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Escola Profissional Amar Terra Verde
“Sabichões”Fevereiro de 2010
“E se um Bloom de Cianobactérias te batesse à
porta?”
Fases do Trabalho
• Preparação de Meio Z8• Cultura de Microcystis• Toxicidade com Chlorella• Toxicidade com Artémia
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Preparação de Meio Z8
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Preparação de Meio Z8 - Continuação
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Cultura de MicrocystisEscola Profissional Amar Terra Verde
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Determinação da densidade celular por quantificação na câmara de
Neubauer
Tabela 1: Densidade celular em função do tempo
Escola Profissional Amar Terra Verdedia nº1 1,70E+072 2,24E+073 4,29E+074 5,76E+075 6,72E+076 7,36E+077 7,30E+078 7,39E+079 7,36E+07
10 7,39E+0711 7,30E+0712 7,36E+0713 7,36E+0714 7,40E+0715 7,36E+0716 7,38E+0717 7,39E+0718 7,36E+0719 7,36E+0720 7,35E+0721 7,30E+0722 7,30E+0723 5,70E+0724 5,20E+0725 4,80E+0726 3,20E+0727 3,00E+0728 2,80E+07
Gráfico da densidade celular em função do tempo
0 5 10 15 20 25 300.00E+001.00E+072.00E+073.00E+074.00E+075.00E+076.00E+077.00E+078.00E+07
Curva de Crescimento
Tempo (dias)
Den
sida
de C
elul
arCe
l/m
L
Toxicidade com Chlorella
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Imagens da filtração, diluição e placa de poços
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Imagens da filtração, diluição e placa de poços
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Imagens da filtração, diluição e placa de poços
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Cálculos: % de inibição em função da Concentração de Microcystis
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1 2 3
Controlo01:01 01:02 01:04
Ensaio 1 8,00E+05 1,60E+06 1,92E+06 3,20E+06
Ensaio 2 9,60E+05 9,60E+05 9,60E+05 4,00E+06
Ensaio 3 9,60E+05 1,76E+06 1,92E+06 3,68E+06
Média 9,07E+05 1,44E+06 1600000 3,63E+06
% de inibição 99,75 99,60 99,56 99,00
Registo da toxicidade em Chlorella
Gráfico: % de inibição em função da Concentração de Microcystis
0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.599.45
99.50
99.55
99.60
99.65
99.70
99.75
99.80
% de Inibição em função da Concentração de Microcystis
Series1
Nº do Poço
% d
e In
ibiç
ão
Toxicidade com ArtémiaEscola Profissional Amar Terra Verde
Preparação da placa de 24 poços com os nauplios de artémia
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Contagem das artémias mortas em cada poço, com a
lupa
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Tabela 4: Nauplios de artémia
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1 2 3
Controlo01:01 01:02 01:04
Ensaio 1 10 7 3 1
Ensaio 2 12 8 5 2
Ensaio 3 10 8 5 1
Média 10,67 7,67 4,33 1,33
Desvio Padrão 1,15 0,58 1,15 0,58
Cálculos: % Artémias mortas em cada poço
1 2 3
Controlo01:01 01:02 01:04Ensaio 1 66,67% 46,67% 20,00% 6,67%Ensaio 2 80,00% 53,33% 33,33% 13,33%Ensaio 3 66,67% 53,33% 33,33% 6,67%Média 71,11% 51,11% 28,89% 8,89%
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0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.50.00%
20.00%
40.00%
60.00%
80.00%
% de bactérias mortas em função da concentração de Microcystis
Series1
Poço
% d
e ba
ctér
ias
mor
tas
Gráfico: % de bactérias mortas em função da
Concentração de Microcystis
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Conclusão
Após os resultados obtidos, elaborou-se um gráfico do crescimento de Microcystis aeruginosa, na qual se observa três fases claras, a de latência, a de crescimento exponencial e a fase de desaceleração.
O efeito toxicológico da Chlorella no crescimento de Microcystis é superior nos poços em que a sua concentração é maior. Daí que o valor de % de inibição nesses mesmos poços também seja superior.
O efeito toxicológico de solução tóxica de Microcystis é mais evidente nos poços em que se encontra mais concentrado, provocando um aumento significativo do número de artémias mortas.
Com a realização deste trabalho desenvolvemos o gosto pela investigação ciêntifica, permitindo-nos o uso de determinados equipamentos nomeadamente a Câmara de Neubauer que de outra forma não seria possível. Além disso, se as cianobactérias não nos fossem fornecidas não poderiamos fazer inoculaçao em diferentes meios e verificar a sua toxicidade em contacto com outras bactérias.
Com a realização deste tipo de actividades podemos aplicar na pratica conhecimentos apreendidos nas aulas teóricas de determinadas disciplinas, nomeadamente, Química Aplicada. No próximo ano estaremos atentos aos ovos desafios propostos pela Ciência Viva, para podermos novamente participar.
Desde já agradecemos tal a atenção disponibilizada por vossas excelências.
Sem mais submetemo-nosClementina Martins, Adriana Cardoso, Katy Faria e Flávia
Gomes
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A equipa, Sabichões!