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El ensayo de placas es un ensayo cuantitativo que permite determinar la cantidad de virus presente en una muestra dada. Se usa para cuantificar el número de virus en una reserva viral o, en los experimentos de crecimiento de un paso la cantidad de virus que hay en un momento determinado. En resumen, se infectan las monocapas celulares con diluciones seriadas de potencia 10 de un virus. Cuando la partícula viral infecta una célula, se replica y la destruye, lo cual origina una placa. La monocapa de células infectadas generalmente es cubierta con agarosa para restringir el movimiento de los virus nuevos que se liberan. De tal modo, durante la replicación, los virus nuevos solo pueden infectar a las células circundantes, las cuales también son destruidas. Al cabo de varios ciclos de recopilación, se forma un área o placa de células muertas. Las placas se visualizan mediante la tinción de las células con colorantes como el rojo neutro o el violeta cristal. Teóricamente, cada virus en el inoculo original genera un área clara (placa) o una unidad formadora de placa (UFP). En otras palabras un ensayo de placas mide la infectividad. Sin embargo, es posible que las partículas virales presentes en una muestra dada no sean infecciosas. Entonces, mas específicamente, un ensayo de placas mide solo el número de partículas infecciosas en una muestra, no el número total de partículas. The plaque assay is a quantitative assay for determining the amount of virus present in a given sample. It is used to quantify the number of viruses in a viral reservation or, in growth experiments a step the amount of virus in a given time. Briefly, cell monolayers were infected with serial dilutions of 10 of a virus potency. When the virus particle infects a cell, it replicates and destroyed, which causes a

El Ensayo de Placas

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Page 1: El Ensayo de Placas

El ensayo de placas es un ensayo cuantitativo que permite determinar la cantidad de virus presente en una muestra dada. Se usa para cuantificar el número de virus en una reserva viral o, en los experimentos de crecimiento de un paso la cantidad de virus que hay en un momento determinado. En resumen, se infectan las monocapas celulares con diluciones seriadas de potencia 10 de un virus. Cuando la partícula viral infecta una célula, se replica y la destruye, lo cual origina una placa. La monocapa de células infectadas generalmente es cubierta con agarosa para restringir el movimiento de los virus nuevos que se liberan. De tal modo, durante la replicación, los virus nuevos solo pueden infectar a las células circundantes, las cuales también son destruidas. Al cabo de varios ciclos de recopilación, se forma un área o placa de células muertas.

Las placas se visualizan mediante la tinción de las células con colorantes como el rojo neutro o el violeta cristal. Teóricamente, cada virus en el inoculo original genera un área clara (placa) o una unidad formadora de placa (UFP). En otras palabras un ensayo de placas mide la infectividad. Sin embargo, es posible que las partículas virales presentes en una muestra dada no sean infecciosas. Entonces, mas específicamente, un ensayo de placas mide solo el número de partículas infecciosas en una muestra, no el número total de partículas.

The plaque assay is a quantitative assay for determining the amount of virus present in a given sample. It is used to quantify the number of viruses in a viral reservation or, in growth experiments a step the amount of virus in a given time. Briefly, cell monolayers were infected with serial dilutions of 10 of a virus potency. When the virus particle infects a cell, it replicates and destroyed, which causes a plate. The infected cell monolayer is generally covered with agarose to restrict movement of new viruses are released. Thus, during replication, the new virus can infect only neighboring cells, which are also destroyed. After several cycles of collection, an area of dead cells or plate is formed.

The plates were visualized by staining the cells with neutral red dyes such as crystal violet or. Theoretically, each master seed virus creates a clear area (plaque) or plaque forming unit (PFU). In other words plaque assay measures the infectivity. However, it is possible that viral particles present in a given sample are not infectious. Then, more specifically, a plaque assay measures only the number of infectious particles in a sample, not the total number of particles.