Enzime Generaliti. Nomenclatur i clasificare. Structur. Markeri tumorali

Enzimele sunt substante chimice complexe de natur organic-proteinecoloidal solubileelaboratedeplante, animale simicroorganisme,capabilesmreascvitezareactiilor chimicecesedesfsoarnsistemele biologice, fr s se consume n cursul lor. Sunt deci, o clas special de proteine dotate cu activitate catalitic; se mai numesc si biocatalizatori. Denumirea de enzime a fost dat de ctre Kuhne (1878) si provine de la expresia "en zima = n levur" (n 1. greac), pornind de la faptul c din drojdii s-au extras pentru primadat enzime. Procese enzimatice, cum sunt fermentatia vinului, dospirea pinii, acidifierea laptelui etc. sunt cunoscute din cea mai ndeprtat antichitate. Dar cunostinte sistematice n acest domeniu s-au obtinut ncepnd cu identificarea primelor enzime: amilaza din malt (Kirchoff,1814), amilaza salivar (Leuchs, 1831) si pepsina (Schwann, 1836).

Toate enzimele cunoscute pn n prezent sunt substane de natur proteic i ndeplinesc rol de catalizatori ai transformrilor biochimice din celula vie. Fiind biocatalizatori, enzimele prezint toate proprietile generale ale catalizatorilor chimici:- mresc viteza reaciilor chimice posibile din punct de vedere termodinamic prin scderea energiei de activare i instalarea mai rapid a strii de echilibru;- activitatea catalitic se manifest la concentraii mici, mediul de reacie coninnd concentraii relativ mari de substrat;- la sfritul transformrii se regsesc n mediu nemodificai din punct de vedere cantitativ i calitativ.

Enzimele intracelulare sunt acele enzime care sunt produse si si desfsoar activitatea chiar n celulele n care sunt biosintetizate. Ele suntlegate puternic de structura celulei si nu pot fi extrase dect prin distrugere acesteia pe cale mecanic (nghe-dezghet, mojarare cu nisip de cuart etc.). Extragerea se face cu ap, glicerin, solutii saline, mentinndu-si activitatea ca si n celule.Enzimele intracelulare pot fi legate prin adsorbtie si n acest caz se numesc bioenzime, iar cnd sunt legate profund de celule, de protoplasma celulei, prin legturi chimice, se numesc desmoenzime. Acestea se separ numai dup autoliza substantei celulare si nu prin distrugerea mecanic.Dup autoliz, enzimele se extrag cu ap, glicerin etc., pstrndu-iactivitatea

Enzimele extracelulare sunt enzimele care, dei biosintezate n celule, sunt eliminate n lichidele din organism sau n mediile de cultur, exercitndu-i aciunea la acest nivel. Aceste enzime se extrag cu uurin de la locul de aciune, iar activitatea lor este deplin.n organism exist enzime fie independent de prezena substratului (enzime constitutive), fie enzime care sunt sintetizate n caz de nevoie i cnd substratul respectiv este prezent (enzime adaptive sau enzime inductibile).

Structura enzimelorNumeroase enzime ins au o structur binar care const dintr-o component proteic, denumit apoenzim i una sau mai multe componente neproteice, denumite cofactori. Complexul apoenzim+cofactor este denumit holoenzim i este activ din punct de vedere catalitic. Prin ndeprtarea cofactorului, rmne componenta proteic inactiv n forma liber.n structura holoenzimei, cofactorul imprim specificitate de aciune, respectiv determin tipul i viteza reaciei catalizate, n timp ce apoenzima imprim specificitate de substrat, respectiv determin substana asupra creia acioneaz enzima.

Structura enzimelorDup natura chimic i modul lor de legare la apoenzim, cofactorii se clasific in: coenzime, grupri prostetice, ioni metalici. coenzimele sunt compui organici - majoritatea derivai de la vitamine - care se ataeaz temporar la apoenzim prin legturi necovalente i care sunt uor disociabili de aceasta. Ele pot trece uor de la o apoenzim la alta putand astfel participa la transformarea altor molecule de substrat dup terminarea unei anumite reacii. Ex: NAD+, NADP+, ATP, CTP, acidul lipoic etc.

Structura enzimelorgruprile prostetice sunt substane organice fIxate pe apoenzim i care disociaz greu deoarece sunt legate prin legturi covalente; dintre aceste grupri se pot meniona FAD, FMN, TPP, piridoxalfosfatul, hemul.Gruparea prostetic imprim mecanismul unor procese enzimatice ca: transportul de electroni, de grupri NH2, acetil etc. De exemplu, hemul coninand ionul Fe2+ este o component a citocromilor (enzime ce transport electroni) puternic legat de apoenzim prin legturi chimice de tip covalent.

Structura enzimelorionii metalici sunt indispensabili pentru exercitarea funciei catalitice a unor enzime, participand in calitate de cofactori sau de componente structurale ale acestora. Aceste enzime se numesc i metal-enzime iar printre ionii care indeplinesc rol de cofactor se pot meniona: Mg2+, Mn2+, Cu2+, Zn2+, Fe2+(3+), Mo2+. Unele enzime pot conine chiar doi ioni metalici.

Specificitatea enzimelorEnzimele difer de catalizatorii neproteici prin una din cele mai remarcabile i caracteristice proprieti ale lor i anume specificitatea. Se inelege prin specificitatea unei enzime proprietatea sa de a aciona preferenial numai asupra unui anumit substrat sau grup de substrate cu caractere chimice comune.Specificitatea enzimatic se poate manifesta la nivelul tipului de reacie catalizat de enzim i la nivelul substratului.

Cinetica reaciilor enzimaticeStudiul cineticii enzimatice este deosebit de important deoarece permite cunoaterea mecanismelor reaciilor enzimatice, inelegerea i clasificarea proceselor metabolice i importana lor fiziologic pentru organism.Msurarea activitii enzimatice se reduce la 'studiul cineticii sau vitezei reaciei catalizate.

Reglarea activitii enzimaticeLa nivel celular, activitatea enzimelor, de care depind procesele metabolice, este sub un control permanent asigurat de mai multe mecanisme de reglare:A Sinteza enzimelor (biosinteza proteinelor- enzime).B Mediul intracelular. La nivelul mediului intracelular pot interveni o serie de factori care s regleze activitatea enzimelor. Astfel:a) pH-ul i electroliii pot avea efect inhibitor sau activator. Ionii de Ca2+ exercit un rol regulator al glicolizei. Astfel, concentraii mari inhib aciunea piruvatkinazei conducand la acumularea de fosfoenolpiruvat.b) hormonii. Organismele pluricelulare sunt reglate in funcionarea lor de hormoni. Acetia acioneaz asupra activitii enzimelor (ca efectori enzimatici) sau asupra sintezei lor. Astfel, hidrocortizonul mrete de 25 ori activitatea a -cetoglutarat-transaminazei; insulina inhib biosinteza enzimelor gluconeogenezei

Reglarea activitii enzimaticec) concentraia intracelular a cofactorilor, (NAD+, NADP+, ATP, etc.). Spre exemplu, in metabolismul acidului piruvic calea pe care acesta o va urma este in funcie de concentraia de NAD+ care depinde de coninutul in O2. Dac in celul exist O2 disponibil, NAD+ va fi produs in cantitate suficient i ca urmare, acidul piruvic va fi metabolizat prin ciclul acidului citric (ciclul lui Krebs). Dac exist puin O2, NADH + H+ nu va fi oxidat de NAD +i in acest caz acidul piruvic este redus la acid lactic.

C Membranele celulare. Dup cum tie, pentru ca o molecul a unei substane s fie metabolizat de celul, ea trebuie s ptrund in celul. Pentru acest scop exist un sistem specific de transport realizat de permeaze care ele insele sunt enzime. De asemenea, membranele intracelulare (lizozomale, mitocondriale, etc.) a cror permeabilitate pentru diversele substraturi, cofactori, enzima este diferit, permit funcionarea normal a celulei.D Reglarea allosteric. Mecanismul cel mai complex al coordonrii metabolice este reglarea allosteric in care sunt implicate enzimele allosterice. Prin structura i funciile lor, aceste enzime intervin in reglarea i controlul diferitelor secvene de reacii ale unor ci metabolice, constituind astfel un fenomen natural, necesar in desfurarea proceselor biochimice.

CLASIFICAREA ENZIMELOR Conform acestui criteriu, enzimele cunoscute pn n prezent se clasific n ase clase principale, enzimele cuprinse ntr-o clas cataliznd acelai tip de reacie:1) oxidoreductazele - enzime ce catalizeaz reaciile de oxidoreducere ce au loc n organismele vii;2) transferazele - enzime ce catalizeaz reacii de transfer ale unor grupe de atomi ce pot fi i grupe funcionale de la un substrat la altul, fr ca aceste grupri s existe libere n timpul procesului;3) hidrolazele - enzime ce catalizeaz scindarea diferitelor legturi covalente din molecula substratului cu participarea moleculelor de ap;4) liazele - enzime ce catalizeaz reacii de adiie a unor grupe de atomi la molecula substratului sau clivarea acestor grupri cu rearanjarea ulterioar a valenelor;5) izomerazele - enzime care catalizeaz diferite reacii de izomerizare a substratelor;6) ligazele sau sintetazele - enzime ce catalizeaz formarea unor noi legturi chimice carbon carbon sau carbon heteroatom, n majoritatea cazurilor utilizndu-se energia stocat n legturile macroergice ale moleculelor de ATP.

Caracterizarea clasei transferazelor Dintre enzimele cunoscute pn n prezent, aproximativ 30% sunt transferaze. Din aceast clas de enzime fac parte, de exemplu aminotransferazele, enzime ce catalizeaz reacia unui a-aminoacid cu un a-cetoacid, conducnd la formarea unui nou aminoacid i a unui nou cetoacid. Din punctul de vedere al mecanismului de reacie, aceast transformare poate fi considerat ca fiind o dezaminare oxidativ a donorului (aminoacidul) cuplat cu aminarea reductiv a acceptorului (cetoacidul) iar aminotransferazele ar putea fi considerate i ca oxidoreductaze:

Caracterizarea clasei hidrolazelorHidrolizele sunt enzime care catalizeaz reacia de scindare a moleculelor cu fixare componentelor apei la produsele rezultate, dup reacia general:R-R + HOH R-H + R-OHDin aceast clas fac parte enzimele care hidrolizeaz proteinele pan la aminoacizi, polizaharidele pan la monozaharide i lipidele pan la acizi grai i glicerol.

Caracterizarea clasei hidrolazelorFosfolipazele sunt esteraze care catalizeaz reacia de scindare hidrolitic a acizilor grai din glicerofosfolipide (fosfatidilcolina, fosfotidiletanolamina)Colinesterazele scindeaz hidrolitic esterii colinei, prezeni indeosebi in esutul nervos, sinapse, eritrocite. Astfel, sub aciunea acestor enzime se descompune acetilcolina, mediatorul chimic care faciliteaz transmiterea influxului nervos de la nervii motori la muchii striai

Caracterizarea clasei izomerazelorIzomerazele sunt enzimele care catalizeaz transformarea intramolecular a unui compus dintr-o form izomer in alt form izomer. Aceste transformri constau din transferul intramolecular al hidrogenului, gruprilor fosfat sau acil, in modificarea distribuiei spaiale a atomilor unor grupri, in deplasarea dublelor legturi etc.

Caracterizarea clasei ligazelorLigazele sau sintetazele sunt enzime care catalizeaz reaciile de sintez a substanelor organice ce se desfoar cu descompunerea unor donori de energie pentru realizarea proceselor de biosintez. Unul dintre aceti donori naturali de energie este ATP.Energia care se elibereaz prin ruperea resturilor de acid fosforic este utilizat pentru activarea substanelor care reacioneaz.

Principalimarkeri tumorali

Incidena cancerului 10 milioane cazuri noi /an (prognoza OMS n urmatorii 20 de ani: cretere la 15 milioane cazuri noi /an) 7 milioane decese /an (prognoza OMS n urmatorii 20 de ani: cretere la 10 milioane decese /an)

Clarificarea definitiei antigenelor tumoraleClarificarea definitiei markerilor tumoraliSemnificatia unor markeri frecvent uzitati: AFPCEAPSA / fPSACA125CA19-9, CD 15-3, CA 72-4, TPA, proteinele Bence-Jones, FeritinaReguli de baz n testarea markerilor tumorali in practica clinic

Markeri tumorali circulantiAlfafetoproteina (AFP)Antigene carboidrato 15-3 (CA 15-3)Antigene carboidrato 19-9 (CA 19-9)Antigene carboidrato 125 (CA 125)Antigene carcinoembrionario (CEA)Antigene prostatico specifico (PSA)Calcitonina (CT)Cromogranina AEnolasi neurono-specifica (NSE)Citocheratina 19 (Cyfra 21-1)Gonadotropina corionica umana (HCG)S-100Tireoglobulina

1. Antigene tumoraleTSA-Tissue Specific Ag - Antigene care aparin doar celulelor tumoraleTAA-Tissue Associated Ag - Antigene care aparin i celulelor normale

Dei nu toate celule neoplazice dispun de markeri deosebii de cei fiziologici, la majoritatea pot fi identificate structuri antigenice diferite, numite neoantigene. Aceste structuri pot fi nirate n urmtoarele 2 grupe:

Antigenele retrogenetice: n condiii fiziologice ele sunt exprimate exclusiv pe suprafaa celulelor embrionare, dar nu i a celor de dup natere antigene oncofetale (-fetoproteina (AFP) i antigenul carcinoembrionar (CEA); pot reapare dup natereAntigenele de difereniere: apar numai ntr-o faz determinat a maturaiei unor serii celulare (elementele imature din leucemii).

Antigenele de diferenierePentru leucemii acute:LLA: CD10 (CALLA)-forma comun; CD19, TdT(n) *- forma nullLLA cu preB: CD19, lanuri m libere intracitoplasmatic LLA cu T: CD3 (citoplasmatic), CD7, TdT(n)LMA: CD13, CD33, mieloperoxidaza* Terminal deoxynucleotidyl transferase (nuclease)

Pentru leucemii cronice:LLC cu B: CD19, CD21, CD5, CD23Sindromul Sezary: CD3, CD4LLC cu T: CD3, CD8

TdT-CD34-HLADR-CD19-CD10-CD79b-cy m Ig-FMC7-CD5-CD23-CD22-sIg-CD38

Markerul tumoral este substana produs de ctre un esut tumoral, care rmne n / pe celula productoare (markeri celulari, de ex. crz Ph, p53, receptori hormonali) sau este secretat n umorile nconjurtoare (markeri umorali / solubili n lichide biologice) i a crei identificare / dozare este util in diagnosticul sau management-ul clinic al afeciunilor canceroase. 2. Markeri tumorali - definiie

1846 - proteina Bence Jones a fost descris ca marker pentru mielomul multiplu1930 - gonadotropina chorionic (hCG) a devenit un test standard, iniial n diagnosticul i apoi n monitorizarea choriocarcinomului1963 - AFP a fost identificat ca marker pentru carcinomul hepatoceluar (Tatarinov)1965 - CEA a fost identificat ca antigen oncofetal i exploatat clinic (Gold i Freedman).din 1975 tehnica anticorpilor monoclonali este folosit pentru a descoperi noi markeri tumorali (Kohler si Milstein)2. Markeri tumorali - istoric

screening populaie la risc (Calcitonina in familii cu afeciuni neoplazice endocrine multiple tip 1, AFP la pacienii cu ciroze hepatice alcoolice - risc nalt de carcinom hepatocelular)diagnosticul tumorilor, pentru completarea simptomatologiei clinice (5 HIAA urinar n sindr. carcinoide)stabilirea prognozei (n unele cazuri, concentraia markerului este n strns relaie cu masa esutului tumoral)monitorizarea rspunsului la tratament chirurgical, chimioterapic sau radioterapic stabilirea recurenei / recderii / metastazrii2. Markeri tumorali - utilitate

Efectuat din snge sau alt lichid uor de prelevat, cu rezultat pozitiv doar pentru pacienii cu cancer (SPECIFICITATE), corelat cu stadiul i rspunsul la tratament (SENSIBILITATE), uor de msurat i reproductibil. 2. Marker-ul tumoral idealNU EXIST MOMENTAN Markeri Tumorali IDEALI !!Se=[RP/(RP+FN)]x100 Sp=[RN/(RN+FP)]x100

TumoraPrezentAbsentTotalRezultatele testrii markerului tumoralPozitivRP(Real pozitiv)FP(Fals pozitiv)RP+FPNegativFN(Fals negativ)RN(Real negativ)FN+RNTotalRP+FNFP+RN

2. Marker-ul tumoral idealSensibilitatea (Se) unui test diagnostic - este probabilitatea ca un individ bolnav s aib rezultatele testului pozitive:Specificitatea (Sp) unui test diagnostic - este probabilitatea ca un individ fr boala respectiv s aib rezultatele testului negative:

Rata fals negativ (RFN) - este probabilitatea ca un individ bolnav s aib rezultatele testului negative:

RFN=[FN/(FN+RP)]x100

Rata fals pozitiv (RFP) - este probabilitatea ca un individ fr boala respectiv s prezinte rezultate pozitive ale testului:

RFP=[FP/(FP+RN)]x100

Valoarea predictiv pozitiv (VPP), sau probabilitatea posttest, este probabilitatea ca un individ cu valori pozitive ale testului s prezinte boala (~ Sp crescut a testului):

VPP=[RP/(RP+FP)]x100

Valoarea predictiv negativ (VPN) - este probabil. ca un individ cu valori negative ale testului s nu aib boala (~ Se crescut a testului):VPN=[RN/(RN+FN)]x100 Acurateea global a testului (AG) - este probabilitatea global ca valorile pozitive sau negative ale testului s identifice corect prezena/absena bolii:AG=[(RN+RP)/(RN+RP+FN+FP)]x1002. Marker-ul tumoral ideal - caracteristici

2. Caracteristicile unui marker tumoral idealsensibilitate 100% - capacitatea de a identifica toi pacienii cu tumor, n stadiu ct mai precoce;specificitate 100% - capacitatea de a discrimina ntre indivizii sntoi i cei cu neoplazii;specificitate de organ capacitatea de a localiza tumora;corelaie ntre concentraia seric a markerului i stadiul tumorii;capacitatea de a indica modificrile induse de tratament;capacitate prognostic n funcie de concentraie.Valoarea cut off: este valoarea concentraiei la care sensibilitatea i specificitatea metodei sunt optime. De obicei corespunde concentraiei la care specificitatea este de minimum 80%

Antigene oncofetale CEA i AFP

B. Carbohidrai CA 15-3, CA 19-9, CA 125, CA 72-4, TPA, PSA

C. Hormoni hCG, Calcitonina

D. Proteine non-oncofetale Tireoglobulina, Feritina, b2-mg, S-100, Bence Jones

E. Enzime NSE, TK

F. Markeri genetici 3. Markeri tumorali clasificare utilitate n practica clinic

n viaa embrionar se produce n pancreas i n tractul gastro-intestinal. Este o glicoprotein complex 180 kD cu 45-60% carbohidrai, fixat n membrana celulei neoplazice (de unde se elibereaz n snge) S-au descris cel puin 6 epitopi (heterogenitatea se datoreaz coninutului variabil n glucide)

Valori normale serice: 0-4,6 ng/ml, Fumtori : < 10 ng/mlTimpul de njumtire n ser : 1-2 sptmni

Valori crescute se ntlnesc n carcinoame ale tractului gastro-intestinal: colo-rectal, pancreatic, gastric i pulmonar, mamar, cervical, ovarian.n urin, concentraii de peste 35 ng/ml (dac infecia urinar este exclus) poate indica un carcinom al vezicii urinarevalori crescute n lcr, apar n metastaze cerebrale 3A. Antigene oncofetale CEA

3A. Antigene oncofetale CEA Sensibilitatea n tu. primare i secundare Se/Sp sunt modeste nu se poate utiliza n scop de screening

Concentraia plasmatic a markerului se coreleaz destul de slab cu masa tumoral

Persistena valorilor patologice postoperator indic o tumor rezidual

Tumori primareSe (%)Carcinom pulmonar cu celule mici60-70Carcinoame pulmonare altele dect cele cu celule mici75-85Cancer mamar preoperator (T3)Cancer mamar postoperator40-95 75-85Ficat30-40Pancreas30-40Carcinom colo-rectal preoper.Carcinom colo-rectal postoper.10-8565-75Vezic urinar

3A. Antigene oncofetale CEAFumatori, Carcinoame colorectale, Carcinoame mamare,Carcinoame polmonare,Carcinoamul pancreatic

Este o glicoprotein de origine oncofetal, cu masa molecular 70 kD (conine 4% carbohidrai), sinteza ei fiind suprimat la adult. n cursul vieii intrauterine se formeaz n sacul vitelin, iar mai trziu n ficat i tract gastro-intestinal (sinteza max - n spt 14-20), fiind o protein plasmatic; n serul mamei concentraia max este atins n spt 35-38).

Valori normale: < 5 ng/ml (< 3,5 U/ml) la adult2-5 mg/ml la ft, < 500 ng/ml la femeia gravidRaportul normal al concentraiei de AFP n :serul fetal : lichidul amniotic : serul matern = 10.000 : 100 :1

Timpul de njumtire: 5 zile

Valori crescute (peste 500 ng/ml): carcinom hepatocelular (poate fi utilizat i pentru screening la persoane AgHBs+), testicular, moderat crescute: n neoplazii testiculare, ovariene, retroperitoneale, mediastinale i n boli non-maligne: hepatita alcoolic, ciroza hepatic, hepatita acut viral, hepatita cronic activ 3A. Antigene oncofetale AFP

3A.Sensibilitatea AFP n diverse afeciuni tumorale i non-tumorale

AFP ng/ml7500Persoane sntoase~100%Ciroza hepatic/hepatita~80%~15%~5%Carcinoame extrahepatice cu metastaze hepatice~65%~30%~5%Carcinoame primare hepatocelulare~5%~10%~35%~50%

Markeri tumorali circulantiAlfafetoproteina (AFP)

Antigene carboidrato 15-3 (CA 15-3) Patologiereumatiche, Ca mammario (avanzatoAntigene carboidrato 19-9 (CA 19-9)- Iperbilirubinemia, Patologie infiammatorie, Carcinoma pancreatico, Carcinoma colorettale

3A. Antigene oncofetale AFPHepatite virale,Ciroza hepatica, Hepatocarcinom,Tumori testicolare, Tumori ovariene

CA 125 (1981) este o glicoprotein cu masa molecular de 200 kD, produsul genei MUC16, prezent n 80 % din carcinoamele ovariene nemucinoase (seroase, nedifereniate).Este prezent n epiteliul: ovarian, pancreas, vezica biliar, stomac, bronhii, rinichi, colon. Se gsete n cantiti crescute n lichidul amniotic, laptele i serul femeilor nsrcinate.

Valori normale: 0-35 U/ml.Interval de grani: 35-65 U/ml.Timpul de njumtire n ser: 2-6 zile.

Sensibilitatea n stadiile I i II este n medie de 65%; n stadiile III si IV de 85%

n cazul tu mucinoase (10% din carcinoamele ovariene), sensibilitatea este mic; este mai sigur combinarea CA 125 cu CA 72-43B. Antigene carbohidrai CA

CA 125Cauza frecvent a rezultatelor fals pozitive este endometrita, diabetul zaharat, ciroza hepatic, insuficiena renal cronic.

Este indicat mai ales pentru monitorizarea evoluiei bolii i a terapiei. Dac nivelul CA 125 rmne n mod constant peste 100U/ml i/sau dac dou testri succesive (la 1-2 spt. interval) arat o cretere cu 50% a concentraiei acestui marker, atunci probabilitatea ca boala s fie progresiv este de > 90%.

Ag gastro-intestinal CA 72-4Este o GP (400 kD), identificat cu 2 AcMo (CC49, B72.3). Este prezent n: stomac, ovare, celule epiteliale pulmonare.

Valori normale: 0-8 ng/ml.Timp de njumtire: 4-6 zile

Este indicat n carcinom colo-rectal, gastric, ovarian, endometrial, mamar i adenocarcinom pulmonar.

Exist o corelaie mai exact ntre CA 72-4 i stadiile bolii, comparativ cu valorile CEA i CA19-9.

CA 72-4 poate fi folosit pentru monitorizarea carcinomului gastric postoperator pentru c indic devreme recidiva bolii.

TumoriSensibilitate (%)Gastric78Ovarian (mucinos)82Pulmonar (altele dect cu celule mici)72

Boli benigneValori crescute (%)Stomac4Ovar4Dup menopauz3

Ag gastro-intestinal CA 19-9Este un gangliozid, prezent numai la persoanele cu antigenele de grup sanguin Lewis prezente. Persoanele cu grup sanguin relativ rar, Lewis - (3-5% din populaie) nu dispun de sialyl-transferaza necesar pentru sinteza CA19-9. La aceste persoane CA19-9 rmne la valori foarte sczute, chiar dac este prezent o neoplazie. La astfel de persoane markerul tumoral recomandat este CA 50.

CA19-9 este prezent n celulele epiteliale i mucoase: pancreas, stomac, intestin Valori normale: 0-37 U/ml.

Timp de njumtire: 4-6 zile.

Intervalul de grani: 37-100 U/ml poate fi ntlnit att la persoane cu boli benigne, ct i cu boli maligne. Valori > 63 U/ml: probabilitatea ca boala s fie de natur malign este de 95%

CA19-9 este markerul de prim linie n carcinomul pancreatic. n alte boli maligne prezint o sensibilitate mai sczut Sensibilitatea CA 19-9 n diverse afeciuni tumorale

Specificitatea CA 19-9

TumorileSensibilitate (%)Pancreas70-95Ci biliare55-75Colon60Ficat50Stomac60Plmni15Glanda mamar14

BoalaValori crescute (%)Ciroz hepatic12Colecistit25Pancreatit18Apendicit11Hernie3

Este o mucin (GP) polimorf epitelial (300 - 450 kD)

A fost identificat cu 2 Ac Mo diferii: 115 D8 (obinut prin imunizare cu lipide din laptele uman) i DF3 (prin imunizare cu membrana celulelor din cc mamar).

Valori normale: 0-22 U/mlTimpul de njumtire: 4-6 zile

Peste 40 U/ml probabilitatea neoplaziei este de 80%.

Are o sensibilitate semnificativ mai mare n comparaie cu CEA n detectarea cc mamar aflat n diferite stadii

CA 15-3Sensibilitatea CA 15-3 i CEA n diverse stadii ale cc mamar

Stadiul boliiCA15-3 > 25 U/ml(%)CEA > 5 U/ml(%)T1T2T3+T425323591114Media:3011MetaLocaleOsoaseHepatice467979124475Media:6941

CA 15-3CA 15-3 este folosit pentru monitorizare postoperatorie, pentru c indic recidiva cu cteva luni nainte ca diagnosticul clinic s fie posibil.

Lead time este perioada de timp care trece de la prima cretere a concentraiei markerului i pn cnd detectarea clinic a recderii devine posibil.

Valoarea CA 15-3 n monitorizarea postoperatorie

Cut-off (U/ml)Valori crescute nainte de diagnostic clinic (%)Valori n momentul diagnosticului (%)Lead time maxim (luni)25707694063767

Specificitatea CA 15-3

Concentraia CA15-3 n alte boli benigne i maligneU/ml>22 >25 >30 >35 >40 X +/- DSPersoane sntoase%9,45,51,30,50,0913,3+/-6Hepatita acut %63503825024,7+/-10Hepatita cronic %574329291425,4+/-13Ciroz %393931272326,8+/-19Boli maligneStomac %14777720,5+/-30Ficat %362821141444,2+/-124Pancreas %808070705051,2+/-53Prostat %1005030282026,2+/-11Plamni %717160534063,6+/-76Ovare %666455393459+/-64

Antigenul polipeptidic tisular (Tissue Polypeptide Antigen) - TPAEste un antigen asociat tumorilor universal, deoarece prezint valori crescute indiferent de locul tumorii.

Este un polipeptid cu masa molecular de 180 kD, fiind de fapt un amestec de citocheratine:Citocheratina 19 - 44%;Citocheratina 18 - 36%;Citocheratina 8 - 20%.

Este prezent n: esuturile fetale, placent, epiteliul organelor cavitare.

Valori normale n ser: 0-90 U/l, iar n urin: < 500U/l

Timp de njumtire: 1 zi

TPA este sintetizat n faza S a ciclului celular i concentraia TPA se coreleaz cu proliferarea tisular.

Poate fi identificat n urin, saliv, lichidul de lavaj bronho-alveolar, ascit. Aceste determinri sunt de multe ori mai valoroase dect determinrile din ser. Sensibilitatea TPA n diverse tumori maligne

Localizarea tumoriiSe (%)Plmni - cu celule mici90-95Plmni - altele dect cele cu celule mici90-95Mamar preoperator postoperator40-9575-85Ficat80-90Pancreas80-90Colon, rect Preoperator Postoperator10-8570-80Vezica urinar80-90Prostat80-90Ovar80-90Tiroid40-60Cap, gt60-80

Antigenul polipeptidic tisular - TPA

Sensibilitate (%):+ = 0-20 , ++= 21-40 , +++ = 41-60 , ++++ = 61-80Sensibilitatea TPA n comparaie cu ali markeri n cteva tumori frecvente Specificitatea este medie / slab. TPA crete frecvent n inflamaii, infecii respiratorii, diabet, hepatit, pancreatit, ciroz hepatic. Este folosit i singur n acele cazuri n care nu exist ali markeri specifici (ex. tumorile vezicii urinare). Combinat cu ali markeri tumorali, poate crete semnificativ eficacitatea diagnostic. n contrast cu ceilali markeri, a cror concentraie se coreleaz cu masa tumoral, TPA indic activitatea actual a tumorii, de aceea mai este numit i antigen de proliferare.

PlamnColon / rectVezicaSnTPA++++++++++++++++CYFRA 21-1+++++++CEA++++++++NSE++++++CA 15-3+++++CA 19-9+++++

Antigenul specific prostatic (Prostate-Specific Antigen)- PSAEste o glicoprotein cu masa molecular de 36 kD (Wang et al 1977), sintetizat de celulele epiteliale prostatice i secretat n lichidul seminal.

Valori normale: 0-2,5 ng/ml, iar cut-off: 3 ng/ml

Timp de njumtire: 1-2 zile.

Valori crescute apar n boli benigne (prostatit, hipertrofie de prostat) i n carcinom de prostat.

In intervalul 4-10 ng/ml, pentru excluderea dg de hipertrofie benign, se recomand dozarea free PSA

Este un marker specific de organ, care poate fi folosit i pentru screening-ul grupelor de risc (brbai cu vrste cuprinse ntre 50-70 ani), mai ales n asociere cu tueul rectal

PSA poate fi folosit i pentru monitorizarea terapiei i detectarea recidivelor.

Antigenul specific prostatic (Prostate-Specific Antigen)- PSAHipertrofie prostatica,Prostatita, Carcinom prostatic

3C. MARKERI TUMORALI HORMONISinteza de hormoni peptidici este o trstur comun a celulelor canceroase. Cele mai multe studii se refer la cancerul bronic: 10% din pacienii cu aceast boal prezint sintez ectopic de hormoni.

Tumorile celulelor APUD (amine precursor uptake and decarboxylation) - APUD-oamele au o activitate intens de sintez hormonal.

Aceste tumori sunt: cancerul bronic cu celule mici, carcinoidul, carcinomul celulelor Langerhans (insulinomul)

Sintez ectopic de hormoni n tumori

TUMORIHORMONIAPUD-oameCancer bronic cu celule miciCarcinoidTumorile celulelor insulare (pancreas)ACTH, Lipotrofina (LPH)Serotonina, Vasopresina (ADH)Calcitonina, PTH, Gastrina, (Insulina, Glucagon)Non APUD-oamePlamni- carcinom epidermoid i adenocarcinomCalcitonina, PTH, STH, Prolactina, Insulina, GlucagonCancer mamarhCG, HPL, Calcitonina, PTH, ACTH

CarcinoidulTumor din grupa APUD-oamelor, se dezvolt din celulele enterocromafine n tractul gastrointestinal, pancreas, ci biliare = sistem de celule cu caracteristici histochimice i raspndire heterogen, cu rolul de a sintetiza amine biogene: dopamina i noradrenalina.

Produsul cel mai caracteristic al acestor tumori este serotonina (5-hidroxitriptamina). Metabolitul serotoninei, acidul 5-hidroxiindolacetic (5 HIAA) este excretat n urin. Determinarea acestui metabolit este un test indispensabil pentru diagnosticul biochimic al carcinoidului > 25mg /24 ore (atenie la recoltarea Urinei: paracetamol, banane, alune - 5 HO-Indol).

Este un hormon GP heterodimeric (cu dou subuniti: a i ) produs n mod normal de ctre trofoblatii placentari; este detectabil dup aprox 1 sptmn de la nidare i crete exponenial (dublndu-i concentraia la 1,5-2,5 zile).

Determinarea hCG este utilizat de obicei pentru confirmarea sarcinii i evaluarea tumorilor trofoblastice.

A fost introdus n screening-ul matern, valori crescute fiind asociate (+AFP +E3) cu riscul crescut de sindrom Down, EduardsHuman Chorionic Gonadotropin - hCG

Human Chorionic Gonadotropin - hCGValori normale: la brbai i la femei < 5 U/lla femei n menopauz < 10 U/l.

Valori crescute: Identificarea n afara sarcinii este caracteristic tumorilor trofoblastice, n particular coriocarcinomului i tumorilor cu celule germinale ale testiculului (seminoame) i ovarului, rareori n carcinoame mamare, pulmonare, adenocarcinomul gastric i pancreatic (uneori nsoite de ginecomastie).

Exist o corelaie destul de bun ntre nivelul acestui marker i masa tumoral, determinarea putnd fi utilizat pentru a monitoriza rspunsul la tratament i eventualele recderi.

Determinarea este util i pentru screening-ul femeilor cu mol hidatiform, n sensul depistrii transformrii acesteia n coriocarcinom.

Calcitonina este secretat de celulele parafoliculare C ale tiroidei. Efectul principal este de scdere a calciului seric, prin inhibarea resorbiei osoase i stimularea eliminrii urinare a calciului.

Creterea concentraiei serice a calcitoninei apare n variate situaii patologice, incluznd sindroamele mieloproliferative.

Una dintre cele mai importante proliferri maligne nsoite de sinteza exagerat de calcitonin este carcinomul medular tiroidian.

Valori normale: < 0.150 ng/ml la brbai < 0.100 ng/ml la femeiCalcitonina

3D. Peptide: lanurile uoare, Tireoglobulina, Feritina, b2-mg, Proteina S-100Proteina(/-ele) Bence Jones

Este considerat primul marker tumoral (cunoscut din 1846: nclzirea la 60C -> pp--100C dizolvare -> re pp prin rcire)

Se utilizeaz doar din 1960, cnd a fost identificat natura monoclonal a acestora (lanuri uoare libere k sau l).

50-80% dintre pacienii cu mielom multiplu au BJ+. Mai puin frecvet, apar ns i n alte tipuri de maligniti:limfoame, leucemii cu Ly B, sarcom osteogen, insuficiena renal cronic

TireoglobulinaFuncia acestei glicoproteine este aceea de a transporta hormonul tiroidian n timpul sintezei i acumulrii acestuia n tiroid.

Tireoglobulina crete la majoritatea bolnavilor cu carcinom tiroidian, de aceea aceast protein este folosit ca marker al cancerului tiroidian. Cea mai mare sensibilitate diagnostic o are n tumorile tiroidiene difereniate (>90%).

Nu exist date suficiente despre sensibilitatea i specificitatea tireoglobulinei n tumorile nedifereniate.

Nu exist nici o corelaie ntre valorile tireoglobulinei i carcinomul medular tiroidian.

Concentraia tireoglobulinei crete i n alte boli tiroidiene: tiroidite, noduli tiroidieni benigni.

Tireoglobulina este important mai ales n monitorizarea evoluiei cancerului tiroidian: este folosit n asociaie cu scintigrafia sau o poate chiar nlocui.

Valori normale: 0-75 ng/ml. Valori peste 500 ng/ml sunt observate n metastaze osoase sau pulmonare.

Hipertiroidism, Carcinom tiroidian

FeritinaProteina responsabil de depozitarea fierului cu o mas molecular de 440 kD

Feritina este denumirea a 20 de izoferitine. Izoferitinele sunt alctuite din combinaia a trei subuniti:H caracterizeaz izoferitinele acide;L caracterizeaza izoferitinele alcaline;HL izoferitine mixte n cord i ficat.

n esuturile tumorale se gsesc mai ales izoferitinele acide. n caz de exces de fier, esuturile tumorale sintetizeaz subuniti H, iar esuturile normale subuniti HL.

Valori normale:Brbai: 18-440 ng/ml.Femei: nainte de menopauz: 8-120 ng/ml, dup menopauz: 30-300 ng/ml.Nou-nscut < 600 ng/ml.Valori crescute: inflamaii, tumori, talasemie, sideroblastoz, hemocromatoz, hepatopatii;

Valori sczute: sideropenie, sindrom nefrotic, sindrom malabsorptiv, graviditate.

n urmtoarele neoplazii feritina crete n 40-70% din cazuri: leucemia acut; limfom Hodgkin; carcinom pulmonar; carcinom de colon; carcinom hepatic; carcinom de prostat.

b 2 microglobulinaEste o protein mic 11,8 kD, alctuit din ~100 de aminoacizi, identic cu lanul uor al antigenului de histocompatibilitate leucocitar HLA clasa I-a. Se gsete pe membranele tuturor celulelor difereniate.

Este prezent n lichidele biologice n concentraie sczut (ser, urin, saliv, lcr, etc). Este eliminat de rinichi n proporie de 98%.

Valori normale:ser: 1,2-2,5 mg/l;urin: 0,02-0,3 mg/l (pH-ul acid < 6, o distruge!);LCR: 0,8-1,8 mg/l.Timp de njumtire: 40 minute.

Cauzele creterii b-2-microglobulinemiei:sinteza crescut; distrugerea celulelor / turn-over crescut n celulele sistemului imun;scderea ratei filtrrii glomerulare.

n cazul tumorilor, concentraia b-2-mg crete datorit sintezei crescute n esutul tumoral, dar poate crete i datorit inflamaiei sau alterrilor suferite de esuturile din jurul tumorii.

Creterea concentraiei b-2-mg nu este specific tumorilor; apare i n inflamaii, n boli renale, hepatice, infecii, SIDA etc.

Sensibilitatea b-2-mg n diagnosticul diverselor tumori

TumoriSensibilitatePulmonar42 %Mamar40 %Colo-rectal52 %Gastric57 %Pancreatic75 %col uterin57 %Limfom Hodgkin48 %Limfom nonHodgkin62 %LLC69 %

Proteina S-100Este o protein astroglial cu o mas molecular de 21 kD, cu capacitatea de a lega calciul, alctuit din 2 subuniti (a, b) care se cupleaz n forme homo- i heterodimere.

Este prezent n: - celule gliale i celule Schwann; - celule gliale;aa - muchi striai (cord, rinichi).

Testul S-100 msoar izoformele bb i ab n ser i LCR. Valori normale: < 0,3 g/l.

Proteina S-100 detecteaz cu o mare sensibilitate bolile sistemului nervos central. Ca marker tumoral este folosit n:tumori primare i metastaze (neurinom, glioblastom, astrocitom, meningiom);monitorizarea melanomului.

Nivelul S-100 se coreleaz exact cu stadiul clinic al melanomului i este folosit ca factor de prognostic i pentru monitorizarea terapiei melanomului.Valoarea prognostic a S-100

Concentraia S-100 (g/l)Supravieuire la 3 ani (%)< 0,385%0,3-0,650%> 0,610%

3E.EnzimeCelulele canceroase au o activitate enzimatic diferit att cantitativ, ct i calitativ.

LDH, Amilaza, CK, g-GT, nu sunt utile pentru diagnosticul primar al tumorilor, dar sunt utilizate pentru monitorizarea terapiei i evoluiei bolii, ca markeri de linia a doua

Cteva enzime i izoenzime ns, pot fi folosite i ca markeri tumorali de prim linie

3E.Enzime markeri tumorali: NSEEnolaza neuronspecific - NSE 87 kD, este o enzim citoplasmatic cu rol n metabolizarea intracelular a glucozei, prezent n toate celulele organismului.

Are trei subuniti: a, b, g prezente ntotdeauna n forme dimere. Formele aa, gg i ag sunt prezente n neuroni, celule neuro-ectodermale i trombocite.

Valori normale: 0-13 ng/ml

Tumorile nsoite de difereniere neuro-endocrin (neuroblastom, carcinom pulmonar cu celule mici) secret n snge o cantitate nsemnat de NSE ca rezultat al distrugerii celulare intense.

Cea mai important indicaie a NSE: monitorizarea evoluiei i terapiei cancerului pulmonar cu celule mici (indic foarte precis eficacitatea chimioterapiei dac dup 48 ore de terapie nu se observ o cretere semnificativ n activitatea NSE, atunci tumora este rezistent la tratament)Sensibilitatea NSE n diagnosticul tumorilor nsoite de difereniere neuro-endocrin

TumoriSe (%)Neuroblastom97Carcinom pulmonar cu celule mici83APUD-oame74

3E.Enzime markeri tumorali: dezoxi Timidin-kinaza - dTK Enzima dTK (dezoxi timidin kinaza) catalizeaz fosforilarea dezoxi timidinei la dT monofosfat.

n celulele organismului uman exist trei izoenzime de TK. Izoenzima TK1 exist n cantiti crescute n celulele care prolifereaz intens i n celulele maligne. Astfel, TK arat activitatea proliferativ (ca i TPA).

Valori normale: 0-5 U/l.

Activitatea enzimatic se coreleaz cu gravitatea bolii; poate fi folosit pentru stadializarea bolii i alegerea tratamentului, precum i pentru evaluarea eficacitii terapiei. TK este folosit mai ales n boli limfoproliferative (limfom Hodgkin, limfom nonHodgkin, leucemie acut i cronic, mielom), tumori cerebrale, carcinom pulmonar cu celule mici, cancer mamar

TK crete i n cteva boli virale (virus herpetic, citomegalic, HIV). Este folosit i pentru monitorizarea acestor boli.

Oncogene= gene care atunci cnd sunt exprimate anormal de intens sau cnd sufer mutaii, contribuie la transformarea unei celule normale ntr-o celul canceroas (angajat n mitoz necontrolat). 3F. Markeri Genetici

Exist trei membri ai familiei de oncogene Ras: H-Ras-1, K-Ras-2, N-Ras3F. Markeri Genetici Oncogene Ras, Raf

Gene supresoare tumorale

Inhib sau frneaz creterea celular i ciclul celular, prevenind dezvoltarea tumorilor

Mutaii ale acestor gene determin ignorarea din partea celulei a unuia sau mai multor componeni ai reelei de semnale inhibitorii, nlturnd frnele ciclului celular, ceea ce conduce la o cretere celular necontrolat - cancer.

p53 = Proteina citopl. supresoare a creterii tu, monitorizeaz integritatea ADN n timpul diviziunii celulare (poate opri / ncetini ciclul celular n faza S, pentru a permite repararea ADN)n caz de leziuni ireparabile, declaneaz apoptoza celulei (prin scderea expresiei Bcl-2)Gena codificatoare p53 este inactiv sau lipsete la peste 50% din celulele canceroase

Gena supresoare p53 a dezvoltrii tumorilor crz 17p13.1

Cromogranina ACromogranina A este o proteina cu greutatea moleculara de 49 kD alcatuita din 439 aminoacizi. Face parte din familia graninelor care se gasesc in veziculele secretorii ale celulelor neuroendocrine. Rolul acestora este de a regla activitatea secretorie a acestor celule.Datorita raspandirii in tesuturile neuroendocrine, cromogranina A constituie un marker util pentru tumorile dezvoltate din aceste tesuturi: carcinoid, feocromocitom, neuroblastom, carcinom tiroidian medular, unele tumori hipofizare, tumori insulare pancreatice si alte apudoame. A fost demonstrat faptul ca nivelurile serice de cromogranina A se coreleaza cu volumul tumoral.De asemenea reprezinta un instrument sensibil pentru depistarea tumorilor reziduale si a recurentelor la pacientii tratati.

Valori de referinta 19-98 g/L

SCLC Frammento 21-1 della CT 19 (Cyfra 21-1)Cyfra 21-1 este o analiza care masoara fragmente de citokeratina existente in sange. Masurarea fragmentelor de citokeratina 19 in sange se face in cazurile de cancer pulmonar (altfel de cancer pulmonar decat cel cu celule mici) si in cazuri de carcinom cu celule scuamoase.Insa cyfra 21-1 este folosit in special ca marker tumoral pentru neoplasmele de plaman. Testul cyfra 21-1 foloseste doi anticorpi monoclonali specifici (KS 19.1 and BM 19.21) pentru citokeratina 19 . Valori normaleValoarea medie a indivizilor sanatosi este de aproximativ : 1.3 ng/mL.

Gonadotropina corionica (HCG)Gonadotropina corionica umana (HCG), un hormon de natura glicoproteica produs in mod normal de placenta si in mod aberant de unele tumori cu celule germinale, este alcatuit din doua subunitati diferite: alfa si beta. Subunitatea alfa, constituita din 92 aminoacizi, este identica cu cea a hormonilor LH, FSH si TSH. Subunitatea beta, ce contine 145 aminoacizi, este specifica pentru HCG; deoarece testul are o sensibilitate inalta pentru beta-HCG nu exista riscul unei reactivitati incrucisate. Anumite tumori slab diferentiate sau nediferentiate se asociaza cu productie ectopica de HCG. Printre acestea se numara: mola hidatiforma, coriocarcinomul si tumorile testiculare cu celule germinale.

Recomandri pentru utilizarea Markerilor pentru dg. Cancerului de snCA 15-3 nu se utilizeaz ca i marker de screening de mas (Se )Determinarea receptorilor pentru Estrogen / Progesteron este recomandat pentru a aprecia raspunsul la terapie hormonal

Determinarea CD 15-3 i CA 27.29 sunt utile pentru detecia precoce a recurenei la pacientele clinic asimptomatice, dup tratament n std II i III

Determinarea CA 27.29 este utilizat doar in monitorizarea pacientelor aflate n faz avansat de boal

Descreterea CD 15-3 = succes terapeutic

CEA dg precoce al metastazelor

Recomandri pentru utilizarea CEA pentru dg. Cancerului colo-rectalCEA nu este recomandat pentru screening (Se ~), este utilizat pentru completarea stadializrii

Dozarea CEA imediat post-operator nu este recomandabil, datorit eliberrii unei mari cantiti intra-operator

Poate fi utilizat pentru monitorizarea rspunsului terapeutic i progresiei bolii

Recomandri pentru utilizarea Markerilor pentru Cancerul pulmonar (NSE, CEA, CYFRA 21-1, SCC)Sensibilitateaa markerilor NSE (SCLC) CEA (NSCLC) n cancerul pulmonar CYFRA 21-1 fragmente solubile de Citokeratina 19 (n NSCLC)Valori normale: < 3,3 ng/mlValori crescute: carcinom bronic non-parvicelular specificitate 95%.Antigenul celulelor carcinomatoase scuamoase (SCC)Valori normale: < 3 ng/mlSe recomanda dozarea tuturor markerilor pt a putea depista Leading marker-ul, cu care se va monitoriza tratamentul !!! (cel mai adesea biopsia este imposibil !)

Tipul boliiNNSE (> 13 ng/ml)CEA (> 5 ng/ml)Carcinom cu celule mici8174%47%Alte carcinoame10815%46%Boli pulmonare benigne795.1%13.9%Persoane sntoase920% ( 7.1 +/- 2.0) 0% ( 1.8 +/- 0.8)

Recomandri pentru utilizarea PSA pentru dg. Cancerului de prostatPSA se utilizeaz n asociere cu tueul rectal ! (cut-off: 3 ng/ml)

Recoltarea sngelui pentru analiz, se face nainte de orice manipulare /manevre asupra prostatei

La valori < 4 ng/ml, nu se recomand biopsia

n intervalul 4-10 ng/ml, pentru excluderea dg de hipertrofie benign, se recomand dozarea f PSA (dac < 25% din PSA, risc )

Standard PSAProbabilitate cancer% free PSAProbabilitate cancer0-2 ng/mL1%0-10%56%2-4 ng/mL15%10-15%28%4-10 ng/mL25%15-20%20%>10 ng/mL>50%20-25%16%>25%8%

Recomandri pentru utilizarea Markerilor pentru Cancerul gastricSensibilitatea i specificitatea comparativ a CA72-4, CA19-9, CEA Corelaia ntre valorile crescute ale CA72-4, CA19-9, CEA i stadiul tumorii

CA72-4 > 8 ng/mlCA19-9 > 37 U/mlCEA > 5 ng/mlCarcinom78%60%51%Boli benigne1%7%9%

StadiulCA 72-4 > 8ng/mlCA 19-9 > 37 U/mlCEA> 5ng/mlI14%4%1%II28,5%12,5%12,6%III64%46%32%IV85%70%65%

Markeri tumorali de prim linie recomandai n neoplazii

TumoriMarkeri tumoraliHepatic primarAFP, CEAGerminaleAFP + hCGProstatPSA, fPSAGastricCA 72-4, CEA, TPAPulmonar cu celule miciNSE, TPA, CEAPancreaticCA 19-9, TPAOvarianCA 125, TPA,, CA 72-4Vezica urinarTPAColo-rectalCEA, TPA, CA 19-9NeuroblastromNSETiroidianTireoglobulina, Calcitonina

MetodaLimita deteciei (fmol)EIA1-0,1FIA0,01LIA0,01-0,00001

Recomandri pentru utilizarea Markerilor pentru Cancerul ovarianNu se recomand utilizarea CA 125 pentru screening-ul populaiei asimptomatice (Se )

Istoric familial de cancer n sfera genital se recomand dozarea la 6 luni interval + Ultra- sonografie transvaginal

CD 125 poate fi utilizat ca marker prognostic n terapia primar

ROC (Receiver Operating Characteristics) markeri tumorali n carcinomul mamar

CEA: 42%hCG: 21%CA 15-3: 30%p53: 10%C-erB-2: 20-30%

Combinarea markerilor tumorali n practica clinicMCA = mucinous carcinoma associated antigen (cut off: 11-14 U/l)

Combinarea markerilor tumorali n practica clinicCarcinoamele pulmonare:CEA: 88%Calcitonina: 54%NSE: 90% carcinomul cu celule n boabe de ovzC-k-ras2: 20%C-myc: 45%

Recoltarea i stocareaRecoltarea:Se face dimineaa pe nemncate.Sngele se recolteaz ca atare, fr aditivi.Se recolteaz 7 ml de snge din venele cubitale. Trebuie evitat aplicarea prelungit a garoului nainte de recoltarea sngelui.Sngele poate fi stocat la temperatura camerei maxim 1-2 ore.Stocarea:Sngele coagulat trebuie centrifugat i serul transferat n 2-3 criotuburi nchise. n ser nu trebuie s rmn hematii.Aceste probe pot fi stocate la 4oC 4-5 zile sau la temperatura de -20oC, pentru cteva sptmni.Pentru determinarea markerilor tumorali probele sunt decongelate la temperatura camerei (1-2 h) i omogenizate. Proba odat decongelat nu mai poate fi recongelat. Dup decongelare proba poate fi stocat 4-5 zile la temperatura de 4oC.Important!Analizele nu pot fi fcute din probe biologice cu hemoliz i/sau lipemie.

Caratteristiche ideali del marker

Identificazione soggetti a rischioDiagnosi precoceSupporto diagnostico clinicoControllo post-operatorioFollow-up Sensibilit = 100% (capacit di identificare la presenza di malattia)Specificit = 100% (capacit di identificare lassenza di malattia)

*******************************************************