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El estrés de los cítricos El estrés de los cítricos y sus soluciones Jose Mª Cerdá Subirachs. [email protected]

El estrés de los cítricosEl estrés de los cítricos y ...¡gina_CEDEFRUT/3ªsemana de la citricultura... · El estrés de los cítricos y sus soluciones Definición y tipos de

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El estrés de los cítricosEl estrés de los cítricos y sus soluciones

Jose Mª Cerdá [email protected]

El estrés de los cítricos y sus solucionesy

Definición y tipos de estrés

Respuestas genéricas y específicas al estrés

Principales funciones fisiológicas de los aminoácidos

Fisiopatías más importantes de los cítricosFisiopatías más importantes de los cítricos

Soluciones BIOIBERICA al estrés de los cítricos

Preguntas y respuestas

Ti t é l¿Tienen estrés los cítricos?

Bioibérica líder mundial en la fabricación y comercialización de aminoácidos.

Investigación, Desarrollo e innovación (I+D+i) centradas en fisiología vegetal.g g

Pionera en la especialización en soluciones para el estrés vegetal (Plant Stress Management).

Siglo Productos para el stress vegetalSiglo XX Aminoácidos

Aminoácidos Siglo XXI Péptidos antimicrobianos

Péptidos inductores proteínas del estrés

¿Qué tienen en común estas 2 imágenes?

Plantación de cítricos Fábrica de BIOIBERICAFábrica de BIOIBERICA

QUE EN LOS 2 SITIOS SE PRODUCEN AMINOÁCIDOS

Señal - Respuesta factores de estrés

SEÑALDE ESTRES

RESPUESTA

ÍESPECÍFICAGENERAL

aminoácidoslibres

Proteinas delestrés

Definición y factores de estrésf y f

Estrés:“conjunto de respuestas bioquímicas o fisiológicas quedefinen un estado particular del organismo diferente alobservado bajo un rango de condiciones óptimas”

Factores de estrés:“cualquier factor que produce un menor crecimientorespecto al óptimo de la planta” (Kozlowski & Pallardy,1997).

Factores bióticos Factores abióticos

FACTORES DELFACTORES DELESTRÉS VEGETALDE LOS CÍTRICOS

Consecuencias de una situación de estrésSi no se prepara anticipadamente la planta a una situación de estrés, la respuesta será más lenta y puede llegar tarde (muerte).Si no aportamos exógenamente aminoácidos a la planta los deberá destruir (hidrolizar) de proteínas ya existentes.Las consecuencias de una situación de estrés comporta a la planta:

un elevado riesgo de muerteen el caso que sobreviva al estrés:

• una merma productiva• un elevado coste energético

• una pérdida de tiempo innecesaria (evitable).p p ( )

Planta Planta menos Pérdida Planta Estresada productiva,

o muerteeconómica

explotación

Mercado/problema/productoMercado Problema Producto

Fitosanitario Insectos Insecticidas

Malas Hierbas Herbicidas

Hongos Fungicidas

Bioestimulante Estrés genérico Aminoácidos Bioestimulante(mercado inespecífico)

Estrés genérico Aminoácidos (TerraSorb, AminoQuelant)

Estrés (mercado específico)

Estrés carencial AminoQuelanZn/Mn

Estrés trasplante IniciumEstrés trasplante Inicium

Estrés por ataque de patógenos

Optimuspatógenos

Estrés salino Stressal

Proteínas del estrés

Factores causantes Proteína de respuesta Referencia

FACTORES ABIÓTICOS

Temperatura HSPs (heat-shock proteins) Vierling, 1991; Waters, et al.,1996

Deficiencia hídrica WSPs (water stress proteins);OLPs (osmotin like proteins)

Bray, 1997; Bray, 2002; Munns,2002; Xiong & Zhu, 2002

Salinidad SSPs (salt stress proteins); LEA (late embryogenesis abundant)

Bray, 1997; Munns, 2002

Asfixia ANPs (anaerobic proteins) Dolferus et al., 2003; Sachs etal., 1996;

ÓFACTORES BIÓTICOS

Insectos, Nemátodos, Hongos, Bacterias, Virus

Proteínas PR, fitoalexinas, inhibidores de proteasas (Pin)

Fischer & Hain, 1994; van Loon,1997

Tabla 1. Factores causantes de estrés vegetal y proteínas de respuesta descritas.

Respuesta del vegetal frente al Estrésgi

co

Estrés

isio

lóg Estrés

Óptimo

Niv

el fi Zona Planta

estresada

N

Muerte Planta

alerta

resistenciaresistencia

Respuesta del vegetal frente al Estrés con la aplicación de Optimus.con la aplicación de Optimus.

gico

Estrés

isio

lóg

ÓptimoEstrés

Niv

el fi Zona Planta

estresada

N

Muerte PlantaTodas las plantas sufren de estrés y

alerta

resistencia

Todas las plantas sufren de estrés y se alejan del óptimo fisiológico y productivo cuando sufren un ataque d tóresistencia de patógenos. Optimus recupera rápidamente la planta y la sitúa en la zona óptima.

¿ Lisis (destrucción) o aporte exógeno ?Situación:

La planta ante una situación de estrés provocado por varios factores (entreellos por ataque de patógeno) necesita, en un periodo muy corto detiempo, una elevada disponibilidad de aminoácidos para fabricar dichasproteínas de defensa (PRs).

A) Lisis:

La planta deberá destruir proteínas existentes.

B) Aporte exógeno:

La aplicación de Optimus® aporta cantidades significativas y de todos losaminoácidos esenciales para que la planta no tenga que destruir (lisis)proteínas ya existentes sino que utilice el aporte exógeno como baseproteínas ya existentes sino que utilice el aporte exógeno como basefundamental de suministro.

Definiciones de alerta, resistencia y t l i l t étolerancia al estrés

Alerta: activación de los mecanismos de defensapropios de una planta.

Tolerancia: la planta sufre estrés pero es capazde sobrevivir (lo tolera).

Resistencia: similar a la tolerancia pero sólofactores específicos, generalmente genéticos, sonresponsables de la respuesta.

Respuestas generales al estrés - i

El nivel de aminoácidos libres es utilizado a menudo como índice de tolerancia de las plantas frente a situaciones d ( t é )adversas (estrés).

Wang et al., 1999

Respuestas generales al estrés - ii

“La acumulación de aminoácidos libres es un mecanismot l t d l i t lpresente en la mayor parte de las especies vegetales

sometidas a estrés, siendo considerada como un fenómenode defensa natural que la propia planta dispone”de defensa natural que la propia planta dispone .

x 21

Mayer et al., 1990

Respuestas generales al estrés - iii

120

80

100

olin

a en

20

40

60

nido

de

pro

hoja

0

20

Con

ten

2º día 4º día 6º día

Control Infectado

Una planta de pimiento infectada por Phytophthora produce endógenamenteUna planta de pimiento infectada por Phytophthora produce endógenamente gran cantidad de aminoácidos (en este caso analizado prolina) para aumentar su resistencia al estrés biótico producido por el ataque del patógeno.

Referencia: Proline Accumulation in Peppers (Capsicum annuun L.). Resistant and Susceptible to Root Rot (Phytophthora capsici Leon). Autor: Isil Oncel et al. Ankara – Turkey.

PRODUCCIÓN DE AMINOÁCIDOS Y ESTRÉS

Aporte exógeno de aminoácidos, vía foliar

E íEnergía

PROTEINASTiempo

AMINOACIDOS

AMONIO

NITRATO

Aporte exógeno de aminoácidos, vía radicular

¿Qué son los aminoácidos?¿Qué son los aminoácidos?

- Son moléculas orgánicas que forman las proteínas

- Dentro de la planta actúan en multitud de funciones fisiológicas

- La aplicación externa de aminoácidos no va dirigida a desarrollo vegetativo,no va dirigida a desarrollo vegetativo, sino que fortalece las funciones que la planta desarrolla en cada momento

- Actúan como estimulantes favoreciendo la recuperación en

, p g , , )

a o ec e do a ecupe ac ó econdiciones desfavorables (sequía, frío, plagas, enfermedades, etc.).

22La mayoría de las proteínas están formadas por cadenas de entre 100 y 5.000 aminoácidos

¿Cuales son los aminoácidos proteicos?¿Cuales son los aminoácidos proteicos?

¿Como se obtienen los¿Como se obtienen los¿Como se obtienen los aminoácidos libres?¿Como se obtienen los aminoácidos libres?

Mét d d bt ió d l i á idMétodos de obtención de los aminoácidos

• SíntesisHidrólisis ácida/ácida controlada• Hidrólisis ácida/ácida controlada

• Hidrólisis básica• Hidrólisis enzimática

24

PROTEINAPROTEINA

¿Cómo se HIDRÓLISIS ÁCIDA

AMINOACIDOS ENLACE PEPTIDICO

obtienen los aminoácidosaminoácidos libres? HIDRÓLISIS ÁCIDA CONTROLADA

HIDRÓLISIS ENZIMÁTICAHIDRÓLISIS ENZIMÁTICAHIDRÓLISIS ENZIMÁTICAHIDRÓLISIS ENZIMÁTICA

Relación de aminoácidos libres respecto a totalesRelación de aminoácidos libres respecto a totales

PORCENTAJE DE AMINOÁCIDOS LIBRES Y TOTALES

THR

CIS

VAL

ARG

TRP

HIS

PRO

PHE

ASP

LYS

ILE

MET

SER

LEU

TYR

ASP

GLU

ALA

GLY

26GRADO DE HIDROLISIS MEDIA: 72 %

0 50 100

AA libres T.S. COMPLEXGRADO DE HIDROLISIS MEDIA: 35%

0 50 100

AA libres SIAPTONGRADO DE HIDROLISIS MEDIA: 21%

0 50 1

AA libres ISABIONx 2

TERRA-SORB®. FUNCIONES FISIOLÓGICAS

1. RESISTENCIA Y RECUPERACIÓN DE LA PLANTA EN SITUACIONES DE ESTRÉS

Una planta sometida a una situación adversa maximiza su ahorro de Energía, disminuye la pérdida de agua y utiliza las reservas para

Estrés Aminoácidos

mantener las funciones vitales

Estrés Aminoácidos Bioibérica

ESTOMAS Ci AbESTOMAS Cierran Abren

FOTOSÍNTESIS NETA Disminuye Aumenta

SENESCENCIA FOLIAR Acelera Retrasa

AMINOÁCIDOS Acumulación Suministro27

AMINOÁCIDOS Acumulación SuministroAlta Demanada

TERRA-SORB®. FUNCIONES FISIOLÓGICAS

2. ESTIMULO Y PROTECCIÓN DE LA POLINIZACIÓN Y FRUCTIFICACIÓNFRUCTIFICACIÓN

Polinización, fecundación, cuajado y retención de frutos j yestán sometidos a factores internos y externos a la planta

28

TERRA-SORB®. FUNCIONES FISIOLÓGICAS

3. MEJORA DE LA ABSORCIÓN Y TRANSLOCACIÓN DE SUSTANCIAS DENTRO DE LA PLANTA

Aumento de la permeabilidad de las membranas

29

TERRA-SORB®. FUNCIONES FISIOLÓGICAS

a) Aumento de la absorción y translocación de nutrientesLa polaridad de la molécula da poder de complejaciónLa polaridad de la molécula da poder de complejación

(estudios con Lucena) Es un complejo activo dentro de la planta.

30

TERRA-SORB®. FUNCIONES FISIOLÓGICAS

b) Aumento de la eficacia de los tratamientos fitosanitarios

31

TERRA-SORB®. FUNCIONES FISIOLÓGICAS4 EFECTO SOBRE LA CALIDAD DE LOS FRUTOS

Mejora del calibre, la homogeneidad de frutos y la

4. EFECTO SOBRE LA CALIDAD DE LOS FRUTOS

homogeneidad de la cosecha

32

Presentación de la empresa Bioibérica y del catálogo de sus productos anti-estrés en cítricoscatálogo de sus productos anti estrés en cítricos

Martinez de la Torre (Veracruz),

ESTRÉS CARENCIAL

DESEQUILIBRIO FISIOLÓGICO

DESEQUILIBRIO NUTRICIONAL

AminoQuelantAminoQuelant

+ μAa

DESESTRESAR A CORREGIR DESESTRESAR A LA PLANTA

CORREGIR DEFICIENCIA

36

CITRICOS (limonero)( )

Objetivo: Verificar la eficacia de AminoQuelant Zn/MnObjetivo: Verificar la eficacia de AminoQuelant Zn/Mn en limonero.

Localización: Abarán (Murcia)Localización: Abarán (Murcia)

Cultivo: Limonero

Variedad: Verna

Parcelas: 25 m2Parcelas: 25 m

Repeticiones: 3

CITRICOS (limonero)Condiciones de la aplicación: Árboles con carencia l i ibl h j b i

( )

claramente visibles por síntomas en hojas y brotes sin aplicación de correctores en primavera.

Marco de plantación: 400 árboles

Aplicaciones: Se realizaron 2 aplicaciones:p p

Evaluación: T0+14 D

D i li ióDosis aplicación:

AQ Zn/Mn (5/5): 400 ml/hl

EDTA Zn (13 %) +EDTA Mn (14 %): (200 + 400) ml/hl

CITRICOS (limonero)Incremento de los niveles foliares de Zn y Mn en limonero

( )

1214

bb

81012

pm)

cc

246(p

p

aa

02

Zn Mn

a

Testigo AQ-Zn/Mn EDTA Zn+EDTA Mn

El gráfico muestra una corrrección equilibrada de los 2El gráfico muestra una corrrección equilibrada de los 2 microelementos (Zn y Mn) y significativamente superior frente al corrector standard EDTA utilizado.

M b j B j M di Alt M lt

Antes de la aplicación de AminoQuelant Zn/Mn

Hierro (Fe)

Manganeso (Mn)

Muy bajo Bajo Medio Alto Muy alto

Manganeso (Mn)

Cobre (Cu)

Zi (Z )Zinc (Zn)

Boro (B)

Muy bajo Bajo Medio Alto Muy alto

Después de la aplicación de AminoQuelant Zn/MnMuy bajo Bajo Medio Alto Muy alto

Hierro (Fe)

Manganeso (Mn)Manganeso (Mn)

Cobre (Cu)

Zinc (Zn)Zinc (Zn)

Boro (B)

Fisiopatías específicas cítricosEspecíficas/genérica Nombre común

Fisiopatías específicas cítricos

Específicas(Aminoquelant – Ca)

Rajado Fruto(Aminoquelant Ca) Picado de la corteza

Colapso de la corteza

Genérica(Aminoquelant – Ca +

Bufado (Aminoquelant Ca + Aminoquelant K low pH)

Granulación

ClaretaClareta

AminoQuelant – Ca y AminoQuelant K/low pH contribuyen a reducirAminoQuelant Ca y AminoQuelant K/low pH contribuyen a reducir la incidencia de determinadas fisiopatías presentes en cítricos, como las que se muestran en este cuadro.

RAJADO DEL FRUTO O SPLITTING

Síntomas:Síntomas:

Agrietamiento de la corteza.

Crecimiento diferencial entre pulpa y corteza, alterando el control hormonal

t últi j b l d llque esta última ejerce sobre el desarrollodel fruto.

En España es muy frecuente en Navelinay menos en Ortanique y Nova.

Causas:Causas:• alteraciones climáticas• desórdenes nutricionalesdesórdenes nutricionales• déficits hídricos estacionales• algunos agentes patógenos

PICADO DE LA CORTEZA O PEEL PITTING

Síntomas:S o s:

Desarrollan unas manchas de color marrón en la superficie del frutomarrón en la superficie del fruto.

Se da en el árbol tras el cambio de color y/o durante su almacenamientocolor y/o durante su almacenamiento en cámara.

Posibles causas:• vientos fuertes y fríos• variaciones importantes humedad relativa• el estado de maduración del fruto

ti d i d d• tipo de variedad• etc.

CLARETA O CREASING

Síntomas:Síntomas:

Presencia de pequeñas grietas y roturas en las zonas más blandas (albedo) de lalas zonas más blandas (albedo) de la corteza de los agrios.

F f á il l i l dFrutos muy frágiles al manipulado y transporte.

Variedades más sensibles: Navelina, Washintong Navel, Valencia late, Clementinas y FortunasClementinas y Fortunas

Los primeros síntomas son detectables a los 8 días del cuajado, a los d b l d i ió d l lb d P bdos meses se observa la desintegración del albedo. Pero no se observa claramente hasta el inicio de la maduración.

BUFADO DEL FRUTO

Alt ió fi i ló iAlteración fisiológica caracterizada por la separación de la corteza y la pulpa.de la corteza y la pulpa.

Síntomas:Síntomas:

El fruto afectado es muy sensible al manipulado y se agrieta con i t f ilid d l d l bl d d idcierta facilidad, lo que da a lugar a problemas de podrido.

En la mandarina “Clemenules” la pérdida de zumo provoca la ió d l l é d l dcontracción de la pulpa y ésta se separa de la corteza provocando

el bufado.

TRANSPORTE DEL CALCIO Y EL BORO POR TRANSPIRACION

AminoQuelant-Ca COMPARADO CON OTROS PRODUCTOS

CARACTERÍSTICAS AQ-Ca Cloruro cálcico

Nitrato cálcico

EDTA-Ca

Quelatación/Complejación SI NO NO SIQuelatación/Complejación SI NO NO SI

Aplicación Foliar y di l

Foliar Foliar y di l

Foliarradicular radicular

Actividad transpiratoria SI NO NO NO

Efecto anti-estrés SI NO NO NO

Compatibilidad en tanque Muy alta Media Media Mediap q y

Selectividad Muy alta Baja Media Baja

Proyecto de investigación sobre la expresión y g pgénica de proteínas de patogenicidad (PRs)

provocada por Optimus® en el control del mildiu p p pde tomate.

Objetivo investigación

C d l l t t dif t f d t é biótiCuando las plantas se someten a diferentes formas de estrés bióticoo abiótico producen y acumulan las denominadas proteínas PRsasociadas a la patogénesis (Pathogenesis-Related proteins).asociadas a la patogénesis (Pathogenesis Related proteins).

Por ello el proyecto de investigación se centró en evaluar la posibleexpresión génica con la aplicación de Optimus® en mildiu deexpresión génica con la aplicación de Optimus en mildiu detomate, mediante:

Determinación en imáticaDeterminación enzimática

Expresión proteica

El proyecto de Investigación se realizó en la Universidad deGerona, reconocido centro mundial en el estudio de las proteínas delestrés.

Determinación molecular

Para poder evaluar, y demostrar, la expresión de proteínas depode ev u , y de os , e p es ó de p o e s depatogenicidad con Optimus® en plantas inoculadas con el patógenoy en plantas no inoculadas se debe recurrir a marcadoresmoleculares, éstos fueron:

Enzimas:

f il l i i li (PAL)fenilalanina amonio liasa (PAL).

Proteínas:

glucanasa (PR 2)glucanasa (PR-2)

proteína tipo taumatina (P23)

Actividad enzimática PAL

78

AL

) T0T2

567

átic

a (P

A.m

in)

T3T5Inoculado

34

ad e

nzim

nmol

/gpf

. Inoculado

T0: 2 horas antes del tratamiento.

012

Act

ivid

a (n T2: 2 días después del tratamiento.T3: 3 días después del tratamiento.T5: 5 días después del tratamiento.Inoculado con el hongo.

0Control Optimus

L f il l i i li (PAL) tó ti id dLa fenilalanina amonio liasa (PAL) presentó una mayor actividaden las plantas tratadas con Optimus respecto al control o tratado entodos los tiempos de muestreo (2, 3 y 5 días después deltodos los tiempos de muestreo (2, 3 y 5 días después deltratamiento con el producto) y después de la inoculación con elpatógeno.

Proteínas de la Patogenicidad (PR-2, P23)

Proteína (expresión génica) Control Optimus

PR-2 (glucanasa)PR-2 (glucanasa)

P23 (proteína tipo (p ptaumatina)

Optimus demuestra expresar los genes PR-2 y P23 como consecuencia de la inoculación del patógeno.

Mecanismo de acción

Patógeno

R Rápida respuesta

Estímulo

Transmisión

Inducción de las defensas de

la planta

p

Transmisión

Estímulola planta

Días

HorasC. fenólicos antimicrobianos

Proteinas PRsOtrosHoras

REGRESIÓN ATAQUE PATÓGENO

Conclusiones: el estrés de los cítricos

1. Los cítricos sufren de estrés.

2. Los aminoácidos es la respuesta genérica al estrés.

3. Los péptidos caracterizados inductores de las proteínas del estrés provocan respuestasproteínas del estrés provocan respuestas específicas, para varios tipos de estreses.

BIOIBERICABIOIBERICA

le da las gracias por su asistencia yle da las gracias por su asistencia y atención.