dari tanaman menggunakan pelarut, tetapi pelarutnya diuapkan kembali sehingga zat aktif ekstrak menjadi pekat. Bnetuknya dapat kental atau kering tergantung apakah sebagian aja pelarut yang diuapkan atau seluruhnya.

2.2.2. Jenis-Jenis EkstrakEkstrak dapat dibedakan berdasarkan konsistesi, komposisi dan senyawa aktif yang terdapat di dalamnya. Berdasarkan konsistensinya :1. Ekstrak cair : Ekstrak cair, tingtur, maserat minyak (Extracta Fluida (Liquida)2. Semi solid   : Ekstrak kental (Extracta spissa)3. Kering         : Ekstrak kering (Extracta sicca)

Ekstrak punya 3 bentuk fisik, yaitu cairan, setengah padat/ kental dan serbuk kering.  Untuk ekstrak cair bisa dibuat dengan menyari simplisia dengan pelarut tanpa pelarutnya diaupkan, atau menambahkan sjumlah pelarut ke dalam ekstrak kental sehingga ekstrak tersebut jadi cair. Yang pertama biasanya dinamakan tingtur, yang kedua disebut ekstrak cair. Berdasarkan komposisi :1.      Ekstrak alami, ekstrak murni sediaan obat herbal alami (Native Herbal Drugs Preparation) kering (sicca), berminyak (oleoresin). Tidak mengandung solvent (air, etanol), eksipien (maltodekstrin, laktosa, sakarosa)2.    Ekstrak non alami sediaan ekstrak herbal, sediaan ekstrak (Non native Herbal Drugs Preparation). Ekstrak non alami dapat berbentuk :extracta spissa (campuran gliserin, propilenglikol); extracta sicca (maltodekstrin, laktosa); extracta fluida, tingtur (tinctura), (air, etanol); sediaan cair non alkohol (gliserin, air) ; dan maserat berminyak.Ekstrak juga berdasarkan komposisi yang ada di dalamnya dibagi menjadi ekstrak murni dan sediaan ekstrak. Disebut ekstrak murni apabila ekstraknya tidak mengandung pelarut maupun bahan tambahan lainnya. Ekstrak seperti ini biasanya merupakan produk antara, bersifat higroskopis dan memerlukan proses selanjutnya untuk menjadi sediaan ekstrak. Ekstrak non alami atau sediaan ekstrak herbal merupakan pengolahan lebih lanjut dari ekstrak murni, untuk dibuat sediaan ekstrak, baik kental maupun serbuk kering untuk selanjutnya dibuat sediaan obat seperti kapsul, tablet, cairan dan lain-lainnya.

Berdasarkan pengetahuan tentang senyawa aktif yang terdapat di dalamnya, ekstrak dapat dibedakan menjadi adjusted/standardised extracts, quantified extract, others extracts.1.      Standardised extracts merupakan ekstrak yang diperoleh dengan mengatur kadar senyawa aktif (menambahkan dalam batas toleransi) yang aktifitas terapeutiknya diketahui dengan tujuan untuk mencapai komposisi yang dipersyaratkan. Standardised extract diperoleh dengan menambahkan bahan pembantu atau mencampur ekstrak hasil bets produksi antara ekstrak yang kandungan senyawa aktifnya tinggi dengan ekstrak yang kandungan senyawa aktifnya rendah yang sering terjadi pada pembuatan sediaan ekstrak alami (native herbal drug preparation), sehingga kandungan senyawa aktifnya memenuhi baku yang ditetapkan.Contoh : Ekstrak daun digitalis, ekstrak kering daun Senna (mengandung hidroksi antrasen 5,5 – 8,0% dihitung sebagai sennoside B), ekstrak kering daun Belladona (mengandung alkaloid hyoscyamin 0,95 – 1,05%).2.      Quantified extract merupakan ekstrak yang diperoleh dengan mengatur kadar senyawa yang diketahui berperan dalam menimbulkan khasiat farmakologi/klinis dengan tujuan agar khasiatnya sama.Quantified extract memiliki kandungan senyawa dengan aktifitas yang diketahui, tetapi senyawa yang bertanggung jawab terhadap aktivitas tidak diketahui. Pengaturan kadar senyawa tersebut hanya dapat diperoleh dengan cara mencampur ekstrak pada satu bets tertentu dengan ekstrak bets lain yang memiliki spesifikasi sama dan dalam jumlah native herbal extract yang konstan.Contoh : Ekstrak daun Ginkgo biloba, ekstrak herba Hypericum perforatum3.      Other extract merupakan ekstrak yang diperoleh dengan mengatur proses produksi (keadaan simplisia, pelarut, kondisi/cara ekstraksi) serta spesifikasinya. Pada other extract kandungan senyawa yang bertanggung jawab terhadap aktifitas tidak diketahui (belum diketahui senyawa yang bertanggung jawab menimbulkan efek farmakologi)Contoh : Cratageus Herba dan Passiflora incarnata

Menurut Farmakope Eropa, ada tiga tipe ekstrak yaitu ekstrak tipe A (Standardized extracts), tipe B (Quantified extracts), dan tipe C (Other extracts).1.      Type A (Standardized extracts): Ekstrak yang distandardisasi berdasarkan senyawa aktif atau golongan senyawa yang diketahui.2.      Type B (Quantified exracts) : Ekstrak yang distandardisasi berdasarkan kandungan senyawa dengan aktifitas yang diketahui, sedangkan senyawa aktif yang bertanggung jawab terhadap aktifitas belum diketahui.3.      Type C (Other extracts) : Ekstrak yang distandardisasi berdasarkan senyawa dalam ekstrak namun tidak diketahui hubungan farmakologinya, dibuat agar selalu memiliki mutu yang sama dengan mengatur proses produksi (keadaan simplisia, pelarut, kondisi/cara ekstraksi) serta spesifikasinya.

           2.2.3.   Cara Pembuatan Ekstrak

              Secara garis besar, tahapan pembuatan ekstrak yaitu pembuatan serbuk simplisia, pemilihan pelarut atau cairan penyari, proses ekstraksi atau pemilihan cara ekstraksi, separasi dan pemurnian, penguapan atau pemekatan, pengeringan ekstrak dan penentuan rendemen ekstrak.1.      Pembuatan serbuk simplisiaPembuatan serbuk simplisia dimaksudkan untuk memperluas permukaan simplisia yang kontak dengan cairan penyari. Proses penyerbukan dilakukan sampai derajat kehalusan serbuk yang optimal.2.      Pemilihan pelarut atau cairan penyariPelarut atau cairan penyari menentukan senyawa kimia yang akan terekstraksi dan berada dalam ekstrak. Dengan diketahuinya senyawa kimia yang akan diekstraksi atau yang diduga berkhasiat akan memudahkan proses pemilihan cairan penyari.3.      Proses ekstraksi atau pemilihan cara ekstraksiCara ekstraksi yang dipilih ikut menentukan kualitas ekstrak yang diperoleh. Dalam memilih cara ekstraksi harus diperhatikan prinsip ekstraksi yaitu menyari senyawa aktif sebanyak-banyaknya dan secepat-cepatnya hingga diperoleh efisiensi ekstraksi.4.      Separasi dan pemurnianSeparasi atau pemisahan dan pemurnian merupakan salah satu proses yang diperlukan terhadap ekstrak dalam rangka meningkatkan kadar senyawa aktifnya. Separasi dapat dilakukan dengan cara-cara tertentu seperti dekantasi, penyaringan, sentrifugasi, destilasi dan lain-lain. Pemurnian ekstrak dapat dilakukan dengan cara mengekstraksi zat-zat yang tidak diinginkan dalam ekstrak akan terpisah dari zat-zat yang diinginkan.5.      Penguapan atau pemekatanPenguapan atau pemekatan merupakan proses meningkatkan jumlah zat terlarut dalam ekstrak dengan cara mengurangi jumlah pelarutnya dengan cara penguapan, tetapi tidak sampai kering.6.      Pengeringan ekstrakPengeringan ekstrak umumnya dilakukan untuk membuat sediaan padat seperti tablet, kapsul, pil dan sediaan padat lainnya. Pengeringan ekstrak dapat dilakukan dengan penambahan bahan tambahan (non-native herbal drug preparation) atau tanpa penambahan bahan tambahan (native herbal drug preparation).7.      Penentuan rendemen ekstrakRendemen ekstrak dihitung dengan cara membandingkan jumlah ekstrak yang diperoleh dengan simplisia awal yang digunakan. Rendemen ekstrak dapat digunakan sebagai parameter standar mutu ekstrak pada tiap bets produksi maupun parameter efisiensi ekstraksi.

2.2.4.      Hal yang Mempengaruhi Mutu EkstrakFaktor yang berpengaruh terhadap mutu ekstrak secara garis besar ada dua, yaitu faktor biologi dan faktor kimia.1.      Faktor biologi: Faktor biologi yang mempengaruhi mutu ekstrak berhubungan dengan bahan baku simplisia yang digunakan. Hal-hal yang berpengaruh antara lain : identitas jenis (species), lokasi tumbuhan asal, periode pemanenan hasil tumbuhan, penyimpanan bahan tumbuhan.

2.      Faktor kimiaa.       Faktor internalØ  Jenis senyawa aktif dalam bahan)Ø  Komposisi kualitatif senyawa aktifØ  Komposisi kuantitatif senyawa aktifØ  Kadar total rata-rata senyawa aktifb.      Faktor eksternalØ  Metode ekstraksiØ  Perbandingan ukuran alat ekstraksiØ  Ukuran, kekerasan dan kekeringan bahanØ  Pelarut yang digunakan dalam ekstraksiØ  Kandungan logam beratØ  Kandungan pestisida

2.2.5.      Parameter dan Metode Uji EkstrakUntuk menjamin mutu ekstrak pada setiap bets produksi, harus ada parameter yang diukur dan dan dijamin dalam keadaan konstan. Namun berbeda dengan obat kimia yang kadar zat aktifnya tertentu, penjaminan mutu ekstrak belum dapat dilakukan terhadap bahan aktifnya. Parameter yang dapat ditentukan yaitua.       Parameter spesifikParameter spesifik merupakan parameter yang sedapat mungkin disusun hanya dimiliki oleh ekstrak tanaman yang bersangkutan. Parameter spesifik meliputi.Ø  Identitas ekstrakContoh:Ekstrak kental Rimpang temulawak (Extractum Curcumae Xanthorrhizae Rhizomae Spsissum). Ekstrak kental rimpang temulawak adalah ekstrak yang dibuat dari rimpang tumbuhan Curcuma xanthorrhiza Roxb., suku Zingiberaceae.Ø  Organoleptik ekstrak: Pemerian ekstrak yaitu bentuk, warna, bau, dan rasa.

Ø  Senyawa terlarut dalam pelarut tertentuKandungan kimia, kurkumin, desmetoksikurkumin, minyak atsiri dengan kandungan utama xanthorizol dan oleoresinb. Parameter Non spesifikParameter non spesifik merupakan pengujian fisika, kimia dan mikrobiologi yang dilakukan terhadap ekstrak yang dilakukan untuk menjamin mutu ekstrak pada setiap bets produksi.Parameter yang diuji antara lain :Ø  Susut pengeringanØ  Bobot jenisØ  Kadar airØ  Kadar abuØ  Sisa pelarutØ  Residu pestisidaØ  Cemaran logam berat

Ø  Cemaran mikroba (ALTB, MPN Coliform, Uji angka kapang khamir dan uji cemaran aflatoksin).c. Uji Kandungan Kimia EkstrakUji ini dilakukan jika kandungan kimia ekstrak dan metode ujinya telah diketahui. Pengujian yang dilakukan antara lain : pola kromatogram esktrak, kadar total golongan kandungan kimia dan kadar kandungan kimia tertentu.

2.3.      PerkolasiPerkolasi adalah metoda ekstraksi cara dingin yang menggunakan pelarut mengalir yang selalu baru. Perkolasi banyak digunakan untuk ekstraksi metabolit sekunder dari bahan alam, terutama untuk senyawa yang tidak tahan panas (termolabil). Ekstraksi dilakukan dalam bejana yang dilengkapi kran untuk mengeluarkan pelarut pada bagian bawah. Perbedaan utama dengan maserasi terdapat pada pola penggunaan pelarut, dimana pada maserasi pelarut hanya di pakai untuk merendam bahan dalam waktu yang cukup lama, sedangkan pada perkolasi pelarut dibuat mengalir.Penambahan pelarut dilakukan secara terus menerus, sehingga proses ekstraksi selalu dilakukan dengan pelarut yang baru. Dengan demikian diperlukan pola penambahan pelarut secara terus menerus, hal ini dapat dilakukan dengan menggunakan pola penetesan pelarut dari bejana terpisah disesuaikan dengan jumlah pelarut yang keluar, atau dengan penambahan pelarut dalam jumlah besar secara berkala. Yang perlu diperhatikan jangan sampai bahan kehabisan pelarut. Proses ekstraksi dilakukan sampai seluruh metabolit sekunder habis tersari, pengamatan sederhana untuk mengindikasikannya dengan warna pelarut, dimana bila pelarut sudah tidak lagi berwarna biasanya metabolit sudah tersari. Namun untuk memastikan metabolit sudah tersari dengan sempurna dilakukan dengan menguji tetesan yang keluar dengan KLT atau spektrofotometer UV. Penggunaan KLT lebih sulit karena harus disesuaikan fase gerak yang dipakai, untuk itu lebih baik menggunakan spektrofotometer. Namun apabila menggunakan KLT indikasi metabolit habis tersari dengan tidak adanya noda/spot pada plat, sedangkan dengan spektrofotometer ditandai dengan tidak adanya puncak.Perkolasi dilakukan dalam wadah berbenruk silindris atau kerucut (perkulator) yang memiliki jalan masuk dan keluar yang sesuai. Bahan pengekstaksi yang dialirkan secara kontinyu dari atas, akan mengalir turun secara lambat melintasi simplisia yang umumnya berupa serbuk kasar. Melalui penyegaran bahan pelarut secara kontinyu, akan terjadi proses maserasi bertahap banyak. Jika pada maserasi sederhana tidak terjadi ekstraksi sempurna dari simplisia oleh karena akan terjadi keseimbangan kosentrasi antara larutan dalam seldengan cairan disekelilingnya, maka pada perkolasi melalui simplisia bahan pelarut segar perbedaan kosentrasi tadi selalu dipertahnkan. Dengan demikian ekstraksi total secara teoritis dimungkinkan (praktis jumlah bahan yang dapat diekstraksi mencapai 95%) (Voight,1995).

2.3.1. Jenis-jenis Perkolator            Jenis-jenis dari percolator yaitu:a.       Perkolator bentuk corong

b.      Percolator bentuk tabungc.       Percolator bentuk paruhDasar pemilihan perkolator tergantung pada jenis serbuk simplisia yang akan disari. Jumlah bahan yang disari tidak boleh lebih dari 2/3 tinggi perkolator.

2.3.2. Hal – hal yang Perlu Diperhatikan Pada Metode Perkolasi1.      Pembuatan ekstrak cair dengan penyari etanol dilakukan tanpa pemanasan.2.      Untuk ekstrak cair dengan penyari etanol, hasil akhir sebaiknya dibiarkan ditempat sejuk selama 1 bulan, kemudian disaring sambil mencegah penguapan.3.      Untuk ekstrak cair dengan penyari air, segera dihangatkan pada suhu 90oC, dienapkan dan diserkai kemudian diuapkan pada tekanan rendah tidak lebih dari 50oC hingga diperoleh konsentrasi yang dikehendaki.4.      Bagian leher percolator diberikan kapas atau gabus bertoreh. Kapas atau gabus bertoreh diusahakan tidak basah oleh air kecuali bila penyari mengandung air. Untuk penggunaan gabus, sebaiknya dilapisi dengan kertas saring yang bagian tepinya digunting supaya dapat menempel pada dinding percolator.5.      Pemindahan massa ke percolator dilakukan sedikit demi sedikit sambil ditekan. Penekanan bertujuan untuk mengatur kecepatan aliran penyari. Bila zat tidak tersari sempurna, penekanan dilakukan dengan agak kuat. Selain itu, bila perkolat tidak menetes, massa terlalu padat atau serbuk simplisia terlalu halus, maka percolator harus dibongkar. Lalu dimasukkan kembali dengan penekanan agak longgar bila perlu dicampur dengan sejumlah kerikil yang bersih.6.      Cairan penyari yang dituangkan harus selalu dijaga agar selapis cairan penyari selalu ada dipermukaan massa, diusahakan agar kecepatan cairan penyari sama dengan kecepatan sari menetes.7.      Penambahan cairan penyari dilakukan setelah massa didiamkan selama 24 jam.8.      Kecepatan aliran percolator diatur 1 mL/menit.

BAB IIIMETODOLOGI PERCOBAAN

3.1. Alat dan Bahan3.1.1.      Alata.       Percolatorb.      Beaker glassc.       Timbangan simplisiad.      Batang pengaduke.       Gelas ukurf.       Kertas saringg.      Pot obath.      Kapasi.        Bejana

3.1.2.      Bahana.       Air-etanol (etanol 70%)b.      Tisuc.       Sebuk pala

 3.2. Prosedur Kerja

1. Dibuat 100 bagian perkolat.2. Disiapkan percolator.3. Dibasahi 100 g serbuk simplisia (sebuk pala) dengan 2,5-5 bagian penyari.4. Dimasukkan ke dalam bejana tertutup sekurang-kurangnya selama 3 jam5. Dipindahkan massa sedikit demi sedikit ke dalam percolator sambil tiap kali

ditekan hati-hati6. Dituangkan cairan penyari secukupnya sampai cairan mulai menetes dan

diatas simplisia masih terdapat selapis cairan penyari.7. Ditutup perklator dan dibiarkan selama 24 jam8. Dibiarkan cairan menetes dengan kecepatan 1mL per menit9. Ditambahkan berulang-ulang cairan penyari secukupnya hingga selalu

terdapat selapis cairan penyari diatas simplisia hingga diperoleh 80 bagian perkolat

10. Diperas massa, dicampurkan cairan perasan ke dalam perkolat, ditambahkan cairan penyari hingga diperoleh volume yang diinginkan

11. Dipindahkan ke dalam bejana, ditutup, dibiarkan selama 2 hari ditempat sejuk, terlindung dari cahaya. Enap, dituangkan atau saring

12. Diuapkan perkolat diatas waterbath hingga diperoleh ekstrak kental.

3.3. Data dan Hasil·      Simplisia yang digunakan : 100 gram serbuk pala·      Volume cairan penyari (etanol 50%) yang digunakan : 1000 mL·      Volume cairan penyari untuk membasahi serbuk simplisia : 100 mL·      Pengenceran etanol 96% :V1 . N1 = V2 . N2

1000mL . 50% = V2 . 96%                 V2    =                  V2    =  520 mL

·         Aquadest = 1000mL – 520 mL =  480 mL