Upload
adha-hujatulatif
View
276
Download
2
Embed Size (px)
Citation preview
8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk
1/34
LAPORAN
GROUP PROJECT
PRAKTIKUM BIOKIMIA
Perbedaan Aktivitas Pemecahan H2O2 pada Berbagai Kondisi Benguk ( Mucuna pruriens)
(Biji Benguk, Benguk Rebus, dan Tempe Benguk !itinjau dari "um#ah $e#embung %ang
!ihasi#kan, &ama Terbentuk $e#embung, dan Tes '%a#a
Ke#ompok )
Anisa 'ur "annah (**22+*-
Putri .handra Har%anto (**22+*2-
Adha Hujatu#ati/ (**22+*0
Hirmampuni Adinda Putri (**22+*0+
.itra Hanum 1ardhani (**22++*
PRODI PENDIDIKAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk
2/34
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
UNIVERSITAS NEGERI YOGYAKARTA
2016
3 P4'!AH5&5A'
A3 "udu#
Perbedaan Aktivitas Pemecahan H2O2 pada Berbagai Kondisi Benguk
( Mucuna pruriens) (Biji Benguk, Benguk Rebus, dan Tempe Benguk !itinjau dari
"um#ah $e#embung %ang !ihasi#kan, &ama Terbentuk $e#embung, dan Tes '%a#a3
B3 &atar Be#akang
Mucuna pruriens termasuk da#am /ami#% 6abaceae3 7pesies ini dikena# dengan
nama benguk atau kara benguk di ndonesia3 7pesies ini juga dikena# dengan sebutan
velvet bean. 7pesies ini ban%ak ditemukan di Asia, A/rica, Pasi/ik, dan juga di
Amerika3
!i ndonesia, benguk dikonsumsi da#am berbagai macam o#ahan3 Benguk
dapat direbus, dikeringkan, hingga dibuat tempe %ang kemudian dapat dibacem
ataupun digoreng3 8eski demikian pengonsumsian benguk sebagai sumber bahan
makanan masih kurang di ndonesia3 Benguk masih menjadi sumber makanan %ang
be#um dikonsumsi secara #uas o#eh mas%arakat ndonesia sebab mas%arakat #ebih
memi#ih tempe kede#ai dibandingkan tempe benguk3
Berbanding terba#ik dengan rendahn%a konsumsi benguk di ndonesia,
permintaan akan benguk di dunia justru meningkat karena benguk memi#iki khasiat
tinggi bagi kesehatam3 Pene#iti bahkan men%atkan bah9a benguk mengandung nutrisi
%ang baik untuk dikonsumsi3 !i da#am benguk atau Mucuna pruriens justru terdapat
ban%ak nutrisi3 'atarajan,et3a#,(2*2) :0 men%atakan bah9a Mucuna form a rich
source of protein, carbohydrate, lipid, fiber, minerals and amino acids. pern%ataan di
atas menekankan bah9a da#am kara benguk, terdapat protein, karbohidrat, serat,
minera#, maupun #emak3 7e#ain itu, 'atarajan,et3a#,(2*2) :- juga men%atakan bah9a
the total daidzin and genistein in Mucuna was found to be higher than in soybeans…
8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk
3/34
!aid;in dan genistein merupakan iso/#avon %ang ber/ungsi sebagai antioksidan3
Keduan%a terkandung da#am kede#ai maupun kara benguk3 8eski demikian,
pern%ataan tersebut menekankan bah9a jum#ah tota# daid;in dan genistein di Mucuna
#ebih tinggi dibandingkan da#am kede#ai3
7e#ain itu, benguk juga memi#iki khasiat #ain3 Khasiat tersebut ada#ah khasiat
antioksidan3 8ucuna pruriens memi#iki kemampuan antilipid peroxidation sehingga
mampu menghi#angkan superoksida3 Lipid peroxidation merupakan proses %ang
men%ebabkan terbentukn%a radika# bebas3 Berkurangn%a proses lipid peroxidation
berarti bah9a pembentukan radika# bebas juga berkurang3 Ha# tersebut didukung o#eh
pene#itian Haresh chandra,et3a#,(2*2)200 bah9a aktivitas kata#ase di se#otak %ang
te#ah ditreatment dengan ekstrak 8ucuna pruriens menga#ami kenaikan3
Tabe# *3 Hasi# pene#itian pengaruh 8ucuna pruriens pada aktivitas kata#ase3
7umber tab#e) Hareshchandra,et3a#,(2*2)20:3
Berdasarkan tab#e hasi# pene#itian di atas, diketahui bah9a aktivitas kata#ase
menga#ami peningkatan pada ke#ompok %ang diberikan treatment Mucuna pruriens3
Hasi# pene#itian o#eh Hareshchandra,et3a#,(2*2)200 juga men%atakan bah9a there is
a moderate decrease in the glutathione peroxidase activity in brain homogenate in
comparison to B!" group. treated group3 $#utathione peroksidase merupakan
en;im %ang ter#ibat da#am metabo#ism g#utathione3 Penurunan aktivitas en;im ini
akan men%ebabkan s%stem anti oksidan da#am tubuh meningkat3 O#eh sebab itu,
Mucuna pruriens dapat meningkatkan aktivitas kata#ase da#am memecah sen%a9a
peroksida3
7e#ain itu, da#am pene#itian 7huk#a,et3a#, (20) *+2 dipero#eh hasi# bah9a
moreover, we also observed that in infertile men who were under psychological stress,
there were low seminal plasma #"$ and catalase activities. But there was
improvement in these enzymes and molecule levels following treatment with M.
pruriens3 Pern%ataan tersebut menekankan bah9a aktivitas kata#ase pada seorang pria
8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk
4/34
%ang sedang menga#ami stress psiko#ogis dapat ditingkatkan dengan treatment
menggunakan kara benguk3
!i beberapa daerah, seperti $unungkidu#, mas%arakat mengonsumsi benguk
dengan merebus ataupun dengan menggoreng dan membacem sete#ah benguk dio#ah
menjadi tempe3 Berto#ak dari berbagai man/aat benguk da#am memecah sen%a9a
peroksida, per#u diketahui pada keadaan apakah benguk pa#ing baik da#am memecah
sen%a9a peroksida3 5ntuk dapat mempero#eh man/aat benguk da#am memecah
sen%a9a peroksida, maka per#u dibuat pi#ihan %ang tepat da#am mengo#ah dan
mengonsumsi benguk3 O#eh sebab itu per#u di#akukann%a suatu pen%e#idikan untuk
men%e#idiki aktivitas kata#ase pada benguk mentah, direbus, maupun da#am bentuk
tempe3
.3 Rumusan 8asa#ah
Berdasarkan uraian #atar be#akang masa#ah di atas maka rumusan masa#ah
da#am pene#itian ini ada#ah sebagai berikut3
* Apakah terdapat perbedaan aktivitas pemecahan H2O2 antara biji benguk,
tempe benguk, dan benguk rebus ditinjau dari jum#ah ge#embung %ang
dihasi#kan, #ama terbentuk ge#embung, dan tes n%a#a<
2 8anakah hasi# %ang #ebih baik antara biji benguk, tempe benguk, dan benguk
rebus da#am memecah H2O2 ditinjau dari jum#ah ge#embung %ang dihasi#kan,
#ama terbentuk ge#embung, dan tes n%a#a<
!3 Tujuan
Berdasarkan masa#ah %ang te#ah dirumuskan di atas, tujuan dari pene#itian
ini ada#ah sebagai berikut3
* 8en%e#idiki perbedaan aktivitas pemecahan H2O2 antara biji benguk, tempe
benguk, dan benguk rebus ditinjau dari jum#ah ge#embung %ang dihasi#kan,
#ama terbentuk ge#embung, dan tes n%a#a3
2 8en%e#idiki hasi# %ang #ebih baik antara biji benguk, tempe benguk, dan
benguk rebus da#am memecah H2O2 ditinjau dari jum#ah ge#embung %ang
dihasi#kan, #ama terbentuk ge#embung, dan tes n%a#a3
43 8an/aat
= 8an/aat Teoretis
8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk
5/34
Hasi# pene#itian ini dapat menambah 9a9asan pengetahuan mengenai
pengo#ahan dan pengonsumsian benguk %ang pa#ing baik untuk mempero#eh
man/aat benguk da#am memecah sen%a9a peroksida3
= 8an/aat Praktis
a3 Bagi pene#iti
Hasi# pene#itian ini dapat menambah 9a9asan pengetahuan dan
pemahaman mengenai pengo#ahan dan pengonsumsian benguk %ang
pa#ing baik untuk mempero#eh man/aat benguk da#am memecah
sen%a9a peroksida3
b3 Bagi mas%arakat
i3 8endorong mas%arakat untuk mengonsumsi benguk3
ii3 8enambah 9a9asan pengetahuan dan pemahaman mengenai pengo#ahan dan pengonsumsian benguk %ang pa#ing baik untuk
mempero#eh man/aat benguk da#am memecah sen%a9a peroksida
%ang berbaha%a bagi tubuh3
8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk
6/34
3 T'"A5A' P57TAKA
A3 4n;im Kata#ase
4n;im ada#ah biokata#isator %ang mampu mempercepat #aju reaksi dengan
menurunkan energ% aktivasi3 4n;im memi#iki peran masing=masing da#am
mempercepat reaksi, sebab en;im bersi/at spesi/ik terhadap substrat %ang
dikata#isis o#ehn%a3 &uhova,et3a#,(2)*>* men%atakan bah9a sa#ah satu dari
en;im utama %ang berperan da#am mengkatabo#isme h%drogen peroksida ada#ah
en;im kata#ase3 4n;im ini dapat ditemui da#am darah, sumsum tu#ang, membranmukosa, ginja# dan hati (Kumar dkk, 2:3 8erupakan hemoprotein %ang
mengandung empat gugus heme3 !i da#am se#, kata#ase ditemukan di da#am
peroksisom3
8ekanisme aktivitas kata#ase sebagai antioksidan dengan cara
mengkata#isis pemecahan H2O2 menjadi H2O dan O2, ada#ah sebagai berikut
(Kumar dkk, 2:3
Kata#ase=6e( ? H2O2 sen%a9a=* ?H2O tahap
7en%a9a=* ? H2O2 kata#ase=6e( ? H2O2 ? O2 tahap
2H2O2 2H2O ? O2
7en%a9a=* merupakan sen%a9a antara serta merupakan kunci dari oksidasi
da#am reaksi en;imatik kata#ase3 Ha# ini disebabkan o#eh keberadaan sen%a9a=*
heme dengan suatu atom oksigen dari mo#eku# H 2O2 pada tahap ini3 Hasi# reaksi
ini membentuk mo#eku# air pada tapak akti/ en;im %ang dekat heme 6e3
Kapasitas reduksi kata#ase tinggi pada suasana H2O2 konsentrasi tinggi,
sedangkan pada konsentrasi rendah kapasitasn%a menurun (.eme#i dkk, 2-@
8i9a dkk, 2:3 Ha# ini disebabkan karena kata#ase memer#ukan reaksi dua
mo#eku# H2O2 da#am proses reduksin%a, sehingga ha# ini #ebih jarang ditemukan
pada konsentrasi substrat rendah (.eme#i dkk, 2-3 Pada konsentrasi H2O2
rendah seperti %ang dihasi#kan dari proses metabo#isme norma#, peroxiredo%sin
(PR %ang ber/ungsi untuk mengikat H2O2 dan mengubahn%a menjadi oksigendan air (8i9a dkk, 2:3
8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk
7/34
Faktor-aktor Ya!" M#$%#!"ar&'( K#r)a E!*($
Aktivitas en;im dipengaruhi beberapa /aktor, antara #ain)
1+ S&'&
Kenaikan temperature mengindikasikan bah9a #aju reaksi dapat meningkat3
Ha# tersebut dapat terjadi sebab menurut 7u and &i, (20)** molecules collide at
a greater fre&uency and with more force at higher temperatures. 'hus, substrates
and enzymes can locate each other easier in the system, speeding up the rate of
the reaction. Pern%ataan di atas menekankan bah9a mo#eku# menjadi #ebih sering
bertabrakan da#am ga%a %ang besar dengan bertambahn%a temperature3 O#eh sebab
itu #aju reaksi menjadi meningkat karena substrat dan en;im menjadi #ebih mudah
bersatu3 8eski demikian, kenaikan temperature dapat meningkatkan energ%
kinetic en;im pada suatu titik %ang dapat mengganggu ikatan non kova#en %ang
mempertahankan struktur tiga dimensi en;im3 Kerusakan tersebut men%ebabkan
rantai po#ipeptida mu#ai terbuka sehingga en;im terdenaturasi dan kehi#angan
kemampuan kata#itikn%a3 Pern%ataan di atas didukung o#eh 8urra%,et3a#,(2)
bah9a the polypeptide chain then begins to unfold, or denature, with an
accompanying rapid loss of catalytic activity.7u and &i,(20)** juga
men%atakan bah9a after a certain point this will no longer be true, as sustained
high temperatures will begin to denature the catalyst, lowering the reaction rate
dramatically3
4n;im pada he9an berdarah panas dan manusia bekerja pa#ing e/isien pada
suhu 0o .3 meski demikian 8urra%,et3a#,(2) menekankan bah9a the
temperature range over which an enzyme maintains a stable, catalytically
competent conformation depends upon(and typically moderately exceeds(the
normal temperature of the cells in which it resides. Temperature optima# masing=
masing en;im berbeda=beda, sebab en;im di da#am tubuh bekerja di se# %ang
berbeda=beda3 Temperature optima# suatu en;im sehingga en;im dapat
memaksima#kan kemampuan kata#itikn%a bergantung pada temperature norma# se#
dimana en;im bekerja3
. %H
7emua en;im peka terhadap perubahan pH, dan nonakti/ pada #ingkungan pH
sangat rendah (asam kuat dan pH tinggi (basa kuat3 Ha# tersebut didasarkan pada
perubahan bentuk sisi akti/ en;im %ang akan berpengaruh pada kee/ekti/an
pengikatan substrat3 'icho#s and .ho#e9iak,(2)+ menje#askan bah9a a s the
8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk
8/34
p* is lowered, an enzyme will tend to gain *+ ions, and eventually enough side
chains will be affected so that the enzymes shape is disrupted. Li%ewise, as the p*
is raised, the enzyme will lose *+ ions and eventually lose its active shape. Many
enzymes have an optimum in the neutral p* range and are denatured at either
extremely high or low p* 3 Pern%ataan tersebut menekankan bah9a pH %ang
rendah ataupun tinggi dapat merusak aktivitas en;im3 7aat pH ter#a#u rendah
sedangkan en;im bekerja di pH netra# ataupun tinggi, maka en;im akan cenderung
mengikat ion H? sehingga rantai %ang men%usun struktur en;im rusak3 O#eh sebab
itu, bentuk en;im rusak3 Begitupu#a dengan pH tinggi3 Bagi en;im %ang tidak
mampu bekerja pada pH tinggi maka akan terjadi perubahan bentuk hingga
kehi#angan sisi akti/ en;im bi#a en;im ditempatkan di pH tinggi3 !engan demikian
pengikatan terhadap substrat dapat menga#ami penurunan3 Berikut merupakan
gra/ik hubungan pH dengan aktivitas en;im3
$ambar *3 $ra/ik hubungan pH dengan aktivitas en;im3
7umber gambar) 8urra%,et3a#,(2)+3
$ra/ik di atas merepresentasikan hubungan antara aktivitas en;im dengan pH3 pH
%ang ter#a#u asam ataupun ter#a#u basa akan mempengaruhi aktivitas en;im3
,+ Ko!#!tra( S&.trat
Konsentrasi substrat turut berpengaruh terhadap kinerja en;im3 "ika pH dan
suhu suatu sistem en;im ada#ah konstan, dan jum#ah substrat ber#ebihan, maka
#aju reaksi ada#ah sebanding dengan jum#ah en;im %ang ada3 7eba#ikn%a jika pH,
suhu dan konsentrasi en;im konstan, maka #aju reaksi ada#ah sebanding dengan
jum#ah substrat (7uhara,2*2)*23
Konsentrasi substrat dapat meningkatkan #aju reaksi hingga mencapai #aju
maksimum3 Bi#a #aju reaksi te#ah mencapai #aju maksimum maka kenaikan
konsentrasi substrat tidak akan meningkat #aju reaksi karena en;im te#ah
8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk
9/34
menga#ami kejenuhan3 8urra%,et3a#,(2)+ mendukung pern%ataan di atas
dengan men%atakan bah9a 6or a t%pica# en;%me, as substrate concentration is
increased, vi increases unti# it reaches a maCimum va#ue - maC3 1hen /urther
increases in substrate concentration do not /urther increase vi, the en;%me is said
to be DsaturatedE 9ith substrate3 $ra/ik di ba9ah ini menunjukkan bah9a
penambahan substrat tidak akan meningkatkan #aju reaksi sete#ah #aju te#ah
mencapai FmaC3 Pada titik ., semua en;im berada da#am kondisi te#ah terikat
dengan substrat membentuk komp#eks en;im substrat (473 O#eh sebab itu tidak
terdapat en;im bebas %ang dapat membentuk komp#eks en;im substrat kemba#i3
!engan demikian, penambahan substrat tidak akan menambah #aju reaksi3
$ambar 23 Pengaruh konsentrasi substrat terhadap #aju reaksi en;imatis3
7umber gambar) 8urra%,et3a#,(2)+3
Representasi keadaan di titik A, B, dan . pada gra/ik ada#ah sebagai berikut3 Titik
. digambarkan pada keadaan bertanda . di gambar3 Keadaan tersebut
menunjukkan te#ah terbentukn%a komp#eks en;im substrat %ang men%ebabkan
tidak adan%a en;im bebas3
$ambar 23 Representasi keadaan en;im da#am konsentrasi substrat rendah (A dan
tinggi (.3
8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk
10/34
7umber gambar) 8urra%,et3a#,(2)>3
A 7umber en;im kata#ase
Pada he9an, kata#ase terdapat pada semua organ, khususn%a di hati %ang
merupakan organ metabo#ik terbesar dan terpenting di tubuh (Gainuri dan
1anandi,2*2)::3 4n;im kata#ase juga dapat ditemukan di tumbuhan3 atalase
is found in animal and plant tissues, and is especially abundant in plant storage
organs such as potato tubers, corms, and in the fleshy parts of fruits ('icho#s and
.ho#e9iak,2)>3 Titik tekan pern%ataan di atas ada#ah bah9a en;im kata#ase
juga dapat ditemukan di umbi=umbian, seperti kentang, buah=buahan, hingga
modi/ikasi perkembangbiakan vegetative tumbuhan, %aitu corm3
Pencampuran kata#ase dengan 8nO2 dapat menimbu#kan panas3 Reaksi antara
keduan%a ada#ah
2H2O2(a ====(cata#ase dan 8nO2===I 2H2O (# ? O2 (g
8anganese dioCide ada#ah kata#is inorganic %ang dapat membantu pencernaan
H2O2 (1a#ter,et3a#,*->)> 3
B Kara Benguk
Kacang=kacangan se#ain dikonsumsi da#am bentuk as#in%a, misa#n%a me#a#ui proses penggorengan dan perebusan, dapat pu#a dikonsumsi da#am bentuk #ain3
7ebagai contoh tahu dan susu kede#ai sebagai hasi# o#ahan kede#ai, tempe sebagai
hasi# /ermentasi kede#ai dan taoge sebagai hasi# perkecambahan kacang3 "enis kacang
%ang #ain te#ah dicoba sebagai bahan baku pembuatan tempe maupun taoge3 Koro
benguk (8ucuna Pruriens, gude (.ajanus cajan, dan koro putih (Phaseo#us #unatus
te#ah dicoba untuk dio#ah menjadi tempe %ang kemudian diuji perubahan aktivitas
en;im /itase se#ama prose pengo#ahann%a (8ahendradatta, 22
Koro merupakan sa#ah satu jenis kacang=kacangan %ang dapat tumbuh di tanah
%ang kurang subur dan kering3 7e#ain untuk diman/aatkan bijin%a, tujuan penanaman
koro ada#ah sebagai tanaman pe#indung dan pupuk hijau (Ba%u Kanetro dan 7et%o
Hastuti, 23
Koro benguk (8ucuna pruriens berasa# dari Asia tropis ban%ak ditanam di
Asia dan Austra#ia3 !i ndonesia tanaman ini ditemukan di "a9a, Ba#i dan 7umatra
%ang mana memi#iki beberapa varietas dengan 9arna ku#it biji abuabu, hitam, cok#at
8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk
11/34
atau berbecak=becak (Anon, *->>@ Tabu#ated n/ormation, *->- cit ndra9ati, *-00 cit
7ri Handajani dan 1indi Atmaka, *--23 Biji koro benguk merupakan sumber protein
tambahan da#am makanan, %ang mana ka%a akan antioksidan (Tripathi dan 5padhat%,
2* cit Bhat et a#3, 203
'amun demikian da#am koro benguk juga terdapat sen%a9a atau /aktor
antinutriti/ seperti /eno#, tanin, &=!opa, #ektin, protease inhibitor (Puga#enthi 8,
2>@ Bhat, 203 Berdasarkan hasi# pene#itian Pangastuti H3P3 dan Tri9ibo9o 7
(*-- bah9a #ama perendaman, perebusan dan pengukusan berpengaruh terhadap
kadar /aktor antinutriti/ pada proses pembuatan tempe3 7e#ain itu ndra9ati, *--0 cit
7ri Handajani dan 1indi Atmaka, *--2 mengatakan bah9a sebagian besar ;at
merugikan %ang terkandung da#am koro benguk rusak o#eh pemanasan dan sebagian
#agi #arut da#am air3 "ika dibandingkan dengan biji kede#ai, kandungan protein dan
#emak biji koro benguk #ebih rendah, tetapi karbohidratn%a dan seratn%a #ebih besar
sehingga berpotensi da#am penanggu#angan pen%akit degenerati/3 Kandungan H.'
da#am biji segar **,> mgJ*g, dan sete#ah perendaman tiga hari tingga# , mg (7ri
Handajani, et a#, *--3
8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk
12/34
7ejauh ini keberadaan asam /itat di da#am bahan makanan keban%akan tidak
dikehendaki3 Ha# ini dikarenakan di da#am bahan makanan asam /itat membentuk
komp#eks dengan minera#=minera# penting dan atau dengan protein3 Ban%ak dari
komp#eks tersebut tidak #arut dan men%ebabkan minera#minera# %ang terikat tidak
tersedia secara bio#ogis bagi tubuh pada kondisi /isio#ogis tertentu3 5mumn%a
pene#itian pada makh#uk hidup memper#ihatkan bah9a asam /itat menghambat
bioavai#abi#itas ;at besi makanan karena terbentukn%a komp#eks3 7emakin tinggi
kandungan asam /itat da#am bahan makanan, semakin sedikit jum#ah ;at besi %ang
dapat diserap tubuh (A#suhendra, 2>3
Pengo#ahan koro pada umumn%a dia9a#i dengan perendaman untuk
menghi#angkan sianidan%a karena kadar sianida pada koro re#ati/ tinggi3 7ete#ah
perendaman biasan%a diikuti dengan pemasakan3 Karena kandungan karbohidrat %ang
tinggi men%ebabkan koro memi#iki tekstur %ang keras, sehingga pemasakan di#akukan
agar teksturn%a menjadi #unak3 Ka#au kede#ai kandungan proteinn%a bisa sekitar >,
sementara untuk Koro bisan%a sekitar *:3
8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk
13/34
$ambar
7umber ) dokumen pribadi
8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk
14/34
. Kandungan 4n;im Kata#ase pada Biji Koro Benguk, Koro Benguk %ang !irebus, dan
Koro Benguk %ang !ijadikan Tempe
Biji koro benguk merupakan jenis biji=bijian %ang mengandung sen%a9a
/eno#ik3 Berdasarkan hasi# pene#itian in vitro menunjukkan bah9a ekstrak
metano# biji koro benguk ( Mucuna pruriens) mempun%ai aktivitas antioksidan3
4kstrak koro benguk dengan konsentrasi **> gJm& mempun%ai aktivitas
pemerangkapan radika# H2O2sebesar > L (Rajesh9ar dkk3, 2>) *=-3
7edangkan pada pengo#ahan biji koro benguk dengan /ermentasi dapat
meningkatkan aktivitas antioksidan3 Ha# itu akan meningkatkan ni#ai /ungsiona#
dari produk tersebut3 Hasi# ana#isis aktivitas antioksidan pada biji koro benguk
ada#ah :0,2 M ,: L dan tempe koro benguk ada#ah ->,>- M ,:2L
(Retnaningsih, dkk, *>03
Antioksidan %ang ada di da#am tempe ini terdapat da#am bentuk iso/#avon3
7en%a9a tersebut masuk da#am ke#ompok /#avonoid, sen%a9a po#i/eno#ik %ang
umumn%a terdapat di da#am buah=buahan, sa%ur=sa%uran, dan biji=bijian3
Antioksidan da#am pengertian kimia ada#ah sen%a9a pemberi e#ektron
(electron donor , da#am arti bio#ogis antioksidan ada#ah semua sen%a9a %ang
dapat meredam radika# bebas dan reactive oxygen species (RO7 %ang bersi/at
oksidan termasuk protein pengikat #ogam3 4n;im=en;im %ang dapat
memusnahkan radika# bebas ada#ah superoksida dismutase (7O!, g#utation
peroksidase ($PC, dan kata#ase3 Antioksidan sering diisti#ahkan sebagai peredam
dan pemerangkap ( scavenger radika# bebas %aitu mo#eku# %ang dapat bereaksi
dengan radika# bebas dan ber/ungsi menetra#kan radika# bebas (Perciva#, *--:) *=
+3
Tempe dibuat me#a#ui proses /ermentasi menggunakan kapang terutama
hizopus oligosporus3 7ete#ah menga#ami proses /ermentasi, tempe memi#iki ni#ai
kecernaan %ang tinggi dan bentuk antioksidan bebas, karena antioksidan tersebut
sudah ter#epas dari sen%a9a gu#a me#a#ui proses hidro#isa pada ikatan ==
g#ikosidik3 7e#ain itu biji koro benguk dibuat tempe untuk menghi#angkan
sen%a9a antigi;i seperti asam sianida (Handajani, 2*) 222=22>3
Pada proses /ermentasi tempe, terjadi biotrans/ormasi iso/#avon g#ikosidamenjadi iso/#avon ag#ikon, %aitu sen%a9a antioksidan tersebut sudah ter#epas dari
8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk
15/34
sen%a9a gu#a me#a#ui proses hidro#isa pada ikatan No=g#ikosidik3 Ha# ini akan
meningkatkan aktivitas antioksidan pada tempe3 Pada proses /ermentasi tempe
terbentuk antioksidan /aktor (,0,+=trihidroksi iso/#avon %ang mempun%ai si/at
antioksidan pa#ing kuat dibandingkan dengan iso/#avon da#am biji3 !engan
demikian tempe koro memi#iki potensi sebagai antioksidan %ang tinggi
(Ratnaningsih, 2*) *>>3
Tempe mengandung antioksidan, sen%a9a %ang mampu menangka#
radika# bebas3 Radika# bebas ada#ah atom atau mo#eku# %ang memi#iki e#ektron
%ang tidak berpasangan dan bersi/at dapat menarik e#ektron dari sen%a9a #ain
sehingga terbentuk radika# bebas %ang baru3 Radika# bebas %ang sangat reakti/
bersi/at tidak stabi#, sehingga berumur sangat pendek dan su#it dideteksi3 .ontoh
sen%a9a reakti/ misa#n%a gugus hidroksi# (=OH, radika# peroksi# (OOH, ion
superoksida (O23, Hidrogen peroksida (H2O2, dan #ain=#ain3 Keberadaan radika#
bebas da#am tubuh dapat men%ebabkan terjadin%a pen%akit degenerati/, misa#n%a
jantung, diabetes, ateroske#orosis, kanker dan sebagain%a3 Bahkan radika# bebas
ini dapat merusak se#aput se# dan !'A (Perciva#, *--:) *=+@ Agba/or dan
'9achuk9u, 2**) +3
8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk
16/34
3 84TO!4 P4'4&TA'
A3 A#at dan Bahan
A#at dan bahan %ang kami gunakan ada#ah sebagai berikut3
A#at )
a3 Tabung reaksi
b3 Pipet tetes
c3 Tabung berska#a
d3 Pisau si#et
e3 7umbat gabusJkaret
/3 'eraca
g3 K#em dans tati/
h3 Bekerge#as
i3 &idi dan korek api
j3 7e#ang p#astic
Bahan
a3 Biji kara benguk
b3 H2O2 *L
c3 Auades
B3 .ara Kerja
a 8engetahui keberadaan en;im kata#ase
8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk
17/34
b 8e#ihat pengaruh panambahan substrat pada aktivitas kata#ase
8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk
18/34
c 8engetahui pengaruh pH terhadap aktivitas en;im kata#ase
8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk
19/34
d 8e#ihat pengaruh suhu terhadap aktivitas en;im kata#ase
8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk
20/34
7kema percobaan
.3 Tabu#asi !ata
Gelas ukur
Gelas beker
Selang plastik
Tabung reaksi
8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk
21/34
7ampe# "um#ah
$e#embung
&ama Terbentuk
$e#embung (menit
Tes '%a#a
*3 Biji koro benguk ?
H2O2
> ???
23 Biji koro benguk
rebus? H2O2
> ?
3 Tempe koro benguk ?
H2O2
:: > ????
+3 Tempe koro benguk
rebus? H2O2
> ??
Keterangan
= ) Tidak 8en%a#a
? ) 7angat redup
?? ) Redup??? ) Terang
???? ) 7angat Terang
????? ) 7angat Terang 7eka#i
!3 Ana#isis !ata
$ra/ik *3 "um#ah $e#embung %ang !ihasi#kan
Biji koro benguk + H2O2
0
20
40
60
80
100
Jumlah Gelembung
Jumla Gelembung
sampel
jumlah gelembng (buah)
$ra/ik 23 5ji '%a#a
8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk
22/34
00!"
11!"22!"
##!"
44!"
#
1
4
2
Tes Nyala
Tes $%ala
BAB
P48BAHA7A'
Percobaan %ang di#akukan pada hari Kamis tangga# 2: 8aret 2* di &aboratorium
Bio#ogi!asar 68PA 5' berjudu# D5ji Kata#ase pada Berbagai Kondisi Benguk ( Mucuna
pruriens) (Biji Benguk, Benguk Rebus, Tempe Benguk Rebus dan Tempe Benguk !itinjau
dari "um#ah $e#embung %ang !ihasi#kan, &ama Terbentuk $e#embung, dan Tes '%a#aE+
Tujuan dari percobaan ini %ang pertama %aitu men%e#idiki perbedaan aktivitas pemecahan
H2O2 antara biji benguk, tempe benguk, dan benguk rebus ditinjau dari jum#ah ge#embung
%ang dihasi#kan, #ama terbentuk ge#embung, dantesn%a#a3Tujuan %ang kedua %aitu
men%e#idikihasi# %ang #ebih baik antara biji benguk, tempe benguk, dan benguk rebus da#am
memecah H2O2 ditinjau dari jum#ah ge#embung %ang dihasi#kan, #ama terbentuk ge#embung,
dantesn%a#a3
Adapun a#at dan bahan %ang digunakan diantaran%a ada#ah tabung reaksi, pipet tetes,
tabung berska#a, pisau, sumbat gabusJkaret, a#u dan mortar, kaki tiga, pembakar spritus,
pe9aktu, neraca, ge#as beker, #idi dan korek api, se#ang p#astic, biji kara benguk, H2O2 *L,
dan air3
Percobaan pertama %ang di#akukan %aitu uji kandungan en;im kata#ase pada biji
koro benguk %ang be#um direbus3 &angkah pertama %ang di#akukan praktikan %aitu
mengha#uskan biji koro benguk dengan a#u dan mortar3 Kemudian menimbang masa biji koro
8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk
23/34
benguk sebesar ,> gr dengan neraca digita#3 7e#anjutn%a memasukan ,>gr biji koro benguk
ke da#am tabung reaksi %ang berisi * m# H2O2 #a#u merangkain%a sesuai skema a#at percobaan3
Adapun hasi# %ang dipero#eh se#ama > menit pada uji kandungan en;im kata#ase
pada biji koro benguk %aitu ge#embung gas seban%ak dan n%a#a bara api %ang terang ???3
Ha# ini menunjukan bah9a terdapat kandungan en;im kata#ase pada biji koro benguk 3
Percobaan %ang di#akukan untuk menguji adan%a kandungan kata#ase pada biji koro
benguk menunjukkan hasi# %ang sesuai dengan teori, bah9a se#ain pada he9an en;im
kata#ase juga terdapat pada tumbuhan, %aitu pada biji koro benguk3 4n;im ini berperan da#am
memecah h%drogen peroksida3
8ekanisme aktivitas kata#ase sebagai antioksidan dengan cara mengkata#isis
pemecahan H2O2menjadi H2O dan O2, ada#ah sebagai berikut (Kumar dkk, 2:3
Kata#ase=6e( ? H2O2 sen%a9a=* ?H2O tahap
7en%a9a=* ? H2O2kata#ase=6e( ? H2O2 ? O2tahap
2H2O2 2H2O ? O2
7en%a9a=* merupakan sen%a9a antara serta merupakan kunci dari oksidasi da#am
reaksi en;imatik kata#ase3 Ha# ini disebabkan o#eh keberadaan sen%a9a=* heme dengan suatu
atom oksigen dari mo#eku# H2O2 pada tahap ini3 Hasi# reaksi ini membentuk mo#eku# air
pada tapak akti/ en;im %ang dekat heme 6e3
8enurutRajesh9ardkk3 (2>) *=- biji koro benguk merupakan jenis biji=bijian
%ang mengandung sen%a9a /eno#ik3 Berdasarkan hasi# pene#itian in vitro menunjukkan
bah9a ekstrak metano# biji koro benguk ( Mucuna pruriens) mempun%ai aktivitas
antioksidan3 4kstrak koro benguk dengan konsentrasi **> gJm& mempun%ai aktivitas
pemerangkapan radika# H2O2 sebesar > L3
Biji koro benguk merupakan sumber protein tambahan da#am makanan, %ang mana
ka%a akan antioksidan3 'amun demikian da#am koro benguk juga terdapat sen%a9a atau
/actor antinutriti/ seperti /eno#, tanin, &=!opa, #ektin, protease inhibitor (Puga#enthi 8, 2>@
Bhat, 203 "ika dibandingkan dengan biji kede#ai, kandungan protein dan #emak biji koro
benguk #ebih rendah, tetapi karbohidratn%a dan seratn%a #ebih besar sehingga berpotensi
da#am penanggu#angan pen%akit degenerati/3
7e#anjutn%a uji pada koro benguk %ang direbus ter#ebih dahu#u3 Berdasarkan hasi#
pen%e#idikan terhadap aktivitas kata#ase pada biji benguk ( Mucuna pruriens rebus, dipero#eh
hasi# bah9a tidak terdapat ge#embung %ang dihasi#kan namun positi/ terhdap uji n%a#a3
Berdasarkan hasi# pen%e#idikan diketahui bah9a biji benguk ( Mucuna pruriens memi#iki
8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk
24/34
aktivitas kata#ase3 Ha# tersebut ditunjukkan dari hasi# pen%e#idikan aktivitas kata#ase dengan
meninjau jum#ah ge#embung %ang dihasi#kan da#am rentang 9aktu > menit dan tes uji n%a#a
untuk menguji keberadaan gas oksigen3
Hasi# pen%e#idikan menunjukkan bah9a uji biji benguk dengan h%drogen peroksida
menghasi#kan ge#embung dengan tes uji n%a#a positi/3 Ha# tersebut menunjukkan bah9a di
da#am biji benguk terdapat en;im kata#ase %ang mampu me#aksanakan proses oksidasi
h%drogen peroksida menjadi oksigen dan air me#a#ui reaksi di ba9ah ini3
2H2O2 2H2O ? O23
!onor?H2O2 donor teroksidasi ?2H2O3
(&uhova,et3a#,2)*>*3
Ha# tersebut didukung o#eh hasi# pene#itian Retnaningsih, dkk ,(2*)*>0 bah9a hasi#
ana#isis aktivitas antioksidan pada biji koro benguk ada#ah :0,2 M ,: L dan tempe koro
benguk ada#ah ->,>- M ,:2L 3 Biji benguk mengandung sen%a9a %ang dapat meredam
radika# bebas dan reactive oxygen species (RO7 %ang bersi/at oksidan seperti h%drogen
peroksida %ang merupakan oksidator kuat3 !engan demikian dapat diketahui bah9a da#am
biji benguk terdapat sen%a9a peredam dan pemerangkap ( scavenger radika# bebas %aitu
mo#eku# %ang dapat bereaksi dengan radika# bebas dan ber/ungsi menetra#kan radika# bebas3
Berdasarkan uraian di atas maka dapat diketahui bah9a da#am biji benguk terdapat
en;im=en;im %ang mampu berperan sebagai aktioksidan3 Hasi# %ang ber#ainan dipero#eh
terhadap hasi# uji biji benguk rebus3 8eski masih mampu men%a#akan bara api da#am
keadaan redup (?, biji benguk rebus tidak menghasi#kan ge#embung %ang terdeteksi3
Peristi9a ini dapat terjadi akibat adan%a perubahan struktur en;im akibat adan%a pemanasan3
Pemanasan dapat merubah struktur en;im sehingga en;im tidak dapat memerankan /ungsin%a
secara norma#3 Ha# tersebut terjadi karena kenaikan temperature dapat meningkatkan energ%
kinetic en;im pada suatu titik %ang dapat mengganggu ikatan non kova#en %ang
mempertahankan struktur tiga dimensi en;im3 Kerusakan tersebut men%ebabkan rantai
po#ipeptida mu#ai terbuka sehingga en;im terdenaturasi dan kehi#angan kemampuan
kata#itikn%a3 Pern%ataan di atas didukung o#eh 8urra%,et3a#,(2) bah9a the polypeptide
chain then begins to unfold, or denature , with an accompanying rapid loss of catalytic
activity. 7u and &i,(20)** juga men%atakan bah9a after a certain point this will no longer
be true, as sustained high temperatures will begin to denature the catalyst, lowering the
8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk
25/34
reaction rate dramatically3 !enaturasi en;im mengakibatkan hi#angn%a kemampuan kata#itik
en;im sehingga #aju reaksi semakin menurun3
4n;im juga tersusun atas protein pada bagian apoen;imn%a3 Kondisi %ang berbeda
dengan di se# tempat protein bekerja dapat men%ebabkan protein kehi#angan /ungisng%a3
Protein dapat kehi#angan struktur tiga dimensin%a me#a#ui proses %ang disebut dengan
denaturasi3 &ehninger,et3a#,(2:) *+ men%atakan bah9a proteins can be denatured by
heat, which has complex effects on the wea% interactions in a protein /primarily hydrogen
bonds). Protein dapat terdenaturasi dengan panas3 Panas dapat mempengaruhi interaksi #emah
da#am protein, %aitu pada ikatan h%drogen protein3 Bi#a temperature meningkat secara
per#ahan, kon/ormasi protein akan tetap sama, namun kenaikan temperature da#am jum#ah
besar akan mu#ai men%ebabkan struktur protein berubah3 8eski struktur protein en;im tidak
rusak di semua sisi, namun kerusakan di satu sisi dapat memengaruhi struktur tota# protein
sehingga terjadi penurunan /ungsi protein3
nteraksi nonkova#en antara en;im dan substrat berperan da#am menghasi#kan energi
%ang mampu menurunkan energi aktivasi reaksi en;imatik3 nteraksi antara substrat dan
en;im menghasi#kan energi bebas %ang disebut binding energy. Binding energy ada#ah
sumber energi bebas utama %ang digunakan o#eh en;im untuk menurunkan energi aktivasi3
8engingat pentingn%a interaksi antara substrat dan en;im, maka struktur protein %ang juga
berperan da#am membentuk interaksi antara en;im dan substrat menjadi penting3 Berikut
merupakan contoh interaksi antara en;im dan substrat3
7umber gambar ) &ehninger,et3a#,(2:) *:-3
1arna merah ada#ah 'A!P? sedangkan 9arna kuning ada#ah tetrahidro/o#at3 Keduan%a
berikatan dengan en;im me#a#ui ikatan=ikatan %ang sa#ah satun%a ada#ah ikatan h%drogen3
Berdasarkan gambar di atas dapat diketahui bah9a struktur en;im memengaruhi interaksin%a
dengan substrat3
Pen%e#idikan ini di#akukan dengan memanaskan biji benguk se#ama menit da#am
temperature berkisar :>
.3 8urra%,et3a#,(2) menekankan bah9a the temperature range
over which an enzyme maintains a stable, catalytically competent conformation depends
8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk
26/34
upon(and typically moderately exceeds(the normal temperature of the cells in which it
resides. Titik tekann%a ada#ah bah9a temperature optima# masing=masing en;im berbeda=
beda, sebab en;im di da#am tubuh bekerja di se# %ang berbeda=beda3 Temperature optima#
suatu en;im sehingga en;im dapat memaksima#kan kemampuan kata#itikn%a bergantung pada
temperature norma# se# dimana en;im bekerja3 4n;im kata#ase ada#ah en;im %ang bekerja
pada organe# peroksisome %ang berada di se#3 .ampbe##,et3a#,(2**) *** bah9a peroxisomes
contain enzymes that remove hydrogen atoms from various substrates and transfer them to
oxygen /"), thus producing hydrogen peroxide /*") as a by0product 3 Titik tekan
pern%ataan di atas ada#ah bah9a en;im kata#se %ang berperan da#am oksidasi h%drogen
peroksida bekerja di da#am se# tubuh sehingga dapat bekerja pa#ing e/isien pada rentang
temperature 0o .3 O#eh sebab itu pemanasan da#am temperature :> . cukup mampu
merusak ikatan nonkova#en %ang mempertahankan strutkur tiga dimensi en;im3 Akibatn%a
ikatan en;im dengan substrat menjadi terganggu dan en;im tidak mampu bekerja optima#3
Ha# ini ditunjukkan dari hasi# pen%e#idikan bah9a en;im kata#ase pada biji benguk masih
mampu menguraikan h%drogen peroksida menjadi air dan oksigen %ang terdeteksi da#am uji
n%a#a3 8eski demikian oksigen %ang dihasi#kan da#am jum#ah sangat sedikit sehingga tidak
terdeteksi me#a#ui penghasi#an ge#embung dan han%a men%a#akan bara api dengan redup dan
mati da#am rentang 9aktu cepat3
Pen%e#idikan ini men%impu#kan bah9a aktivitas kata#ase da#am biji benguk rebus
te#ah menga#ami penurunan karena bagian protein pada en;im te#ah menga#ami perubahan
struktur tiga dimensin%a %ang disebut dengan denaturasi3 Akibatn%a en;im kata#ase
kehi#angan aktivitas kata#itikn%a da#am memecah h%drogen peroksida menjadi air dan
oksigen3 &ehninger,et3a#,(2:) *:- menekankan bah9a thus the primary, secondary,
tertiary, and &uaternary structures of protein enzymes are essential to their catalytic activity3
Bi#a bagian protein en;im diuraikan menjadi asam=asam aminon%a, struktur protein baik
primer, sekunder, maupun tersier dan kuartenern%a dapat berubah, sedangkan struktur protein
sangat penting bagi kemampuan kata#itik suatu en;im3 !engan demikian temperature %ang
ekstrem dengan rentang jauh berbeda dengan temperature en;im tersebut biasa bekerja dapat
merusak kemampuan en;im da#am mengkati#isis suatu reaksi3
Kemudian se#anjutn%a uji di#akukan pada sampe# koro benguk %ang dibuat tempe
tanpa direbus3 Hasi# percobaan men%atakan bah9a sampe# tempe koro benguk %ang
ditambah H2O2 menghasi#kan ge#embung seban%ak :: buah da#am 9aktu #ima menit dan
menghasi#kan n%a#a sangat terang (????3 $e#embung %ang dihasi#kan sampe# tempe koro
8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk
27/34
benguk %ang ditambah H2O2 pa#ing ban%ak dibandingkan dengan sampe# %ang #ain3 Ha# ini
ter#ihat dari gra/ik berikut3
$ra/ik *3 "um#ah $e#embung %ang !ihasi#kan
Biji koro benguk + H2O2
0
20
40
60
80
100
Jumlah Gelembung
Jumla Gelembung
sampel
jumlah gelembng (buah)
!emikian pu#a dengan hasi# uji n%a#a pada sampe# ini %ang menunjukkan n%a#a pa#ing
terang (???? dibandingkan dengan sampe# %ang #ain3
$ra/ik 23 5ji '%a#a
8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk
28/34
00!"
11!"22!"
##!"
44!"
#
1
4
2
Tes Nyala
Tes $%ala
Ban%akn%a jum#ah ge#embung dan terangn%a n%a#a bara api pada sampe# tempe koro
benguk menunjukkan bah9a tempe ini beraktivitas da#am pemerangan radika# H2O2 dengan
baik3 Ha# ini dikarenakan pada dasarn%a biji koro benguk merupakan jenis biji=bijian %ang
mengandung sen%a9a /eno#ik3 Rajesh9ar dkk3(2>, *=- da#am hasi# pene#itian in vitro0
n%a menunjukkan bah9a ekstrak metano# biji koro benguk ( Mucuna pruriens) mempun%ai
aktivitas antioksidan3 4kstrak koro benguk dengan konsentrasi **> gJm& mempun%aiaktivitas pemerangkapan radika# H2O2 sebesar > L3 7edangkan pada pengo#ahan biji koro
benguk dengan /ermentasi dapat meningkatkan aktivitas antioksidan3 Ha# itu akan
meningkatkan ni#ai /ungsiona# dari produk tersebut3 Hasi# ana#isis aktivitas antioksidan pada
biji koro benguk ada#ah :0,2 M ,: L dan tempe koro benguk ada#ah ->,>- M ,:2L
(Retnaningsih, dkk, *>03
Tempe dibuat me#a#ui proses /ermentasi menggunakan kapang terutama hizopus
oligosporus3 7ete#ah menga#ami proses /ermentasi, tempe memi#iki ni#ai kecernaan %ang
tinggi dan bentuk antioksidan bebas, karena antioksidan tersebut sudah ter#epas dari sen%a9a
gu#a me#a#ui proses hidro#isa pada ikatan ==g#ikosidik3 7e#ain itu biji koro benguk dibuat
tempe untuk menghi#angkan sen%a9a antigi;i seperti asam sianida (Handajani, 2*) 222=
22>3
Antioksidan %ang ada di da#am tempe ini terdapat da#am bentuk iso/#avon3 7en%a9a
tersebut masuk da#am ke#ompok /#avonoid, sen%a9a po#i/eno#ik %ang umumn%a terdapat di
da#am buah=buahan, sa%ur=sa%uran, dan biji=bijian3 Antioksidan da#am pengertian kimia
8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk
29/34
ada#ah sen%a9a pemberi e#ektron (electron donor , da#am arti bio#ogis antioksidan ada#ah
semua sen%a9a %ang dapat meredam radika# bebas dan reactive oxygen species (RO7 %ang
bersi/at oksidan termasuk protein pengikat #ogam3 4n;im=en;im %ang dapat memusnahkan
radika# bebas ada#ah superoksida dismutase (7O!, g#utation peroksidase ($PC, dan
kata#ase3 Antioksidan sering diisti#ahkan sebagai peredam dan pemerangkap ( scavenger
radika# bebas %aitu mo#eku# %ang dapat bereaksi dengan radika# bebas dan ber/ungsi
menetra#kan radika# bebas (Perciva#, *--:) *=+3
$e#embung dan hasi# n%a#a bara pada sampe# ini #ebih tingi dari biji koro benguk
mentah dikarenakan pada proses /ermentasi tempe, terjadi biotrans/ormasi iso/#avon
g#ikosida menjadi iso/#avon ag#ikon, %aitu sen%a9a antioksidan tersebut sudah ter#epas dari
sen%a9a gu#a me#a#ui proses hidro#isa pada ikatan No=g#ikosidik3 Ha# ini akan meningkatkan
aktivitas antioksidan pada tempe3 Pada proses /ermentasi tempe terbentuk antioksidan /aktor
(,0,+=trihidroksi iso/#avon %ang mempun%ai si/at antioksidan pa#ing kuat dibandingkan
dengan iso/#avon da#am biji3 !engan demikian tempe koro memi#iki potensi sebagai
antioksidan %ang tinggi (Ratnaningsih, 2*) *>>3
Pada percobaan %ang se#anjutn%a ada#ah benguk %ang sudah menjadi tempe %ang
direbus, maka tempe tersebut direbus ter#ebih dahu#u kemudian sete#ah itu ditambah
dengan H2O2 3 7ebe#um percobaan dimu#ai ada#ah menimbang tempe %ang di rebus3 Pada
percobaan saat Tempe rebus ? H2O2 bertujuan untuk me#acak dan munujukkan keberadaan
kata#ase, perhitungan ge#embung di#akukan se#ama > menit3 Pada penggunaan bahan tempe
benguk rebus sebagai ekstrak tidak menghasi#kan ge#embung dan ketika bara api dimasukkan
keda#am tabung reaksi juga timbu# n%a#a api %ang redup (?? 3 Ha# ini disebabkan karena
protein di da#am en;im kata#ase %ang terdapat di tempe benguk rebus te#ah rusak sehingga
tidak dapat menguraikan H2O2 menjadi H2O dan O23 tu membuktikan juga bah9a dimana
en;im kata#ase tidak akan bekerja secara optima# pada suhu tinggi saat perebusan, karena kita
ketahui bah9a en;im kata#ase akan bekerja pada suhu netra#3
Kenaikan temperature dapat meningkatkan energ% kinetic en;im pada suatu titik
%ang dapat mengganggu ikatan non kova#en %ang mempertahankan struktur tiga dimensi
en;im3 Kerusakan tersebut men%ebabkan rantai po#ipeptida mu#ai terbuka sehingga en;im
terdenaturasi dan kehi#angan kemampuan kata#itikn%a3 Pern%ataan di atas didukung o#eh
8urra%,et3a#,(2) bah9a the polypeptide chain then begins to unfold, or denature, with
an accompanying rapid loss of catalytic activity.7u and &i,(20)** juga men%atakan bah9a
after a certain point this will no longer be true, as sustained high temperatures will begin to
8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk
30/34
denature the catalyst, lowering the reaction rate dramatically3 Berdasarkan ha# tersebut,
Temperature optima# masing=masing en;im berbeda=beda, sebab en;im di da#am tubuh
bekerja di se# %ang berbeda=beda3 Temperature optima# suatu en;im sehingga en;im dapat
memaksima#kan kemampuan kata#itikn%a bergantung pada temperature norma# se# dimana
en;im bekerja3
7ebe#um direbus , tempe dibuat me#a#ui proses /ermentasi menggunakan kapang
terutama hizopus oligosporus3 7ete#ah menga#ami proses /ermentasi, tempe memi#iki ni#ai
kecernaan %ang tinggi dan bentuk antioksidan bebas, karena antioksidan tersebut sudah
ter#epas dari sen%a9a gu#a me#a#ui proses hidro#isa pada ikatan ==g#ikosidik3 7e#ain itu biji
koro benguk dibuat tempe untuk menghi#angkan sen%a9a antigi;i seperti asam sianida3
7ehingga tempe %ang te#ah direbus mengakibatkan protein di da#am en;im kata#ase
%ang terdapat di tempe benguk rebus te#ah rusak sehingga tidak dapat menguraikan
H2O2 menjadi H2O dan O23 tu membuktikan juga bah9a dimana en;im kata#ase tidak akan
bekerja secara optima# %ang ditandai dengan tidak menghasi#kan ge#embung saat di amati dan
ketika bara api dimasukkan keda#am tabung reaksi juga timbu# n%a#a api %ang redup (?? dan
7uhu sangat mempengaruhi karena sebagian besar ;at merugikan %ang terkandung da#am
koro benguk rusak o#eh pemanasan dan sebagian #agi #arut da#am air3 4n;im menjadi rusak
bi#a suhun%a ter#a#u tinggi atau rendah3 Protein akan mengenta# atau menga#ami koagu#asi
bi#a suhun%a ter#a#u tinggi (panas3
!ari pembahasan diatas dapat disimpu#kan bah9a akti/itas sampe# tempe koro
benguk pa#ing tinggi dibandingkan dengan sampe# #ain dikarenakan kandungan antioksidan
%ang mampu menangka# radika# dari H%drogen peroksida (H2O2 berjum#ah pa#ing ban%ak
dibandingkan kandungan antioksidan pada sampe# %ang #ain3
8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk
31/34
BAB F
K478P5&A' !A' 7ARA'
A3 K478P5&A'
Berdasarkan percobaan dan pembahasan dapat disimpu#kan bah9a
*3 Terdapat perbedaan aktivitas pemecahan H2O2 antara biji benguk, tempe benguk,
dan benguk rebus ditinjau dari jum#ah ge#embung %ang dihasi#kan, #ama terbentuk
ge#embung, dan tes n%a#a3
23 Akti/itas sampe# tempe koro benguk pa#ing tinggi dibandingkan dengan sampe#
#ain dikarenakan kandungan antioksidan %ang mampu menangka# radika# dari
H%drogen peroksida (H2O2 berjum#ah pa#ing ban%ak dibandingkan kandungan
antioksidan pada sampe# %ang #ain
A3 7ARA'
Peman/aataan koro benguk sebagai sumber bahan makanan sangat baik untuk
menunjang kebutuhan nutrisi tubuh3 !a#am peman/aatann%a berdasarkan hasi#
percobaan se%og%an%a dapat dijadikan 9a9asan mengenai bagaimana pengo#ahan
8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk
32/34
dan pengonsumsian %ang pa#ing baik untuk mempero#eh man/aat da#am pemecahan
peroksida3 7ehingga potensi tanaman benguk %ang tumbuh di ndonesia dapat #ebih
dikembangan sebagai a#ternati/ bahan makanan3
!a/tar Pustaka
Agba/or, K3'3 dan '9achuk9u '3 (2**3 Ph%tochemica# Ana#%sis and AntioCidant Propert%
o/ &ea/ 4Ctracts o/ -itexdoniana and Mucuna pruriens3 Biochemistry esearch 1nternational. Fo#ume 2**, Artic#e ! +>-:-, + pages doi)*3**>>J2**J+>-:-3
Akhtar,Kha#ida, et3a#32*23 4//ect o/ pH and Temperature on the .ata#%tic Properties o/
Pro%#rt(# o Ma!"a!## /(o(/# J.Chem.Soc.Pak., Vol. 34, No. 2, 2!2(versi
e#ektronik3 !iunduh dari http)JJ#ib3ugm3ac3id3 Pada tangga# 2 8aret 2*3
A#suhendra3 2>3 7udah Ban%ak Konsumsi 7a%ur 8asih 7aja Kurang !arah3
9993ha#a#mui3or3idJk3
Bajji,8ohammed,et3a#3203 .ata#ase inhibition acce#erates dormanc% re#ease and sprouting
in potato (#olanum tuberosum &3 tubers) Biotechnol. !gron. #oc. 2nviron. 20 **
(2, *2*N**(versi e#ektronik3 !iunduh dari http)JJ#ib3ugm3ac3id3 Pada tangga# 2
8aret 2*3
Ba%u Kanetro dan 7et%o Hastuti, 23 Ragam Produk O#ahan Kacang N kacangan3
5niversitas 1angsa 8angga#a Press3 og%akarta
.eme##i, 43, Baumgartner, A3, Anderson, !3 2-, AntioCidant and The .ommet Assa%3
Mutation esearch, :*)>*=03
http://lib.ugm.ac.id/http://lib.ugm.ac.id/http://lib.ugm.ac.id/http://lib.ugm.ac.id/
8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk
33/34
4ssid,836,et3a#32*+3 H%drogen PeroCide and .ata#ase as a 9a% to break dormanc% o/ potato
tubers (#olanum tuberosum &3) 1ntl 3 !gri rop #ci. -ol., 4 /56), 57805789, :57
(versi e#ektronik3 !iunduh dari http)JJ#ib3ugm3ac3id3 Pada tangga# 2 8aret 2*3
Handajani, 73 (2*3 ndogenous mucuna tempe as /unctiona# /ood3 !sia ;acific 3ournalof
linical 3
Hareshchandra,!esai ogesh,et3a#32*>3 'euro=protective ro#e o/ seeds o/ Mucuna pruriens
B4K and Mucuna monosperma !. in 9istar a#bino rats) 'he 3ournal of
;hytopharmacology :56= 7/8)> 480?5 (versi e#ektronik3!iunduh dari http)JJ9993
#ib3ugm3ac3id3Pada tangga# 8aret 2*3
Kumar, F3, Abbas, A3K3, 6austo, '3, Aster, "3.3, Hauth, ",.3 2:3 Robbins and .otran
Patho#ogic Basic o/ !isease3 4ight edition3 ellular !daptations,ell 1n@ury, and
ell $eath, *)*=*:
&uhova,&3et3a#323Activities o/ Amine oCidase, peroCidase, and cata#ase in seed#ings o/
Pisum sativum & under di//erent #ight condition> ;L!
8/16/2019 Enzim Katalase Pada Benguk
34/34
Rajesh9ar, 3, Kumar, $3P373, $upta, 8353K3 dan 8a;umber (2>3 7tudies on in vitro
antioCidant activities o/ methano# eCtract o/ Mucuna pruriens (6abaceae 7eeds3
2uropean Bulletin of $rug esearch 1,(*) *=-3
Ratnaningsih, .hristiana, dkk3 2*3 ;ening%atan !%tivitas !ntio%sidan #upero%sida
$ismutase pada 'i%us *ipergli%emi dengan !supan 'empe Goro Bengu% /Mucuna
pruriens L). di unduh dari> http>HHwww.@urnal0
[email protected]?7H47 pada 7e#asa,
8aret 2* puku# *32 1B3
7huk#a,Kam#a Kant,et3a#3203 Mucuna pruriens Reduces 7tress and mproves the ua#it% o/
7emen in n/erti#e 8en) e!M :5:=4/5)5A4577 (versi e#ektronik3!iunduh dari
http)JJ9993 #ib3ugm3ac3id3Pada tangga# 8aret 2*3
7u, chris and 8ei%i &i3203atalase Ginetics (versi e#ektronik3!iunduh dari
http)JJ999J#ib3ugm3ac3id3 Pada tangga# * 8aret 2*3
7uhara32*23 ;engantar 'entang 2nzim3Bandung)5P3
7ri Handajani3 *--3 Pengaruh &arutan Perendam dan Perebus Terhadap Kekerasan, Kua#itas
Tanak, dan Kandungan 8inera# Biji Kacangkacangan3 6aku#tas Pertanian, 5niversitas
7ebe#as 8aret3 7urakarta
1a#ter .37chumb,et3a#3*->3 *ydrogen ;eroxide. 'e9 ork ) Reinho#d Pub#ishing
.orporation3
Gainuri 8asagus dan 7epte#ia na9ati 1anandi32*23 Aktivitas 7pesi/ik 8anganese
#uperoxide $ismutase /Mnsod) !an Kata#ase pada Hati Tikus %ang !iinduksi
Hipoksia 7istemik) Hubungann%a dengan Kerusakan Oksidati/) Media Litbang
Gesehatan -olume