Estudio de propagacion sexual de Pino de monte (Podocarpus glomeratus) en la comunidad de Sailapata (Cochabamba, Bolivia)

UNIVERSIDAD MAYOR DE SAN SIMNFACULTAD DE CIENCIAS AGRCOLAS Y PECUARIAS ESCUELA DE CIENCIAS FORESTALES

ESTUDIO DE PROPAGACIN SEXUAL DE PINO DE MONTE (Podocarpus glomeratus D. Don) EN LA COMUNIDAD DE SAILAPATA - INDEPENDENCIA

Tesis de grado para obtener el ttulo de licenciatura en Ingeniera Forestal

ARIEL ISAAS AYMA ROMAY

Cochabamba Bolivia 2005

HOJA DE APROBACIN TRIBUNAL DE DEFENSA.

.. ING. M. SC. JUN HERBAS BALDERRAMA TRIBUNAL DE DEFENSA

... ING. CLAUDIO PEARRIETA V. TRIBUNAL DE DEFENSA

. ING. M. SC. FIMO ALEMAN DAZA TRIBUNAL DE DEFENSA

ING. M. SC. EDWARDS SANZETENEA TERCEROS DIRECTOR ESFOR

. ING. HERMOGENES ESPINOZA DECANO (FCAPV y F)

DEDICATORIA

Doy gracias a Dios creador de nuestra exuberante y an desconocida naturaleza, por la cual debemos dedicar con pasin toda nuestra vida para comprenderla y conservarla. Dedico la investigacin a los exuberantes y poco explorados bosques de neblina, que an conservan valiosas plantas y animales que son dignos de admiracin, respeto y estudio. A toda mi familia en especial a mi madre Olimpia por el amor que nos ha regalado, a mis queridos hermanos Mara Isabel, Edwards, Daniel y a la memoria de mi padre Vicente. As tambin, a Elsa Padilla, quien me regalo sin medida su amor, amistad y confianza. Quin me contagio de vida y de sueos.

AGRADECIMIENTOS

Quedo agradecido a la Escuela de Ciencias Forestales de la Universidad Mayor de San Simn por haber permitido mi educacin y formacin tcnica. Agradezco a la cooperacin de PROBONA-BOLIVIA (Programa de Bosques Nativos y Agroecosistemas Andinos), KURMI (Apoyo al Desarrollo Sostenible Interandino) y BASFOR (Centro de Semillas Forestales) Asimismo, agradezco a las fuertes familias quechuas de Sailapata, por haber apoyado en la investigacin y mediante su hospitalidad permitirme compartir su forma de vida, lo que ha significado para m un orgullo y una experiencia inolvidable. Agradezco tambin, a mi tutor Ing. M. Sc. Eduwards Sanzetenea y a mi asesor Lic. Edilberto Rojas, por haberme guiado en la investigacin. A Lucy Rivero de la ORS de Santa Cruz, al SENAMHI (Servicio Nacional de Meteorologa e Hidrologa- Regional, Claudio Pearrieta de ORS de Cochabamba, Fimo Alemn docente ESFOR y director BASFOR, Juan Herbas B. docente de la Facultad de Agronoma UMSS y otros que gentilmente colaboraron en el trabajo, a todos ellos les agradezco sinceramente.

RESUMENLa presente investigacin contribuye con conocimientos para propagar sexualmente el Pino de monte (Podocarpus glomeratus D. Don), para que este recurso forestal sea utilizado en actividades silviculturales de planes de manejo comunitario de bosques, en la comunidad de Sailapata y comunidades de la cuenca Qorimayu del municipio de Independencia Cochabamba. La investigacin estudio temas de fenologa, productividad de semillas, poca de cosecha y atributos de la semilla como ser: morfologa, maduracin, procesamiento, deterioro en el almacenamiento y germinacin de semillas en bosque, vivero y laboratorio con diferentes tratamientos pregerminativos. Los principales resultados obtenidos son los siguientes: La semilla esta dentro de un epimacio, ste se asienta sobre un pseudofruto carnoso y dulce al madurar; la cubierta seminal es fibrosa y dura, tiene un gametofito abundante y un embrin morfolgicamente desarrollado con cotiledones en miniatura. La especie produce escasas semillas maduras durante seis meses; su mejor poca es diciembre, mes cuando sta fenofase alcanza un 17% de ocurrencia. As tambin no todos los rboles cumplen esta fenofase; ya que permanecen con semillas en maduracin durante ms de un ao. Cada rbol semillero produce 4% de semillas maduras de donde se pueden cosechar como promedio slo 835 semillas. La semilla premadura no tiene posibilidades de germinar. En tanto, la semilla madura sin procesamiento tiene una viabilidad de 50% (estimacin por prueba de corte) y un 33% de capacidad germinativa. As tambin, la semilla madura con el mtodo de procesamiento de flotacin mejora su viabilidad, ya que se obtiene un lote de 98% de pureza, con 76% de semillas viables. La semilla es recalcitrante, bajo las condiciones de almacenamiento rsticas, no pueden mantener la viabilidad por ms de 11 das, ya que no soportan un contenido de humedad menor a 26%. La germinacin en laboratorio es demasiado lenta, inicia a los 42 das y concluye a los 133 das. Mediante un anlisis de varianza y prueba de rangos mltiples de Duncan al 95 % de probabilidad se determino que los tratamientos pregerminativos de escarificado, escarificado remojo 48 horas y remojo 9 das a comparacin del testigo no ejercieron ningn efecto significativo en la germinacin. Sin embargo, el tratamiento de escarificado present mejores resultados a comparacin de los dems; ya que obtuvo un 58% de capacidad de germinacin, 0.39 de ndice de velocidad, 41% de vigor en 79 das. Por otra parte, en bosque y vivero, los tratamientos pregerminativos aplicados tuvieron poco efecto sobre la germinacin, ya que se obtuvo 1% de capacidad germinativa con el tratamiento de escarificado y remojo 48 horas al final de 18 semanas de observacin.

SUMMARYThe present study investigates applicable methods of the sexual propagation of Pino del Monte (Podocarpus glomeratus D. Don), in order to facilitate the use of this forest resource in silviculture activities and communal forest management, in the community of Sailapata and communities of the Q'orimayu watershed. This study investigated topics of phenology, seed productivity, season of seed production and seed attributes such as: morphology, maturation, processing, storage deterioration, and germination of seeds in the forest, nursery and laboratory with different pre-germination treatments. The principal results obtained are as follows: The seed lies within an epimacio (external seed covering), which is situated on a fleshy and sweet pseudofruit upon maturation; the seminal cover is fibrous and hard, has an abundant gametofito and an embryo morphologically developed with miniature cotyledons. This species disseminates its scarce mature seeds over the course of six months; however, in its most productive period (December) this pheno-phase reaches a high of 17% occurrence rate. Likewise, not all the trees complete this pheno-phase, as some remain with mature seeds for more than one year. Each seed-bearing tree produces 4% mature seeds of total seeds produced in one year, of which an average of only 835 seeds can be harvested. It is not possible for the premature seed to germinate. Likewise, without processing, the mature seed has a viability of 50% (estimated by seed cuts) and 33% germination capacity. Likewise, with the method of flotation processing, viability of the mature seed is improved, resulting in 98% purity and 76% viability of seeds. Furthermore, the seed is recalcitrant, thus, under rustic storage conditions, they cannot maintain their viability for more than 11 days, as they do not survive at a humidity level of of less than 26%. Germination in the laboratory is very slow, beginning at 42 days and concluding after 133 days. By means of a Variance Analysis and Test of Multiple Ranges developed by Duncan to a 95% probability, it was determined that the pre-germination treatments of scarification, scarification and immersion in water for 48 hours, and immersion in water for 9 days, in comparison to the control, did not have any significant effect on the germination rate. However, the treatment of scarification presented better results in comparison to the other treatments, obtaining 58% germination capacity, 0.39 in the velocity index, 41% vigor in 79 days. Furthermore, in forest and nursery, the applied treatments had little effect on the germination, as a result of only 1% was obtained with the treatment of scarification, and immersion in water for 48 hours at the end of 18 weeks of observation. (Traducido por Elizabeth Braun 2005) 1

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Voluntaria del CUERPO DE PAZ, en el Gobierno Municipal de Independencia. Cochabamba, BOL.

CONTENIDO CAPITULO I. INTRODUCCIN....................................................................................... 1 1.1 Introduccin .................................................................................................................... 1 1.2 Objetivos ......................................................................................................................... 2 1.2.1 Objetivo general ....................................................................................................... 2 1.2.2 Objetivos especficos ............................................................................................... 2 CAPTULO II. MARCO TERICO .................................................................................. 3 2.1 Descripcin botnica de Pino de monte (Podocarpus glomeratus)................................. 3 2.1.1 Taxonoma ............................................................................................................... 3 2.1.2 Caractersticas fisonmicas...................................................................................... 3 2.1.3 Estructuras reproductivas que originan la semilla ................................................... 3 2.1.4 Distribucin geogrfica............................................................................................ 4 2.2 Consideraciones de estimacin de floracin y fructificacin en especies forestales ...... 5 2.2.1 Caractersticas de produccin de semillas en especies de Podocarpus .................... 5 2.2.2 Fenologa y caractersticas de la irregularidad en la produccin de semillas .......... 5 2.3 Aspectos de la maduracin de semillas forestales con nfasis en conferas ................... 6 2.4 Fundamentos para el manejo de semillas recalcitrantes ................................................. 7 2.4.1 Precedentes sobre caractersticas recalcitrantes de Podocarpus .............................. 7 2.4.2 Caractersticas biolgicas de las semillas recalcitrantes .......................................... 7 2.4.3 Limpieza, extraccin, beneficio y oreo en relacin a semillas recalcitrantes. ......... 8 2.4.4 Recomendaciones para el almacenamiento de semillas recalcitrantes. ................... 8 2.5 Antecedentes de algunos atributos sobre la calidad de la semilla de Podocarpus .......... 9 2.6 Estructuras de la semilla considerando algunas identificadas en Podocarpus ................ 9 2.7 Impedimentos de la germinacin y tratamientos pregerminativos. .............................. 11 2.7.1. Clasificacin de tipos de latencia.......................................................................... 11 2.7.2 Latencia por la cubierta de semillas y tratamientos .............................................. 11 2.7.3 Latencia del embrin y tratamientos...................................................................... 12 2.7.4 Latencia combinada ............................................................................................... 13 2.8 Germinacin en diferentes condiciones de lugar (bosque, vivero y laboratorio). ........ 13 2.8.1 Experiencias de siembras directas en bosques tropicales. ..................................... 13 2.8.2 Condiciones de laboratorio y vivero para la germinacin. .................................... 14 CAPTULO III. MATERIALES Y METODOLOGIA .................................................. 15 3.1 Descripcin de Sailapata ................................................................................................. 15 3.1.1 Vegetacin ............................................................................................................. 15 3.1.2 Fisiografa. ............................................................................................................. 15 3.1.3 Clima...................................................................................................................... 15 3.2 Mtodo para caracterizar la morfolgica de la semilla ................................................. 16 3.3 Patrones fenolgicos y produccin de semillas maduras.............................................. 17 3.3.1 Evaluacin de los patrones fenolgicos ................................................................. 17 3.3.2 Estimacin de porcentaje de semillas maduras por rbol. ..................................... 17

3.4 Procedimientos aplicados para la determinacin de atributos de la semilla en laboratorio ..................................................................................................................... 19 3.4.1 Prueba de germinacin con diferentes estados de maduracin.............................. 19 3.4.2 Viabilidad en diferentes estados de maduracin mediante prueba de corte .......... 19 3.4.3 Procesamiento con mtodo de flotacin ................................................................ 20 3.4.4 Viabilidad en diferentes tiempos de almacenamiento ........................................... 21 3.4.5 Pureza..................................................................................................................... 22 3.4.6 Peso ........................................................................................................................ 23 3.4.7 Contenido de humedad .......................................................................................... 23 3.4.8. Mtodo aplicado para determinar un tratamiento pregerminativo....................... 23 3.5 Determinacin de un tratamiento pregerminativo que mejore la germinacin de la semilla en bosque y vivero........................................................................................... 26 3.5.1 Diseo del experimento ......................................................................................... 26 3.5.2 Siembra en bosque ................................................................................................. 26 3.5.3 Siembra en vivero. ................................................................................................. 27 3.6 Anlisis de datos. .......................................................................................................... 27 CAPTULO IV. RESULTADOS Y DISCUSIONES ....................................................... 28 4.1 Condicionantes de la investigacin.............................................................................. 28 4.2 Caracterizacin morfolgica de la semilla...................................................................... 29 4.2.1 Origen de la semilla ............................................................................................... 29 4.2.2 Morfologa de la semilla ........................................................................................ 29 4.3 Estimacin de patrones fenolgicos, poca de cosecha y productividad de semillas... 33 4.3.1 Ocurrencia de patrones fenolgicos en rboles de sexo femenino ........................ 33 4.3.2 Ocurrencia de patrones fenolgicos en rboles de sexo masculino. ...................... 36 4.3.3 Estimacin de productividad de semillas maduras. ............................................... 37 4.4 Determinacin de la calidad y vigor de la semilla ........................................................ 38 4.4.1 Viabilidad en diferentes estados de maduracin mediante prueba de corte .......... 38 4.4.2 Capacidad de germinacin de la semilla con diferentes estados de maduracin... 39 4.4.3 Beneficio por el mtodo de flotacin ..................................................................... 40 4.4.4 Pureza..................................................................................................................... 40 4.4.5 Determinacin de viabilidad, contenido de humedad y peso bajo condiciones rsticas de almacenamiento ......................................................................................... 41 4.4.6 Determinacin de tratamiento pregerminativo en laboratorio ............................... 43 4.5 Germinacin en bosque y vivero con aplicacin de tratamientos pregerminativos .... 46 4.5.1 Germinacin en bosque ......................................................................................... 46 4.5.2 Germinacin en vivero........................................................................................... 47 4.6 Comparacin de la propagacin sexual y asexual ........................................................ 47 CAPITULO V. CONCLUSIONES ................................................................................... 49 CAPITULO VI. RECOMENDACIONES. ....................................................................... 51 CAPITULO VII. BIBLIOGRAFA. ................................................................................. 52

NDICE DE TABLAS Tabla 1. Clasificacin taxonmica de Pino de monte. ........................................................... 3 Tabla 2. Observaciones fenolgicas de la produccin de semillas de Podocarpus. .............. 5 Tabla 3. Observaciones de caractersticas recalcitrantes de semilla de Podocarpus. ............ 7 Tabla 4. Atributos sobre la calidad de la semilla de algunos Podocarpus. ........................... 9 Tabla 5. Precipitacin de Independencia (2000 2005) expresada en milmetros.............. 16 Tabla 6. Criterios e indicadores para evaluar el estado fenolgico de Pino de monte......... 17 Tabla 7. Criterios para evaluar el estado de maduracin de la semilla de Pino de monte en la cosecha ...................................................................................................................... 18 Tabla 8. Indicadores de viabilidad de la semilla de Pino de monte para prueba de corte. .. 20 Tabla 9. Indicadores de viabilidad de embriones de Pino de monte para la prueba de tetrazolio ....................................................................................................................... 22 Tabla 10. Control de homogeneidad de ISTA ..................................................................... 25 Tabla 11. Esquema del experimento .................................................................................... 26 Tabla 12. Germinacin de Podocarpus glomeratus con diferentes tratamientos pregerminativos en cmara de germinacin. ................................................................ 43 Tabla 13. Comparacin de propagacin asexual y sexual en bosque vivero y laboratorio 48 NDICE DE FIGURAS Figura 1. Escarificacin de la semilla de Podocarpus glomeratus. .................................... 24 Figura 2. Parcela de siembra de semillas en bosque. . ....................................................... 27 Figura 3. Almaciguera de siembra de semillas, en la comunidad de Sailapata. ................. 27 Figura 4. Ginostrbilo de Podocarpus glomeratus.............................................................. 29 Figura 5. Estructuras que acompaan a la semilla. ............................................................. 29 Figura 6. Cambios de coloracin del pseudofruto de la semilla de P. glomeratus. ............ 30 Figura 7. Epimacio de la semilla de P. glomeratus. ............................................................ 30 Figura 8. Hilo y micrpilo de P. glomeratus. ...................................................................... 31 Figura 9. Estructuras externas del epimacio. ....................................................................... 31 Figura 10. Rafe y Haz conductor. ........................................................................................ 31 Figura 11. Epimacio y cubierta seminal de P. glomeratus. ................................................. 31 Figura 12. Gametofito de la semilla. ................................................................................... 32 Figura 13. Partes del embrin de P. glomeratus .................................................................. 32 Figura 14. Embrin cubierto por abundante gametofito ...................................................... 32 Figura 15. Cotiledones del embrin.................................................................................... 32 Figura 16. Estimacin de fenofases en rboles de sexo femenino ...................................... 33 Figura 17. Semilla premadura de P. glomeratus. ............................................................... 33 Figura 18. Estimacin de fenofases en rboles machos de julio 2004 a junio 2005 ........... 36 Figura 19. Androstrbilo en formacin. .............................................................................. 36 Figura 20. Androstrbilos de P. glomeratus desarrollados ................................................. 37 Figura 21. Relacin de productividad de semillas maduras en relacin a la cantidad de semillas premaduras...................................................................................................... 38 Figura 22. Comparacin de viabilidad de la semilla con distintos estados de maduracin. 39 Figura 23. Viabilidad de semillas sumergidas y flotantes .................................................. 40 Figura 24. Avispa parsita de la semilla de P. glomeratus. ................................................. 41

Figura 25. Perdida de viabilidad, contenido de humedad y peso en funcin a das de almacenamiento. ........................................................................................................... 41 Figura 26 Prueba de tetrazolio en embriones de P. glomeratus. ......................................... 43 Figura 27. Comparacin de porcentaje de germinacin acumulada entre los tratamientos pregerminativos aplicados. ........................................................................................... 45 Figura 28. Comportamiento de la germinacin semanal con tratamientos . ....................... 45

ANEXOS

Anexo 1. Ubicacin de Sailapata. ......................................................................................... 58 Anexo 2. Mapa de los bosques de neblina de la comunidad de Sailapata ............................ 60 Anexo 3. Recoleccin de semillas de Pino de monte ........................................................... 61 Anexo 4. Procesamiento y oreo de semillas. ........................................................................ 61 Anexo 5. Germinacin de las semillas de Pino de monte. ................................................... 62 Anexo 6. Usos tradicionales del Pino de Monte ................................................................... 63 Anexo 7. Alternativa de propagacin por estacas ................................................................ 64

Captulo I. Introduccin

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CAPITULO I. INTRODUCCIN

1.1 Introduccin Una manera de contrarrestar los procesos de deforestacin de los ecosistemas andinos de Bolivia y permitir su conservacin, es mediante el manejo comunitario de los bosques desde visiones y acciones campesinas. En este sentido, la comunidad de Sailapata y otras de la cuenca Qorimayu, en el municipio de Independencia, con apoyo de Probona (Programa de Bosques Nativos y Agroecosistemas Andinos) y Kurmi (Apoyo al Desarrollo Sostenible Interandino) han desempeado actividades que permiten la conservacin y proteccin de los bosques de neblina en sus territorios comunales. Entre una de las actividades que realizan las comunidades campesinas con este sistema de manejo; estn la propagacin y establecimiento de especies arbreas nativas valiosas para su manejo, aprovechamiento y conservacin; ejerciendo actividades silviculturales como: cosecha, siembra de semillas, produccin de plantas en vivero, plantaciones entre otras. Como se podr entender, para realizar stas actividades, es importante conocer aspectos relacionados con la propagacin de plantas y manejo de material reproductivo semilla. Este tema es poco conocido por las comunidades campesinas y por tcnicos del rea; ya que la investigacin en este sentido, tiene grandes vacos de informacin, especialmente sobre especies nativas que se habitan en los bosques de neblina de la ecoregin Yungas. En este contexto, la presente investigacin vio la necesidad de generar esta informacin para el Pino de monte (Podocarpus glomeratus); especie que se encuentra en dicha ecoregin de la comunidad de Sailapata. Se prioriz sta especie debido a que representa un recurso de uso tradicional en la comunidad, y por sus caractersticas tiene un potencial para actividades ambientales y comerciales. As tambin, las especies de Podocarpus en general, han sido poco estudiadas y se dispone de escasa informacin tcnica sobre ellos, peor an cuando se trata de fenologa, propagacin y semilla. Debido a esta situacin, se tomo la decisin de investigar temas que en el momento de realizar cualquier trabajo de propagacin son de indispensable conocimiento, stos son los siguientes:

Aspectos fenolgicos, poca de cosecha y produccin de semillas. Biologa de semillas como calidad, maduracin, tratamientos pregerminativos, morfologa, procesamiento, deterioro en el almacenamiento y germinacin de semillas en bosque, vivero y cmara de germinacin.

Universidad Mayor de San Simn/Escuela de Ciencias Forestales

Ayma R. Ariel Isaas. 2005

Captulo I. Introduccin

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1.2 Objetivos 1.2.1 Objetivo general

Estudiar la propagacin sexual de Pino de monte (Podocarpus glomeratus D. Don) en la comunidad de Sailapata del municipio Independencia - Cochabamba.

1.2.2 Objetivos especficos

Caracterizar morfolgicamente la semilla. Estimar los patrones fenolgicos, poca de cosecha y productividad de semillas de Pino de monte de la procedencia de Sailapata. Determinar atributos de la semilla en funcin al estado de maduracin, procesamiento, almacenamiento y aplicacin de tratamientos pregerminativos en laboratorio. Determinar la capacidad de germinacin en condiciones naturales de bosque de neblina y vivero con la aplicacin de tratamientos pregerminativos.

Estudio de propagacin sexual de Pino de monte (Podocarpus glomeratus D. Don) en la comunidad de Sailapata- Independencia

Captulo II. Marco terico

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CAPTULO II. MARCO TERICO2.1 Descripcin botnica de Pino de monte (Podocarpus glomeratus) 2.1.1 TaxonomaTabla 1 Clasificacin taxonmica de Pino de monte. Taxn Reino Divisin Nivel de organizacin Subdivisin Clase Subclase Orden Familia Gnero Especie Fuente: Modificado de Strasburger et al (1994) Nombre Eucariota. Spermatophyta. Gymnosperma. Coniferophyta. Pinopsidas (= Coniferopsidos). Pinidae (=Coniferae). Pinales. Podocarpaceae S. Endlicher. Podocarpus Podocarpus glomeratus D. Don2.

2.1.2 Caractersticas fisonmicas El tronco es ms de 30 metros de altura, su ramificacin es a partir de 10 a 15 metros de altura. El dimetro altura pecho (DAP) alcanza hasta ms de 80 centmetros (Villavicencio 2000), llegando a medir hasta 2.5 m. de dimetro en rboles adultos (Santuario Nacional de Ampay 2000) La copa de rboles adultos, es rala en hojas, esta cubierta de plantas epifitas como orqudeas y otros. Los rboles jvenes tienen una copa amplia y de forma oval (Villavicencio 2000) Las hojas son simples, verticiladas, de pice punzante; tienen el envs rodeado de una cera superficial de aspecto verde azul, sus yemas son foliares globosas, con escamas triangulares recorvadas hacia fuera (HERBARIO NACIONAL DE BOLIVIA 1992). En Podocarpus las semillas son solitarias, desnudas con arilo correoso (HERBARIO NACIONAL DE BOLIVIA 1992). Font (1979) indica que es drupcea (parecida a una drupa carnosa). La semilla esta acompaada de un pseudofruto (Gola et al. 1961). 2.1.3 Estructuras reproductivas que originan la semilla A diferencia de las angiospermas o plantas con flor; Niembro (1988) indica que las gimnospermas tienen semillas primitivas. No tienen una cpsula de proteccin derivada del ovario y estn desprovistas de partes florales (Weier et al. 1990)

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Identificacin botnica realizada por el Herbario Nacional Forestal Martn Crdenas. 2005. Cochabamba, BOL.




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Los rganos reproductivos de Podocarpus, segn el HERBARIO NACIONAL DE BOLIVIA (1992) y Gola et al. (1961) estn separados en estrbilos femeninos (= ginostrbilos) y masculinos (= androstrbilos), en diferentes rboles (= dioicos). Los androstrbilos segn Weier et al. (1990) en Podocarpaceae, se componen de escamas seminferas (= microsporofilas) donde se forman dos microsporangios donde se producen las microsporas (= granos de polen) las cuales mantienen el gametofito masculino (Strasburger et al. 1994). El grano polnico esta provisto de dos vesculas laterales las cuales ayudan a trasladarse hasta el ginostrbilo con la ayuda del viento (Gola et al. 1961). Los ginostrbilos segn Gola et al. (1961) en Podocarpaceae, tienen dos escamas soldadas: una escama tectriz (= brctea o carpelar) y otra escama seminfera (= epimacio o escama ovular) soldada al rudimento seminal (= macrosporangio). Segn Wettstein, citado por Font (1979), Strasburger et al. (1994) la escama seminfera origina una drupa en forma de cpula llamada epimacio que rodea en principio al rudimento seminal y luego a la semilla. Mientras la escama carpelar forma un pseudofruto carnoso (Gola et al 1961). Segn Font (1979) la escama seminfera nace en la escama tectriz. La escama seminfera (=macrosporofilo) en Podocarpus, segn Gola et al. (1961) cumple funcin de placenta: protege y nutre al rudimento seminal. Font (1979) indica que el rudimento seminal forma la semilla. Strasburger et al. (1994) menciona que cada rudimento seminal (= vulo) contiene: funculo, nucela, calaza, tegumentos, micrpilo y solo una megspora que forma un gametofito femenino y un protalo donde se forman arquegonios. Segn Gola et al. (1961) en Podocarpus solo un arquegonio llega a la madurez; el arquegonio contiene a la oosfera, que cuando es fecundada por el gametofito masculino, forma el embrin. El tegumento da una proteccin efectiva al rudimento seminal. 2.1.4 Distribucin geogrfica Las especies de Podocarpus se hallan distribuidos en los bosques montanos de los pases tropicales y subtropicales del hemisferio Austral, Nueva Zelanda, Australia y los Andes Sudamericanos (Strasburger et al 1994). Algunas especies de Podocarpus que se encuentran en Bolivia son: P. glomeratus, P. parlatorei, P. rusby, P. ingensis, P. oleifolius y P. magnifolius (HERBARIO NACIONAL DE BOLIVIA 2005). En el municipio de Independencia nuestra especie, se distribuye en los bosques de Sailapata, Sivingani, Pajchanti (Villavicencio 2001). El HERBARIO NACIONAL DE BOLIVIA (2005) 3 tambin ha identificado sta especie en la comunidad3

Informacin extractada de fichas de muestras disecadas de P. glomeratus del Herbario Nacional de Bolivia. La Paz. BOL.



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de Pichagani en el mismo municipio y tambin en la provincia de Carrasco en la zona de Sehuencas. 2.2 Consideraciones de estimacin de floracin y fructificacin en especies forestales 2.2.1 Caractersticas de produccin de semillas en especies de PodocarpusTabla 2 Observaciones fenolgicas de la produccin de semillas de Podocarpus. Autor/ao Podocarpus. Observaciones Veillon, citado por Podocarpus sp. No fructifica a intervalos fijos y la cantidad de semilla Antezana (1988) producida vara de un ao al otro. (Kelly et al., citado por Rosas et al. 2004). CATIE (1996) PROECEN (2002) P. nubgena tiene polinizacin anemfila (por viento) a consecuencia presentan alta variacin de produccin de semillas Fructifica cada tres aos. fructifica eventualmente durante todo el ao sin presentar un perodo de mayor produccin de semillas fructifica casi escasamente todo el ao en un 25 %

Podocarpus P. guatemalensis

CESA, citado por FOSEFOR (2000) GTZ/Proyecto de Reforestacin en la Selva Central de Per (1983) PLAFOR, citado por FOSEFOR (2000)

P. oleifolius

P. rospigliosii

tiene alta produccin de semillas en un par de meses

P. parlatorei

tiene una fructificacin escasa durante un periodo de dos meses de febrero a marzo Se puede cosechar semillas cuando fructifica de julio a agosto, madura lentamente.

Pea y Morales, P. parlatorei citado por FOSEFOR (2000) Fuente: Recopilacin propia.

2.2.2 Fenologa y caractersticas de la irregularidad en la produccin de semillas Los estudios fenolgicos permiten conocer patrones de floracin, fructificacin y dispersin de semillas de especies de inters (BOLFOR 2000), son tiles para planificar una cosecha (GTZ/ Proyecto de reforestacin en la Selva Central de Per 1983). Las semillas recolectadas en periodos de fructificacin abundante tienen alta capacidad germinativa y buenas caractersticas para almacenarse; as tambin, el dao de las semillas por ataque de insectos es menor (Turnbull, citado por FAO 1991). La produccin de semillas en especies forestales generalmente es irregular, existe una produccin masiva de frutos cada cierto nmero de aos, seguida de una produccin escasa en aos intermedios considerados de mala produccin (Harold y Hocker 1984, FAO 1991,




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Vzquez et al. 2003). Este fenmeno es caracterstico en Pinus (Flores, citado por Niembro 1986). Pinus segn FAO (1991) y Niembro (1986) producen una cosecha abundante de semillas cada dos a tres aos. El periodo de fructificacin cambia entre diferentes localidades y dentro de una misma regin (Vzquez et al. 2003). Incluso sta variacin puede llegar a que rboles del mismo rodal se encuentren en distintos ciclos fenolgicos (Krugman et al, citado por FAO 1991). La variacin de produccin de semillas depende de la sincronizacin en el florecimiento (Smith et al. y Sork, citado por Rosas et al. 2004); de la temperatura y precipitacin (Rodrguez 1991), de la poca favorable para la germinacin y establecimiento de plntulas (Universidad Austral de Chile 1995). La irregularidad de produccin de semillas en Pinus tambin puede ser causada por la ubicacin de los rboles; aquellos que se ubican en lugares soleados por lo general producen flores, sin embargo, los rboles suprimidos al interior del bosque pueden pasar toda su vida sin producir flores (Baker, citado por Niembro 1986) 2.3 Aspectos de la maduracin de semillas forestales con nfasis en conferas Las semillas maduras tienen ms energa germinativa y longevidad en almacenamiento (FAO 1991). Para determinar el punto de maduracin, es preciso conocer el periodo de floracin de la planta as como asociar caractersticas anatmicas de la semilla (Fernndez y Johnston 2000). La maduracin depende de factores internos de la planta (Rodrguez 1991). La Universidad Central de Santiago de Chile (2000) indica que las especies de la clase Pinopsidas a la cual pertenecen Podocarpus y Pinus tienen una maduracin lenta de hasta dos aos. CATIE (1996) indica que la maduracin de la semilla de Podocarpus tiene un ciclo de tres aos, su fecundacin ocurre en la segunda estacin despus de su polinizacin; y el fin de maduracin de la semilla ocurre en una tercera estacin. Esta caracterstica es peculiar tambin en Pinus segn FAO (1991) pasan dos aos entre polinizacin y maduracin de semilla. CATIE (1996) indica que es difcil diferenciar la maduracin de semillas en gimnospermas, ya que el vulo al momento de la fertilizacin es generalmente de tamao de la semilla madura. Adems la mayora de conferas tienen vulos y conos que no son fertilizados, estos se desarrollan y forman semillas vacas aparentemente normales, pero no tienen embriones. UMSS/FOSEFOR/BASFOR (2002) indican que para diferenciar la maduracin de la semilla, se utilizan ndices que ayudan a determinar el momento preciso de una cosecha, evaluando visualmente cambios de color del fruto, secamiento del cuerpo de la planta y llenado de semilla con pruebas de corte.



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Segn FAO (1991) semillas inmaduras tienen un endospermo de aspecto lechoso, mientras que una semilla madura tiene el endospermo y embrin blanco y firme. La semilla en Podocarpus desarrolla una estructura carnosa cuando madura que cambia de color verde ha morado 4. FAO (1991) menciona que la posibilidad de recolectar frutos antes de la maduracin y luego permitir su post-maduracin en lugares frescos y ventilados. Esta tcnica puede ser aplicable en Podocarpus puesto que es difcil encontrar semillas maduras 5. La semilla de P. glomeratus se debe recolectar antes de su plena maduracin, ya que si se espera se puede perder la semilla por dispersin natural, insectos y otros 6. No obstante, segn UMSS/FOSEFOR/BASFOR (2002) con esta tcnica la semilla se marchita perdiendo el 15% de peso; sin embargo se puede reducir la cantidad de semillas atacadas por podredumbres. 2.4 Fundamentos para el manejo de semillas recalcitrantes 2.4.1 Precedentes sobre caractersticas recalcitrantes de PodocarpusTabla 3. Observaciones de caractersticas recalcitrantes de semilla de Podocarpus. Autor/ao Especie Observaciones FAO (1968) P. gracilior y Pierde rpido su viabilidad no debe ser almacenada P. milanjianus por mucho tiempo. Magn y Tulstrup, citado por Antezana (1988) Vzquez (2003) et al Podocarpus sp. Pierde rpido su viabilidad en condiciones de almacenamiento.

P. coriaceus

Semillas recalcitrantes y puede estar almacenada durante 90 das. Pierde su viabilidad en 30 por ciento al cabo de tres meses de almacenamiento en condiciones naturales.

GTZ/Proyecto de Reforestacin en la Selva Central de Per (1983)

P. rospigliosii

EMBRAPA (1994) P. lambertii Fuente: Recopilacin propia

Pierde completamente su viabilidad en 60 das

2.4.2 Caractersticas biolgicas de las semillas recalcitrantes Segn Vzquez et al. (2003) en bosques de trpico hmedo algunas de sus especies tienen dificultades para mantener su viabilidad en almacenamiento, estas semillas se denominan recalcitrantes.4

Morales, M. (2004) Maduracin de la semilla de Podocarpus. (Consulta). La Paz, BOL. INFOBOL (Inventario Forestal Nacional) 5 Tcnicos recolectores de semilla de BASFOR (Centro de Semillas Forestales), 2004. Estado de maduracin. (consulta) Cochabamba, BOL. UMSS (Universidad Mayor de San Simn) 6 Sanzetenea, E. (2004) Maduracin de la semilla de Podocarpus. (consulta) Cochabamba, BOL. UMSS (Universidad Mayor de San Simn)/ ESFOR (Escuela de Ciencias Forestales)




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Estas semillas suelen morir si se evita su respiracin (FAO 1991) y tienen la caracterstica de sobrevivir algunos das o meses (Barcel et al 1987). INE (2003) menciona que stas semillas son liberadas de la planta madre con un contenido de humedad (CH) entre el 40 y 60 por ciento de agua y al tratar de almacenarlas se presentan daos en la estructura celular provocados por desecacin cuando su CH se reduce por debajo del 20 por ciento; daos por congelacin provocados por la formacin de cristales cuando se almacenan con altos contenidos de humedad; problemas de falta de oxgeno asociados con el almacenamiento hermtico en una condicin hmeda, contaminacin por hongos, bacterias y otros. Las semillas recalcitrantes de Hevea brasiliensis y Theobroma cacao, cuando disminuyen sus contenidos de humedad inferiores al 30% disminuyen notablemente su poder germinativo (King y Roberts, citado por Fernndez y Johnston 2000). El deterioro de la semilla empieza cuando sta alcanza la maduracin fisiolgica y continua hasta perder su capacidad de germinar. La duracin del proceso de deterioro es determinada por la herencia gentica, su contenido de humedad y la temperatura (Delouche 2002). 2.4.3 Limpieza, extraccin, beneficio y oreo en relacin a semillas recalcitrantes. FAO (1991) indica que en la limpieza se sacan basuritas y se quitan apndices carnosos. Segn Stein et al., citado por FAO (1991) Podocarpus sp no requiere que se quite la cubierta de su semilla en la extraccin. El beneficio segn UMSS/FOSEFOR/BASFOR (2002) elimina impurezas y homogeniza lotes de semilla con relacin a su tamao, peso y forma. Segn FAO (1991) el mtodo de flotacin por absorcin de agua, ayuda a alcanzar este propsito, separando semillas viables de inertes, vacas y estriles; se debe colocar las semillas en un recipiente con agua, transcurrido un cierto tiempo las semillas viables absorben agua y se hunden antes que las no viables. Despus de la limpieza las semillas deben orear, este paso no se puede evadir puesto que en la prctica las semillas no se siembran inmediatamente despus de su cosecha (FAO 1991). Stein et al., citado por FAO (1991) indica que la semilla de Podocarpus debe orear bajo cubierta siendo removidas con frecuencia. 2.4.4 Recomendaciones para el almacenamiento de semillas recalcitrantes. El CATIE (1997) recomienda sembrar semillas recalcitrantes, lo antes posible despus de cosecharla. Se pueden almacenar durante el oreo en un lugar protegido bajo techo, ventilado, evitando el secado rpido y la exposicin directa al sol; en bolsas de polietileno, ya que mantiene la



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humedad de la semilla, impiden el intercambio de humedad y permiten el intercambio de oxgeno y dixido de carbono con el exterior (FAO 1991) Se debe encontrar el contenido de humedad ms bajo tolerado y el periodo de viabilidad (CATIE 1997); ya que almacenar con un contenido de humedad mayor puede provocar daos a la semilla (FAO 1991). 2.5 Antecedentes de algunos atributos sobre la calidad de la semilla de PodocarpusTabla 4 Atributos sobre la calidad de la semilla de algunos Podocarpus. Autor/ao Especie Peso 1000 Germinacin semillas (%) (gramos) CSF, citado por CIT (2002) P. salignus 56.65 56 (Vzquez et al 2003) Revista de Flora y Vegetacin. (2000) (GTZ 1983) Veillon , citado por Antezana (1988) Lamprecht, citado por PROBONA (1997) (GTZ 1983) P. coriaceus P. nubigena P. montanus P. rospigliosii P. rospigliosii P. rospigliosii * * 90 * * 2200 12 0 40 50 70 60 Observaciones

* * * siembra inmediata * Con remojo 14 a 21 das siembra inmediata infestada por larvas atacada por larvas , escarificacin cida atacada por larvas

Santuario Nacional de Ampay (2000) Antezana (1988)

P. glomeratus

*

5

P. glomeratus

44.7

1

(Borja y Lasso 1990) Fuente: Recopilacin propia.

P. sprucei

*

*

2.6 Estructuras de la semilla considerando algunas identificadas en Podocarpus El hilo segn Weier et al (1990) es una cicatriz que aparece donde la semilla se separ del funculo; o en otros casos de la placenta (Font 1979). Rodrguez (2000) indica que es permeable al agua y presenta una vlvula que es una fisura que se encuentra a lo largo del surco del hilo que tiene la funcin de abrirse cuando la semilla esta rodeada de aire seco y de cerrarse cuando el aire exterior es hmedo.




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El micrpilo segn Esau, citado por Niembro (1988) es una perforacin que comunica a la semilla con el medio ambiente. Es una pequea abertura en la cubierta de la semilla a un borde del hilo (Weier et al 1990). El funculo es un filamento o pedicelo que une a la semilla a la placenta, por el cual pasan los alimentos a travs de un hacecillo conductor (Rodrguez 2000). El rafe es un borde al lado del hilo y opuesto al micrpilo; tiene un haz conductor que prosigue del funculo (Weier et al 1990). El arilo segn Pilj y Fahn, Werkor, citados por Niembro (1988) la presencia del arilo en la semilla indica un estado primitivo relacionado con la dispersin por aves y mamferos. Segn Rodrguez (2000) es carnosa y se forma en la superficie del rudimento seminal, localizado en muy diversos puntos del tegumento externo y muy variable en su desarrollo. La cubierta seminal cubre a la semilla y se forma de tegumentos del vulo, generalmente se forman en recubrimientos duros y crneos de la semilla madura. (Weier et al. 1990). El epimacio es una excrecencia ms o menos carnosa, de mayor o menor desarrollo y de origen axial, en forma de rodete o cpula (= bveda), inmediata al rudimento seminal y luego a la semilla (Wettstein, citado por Font 1979). El endospermo no existe en gimnospermas, tienen un gametofito femenino formado de un tejido haploide que cumple la misma funcin que el endospermo en las angiospermas (CATIE 1996 y FAO 1991). Segn Niembro (1988) se clasifica por: (i) cantidad de endospermo en endosprmicas y no endosprmicas; (ii) textura en uniforme o ruminadas y (iii) por posicin en externa aquella que es abundante y rodea al embrin; lateral aquella que est a lado del embrin y basal la que rodea a la radcula. Por su consistencia puede ser carnoso, vidrioso, mucilaginoso, farinceo o corneo. El embrin segn Niembro (1988) es una planta en miniatura, que tiene un hipoctilo que se encuentra por debajo del punto de insercin de los cotiledones y en su base presenta la radcula; por encima del punto de insercin de los cotiledones se encuentra un tejido meristemtico que origina al tallo, el cual si tiene hojas embrionarias (plmula), si carece de las mismas (epictilo). Segn Martin, citado por Niembro (1988) el embrin se puede clasificar por: (i) tamao segn en relacin al endospermo: es pequeo < , cuarto > , medio > , dominante > y total 4/4. (ii) por posicin en basales aquellos que son pequeos conocidos como rudimentarios (estos son difciles de diferenciar con la caracterizacin morfolgica ya que estn sujetos a procesos fisiolgicos complejos 7).7

Herbas, J. 2005. Embriones rudimentarios. (entrevista) Cochabamba, BOL. UMSS (Universidad Mayor de San Simn) Facultad de Ciencias Agrcolas y Pecuarias Martn Crdenas.



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Los embriones son perifricos cuando las que son grandes y tienen contacto con la cubierta seminal. Axiales cuando los embriones se encuentran en el eje central de la semilla; stas a la vez se subdividen en: lineales ms largos que anchos, cotiledones no extendidos, miniaturas presentes en semillas muy pequeas y foliales con cotiledones extendidos. Los cotiledones son planos y delgados en semillas endosprmicas (Eames, Daniels y Holman, Robbins, citado por Niembro (1988). 2.7 Impedimentos de la germinacin y tratamientos pregerminativos. 2.7.1. Clasificacin de tipos de latencia. Patio et al. y FAO, citados por Universidad de Chile/CESAF (2000) indican que existen dos tipos de impedimentos para la germinacin: (i) la quiescencia cuando el medio no es favorable a causa de una escasa disponibilidad de humedad, aireacin o temperatura inadecuada; y (ii) latencia o letargo cuando las condiciones del medio son adecuadas, pero el organismo tiene una combinacin fisiolgica tal que impide su crecimiento. Se deben a factores intrnsecas de las semillas, puede llamarse tambin dormicin innata (Barcel et al. 1987) Los distintos tipos de latencia pueden agruparse en tres grupos: latencia exgena, endgena y combinada (Willan, Hartmann y Kester, citados por Universidad de Chile/CESAF 2000, Barcel 1987, FAO 1991). 2.7.2 Latencia por la cubierta de semillas y tratamientos La latencia exgena o por la cubierta de las semillas se subdivide en: latencia fsica, latencia mecnica y latencia qumica (FAO 1991 y Barcel et al 1987). La latencia fsica se presenta en semillas con testa o secciones endurecidas de otras cubiertas que son impermeables al agua; la latencia mecnica se caracteriza por cubiertas demasiadas duras para permitir que el embrin se expanda durante la germinacin y la latencia qumica corresponde a la produccin y acumulacin de sustancias qumicas en cubiertas de las semillas que inhiben la germinacin (FAO 1991). La latencia qumica es caracterstica de regiones tropicales y subtropicales con estaciones secas; para superar este impedimento es necesaria la accin de la precipitacin para que se lixivien los inhibidores (Barcel et al. 1987). Para romper la latencia de la cubierta FAO (1991) recomienda aplicar tratamientos pregerminativos que buscan lixiviar sustancias inhibidoras, ablandar, perforar, rasgar la cubierta de la semilla sin daar el endospermo o el embrin. Segn Hartmann y Kester (1989) con la escarificacin mecnica se puede raspar con lijas, romper con martillo o cortar las cubiertas de las semillas muy duras o impermeables, as




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tambin, con el remojo en agua o lixiviacin se puede reforzar la escarificacin mecnica y adems puede remover inhibidores de la cubierta (FAO 1991). Se han aplicado algunos de estos tratamientos para el caso de algunas semillas de conferas y Podocarpus: Lamprecht, citado por PROBONA (1997) recomienda remojar por 14 a 21 das en agua fresca las semillas de Podocarpus rospigliosii. La semilla de P. glomeratus se remoja 10 das (Villavicencio 2000). En Pinus el remojo en agua por ms de 15 das es adecuado8 (FAO 1991). Morales (2004) recomienda escarificar la semilla de Podocarpus o remojarla durante diferentes periodos 9. La latencia por la cubierta segn FAO (1991) tambin puede ser rota de una manera biolgica, cuando la semilla pasa por el tracto digestivo de vertebrados, as tambin por la flora microbiana del suelo y la influencia trmica (Barcel et al. 1987). 2.7.3 Latencia del embrin y tratamientos La latencia endgena o latencia del embrin segn Barcel et al. (1987) se distinguen tres casos: latencia de embriones subdesarrollados o morfolgica, fisiolgica y morfofisiolgica, los cuales se describen a continuacin:

Latencia de embriones subdesarrollados

Segn Hartmann y Kester, Willan citados por Universidad de Chile/CESAF (2000) la germinacin no tiene lugar hasta que el embrin ha completado su desarrollo. Estos embriones estn embebidos en endospermo como Magnoliaceae y Palmae (Hartmann y Kester 1980). Algunos embriones maduran en almacenamiento en seco y otras requieren humedad y temperaturas bajas (Rodrguez 1991). El desarrollo del embrin de Gingko biloba ocurre en el almacenamiento (Hatano y Kano, citado por FAO 1991). FAO (1991) indica que para romper la latencia morfolgica del embrin, se suele aplicar un tratamiento en calor hmedo, se remoja la semilla y se estratifica en arena o turba para almacenarla a temperatura templada entre 20 y 25 C volviendo a humedecerla si se seca, este tratamiento oscila de dos hasta 16 semanas.

Latencia fisiolgica del embrin

Se presenta en especies que dispersan semillas antes de invierno, el embrin esta desarrollado en el momento de la dispersin, pero son incapaces de germinar si no se producen determinados cambios fisiolgicos an no muy conocidos (FAO 1991).Simn, V (2004) Tratamientos pregerminativos en Pinus. Cochabamba, BOL. BASFOR (Centro de Semillas forestales. 9 Morales, M. (2004) Tratamientos pregerminativos (Consulta). La Paz, BOL. INFOBOL (Inventario Forestal Nacional)8



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El (duraznero, manzano y peral) presentan un embrin bien formado pero sus clulas no han sufrido una diferenciacin necesaria, a menudo se debe a una carencia de hormonas (Garcidueas 1993). Las semillas pueden salir de este tipo de latencia mediante almacenamiento en seco, tratamiento en fro o luminoso (Barcel et al. 1987). El tratamiento en fro permite la sntesis de giberelinas que estimulen el desarrollo del embrin (Pardos 1985). Para romper la latencia fisiolgica del embrin FAO (1991) recomienda estratificar en condiciones naturales de invierno dejndolas en capas de sustrato de arena o turba hmeda a temperatura fresca. La semilla requiere de cero a cinco grados centgrados (Barcel et al. 1987). Bonner et al, citado por FAO (1991) indica que el nivel elevado de humedad y temperatura baja pone en marcha cambios bioqumicos. El letargo fisiolgico segn Pardos (1985) es difcil de superar, generalmente esta ligado a la latencia de cubierta, se deben aplicar estratificacin en fro menores a 10 grados centgrados, accin de luz, hormonas y almacenamiento en seco.

Latencia morfofisiolgica del embrin

Es la combinacin de la inmadurez del embrin con algn problema fisiolgico Barcel et al. (1987). Este tipo de latencia es difcil de romper, tiene que ser provocado por cambios fisiolgicos como condiciones de iluminacin, administracin de sustancias de crecimiento y a ciertas temperaturas. Requieren una estratificacin caliente primero y luego una fra o inversa (FAO 1991). Algunas semillas de este tipo tienen necesidades de luz para germinar, tambin influye la alternancia de luz y oscuridad (fotoperiodo), esta latencia se complica ms cuando la luz se interrelaciona con la temperatura. Tambin pueden existir inhibidores en el embrin como la cumarina, cido absrbico, el amoniaco y otros; para estimular la germinacin se puede utilizar KNO, tiourena (S), etileno (C2 H4) la giberelina y cinetina (Rodrguez 1991). 2.7.4 Latencia combinada Combina una la latencia endgena del embrin y una exgena de la cubierta, para romper esta latencia se tienen que aplicar tratamientos ms complejos que resultan de la combinacin de los mencionados anteriormente (Barcel et al. 1987). 2.8 Germinacin en diferentes condiciones de lugar (bosque, vivero y laboratorio). 2.8.1 Experiencias de siembras directas en bosques tropicales. Los rboles pueden sembrarse directamente en los sitios definitivos en la reforestacin (Hartmann y Kester 1980). La siembra directa pude tener prdidas a causa de aves, ganado




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y competencia de vegetacin; es recomendable enterrar las semillas en poca de lluvia (PROFOR 1994). Jimnez (1999) indica que Podocarpus guatemalensis tiene una buena germinacin dentro el bosque. As tambin, FAO (1955) indica que en Japn el Podocarpus nagi es utilizado para la siembra directa. En Bolivia PROFOR (1998) realiz una siembra directa en poca de lluvia con semillas de Podocarpus sp, en zonas hmedas de Corani pampa encontrando 21 % de germinacin en 15 semanas sin aplicacin de tratamientos pregerminativos. Cuando no existe regeneracin natural la siembra directa en bosque al voleo tiene la ventaja de reducir gastos de produccin en viveros, se debe contar con condiciones apropiadas de micro-sitio para la germinacin (BOLFOR 2001b). 2.8.2 Condiciones de laboratorio y vivero para la germinacin. Segn Bonner (1993) las condiciones ambientales de laboratorio son ideales y los resultados de germinacin reflejan los valores ms altos. La cmara de germinacin simula el da con una duracin de ocho horas luz con una temperatura de 28 C a 32C y la noche a 16 horas con temperaturas de 18C a 22C (Prado. 1998). Los resultados obtenidos en laboratorio rara vez son igualados por los de campo, se sugiere repetir los ensayos en vivero (INE. 2000). En vivero la germinacin es afectada en su velocidad y no al nmero total de semillas germinadas; en Acacias la germinacin baja 70%, en Cedrela 15% debido a causas culturales, climticas y edafolgicas (FAO. 1991). En Zambia se aplica un factor de reduccin de 20% para cubrir la diferencia que existe en la germinacin de laboratorio y vivero (Allan y Endean, citado por FAO 1991). Entre las recomendaciones principales para realizar la siembra en vivero segn INE (2000) son: sembrar en una cama de suelo preparado, con sustrato de suelo de bosque mezclado con arena, tierra del lugar y otros. La almaciguera antes de iniciar la siembra se nivela y humedece; para proteger a las plntulas contra los rayos directos del sol, heladas, lluvia y los pjaros, se recomienda construir una sombra que cubra el almcigo. La siembra se puede realizar en surcos o al voleo a una profundidad de dos a tres veces su tamao.


Captulo III. Materiales y metodologa

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CAPTULO III. MATERIALES Y METODOLOGIA3.1 Descripcin de Sailapata La investigacin de campo y la procedencia del material reproductivo sexual, fue de la comunidad de Sailapata, sta se encuentra al noroeste del municipio de Independencia de la provincia de Ayopaya Cochabamba (anexo 1). 3.1.1 Vegetacin Esta comunidad segn la clasificacin de HuecK, citado PROBONA (2002a) se encuentra en las formaciones montaosas hmedas de la vertiente Oriental, las cuales denomino Selva de Yungas. De acuerdo a un estudio realizado por Snchez, citado por Kurmi (2005) sta zona se clasifico en tres provincias climticas o zonas de vida de acuerdo a pisos altitudinales: Pastizales (Fu Tierras fras hmedas), Bosque de neblina (Tu tierras templadas Subhmedas) y bosque seco o xeroftico (Ts tierras templadas clidas seco). P. glomeratus segn esta clasificacin habita en la zona de bosque de neblina. En Sailapata el bosque de neblina segn el IGM (1991) se encuentra a una altura entre 2800 - 3500 msnm. Este tipo de bosque generalmente tiene una vegetacin de especies latifoliadas cubiertas de epifitas, conformada por especies arbreas nativas como Podocarpus glomeratus, Cedrela lilloi, Weinmannia micropylla, Ocotea sp, Blepharocalix sp y otras (Villavicencio 2001) 3.1.2 Fisiografa. El bosque de neblina, presenta elevaciones con moderados desniveles y paisajes poco accidentados; geolgicamente pertenecen parcialmente a las formaciones Capinota, Cuc Punata. La topografa de montaa es fuertemente plegada, formando quebradas con pendientes que varan desde empinadas a muy empinadas, presentando un relieve muy escarpado y discontinuo, con diferencias altitudinales importantes en distintas cotas. (Snchez, citado por Kurmi 2005). La fluctuacin de pendientes van desde 20 a 70%, estas fuertes diferencias de altura promueven la erosin hdrica de suelos; y en laderas con pendientes excesivamente escarpadas promueven deslizamientos y derrumbes (Villavicencio 2001). 3.1.3 Clima El bosque de neblina, se caracteriza porque est hmedo 11 a 12 meses por ao, con presencia de neblina por la humedad procedente de la cuenca del Amazonas (Villavicencio 2001).




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Las precipitaciones anuales y mensuales en Independencia, de acuerdo al Servicio Nacional de Meteorologa e Hidrologa Regional Cochabamba (2005) en el transcurso del ao 2000 al 2005 tienen la media de 856 mm/ao (Tabla 5).Tabla 5. Precipitacin de Independencia (2000 2005) expresada en milmetrosAo/ meses 2000 2001 2002 2003 2004 2005 Media Ene. 238 250 147 201 187 183 201 Feb 125 205 233 155 163 204 181 Mar 153 104 134 145 105 * 128 Abr 4 47,8 57,3 15,4 42,4 * 33,4 May 7,4 38,6 17,3 10,8 5,2 * 15,9 Jun. 35,3 7,2 4,2 0 0 * 9,34 Jul 1,3 18,3 65,6 14,4 33,6 * 26,6 Ago. 9,1 47,2 4,2 33,3 25,9 * 23,9 Sept. 31,9 15,3 15,1 19,7 28,2 * 22 Oct. 88 24,5 112 27,3 20,7 * 54,5 Nov. 24,9 46,6 79,3 77,8 45,7 * 54,9 Dic. 115 122 57,9 193 40,1 * 106

A esta precipitacin la niebla puede adicionar hasta 1500 mm/ao de precipitacin a consecuencia de la condensacin en hojas aciculares en conferas; y la niebla suele tambin reducir horas luz (Byers, citado por Universidad Austral de Chile. 1981). Siendo este tipo de precipitacin uno de los factores que permite la existencia de estos bosques, ya que el bosque de Podocarpus en Pajchanti Independencia, tiene ocho meses de sequa, pero mantiene su humedad gracias a los aportes de la niebla (Shulte 1986). La humedad relativa es alta, registrndose a menudo 100%, a pesar de que los valores medios no son mayores a 80% (Villavicencio 2001). Sclulte (1986) indica que el suelo del bosque de Podocarpus, es rico en humus hasta 20% con una profundidad de hasta 60 cm, con buen suministro de nitrgeno y fsforo. La distribucin de partculas del suelo oscila de 3.5% de arcilla, 50 % 60% de limo y 5% a 15% de arena. Adems existe 220 mm de agua til en un metro de profundidad lo que significa alta capacidad de almacenamiento de agua para plantas. En cuanto a su temperatura, domina un clima ms fro y en partes hmedo, que oscila entre 2C y 20C (febrero/marzo), vale la pena remarcar que durante el verano las temperaturas bajan hasta 0C, y que en invierno se producen frecuentemente las heladas, caracterizado adems de los ventarrones fros y granizadas (Villavicencio 2001). 3.2 Mtodo para caracterizar la morfolgica de la semilla Para este propsito se cosecharon semillas de 2 rboles, luego con un estereoscopio, bistur, cajas petri, se observaron y analizaron todas las estructuras de la semilla como ser: cubierta, embrin, gametofito, rafe, hilo, micrpilo y otras estructuras anexas a la semilla. De todas las estructuras se tomaron fotografas con un flexcam. La metodologa utilizada para esta investigacin, fue en base a las caracterizaciones realizadas por Niembro (1988) en Semillas de rboles y arbustos: ontognia y estructura.



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3.3 Patrones fenolgicos y produccin de semillas maduras 3.3.1 Evaluacin de los patrones fenolgicos Para estimar la fenologia de Pino de monte; se observaron cambios de los patrones de produccin de semillas, de foliacin, maduracin del vulo, formacin de estrbilos tanto de rboles machos y hembras, durante un tiempo de nueve meses (agosto 2004 - abril 2005). Las evaluaciones se realizaron en el bosque bajo de Bajuchuru Sailapata, de acuerdo a los siguientes criterios e indicadores:Tabla 6. Criterios e indicadores para evaluar el estado fenolgico de Pino de monte. Sexo Fenofase Indicador Masculino Foliacin Crecimiento de brotes vegetativos tiernos. Formacin de Botones de inflorescencia pequeos. androstrbilos Dispersin de polen Conos completamente formados con abundante polen. Femenino Foliacin Crecimiento de brotes vegetativos tiernos. Formacin de ginostrbilos Abundantes conos pequeos verdes tiernos. Maduracin del vulo Abundante semilla con pseudofruto verde Dispersin semilla madura Semilla con pseudofruto dulce en el rbol y suelo. Fuente: Elaboracin propia

Se observaron de 40 a 50 rboles entre machos y hembras en cada evaluacin, realizadas en los meses de agosto, octubre, diciembre, febrero y abril. Los meses intermedios se estimaron por observaciones propias y conocimiento local de comunarios de Sailapata. Para valorar las diferentes fenofases, se utiliz la metodologa propuesta por Newstron y Frankie, citado por BOLFOR (2000); en cada evaluacin se sac el porcentaje de ocurrencia de cada fenofase con las siguientes categoras de calificacin: 1= Muy escaso (0 a 25%); 2= Regular (26 a 50%); 3 = Bueno (51 a 75%) y 4 = Abundante (76 a 100%). Se compararon las fenofases con la precipitacin mensual de la zona de Independencia10 a partir de los meses de julio (2004) a febrero (2005); mientras los meses de marzo a junio 2005 (datos no disponibles) se estimaron mediante promedios de precipitacin de los ltimos cinco aos registrados. 3.3.2 Estimacin de porcentaje de semillas maduras por rbol. Al mismo tiempo de la evaluacin fenolgica, el mes de Diciembre, con gran dificultad y con ayuda de comunarios, se identificaron en la zona de Bajuchuru Sailapata, los nicos y mejores doce rboles, que contaban con semillas maduras y eran accesibles a ser evaluados11.10

Datos proporcionados por el Servicio Nacional de Meteorologa e Hidrologa Regional Cochabamba (2005). 11 Pese a la exhaustiva bsqueda, no se encontraron ms rboles con semilla madura. Por lo cual, no se utilizaron criterios de seleccin de rboles respecto a forma, ubicacin, tamao, edad y otros.




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El resto de los rboles no tenan semillas maduras. La maduracin se distingui mediante criterios indicadores (Tabla 7).Tabla 7 Criterios para evaluar el estado de maduracin de la semilla de Pino de monte en la cosecha Estado de maduracin Indicadores supuestos. Semilla madura - Epimacio verde, acompaado de un pseudofruto blando cuando se presiona con los dedos, jugosa y dulce de color verde claro similar a la uva o en cambio rojo o morado. Semilla inmadura maduracin) (vulo en - Epimacio verde con pseudofruto de color verde oscuro y duro cuando se presiona con los dedos.

Fuente: Elaboracin propia

De cada uno de estos rboles, se calcul el porcentaje de produccin de semillas, mediante un mtodo recomendado por Alemn (2005) 12, que consiste en la cuantificacin del nmero de semillas maduras y premaduras en una rama cualquiera, recolectada al azar de la copa del rbol. Entonces se procedi a tomar 10 ramas como muestra por rbol semillero13. Luego de cada rama se contaron las semillas maduras y premaduras existentes; posteriormente se utilizaron las siguientes formulas: Pr = (N m / N i)*100

Pr = Porcentaje de productividad de semillas maduras por rama. N m = Nro de semillas maduras por rama N i = Nro de semillas premaduras por rama.

Pa = Pr 1 + Pr 2 + Pr n / nPa = Porcentaje de semillas maduras por rbol Pr = Porcentaje de semillas maduras por rama n = nmero de ramas evaluadas por rbol

Luego para estimar la cantidad de semillas maduras producidas por rbol, antes se estim el nmero de semillas existentes en la copa de los rboles por un mtodo recomendado por Ojeda (2004) 14 cuando las semillas son pequeas y abundantes, que consiste en estimar ste12

Alemn, F. (2005). Productividad de semillas. (consulta personal) Cochabamba, BOL. BASFOR (Centro de Semillas Forestales) 13 Las ramas miden de 50 a 80 cm de largo por 50 de ancho; con 50 a 150 semillas entre verdes y maduras aproximadamente. 14 Ojeda, M (2004). Productividad de semillas. Cochabamba, BOL. ESFOR (Escuela de Ciencias Forestales)



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dato a simple observacin y relacionarlo con nmero de ramas por rbol y nmero de semillas por rama. Este valor se multiplic por el (Pa) de cada rbol como se muestra en la siguiente frmula: Nsa = 20000*(Pa/100)Nsa = Nmero de semillas maduras por rbol. Estimacin de nmero de semillas totales existentes por rbol = 20000 Pa = Porcentaje de produccin de semillas por rbol.

3.4 Procedimientos aplicados para la determinacin de atributos de la semilla en laboratorio 15 3.4.1 Prueba de germinacin con diferentes estados de maduracin Se cosecharon 450 semillas maduras y 500 pre-maduras de 12 rboles semilleros del bosque bajo de Bajuchuru Sailapata (anexo 1), bajo criterios visuales de maduracin (tabla 7). Las semillas premaduras orearon 14 das; y las maduras 7 das, ambos tratamientos orearon bajo sombra en condiciones naturales de ambiente recomendacin de Stein et al., citado por FAO (1991) para el caso de semillas de Podocarpus. Despus del oreo se seleccionaron las mejores 400 semillas maduras y 400 premaduras, descartando para el ensayo por sus caractersticas externas: las semillas pequeas, huecas, cafs y secas. Los dos estados de maduracin representan los tratamientos, cada una de ellas con cuatro repeticiones de 100 semillas. Estas semillas se colocaron a prueba de germinacin siguiendo metodologa recomendada por ISTA citadas por UMSS/FOSEFOR/BASFOR (2002) en condiciones ptimas de cmara de germinacin. Las semillas fueron sembradas a un centmetro de profundidad, en arena hmeda esterilizada a 130C, contenidas en recipientes plsticos transparentes. Estuvieron sometidas a ocho horas luz, a una temperatura de 28 C a 32C y a 16 horas de oscuridad con temperaturas de 18C a 22C. Para esta prueba slo se midi el porcentaje o capacidad de germinacin. 3.4.2 Viabilidad en diferentes estados de maduracin mediante prueba de corte 16 Para estimar la viabilidad 17, se realiz la prueba de corte a semillas con distintos estados de maduracin, para distinguir stos se utilizaron criterios visuales de maduracin (tabla 7).15

Los ensayos de calidad de la semilla, fueron realizados en el laboratorio y cmara de germinacin de BASFOR (Centro de Semillas Forestales). Cochabamba, BOL. 16 La prueba de corte es un ensayo de viabilidad sencillo y prctico para campo, de fcil aplicacin para comunarios.




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Los tratamientos fueron los siguientes:

Tratamiento 1. Semilla madura. Tratamiento 2. Semilla inmadura. Tratamiento 3. Semilla inmadura con dos semanas de almacenamiento Tratamiento 4. Semilla inmadura con un mes de almacenamiento.

El tratamiento uno y dos permanecieron al oreo durante una semana bajo sombra expuestas al aire; mientras las semillas del tratamiento tres y cuatro permanecieron envueltas en dos capas de peridico bajo sombra en condiciones ambientales, se aplico ste ltimo para comprobar la posible maduracin del vulo que ocurre en otras especies forestales en el almacenamiento entre ellas Gingko biloba (FAO 1991). Transcurridos los tiempos de oreo y almacenamiento, con un estilete se procedi a estudiar el interior de la semilla a travs de cortes paralelos al embrin. Se observaron en total 1200 semillas; por cada uno de los tratamientos se realizaron seis repeticiones con 50 semillas de observacin. Para calificar la viabilidad se utilizaron algunos indicadores de UMSS/FOSEFOR/BASFOR (2002) y se incorporaron otros para el caso de la semilla en estudio (tabla 8).Tabla 8 Indicadores de viabilidad de la semilla de Pino de monte para prueba de corte. Viabilidad Indicadores. Viable Semilla llena con gametofito firme, blanco, sano. Semilla con endospermo o gametofito inmaduro de color verde, que ocupa menos del 80% de la cavidad de la semilla. Con presencia de insectos o larvas. Huecas, sin polinizarse. Embrin daado. Fuente: Elaboracin propia. No viable

3.4.3 Procesamiento con mtodo de flotacin Este mtodo es recomendado por FAO (1991) y UMSS/FOSEFOR/BASFOR (2002) como parte del procesamiento para obtener semillas viables de especies forestales en general. Para ste mtodo solo se utiliz semillas maduras, stas inmediatamente despus de ser cosechadas, fueron despojadas de su pseudofruto carnoso manualmente, luego se echaron a un recipiente con agua por cinco minutos. Luego tanto las semillas flotantes, como las sumergidas se sometieron a una prueba de corte, para determinar las diferencias de viabilidad entre ambas mediante indicadores visuales (tabla 8).La viabilidad es un anlisis que describe si la semilla tiene condiciones para germinar y desarrollar una plntula normal permitiendo deducir la capacidad de germinacin. Se expresa en porcentaje. (Prez y Volpi 2004).17



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La misma operacin se realiz seis veces con 50 semillas u observaciones por repeticin. Llegando a utilizar 300 semillas. 3.4.4 Viabilidad en diferentes tiempos de almacenamiento Esta tarea se realiz mediante el ensayo bioqumico o tetrazolio; se estim el porcentaje de viabilidad de las semillas maduras durante diferentes tiempos de almacenamiento. Paralelamente al ensayo se midi la prdida de contenido de humedad y peso bajo normas ISTA citadas por UMSS/FOSEFOR/BASFOR (2002). El mes de febrero se cosecharon pocas semillas maduras de 6 rboles. Despus de su cosecha fueron despojadas manualmente de su pseudofruto carnoso, posteriormente fueron seleccionadas con el mtodo de flotacin, orearon dos das, fueron almacenadas en una bolsa de polietileno bajo sombra dentro una conservadora de plastoformo en condiciones ambiente. Este mtodo de almacenamiento es sencillo, de bajo costo y aplicable para las comunidades. As tambin, es recomendado por FAO (1991) para semillas recalcitrantes de especies tropicales. Los tratamientos del ensayo son los diferentes tiempos de almacenamiento:

Tratamiento 1. Cuatro das de almacenamiento. Tratamiento 2. Once das de almacenamiento. Tratamiento 3. Veinte das de almacenamiento. Tratamiento 4. Veinte y siete das de almacenamiento. Tratamiento 5. Treinta y cuatro das de almacenamiento.

Debido a la escasa cantidad de semilla disponible, cada tratamiento const de veinte semillas como observaciones. Previo al ensayo de tetrazolio, considerando algunas experiencias de lvarez et al (2001) y Delouche et al. (1988) con otras semillas de conferas, la semilla se someti a remoj en agua destilada. Primero se remoj la semilla por 24 horas, luego el segundo da se quito el epimacio que la rodea, luego nuevamente se coloc a remojo otro da ms, el tercer da se saco la cubierta seminal, dejando la semilla desnuda, para luego quitar el embrin y realizar la prueba. Las semillas del tratamiento cuatro y cinco debido a que estaban ms secas, despus del primer da de remojo se escarifico la semilla para permitir el ingreso del agua, el tercer da se saco el epimacio y la cubierta, luego las semillas remojaron 4 horas, y despus de este tiempo se extrajo el embrin. Para sacar el embrin, se parti la semilla por la mitad, con un bistur paralelamente al embrin teniendo cuidado de no daarlo.




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Luego los embriones extrados por recomendaciones de Delouche et al. (1988) y Rivero (2005) 18 se sumergieron en la solucin de tetrazolio contenida en frascos de vidrio, envueltos con papel estao para crear oscuridad, los embriones permanecieron en la solucin durante una hora y media a una temperatura de 40C en un horno elctrico. El reactivo de tetrazolio por recomendacin de Delouche et al. (1988), Pearrieta (2005) 19 y Rivero (2005) para tincin de embriones de especies forestales, se prepar a un por ciento de concentracin en agua destilada y se almacen bajo oscuridad en un refrigerador a 8C de temperatura no ms de dos semanas para su uso. Para la calificacin de la viabilidad del embrin se tomaron algunas recomendaciones de FAO (1991); Delouche et al (1988); lvarez et al (2001) y fueron adaptados para el caso de los embriones de la especie en estudio (tabla 9).Tabla 9. Indicadores de viabilidad de embriones de Pino de monte para la prueba de tetrazolio Viabilidad Indicadores Viables. Embriones totalmente teidos de rojo carmn. Embriones totalmente teidos pero con la punta de la radcula de color crema. No viables. Embriones blancos. Embriones teidos menos del 50%. Embriones teidos ms del 50% pero con los cotiledones blancos. Semillas infestadas, huecas y premaduras.

Viabilidad limitada (no Embriones teidos de rojo carmn al 80%, con manchas al interior diferenciada) o costados del epictilo Fuente: Elaboracin propia

Los embriones se analizaron inmediatamente despus de la prueba con ayuda de un estereoscopio con lentes de 10x y 20x de aumento. 3.4.5 Pureza Por recomendaciones de ISTA, citadas por UMSS/ FOSEFOR/BASFOR (2002) se consider semillas puras a semillas maduras sin daos; impurezas a semillas de otras especies; materia inerte a trozos de semillas rotas o daadas con tamaos menores a la mitad de lo habitual; otros materiales a fragmentos de hoja, ramitas, piedras o tierra, se calcul mediante la siguiente frmula:Porcentaje de pureza = (Peso de semillas puras/peso total de la muestra)* 100

Rivero, L. 2005. Mtodo de prueba de tetrazolio. (entrevista) Santa Cruz. BOL. ORS (Oficina Regional de Semillas de Santa Cruz) 19 Pearrieta, C. 2005. Conservacin del reactivo de tetrazolio. (entrevista) Cochabamba. BOL. ORS (Oficina regional de Semillas Cochabamba)

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Tambin se consider semillas puras aquellas que tengan daos internos por insectos e premaduras, ya que esta prueba no tiene la finalidad de estimar la germinacin (Musi, citado por Bonner 1993). 3.4.6 Peso Se realiz de acuerdo a normas ISTA recopiladas por UMSS/FOSEFOR/BASFOR (2002). Se peso en una balanza de precisin electrnica 100 semillas sin pseudofruto con ocho repeticiones; luego se obtuvo el dato de peso con la siguiente frmula:Nmero de semillas/Kg. = Nmero de semillas de la muestra *1000 Peso de la muestra en gramos

3.4.7 Contenido de humedad Se prepararon dos muestras de semillas de cinco gramos, luego se encendi el horno una hora antes, despus en cajas petri se introdujeron al horno las muestras durante 17 horas a una temperatura de 105C +/- 2C. (De Acosta, citado por UMSS/ FOSEFOR/BASFOR 2002) Transcurrido el tiempo, las semillas se colocaron a una bomba de vaci, para despus pesar las muestras en una balanza electrnica de precisin. El dato se obtuvo mediante la siguiente frmula en base hmeda recomendada por ISTA, citado por Bonner (1993):

Porcentaje de contenido de humedad (%) = Peso en fresco peso seco * 100 Peso en fresco

3.4.8. Mtodo aplicado para determinar un tratamiento pregerminativo 3.4.8.1 Diseo experimental Se realizo un diseo de bloques aleatorizados con seis tratamientos pregerminativos, a cuatro repeticiones; cada repeticin con 50 semillas sembradas. En total se utilizaron 1200 semillas. El modelo matemtico es el siguiente:y i j = + ai + bj + ui j yi j = cualquiera de las observaciones = media global. ai = efecto i-simo de tratamientos pregerminativos bj = efecto j-simo de los bloques. ui j = error experimental.

3.4.8.2 Cosecha de semillas Se cosecharon semillas maduras de 12 rboles semilleros, que se encuentran en manchas de Podocarpus de bosque bajo y medio de Bajuchuru Sailapata (anexo 2). sta actividad se realiz con ayuda de los comunarios.




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3.4.8.3 Procesamiento Inmediatamente despus de su cosecha se quitaron los pseudofrutos manualmente y luego se seleccionaron por el mtodo de flotacin durante cinco minutos (se desecharon las semillas flotantes y se utilizaron slo semillas sumergidas); luego orearon una noche, en un cuarto, para su posterior almacenamiento, que no excedi de 10 das hasta ejercer el tratamiento o la siembra. El almacenamiento de las semillas fue en bolsas de polietileno sencillas, bajo sombra y en conservadoras de plastoformo a condiciones ambiente. 3.4.8.4 Tratamientos pregerminativos aplicados

Testigo (t).- Sin ningn tratamiento. Remojo 9 das (r9).- Las semillas remojaron en abundante agua, bajo sombra, cambiando el agua diariamente. Remojo 18 das (r18).- El mismo que el anterior con la diferencia que el remojo duro 18 das. Escarificado (e).- Con un estilete se realiz un corte tangencial, al epimacio y cubierta seminal de la semilla, sin daar el gametofito. El corte fue al lado posterior superior del micrpilo (Figura 1) Escarificado y remojo 48 horas (e48).- la misma operacin que el anterior con la diferencia que despus se remoja en agua fresca durante dos das. Figura 1. Escarificacin de la La estratificacin clida de 18 das (et).-Estas semilla de Podocarpus semillas se colocaron dentro de una bolsa negra, glomeratus. Fuente: mezcladas con tierra negra fina y un poco de arena Elaboracin propia tamizada hmeda, las bolsas se guardaron en oscuridad bajo condiciones de ambiente. 3.4.8.5 Siembra en cmara de germinacin.

En laboratorio las semillas se sembraron en cajas plsticas transparentes, en arena esterilizada a 130C, con una humedad proporcionada por la mezcla de 500 gramos de arena por 75 cc de agua destilada, las semillas fueron sembradas en filas de 3 * 5 cm. a una profundidad de un centmetro. Luego se introdujo el ensayo a cmara de germinacin con ocho horas luz, temperatura de 28C a 32C y a una oscuridad de 16 horas con temperaturas de 18C a 22C (Prado 1998). 3.4.8.6 Variables consideradas.

Tiempo de latencia:

Son das transcurridos desde la siembra hasta que se inicie la germinacin; el valor es til para conocer la efectividad del tratamiento pregerminativo (INE 2003).



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Capacidad de germinacin o poder germinativo:

Es el porcentaje de semilla pura capaz de germinar y producir una plntula en condiciones ptimas para la especie (ISTA, citado por Prez y Volpi 2004). INE (2003) indica que es aceptable cuando presenta valores por arriba del 60%, cuando es menor se recomienda otro tratamiento pregerminativo. Se obtiene con la siguiente frmula:CG % = (n/N) * 100

CG % = Capacidad de germinacin. n = nmero de semillas germinadas N = nmero de semillas sembradas

Vigor:

Es un atributo solamente de semillas capaces de germinar (Delouche 2002). Es el tiempo hasta donde existe mayor germinacin, a partir de este punto se considera que las semillas que germinen despus no se establecen (INE 2003). Es el potencial de la semilla para una emergencia rpida, uniforme y un desarrollo normal de plntulas bajo condiciones de campo, se expresa en porcentaje (Casini, citado por Prez y Volpi 2004).

Homogeneidad de germinacin:

Sirve para comprobar la homogeneidad de germinacin entre repeticiones, se calcula al 0.025 de variacin de muestreo (es la diferencia entre el valor ms alto y bajo de germinacin entre repeticiones), ste valor se compara con un cuadro de clculo de homogeneidad (tabla 10).Tabla 10. Control de homogeneidad de ISTA PG% 1 Intervalo mximo 2 3 PG% 1 87-88 84-86 81-83 78-80 73-77 67-72 56-66 51-55 Intervalo mximo 2 3 13-14 15-17 18-20 21-23 24-28 29-34 35-45 46-50 13 14 15 16 17 18 19 20

99 2 5 98 3 6 97 4 7 96 5 8 95 6 9 93-94 7-8 10 91-92 9-10 11 89-90 11-12 12 Fuente: ISTA, citado FAO (1991)

ndice de velocidad de germinacin:

Popinigins, citado por Congresso de Floresta brasileiro (1983), Valdillo et al (2004) y Brown y Meyor, citado por Johnston et al (2003) indican que se calcula mediante la




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frmula propuesta por Maguire: que es la suma del nmero de semillas germinadas entre el tiempo transcurrido en cada una de las observaciones; se calcula mediante la siguiente frmula:IVG = (ni /ti ) IVG = ndice de velocidad de germinacin ni = nmero de semillas germinadas en el i-simo da ti = tiempo en das, para la germinacin en el i simo da

3.5 Determinacin de un tratamiento pregerminativo que mejore la germinacin de la semilla en bosque y vivero 3.5.1 Diseo del experimento Se diseo un experimento de bloques al azar con arreglo de factores de dos por seis, es decir: dos condiciones ambientales de siembra (vivero y bosque), con seis tratamientos pregerminativos cada una. Para cada tratamiento se tienen cuatro repeticiones o parcelas cada una de ellas con 50 semillas sembradas 20. En total se sembraron 2400 semillas (tabla 11).Tabla 11. Esquema del experimento Factor 1: condiciones ambientales Condiciones ambientales de bosque Factor 2: Tratamientos pre-germinativos Remojo 9 das Remojo 18 das Escarificado y remojo 48 horas. Escarificado Estratificacin clida. Testigo Remojo 9 das Remojo 18 das Escarificado y remojo 48 horas. Escarificado Estratificacin clida. Testigo

Condiciones ambientales de vivero

Fuente: Elaboracin propia

3.5.2 Siembra en bosque Se utiliz semilla del mismo lote que las semillas sembradas en cmara de germinacin; sin diferencias en cuanto a cosecha, almacenamiento, procesamiento y tratamientos pregerminativos. La siembra en bosque se realiz a principios de Diciembre; despus de la ocurrencia de tres precipitaciones lo que anunciaba fin de la sequa.

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Debido a que los resultados obtenidos de este ensayo, no se ajustaron al diseo experimental, stos se analizaron con estadstica descriptiva.



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Las semillas se sembraron en surcos a una profundidad de 1 a 2 cm en cuatro parcelas cuadradas de uno por uno metros, instaladas bajo un bosque donde abundaban rboles de Podocarpus, zona denominada Yakuawi (Ver anexo 1); esta parte del bosque tenia realizado por los campesinos un tratamiento de limpieza del sotobosque como tratamiento silvicultural, con la intencin de mejorar la regeneracin natural. Adems esta rea estaba protegida por un cerco de alambre de pas para no permitir el ingreso del ganado (Figura 2). Antes de la siembra se quitaron las malezas y se removi la abundante hojarasca y materia orgnica del suelo manualmente. La siembra estuvo sometida a condiciones climticas naturales del bosque de neblina. 3.5.3 Siembra en vivero. Para la siembra en vivero, se construy con ayuda de los comunarios, una almaciguera de cama fra con los materiales disponibles del lugar; se prepar un sustrato tamizado de 7 partes de tierra negra y 3 de tierra de bosque. La almaciguera por debajo, tiene una capa de arena de 10 cm como drenaje y una capa de sustrato de 30 cm. Un ancho de 80 cm y un largo de 6 metros. En la almaciguera las semillas se sembraron en surcos, a una profundidad de 1 a 1,5 cm. Para generar mejores condiciones para el cultivo, la almaciguera se cubri con un plstico de invernadero amarillo de 250 micrones de espesor, por encima de sta se cubri con una malla semi - sombra de color negro de 65%; y para aumentar la oscuridad se cubri con un poco de paja del lugar, la humedad se mantuvo con riego manual (Figura 3). 3.6 Anlisis de datos.

Figura 2 Parcela de siembra de semillas en bosque. Fuente: Elaboracin propia.

Figura 3. Almaciguera de siembra de semillas, en la comunidad de Sailapata. Fuente: Elaboracin propia

Para definir si existen diferencias significativas entre los tratamientos pregerminativos, se realizo un anlisis de varianza (ANOVA) y la prueba de rangos mltiplos de Duncan, ambos al 95% de probabilidad con las siguientes variables: capacidad de germinacin, ndice de velocidad y vigor expresado en porcentaje. El resto de las variables de la investigacin, se analiz mediante estadstica descriptiva.



Captulo IV. Resultados y discusiones

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CAPTULO IV. RESULTADOS Y DISCUSIONES4.1 Condicionantes de la investigacin.

Ecolgicas

Se tropez con la dificultad de abastecerse de semillas maduras para los ensayos respectivos. Los antecedentes fenolgicos y de produccin de semillas maduras de otras Podocarpaceas no coincidan con el Podocarpus de la zona de Sailapata. Este problema se subsano en parte con la exhaustiva bsqueda de semillas en el bosque con ayuda de comunarios hbiles para trepar rboles. Por las escasas semillas que se cosecharon los ensayos realizados, no necesariamente estn fundamentados en un diseo experimental, por el hecho de que los resultados y circunstancias que se presentaron en campo no siempre se adaptaron a un modelo estadstico (en su defecto se analizaron con estadstica descriptiva)

Clima

El clima represent otra limitante para la investigacin, ya que existi una sequa desde septiembre hasta el mes de Enero teniendo un retraso de lluvia de 4 meses segn datos de SENAMHI; as tambin comunarios indican que las precipitaciones fueron escasas a las habituales en la comunidad. Este fenmeno es un factor que influy en la germinacin en bosque, poca de cosecha, cantidad de semillas producidas y tambin sobre la cantidad de semillas abortadas que existan derramadas debajo de los rboles semilleros.

Accesibilidad y medios.

Sailapata es una de las comunidades ms alejadas del municipio de Independencia y se puede decir del departamento. Para llegar se tiene que viajar a Villa de Independencia durante 8 horas en transporte pblico desde Quillacollo; despus se tiene que caminar 10 horas o en el mejor de los casos entrar o salir en movilidad en 3 horas (en poca seca). Por otra parte, no tiene energa elctrica o un ambiente de trabajo para semillas (anexo 1b). Estas limitantes perjudicaron el almacenamiento, transporte de semillas, control de germinacin en laboratorio, bosque y vivero.

Sociales.

La comunidad es de tradicin agrcola y conoce poco sobre temas de biologa de semillas forestales; recin empiezan a desarrollar actividades silvcolas, en este aspecto tienen algunos problemas de organizacin y liderazgo comunitario.


Captulo IV. Resultados y discusiones

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4.2 Caracterizacin morfolgica de la semilla 4.2.1 Origen de la semilla Se constat con un estereoscopio que la semilla de Pino de monte (P. glomeratus) se origina del

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Estudio de propagacion sexual de Pino de monte (Podocarpus glomeratus) en la comunidad de Sailapata (Cochabamba, Bolivia)