ETUDE PHYTOCHIMIQUE ET DES ACTIVITES … : Volume final Vi : Volume initial SOMMAIRE ... 3.3-Détermination de l’activité antalgique…………………………………64

REPUBLIQUE DU MALI

Un peuple - un but - une foi

MINISTERE DE L'EDUCATION -------------------------------- UNIVERSITE DE BAMAKO N0: ----------------------------- Facult de Mdecine, de Pharmacie Et d'Odonto-Stomatologie ANNEE UNIVERSITAIRE 2002 - 2003 TITRE THESE

Prsente et soutenue publiquement le 6 dcembre 2003 Devant la Facult de Mdecine de Pharmacie et d'Odonto-Stomatologie

du Mali Par Mlle TIMBO Binta

Pour obtenir le grade de DOCTEUR en Pharmacie (Diplme d'Etat) JURY Prsident: Professeur Boubacar S. CISSE Membres: Docteur Elimane MARIKO Docteur Rokia SANOGO Directeur: Professeur Babacar FAYE Codirecteur: Docteur Drissa DIALLO

ETUDE PHYTOCHIMIQUE ET DES

ACTIVITES BIOLOGIQUES DE Trichilia emetica VAHL (MELIACEAE)

2

DEDICACES Au nom d'ALLAH le tout misricordieux, le trs misricordieux " Gloire toi nous

n'avons de savoir que ce que tu nous as appris, certes c'est toi l'omniscient, le sage " saint

Coran. Sourate 2 - Verset 32.

Je ddie ce travail :

A mon pre Sory IbrahimTimbo et ma mre Awa Traor Timbo

Le plus beau cadeau que Dieu puisse faire un enfant c'est de lui donner des parents dignes

de ce nom. Papa et Maman vous avez fait plus que votre devoir, je voudrai que vous sachiez

que je vous aime, et que je rends louange Dieu de m'avoir donner ce privilge d'tre votre

fille.

Mes frres Samba Karim, Abdrahmane, mes soeurs Madame Traor Kadidia, Fatoumata

Bintou, Habsatou, et Assita, merci pour votre prsence et votre amour.

Mes grand-parents Samba Karim Timbo, Abdrahmane Traor, Fatoumata Timbo (in

memorium) que le Puissant vous garde dans sa misricorde. Mahamane Tounkara, Binta

Bah, que Dieu vous garde encore trs longtemps nos cts.

Mon oncle Abdoul Karim Timbo et sa famille, que Dieu assiste vos enfants autant que vous

le faites pour ceux des autres.

Mes oncles et Tantes, merci pour vos conseils et vos bndictions.

Mes cousins et cousines, vous n'tes pas toujours faciles supporter, mais je vous adore.

Mes nerveux et nices vous me donnez la nostalgie de cette enfance joyeuse et insouciante

Madame Ballo Moussokoroni Sonogo, plus qu'une amie vous avez t une sur pour ma

mre et une mre pour moi.

Ma tante feue Mme Djir Awa Traor que le tout puissant vous accueille dans son paradis

Ma tante Assitan Traor Coulibaly et toute sa famille Dakar, Tantie vous m'avez donn

une famille l o je ne connaissais personne, vous m'avez accueilli avec tant d'amour que je

saurai jamais vous remercier assez. Croyez ma profonde gratitude et toute ma

reconnaissance.

3

MENTION SPECIALE A l'Universit d'Oslo (Norvge) pour son soutien matriel et financier travers le projet

CNRST - NUFU plantes mdicinales

Au Dr Diallo pour son engagement la valorisation de la mdecine traditionnelle

Au personnel du laboratoire du Dpartement de Mdecine Traditionnelle du Mali:

l'quipe de production des MTA, M. Fofana, Mme Thra Aminata Kon, M. Seydou

Dembl, Tantie Fatim, Tantie Tapa, Tontons Kassoum et Famolo, Fagnan Sanogo, M.

Magan Gory et Dr Coulibaly pour l'atmosphre conviviale qui nous a beaucoup aid pour la

ralisation de ce travail. Au personnel du laboratoire du Dpartement de Pharmacologie et de Pharmacodynamie

de l'Universit Cheick Anta Diop de Dakar, votre hospitalit nous a beaucoup marqu,

recevez toute l'expression de notre gratitude

Au personnel de l'animalerie du Centre National d'Appui la lutte contre la Maladie,

nous tenons vous remercier pour votre courtoisie

A Mes amie Salimata Fall Coulibaly, Bintou Sogoba, Mme Sy Nana Soumar, Astan

Djir, j'adore votre amiti.

Mes ans Docteurs Richard, Adjaratou, Tolo, Fan

Mes copines de chambre: mes mamans Awa Traor, Awa Coulibaly, Awa Konar; mes

grandes surs Dr Fanta Diarra, Wadiou Diakit; mes petites Fatim Ouattara, Saran

Kot, Dram, mes filles Binette et Poupe, mes chries Tn Ouologem, Wassa et mes

copouses Oumou Kita et Djnbou Kita et toutes celles qui ont pass par la 102

Mes camarades de promotion Promotion feu Arouna Kita, paix son me

Mes camarades internes du DMT: Drissa Sangar, Aboubacar S Bouar, Salamatou

Ahmet, Nana Mariama Chtima, Colette Ekoumou

A Amina Yattassaye, N'Deye Coumba N'Diaye, Moumine Sanogo, Aballo, Alou

Mes cadets Mimi, Sory, Dominique

Aux amis de l'ADERS

Aux amis de l'AESACKS

Aux amis du RASERE

Aux frres et surs de la LIEEMA

4

REMERCIEMENT A l'tat malien, chre patrie merci pour m'avoir donner l'opportunit d'acqurir la plus noble

des richesses

Au corps professoral de la Facult de mdecine de Pharmacie et d'Odonto-Stomatologie

A mes matres et enseignants depuis la maternelle

Au Dr Drissa Diallo pour qualit de la formation reue

Au Dr Ababacar Maga

Au Pr Faye pour avoir accepter de nous recevoir dans son laboratoire

Au Dr Rokia Sanogo pour vos conseils, vos critiques et suggestions

Au Dr Sergio Giani

Aux techniciens Fagnan Sanogo, Kassoum coulibaly et Famolo Diarra, pour tout le mal

qu'ils se donnent pour la formation des tudiants sur la paillasse.

Au Dr Gatta Yoro Sy, pour avoir accept de vous mettre notre disposition aussi bien de

prs que de loin. Votre dynamisme, votre courage et sympathie nous ont beaucoup marqu.

Au Dr Amadou Moctar Dieye, pour tous vos conseils

Au Dr Kane

A Monsieur Biram Faye pour votre aide si prcieux

A Monsieur Diallo, votre aide a t indispensable pour l'acquisition du matriel animal

Dakar

Aux tudiants sngalais: Awa Mbodje, Assata, Binta, Mr Faye

Au Pr Salikou Sanogo pour votre dvouement pour la russite des tudiants ressortissants de

la rgion de Sikasso

Au Dr Abdoulaye Tour et sa Famille, je ne saurai jamais vous remercier assez pour votre

aide. Croyez ma sincre gratitude.

Au Thrapeute de Dioila pour leur collaboration

Aly Traor, Hamidou et sa mre

5

HOMMAGES A NOS MAITRES A notre Matre et Prsident du Jury Professeur Boubacar Sidiki CISSE

Ancien recteur de lUniversit du Mali

Professeur de toxicologie la FMPOS

Conseiller technique au ministre de la sant

Cest un grand honneur que vous nous faites en acceptant de prsider ce jury malgr vos

lourdes responsabilits. Nous avons bnfici au prs de vous dun enseignement de qualit.

Votre rigueur et votre disponibilit ont forc notre admiration.

Recevez cher Matre lexpression de notre profonde gratitude.

A notre Matre et Juge Docteur Elimane MARIKO

Matre de confrence en pharmacologie

Chef de DER des sciences pharmaceutiques la FMPOS

Charg de mission au Ministre de la Dfense et des Forces armes

Nous vous remercions pour avoir accepter de participer lamlioration de la qualit de ce

travail. Vous nous avez mis laise par votre grande modestie et votre sens de la sociabilit.

Croyez cher Matre a nos sentiments de respect et de reconnaissance.

A notre Matre et Juge Docteur Rokia Sanogo

Charge de cours de matire mdicale la FMPOS

Vous nous faites un grand honneur de siger ce jury.

Nous avons apprci en vous votre dynamisme et votre dtermination dans le travail.

Vos critiques, vos remarques et vos suggestions ont t dun grand apport pour la ralisation

de travail.

Permettez-nous cher Matre de vous exprimer toute notre reconnaissance et notre respect.

6

A notre Matre et codirecteur Docteur Drissa Diallo

Matre assistant en pharmacognosie

Chef du Dpartement de Mdecine Traditionnelle

Charg de lenseignement de matire mdicale la FMPOS

Cest pour nous un privilge de recevoir auprs de vous cette richesse quest la science.

Nous ne saurons jamais vous remercier assez pour tout le sacrifice que vous faites pour

lencadrement de vos tudiants. Vos qualits humaines et intellectuelles inpuisables, votre

disponibilit permanente, votre aide morale et matriel nous ont permis de mener bout ce

travail.

Votre dtermination, votre courage et votre rigueur font de vous un exemple dans le domaine

de la recherche.

Soyez assur cher Matre de notre profond attachement de toute notre gratitude

A notre Matre et directeur de thse Professeur Boubacar Faye

Professeur de pharmacologie

Chef du Dpartement de Pharmacodynamie et de Pharmacologie de lUCAD

Nous avons t trs touchs par la spontanit avec laquelle vous avez accept de nous

recevoir au sein de laboratoire.

Votre modestie, votre sympathie et votre disponibilit nous ont impressionns.

Recevez cher Matre lexpression de nos sentiments de respect et de gratitude.

7

LEXIQUE DES ABREVIATIONS

C : Degr Celsius

g : Microgramme

l : Microlitre

ADN : Acide dsoxyribonuclique

AINS : Antiinflammatoires non strodiens

AIS : Antiiflammatoires strodiens

CCM : Chromatographie sur couche mince

cm : Centimtre

DL50 : Dose ltale 50%

DME : Dose maximale sans effet toxique

DMT : Dpartement de Mdecine Traditionnelle

DPPH : 1,1- diphnyl-2-picylhydrazyle

ED : Eau distille

g: Gramme

h: Heure

IC50 : Concentration inhibitrice 50 %

IMAO : Inhibiteur de la monoamine-oxydase

INRSP: Institut National de Recherche en Sant Publique

j: Jour

Kg: Kilogramme

m: Mtre

mg: Milligramme

ml: Millilitre

mn: Minute

NADPH : Nicotinamide-adnine-dinuclotide-phosphate hydrogn

PE : Prise dessai

RUV : Rayon ultraviolet

UCAD : Universit Cheick Anta Diop

Vf : Volume final

Vi : Volume initial

SOMMAIRE

Pages

8

INTRODUCTION..1

MOTIVATION...2

OBJECTIFS....3

SYNTHESE BIBLIOGRAPHIQUE

RAPEL SUR TRICHILIA EMETICA VAHL.

1 - Botanique...5

2- Usages traditionnels...6

3- Chimie de la plante.8

4- Activits biologiques ...12

5- Toxicit.....14

ANTIOXYDANTS....15

INFLAMMATION

1- Physiopathologie21

2- Apprciation de lactivit antiinflammatoire.27

3- Antiinflammatoires conventionnels...29

4- Plantes antiinflammatoires.....35

DOULEUR

1- Physiopathologie36

2- Evaluation de la douleur.37

3- Traitement conventionnel..38

4- Plantes antalgiques.43

NOTION DE TOXICITE...44

TRAVAUX PERSONNELS

METHODOLOGIE

1- ENQUETE ETHNOBOTANIQUE...46

2- ETUDES PHYTOCHIMIQUES

2.1-Matriel vgtal...47

2.2-Ractions de dosage.47

2.3-Ractions de caractrisation50

2.4-Extraction54

2.5-Chromatographie sur couche mince58

3- TESTS BIOLOGIQUES

3.1-Dtermination de lactivit antioxydante59

3.2-Dtermination de lactivit antiinflammatoire60

9

3.3-Dtermination de lactivit antalgique64

3.4-Dtermination de la toxicit66

RESULTATS

1-ENQUETE ETHNOBOTANIQUE...67

2-PYTHOCHIMIE

2.1-Ractions de dosage71

2.2-Ractions de caractrisation...72

2.3-Extractions..74

2.4-Chromatographie sur couche mince75

3- TESTS BIOLOGIQUES

3.1-test antioxydant...83

3.2-Test antiinflammatoire85

3.3-Test antalgique90

3.4-Test de toxicit91

COMMENTAIRES ET DISCUSSIONS..93

CONCLUSION98

REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES.100

ANNEXES...105

RESUME.108

Etude phytochimique et des activits biologiques de Trichilia emetica Vahl (Meliaceae)

10

INTRODUCTION Les plantes jouent un rle trs important dans la lutte contre la grande majorit des maladies

dans les pays africains.

Le traitement par les plantes se trouve surtout facilit par le fait que cette pratique est

intimement lie aux coutumes et traditions dAfrique. Ce qui instaure un climat de confiance

et lapproche tellement aise des tradipraticiens. Ces dtenteurs du savoir traditionnel sont

d'un grand secours dans des pays comme le Mali o la sant des populations est remise en

cause par de nombreux facteurs notamment le manque de moyens techniques et de personnel

qualifi, le cot lev des prestations et des mdicaments conventionnels, linsalubrit de

lenvironnement, l'insuffisance de campagnes dducation pour la sant, pour ne citer que

ceci.

Au fil des sicles, des connaissances empiriques parfois accompagnes de superstition et de

mystre sur les plantes mdicinales se sont accumules. Ainsi au Mali les autorits sanitaires

ont mis en place en 1968 une structure charge dorganiser et de promouvoir les activits de

mdecine traditionnelle sur toute ltendue du territoire. Cette structure, devenue en 1986

Division de Mdecine Traditionnelle (D.M.T.) de lInstitut National de Recherche en Sant

Publique (I.N.R.S.P.), nous permet de percer ces mystres en mettant notre disposition des

moyens techniques modernes capables dexpliquer scientifiquement les vertus des plantes.

Cela dans le souci de corriger les imperfections de la pharmacope traditionnelle savoir :

diagnostic imprcis, posologie mal adapte avec souvent des risques dapparition de

phnomnes dintoxication etc.

Les syndromes inflammatoires sont trs frquemment rencontrs en pratique courante. Ils

reprsentent 25 30% chez des patients consultants ou hospitaliss en France. La raction

inflammatoire d'origine infectieuse ou non infectieuse peut entraner un tat de choc avec

dfaillance multi-viscrale qui engage le pronostic vital (dcs dans 50% des cas).

L'athrosclrose, considre comme une inflammation chronique de l'intima des vaisseaux,

est la premire cause de mortalit dans les pays industrialiss (Prin, 2003). Ces affections

qui englobent fivre et douleur sont dune trs grande diversit et voluent gnralement vers

la chronicit en labsence dun traitement complet et efficace do la ncessit de la recherche

et de mise au point de mdicaments anti-inflammatoires accessibles par tous.


11

Trichilia emetica qui fait lobjet de notre tude est une plante utilise des fins multiples par

les tradithrapeutes.

-La prsence de la plante parmi les plus utilises comme anti-inflammatoires au cours des

travaux de Dembl (Dembl, 1992 );

-La mise en vidence par McGaw et coll. dune activit inhibitrice des extraits de Trichilia

emetica sur la cyclooxygnase (Mc Gaw et coll., 1997);

-Lactivit anti-complmentaire obtenue par Diallo sur les extraits de cette plante (Diallo,

2000) ;

-Son usage dans les pathologies hmorrodaires, abdominales, les plaies chroniques... nous

ont motivs dans le choix de la plante et des tests biologiques effectus.


12

OBJECTIFS OBJECTIF GENERAL Etudier la phytochimie et les activits biologiques des extraits de Trichilia emetica

OBJECTIFS SPECIFIQUES

- Identifier les usages traditionnels de Trichilia emetica ;

- Identifier les groupes chimiques prsents dans les feuilles et les corces de racines de

Trichilia emetica ;

- Dterminer lactivit anti-inflammatoire des extraits aqueux et hydro-alcooliques des

feuilles et des corces de racine de Trichilia emetica ;

- Dterminer lactivit antalgique des extraits de feuilles et dcorces de racine de

Trichilia emetica ;

- Dterminer lactivit anti-radicalaire des extraits aqueux et hydro-alcooliques des

feuilles et des corces de racine de Trichilia emetica ;

- Dterminer la toxicit aigu des extraits de feuilles et dcorces de racine de Trichilia

emetica.


13

SYNTHESE

BIBLIOGRAPHIQUE


14

RAPPEL SUR LA PLANTE

1- Etude botanique

1.1- Nom scientifique: Trichilia emetica (Vahl)

1.2- Synonymes: Trichilia roka (Chiov)

Elcaja roka (Forsh)

Trichilia somalensis (Chiov)

Rochetia choensis (Del) La plante entire

1.3- Noms vernaculaires

Franais: mafouraire

Anglais: roka

Bambara: fulofinzan

Malink: waratiga; sulafinzan

Peuhl: budeyel

Minianka: sigikhugo

Snoufo: sigi khugo (Malgras,1992)

Les corces de tronc Les feuilles

1.4- Systmatique Embranchement : Spermaphyte

Sous embranchement : Angiosperme

Classe : Dicotyldone

Sous classe : Rosidae

Ordre : Sapindale

Famille : Mliace

Genre : Trichilia

Espce : emetica Les racines

Figure 1 : La plante entire, les corces de tronc,

Les feuilles et les racines de Trichilia emetica Vahl

La famille des Mliaces est lune des 15 familles de lordre des sapindales avec 51 genres et

550 espces.


15

Le genre Trichilia est le plus grand de la famille avec 200 espces

Trichilia emetica Subsp varit suberosa est seulement connue en Afrique de lOuest, par

contre, il existe une autre varit emetica plutt connue en Afrique de lEst (Diallo, 2000).

1.5- Description botanique Trichilia emetica est un arbuste mal dvelopp ou petit un arbre denviron 10 mtres de long

avec un tronc de 5-15 cm de diamtre avec des branches basses retombantes, une couronne

avec des feuilles persistantes groupes en touffes.

Les fleurs se prsentent sous forme de courts et denses racmes terminaux de couleurs

verdtres.

Les fruits sont des baies globuleuses rouges maturit puis brunes.

Cest une espce trs variable dans la savane, commune travers la rgion, au Cameroun, en

Afrique centrale, au Soudan et en Ouganda.

Elle est diffrente de lautre varit subsp emetica qui est un arbre de taille moyenne feuille

persistante de 8-20 cm de long et couronne tale prsente en Afrique de lEst et du Sud

(H.M.Burkill,1997). Au Mali Trichilia emetica est disponible au Sud (Diallo, 2000).

2- Utilisations traditionnelles

Tous les organes de cette plante ont diverses utilisations en mdecine traditionnelle, cest

ainsi quelle sert au traitement du paludisme, de la toux, de lulcre gastrique, des

dysmnorrhes, de lasthme, de la cirrhose, des vers intestinaux. Elle est galement utilise

contre lempoisonnement, lhpatite, les crotes, lhypertension artrielle, les infections de la

peau et les infections buccales (Diallo, 2000).

Les usages mdicinaux de Trichilia emetica sont rsums dans le tableau 1.


16

Tableau I : Usages en mdecine traditionnelle de Trichilia emetica.

_______________________________________________________________________

Organes Modes de prparation Indications Rfrences

________________________________________________________________________ Racine racle puis amnorrhe Diallo, 2000 pulvrise douleurs abdominales, ascaridiose, dysmnorrhe poudre + eau tide utilise comme vomitif fermente avec le miel asthme moulue et mlange au lait usage comme purgatif dcoction ankylostomiase DeLaPradilla 1981 Ecorce macration dans le lait empoisonnement Diallo, 2000 de racine poudre indigestion, fivre, hpatite gastrite, empoisonnement dcoction pilepsie, fivre et comme mtique et purgatif macration/ dcoction strilit Burkill,1997 Ecorce poudre toux, vers intestinaux, Diallo, 2000 de tige fivre, syphilis, lpre, blennorragie, usage aussi comme purgatif, mtique stimulatrice des scrtions bronchiques, les troubles lis lestomac : gastrite, hpatite dyspepsie, ulcre, strilit, ballonnement, amnorrhe, tumeur interne pommade en usage entorse, pansement sur Diallo, 2000 externe blessure raideur Feuille dcoction paludisme, blennorragie, DeLaPradilla ankylostomiase 1981 infusion hypertension, cphale Diallo, 2000 douleur lombaire intense ulcrations rectales, lumbago, galement mtique et purgatif


17

Tableau N0 I (suite) Feuille+racine dcoction plaies Feuille+ tige dcoction infections intestinales, cutanes et buccales, polyuries Tige+racine - algie musculaire et courbature Adjanohoun et coll., 1989 Feuille poudre en onchocercose Dembl, + racine partie gale 1992 + tige Fruit - usage comme diurtique et Dujardin, 1889 mtique Latex - eczma Burkill, 1997 Graine application de soins des enfants chtifs Burkill, 1997 lhuile

La racine associe avec celle de Cussonia barteri et la potasse indigne rduite en poudre

est utilise en cas dempoisonnement comme mtique.

La plante ajoute Securidaca longepedonculata est utilise en cas denvenimation par

morsure de serpent, galement le dcoct de racines de Trichilia emetica avec celles de

Anthocleista nobilis est antispasmodique (Ajanohoun E.J. et coll., 1989).

3- Chimie de la plante

3.1- Les mtabolites primaires

Ils ont t trs peu tudis. Les graines sont caractrises par une huile, elles en contiennent

45- 60 % pour les chantillons dAfrique de lOuest et 64% pour ceux dAfrique de lEst. La

composition en acide gras de cette huile est essentiellement lacide palmitique, lacide olique

et lacide linolnique. Trchilia emetica contient 17% de protines. Les polysaccharides

reprsentent 43% et 39% des extraits aqueux 50 et 100C des feuilles de Trichilia emetica.

Les pourcentages en polysaccharides aprs fractionnement et la composition en

monosaccharides aprs mthanolyse ont t dtermins. Les principaux monosaccharides ont

t larabinose, le galactose, le rhamnose, lacide galacturonique, le mannose, le glucose, et

lacide glucuronique (Diallo, 2000 ).


18

Tableau II: Composition et % en monosaccharides des polymres de Trichilia emetica

(Diallo, 2000).

________________________________________________________________________

Echantillon %Polym Ara Rha Xyl Man Gal Glc GlcA GalA

________________________________________________________________________

Te50 Extrait brute 43 31 10 0 1 42 3 8 5 Neutre 54 1 3 2 25 40 28 0 1 Acide 1 45 24 14 3 1 44 2 7 5 Acide 2 49 20 15 0 0 36 3 14 12 Te100

Extrait brute 39 25 8 2 4 28 6 6 21 Neutre 78 20 7 3 28 12 24 0 6 Acide 1 95 37 5 1 2 44 2 5 4 Acide 2 88 28 9 0 1 31 2,5 8 20 Acide 3 65 22 10 1 1 27 2 8 29 Acide 4 58 14 15 1 1 15 3 4 47 Acide 5 13 15 9 3 5 34 25 0 9 ________________________________________________________________________

Lhydrolyse partielle en prsence dacide oxalique diminue les teneurs de certains

monosaccharides comme larabinose, le xylose, lacide glucuronique.

Tableau III : Composition en monosaccharides des fractions aprs hydrolyse partielle

(Diallo, 2000).

________________________________________________________________________

Echantillon Ara Rha Xyl Man Gal Glc GlcA GalA

________________________________________________________________________

Te 50

Acide 1 2 9 0 1 66 1 12 9 Te100

Neutre 0 14 2 31 14 28 0 11 Acide 1 14 4 0 2 78 2 0 0 Acide 2 8 6 0 0 58 3 0 25 Acide 3 1 5 0 1 42 2 8 41 Acide 4 1 15 0 1 22 3 0 57 ________________________________________________________________________


19

3.2- Les mtabolites secondaires

Beaucoup de limonodes (ou trichilines ) ont t isoles de Trichilia emetica. Les trichilines

de type B ont une forte activit insecticide.

Les tanins constituent 6,82% dune infusion aqueuse des corces ; les alcalodes et les

glycosides sont absents. Les corces de racine et de tronc sont amres, elles contiennent une

substance ressemblant la cacdrine (Burkill, 1997 ; Diallo, 2000 )

Gunatilaka a isol 9 composs des corces de tronc dont la plupart est lie aux limonodes, se

sont : nymania1, TrB, drageana 4, trichiline A, rohituka 3, seco-protolimonode. (Mc. Gaw et

coll., 1997 ; Diallo, 2000).

Ces substances sont reprsentes par leurs structures ci-dessous.

O

H3COCO

H3COCO

OH

HOH

OH

O

O

H

O

H

O

O

O

HO

H

H

OH

O

OH

HTrichine A

Trichiline C

Trichiline D

12

9

1112

12

Tric

hiline B 12 - OH


20

O

OOH

O

OOH

HOOC

H

O

COOCH3

OHO

OAc

H

Nymania 1

HOOC

O

O O

O OOH

O

H

OAc

O

H

OHO

Tr-B

O

O

OH

H

O

O

OO

OAc

OHH

Drageana 4

OAc

9

O

O

OCH3

OH

H OH

OH

OH

Seco- A protolimonoid

OAc

O

O

O

O

O

O

H

H O

OOOH

OH

Rohituka 3

9 15

23

21


21

4- Activits biologiques de la plante

4.1-Activit insecticide et larvicide

Les plantes de la famille des Mliaces ont suscit beaucoup dintrt pour lexploration de

leur activit insecticide.

Une limonode, trs complexe isole des graines de Azadirachta indica (Juss), appele

azadirachtine est toxique, insecticide et rgulatrice de la croissance des insectes ( 300 espces

dinsectes et dacariens ). Cependant lextrme complexit de la molcule dazadirachtine

rend toute synthse chimique dlicate lchelle commerciale, pour trouver une alternative

cette molcule, plusieurs investigations ont t menes sur dautres espces de Trichilia parmi

lesquelles Trichilia emetica

Ainsi lextrait thanoque des graines de cette plante a montr un haut niveau dactivit au

cours des essais contre Spodoptera frugiperda et dautres espces

La srie des trichilines isoles de Trichilia roka ont montr une activit insecticide contre

Spodoptera eridania et Epilachna varivestis (Diallo, 2000).

Ltude de la relation structure-activit a montr une action indpendante de la substitution

sur la chane A. Les trichilines les plus actives ont t:

- le type B avec 12-OH sur la chane A, suivit du compos 12-OH

- le type 12 dsoxy comme la trichiline D et le compos 12-actoxy

Lapo-euphol limonode sendanine isole des fruits de Trichilia emetica a un effet inhibiteur

sur la croissance de 4 lpidoptres: Pectinophora grossypiella, Heliosthis zea, Heliosthis

virescens et Spodoptera frugiperda (Diallo, 200).

4.2- Activit antiplasmodiale

Des extraits de plante de 4 familles ont t tests au Soudan pour leur activit antiplasmodiale

sur des souches 3D7 sensibles la chloroquine et des souches rsistantes Dd2 de Plasmodium

falciparum.

Plusieurs plantes de la famille des Mliaces ont montr une forte activit contre les 2

souches.

Les extraits mthanoliques des feuilles de Trichine emetica ont donn une concentration

inhibitrice 50% (IC50) de 2,5g/ml contre Dd2 et 17,5g/ml contre 3D7.

Lextrait mthanoque des corces de tronc a donn une IC50 de 8,5g/ml contre 3D7 et

200g/ml contre Dd2. (El. Tahir et coll.,1999).


22

Une tude similaire a t faite sur 4 plantes maliennes et lextrait aqueux des feuilles de

Trichilia emetica a donn une IC50 > 500g/ml sur les 2 souches. Lextrait

hydromthanolique des feuilles a donn une IC50 > 250g/ml sur les souches 3D7 et W2.

(Traor-Kita et coll., 2000).

4.3- Activit inhibitrice de la synthse des prostaglandines

Les extraits aqueux et thanoques de Trichilia emetica qui est une plante utilise par les

gurisseurs Zulu contre les douleurs et inflammation ont t tests pour linhibition de la

synthse de la cyclooxygnase.

Les concentrations de 5g/ml ont entran une inhibition de 22 et 99% respectivement pour

les extraits aqueux et alcooliques. (Mc Gaw et coll., 1997)

4.4-Activit cytotoxique

Les extraits mthanolique et butylique des corces de tronc de Trichilia emetica ont t tests.

Lactivit de dficience de lacide dsoxyribonuclique (DNA) sur RS 322 YK (rad 52Y) et

RS 188 N (RAD+) a t significative pour lextrait butanolique avec une inhibition de 12 mm

de diamtre autour du dpt (IC12) de 40g/ml sur RS 322 YK et de 161g/ml sur RS 188 N.

Deux molcules ont t isoles de cet extrait, il sagit de:

- Nymania 1 qui a donn une IC12 de 0,9 et de 100 g/ml respectivement sur RS 322 YK et

RS188 N et une cytotoxicit (IC50) de 12g/ml.

- Tr-B avec IC12 gale 13g/ml pour RS 322 YK et suprieure 100g/ml pour RS

188 N et une cytotoxicit de plus de 20g/ml. (Gunatilaka et coll., 1998; Diallo, 2000).

4.5-Activit antipyrtique

Le dcoct 10% des racines de Trichilia emetica a t test chez les rats aprs induction de

la fivre par administration dune suspension 30% de levures dans leau physiologique. 5 h

aprs linjection les doses de 1; 0,5 et 0,25 ont entran une rduction significative de

lhyperthermie avec des rsultats comparables ceux du lot tmoin (Sanogo et coll., 2001).

4.6-Activit anticomplmentaire

Les extraits aqueux des feuilles 50C et 100C ( Te50 et Te100 ) de Trichilia emetica ont

une activit de fixation du complment avec une inhibition 50% (ICH50 ) de 45 et 35 g/ml


23

respectivement, les pourcentages en polysaccharides ont t de 43% pour Te50 et 39% pour

Te 100.

Aprs fractionnement et purification les diffrents fragments de polysaccharides ont t

soumis au test de lactivit anticomplmentaire.

La fraction la plus active a t la plus acide Te100-4 de lextrait 100C avec une ICH50

infrieure 15g/ml suivit de la fraction acide Te50-1 avec ICH50, 34g/ml ; la fraction

neutre Te100N, 52g/ml.

Aprs hydrolyse partielle, il sest produit une diminution de lactivit de toutes les fractions,

ce qui dmontre la relation entre lactivit et les chanes latrales (Diallo, 2000).

4.7- Activit hpatoprotectrice

Les extrait de Trichilia emetica ont t test sur le domage caus par administration intra

pritonale de la solution CCl4 chez les rats. la fraction dithyl ther du dcoct de racine a

donn la plus forte activit de rparation 1g/kg. Cet effet serait li la prsence de plyphnols

dans la plante (German et coll., 2001).

6-Toxicit

Les graines sont mtico-cathartiques et de nombreux auteurs ont signal la toxicit des

tourteaux pour le btail. Le dcoct dcorce et la matire grasse extraite des graines ne sont

pas toxiques. Chez les cobayes, la teinture des feuilles a produit de nombreux cas de mort par

oedme aigu du poumon (Kerharo et Adams, 1974; Burkill, 1997).La plante figure galement

parmi les plus toxiques identifis au cours des enqutes menes par Fan (Fan, 2003).


24

LES ANTIOXYDANTS

Un antioxydant est toute substance qui lorsquelle est prsente en faible concentration par

rapport celle du substrat oxydable, retarde ou prvient de manires significatives loxydation

de ce substrat.

Ces antioxydants prsentent un intrt croissant car il semblerait que les formes ractives de

loxygne (les radicaux superoxydes, hydroxyles, alkoxydes et peroxydes, le peroxyde

dhydrogne, loxygne singulet ) soient, en partie du moins lorigine de nombreuses

affections comme la maladie de Parkinson, la maladie dAlzheimer, lartriosclrose, la

polyarthrite chronique, le mongolisme ou encore le cancer (Chevalley, 2000 ). Ils

interviennent aussi dans le phnomne de vieillissement.

Loxygne en plus de son action anti-infectieuse est utilis par des enzymes telles que les

monoamino-oxydases ou les monoxygnases pour mtaboliser des composs endognes et

exognes (Cavin, 1999) en outre la production par le corps humain de certains composs

comme les prostaglandines passe par des intermdiaires radicalaires. Cependant lorsquil y a

surproduction de ces espces instables dans lorganisme, il se produit des dommages sur

lADN, la peroxydaton des lipides ou encore la fragmentation des protines (Chevalley, 2000

).

Lorigine des radicaux est diversifie ; ils sont gnrs lors de la pollution de notre

environnement (une bouffe de cigarette contient environ 10 14 radicaux), par les

rayonnements UV, les radiations ionisantes (IR), les mtaux de transition (cuivre, zinc) et au

cours des ractions enzymatiques (Bathily, 2001).

Les antioxydants galement ont diverses origines :

In vivo il sagit denzymes comme la superoxyde dismutase, la gluthation peroxydase, la

catalase et des molcules de faibles masses molculaires comme le tripeptide gluthation ou

lacide urique.

Les mdicaments : Les anti-inflammatoires non strodiens, les hyperlipoprotinemiques,

les -bloquants et les antihypertensifs ont t valus pour leur proprit antioxydante.

Comme exemple nous avons le Probutol, hypocholestrolmiant et antioxydant par


25

inhibition de la modification oxydative des lipoprotines de basse densit (LDL) (Bathily,

2001).

Lalimentation : Les principales substances antioxydantes sont :

Lacide ascorbique (vitamine C), il est rducteur et intervient dans la rgnration du

tocophrol et est retrouv dans les lgumes, le chou, le poivron, le persil, les

agrumes(Cavin, 1999).

Le tocophrol (vitamine E ), il prvient la proxydation des lipides membranaires in vivo

en captant les radicaux peroxyles, il est prsent dans les huiles vgtales (huile darachide,

de soja, de palme, de mas, de tournesol et dolive presse froid ) ainsi que dans les noix,

les amandes, les graines, le lait, les ufs et les lgumes feuilles vertes (Cavin, 1999).

Le carotne (provitamine A ), il capte loxygne singulet et se retrouve dans les lgumes

verts, les pinards, la salade, les carottes, labricot, le melon, la papaye et dautres fruits

jaunes

O CH2

CH3HO

H3C CH2

CH2

CH

CH2

CH3

H

Tocophrol

3

O CH

OH

CH2OHO

OHHO

Acide ascorbique


26

Les plantes : Depuis quelques annes de nombreux composs ayant des proprits

antioxydantes ont t isols des plantes. Les antioxydants naturels sont prsents dans

toutes les parties des plantes suprieures et sont pour la plupart des composs phnoliques.

Ils agissent par la dsactivation des radicaux par raction daddition covalente, le captage

de loxygne singulet, la complexation dions et mtaux de transition et la rduction des

radicaux.

Les flavonodes, ils sont prsents dans toutes les parties de la plante o ils jouent un rle

dterminant dans le systme de dfense comme antioxydant. Les flavonodes sont

abondants dans les fruits, les lgumes, le th et le vin et agissent soit comme chlateurs de

mtaux (querctine, catchine ), soit comme capteurs de radicaux hydroxyles,

superoxydes, alkoxyles, peroxyles (querctine, rutine, kaempfrol ).

Cependant les flavonodes peuvent tre pro-oxydants sur les protines, sur la proxydation

des lipides et sur lADN. Ils prsentent dautres effets biologiques tels que les effets anti-

inflammatoires, antiviral, anti-allergique, anti-hypertensif, anti-thrombotique, antibactrien,

anti-hpatotoxique, anti-cancrigne.

Exemple : La morine

Beta-carotne


27

Les xanthones sont des polyphnols activit inhibitrice de la monoaminoxydase, ils

sont antimicrobiens, cytotoxiques. Leur proprit antioxydante sexerce par inhibition

de la peroxydaton des lipides ainsi que par le captage des anions superoxydes.

Les coumarines, ils proviennent de la peroxydation des lipides membranaires et captent

les radicaux hydroxyles, superoxydes et peroxyles. Les conditions structurales requises

pour lactivit anti-peroxydante des coumarines sont similaires celles signales pour les

flavonodes.

Les carotnodes, pigments liposolubles constitutifs de la membrane des chloroplastes, ils

donnent la coloration jaune, orange et rouge des fruits et lgumes. Les carotnodes

captent loxygne singulet, les radicaux peroxyles et alkoyls.

Le carotne aurait des proprits anti-cancrignes.

Les tanins, ils prsentent des proprits anti-oxydantes significatives et agissent par

captage et en donneurs de protons face aux radicaux libres lipidiques produits lors de la

peroxydation, leurs actions inhibitrices de lauto-oxydation de lacide ascorbique, du

linolate et de la peroxydation lipidique des mitochondries du foie et des microsomes ont

t dmontres. Les tanins prsentent galement des proprits anticancreuses non

ngligeables.

O

OOH

OH

HO

OHHO

Morine

O

O

HO

HO

OH

O---Glc

OH

Mangifrine


28

Le th vert prsente des polyphnols activit anti-mutagne prouve cest le cas du gallate

d(-)-pigallocatchine.

Les drivs dacide phnolique et composs phnoliques, ce sont gnralement des

drivs dacide hydroxycinnamique : drivs dacide coumarique, cafique, frulique et

chlorognique. Ils sont prsents dans de nombreux fruits et lgumes et captent les

radicaux superoxydes du systme NADPH/ mthosulfate de phnazine.

Ils sont anti-mutagnes par blocage de la nitrosation des amines aussi bien in vitro qu in vivo.

Parmi les glucosides, ceux du phnylpropane ont montr une forte activit anti-

oxydante, le Verbascoside inhibe lauto-oxydation de lacide linolique, la peroxydation

lipidique microsomale et capte le DPPH.

Parmi les composs phnoliques le Resvratrol, stilbne isol du raisin possde des proprits

anti-oxydantes et inhibe le dveloppement des lsions prneoplastiques chez la souris.

HO

HO

O

OO

OH

O OH

OH

OH

O

O

OHOH

HO

Verbascoside

OH

OH

HO

Resvratrol

O

O

OH

OH

OH

OH

HO

C

O

OH

OH

OHEpigallocatchine


29

Les lignanes, les lignanes diarylfuranofuraniques tels que le Ssaminol ont une activit

anti-oxydante expliquant la stabilit de lhuile de ssame et sa rsistance la dtrioration

oxydative (Cavin, 1999 ).

O O

O

O

OH

O

OSsaminol


30

LINFLAMMATION

1- Physiopatologie de la raction inflammatoire

1.1- Dfinition et tiologie

1.1.1- Dfinition

Linflammation est une raction de dfense et dadaptation de lorganisme une stimulation

cellulaire excessive ou anormale due une agression tissulaire dorigine diverse. Le plus

souvent cette rponse est bnfique pour lhte agress.

Cette raction met en jeu de nombreux systmes biologiques qui interviennent des temps et

des degrs variables : ractions biochimiques, activation cellulaire, coagulation, fibrinolyse et

qui visent dtruire ou liminer la substance trangre (fig. 2). Cependant une activation

trop prolonge ou trop importante peut entraner des altrations plus ou moins dfinitives.

(Lechat et coll.1990) (Dieng, 1993).

Depuis prs de vingt sicles, linflammation est diagnostique grce aux signes cardinaux :

Rougeur, chaleur, douleur, et lsion fonctionnelle noncs par Aulus Cornelius Celsius.

(Schorderet et coll., 1998 ).

On distingue :

-Linflammation primaire ou aigu ayant une cause immdiate et localise.

-Linflammation secondaire ou chronique, elle est gnralise cest le cas de linflammation

rhumatismale (Moulin, 1998 ).


31

Figure 2 : Diagramme gnral de la raction inflammatoire ( Laurent P.E., 1982)

1.1.2- Facteurs tiologiques

1.1.2.1- Agents phlogognes exognes

Agents physiques : Radiation, lectricit, froid, chaleur, piqre, coupure, contusion.

Agents chimiques : Acide, base, substances minrales diverses.

Agents biologiques : Microorganismes pathognes ( virus, bactrie, parasite, champignon

) et certains produits comme le venin, le pollen et les toxines.(Dieng, 1993 ; Bayes, 1997

).

AGRESSION TISSULAIRE

Nerf Mastocytes Lesionsvasculaires

Dgtcellulaires

Antignes

Substances PHistamineserotonine

Agrgationplaquettaire

Coagulation

Plasmine

Fibrinolyse

Prostaglandines

Anticorps

Complexes immuns

VASODILATATION

ACTIVATION

Produitsbactriens

VASOPERMEABILITE

DOULEUR

CHALEURROUGEUR

OEDEME

Complment

Kinines

AFFLUX DE LEUCOCYTES

Prostaglandinesleucotrines

Protases neutresDgradations tissulaires

Cytokines Chimiotaxieopsonisationphagocytose

ACTIVATION LYMPHOCYTAIREIL1 Prolifration

no-vaisseauxfibroblastes

FIEVRELEUCOCYTOSE

VITESSE DESEDIMENTATION

FIEVRELEUCOCYTOSE

VITESSE DESEDIMENTATION

CHRONICITE IMMUNISATION CICATRISATION

Granulome


32

1.1.2.2- Agents phlogognes endognes

Ce sont les antignes, les auto-antignes, les complexes immuns circulants, galement les

cristaux forms dans les liquides biologiques ( urates, cholestrol) (Bayes, 1997 ).

1.2- Phases de l'inflammation

Classiquement, les mcanismes de linflammation peuvent tre groups selon la squence et

les manifestations cellulaires et tissulaires suivantes :

Phase vasculaire et plasmatique

Elle est caractrise par une vasodilatation artrielle entranant un rythme, un dgagement

de chaleur locale, une hyperesthsie.

Il se produit une altration des micro capillaires par relchement des cytokines et des

substances vasoactives (histamine, bradykinine, srotonine, prostaglandine, drivs du

complment ) entranant lexsudation des cellules et du plasma vers les tissus.

Phase cellulaire

La migration extra vasculaire (diapdse) des leucocytes et la libration de cytokines sont

lorigine de lactivation cellulaire et de la libration de mdiateurs. Ds lors une succession

dvnements au sein de la lsion inflammatoire entrane :

- la phagocytose dagents extrieurs

- la captation et la prsentation dantignes

- la production de radicaux libres

Les cytokines en outre agissent au niveau systmique pour augmenter la dfense de lhte

sous forme de fivre.

phase de rgnration

Elle passe par :

Une dtersion ou limination de lagent causal et des dbris cellulaires et tissulaires du

foyer inflammatoire de faon interne (phagocytose, pinocytose) ; externe par les orifices

naturels ou par formation dabcs : artificielle (incision chirurgicale).

Une cicatrisation, celle-ci dpend de limportance de la perte de substance survenue la

phase aigu.


33

Le tissu conjonctif est construit de nouveau par la synthse de collagne, la multiplication

cellulaire (fibroblastes ) et la nognse vasculaire partir des capillaires persistants ou

localiss en priphrie du site.

La surproduction de tissu conjonctif lors de la cicatrisation aboutit la formation de cicatrices

hypertrophiques et de chlodes, galement un dfaut de dtersion peut entraner une

persistance des phnomnes inflammatoires (chronicit) (Schorderet et coll.,1998 ; Haslett et

coll., 2000; Cohen, 1986).

1.3- Cellules et mdiateurs de l'inflammation

1.3.1- Cellules

Les polynuclaires neutrophiles : Ils librent des protases, des protines cationiques, les

icosanodes. Ils prsentent des rcepteurs membranaires responsables de leurs proprits

dadhrence, de chimiotactisme, de migration, endocytose et phagocytose, ils meurent sur

le site et sont phagocyts par le macrophage.

Les phagocytes mononucls : Les monocytes proviennent de la moelle osseuse, ils ont

des rles dadsorption et de lyse dagents pathognes, ils assurent galement la

prsentation des antignes au lymphocytes, la rsorption de substances trangres et de

dbris, ils scrtent des cytokines, participent lagression tissulaire par la libration de

mtabolites de loxygne, de protase.

Enfin ils participent la fibrinognse et au remodelage cellulaire par lapport de collagnase.

Les lymphocytes : Ils naissent dans la moelle osseuse et se retrouvent dans le sang et les

tissus lymphodes.

Ils sont de deux types : les lymphocytes B qui par diffrenciation donnent naissance aux

plasmocytes, producteurs dimmunoglobulines et les lymphocytes T responsables de

l immunit mdiation cellulaire.

Les polynuclaires osinophiles : Ils librent les drivs de lacide arachidonique.

Les mastocytes : Ils contiennent de lhistamine.

Les cellules endothliales : Ils scrtent les cytokines, leur multiplication et leur

diffrenciation sont indispensables langiognse, facteur cl de rparation tissulaire.

Les fibroblastes : Ils librent la collagnase.

Les plaquettes (Capron,1998 ; Diouf,1991).


34

1.3.2- Mdiateurs de l'inflammation

1.3.2.1- Les mdiateurs cellulaires

Les amines vasoactives : Il sagit de :

La srotonine, stocke dans les plaquettes sanguines et dans les cellules chromaffines de

la muqueuse intestinale, libre, elle stimule les fibres lisses vasculaires et la disjonction

des cellules endothliales.

Lhistamine, dont la premire source est les mastocytes est libre par dautres cellules

comme les phagocytes (polynuclaires neutrophiles et basophiles, macrophage ), les

cellules sanguines (plaquettes, hmaties ). Elle est retrouve au niveau de lpiderme de la

muqueuse gastro-intestinale et du systme nerveux. Dans toutes ces cellules lhistamine se

trouve stocke sous forme de complexes protiques inactifs car lie lhparine, elle est

libre lors de la dgranulation des cellules phagocytaires et a des proprits

chimiotactiques pour les phagocytes ( Capron, 1998).

Les icosanodes : Ce sont des composs vingt acides amins drivs de lacide

arachidonique. Les uns sont de structures linaires, les leucotrines et les autres de

structure cyclique, les prostaglandines, prostacyclines et thromboxanes.

En rponse une perturbation physique ou chimique, il se produit une activation de la

phospholipase A2 qui hydrolyse les liaisons esters des phospholipides membranaires et libre

des drivs de lacide arachidonique, ce dernier son tour est mtabolis selon deux voies

possibles :

La voie de la lipooxygnase qui le transforme en leucotine.

La voie de la cyclooxygnase qui le transforme principalement en prostaglandine.

Les leucotrines augmentent la permabilit capillaire et exercent une chimioatractivit sur les

polynuclaires.

Les prostaglandines produisent une vasodilatation locale, favorisent ldme et lafflux

leucocytaire, en outre, ils dpriment certains mcanismes immunitaires et potentialisent les

effets algognes de la bradykinine (Moulin, 1998 ).

Les tromboxanes stimulent les mcanismes de lagrgation plaquettaire (Diouf, 1991 )

Les cytokines : Les monokines et lymphokines forment un groupe de protines jouant un

rle essentiel dans les communications intercellulaires et notamment entre les acteurs du

processus inflammatoire. Elles sont scrtes par les lymphocytes, les macrophages, les


35

fibroblastes, les cellules endothliales, les plaquettes et dautres types cellulaires telles que

les cellules pithliales (Capron, 1998 ).

Les cytokines pro inflammatoires sont essentiellement linterleukine (IL)-1 qui est produit par

les phagocytes mononucls sous linfluence de divers facteurs inducteurs, son action majeure

est de promouvoir la scrtion de lIL-2 ; lIL-6 induit la scrtion danticorps par les

lymphocytes B et favorisent la synthse par les hpatocytes des protines de linflammation

aigu ; lIL-8 favorise la chimiotaxie des neutrophiles ; le tumor necrosis factor TNF.

Le PAF acether, phosphoglycride issu de la dgradation des phospholipides

membranaires, est vasodilatateur et augmente la permabilit capillaire.

1.3.2.2- Les mdiateurs plasmatiques

Les kinines : polypeptides plasmatiques phlogognes, les kinines dont la plus active est la

bradykinine ont divers effets sur linflammation, elles entranent entre autre une activation

de la phospholipase A2, une irritation des fibres sensorielles au niveau lsionnel, la

bradykinine favorise en plus une vasoconstriction la base de la stase intracapillaire

(Diouf,1991 ).

Le systme du complment, il intervient dans le phnomne inflammatoire comme dans

limmunit par lactivation des deux voies (classique et alterne ) et entrane la fixation sur

la particule cible de C3 responsable de lopsonisation et de C5, C6, C7 et C8 responsables

de la lyse avec libration de fragments peptidiques, les anaphylatoxines provoquant une

inflammation locale.

Les facteurs de la coagulation, la fibrine qui sdimente dans le site de linflammation

la phase aigu est le rsultat de lactivation de la fibrinognse (Capron,1998; Haslett et

coll., 2000).

2-Apprciation de l'activit antiinflammatoire

2.1-Tests chez l'homme

En clinique il est difficile dapprcier laction antiphlogistique dun mdicament daprs les

seules impressions du malade et du mdecin.

Des lments mesurables doivent tre pris en compte selon les cas :

la raideur, value par sa dure aprs le lever.

la douleur value selon les besoins en acide actylsalicylique.


36

la fatigue, exprime par la priode dactivit dbout.

le test de la fonction articulaire, exprim par le degr de faiblesse musculaire.

le gonflement articulaire et dme, donn par la mesure du primtre inter-

phalangienne laide dune anse coulissante.

laugmentation des protines sriques (vitesse de sdimentation des globules rouges,

lectrophorse des protines sriques).

2.2-Tests d'tudes exprimentales

Erythme aux rayons UV chez le cobaye

Il sagit dapprcier lintensit de la coloration rouge de la peau pile du dos du cobaye

soumise aux rayons UV, en prsence et en absence danti-inflammatoires. (Coyen, 1986).

Permabilit capillaire chez le lapin

Sur la peau pile du lapin albinos est applique lessence de trbenthine ou de lhuile de

croton. Lexsudation plasmatique est mise en vidence par l injection intraveineuse de Bleu

de Trypan ou de Bleu Evans qui se lient aux protines plasmatiques. Ltendue de la tche

bleue cutane est proportionnelle la permabilit capillaire et l tendue de la diffusion du

bleu dans la substance fondamentale du derme est rduite en prsence danti-inflammatoires.

(Coyen, 1986).

dme de la patte du rat

Lexsudation est value par le gonflement de la patte postrieure du rat aprs injection intra-

articulaire dun agent phlogogne ( formol, ovalbumine, kaolin, carragnine ),le diamtre de

larticulation tibiotarsienne est ensuite mesur laide dun pied coulisse ou la patte est

sectionne et pese ou encore son volume est estim dans un plthysmomtre imagin par

Chevillard et Giono. (Coyen, 1986).

Pour notre tude nous avons utilis cette mthode avec la carragnine (sulfopolygalactoside

retir du lichen dIsland ) comme substance pro-inflammatoire.

Granulome la carragnine chez le rat

Une petite boule de coton imprgne de carragnine est insre dans le tissu cellulaire sous-

cutan contre la cage thoracique, au bout de 7 jours le tissu de prolifration qui englobe le

pellet est prlev et pes.


37

Lanti-inflammatoire est donn pendant lessai pour empcher la formation de granulome.

(Coyen, 1986).

Arthrite ladjuvant de Freund

Linjection intra-articulaire dans la patte postrieure du rat dadjuvant de Freund (suspension

de bacilles tuberculeux tus ou mulsion de cire D de bacilles tuberculeux ) dtermine une

raction dmateuse qui se dveloppe immdiatement (inflammation primaire ).

En deux ou trois semaines apparaissent distance sur les pattes antrieures, aux oreilles une

raction avec gonflement, rougeur et chauffement (inflammation secondaire )

Les anti-inflammatoires administrs pendant lessai empchent les ractions primaires et

secondaires (Coyen, 1986).

3- Antiinflammatoires conventionnels

3.1- Antiinflammatoires non strodiens (AINS)

Ils sont constitus dune vaste famille aux produits chimiquement distincts mais qui se

caractrisent tous par leurs proprits antalgique, anti-inflammatoire et anti-agrgante

plaquettaire.

Mcanisme daction

Ils inhibent principalement le mtabolisme de lacide arachidonique par la voie de la cyclo-

oxygnase, cependant dautres effets doivent tre voqus, en particulier la diminution de la

migration cellulaire, du mtabolisme oxydatif ainsi que des actions sur divers constituants du

tissu conjonctif (protoglycane, glycoprotine, collagne ).

Interaction mdicamenteuse

- Dplacement des anticoagulants de leurs liaisons protiques

- Antagonisme des diurtiques et antihypertenseurs

- Augmentation de la toxicit sanguine du lithium et du mthotrxate

- Potentialisation des effets des sulfamides hypoglycmiants.

Effets secondaires

Ils sont dordre digestif (ulcre ), rnal (rtention hydrosol ), hpatique, cutanomuqueuse,

hmatologique (cytopnie, atteinte mdullaire ), allergique.

Contre- indications

Elles dcoulent des proprits pharmacologiques

- Ulcres digestifs en pousse


38

- Intolrance lAspirine (crise aigu de goutte ) ou tout autres AINS

- Troubles acquis ou congnitales de lhmostase

- Prcaution chez les sujets gs et les insuffisants rnaux et hpatiques

Apprciation du rapport bnfice/ risque chez les jeunes enfants, les femmes enceintes et les

sujets ayant des polypathologies.

Tableau IV: les principaux groupes dAINS

________________________________________________________________________

Les groupes DCI Spcialits Posologie /j

chimiques chez ladulte

Indoliques Indomtacine INDOCID 50-200mg

DOLCIDIUM

Sulindac ARTHROCINE 200-400mg

Salicyls Acide actylsalicylique ASPIRINE 3-6 g

Acide salicylate de lysine ASPEGIC

Pyrazols Phnylbutazone PHENYLBUTAZONE 200-600mg

BUTAZOLIDINE

CARUDOL

MEGAZONE

Oxicams Piroxicam FELDENE 20-40mg

Tnoxicams TILCOTIL 20mg

Propioniques Ibuprofne BRUFEN 1,2 2,4mg

FENALGIE

Ktoprofne PROFENID 150-300mg

Drivs de lacide Diclofnac VOLTARENE 100-200mg

Phnylactique Etodolac LODINE 0,4 g

Anthraniliques Acide niflumique NIFLURIL 0,5 1 g

Acide mfnamique PONSTYL 1 1,5 g

________________________________________________________________________


39

Figure 3: Structures chimiques de quelques antiinflammatoires non strodien

3.2- Antiinflammatoires strodiens (AIS)

En 1949, Hench (U.S.A.) rapporte leffet spectaculaire de la cortisone dans la polyarthrite

rhumatode, elle avait t isole du cortex surrnal par Kendall (U.S.A.) et Reichstein (Suisse)

COOH

OCOCH3

NN

O

O C4H9

N

COOHHN

CF3

COOH

NH

CH3H3C

NH

CH2COOH

Cl

Cl

N

H3CO CH2COOH

CH3

C

O

CL

H3CCH

H3CCH2

SALICYLES

Acide actylsalicylique

PYRAZOLES

CH

COOH

CH3

Phnylbutazone

ATHRANILIQUES

Acide niflumique

Acide mfnamique

C

O

DERIVES DE L'ACIDE PHENYLACETIQUE

CH

DERIVES DE L'INDOLE

CH3

COOH

DERIVES DE L'ACIDE PHENYLPROPIONIQUE

Ibuprofne

Indometacine

Diclofnac

Ktoprofne


40

en 1934 et synthtises en 1946. Depuis de nombreux drivs ont t synthtiss, leur

squelette de base est le cyclopentanoperhydrophnanthrne.

Mcanisme daction

Laction antiinflammatoire des glucocorticodes sexerce grce des impacts multiples,

Ils augmentent la production de la lipocortine, inhibant ainsi la phospholipase A2 donc la

libration de lacide arachidonique. En outre, ils diminuent fortement la migration des

polynuclaires, monocytes-macrophages vers le site de linflammation et la production

dautres mdiateurs comme lhistamine, la srotonine, la bradykinines, les cytokines, les ions

superoxydes.


- Ils accroissent les risques dhypokalimie avec les diurtiques, les laxatifs irritants,

lamphotricine B en prise simultane et la toxicit des digitaliques et certains

antiarythmiques ;

- Ils diminuent lactivit des antihypertenseurs ;

- Lassociation avec lhparine, les antivitaminiques K accrot le risque hmorragique ;

- La Rifampicine, le Phnobarbital, la Phtoine, la Primidone acclrent le catabolisme de

certains glucocorticodes.

Effets secondaires

- Troubles mtaboliques (hydrolectriques, glucide, lipide, protide ) ;

- Troubles endocriniens : atrophie corticosurrnalienne, troubles menstruels, hirsutisme, arrt

de la croissance chez lenfant, aggravation du diabte ;

- Troubles gastro-intestinaux : dyspepsie, ulcre ;

- Troubles rnaux , calcul ;

- Troubles hmatologiques : thrombose, hyperleucocytose, lymphopnie ;

- Dficit musculo-squlettique : faiblesse, atrophie musculaire, ostoporose ;

- Troubles dermatologiques ;

- Troubles neuropsychiques : euphorie, trouble du sommeil, convulsion ;

- Troubles ophtalmiques : augmentation de la pression rtinienne.

Contre- indications

- Hypersensibilit au mdicament ;

- Toute affection bactrienne et mycosique non contrle ;

- Affections rnales manifestation ophtalmique ;


41

- Ulcre gastroduodnal volutif ;

- Cirrhose alcoolique avec ascite ;

- Vaccination par un vaccin vivant (Schorderet et coll., 1998 ; Lechat, 1990 ; Coyen, 1990).

Tableau V: Les principaux AIS et leurs posologies.

________________________________________________________________________

DCI Spcialits Dose dattaque Dose dentretien

/24h /24h

________________________________________________________________________

Hydrocortisone HYDROCORTISONE 150-300mg 50-75mg

Prednisone CORTANCYL 40-60mg 5-20mg

Prednisolone SOLUPRED 20-60mg 5-20mg

Mthylprednisolone MEDROL 32-48mg 4 16mg

Triamcinolone KENACORT 10-20mg

Dexamthasone DECADRON 4 6mg 0,5- 1mg

Btamthasone CELESTENE 4 6mg 0,5- 2mg

Paramthasone DILAR 16-24mg 2 8mg

Cortivazol DIASTER 2 4mg 0,5- 1mg

________________________________________________________________________


42

Figure 4: Structure de quelques antiinflammatoires strodiens

CH3

XCH3

C

OH

O

O

H2C

O

CX

O

OH

O

C

OH

O

CH2OH

HO

Structure gnrale des AIS

F

C

OH

O

CH2OH

HO

O

F

CH3

O

C

OH

O

CH2OH

HO

CH3

OH

Cortisone :

H2C OH

CH3

Hydrocortisone :

O

C

HO

F

O

CH2OH

Prednisolone

O

O

Prednisone

C

CH3

CH3

Btamthasone

Dexamthasone

Methylprednisolone Triamcinolone

X

O

OH

OH

O

X

12

3 4 5 67

89

10

1112

13

14 1516

1718

1920

21


43

LT: Leucotrine

PG: Prostaglandine

Figure 5: Cascade arachidonique et site daction des antiinflammatoires

4- Exemples de plantes antiinflammatoires

Tableau VI : Quelques plantes activit anti-inflammatoire

Plantes Familles Indications Rfrence Colchicum Liliaceae antichimiotactique, Schaffer et coll., 1993 autumnate L. antiphlogistique, antimitotique Nauclea Rubiaceae anti-inflammatoire Dembl,1992 latifolia Sm. anti-hmorodaire Kerharo,1974 Azadirachta Meliaceae rhumatisme Ahodikpe, 1997 indica L. articulaire

Stumulus

Dsordre cellulaire

Phospholipides membranaires

Acide arachidonique / Acide dihomo-gamma linolniquePhospholipase A2

Hydroxyproxydes Endoproxides

Leucotrines Lypoxines

LTB4 LTC

Prostaglandines Tromboxane A2PGE2/ PGF2PGD2/ PGI2

Prostacycline

AIS

Cyclooxygnase AINS


44

LA DOULEUR 1- Physiopathologie de la douleur

1.1- Dfinition

Elle est dfinie comme une impression anormale et pnible reue par une partie vivante et

perue par le cerveau. Cest un phnomne perceptif pluridimensionnel qui signale une perte

de lintgrit physiologique.

La douleur rsulte de processus physiologiques complexes dclenchs lorsque les

terminaisons nerveuses priphriques libres ragissent des stimuli nociceptifs de natures

diverses : brlure, piqre, pincement, compression, agents algsiques de nature physique et

chimique, produits toxiques

1.2- Mdiateurs de la douleur

Au cours du processus douloureux, lhistamine, la bradykinine, les prostaglandines (PGE1,

PGF ) interviennent.

Les donnes rcentes de la neuropharmacologie permettent de penser que les enkphalines

(neuropeptides ) et leurs rcepteurs sont impliqus dans lanalgsie morphinique, ils sont de

deux types : La leucine-enkphaline et la mthionine enkphaline.

La substance P (peptide ), inhibe par la stimulation des rcepteurs enkphalinergiques.

La srotonine apparat comme un neurotransmetteur synaptique indispensable, une dpltion

en srotonine provoque pharmacologiquement supprime lanalgsie enkphalinergique

(Pieri, 1992 ).

1.3- Mcanismes de la douleur

Ils dpendent de ltiologie de celle-ci ;

La douleur nociceptive

Elle est due une hyperstimulation des terminaisons libres entranant une hyperesthsie ou

hyperalgsie. Le stimulus peut tre mcanique (douleur osseuse ), chimique (douleur de

lulcre, goutte aigu ) ou inflammatoire (dpt durate par production de mdiateurs

endognes tels que les kinines, les prostaglandines, la srotonine, lhistamine)


45

Le sige se trouve au niveau du foyer lsionnel ou distance (douleur projete ou rfre).

Cette douleur est sensible aux inhibiteurs des prostaglandines comme les AINS.

La douleur neurogne

Elle survient la suite dune lsion priphrique mdullaire ou centrale (traumatisme, troubles

mtaboliques ou ischmiques ), elle rsulte galement dun disfonctionnement de la

transmission de messages ; cest le cas de brlure, dune dcharge lectrique, dun coup de

poignard, dune hyperpathie. La douleur neurogne est peu sensible aux antalgiques, elle est

plutt traite par les antidpresseurs.

La douleur psychogne

La douleur psychologique ou psychopathologique relve de la psychologie, elle nest pas

traite par les antalgiques (Bourin et coll., 1993 ; Pieri, 1992 ).

2- Evaluation de la douleur

2.1- Evaluation de l'intensit

Classiquement il existe deux formes de douleur :

-La douleur aigu

-La douleur chronique (3 6 mois)

Pour valuer la douleur il existe,

Une chelle verbale simple :

Avec, 0 : absence de douleur

1 : douleur faible

2 : douleur modre ou moyenne

3 : douleur forte

4 : douleur extrmement forte ou vive

Le patient choisi le chiffre qui correspond le mieux son tat.

Une chelle visuelle :

Elle est analogue la prcdente, avec :

_______________________________________

0 100

Pas de douleur Douleur maximale


46

2.2- Evaluation du retentissement

Le retentissement de la douleur est valu par :

Les signes motionnels : cris, pleurs, crispation, agitation, prostration

La neuroposture : attitude antalgique, protection de la rgion douloureuse

Il existe galement dautres notions comme

Les troubles de sommeil

Lanorexie

La restriction des activits

3- Traitement conventionnel

3.1- Tests d'tudes exprimentales antalgiques

Test de Randall et Selitto

Il consiste soumettre une pression mesure la patte du rat qui ragit par un cri, lanimal

analgsi ne ragit pas. (Colot, 1972).

Test dAmour et Smith

Il sagit de focaliser un rayon lumineux calorifique sur la queue de la souris, en moins de 6

secondes la souris dplace la queue. Lanimal est considr analgsi sil ny a pas de rponse

au bout de 12 secondes. (Colot, 1972).

Test la plaque chauffante ou hot plate test, (Woolf et Mc Donald )

Le stimulus est galement thermique, la souris est place sur une plaque la temprature de

56C. Si elle nest pas analgsie, elle se lche la patte en moins de 8 secondes

Les ractions de groupes de souris naves sont compares. (Colot, 1972).

Test de Charpentier

La base de la queue du rat est stimule lectriquement, lanimal prsente une raction de fuite

avec cris. Le seuil dintensit de courant lectrique dterminant le cri et sa variation aprs

analgsie sont valus. (Colot, 1972).

Test de torsion ou writhing test (Siegmund )

Une solution de phnylbenzoquinone ou dacide actique 3% est injecte par la voie

intrapritonale la souris ou au rat. Sur des groupes danimaux la dose analgsique


47

empchant le phnomne de torsion induit par le stimulus chimique est dtermine. (Colot,

1972).

3.2- Antalgiques conventionnels

Ce sont des mdicaments action symptomatique qui attnuent ou abolissent les sensations

douloureuses sans provoquer une perte de conscience ou une dpression des autres sensations

contrairement aux anesthsiques.

Ils constituent une famille htrogne du point vue chimique et pharmacologique, on

distingue :

3.2.1-Les antalgiques centraux ou majeurs

Il sagit de la morphine et drivs et les analgsiques de synthse dont la structure est drive

de celle de la morphine.

Mcanisme daction

Pour expliquer le mcanisme daction morphinique, il est admis quil y aurait une action

directe au niveau mdullaire sur la transmission de linflux douloureux et une action indirecte

au niveau du tronc crbral par renforcement des contrles inhibiteurs

Sur la conscience et la sensation de la douleur, les rgions les plus sensibles sont les structures

du cerveau moyen (rgions acqueducale et peri- ventriculaire ainsi que le noyau mdullaire du

raph ).

Les effets multiples morphiniques sont expliqus par lexistence de divers rcepteurs U, K, .

Sur le plan biochimique, il se produit un dplacement des enkphalines vers leurs rcepteurs

avec analgsie.


- Ils potentialisent les effets des anesthsiques locaux, des barbituriques ;

- Leur action antalgique est potentialise par les neuroleptiques, les spasmolytiques ; par

contre les anesthsiques gnraux volatils, les neuroleptiques, les antidpresseurs tricycliques

augmentent laction dpressive respiratoire des morphiniques (Pieri, 1992).

Effets secondaires

Manifestations dysphoriques, effet mtisant, constipation, dpression respiratoire,

hypotension orthostatique, rtention urinaire, effet toxicomanogne (Bourin et coll.,

1993 ).


48

Contre-indications

Lemploi des analgsiques morphiniques doit tre vit chez les enfants, la femme enceinte

ou allaitante, voire le vieillard et linsuffisant rnal ou hpatique.

La prise est contre-indique dans les cas suivants :

- Insuffisance respiratoire, aigu ou chronique ;

- Diverticulose sigmodienne ;

- Traitement par les IMAO ;

OO

N

CH3

OHR

CH3

C2H5

N OCH2

H2C

Morphine H

Codene

Dionine

Tholcodine

R

O

HO

NH2C C

HCH2

ONaloxone

C

NC

O

CH

H3C

H2C N

O

Dextromoramide

OH2C CH3

CH2

HC

CH3

NCH3

CH3

C

C

Mthadone


49

Figure 6: Structure de quelques antalgiques centraux

3.2.2-Les analgsiques priphriques

Ils regroupent des composs chimiques trs htrognes et agissent localement au niveau du

stimulus douloureux, leur mode daction souvent proche fait intervenir pour lessentielle

linhibition de prostaglandines.

Ce sont :

Les antalgiques purs comme les phnines

Floctaphnine : IDARAC

Les antalgiques antipyrtiques,

- Les anilides

Paractamol : DOLIPRANE

-Les pyrazols

Aminophnazone : PYRAMIDON

Mthane sulfonate sodique de noramidopyrine : NOVALGINE

-Les anti-inflammatoires non strodiens.


50

Figure 7: Structures de quelques antalgiques priphriques

3.3- Exemples de plantes antalgiques

OH

NHCOCH3

OC2H5

NHCOCH3

NHCOCH3

NNO

CH3

CH3

N

CH3

NaO3SH2C

NN

O

N CH3

CH3

CH3

H3C

OC

OCOCH3

F F

COOH

OH

Paractamol Phnactine

O

Actanilide

NH

Novalgine

COCH3

Pyramidon

Diflunisal

Bnorilate


51

Tableau VII : Quelques plantes activit antalgiques

Plantes Familles Indications Rfrences

Zingiber offinicinal L. Zingiberaceae Douleurs musculaires Lavergne, 1989

douleurs dentaires Kerharo, 1974

Papaver sumniferum L. Papaveraceae Antalgique, narcotique Boiteau, 1986

Ranunculus Ranunculaceae Cphales Boiteau, 1986

madagascariensis Freyn.

________________________________________________________________________


52

NOTION DE TOXICITE Les effets toxiques dune substance varient considrablement selon sa nature, lorgane cible et

son mcanisme daction. Ces effets constituent la rsultante dinteractions biochimiques entre

la substance toxique et/ou ses mtabolites et les structures de lorganisme. Une meilleure

connaissance de ces caractristiques permet damliorer lvaluation des risques potentiels

pour la sant et facilite le dveloppement de mesures rationnelles dans la prvention et le

traitement (Traor, 1999 ).

Il existe des drogues dont ladministration peut provoquer des phnomnes dintolrance ou

dallergie, dautres plantes exercent leur effet thrapeutique des doses voisines de celles

pour lesquelles on observe des phnomnes toxiques on dit que la marge thrapeutique est

rduite (Fan, 2002 ).

Lusage clinique dune drogue est toujours prcd dun test de toxicit afin dtablir le risque

encouru par lhomme lors de ladministration du produit.

Ltude de la toxicit aigu permet dexprimer la dose qui tue 50 % des animaux dexprience

(DL50) ainsi que la dose maximale sans effet toxique (DME ) cest dire la dose la plus

leve pour laquelle aucun effet toxique nest relev par rapport au lot tmoin. (Traor, 1999

).


53

TRAVAUX PERSONNELS


54

METHODOLOGIE 1- ENQUETE ETHNOBOTANIQUE: 1.1- Matriel: Les informations relatives lidentification de la plante, aux parties utilises, aux indications

thrapeutiques, aux mthodes de prparation, aux voies et doses dadministration ont t

recenses. Egalement lge du thrapeute et le nombre danne de pratique ont t nots.

1.2- Collecte des donnes:

Lenqute a t effectue auprs de 32 thrapeutes du 27 janvier au 02 fvrier 2003 dans le

cercle de Dioila. Elle a concern les thrapeutes des villages de Diadougoutiguila, Diana,

Doomi, Ngala, Finnyana, Silimanbougou, Wolom, Zambougou et la ville de Dioila.

2- ETUDE PHYTOCHIMIQUE

2.1- Matriel vgtal

Les drogues ont t rcoltes le 11 /11/2002 DOUGAN dans la commune de MOLOBALA,

environ 20 kilomtres de KOUTIALA, au Sud du MALI.

Les feuilles, les corces de racine ont t sches lombre la temprature ambiante puis

pulvrises dans un mortier traditionnel.

Les poudres obtenues ont servi aux diffrentes oprations.

Les diffrents organes ont t identifis au DMT et un spcimen est dpos lherbier

2.2- Monographie de la plante

2.2.1- Teneur en eau

Pour une bonne conservation cette teneur doit tre infrieure 10%.

Deux mthodes ont t utilises pour le dosage :


55

2.1.1.1- Mthode gravimtrique

Principe : Cest une mthode pondrale qui consiste en la dtermination de la perte de masse

par dessiccation ltuve.

Matriel : - Balance analytique de prcision ( type SARTORIUS )

- Etuve MEMMERT rgle 110C

- Verre de montre

- Pince

- Spatule mtallique

- Capsules en verre

- Dessiccateur

Technique : Nous avons opr sur un chantillon homogne, broy ou concass.

Tarer cinq verres de montre, faire une prise dessai de 1 2 g (peser au mg prs).

Desscher de faon obtenir une masse constante aprs plusieurs peses conscutives.

Le refroidissement avant pese se fait dans un dessiccateur renfermant un desschant

(chlorure de calcium, anhydride phosphorique)

Calcul: Masse drogue essai = masse avant tuve - tare

Masse eau =masse avant tuve masse aprs tuve

% Eau = (masse eau masse drogue essai) 100

2.1.1.2- Mthode volumtrique

Principe : Elle consiste en un dosage de leau par entranement azotropique.

Matriel : - Ballon de 250 millilitres.

- Rfrigrant reflux tube droit de 20 centimtres de long

- Tube cylindre gradu

- Source de chaleur

Technique : Introduire dans le ballon sec 100 millilitres (ml) de tolune et 1ml deau distille

(ED).

Distiller pendant 1heure (h), laisser reposer pendant 30 minutes (mn).

Lire le volume deau distille initiale (Vi).

Introduire dans le ballon une prise dessai (PE) de 5g de poudre de drogue.

Faire bouillir lensemble pendant 1h et laisser refroidir pendant 30 mn.

Lire de nouveau le volume deau dans lappareil (Vf).


56

Calcul : % deau dans la drogue = (Vf Vi ) 100 PE

2.2.2- Substances extractibles par l'eau

Raliser une dcoction dans un ballon dun gramme de poudre (PE) avec 20 ml d

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ETUDE PHYTOCHIMIQUE ET DES ACTIVITES … : Volume final Vi : Volume initial SOMMAIRE ... 3.3-Détermination de l’activité antalgique…………………………………64