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ENFERMEDAD BACTERIANA DE TIPO GRANULOMATOSA EN TILAPIA CULTIVADA EN JAULAS FLOTANTES * [email protected] Enrique Mateo, Teresa Castro, Verónica Sierralta * Marzo, 2011 LABORATORIO DE PATOBIOLOGÍA ACUÁTICA

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ENFERMEDAD BACTERIANA DE TIPO

GRANULOMATOSA EN TILAPIA CULTIVADA EN JAULAS

FLOTANTES

* [email protected]

Enrique Mateo, Teresa Castro, Verónica Sierralta *

Marzo, 2011

LABORATORIO DE PATOBIOLOGÍA ACUÁTICA

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INTRODUCCIÓN

• Acuicultura: aporta el 45% del consumo total productos pesqueros para la población humana (FAO, 2008) y entre los cultivos líderes se encuentra la tilapicultura (El-Sayed, 2006).

• Cultivo de tilapia se ha popularizado en más de 100 países, ya que es una especie de fácil crianza, adaptable a diferentes sistemas de cultivo, habiendo sido considerada resistente a aguas de poca calidady a muchas enfermedades (FAO, 2007).

• Las naciones más productoras de tilapias son China, Egipto, Filipinas, Indonesia y Tailandia que acumulan 87% de la producción mundial, siendo China el líder con 50% (El-Sayed, 2006). En el año 2002, la producción en América del Sur fue de 75.328 t (5% de la producción mundial) siendo los países más productores Brasil, Colombia y Ecuador.

• Baltazar (2009) El Perú en el año 2001 le da importancia al cultivo de tilapia. La producción de esta especie en el año 2002 alcanzó 122 t. y en el 2008 se incrementa a 1714 t, siendo los departamentos más representativos Piura y San Martín con 88.3% y 10.8%,respectivamente y con sólo 0.7% y 0.2% Lima y Amazonas.

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INTRODUCCIÓN

• Una de las características que hizo popular el cultivo de tilapia era la supuesta resistencia que estos peces tenían frente a las infecciones.Actualmente tal atributo se ha desacreditado por las numerosas referencias sobre casos de epizootias, algunas muy devastadoras que se presentan en cultivos en diferentes partes del mundo (Ariel & Owens, 1997)

• Los cultivos de tilapia son afectados por una gran variedad de organismos patógenos: crustáceos, protozoos, hongos, bacterias y virus. Las bacterias producen los mayores perjuicios económicos, siendo las más frecuentes en cultivos de jaulas en ambientes dulceacuícolas las siguientes: Aeromona hydrophila, Edwardsiella tarda, Flavobacterium columnare, Mycobacterium spp., Pseudomona fluorescens, Staphylococcus epidermidis, Streptococcus agalactiae, S. iniae, S. milleri y Francisella.

• En cultivos en jaulas en pequeñas lagunas, se crea un ambiente propicio para la multiplicación de una gran variedad de bacterias de vida libre; y algunas se comportan como patógenos facultativos(Aeromonas, Pseudomonas, Edwardsiella, etc.) cuando el sistema inmunológico de los peces se ve mermado por la continua acción de factores estresantes, que precisamente abundan en este tipo de medio ambiente (Wedemeyer et al., 1976).

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MATERIAL Y MÉTODOS

• Muestreo 15 tilapia roja Oreochromis niloticus.

• Meses de marzo, junio y noviembre del 2009

• Temperatura del agua 21º, 19º y 21º C.

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MATERIAL Y MÉTODOS

• Apertura de la cavidad visceral

en forma aséptica - pool riñón

anterior y bazo.

• Placas con agar sangre,

incubadas a 30º C por 24 a 72

horas.

• Las cepas bacterianas aisladas fueron identificadas usando

pruebas morfológicas, tintoriales, fisiológicas, bioquímica

convencional y utilizando el sistema API 20E (Manual AFS-FHS,

2007).

ESTUDIO BACTERIOLÓGICO

API 20E

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MATERIAL Y MÉTODOS

• Cada pez - muestras de cerebro,

branquias, corazón, hígado, bazo,

riñón, estómago, intestino y

músculo.

• Fijación solución de formaldehído

al 10% (v/v) en buffer fosfato pH 7,0,

procesamiento según metodología

propuesta por Luna (1968)

• Muestras - inclusión parafina

líquida – bloques - 5 µm de espesor.

• Cortes de tejido teñidos con

Hematoxilina y Eosina de Harris.

ESTUDIO HISTOPATOLÓGICO

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RESULTADOS

• Especímenes muestreados sin

signos externos evidentes

• Signos internos: Granulomas

ascitis.

SIGNOS ANATOMOPATOLÓGICOS

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ESTUDIO BACTERIOLÓGICO

• Edwardsiella tarda, bastones

cortos (0,68 – 0,80 µm), Gram

negativos y móviles.

+Manosa

+Manitol

Producción de ácido:

-VP

+MR

-Urea

-Gelatina

+Indol

+H2S

+Ornitina descarboxilasa

+Lisina descarboxilasa

FPrueba de O-F

+Catalasa

-Oxidasa

+Motilidad

ResultadoPruebas

Tabla. Características bioquímicas

de Edwardsiella tarda.

• Streptococcus sp., Gram positivos

y no móviles.

5 (15) muestras – bacterias (pool de

órganos internos).

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ESTUDIO HISTOPATOLÓGICO

60915TOTAL

8045Noviembre

4025Junio

6035Marzo

Con granulomasde muestrasPrevalencia (%)

Muestras Número Meses

Tabla. Prevalencia de granulomas en

tilapias por mes de muestreo.

0

10

20

30

40

50

60

Incidencia (%)

Branquias Bazo Corazón Hígado Intestino Páncreas Riñón

Figura 3. Incidencia de granulomas en órganos de tilapia.

53,3%

40%

6,6%

13,3%

26,6%

6,7%

13,3%

361,6 - 1114,9 µm

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DISCUSIÓN

• Estudio bacteriológico se logró aislar a partir de muestras de tilapia

cepas bacterianas de Edwardsiella tarda, Staphylococcus sp. y

Streptococcus sp,. Es frecuente encontrar en cultivos de esta especie,

la presencia de Edwardsiella tarda causando severas infecciones

(Chen & Lai, 1998).

• Los estafilococos y estreptococos son también patógenos

importantes de las tilapias sobre todo el Staphylococcus epidermidis

(Huang et al., 1999) y el Streptococcus agalactiae (Hernandez et al.,

1999).

• Con respecto a las bacterias causantes de granulomas:

Pseudomonas fluorescens, Mycobacterium fortuitum,

Staphylococcus epidermidis, Streptococcus agalactiae, S. iniae,

Edwardsiella tarda y Francisella sp.; siendo esta última la más

frecuente y la más patógena (Hsieh et al., 2006, Soto et al., 2006,

Mauel et. al., 2007).

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DISCUSIÓN

• Respecto a la incidencia de granulomas en tilapia se encontró que en

gran parte de órganos muestreados se presentaron lesiones de tipo

granulomatosa, asociadas con el aislamiento de Edwardsiella tarda,

Staphylococcus sp. y Streptococcus sp.

• Sin embargo en caso de peces que en el estudio histopatológico se

observó presencia de granulomas y bacteriológicamente no se

aislaron patógenos, podría explicarse en el hecho de que el

muestreo se efectuó en el inicio de la fase crónica de la

enfermedad, ya que la mayoría de bacterias son fagocitadas por

macrófagos formando granulomas, los cuales dificultarían el

aislamiento del patógeno (Huang et al., 1999).

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Tabla. Signos externos e internos en tilapias

muestreadas y análisis bacteriológico - histopatológico

GranulomasEdwardsiella tarda

Streptococcus sp.

Hígado congestionado y

granulomas en el bazo

Sin signosN5

GranulomasStaphylococcus sp.Granulomas en bazo e hígadoSin signosN4

GranulomasNegativoBazo con granulomasSin signosN3

NegativoNegativoSin signos evidentesSin signosN2

GranulomasNegativoBazo con granulomasSin signosN1

GranulomasEdwardsiella tardaBazo congestionadoSin signosJ5

NegativoNegativoHígado pálidoExoftalmiaJ4

NegativoNegativoSin signos evidentesSin signosJ3

GranulomasNegativoSin signos evidentesExoftalmiaJ2

NegativoNegativoSin signos evidentesSin signosJ1

NegativoNegativoHígado pálidoSin signosM5

GranulomasEdwardsiella tardaAscitisSin signosM4

GranulomasNegativoEsplenomegalia e

hígado con granulomas

Sin signosM3

GranulomasEdwardsiella tardaAscitis, hígado pálido y riñón

friable

Sin signosM2

GranulomasNegativoSin signos evidentesSin signosM1

Estudio histopatológico

Análisis BacteriológicoSignos internosSignos externosMuestra

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DISCUSIÓN

• Las tilapias que presentaron la enfermedad de tipo granulomatosa

probablemente se infectaron en el lugar de procedencia durante la

fase de alevinaje.

• Es importante que se tomen las medidas necesarias para evitar que

los problemas hallados no se agraven con el tiempo.

• Los resultados patológicos obtenidos en este estudio no son graves,

pero si preocupantes, considerando el tipo de sistema de cultivo que

se emplea, donde los factores estresantes podrían agravar la salud

de los animales, ya que son prácticamente incontrolables.

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GRACIAS ! ! !

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