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EsamiEsamiEsamiEsamiEsamiEsamiEsamiEsami Diagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologia
Erasmo MieleErasmo MieleErasmo MieleErasmo MieleErasmo MieleErasmo MieleErasmo MieleErasmo Miele
Dipartimento di PediatriaDipartimento di PediatriaDipartimento di PediatriaDipartimento di PediatriaDipartimento di PediatriaDipartimento di PediatriaDipartimento di PediatriaDipartimento di PediatriaUniversitUniversitUniversitUniversitUniversitUniversitUniversitUniversitàààààààà di Napoli di Napoli di Napoli di Napoli di Napoli di Napoli di Napoli di Napoli ““““““““Federico IIFederico IIFederico IIFederico IIFederico IIFederico IIFederico IIFederico II””””””””
EsamiEsamiEsamiEsamiEsamiEsamiEsamiEsami Diagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologia
• La “visita”
• Il “prelievo di sangue”
• La raccolta delle urine
• La raccolta delle feci
EsamiEsamiEsamiEsamiEsamiEsamiEsamiEsami Diagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologia
La “visita”
EsamiEsamiEsamiEsamiEsamiEsamiEsamiEsami Diagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologia
LL’’accrescimento accrescimento staturostaturo --ponderaleponderale
•• Il ritardo di accrescimento Il ritardo di accrescimento staturalestaturale èè spesso il primo spesso il primo sintomo di malattia ad esordio precoce, può essere sintomo di malattia ad esordio precoce, può essere indice di ricaduta. indice di ricaduta.
Malattia di Malattia di CrohnCrohn 35% 35% RettocoliteRettocolite Ulcerosa Ulcerosa 66--10% 10%
•• Fattori che possono influenzare la crescita lineare Fattori che possono influenzare la crescita lineare includono: includono:
Deficienza di Deficienza di Zn Zn Elevati livelli TNF associati a ridotti livelli di IGF I Elevati livelli TNF associati a ridotti livelli di IGF I
circolanticircolantiAlterato asse IGFAlterato asse IGFAlterata attivitAlterata attivit àà condrociticacondrocitica
Gastroenterology 2004; 126: 1550-1560
EsamiEsamiEsamiEsamiEsamiEsamiEsamiEsami Diagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologia
Il “prelievo di sangue”
Laboratory markers in IBD: useful, magic, or unnecessary toys? S Vermeire, G Van Assche and P Rutgeerts
GUT 2006
EsamiEsamiEsamiEsamiEsamiEsamiEsamiEsami Diagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaIndagini di I livello per Indagini di I livello per
Malattia Infiammatoria Cronica Intestinale (MICI)Malattia Infiammatoria Cronica Intestinale (MICI)
MarkersMarkers infiammatoriinfiammatori : : VES VES Proteina CProteina C --reattiva reattiva
Indagini nutrizionaliIndagini nutrizionali : : albumina albumina proteine totali proteine totali FerroFerro CalcioCalcioFosfatasi alcalinaFosfatasi alcalina
Altri studi Altri studi siericisierici : : EmocromoEmocromo con formula e piastrine, Enzimi con formula e piastrine, Enzimi epatici (AST/ALT/Bilirubina totale/epatici (AST/ALT/Bilirubina totale/ γγγγγγγγGT)GT)amilasi, lipasi amilasi, lipasi
Gastroenterology 2004; 126: 1550-1560
EsamiEsamiEsamiEsamiEsamiEsamiEsamiEsami Diagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologia
Indagini di I livello per MICIIndagini di I livello per MICI
““ PanelPanel ”” sierologicosierologico per MICIper MICI ::pANCApANCAASCAASCA
Test di permeabilitTest di permeabilit àà intestinaleintestinale
Esami fecaliEsami fecali ::Indagini microbiologicheIndagini microbiologicheSangue occultoSangue occultoCalprotectinaCalprotectina
EsamiEsamiEsamiEsamiEsamiEsamiEsamiEsami Diagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologia
Indagini di I livello per MICIIndagini di I livello per MICI
VES patologica in 90% dei pazienti MICIVES patologica in 90% dei pazienti MICI
Boyle JT, Boyle JT, Pediatr Rev,Pediatr Rev, 19971997
Rettorragia, >VES, <Hg identificano 86% deiRettorragia, >VES, <Hg identificano 86% deipazienti MICI prima di esami endoscopicipazienti MICI prima di esami endoscopici
Khan k et al. Khan k et al. Inflamm Bowel DisInflamm Bowel Dis, 2002, 2002
EsamiEsamiEsamiEsamiEsamiEsamiEsamiEsami Diagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologia
Indagini di I livello per MICIIndagini di I livello per MICICC--ReactiveReactive ProteinProtein asas a Marker a Marker for for
InflammatoryInflammatory BowelBowel DiseaseDisease
•• Malattia di Malattia di CrohnCrohn , valido marker che correla con l'attivit, valido marker che correla con l'attivit àà e con e con altri marker di infiammazione, come CDAI, altri marker di infiammazione, come CDAI, amiloideamiloide siericasierica , IL, IL--6 e 6 e calprotectinacalprotectina fecale.fecale.
•• Predice la necessitPredice la necessit àà di chirurgia di chirurgia
•• TrialsTrials con con antianti --TNF e molecole antiTNF e molecole anti --adesione hanno mostrato che adesione hanno mostrato che alti livelli di PCR predicono una buona risposta a qu este alti livelli di PCR predicono una buona risposta a qu este molecole. molecole.
•• RettocoliteRettocolite Ulcerosa: bassi livelli di PCR Ulcerosa: bassi livelli di PCR
InflammInflamm BowelBowel DisDis, 2004, 2004
EsamiEsamiEsamiEsamiEsamiEsamiEsamiEsami Diagnostici di Laboratorio in Diagnostici di Laboratorio in Diagnostici di Laboratorio in Diagnostici di Laboratorio in Diagnostici di Laboratorio in Diagnostici di Laboratorio in Diagnostici di Laboratorio in Diagnostici di Laboratorio in GastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologia
Indagini Indagini sierologichesierologiche ::
pANCA pANCA ((perinuclearperinuclear stainingstaining antineutrophilantineutrophil antibody) antibody)
ASCA ASCA ((antianti --SaccharomycesSaccharomyces cerevisiaecerevisiae antibody)antibody)
““ Role of serology and routine laboratory test in children inflammatory bowel disease”
Khan K et al. Inflamm Bowel Dis. 2002
TEST SIEROLOGICI (pANCA, ASCA)
� I I TEST SIEROLOGICI (pANCA, ASCA): ELEVATA SPECIFICI TA’
� I TEST DI ROUTINE (VES, Hb): ELEVATA SENSIBILITA’
Malattie Infiammatorie Croniche Intestinali
NovitNovitNovitNovitNovitNovitNovitNovitàà in Tema di Diagnosi delle MICIin Tema di Diagnosi delle MICIin Tema di Diagnosi delle MICIin Tema di Diagnosi delle MICIin Tema di Diagnosi delle MICIin Tema di Diagnosi delle MICIin Tema di Diagnosi delle MICIin Tema di Diagnosi delle MICI
Comparison Comparison of of Serological Markers Serological Markers of of Inflammatory Bowel Inflammatory Bowel Disease with Clinical Diagnosis Disease with Clinical Diagnosis in in ChildrenChildren
Ulcerative Ulcerative Colitis Colitis CrohnCrohn ’’s Diseases Disease
SensitivitySensitivity 69.269.2 54.154.1
SpecificitySpecificity 95.195.1 96.896.8
++Predictive valuePredictive value 90.090.0 90.990.9
--Predictive valuePredictive value 87.187.1 80.880.8
Inflamm Bowel DisInflamm Bowel Dis, 2004, 2004
EsamiEsamiEsamiEsamiEsamiEsamiEsamiEsami Diagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologia
Test di PermebailitàIntestinale agli Zuccheri
•• Il test di assorbimento degli zuccheri si basa sull a misurazioneIl test di assorbimento degli zuccheri si basa sull a misurazionedelldell ’’escrezione urinaria di zuccheri somministrati per escrezione urinaria di zuccheri somministrati per osos((cellobiosiocellobiosio e e mannitolomannitolo ) e del loro rapporto (C/M)) e del loro rapporto (C/M)
•• Il Il mannitolomannitolo , piccolo monosaccaride, , piccolo monosaccaride, èè assorbito attraverso assorbito attraverso pori presenti sulla parte apicale della membrana pori presenti sulla parte apicale della membrana citoplasmaticacitoplasmaticadegli degli enterocitienterociti
Estensione Superficie Assorbitiva
MannitoloMW<200 Da
Test di Permeabilità Intestinale agli Zuccheri
Via Via TranscellulareTranscellulare
• Il cellobiosio può passare solo attraverso gli spazi intercellulari
Chiusura e la Maturazione Tight Junctions
CellobiosioMW>300 Da
Test di Permeabilità Intestinale agli Zuccheri
Via Paracellulare
In bambini sani il rapporto C/M è <0.023
Test di Permeabilità Intestinale agli ZuccheriModalità di Esecuzione
• Dopo una notte di digiuno:Mannitolo 2 grCellobiosio 5 grAcqua 100 ml (osmolarità 270 mmol/l).
• Raccolta urine per le successive 5 ore con conservazione a -20°C
• Digiuno per durata del test, ma possibilità di assumere acqua dopo la prima ora
Test di Permeabilità Intestinale agli Zuccheri
Indicazioni• Diabete tipo I
• Malattia Celiaca
• Allergia Alimentare
• Malattie Infiammatorie Croniche Intestinali
• Colon Irritabile
Arrieta MC, et al. Gut 2006; 55: 1512-1520
Altered Intestinal Permeability is Predictive of Early Relapse in
Children with Steroid Responsive Ulcerative Colitis
Miele E, et al. Aliment Pharmacol Ther, 2007
EsamiEsamiEsamiEsamiEsamiEsamiEsamiEsami Diagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologia
La raccolta delle feci
EsamiEsamiEsamiEsamiEsamiEsamiEsamiEsami Diagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inDiagnostici di Laboratorio inGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologiaGastroenterologia
Indagini di I livello per MICIIndagini di I livello per MICI
Esami fecaliEsami fecali ::Indagini microbiologicheIndagini microbiologicheSangue occultoSangue occultoCalprotectinaCalprotectina fecalefecale
Indagini di I livello per MICIIndagini di I livello per MICI
BalantidiumBalantidium colicoli
CampilobacterCampilobacter
ChlamidiaChlamidia trachomatistrachomatis
ClostridiumClostridium difficiledifficile
CytomegalovirusCytomegalovirus
EntamoebaEntamoeba histolyticahistolytica
EscherichiaEscherichia colicoli
HistoplasmaHistoplasma
Mycobacterium tubercolosisNeisseria gonorrhoeaSalmonellaSchistosomaShighellaStrongyloidesTreponema pallidumYersinia
SD Lee, RD Cohen, Gastroenterol Clin N Am 2002
Diagnosi Differenziale
Impact of Impact of Clostridium difficileClostridium difficile infection oninfection onPediatric Inflammatory Bowel DiseasePediatric Inflammatory Bowel Disease
• Prevalence of C. difficile infection: not significantly higher in IBD patients (12%) and in non-IBD subjects (7%) (p=0.119; χ2=1.39)
• IBD predisposes children to an increased risk of C. difficile infection (OR=1,79)
Prevalence of Clostridium difficile infection in IBD and non-IBD patients
0102030405060708090
100
IBD Non-IBD
Per
cent
of p
atie
nts
C. diff positive
C. diff negative
Pascarella F, Miele E et al. DDW 2008
Grazie per l’Attenzione!!!