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Universidad de La Salle Universidad de La Salle
Ciencia Unisalle Ciencia Unisalle
Ingeniería Ambiental y Sanitaria Facultad de Ingeniería
2020
Evaluación de la eficiencia de Metarhizium sp y un insecticida Evaluación de la eficiencia de Metarhizium sp y un insecticida
comercial sobre la reducción de la población de larvas de Tecia comercial sobre la reducción de la población de larvas de Tecia
solanivora solanivora
Claudia Marcela Álvarez Marroquín Universidad de La Salle, Bogotá
Daniela Guisel Gutiérrez Rincón Universidad de La Salle, Bogotá
Follow this and additional works at: https://ciencia.lasalle.edu.co/ing_ambiental_sanitaria
Part of the Biology Commons, and the Environmental Engineering Commons
Citación recomendada Citación recomendada Álvarez Marroquín, C. M., & Gutiérrez Rincón, D. G. (2020). Evaluación de la eficiencia de Metarhizium sp y un insecticida comercial sobre la reducción de la población de larvas de Tecia solanivora. Retrieved from https://ciencia.lasalle.edu.co/ing_ambiental_sanitaria/1861
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EVALUACIÓN DE LA EFICIENCIA DE METARHIZIUM SP Y UN INSECTICIDA
COMERCIAL SOBRE LA REDUCCIÓN DE LA POBLACIÓN DE LARVAS DE TECIA
SOLANIVORA
CLAUDIA MARCELA ALVAREZ MARROQUIN
DANIELA GUISEL GUTIERREZ RINCON
UNIVERSIDAD DE LA SALLE
FACULTADES DE INGENIERIA Y CIENCIAS BASICAS
PROGRAMA INGENIERIA AMBIENTAL Y SANITARIA
PROGRAMA DE BIOLOGÍA
BOGOTA D.C.
AGOSTO 2020
PROGRAMA INGENIERIA AMBIENTAL Y SANITARIA
PROGRAMA DE BIOLOGÍA
EVALUACIÓN DE LA EFICIENCIA DE METARHIZIUM SP Y UN INSECTICIDA
COMERCIAL SOBRE LA REDUCCIÓN DE LA POBLACIÓN DE LARVAS DE TECIA
SOLANIVORA
TRABAJO DE TESIS PARA OPTAR POR EL TITULO DE BIOLOGO E INGENIERO
AMBIENTAL Y SANITARIO
DIRECTOR
MSC. JOHAN ALEXANDER ÁLVAREZ BERRIO
BOGOTA D.C.
AGOSTO 2020
Nota de aceptación
_________________________
_________________________
_________________________
_________________________
_________________________
_________________________
Johan Alexander Álvarez Berrio
DIRECTOR
_________________________
Jurado
BOGOTA D.C.
AGOSTO DE 2020
Agradecimientos
Le agradezco a Dios por permitirme vivir hasta este día por guiarme a lo largo de mi vida y por
darme la fortaleza para seguir adelante en aquellos momentos de debilidad.
A mis padres por todo su amor, comprensión, trabajo y sacrifico en todos estos años, pero sobre
todo gracias infinitas por la paciencia que me han tenido. No tengo palabras para agradecerles las
incontables veces que me brindaron su apoyo en todas las decisiones que he tomado a lo largo de
mi vida.
A mi hermana por ser parte importante de mi vida, por apoyarme en todo momento, por llenar mi
vida de alegrías y amor cuando más lo he necesitado.
A Claudia por haber sido una excelente compañera de tesis y amiga, por el apoyo recibido desde
el primer día que la conocí. Por tener la paciencia necesaria y motivarme a seguir adelante en los
momentos difíciles.
Por último, quiero agradecer a todas las personas que hicieron posible esta investigación a
Maicol y a Rosita por su apoyo. A mi director de tesis y a Angélica por guiar esta investigación.
A mi familia y amigos por el apoyo y el amor brindado y por supuesto a la Universidad de la
Salle por permitirme concluir una etapa de mi vida.
Daniela
Agradezco a Dios la oportunidad de poder culminar con este trabajo, por guiarme en los
momentos difíciles y por darme la sabiduría de afrontar y solucionar las situaciones de la manera
adecuada.
A mis padres por darme todo el apoyo económico y moral para culminar con esta etapa tan
importante en mi vida, por ser la guía y centro de apoyo en las dificultades presentadas y por
prestarnos el terreno donde se realizó el invernadero.
A Daniela por ser una excelente compañera de trabajo y amiga comprensible y paciente, por
apoyarme en momentos de caída y motivarme a seguir adelante con este proyecto.
A los campesinos y cultivadores de papa de la vereda el Hatillo del municipio de Suesca,
Cundinamarca que con su ayuda nos brindaron el material biológico para que este trabajo se
pudiera realizar.
Por último, agradecer a Maicol y a la docente Lucia Lozano por aportar su conocimiento y
ayuda, a nuestro director Johan Álvarez y a la cotutora Angélica González por guiarnos en el
desarrollo de este trabajo. A todas las personas que de una u otra manera aportaron a que esta
investigación se desarrollara de una manera eficiente.
Claudia
Dedicatoria
Dedico este trabajo a Dios, por haberme dado la vida y permitirme el haber llegado hasta este
momento tan importante de mi vida. A mis padres quienes con su amor, paciencia y esfuerzo
me han permitido llegar a cumplir hoy un sueño más. A mi mami, por demostrarme siempre
su cariño y apoyo incondicional. A mi papa por siempre estar dispuesto a escucharme y
ayudarme en cualquier momento. A mí hermanita por su cariño y apoyo incondicional,
durante todo este proceso. Y por último a mi abuelita por confiar en mí, gracias por ser parte
de mi vida y por permitirme se parte de su orgullo.
Daniela
Dedico esta investigación a Dios, por haberme dado la sabiduría para realizarla, a mis padres
que son mis promotores principales. A mi padre por aportar su conocimiento, paciencia, amor
y ayuda en este trabajo. A mi madre por su comprensión, amor y motivación para salir
adelante.
Claudia
Contenido
Resumen ............................................................................................................................................... 14
Abstract ................................................................................................................................................. 16
Introducción .......................................................................................................................................... 18
1. Objetivos ....................................................................................................................................... 21
1.1 General .................................................................................................................................. 21
1.2 Específicos ............................................................................................................................. 21
2. Marco teórico ................................................................................................................................ 22
2.1. Origen de la papa ........................................................................................................................ 22
2.2. Taxonomía .................................................................................................................................. 22
2.3. Morfología .................................................................................................................................. 23
2.4. Cultivo de papa en Colombia ...................................................................................................... 24
Condiciones agroclimatológicas ..................................................................................................... 25
Ciclo fenológico del cultivo ........................................................................................................... 25
2.5. Manejo integrado del cultivo ....................................................................................................... 26
Selección y clasificación de la semilla ............................................................................................ 26
Establecimiento del cultivo ................................................................................................................ 27
Desarrollo del cultivo..................................................................................................................... 27
Sanidad del cultivo ........................................................................................................................ 28
Cosecha y poscosecha .................................................................................................................... 29
2.6. Principales problemas fitosanitarios........................................................................................ 29
2.7. Polilla guatemalteca (Tecia solanivora) ....................................................................................... 30
Clasificación taxonómica ................................................................................................................... 30
Biología y Ecología ........................................................................................................................... 31
2.8. Manejo integrado de Tecia solanivora ......................................................................................... 33
Control Cultural................................................................................................................................. 34
Control Etológico .............................................................................................................................. 34
Control Biológico .......................................................................................................................... 35
Control Químico ................................................................................................................................ 35
2.9. Hongos entomopatógenos ........................................................................................................... 36
2.10. Género Metarhizium anisopliae................................................................................................. 37
Morfología .................................................................................................................................... 37
Mecanismo de acción Metarhizium anisopliae ............................................................................... 38
2.11. Clorantraniliprole ...................................................................................................................... 38
3. Marco contextual ........................................................................................................................... 39
3.1. Descripción del municipio de Suesca ......................................................................................... 39
4. Marco normativo ........................................................................................................................... 42
4.1. Constitución política de Colombia............................................................................................... 42
Artículo 49. ................................................................................................................................... 42
Artículo 79 .................................................................................................................................... 42
4.2. Decreto 3075 de 1997 ................................................................................................................. 42
4.3. Decreto 1843 de 1991 ................................................................................................................. 43
4.4. Resolución 3168 de 2015 ............................................................................................................ 43
4.5. Norma Técnica Colombiana NTC 341 ........................................................................................ 43
5. Metodología .................................................................................................................................. 44
5.1. Diseño experimental .................................................................................................................. 44
5.2. Etapa I: Laboratorio .................................................................................................................... 44
5.2.3. Caracterización morfológica ................................................................................................. 46
5.2.4. Preparación para las suspensiones de inóculo........................................................................ 47
5.2.5. Ensayo para determinar la CL50 de la cepa evaluada en laboratorio ....................................... 48
5.3. Etapa II: Campo (invernadero) .................................................................................................... 50
5.3.1. Ensayo para determinar la CL50 de la cepa evaluada en invernadero .................................... 50
5.3.2. Determinación de la eficiencia del control biológico y químico............................................ 51
6. Resultados y Discusión .................................................................................................................. 52
6.1. Cría de Tecia solanivora ........................................................................................................ 52
6.2. Caracterización morfológica de Metarhizium anisopliae.............................................................. 54
6.3 Determinación de la CL50 del control Biológico (Metarhizium anisopliae) en laboratorio ............ 55
6.4. Determinación de la CL50 en invernadero de Metarhizium anisopliae y el insecticida comercial
sobre Tecia solanivora ....................................................................................................................... 62
6.5 Eficiencia del control biológico y químico ................................................................................... 65
6.6. Comparación de resultados entre laboratorio e invernadero ......................................................... 67
7. Conclusiones ................................................................................................................................. 69
8. Recomendaciones .......................................................................................................................... 71
9. BIBLOGRAFIA ................................................................................................................................ 72
10. Anexos ............................................................................................................................................ 80
Lista de Ilustraciones
Ilustración 1: Descripción botánica de la planta de papa ......................................................................... 23
Ilustración 2: Etapas de crecimiento del cultivo de la papa. .................................................................... 26
Ilustración 3. Ciclo Biológico de T. Solanivora ...................................................................................... 31
Ilustración 4. Colonias de dos aislamientos de Metarhizium anisopliae .................................................. 38
Ilustración 5. Ubicación geográfica Suesca, Cundinamarca .................................................................... 40
Ilustración 6. Diagrama de temperatura de Suesca.................................................................................. 40
Ilustración 7. Climograma de Suesca ..................................................................................................... 41
Ilustración 8. Cría masiva de Tecia solanivora. ...................................................................................... 45
Ilustración 9. Recuento de cuadros grande de cámara de Neubauer ........................................................ 47
Ilustración 10. Modelo experimental de pruebas en invernadero. ............................................................ 52
Ilustración 11. Aislados de Metarhizium anisopliae. en medio PDA. A) 8 días B) 15 días ...................... 55
Ilustración 12: Larvas de Tecia solanivora infectadas por Metarhizium comercial .................................. 58
Lista de Tablas
Tabla 1: Factores y características que se deben tener en cuenta para seleccionar tubérculos-semillas de
buena .................................................................................................................................................... 27
Tabla 2. Las plagas en el cultivo de papa ............................................................................................... 29
Tabla 3. Descripción taxonómica de Tecia solanivora ............................................................................ 30 Tabla 4.Porcentaje de mortalidad de larvas de Tecia solanivora (número de larvas muertas) de acuerdo
con las concentraciones del control Químico Clorantraniliprole ............................................................. 60
Tabla 5. Concentración letal media (CL50) del control biológico (Metarhizium anisopliae) y del control
químico (Clorantraniliprole) en larvas de Tecia solanivora a las 240 horas ............................................. 61
Tabla 6. Concentración letal media (CL50) con Metarhizium anisopliae en larvas de Tecia solanivora en
invernadero. .......................................................................................................................................... 64 Tabla 7. Concentración letal media (CL50) con el principio activo Clorantraniliprole en larvas de Tecia
solanivora en invernadero ...................................................................................................................... 65
Lista de Gráficos
Gráfico 1. Ciclo biológico de la polilla del cultivo de papa (Solanum tuberosum) ................................. 53
Gráfico 2. porcentaje de mortalidad de larvas de Tecia solanivora con diferentes concentraciones de
Metarhizium anisopliae ......................................................................................................................... 57
Gráfico 3. Porcentaje de mortalidad de acuerdo a la variación de la concentración de Metarhizium
anisopliae en el invernadero. .................................................................................................................. 63
Gráfico 4 Porcentaje de mortalidad de acuerdo a la variación de la concentración del insecticida con
principio activo Clorantraniliprole en el invernadero .............................................................................. 64
Gráfico 5. Eficiencia en porcentaje de Metarhizium anisopliae en el invernadero ................................... 66
Gráfico 6. Eficiencia de Clorantraniliprole en el invernadero ................................................................. 67
Gráfico 7. Comparación del porcentaje de mortalidad de Tecia solanivora entre laboratorio e invernadero
para Metarhizium anisopliae .................................................................................................................. 67
Gráfico 8. Comparación del porcentaje de mortalidad de Tecia solanivora entre laboratorio e invernadero
para Clorantraniliprole ........................................................................................................................... 68
Lista de Ecuaciones
Ecuación 1. Fórmula para recuento con cuadros en cámara de Neubauer ................................................ 48
Ecuación 2. Determinación de la eficiencia en número ........................................................................... 51
Lista de anexos
Anexo A. Resultados estadísticos Cría de Tecia solanivora .................................................................... 80
Anexo B. Registro de mortalidad Control biológico ............................................................................... 82
Anexo C. Registro de mortalidad Control Químico ................................................................................ 83
Anexo D. Eficiencia del control biológico y químico en campo ............................................................. 84
Anexo E. Resultados estadísticos para la comparación entre condiciones de laboratorio e invernadero .. 85
Anexo F. Memoria de cálculo de CL 50 ................................................................................................. 86
Resumen
La papa (Solanum tuberosum) es uno de los cultivos más importantes de Colombia. Las larvas de
la polilla de la papa, Tecia solanivora (Povolny), se ha convertido en uno de los problemas
fitosanitarios más importantes del cultivo de la papa en Colombia, esta plaga ha ocasionado
elevadas pérdidas económicas. Con el fin de contribuir al conocimiento del manejo de la plaga el
presente trabajo tiene como objetivo determinar la eficiencia de Metarhizium anisopliae y un
insecticida comercial sobre la reducción de la población de larvas de Tecia solanivora y
determinar la concentración letal media (CL50) de los dos controles. Para metarhizium anisopliae
se evaluó una cepa comercial y para el insecticida (Clorantraniliprole) un producto comercial en
el laboratorio de la Universidad de La Salle. El modelo experimental consistió en dos fases, una
en laboratorio y otra en campo (invernadero), para los dos controles se utilizó el método de
infección sobre las larvas del tercer estadio de Tecia solanivora con concentraciones en el orden
de 6.1x105, 6.1x10
4, 6.1x10
3 y 6.1x10
2 conidios/ml, para el control biológico, y concentraciones
de 4.6, 0.46, 0.046 y 0.0046 mg / l para el control químico, Se utilizó el método Probit para la
determinación de la CL50 de ambos controles, con un intervalo de confianza de 95 %. Los
resultados obtenidos mostraron que las larvas de Tecia solanivora al ser expuesto a los controles,
presentaron un porcentaje de mortalidad a los 10 días del 90.1% para el control Biológico en la
concentración de 6.1x105 conidios/ml y del 63.6% para el control químico en la concentración de
4.6 mg/l, presentando concentraciones letales 50 (CL50) de 2.1x103 conidios/ml y 5.6 mg/l
respectivamente. Para la fase de campo se encontró una CL50 de 2,3 x 104 conidios/ml para
Metarhizium anisopliae y de 0,61 mg/l para Clorantraniliprole; Metarhizium anisopliae demostró
un porcentaje de mortalidad y eficiencia del 80% siendo este mayor en comparación a
Clorantraniliprole que fue del 60 y 73% respectivamente. Estos resultados indican que el uso de
Metarhizium anisopliae puede ser una alternativa de manejo dentro de los programas de control
de la plaga de Tecia solanivora, puesto que mostró resultados similares a los alcanzados con el
control químico.
Abstract
The potato (Solanum tuberosum) is one of the most important crops in Colombia. The larvae of
the potato moth, Tecia solanivora (Povolny), has become one of the most important
phytosanitary problems of potato cultivation in Colombia, this pest has caused high economic
losses. In order to contribute to the knowledge of the pest management, the present work aims to
determine the efficiency of Metarhizium anisopliae and a commercial insecticide on reducing the
population of Tecia solanivora larvae and to determine the mean lethal concentration (CL50) of
the two controls. A commercial strain was evaluated for Metarhizium anisopliae and a
commercial product for the insecticide (Clorantraniliprole) in the laboratory of the University of
La Salle. The experimental model consisted of two phases, one in the laboratory and the other in
the field (greenhouse). For both controls, the infection method was used on the third stage larvae
of Tecia solanivora with concentrations in the order of 6.1x105, 6.1x104, 6.1x103 and 6.1x102
conidios / ml, for the biological control, and concentrations of 4.6, 0.46, 0.046 and 0.0046 mg / l
for the chemical control. The Probit method was used for the determination of the CL50 of both
controls, with an interval 95% confidence. The results obtained showed that the Tecia solanivora
larvae, when exposed to the controls, presented a mortality rate at 10 days of 90.1% for the
Biological control in the concentration of 6.1x105 conidios / ml and 63.6% for the chemical
control. in the concentration of 4.6 mg / l, presenting lethal concentrations 50 (LC50) of 2.1x103
conidios / ml and 5.6 mg / l respectively, showing statistically significant differences. For the
field phase, a CL50 of 2.3 x 104 conidios / ml was found for Metarhizium anisopliae and 0.61 mg /
l for Clorantraniliprole; No statistically significant differences were found between the two
controls, however, Metarhizium anisopliae demonstrated a mortality and efficiency percentage
of 80%, being this higher compared to Chlorantaniliprole, which was 60 and 73% respectively.
These results indicate that the use of Metarhizium anisopliae may be a management alternative
within the Tecia solanivora pest control programs, since it showed similar results to those
achieved with chemical control.
Introducción
La papa (Solanum tuberosum L) es el cuarto cultivo sembrado, en más de cien países
siendo el alimento básico de los países desarrollados como lo es Europa y Estados Unidos,
quienes consumen 75 kg percapita anuales (CENTA, 2011). En Colombia Según el Ministerio de
Agricultura y Desarrollo Rural la producción de papa llego en el 2018 a 2.690.585 toneladas. El
consumo de este producto se presentó en 2017 con 2.751.837 toneladas, el índice más alto de
consumo desde 2013, donde el consumo estuvo alrededor de 2.664.000 toneladas (MADR,
2018). El 90% del área sembrada de papa en Colombia se concentra en cuatro departamentos los
cuales son Cundinamarca: 37%, Boyacá: 27%, Nariño: 20% y Antioquia: 6%. Es la actividad
agropecuaria que más empleo e ingresos genera, constituyéndose en eje fundamental de la
economía regional en estos departamentos (Fondo Nacional De Fomento De La Papa, 2016).
La importancia de la papa radica en que sus tubérculos son parte de la dieta de millones
de personas, contiene 80% de agua y la materia seca constituida por carbohidratos, proteínas,
celulosa, minerales, vitaminas A y C proporcionan una dieta balanceada, además son utilizadas
en la industria para la producción de almidón, comidas rápidas, papas a la francesa, chips,
hojuelas y puré (INTA, 2004 ).
Uno de los mayores problemas sanitarios que presenta el cultivo de papa es el ataque del
tubérculo de la polilla guatemalteca T. solanivora, esta plaga se ha adaptado a diferentes
condiciones agroecológicas, afectando la calidad del tubérculo no solo en su apariencia que
reduce su valor comercial, si no en una (Carrillo & Torrado, 2013). Esta plaga afecta la calidad
del tubérculo no solo en su apariencia que reduce su valor comercial, si no en una afectación
total que hace que el tubérculo no se pueda utilizar para semilla, ni para su comercialización
19
puesto que no sirve para su consumo humano, ni animal. El Impacto de esta plaga en Colombia
puede causar infestaciones en cultivo superiores al 90%, con pérdidas del 25% en producción y
hasta el 100% en almacenamiento (Fondo Nacional De Fomento De La Papa, 2016).
El control integral de plagas trata de utilizar racionalmente los sistemas de control
disponible, combinando medidas biológicas, químicas y culturales para el manejo integral de la
polilla guatemalteca. Entre los controles químicos encontramos una gran cantidad de plaguicidas
(FAO, 2008), que son aplicados con frecuencia; lo cual, además de incrementar sustancialmente
los costos de producción, origina una serie de problemas secundarios, entre ellos el desarrollo de
resistencia a los plaguicidas (Sánchez, Londoño, & Peña, 2000). Así mismo los insecticidas
pueden traer consecuencias negativas que afectan a la salud humana que pueden ejercer un efecto
instantáneo sobre la piel, mucosas, árbol respiratorio, etc. Las intoxicaciones agudas resultan en
náuseas, dolores abdominales, diarrea, mareos, ansiedad y confusión (Rodríguez, Suárez , &
Palacio, 2014). Así mismo las intoxicaciones crónicas se asocian a problemas respiratorios,
trastornos de memoria, enfermedades de la piel, depresión, abortos, defectos de nacimiento,
cáncer y enfermedades neurológicas tales como Enfermedad de Parkinson. Según la OMS cada
año se producen 5 millones de casos por intoxicación de pesticidas en zonas aledañas a los
cultivos, y el Instituto Nacional de Salud reporta que, entre 2011 y 2012 sucedieron 19.000
intoxicaciones producidas por plaguicidas (Gaviria , Ospina , & Quijada, 2017).
Dentro del control integral de plagas tiene gran importancia el control biológico, que se
define como la utilización de enemigos naturales (depredadores, parasitoides y
entomopatógenos) para mantener la población de otro organismo a densidades inferiores de las
que tendría en su ausencia (Moreno , 2011). El control biológico tiene varias ventajas ya que la
estrategia se dirige a una especie de plaga particular, mientras se mantiene la población de la
20
plaga por muchos años sin causar daño económico. En el largo plazo, el control biológico es uno
de los métodos más baratos, seguros, selectivos y eficientes para controlar plagas (Rodríguez,
Suárez , & Palacio, 2014).
Aunque el desarrollo de alternativas de manejo biológico ha sido lento porque los
compuestos químicos pueden patentarse, mientras que los enemigos naturales no; por tanto, las
compañías han tenido poco incentivo para desarrollar métodos de control biológico. En
consecuencia, la mayoría de la investigación en control biológico la han realizado universidades
y organizaciones gubernamentales con fondos públicos, a veces escasos (Estrada , 2014).
Teniendo en cuenta lo mencionado anteriormente, el objetivo de este trabajo fue
determinar la eficacia de Metarhizium anisopliae y el principio activo chlorantraniliprole sobre la
reducción de la población de larvas de la polilla guatemalteca (Tecia solanivora) en un cultivo de
papa en Suesca, Cundinamarca.
21
1. Objetivos
1.1 General
Determinar la eficiencia de Metarhizium sp y el principio activo Chlorantraniliprole sobre
la reducción de la población de larvas de la polilla guatemalteca en un cultivo de papa en Suesca,
Cundinamarca.
1.2 Específicos
- Establecer una cría de larvas de Tecia solanivora como insecto trampa para los
bioensayos.
- Determinar la concentración letal 50 (CL50) del control biológico y del control químico
en laboratorio y en campo.
- Establecer la relación entre los resultados obtenidos en el bioensayo de campo y el
bioensayo de laboratorio.
22
2. Marco teórico
2.1. Origen de la papa
La papa (Solanum tuberosum), es una planta originaria de América, y cultivada por todo
el mundo por sus tubérculos comestibles. Fue domesticada en el altiplano andino por sus
habitantes hace unos 8000 años a.C, y más tarde fue llevada a Europa por los conquistadores
españoles como una curiosidad botánica más que como una planta alimenticia. Durante siglos
fue, junto al maíz, puntal clave en la alimentación de varias civilizaciones precolombinas
(Montaldo, 1984).
En el continente americano hay unas 200 especies de papas silvestres, pero fue en los
Andes centrales donde los agricultores lograron seleccionar y mejorar el primero de lo que habría
de convertirse, en los milenios siguientes, una asombrosa variedad de cultivos del tubérculo. En
realidad, lo que hoy se conoce como "papa" (Solanum especie tuberosum) contiene apenas un
fragmento de la diversidad genética de las siete especies reconocidas de papa y las 5.000
variedades que se siguen cultivando en los Andes (FAO, 2008).
2.2. Taxonomía
La siguiente descripción taxonómica y morfológica de la planta de la papa está basada en
(Huamán, 2008). La papa o patata (Solanum tuberosum) es una especie de planta herbácea
perteneciente al género Solanum de la familia de las solanáceas.
Familia: Solanácea
Género: Solanum
Especie: Solanum tuberosum L
23
2.3. Morfología
La planta de papa es herbácea, conformada por dos partes principalmente: sección
subterránea compuesta por la raíz, estolones, tubérculos y tubérculo madre, y la sección aérea
conformada por tallos principales y secundarios, hojas, flores y frutos (Ilustración 1). Al finalizar
cada ciclo productivo, la parte aérea de la planta muere (Corzo, Diler, & Franco, 2003)
Ilustración 1: Descripción botánica de la planta de papa
Fuente: (Food and Agriculture Organization of the United Nations FAO, 2014)
Las plantas de papa pueden desarrollarse a partir de una semilla o de un tubérculo.
Cuando crecen a partir de una semilla, forman una delicada raíz axonomorfa con ramificaciones
laterales. Cuando crecen de tubérculos, primero forman raíces adventicias en la base de cada
brote y luego encima de los nudos en la parte subterránea de cada tallo. Ocasionalmente se
forman raíces también en los estolones. En comparación con otros cultivos, la papa tiene un
24
sistema radicular débil, por lo cual necesita un suelo de muy buenas condiciones físicas y
químicas para su desarrollo (Inostroza , Méndez , & Soto, 2016).
Las hojas son alternas compuestas, es decir, tienen un raquis central y varios folíolos, con
tres pares de hojuelas laterales y una hojuela terminal entre las hojuelas laterales hay hojuelas en
segundo orden. En la base de cada pecíolo se encuentran dos hojuelas laterales llamadas
seudoestípulas. Desde el punto de inserción del pecíolo pueden extenderse hacia abajo, las alas o
costillas del tallo (Ríos , 2007).
Las flores son abundantes a moderadas, inflorescencia cimosa con pedúnculo, presencia
de hoja en formación en la base del ramillete floral. Cáliz: cinco sépalos morados con
pigmentación verde, acuminado y pubescente. Corola: cinco pétalos, rotada, morada y tamaño
medio. Estambres: anteras amarillas y largas. Pistilo: verde, con estigma más largo que las
anteras. Con alta fertilidad como hembra o macho (INIAP, 2011).
El fruto o baya de la papa se origina por el desarrollo del ovario. La semilla conocida
también como semilla sexual, es el ovulo fecundado, desarrollado y maduro (Egusquiza, 2000).
2.4. Cultivo de papa en Colombia
En el país existen cerca de 250 variedades de papa y se dice que hay unas 30 variedades
comerciales, pero las más importantes son: Pastusa Suprema, Diacol Capiro, Ica Única, Parda
Pastusa, Ica Puracé, Tuquerreña y Roja Nariño (DANE, 2013).
Para el año 2013 en Colombia se produjeron 2.788.050 toneladas, siendo Cundinamarca
el principal departamento productor con 1.001.376 ton, Boyacá con 709.000 ton, Nariño con
509.400 ton y Antioquia con 168,172 ton (Fonseca. L, 2015).
25
Condiciones agroclimatológicas
En Colombia se cultiva papa en latitudes que van desde los 2.000 hasta los 3.500
m.s.n.m. Las temperaturas óptimas se encuentran entre los 12 y los 14 °C. En lo referente al
suministro de agua, el cultivo de papa requiere lluvias bien distribuidas de 600 a 800 mm en el
año (Monomeros Colombo Venezolanos, 1980). El cultivo de papa requiere una textura del suelo
fina y una profundidad efectiva superior de 40 cm, lo cual permite el desarrollo apropiado de las
raíces. Debe presentar un contenido de materia orgánica superior al 5%, lo cual disminuye el
riesgo de erosión y aumenta la actividad biológica del suelo manteniendo así la sanidad del suelo
(Moreno, y otros, 2012).
Ciclo fenológico del cultivo
En el ciclo fenológico de la papa se pueden distinguir cuatro fases (Ilustración 2) los
cuales son:
Fase de Emergencia: que es el periodo que transcurre entre la siembra y la aparición de
los brotes en el surco.
Fase vegetativa: el cuál es el periodo entre la emergencia y la iniciación de la
tuberización.
Fase de tuberización o llenado: periodo entre la iniciación de la tuberización y el
máximo desarrollo del follaje. Para muchas variedades se considera que este periodo coincide
con el inicio de la floración.
Fase de madurez: periodo entre el máximo desarrollo del follaje y la senescencia
total.
26
Ilustración 2: Etapas de crecimiento del cultivo de la papa.
Fuente: (SQM, 2015)
2.5. Manejo integrado del cultivo
Según la Federación Colombiana de Productores de Papa (FEDEPAPA, 2014) el proceso
productivo del cultivo de la papa en Colombia se establece la siguiente metodología: 1) selección
y clasificación de la semilla, 2) establecimiento del cultivo, 3) desarrollo del cultivo, 4) sanidad
del cultivo y 5) cosecha y poscosecha.
Selección y clasificación de la semilla
Selección y clasificación de la semilla Para iniciar, la selección consiste en separar los
tubérculos dañados, deformes, cortados o rajados de aquellos que están sanos para mantener la
calidad del producto (Corpoica, 2003). Los factores y las características que se deben tener en
cuenta para seleccionar semilla de papa de buena calidad se presentan en la tabla 3.
27
Tabla 1: Factores y características que se deben tener en cuenta para seleccionar tubérculos-semillas de buena
Calidad
Fuente: adaptado de (Corpoica, 2003)
Establecimiento del cultivo
Para el establecimiento del cultivo se deben elegir lotes aislados del resto de cultivos de
papa para evitar mezclas entre variedades y prevenir la aparición de enfermedades por patógenos
que se encuentren en el suelo. El suelo debe ser preparado con anterioridad, con el fin de promover
la aireación, además de eliminar malezas y plagas. Posterior a la preparación del suelo, es necesario
armar surcos, los cuales son guía para ubicar el tubérculo semilla a una profundidad apropiada y
facilitar la fertilización la cual se puede realizar en el fondo del surco o en corona alrededor de los
tubérculos (Herrera, Fierro , & Moreno, 2000).
Desarrollo del cultivo
En el crecimiento de la planta de papa se pueden diferenciar tres etapas: la emergencia, el
crecimiento vegetativo y reproductivo, y la madurez, estas a su vez establecen diferentes
prácticas de manejo del cultivo, como lo es la deshierba, el aporque para los controles
fitosanitarios y requerimientos de nutrientes (Corpoica, 2003). Con la deshierba se busca que el
cultivo esté libre de malezas para evitar la competencia especialmente por nutrientes y luz,
estimulando así un buen crecimiento de las plantas y, de paso, reduciendo el riesgo de
enfermedades y plagas (DANE, 2013).
Factores Características
Pureza de la
semilla
Sin mezcla de tubérculos de otras variedades. Tubérculos con el
color y la forma característica de cada variedad.
Semilla sana Libre de plagas como gusano blanco, polillas y enfermedades
causadas por hongos, bacterias, virus y nematodos.
Buenas
condiciones físicas
Uniformidad en forma y tamaño, sin daños mecánicos; tubérculos
turgentes con brotes múltiples, fuertes, sanos y verdeados
28
Otra labor que se debe implementar es el aporque, que consiste en agregar suelo
alrededor de la planta y levantar la altura del surco; se busca brindar mejores condiciones como:
facilitar la aireación del suelo, mantener la humedad cerca a las raíces, proporcionar soporte a la
planta para evitar el volcamiento y mejorar el drenaje del agua que se presente en exceso,
evitando el encharcamiento (DANE, 2013). Con esto se logra que la planta desarrolle raíces y
tubérculos, se evita que los estolones queden en la superficie convirtiéndose en tallos y no en
tubérculos. De igual forma, se busca evitar el verdeamiento de los tubérculos, condición que
afecta la calidad del producto y el ataque de plagas y enfermedades como las polillas, el gusano
blanco de la papa y la gota (Corpoica, 2003).
Sanidad del cultivo
Para tener un cultivo sano lo primero que se tiene que hacer es mantener la salud del
suelo y utilizar semilla sana. La sanidad del cultivo se obtiene fertilizándolo y previniéndolo de
plagas y enfermedades. Las plagas de la papa son numerosas, pero se debe tener presente que
para cada una de ellas existe un límite o nivel de daño económico. Esto quiere decir que un
organismo parásito se constituye en problema solamente, si su acción disminuye los
rendimientos del cultivo (DANE, 2013). Por esta razón, se debe observar y evaluar las
enfermedades y plagas durante el desarrollo del cultivo y decidir en forma oportuna las medidas
a tomar. Cuando se presente una plaga o enfermedad, el objetivo principal es manejarla y no
tratar de erradicarla, esto significa que se deben ejecutar un conjunto de prácticas y métodos de
control que se apoyen unos a otros (Corpoica, 2003).
Según Fedepapa (2013) dentro de las prácticas para el control de las plagas recomienda:
el uso de semilla certificada o de origen conocido libre de plagas y enfermedades; semillas
tratadas con insecticidas biológicos o químicos; preparación del suelo con labranza reducida, con
29
una profundidad adecuada, destrucción de terrones y tiempo suficiente previo a la siembra que
permita la exposición al sol y el consumo por parte de las aves de huevos, larvas, cámaras
púpales o pupas de insectos plaga, entre otras.
Cosecha y poscosecha
La cosecha y poscosecha comprende todas las actividades desde la extracción y
manipulación del producto, partiendo de la recolección, clasificación, selección, empaque,
pesada y transporte, incluyendo almacenamiento, procesamiento y consumo, como resultado del
proceso productivo en condiciones óptimas para su realización (DANE, 2013).
2.6. Principales problemas fitosanitarios
Las condiciones agrícolas bajo las cuales se desarrollan el cultivo de la papa en Colombia son
muy variadas. Estas variaciones tienen una gran importancia en la cantidad de especies no deseada de
insectos en las diferentes áreas y determinan su presencia, dispersión, abundancia y manejo. En la tabla
4 se presenta las plagas de mayor impacto económico en Colombia en el cultivo de la papa.
Tabla 2. Las plagas en el cultivo de papa
suelo/tubérculo Almacenamiento
Gusano Blanco de la
papa Premnotrypes
vorax
Polilla pequeña o Palomilla
Polilla Guatemalteca de
la papa Tecia solanivora
Polilla Guatemalteca de la
Tiroteador Naupactus sp Afidos Rhopalosiphoninus
latysiphon
Polilla Pequeña o
Palomilla
Polilla Gigante de la Papa
Phthorimaea operculella Symmetrischema plaesiosema
Fuente: (FEDEPAPA, 2013)
30
2.7. Polilla guatemalteca (Tecia solanivora)
Tecia solanivora Povolny es una plaga de la papa originaria de Centroamérica, se reportó
su introducción a Venezuela en 1983. Dos años después, en 1985, se constató por primera vez su
presencia en Colombia en el departamento de Norte de Santander de donde se diseminó al resto
de las zonas paperas del país (ICA , 2016).
Se considera la plaga de mayor impacto económico en el cultivo de la papa por los daños
que ocasiona en calidad y cantidad de tubérculo atacado en condiciones de cultivo y de
almacenamiento de papa destinada al consumo (Mesa, 2012). Su ataque causa grandes pérdidas,
las cuales se atribuyen, no sólo al deterioro de la apariencia del tubérculo que reduce su valor
comercial y los ingresos de los cultivadores, sino al hecho de que los tubérculos severamente
afectados no se pueden utilizar para semilla ni para consumo humano o animal (Restrepo ,
Sánchez , Soto , & Echeverry , 2011). La polilla Guatemalteca de la Papa Tecia solanivora se ha
adaptado a las diferentes condiciones agroecológicas que presentan las regiones productoras de
papa del país, las cuales se encuentran entre los 1.800 a los 3.200 m de alturas sobre el nivel del
mar, temperaturas entre 6 y 24 °C; precipitaciones entre 500 a 2.500 m.m. y humedad relativa
entre 60 y 100 % (Ríos D. , 2012).
Clasificación taxonómica
La siguiente descripción taxonómica y morfológica de la Polilla guatemalteca (Tecia
solanivora) está basada en (Torres, 1998).
Tabla 3. Descripción taxonómica de Tecia solanivora
Orden Lepidóptera
Sub-orden Dytrisia
Familia Gelechiidae
31
Biología y Ecología
Según (Fedepapa, 2009) la plaga presenta cuatro estados o fases de desarrollo bien
diferenciados: Adulto, huevo, larva y pupa (Ilustración 3). Cada uno de estos estados de
desarrollo se verá afectado por las condiciones medioambientales principalmente la temperatura
y la humedad, pudiendo durar el ciclo completo entre 4-5 semanas en condiciones óptimas, es
decir que, a mayor altitud sobre el nivel del mar, el ciclo de vida de la plaga se hace más largo
así mismo las condiciones de humedad también estarán relacionadas con la dispersión
(Villanueva & Saldamando, 2013)
A continuación, se presenta un resumen de los aspectos más sobresaliente que hace parte
de la biología de la plaga.
Ilustración 3. Ciclo Biológico de T. Solanivora
Fuente: (DANE, 2014)
Género Tecia
Especie Solanivora
32
Adulto. Los adultos son unas pequeñas polillas cuyo color es pajizo; varía de pardo
oscuro a gris, con cabeza, tórax y tégula de color marrón oscuro en los machos y marrón claro en
las hembras. Los adultos machos y hembras se diferencian tanto en tamaño como en coloración
(Araque & Garcia, 1999). La hembra mide 12mm de largo y 3,4 mm de ancho, mientras que el
macho que es más pequeño tiene 9,7 mm de largo y 2,9 mm de ancho; el abdomen de la hembra
es abultado y claro, en el macho delgado oscuro (Fedepapa, 2009).
El adulto tiene hábitos nocturnos su vuelo es corto y errático, comúnmente se posa en el
suelo debajo de las hojas o en las grietas del suelo. Al oscurecer, vuelan activamente, copulan y
ovipositan (Otondo , 2006).
Huevo. Los huevos de T. solannivora son ovalados y miden 0,5 mm de diámetro.
Inicialmente Presentan un color blanco que con el tiempo se va tornando amarillo. Medida que se
desarrollan (Urbano & Echeverria, 1999). En papa almacenada bien sea para consumo o para
semilla, la polilla deposita los huevos sobre el tubérculo, y en campo muy cerca de la zona de
tuberización, sobre hojas bajeras de la planta, cuello de la raíz o base del tallo, eclosionando y
dando paso al nacimiento de las larvas de 8 a 10 días después de la postura (DANE, 2014).
Larva. Las larvas de la polilla guatemalteca pasan por cuatro estadios intermedios.
Presentan una forma alargada y poseen tres pares de patas torácicas, cuatro pares de pseudopatas
abdominales y un par de pseudopatas anales (ICA, 2011). En el primer instar, las larvas muestran
una coloración blanco transparente y cabeza de color marrón oscuro, penetran en el tubérculo
haciendo orificios casi imperceptibles; este estado es muy susceptible a la luz solar al agua y
polvos finos que se le puedan pegar y envolver su cuerpo ocasionando su deshidratación, aspecto
que se debe tener en cuenta para establecer su control (Araque & Garcia, 1999)
33
Conforme avanza la larva se interioriza en el tubérculo, cambia de ínstar, aumenta su
consumo, daña parcial o totalmente la papa y deja sus excrementos detrás de su paso esto
generando pudriciones secundarias que inhabilitan el tubérculo para consumo; hacia el final del
cuarto instar cesa su alimentación, para salir del tubérculo dejando un orificio redondo limpio y
luego empupa en sitios donde encuentra condiciones adecuadas para su reproducción
(Echeverria, 2002).
Pupa. La larva de último instar emite una seda con la que forma un capullo al que se
adhieren partículas de tierra y/o fibras vegetales que encuentra en el substrato disponible. Dentro
de este capullo ocurre la metamorfosis de larva a pupa y de pupa a adulto. Las pupas
generalmente se forman fuera del tubérculo, aunque también se pueden desarrollar dentro de él,
este estado puede durar entre 15 a 18 días, la pupa hembra es más abultada y grande (ICA,
2011).
2.8. Manejo integrado de Tecia solanivora
El manejo integrado de plagas es un sistema de control que tiende a seleccionar, integrar
y aplicar en forma armónica, después de haber previsto las consecuencias ecológicas,
agronómicas, económicas y sociales de esa aplicación, todos aquellos métodos apropiados para
una situación determinada, con el objeto final de reducir la poblaciones a niveles por debajo de
aquel en el que causarían daño económico (Clavijo, 1993).
En Colombia, el manejo integrado de las plagas del cultivo de la papa se ha venido
consolidando progresivamente, llegando a construir hoy día, la alternativa más adecuada en el
control de la polilla de la papa. Sus componentes de control son diversos, entre ellos las prácticas
culturales, trampas con feromonas sexuales, controladores biológicos y aun el control químico.
La estrategia es utilizar aquellos métodos que pueden integrase por ser compatibles; reduciendo
34
de esta manera el uso de insecticidas como única o principal medida de mortalidad de la plaga.
Así se reduce el desarrollo de la resistencia, la aparición de nuevas plagas y los problemas de
residuos tóxicos, permitiendo un ambiente rural menos contaminado y más saludable.
De acuerdo con el ICA (2011), el manejo integrado de plagas busca mantener las plagas
en una población que no cause daño económico importante al cultivo, permitiendo ofrecer
tubérculos de buena calidad, sino también disminuir los costos de producción que se han ido
incrementando debido a los altos precios de los insecticidas.
Control Cultural
Varias prácticas culturales son indispensables para el manejo adecuado de la plaga, entre
las que se tienen: programas adecuados de fecha de siembra y cosecha, técnicas de irrigación
adecuada profundidad de plantación (mínimo 15cm), eliminación de restos de cosecha y de
malezas, rotación de cultivos, y control físico con barreras repelentes (Ortega, 1995)
Control Etológico
Es el que se realiza mediante el uso de sustancias o materiales atrayentes o repelentes
para el insecto plaga. El uso de trampas de agua con feromona sexual es una práctica que aparte
de eliminar los machos y por ende bajar la fertilidad de las hembras, informa sobre las
poblaciones existentes en el lugar del almacenamiento (Araque & Garcia, 1999). La polilla
guatemalteca deberá ser monitoreada de manera permanente y especialmente durante las etapas
de formación y desarrollo de los tubérculos, en temporadas secas y veranos prolongados, y en
cultivos cercanos a focos de diseminación de la plaga (fedepapa, 2013)
35
Control Biológico
El control biológico es una disciplina muy amplia del conocimiento, basada en el
principio natural de que muchas especies de organismos se alimentan, viven y se reproducen a
costa de otros, cuyas poblaciones son reguladas por las primeras en los diferentes ecosistemas
(Madrigal, 2001).
Se han realizado varios trabajos de búsqueda, reconocimiento y evaluación de posibles
controladores biológicos para T. solanivora, no obstante se han identificado hasta ahora pocos
agentes benéficos que puedan desempeñar un papel significativo en el manejo de esta plaga
(Rodríguez A. , 1996). A diferencia de los insecticidas químicos, los microorganismos
entomopatógeno son altamente específicos para ciertos insectos y han sido considerados por la
organización Mundial para la Agricultura y la Alimentación (FAO) y la Organización Mundial
de la Salud (OMS), como una de las alternativas promisoras para el control de plagas (Espitia,
2010).
Control Químico
El control químico solo se justifica cuando los conteos de los machos adultos lleguen a
100 individuos promedio por trampa/semana, durante la etapa de engrosamiento y maduración
de los tubérculos. Se aplican insecticidas selectivos a base de clorpirifos, propenofos o metomyl,
teniendo en cuenta las recomendaciones y orientaciones dadas por el técnico de campo. Cabe
anotar que, para evitar al máximo el uso de productos químicos, es necesario acoger y poner en
práctica las recomendaciones de manejo integrado de la plaga (MIP), lo que representa una
reducción en los costos de manejo del cultivo y menores riesgos que afecten tanto al productor
como al medio ambiente a causa del uso de pesticidas químicos (ICA, 2011).
36
2.9. Hongos entomopatógenos
Los hongos entomopatógenos son un amplio grupo de microorganismos que proveen
múltiples servicios a los sistemas agroecológicos. Entre esos está la capacidad de regular las
plagas para mantenerlas en niveles adecuados (Motta & Murcia, 2011).
Estos microorganismos infectan a la plaga directamente, a través de la penetración de la
cutícula y ejercen múltiples mecanismos de acción, confiriéndoles una alta capacidad para evitar
que el hospedero desarrolle resistencia (López & Hans, 2001). para su utilización como control
biológico es necesario prácticas agrícolas en donde se manipule el ambiente para beneficiar las
poblaciones de entomopatógenos, donde el conocimiento de los aspectos ecológicos del hongo es
necesario, tales como la humedad relativa, temperatura, patogenicidad, virulencia y hospederos a
los que infecta activamente (Meyling & Eilenberg , 2007).
Según Pucheta Diaz et al. (2006), los hongos entomopatógenos tienen un gran potencial
como agentes controladores, constituyendo un grupo con más de 750 especies, diseminados en el
medio ambiente y provocando infecciones fungosas a poblaciones de artrópodos entre los
géneros más importantes están: Metarhizium, Beauveria, Paecilomyces, Verticillium, Rhizopus y
Fusarium (López & Hans, 2001)
Las investigaciones referentes al empleo de hongos entomopatógenos para el biocontrol
de T. solanivora son escasas; no obstante, se reportan estudios in vitro y en campo que evalúan
Beauveria bassiana y Metarhizium anisopliae sobre huevos y larvas de este insecto plaga (Feris,
Gutiérrez, Varela, & Espitia, 2002)
37
2.10. Género Metarhizium anisopliae
El género fue descrito por Sorokin en 1883, como un hongo perteneciente a los hongos
imperfectos, hoy hongos anamórficos o conidiales, ya que su fase sexual o perfecta no se conocía
y su taxonomía aún no es completamente clara (Cepero, Restrepo, Franco, Cárdenas, & Vargas,
2012).
El hongo Metarhizium anisopliae es uno de los principales entomopatógenos empleado
como bioinsecticida. Este hongo tiene, un amplio rango de insectos hospederos de diferentes
órdenes, entre los que se incluyen plagas de lepidópteros de importancia agrícola (Faria &
Wraight , 2017). El ciclo biológico de este hongo entomopatógeno comprende una fase infectiva
celular en el interior del insecto y otra saprofita cuando el hongo completa su ciclo al aprovechar
los nutrientes del cadáver del insecto (Khachatourians & Qazi , 2008). Los insectos muertos por
este hongo son inicialmente cubiertos de forma total por micelio de color blanco, el cual se torna
verde cuando el hongo esporula (Wraight , Inglis, & Goettel , 2007).
Morfología
Las colonias de estos hongos no crecen muy rápido y presentan varios tonos de verde que
van desde amarillo verdoso hasta verde oliva y, con el tiempo, pueden ser de color sepia. Forman
fiálides que pueden ser ramificadas, en conidióforos que nacen directamente del micelio. Los
conidios elipsoides y de tamaño variable según la especie, son unicelulares, hialinos y se forman
en cadenas basípetas, las cadenas de conidios se adhieren unas con otras y forman unos paquetes
de conidios en empalizada (Ilustración 4) (Cepero, Restrepo, Franco, Cárdenas, & Vargas,
2012).
38
Ilustración 4. Colonias de dos aislamientos de Metarhizium anisopliae
Fuente: (Cepero, Restrepo, Franco, Cárdenas, & Vargas, 2012)
Mecanismo de acción Metarhizium anisopliae
El ciclo de la infección fúngica del M. anisopliae empieza con la adhesión del conidio en
la cutícula del insecto hospedante, continuando con la germinación y la invasión a la hemolinfa,
donde se desarrolla dentro del cuerpo matando el insecto, donde el hongo comienza a salir del
tegumento y forma micelio blanco aéreo que pronto se torna verde por la producción de conidios.
El tiempo de muerte a causa de la infección varia de 2 a 15 días dependiendo de las
características del hospedante y los factores abióticos en campo siendo las condiciones climáticas
favorables de temperatura 70% (Ramírez, 2015).
2.11. Clorantraniliprole
Clorantraniliprole que pertenece a la clase de química de diamida antranílica y está
destinado al control de plagas de lepidópteros, coleópteros y algunos dípteros en la agricultura
comercial en cultivos tanto perennes como anuales. La ingestión es el método de ingreso más
efectivo y generalmente requiere una dosis más baja para la respuesta (Bentley, & Woodward,
2010). Actúa fundamentalmente por ingestión y, en menor medida, por contacto, mostrando una
39
buena actividad ovo-larvicida y larvicida sobre la casi totalidad de lepidópteros económicamente
relevantes, los insectos afectados dejan de alimentarse casi inmediatamente después del contacto
con el producto, exhiben letargo general y parálisis muscular seguida en última instancia por la
muerte. Posee actividad sistémica al ser absorbido por vía radicular cuando es aplicado al suelo y
acción traslaminar cuando se aplica al follaje (Astor, Márquez, Huber, Scals, & Martín , 2009).
Clorantraniliprole es clasificado por la OMS como un producto ligeramente peligroso. Su
DL50 dermal aguda en ratas es mayor a 5 000 mg/kg, no causa irritación en la piel ni en los ojos.
Las pruebas en animales no causaron sensibilización por contacto con la piel en ratas. El
Clorantraniliprole es un compuesto de muy seguro para aves y peces, pero puede ser tóxico para
otros invertebrados acuáticos si se aplica directamente a las fuentes de agua. Bajo a
moderadamente tóxico para lombriz de tierra y algas acuáticas. La vida media en el suelo es de
204 días (Gonzales , 2016)
3. Marco contextual
3.1. Descripción del municipio de Suesca
El municipio de Suesca se encuentra ubicado en la parte norte de la sabana de Bogotá. Se
localiza en la parte noroccidental del departamento de Cundinamarca, sobre la cordillera oriental,
el clima de Suesca en su totalidad es frío y generalmente seco, acorde a su relieve y altitud media
de 2665 msnm; presenta una temperatura media de 14º C (ilustración 6). La precipitación
predomina el régimen bimodal, caracterizado por dos periodos de lluvia máxima presente en los
meses de marzo a mayo y septiembre a noviembre (ilustración 7); el municipio de Suesca limita
al sur con el municipio de Gachancipa al occidente con el municipio de Tausa, al norte con el
municipio de Cucunuba y al oriente con el municipio de Sesquile (Alcaldía municipal de Suesca,
2015).
40
Ilustración 5. Ubicación geográfica Suesca, Cundinamarca
Fuente: (Alcaldía municipal de Suesca, 2015)
Ilustración 6. Diagrama de temperatura de Suesca
Fuente: (Alcaldía municipal de Suesca, 2015)
41
Ilustración 7. Climograma de Suesca Fuente: (Alcaldía municipal de Suesca, 2015)
Dentro de las actividades económicas desarrolladas en el municipio para el sector
agropecuario se encuentran cultivos permanentes de flores y productos transitorios como papa,
arveja, trigo y cebada. De acuerdo a la Evaluación Agropecuaria Municipal del año 2013, la papa
se encuentra dentro de los cultivos transitorios, con 1000 Ha de área cosechada distribuidas en
diferentes variedades, merengo (400 Ha), suprema (220), única (250 Ha), criolla (80 Ha), patusa
(50Ha) (Alcaldía municipal de Suesca, 2015).
42
4. Marco normativo
Para la elaboración del presente trabajo, se tuvo en cuenta las disposiciones contempladas
en la Constitución Política de Colombia expedida, Leyes y Decretos de carácter nacional,
Resoluciones y Acuerdos relacionados con salud pública, el medio ambiente y su conservación.
4.1. Constitución política de Colombia
Artículo 49. Toda persona tiene el deber de procurar el cuidado integral de su salud y de
su comunidad, de manera que ningún ciudadano puede, bajo ningún aspecto, efectuar actos que
impliquen el deterioro ambiental, ni tampoco aquellos que atenten contra la higiene y la
integridad física de las personas.
Artículo 79. Todas las personas tienen derecho a gozar de un ambiente sano. La ley
garantizará la participación de la comunidad en las decisiones que puedan afectarlo. Es deber del
Estado proteger la diversidad e integridad del ambiente, conservar las áreas de especial
importancia ecológica y fomentar la educación para el logro de estos”.
4.2. Decreto 3075 de 1997
De obligatorio cumplimiento en todas las plantas donde se fabrique, procese, envase,
almacene y expenda alimentos.
Puntualmente el, Artículo 29, que establece el Plan de Saneamiento debe estar escrito y a
disposición de la autoridad sanitaria competente e incluirá como mínimo los siguientes
programas: Programa de Limpieza y desinfección, Programa de Desechos Sólidos y Programa de
Control de Plagas (ministerio de salud , 1997)
43
4.3. Decreto 1843 de 1991
Por el cual se reglamentan parcialmente los títulos III, V, VI, VII y XI de la ley 9 de 1979 sobre
uso y manejo de plaguicidas
Puntualmente el, Artículo 1, establece que el objeto del control y vigilancia epidemiológica: El
control y vigilancia epidemiológica deberá efectuarse con el objeto de evitar que afecten la salud
de la comunidad, la sanidad animal y vegetal o causen deterioro ambiental (Secretaría Seccional
de Salud y Protección Social , 1991).
4.4. Resolución 3168 de 2015
Por medio de la cual se reglamenta y controla la producción, importación y exportación
de semillas producto del mejoramiento genético para la comercialización y siembra en el país,
así como el registro de las unidades de evaluación agronómica y/o unidades de investigación en
fitomejoramiento y se dictan otras disposiciones (ICA, 2015).
4.5. Norma Técnica Colombiana NTC 341
Esta norma establece las condiciones necesarias para conservar la papa (Solanum
tuberosum), durante su almacenamiento y transporte, las cuales son destinadas para el consumo
doméstico y para el procesamiento industrial (Fedepapa, 1969).
44
5. Metodología
5.1. Diseño experimental
Para el presente estudio se dividió en dos etapas, la primera etapa se realizó en el
laboratorio de la universidad de la Salle en donde se llevó a cabo la cría de Tecia solanivora, el
cultivo de Metarhizium anisopliae comercial, y los ensayos para la determinación de la CL50 en
laboratorio del control biológico y del control químico. En la segunda etapa se llevó acabo en un
invernadero en Suesca Cundinamarca en este se realizó el cultivo de papa, el ensayo para la
determinación de la CL50 en campo al igual que se hizo en el laboratorio y la determinación de la
eficiencia de Metarhizium anisopliae y del insecticida comercial.
5.2. Etapa I: Laboratorio
5.2.1. Cría de Tecia solanivora
La población inicial de Tecia Solanivora se obtuvo a partir de tubérculos infestados con
la plaga, que se recolecto en la zona rural del municipio de Suesca Cundinamarca. Para las dos
cámaras de cría se usaron recipientes plásticos translúcidos de 50 cm de largo 40 de ancho y 15
de profundidad con una humedad relativa de 40% y una temperatura de 25°C. En los dos
recipientes se colocaron una capa de arena de un centímetro, una reja plástica con espacios
cuadrados de 3x3 cm a una distancia de 3 cm por encima de la arena y sobre los mismos
tubérculos para cubrir toda el área de la caja. Sobre la reja plástica se colocaron los tubérculos
infectados. Después las larvas de cuarto instar salieron de los tubérculos hacia la arena en donde
pasaban al estado de pupa y al cabo de 10 días se capturaron las polillas adultas mediante viales
de vidrio y se depositaron en un recipiente de plástico de 250 ml. A cada frasco se le acondiciono
un copo de algodón embebido en una solución de sacarosa al 10%, Los frascos con los adultos se
45
ubicaron boca abajo sobre círculos de papel filtro para que las hembras adultas opositaran
(Ilustración 6).
Ilustración 8. Cría masiva de Tecia solanivora.
A) Recolección de Tecia solanivora en papas infectadas, B) cámara de cría, C) alimentación de los adultos, D)
cosecha de huevo.
Fuente: Autores
Se registraron la fecha de colocación de las oviposturas en las cámaras. Al cabo de
una semana que se recolectaron las oviposturas, en cada una de las cámaras se escogieron 5
huevos y se revisaron diariamente con una lupa, se observó el cambio de color de los huevos
y a continuación se registró el día de eclosión de los huevos de cada cámara. El indicativo
que se utilizó para determinar la eclosión de los huevos fueron el color y el aspecto de los
huevos. Después de la eclosión de los huevos se colocaron en papas no infectadas para
esperar la emergencia de las larvas. Se observaron diariamente las cámaras de cría para
registrar el día en que las larvas salieron de los tubérculos como como pre pupas, se
seleccionó 5 larvas por cada cámara de cría para la toma de datos y se enumeró los tubérculos
del 1 al 5 donde las larvas empezaron a empupar, tejiendo una tela para su capullo y
utilizando la arena que se colocó en la cámara; al igual que como se hizo con los huevos y las
46
larvas se escogieron 5 pupas al azar por cada cámara y cada semana se observaron el estado
de las pupas para registrar el día de la presencia de adultos. Luego de haber concluido el
ciclo de vida del insecto en laboratorio se obtuvo el número de días de duración de cada
estadio y el número de huevos para obtener un promedio de cada variable en cada estadio de
cada una de las cámaras de cría utilizando RStudio.
5.2.2. Producción de conidios de los hongos entomopatógenos
La metodología planteada para la producción de Metarhizium anisopliae es basada en la
guía para la producción de Metarhizium anisopliae (Gómez & Mendoza , 2004). A pesar de que
la sepa es comercial se realizó el aislamiento debido a los antecedentes (Gonzalez & Miranda ,
2017), puesto que a ellos al usar el producto directamente al tubérculo no obtuvieron resultados,
pero al cultivarlo nuevamente su eficiencia fue mayor al 83%.
A partir de las conidios aisladas que se obtuvieron de la presentación granular del hongo
comercial de Metarhizium anisopliae de Productos ANISAGRO WP Se sembraron en cajas de
Petri con agar papa dextrosa (PDA). Para evitar el crecimiento de bacterias se agregará una gota
de ácido láctico sobre el medio de cultivo en cada caja y se colocó dentro de una incubadora a 25
°C dejándolos durante un periodo de 7 días, tiempo en el cual el hongo completa su desarrollo y
alcanza a esporular completamente, este proceso se realizó 2 veces hasta obtener un cultivo puro
y de gran cantidad de conidios para la realización de los bioensayos.
5.2.3. Caracterización morfológica
A partir del hongo puro dentro de las cajas Petri, se identificó la taxonomía de este
mediante la morfología de los conidios, conidióforos, hifas y color a partir de la observación en
el microscopio utilizando como guía el libro de biología de hongo (Cepero, Restrepo, Franco,
Cárdenas, & Vargas, 2012). Para esto fue necesario realizar la tinción de azul de lactofenol, la
47
cual es empleada para observación de hongos y así hacer fácil la visualización de las hifas y
conidios.
5.2.4. Preparación para las suspensiones de inóculo
En un vaso de precipitado de 250 ml se vertieron 50 ml de agua destilada estéril, luego se
le adicionaron las esporas del hongo con un asa estéril. A partir de esta solución madre de
esporas se prepararon las siguientes concentraciones: 6,1x105, 6,1x10
4, 6,1x10
3 y
6,1x102 conidios/ml, realizando los conteos mediante la cámara de Neubauer, la cual costa de
una placa que se dividen en dos zonas anchas exteriores y 3 campos pequeños interiores. En el
campo central están grabadas dos cuadrículas de recuento separadas una de otra para facilitar el
conteo de conidios. Con una micropipeta se depositó una gota proveniente de la mezcla entre la
solución y el hongo evaluado en un extremo de la cámara dejando que esta se disperse entre la
cámara de Neubauer y un cubreobjetos en la parte superior.
Al momento de contar las conidios observadas en el microscopio, solo se debe tener en
cuenta los 5 cuadros grandes de la cámara y en cadena por cada uno de los cuadros pequeños
como se evidencia en la Ilustración 6 (Bastidas, 2016).
Ilustración 9. Recuento de cuadros grande de cámara de Neubauer
Fuente: (Bastidas, 2016)
48
Al terminar el recuento de conidios por cada cuadro grande se procedió a aplicar la
Ecuación 1. Permitiendo determinar la concentración de esporas que había en la mezcla entre la
solución y el hongo evaluado (Bastidas, 2016).
𝐶𝑜𝑛𝑐𝑒𝑛𝑡𝑟𝑎𝑐𝑖ó𝑛 =𝑃𝑎𝑟𝑡𝑖𝑐𝑢𝑙𝑎𝑠 𝑐𝑜𝑛𝑡𝑎𝑑𝑎𝑠
𝑠𝑢𝑝𝑒𝑟𝑓𝑖𝑐𝑖𝑒 𝑐𝑜𝑛𝑡𝑎𝑑𝑎 ∗ 𝑝𝑟𝑜𝑓𝑢𝑛𝑑𝑖𝑑𝑎𝑑 𝑐á𝑚𝑎𝑟𝑎 ∗ 𝑑𝑖𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛 (1)
Ecuación 1. Fórmula para recuento con cuadros en cámara de Neubauer
5.2.5. Ensayo para determinar la CL50 de la cepa evaluada en laboratorio
Con el fin de determinar de manera segura las concentraciones a utilizar en los ensayos
con Tecia solanivora, se procedió a emplear el método de diluciones decimales seriadas, donde
se partió de una concentración máxima para el hongo evaluado y para el insecticida comercial.
Con el fin de reducir el orden de las concentraciones se utilizaron 4 tubos de ensayo con 9 ml de
la solución inicial sin ninguno de los dos controles y una micropipeta donde esta se carga cada
vez con 1 ml de la mezcla anterior agitando y cambiando las puntas por cada cambio de tubo,
hasta llegar a las concentraciones deseadas.
Las larvas de tercer estadio de T. solanivora se inocularon con suspensiones del
aislamiento de Metarhizium anisopliae (control biológico) y suspensiones con el principio activo
chlorantraniliprole (control químico) estas suspensiones tuvieron concentraciones de 6,1x105,
6,1x104, 6,1x10
3 y 6,1x10
2conidios/ml, para el control biológico, y concentraciones de 4,6, 0,46,
0,046 y 0,0046 mg / l para el control químico
Los tratamientos se realizaron en cajas Petri en estas se dispuso de 11 larvas de Tecia
solanivora III estadio por caja y 2 ml de agua destilada. Cada uno de los tratamientos contó con
tres repeticiones más el testigo (ilustración 8). Por lo que se tuvo un total de 26 cajas Petri y 286
larvas para este ensayo. Para este ensayo y de acuerdo a la investigación realizada por (Benítez
49
& Duarte, 2016) se determinó que el mejor método de infección en insectos en condiciones de
bioensayo es la inmersión y que el tiempo óptimo de inmersión es de 30 segundos por lo tanto
para ambos controles tanto para el Biológico como el Químico se aplicó la técnica de inmersión
por 30 segundos con cada una de las 480 larvas. Finalmente, se realizó un gráfico del resultado
de los tratamientos en el tiempo por medio del programa Graphpad, y el análisis de varianza y la
prueba de comparación múltiple por Tukey. Con el valor de mortalidad acumulada hasta el
octavo día determinó la CL50 usando el programa ProStat y aplicando el modelo probit.
Ilustración 8. Esquema de los tratamientos para la determinación de la concentración letal media.
Fuente: Autores
Tecia solanivora
Insecticida Chlorantraniliprole
4.6 mg/l
0.46 mg/l
0.046 mg/l
0.0046 mg/l
Testigo
Metarhiziumanisopliae Comercial
6.1 x 105 conidios/ml
6.1 x 104 conidios/ml
6.1 x 103 conidios/ml
6.1 x 102 conidios/ml
50
5.3. Etapa II: Campo (invernadero)
5.3.1. Ensayo para determinar la CL50 de la cepa evaluada en invernadero
Para determinar la CL50 en el invernadero, se diseñó un experimento que consistía en
disponer 10 macetas dentro de un invernadero de 25 m2 distribuidas como se demuestra en la
ilustración 9, cada maceta contenía 2 semillas; 8 macetas se utilizaron para la aplicación de los
controles, 4 para control biológico y 4 para control químico, y 2 macetas se utilizaron como
testigo. Cada maceta represento una réplica para concentraciones de 6,1x105, 6,1x10
4, 6,1x10
3 y
6,1x102conidios/ml, para el control biológico, y concentraciones de 4,6, 0,46, 0,046
y 0,0046mg /
l para el control químico.
Ilustración 9. Modelo experimental de pruebas en invernadero.
Fuente: Autores
El cultivo tuvo una duración de 4 meses, las aplicaciones de los controles biológico y
químico preparadas previamente en el laboratorio y transportadas al invernadero en el municipio
de Suesca, se hicieron al mes, 2 meses y medio y 3 meses desde el momento de la siembra, esto
51
para asegurar que el cultivo no se contaminara, una hora después de la última aplicación se
adicionaron los huevos tomados de la cría de Tecia solanivora (ilustración 10); a los 27 días los
huevos pasaron al estadio larval y allí se pudo determinar el número de larvas infectadas por
maceta, y así mismo se determinó el porcentaje de mortalidad por cada concentración, dentro de
este periodo de tiempo se realizaron las ultimas aplicaciones de los controles por aspersión a los
7, 14 y 21 días. Para calcular la CL50 se realizó la curva de mortalidad a diferentes
concentraciones y se linealizó mediante la transformación Probit. Las condiciones ambientales
del invernadero se mantuvieron inspeccionadas con un medidor de temperatura y humedad,
manteniendo una humedad relativa de 40% y una temperatura de 25°C, condiciones que se
controlaron por la cantidad de agua aplicada a las plantas y la ventilación del invernadero.
5.3.2. Determinación de la eficiencia del control biológico y químico
Cuando finalizó el cultivo se retiraron las papas cosechadas por cada maceta y se
contaron y pesaron los tubérculos infectados y los sanos, luego se sumó el total de todas las
macetas y se determinó la eficiencia con el número de tubérculos, teniendo en cuenta la ecuación
2.
%Eficiencia =#tuberculos sanos totales
#tuberculos totales cosechados x 100
Ecuación 2. Determinación de la eficiencia en número
52
6. Resultados y Discusión
6.1. Cría de Tecia solanivora
En las posturas se hizo un conteo de huevos para tener una idea de la cantidad y la
velocidad de reproducción, alrededor de 18-31 huevos fueron puestos por ovipostura. Según
Niño (2004), cada hembra fecundada puede colocar entre 150 y 360 huevos, bien sea
individualmente o en grupos, y la viabilidad de estos puede variar entre el 78 y el 98% por
diferentes aspectos ya sea por la alimentación o condiciones ambientales. Teniendo en cuenta la
información descrita anteriormente y comparándolo con los resultados obtenidos en laboratorio
(ilustración 10) se observa una diferencia en la postura de los huevos, esta diferencia se podría
presentar debido a la alimentación ya que para este diseño experimental se utilizó una solución
de sacarosa al 10% y según la revisión sobre Tecia solanivora del Centro y Suramérica, la
alimentación en base a miel contribuye a que las hembras coloquen mayor cantidad de huevos
(Echeverría & Enriquez, 2006). Suponiendo que el alimento podría ser el causante de la carencia
de huevos.
Ilustración 10. Modelo experimental de pruebas en invernadero.
Fuente: Autores
53
En él grafico 1 se muestra el tiempo de duración promedio de cada estadio, estos
resultados son el producto del análisis del total de individuos observados en cada una de las
cámaras que se puede observar en el anexo A. El promedio de vida durante los cinco estadios del
insecto de la polilla de papa (Tecia solanivora) requiere alrededor de 74 días, desde huevo hasta
la muerte de los adultos. El estadio promedio más largo es el de la larva con 25,3 días y el más
corto prepupa con 2,6 días en condiciones de laboratorio con una temperatura promedio de 25 °C
y una humedad relativa promedio de 40 %; cabe señalar que el tiempo de duración de cada
estadio de desarrollo puede variar de acuerdo a la temperatura y la humedad relativa del lugar
donde habitan las polillas. El estudio de Barragán (2005) que se desarrolló a una temperatura de
23 °C y 83% de humedad relativa, la incubación de los huevos duro 10 días, en la fase larval 26
días y en la etapa de pupa duro 27 días aproximadamente, con un total de 63 días hasta la
eclosión de la pupa, siendo este tiempo mayor en comparación con este estudio que fue de 59,3
días hasta esta fase. Concluyendo de esta forma que el ciclo de vida si está influenciado
principalmente por la temperatura; por lo que a temperaturas más altas el ciclo se acorta.
Gráfico 1. Ciclo biológico de la polilla del cultivo de papa (Solanum tuberosum) Fuente: Autores
Tecia solanivora en su etapa de adulto registro aproximadamente 15 días, en su fase de
huevo el tiempo de incubación fue de 11 días, en su etapa larval duro aproximadamente 25 días y
54
finalmente en su etapa de pupa duro 13 días a una temperatura de 25 °C y una humedad relativa
de 40 %; condiciones que fueron dadas en las cámaras de cría para determinar la duración en
días de la vida de Tecia solanivora, que es la principal plaga que afecta al cultivo de papas que
provoca enormes pérdidas económicas.
Por tal razón es necesario tener el conocimiento de la duración del periodo en que el
insecto completa su ciclo de vida (huevo-adulto), de manera que con una vigilancia adecuada de
la plaga se podrá predecir en qué etapa del cultivo se presenta las mayores poblaciones del
insecto para así determinar las prácticas y las medidas de control adecuado Ordoñez et al. (2012).
6.2. Caracterización morfológica de Metarhizium anisopliae
A los 8 y 15 días después de la siembra de la cepa comercial de M. anisopliae se
efectuaron observaciones para describir las características morfológicas en cuanto al color y
forma del borde (Ilustración 11). A los 7 días la cepa presenta un borde circular muy definido,
con colores verde grisáceo claro y verde grisáceo muy oscuro, a los 15 días, se presenta
abundante esporulación, con un color verde oscuro con borde circular definido. Las diferentes
tonalidades de verde observados en las colonias son características de M. anisopliae, de acuerdo
a lo manifestado por Romero et al. (1997). Debido a que M. anisopliae tiene una variabilidad
morfológica en cuanto a tonos de la esporulación que varían entre verde, amarillo y negro
verdoso, este parámetro no es un indicador morfológico para diferenciar entre aislamientos de
una misma especie.
55
Ilustración 11. Aislados de Metarhizium anisopliae. en medio PDA. A) 8 días B) 15 días
Fuente: Autores
La identificación de la cepa comercial se realizó mediante la comparación del libro de
Cepero et al. (2012), tomando como base sus estructuras de reproducción. El hongo se
caracterizó por presentar conidios cilíndricas, hialinas de extremo redondo en cadenas.
6.3 Determinación de la CL50 del control Biológico (Metarhizium anisopliae) en
laboratorio
Para los bioensayos del control biológico en laboratorio se utilizó un grupo control (agua
destilada) y cuatro concentraciones diferentes (6,1x105, 6,1x104, 6,1x103, 6,1x102 conidios/ml).
Estas concentraciones se obtuvieron mediante la dilución decimal seriado a partir de la solución
madre o de la concentración inicial que se sacó por medio del conteo de conidios en la cámara de
Neubauer. Estas cuatro concentraciones fueron evaluadas sobre larvas de tercer instar de Tecia
solanivora, debido a que los primeros estadios de lepidópteros son los más vulnerables a
distintos factores ambientales Bosa et al, (2004).
En el grafico 2, se observa los valores promedios del porcentaje de mortalidad acumulada
en larvas de tercer estadio de Tecia solanivora, registrados a las 48, 96, 144, 192 y 240 horas de
exposición en las cuatro concentraciones de Metarhizium anisopliae como se puede evidenciar
en el Anexo B, los cuatro tratamientos evaluados presentaron una mortalidad acumulada superior
56
al 50% antes de las 240 horas. Se presenta una diferencia entre las concentraciones debido a que
entre mayor es la concentración del hongo, mayor es la mortalidad generada, así mismo se puede
evidenciar que la mortalidad aumentó a medida que aumentaba el período de exposición.
Se evidencia que la concentración de 6,1x105 conidios/ml presenta el mayor número de
larvas muertas con un porcentaje de mortalidad del 27% a las 48 horas a diferencia de la
concentración de 6,1x102 conidios/ml que presenta un porcentaje de mortalidad del 9,1%. A las
240 horas se obtuvo un porcentaje del 63,6% para una concentración de 6,1x102 conidios/ml
llegando hasta una mortalidad del 90,9% con una concentración de 6,1x105 conidios/ml, lo que
permite inferir que a concentraciones altas con base a los resultados del presente estudio el
hongo es efectivo para el control de las larvas de Tecia solanivora expuestas a mayor tiempo,
pero a pesar de eso el porcentaje de mortalidad aun siendo en concentraciones menores el efecto
del hongo es efectivo; esto se puede corroborar con González et al. (1994), donde mencionan
que el comportamiento del hongo entomopatógeno ante la infección a insectos plaga tiende a ser
proporcional la concentración y la mortalidad. Esta idea que es compartida por Castro (1997),
que obtuvo una mortalidad entre 11,3% y 46% utilizando concentraciones de 1 x 107 conidios/ml
de 23 aislamientos de los géneros Beauveria y Metarhizium, para el control del gusano blanco de
la papa; Torres & López, (1996) obtuvo mortalidades del 100% en períodos de 9 a 11 días, con
una concentración de 1 x 109 conidios/ml y en períodos de 21 días para una concentración de 1 x
107 conidios/ml en el gusano blanco de la papa (Premnotrypes vorax); García et al. (2010),
Evaluaron la efectividad de tres hongos entomopatógenos (Beauveria bassiana, Metarhizium
anisopliae y Paecilomyces fumosoroseus) para el control de plagas en cultivos de hortalizas, en
una concentración de 1,2 x 1012 esporas/ml generando mortalidad superior al 80% a las 72 horas
de aplicación y Gonzalez & Miranda, (2017) obtuvieron resultados con una mortalidad mayor al
57
80% con una concentración en Metarhizium anisopliae de 6,6 x 105 conidios/ml para el control
de Tecia solanivora.
48 96 144 192 240
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
Tiempo (Horas)
La
rv
as
Mu
erta
s %
Testigo
6.1x10^5 conidias/ml
6.1x10^4 conidias/ml
6.1x10^3 conidias/ml
6.1x10^2 conidias/ml
Gráfico 2. porcentaje de mortalidad de larvas de Tecia solanivora con diferentes concentraciones de Metarhizium
anisopliae
Fuente: Autores
En la Ilustración 12 se observa la aparición de micelio sobre el cadáver de las larvas, y en
el grafico 3 se presentan los registros de aparición de micelio en función del tiempo de
observación después de la muerte de las larvas. De acuerdo con estos resultados, Metarhizium
anisopliae presenta la aparición de micelio sobre las larvas muertas con una distribución similar
a la mortalidad y comenzó a esporular entre el tercer y cuarto día posteriores a la detección de los
individuos muertos.
58
Ilustración 12: Larvas de Tecia solanivora infectadas por Metarhizium comercial
Fuente: Autores
M. anisopliae mostró un porcentaje del 72,7 % de esporulación teniendo en cuenta el
total de larvas, en las concentraciones más altas. Este resultado es importante porque la
esporulación del hongo desde su hospedante, significa la formación de una nueva fuente de
inóculo para la infección de nuevas poblaciones de insectos plagas. Por lo tanto, si el hongo
presenta un porcentaje de esporulación alta, tendrá más posibilidades de ser diseminado por
agentes bióticos y abióticos (Rivera & Pimto, 2002). Es importante tener en cuenta la
esporulación del hongo ya que nos ayuda a comprobar que las larvas murieron por el efecto de
los mismos y no por otros factores como por ejemplo la inhibición de la alimentación. Por otra
parte, la esporulación es un indicador de calidad de los hongos entomopatógenos. Tal como es el
caso de García et al. (2011), que utiliza como indicador de selección la rápida esporulación de
los aislados de B. bassiana y M. anisopliae para el control de S. frugiperda un lepidóptero que
ataca a diversos cultivos tales como maíz y algodón.
Ibarra et al. (2005), Encontraron que M. anisoplieae cepa M362 comenzó a esporular a
los tres días posteriores a la detección de los individuos muertos de Dalbulus maidis y tuvo el
mayor porcentaje de esporulación de 52,8 % entre todos los aislados empleados. Los resultados
59
coinciden con estos autores en el tiempo en el que el hongo comenzó a esporular en las larvas
muertas.
48 96 144 192 240
0
10
20
30
40
50
60
70
80
Tiempo (Horas)
%L
arv
as
co
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o
control
6.1x10^5 conidias/ml
6.1x10^4 conidias/ml
6.1x10^3 conidias/ml
6.1x10^2 conidias/ml
Figura 8. Aparición del micelio en larvas de Tecia solanivora
Fuente: Autores
En la tabla 4, se observa los valores promedios del porcentaje de mortalidad acumulada
en larvas de Tecia solanivora, que causo el compuesto activo Clorantraniliprole (Anexo C) a
diferentes concentraciones y en los diferentes tiempos de evaluación. A las 48 horas después de
la aplicación del insecticida no se presenta ningún efecto sobre las larvas de Tecia solanivora; a
las 96 horas se aprecian porcentajes bajos de mortalidad en las concentraciones altas, con
mortalidades de 27,3% y 18,2% en las concentraciones de 4,6 mg/l y 0,46 mg/l, además de no
observarse mortalidad en las concentraciones bajas de 0,046 mg/l y 0,0046 mg/l. solamente a las
144 horas de inicios de la prueba se presenta un ligero incremento en la mortalidad, con
porcentajes de 45,3%, 27,3 y 9,1% en las concentraciones de 4,6 mg/l, 0,46mg/l, y 0,046 mg/l
respectivamente. Ya para finalizar a las 240 horas, la concentración más alta 4,6 mg/l presento
una mortalidad de 72.2% como porcentaje máximo de mortalidad; mientras las concentraciones
de 0.046 mg/l y 0.0046 mg/l presentaron los porcentajes de mortalidad más bajos en los ensayos
de 27.3% y 9.1%. Resalta el hecho de que cuanto mayor es la concentración de dicha sustancia
60
química, mayor es la mortalidad generada. Es importante señalar que, en un principio, las larvas
cambiaron a un color oscuro y sus movimientos se vieron entorpecidos, esto concuerda con lo
que menciona Yu (2008), que dice que Clorantraniliprole afecta rápidamente los músculos
esqueléticos y cardiacos, causando una rápida cesación en la alimentación.
Tabla 4.Porcentaje de mortalidad de larvas de Tecia solanivora (número de larvas muertas) de acuerdo con las
concentraciones del control Químico Clorantraniliprole
El total de larvas utilizadas por tratamiento en el bioensayo fue = 11 larvas equivalentes al 100%
Por lo tanto, se pone de manifiesto que Clorantraniliprole presenta una eficacia muy baja
para larvas de tercer estadio de Tecia solanivora. De hecho, las larvas que sobrevivieron a este
ensayo, se desarrollaron con normalidad hasta el estado adulto. Estos resultados concuerdan con
Unsar et al. (2020), que observaron que el Clorantraniliprole causó la menor mortalidad en larvas
de Spodoptera frugiperda Mayo , J. (2012) entre 6,67% y 73,33% en un periodo de 96 horas
utilizando dosis de 0,01 mg/gr a 56,8mg/g y pone de manifiesto que el producto es eficaz,
cuando la dosis es demasiado elevada. Aunque existen pocos estudios sobre este insecticida
con Tecia solanivora, se han realizado estudios en Hemípteros, por ejemplo, Biondi et
al. (2012) que no observaron toxicidad de Clorantraniliprole en Orius laevigatus, así como
en Castro et al. (2013) que tampoco detectaron la toxicidad de este insecticida para Podisius
nigrispinus y Supputius cincticeps. Castro et al. (2013) observaron que el Clorantraniliprole fue
el insecticida menos tóxico y más selectivo para Podisus nigrispinus con estas especies de
prueba experimentando mortalidades de menos del 10% cuando se expone a 133 mg/ml.
Tratamientos
% Mortalidad
Horas
48 96 144 192 240
Control 0 0 0 0 0
4,6 mg/l 0 27.3 45.5 63.6 72.2
0,46 mg/l 0 18.2 27.3 36.4 36.4
0,046 mg/l 0 9.1 9.1 27.3 27.3
0,0046 mg/l 0 0 0 0 9.1
61
Mediante el análisis de Probit se determinó los valores de mortalidad mediante las CL50
del control Biológico M. anisopliae y del control químico Clorantraniliprole para larvas del
tercer estadio de Tecia solanivora (Tabla 5) (anexo F) . Para M. anisopliae se realizó el análisis a
las 240 horas. El control al 50% (CL50) fue de 2,1x103conidios/ml con límites de confianza
605,18– 7434,35 conidios /ml estos datos están dentro del rango de concentraciones planteadas
por este ensayo. Por otro lado, la CL50 para el insecticida Clorantraniliprole, fue de 0,51 mg/l con
límites de confianza de 0,121 – 2,197 mg/l. De acuerdo a estos datos podemos indicar que el
control químico (Clorantraniliprole) requiere una concentración alta para controlar la población
de larvas de Tecia solanivora.
Para el caso de M.anisopliae González et al. (2017), en un experimento en laboratorio
con cepas de Beauveria bassiana y Metarhizium anisopliae para el control de larvas de Tecia
solanivora determino una concentración letal Cl50 1,2x107 conidios/ ml dato superior al del
presente trabajo y otro estudio realizado por Mafla et al (2004), utilizando el método por
inmersión con cepas de Metarhizium anisopliae para tratar larvas de Ancognatha scarabaeiodes
resultó en que una de las cepas dio una CL50 de 2,1 x 107 conidios/ml, superior al obtenido en
este trabajo.
Tabla 5. Concentración letal media (CL50) del control biológico (Metarhizium anisopliae) y del control químico
(Clorantraniliprole) en larvas de Tecia solanivora a las 240 horas
Control CL50 Límite de confianza 95%
Inferior Superior
Control Biológico
(Metarhizium ) 2,1x103 conidios/ml
605,18
conidios/ml
7,4x103
conidios/ml
Control Químico
(Clorantraniliprole) 0,51 mg/l 0,121 mg/l 2,197 mg/l
62
6.4. Determinación de la CL50 en invernadero de Metarhizium anisopliae y el insecticida
comercial sobre Tecia solanivora
Para la determinación de la CL50 en el invernadero, se realizaron previamente las
diluciones de los controles en el laboratorio y se transportaron al lugar de la aplicación en el
municipio de Suesca, Cundinamarca. Las aplicaciones se realizaron teniendo en cuenta la
dilución decimal seriada tanto para Metarhizium anisopliae, como para el insecticida con
principio activo Clorantraniliprole.
El conteo del número de larvas muertas y vivas de Tecia solanivora presentados en él
invernadero, se realizó al día 27 de haber puesto los huevos en el cultivo, cuando estos ya
hubieran pasado a estadio larval; dichos datos se evidencian en los gráficos 3 y 4. De acuerdo a
la figura 9 la concentración del hongo Metarhizium anisopliae correspondiente a 6,1 x 105
conidios/ml tuvo una mayor respuesta ante el porcentaje de individuos muertos, presentando una
mortalidad del 80%.
Según lo reportado por Lezama et al. (2005), donde se evaluó la efectividad de
Metarhizium anisopliae, en el control de larvas de S. frugiperda en un cultivo de maíz, bajo
condiciones de campo (no invernadero) a la dosis de 1 x 1012 conidios por hectárea; no logró
alcanzar resultados exitosos, generando que el insecticida Triclorfón (800 g/ha) tuviera un mejor
resultado; al compararse con los resultados obtenidos en este estudio, las condiciones
ambientales controladas dentro del invernadero fueron un punto clave para la actividad efectiva
del hongo, puesto que Metarhizium anisopliae obtuvo mayor porcentaje de mortalidad que
Clorantaniliprole.
63
Gráfico 3. Porcentaje de mortalidad de acuerdo a la variación de la concentración de Metarhizium anisopliae en el
invernadero.
Fuente: Autores
Con respecto a la grafico 4 la concentración de mayor respuesta de porcentaje de
individuos muertos para el control químico fue de 4,6 mg/l, presentando una mortalidad del 60%,
determinando que Metarhizium anisopliae presenta un porcentaje mayor de mortalidad a pesar
de que la concentración del control químico recomendada en la ficha técnica del producto fuera
la óptima aplicada para un cultivo de papa.
Como lo indican Ugon et al. (2017), Donde evaluaron la eficiencia de Clorantraniliprole
en un cultivo de soja para combatir larvas de Anticarsia gemmatalis, en la fase de campo
exponen que el Clorantraniliprole obtuvo una alta eficiencia en mortalidad, pero la ayuda del
hongo entomopatógeno, que actúa en este estudio como un parasitoide ayudo a que la población
se mantuviera por debajo del umbral de acción (cinco larvas/m mayores a 1,5 cm).
64
Gráfico 4 Porcentaje de mortalidad de acuerdo a la variación de la concentración del insecticida con principio
activo Clorantraniliprole en el invernadero
Fuente: Autores
Usando el programa ProStat se determinó la CL 50 para cada uno de los controles
evaluados, registrando el número de larvas muertas y sus respectivas concentraciones,
obteniendo como resultado los datos evidenciados en la Tabla 6 y 7.
Para Metarhizium anisopliae la concentración letal media en la fase de campo
(invernadero) fue de 2,3 x 104 conidios/ml, concordando con un estudio realizado en campo y
con otro modelo biológico, donde indica que las cepas de M. anisopliae con CL50 de 1,57 x 104 a
6,33 x 104 conidios/ml, presentaron una mayor efectividad para matar larvas de garrapata en
pasto López et al. (2009), y no causando afectaciones a otros grupos como ortópteros donde la
CL50 es de 7,5 x 106 conidios/ml (Miao Jia, y otros, 2016).
Tabla 6. Concentración letal media (CL50) con Metarhizium anisopliae en larvas de Tecia solanivora en
invernadero.
CL50 Metarhizium
(conidios/ml)
Límite de confianza 95%
Inferior Superior
2,3 x 104 3,6 x 103 1,45 x 105
El control químico con principio activo Clorantraniliprole presento una concentración
letal media de 0.61mg/l; en cuanto a ortópteros donde se presenta CL50 de 4,76 mg/l Miao Jia et
65
al. (2016), pero demostrando una alta toxicidad para micro crustáceos como Ceriodaphnia dubia
y Daphnia magna Straus donde la CL50-48h es de 0,032 y 0,0286 mg/l respectivamente (Soriano
, 2015).
Tabla 7. Concentración letal media (CL50) con el principio activo Clorantraniliprole en larvas de Tecia solanivora
en invernadero
CL50 Principio activo
Clorantraniliprole (mg/l)
Límite de confianza 95%
Inferior Superior
0,61 0,0408 3,1402
6.5 Eficiencia del control biológico y químico
Al finalizar el cultivo se determinó el conteo de tubérculos infectados y los sanos por
cada maceta (Anexo D), la eficiencia se determinó con respecto a la ecuación 2 y los resultados
se evidencian en la grafico 5 y 6. Para la eficiencia de Metarhizium anisopliae se observa que la
maceta a la que se le adicionó el control con la concentración de 6,1 x 105 (conidios/ml) fue la
más eficiente y la que presentó el menor porcentaje de eficiencia es la que corresponde a 6,1 x
102 (conidios/ml) como se observa en la grafico 5.
Según Utus (2017), en un estudio en campo abierto en un cultivo de papa con Beauveria
bassiana y Metarhizium anisopliae se demuestra que tiene similar comportamiento que la acción
del control químico, este último además de tener un costo alto, presenta efectos negativos contra
otros organismos y al medio ambiente, en comparación con Metarhizium anisopliae que tienen
un amplio rango de hospederos, no causa resistencia a las plagas, no es tóxico para el hombre,
animales o plantas, no contamina el ambiente, puede aplicarse en cualquier época del desarrollo
del cultivo, presentan una alternativa de control dentro del manejo integrado sobre plagas que
afectan al cultivo de papas (Utus, 2017); indicando que el control biológico a pesar de no tener
condiciones ambientales controladas dentro del invernadero presento una alta eficiencia en
66
cuanto a la productividad de un cultivo de papa, lo que demuestra que un control químico puede
remplazarse por un control biológico.
Gráfico 5. Eficiencia en porcentaje de Metarhizium anisopliae en el invernadero
Fuente: Autores
Para el control químico la concentración que obtuvo un mayor porcentaje de eficiencia es
la que corresponde a 4,6 mg/l y la que presentó la menor eficiencia fue la concentración de
0,0046 mg/l (ver gráfico 6). Según Perera et al. (2016), Manejando los requerimientos por la
ficha técnica del producto, Clorantraniliprole presentó una eficiencia del 39.6% con una dosis
máxima de 8 mg/l en condiciones de campo abierto para el mismo modelo de estudio, resultados
que pudieron variar con este informe por las condiciones ambientales controladas dentro del
invernadero; sin embargo, el control biológico fue más efectivo que el control químico con 80 y
60% de eficiencia respectivamente. Cabe resaltar que para el grupo testigo todos los tubérculos
se encontraron afectados por Tecia solanivora.
67
Gráfico 6. Eficiencia de Clorantraniliprole en el invernadero
Fuente: Autores
6.6. Comparación de resultados entre laboratorio e invernadero
Teniendo en cuenta los resultados obtenidos en laboratorio y campo se realizó una
comparación entre ambos en cuanto al porcentaje de mortalidad de Tecia solanivora, como se
observa en la grafico 7 para Metarhizium anisopliae la mortalidad fue mayor en laboratorio en
todas las concentraciones, sin embargo, hay que destacar que para la concentración de 6,1 x 105
conidios/ml el porcentaje entre el laboratorio e invernadero fue cercano con un 80 y 73%
respectivamente.
Gráfico 7. Comparación del porcentaje de mortalidad de Tecia solanivora entre laboratorio e invernadero para
Metarhizium anisopliae
Fuente: Autores
68
La CL50 en campo fue más alta presentando 2,3 x 104 conidios/ml en comparación del
laboratorio que fue de 2,1 x 103 conidios/ml, lo que indica que es necesaria una concentración
mayor en campo para que muera la mitad de la población de larvas, esto debido a que en
laboratorio tiene una variabilidad menor que en invernadero.
Gráfico 8. Comparación del porcentaje de mortalidad de Tecia solanivora entre laboratorio e invernadero para
Clorantraniliprole
Fuente: Autores
En la grafico 8 se puede observar que después de 0,46 mg/l de Clorantraniliprole
aplicado, el porcentaje de mortalidad en el invernadero aumento, en comparación con los datos
de laboratorio, así mismo se puede observar que la concentración más baja de 0,0046 mg/l
presentó el doble de mortalidad en el invernadero que en campo; sin embargo, la CL50 demuestra
que se necesita una concentración cercana en ambos lugares experimentales para controlar la
mitad de la población de larvas, esto, teniendo en cuenta que la CL50 en laboratorio fue de 0,51
mg/l y en invernadero de 0,61 mg/l, datos que no son soportados con antecedentes por la
ausencia de estudios similares.
El ANOVA realizado con una significancia del 0,05 arrojo que para el control biológico
la probabilidad es de 0,0017 indicando que no hay diferencias significativas entre el porcentaje
69
de mortalidad en invernadero y laboratorio, siendo este contrario con el control químico donde si
hay diferencias significativas con una probabilidad de 0,79 (Anexo E)
7. Conclusiones
A partir del trabajo realizado se logró cumplir con los objetivos, obteniendo una CL50 en
laboratorio del control biológico (Metarhizium anisopliae) de 2,1 x 103 conidios/ml y del control
químico (Clorantraniliprole) de 0,68 mg/l para el manejo de Tecia solanivora.
El porcentaje de mortalidad más alto que presento las larvas de Tecia solanivora para
Metarhizium anisopliae fue de 6,1 x 105 conidios/ml, obteniendo un porcentaje del 90,9% a
diferencia de la concentración de 6,1 x 102 conidios/ml que presento un porcentaje del 63,6% a las
240 horas de ser aplicado, lo que nos permite inferir que a concentraciones altas el hongo
entomopatogeno es más efectivo para el control de larvas de Tecia solanivora. Clorantraniliprole
obtuvo el mismo comportamiento que Metarhizium anisopliae pero con un porcentaje de
mortalidad menor del 72,7% con una concentración máxima aplicada del 4,6 mg/l.
Para campo (invernadero) se determinó una CL50 para Metarhizium anisopliae de 2,3 x 104
conidios/ml y para Clorantraniliprole de 0,61 mg/l, indicando que el control biológico es más
eficaz que el control químico en el manejo de las larvas de tecia solanivora; al igual que en el
laboratorio utilizando las mismas concentraciones el porcentaje de mortalidad fue mayor para
Metarhizium anisopliae con un 80% y para Clorantraniliprole con un 60%.
La eficiencia lograda con los controles biológico y químico alcanzo un 80% para
Metarhizium anisopliae y un 73% para Clorantraniliprole, aunque los porcentajes son cercanos,
demuestran que el control químico puede ser remplazado por el control biológico ya que este suele
70
ocasionar un menor impacto en el ambiente, es menos costoso y se puede aplicar en cualquier
etapa de desarrollo de la planta.
Los resultados presentados a través de la presente investigación sugieren la utilización del
hongo entomopatógeno Metarhizium anisopliae para el control de larvas de Tecia solanivora en
el manejo integral de la plaga, puesto que mostró resultados similares a los alcanzados con el
control químico.
Se determinó la duración del periodo comprendido entre la primera liberación de adultos
de T. solanivora y el inicio de la captura de adultos de la segunda generación en condiciones de
laboratorio, con temperatura media de 25 °C y una humedad relativa promedio de 40 %, la polilla
guatemalteca completa su ciclo de vida en un período de 74,4 días.
71
8. Recomendaciones
Realizar el mantenimiento de la cría de Tecia solanivora, para evitar que factores
externos incidan en los resultados de las pruebas.
Con base en los resultados de este trabajo, se recomienda realizar investigaciones en las
que se determinen con mayor precisión los umbrales de advertencia y toma de decisiones con
respecto al control de la polilla guatemalteca.
Se deben asegurar condiciones óptimas como la temperatura y humedad en el laboratorio
y el invernadero para evitar cualquier cambio inesperado en el mismo, y evitar alteraciones a los
organismos utilizados para las pruebas y por lo tanto en los resultados obtenidos.
Debido a que estas pruebas se realizaron en un ambiente controlado tanto en laboratorio
como invernadero, se recomienda desarrollar estudios en campo abierto con las concentraciones
establecida en la presente investigación.
Teniendo en cuenta la eficiencia de productividad de la papa en el invernadero, se
recomienda no realizar siembra dentro de este, ya que el tubérculo no presentó una alta
productividad en comparación con la de un cultivo en condiciones normales (no invernadero).
72
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80
10. Anexos
Anexo A. Resultados estadísticos Cría de Tecia solanivora
Ciclo de vida de Tecia solanivora
Recipiente Fechas N de
huevos Individuos
Días T° H%
H L PP P A
CAMARA
1 15/01/2019 580
1 11 27 2 19 15 25 45
2 11 25 2 19 15 25 45
3 10 24 3 20 14 25 45
4 11 26 2 20 16 25 45
5 12 26 3 20 15 25 45
CAMARA
2 12/03/2019 644
1 11 25 3 19 14 25 45
2 10 26 3 21 15 25 45
3 12 24 2 21 16 25 45
4 12 27 3 20 16 25 45
5 11 25 2 20 14 25 45
CAMARA
1 13/05/019 647
1 12 24 3 20 15 25 45
2 12 26 3 21 15 25 45
3 10 24 3 21 15 25 45
4 12 24 3 19 16 25 45
5 10 26 3 21 15 25 45
CAMARA
2 12/07/2019 617
1 11 25 2 21 14 25 45
2 12 25 2 21 16 25 45
3 11 27 3 20 16 25 45
4 12 25 3 20 15 25 45
5 10 25 2 21 16 25 45
Prueba de homogeneidad de varianzas
Estadístico Test de
Bartlett df Sig.
6. 3496 4 0.1745
81
ANOVA
Suma de
Cuadrados gl Media cuadrática F Sig.
Entre Grupos 6033.2600 4 1508.3150 2416.3562 0.0
Dentro de Grupos 59.3000 95 0.6242
Total 6092.5600 99
82
Anexo B. Registro de mortalidad Control biológico
48 HORAS
TRATAMIENTOS I II III
control 0 0 0
6.1x105 5 5 5
6.1x104 3 2 3
6.1x103 2 2 0
6.1x102 1 1 1
96 HORAS
TRATAMIENTOS I II III
control 0 0 0
6.1x105 6 6 5
6.1x104 4 4 4
6.1x103 3 2 3
6.1x102 1 1 2
144 HORAS
TRATAMIENTOS I II III
control 1 1 1
6.1x105 8 7 8
6.1x104 6 6 6
6.1x103 6 6 5
6.1x102 4 4 3
192 HORAS
TRATAMIENTOS I II III
control 1 1 1
6.1x105 10 9 10
6.1x104 8 8 6
6.1x103 6 7 6
6.1x102 6 7 5
240 HORAS
TRATAMIENTOS I II III
control 3 3 3
6.1x105 10 9 10
6.1x104 9 8 8
6.1x103 8 9 8
6.1x102 7 8 7
83
Anexo C. Registro de mortalidad Control Químico
48 HORAS
TRATAMIENTOS I II III
control 0 0 0
4,6 mg/l 0 0 1
0,46 mg/l 0 0 0
0,046 mg/l 0 0 0
0,0046 mg/l 0 0 0
96 HORAS
TRATAMIENTOS I II III
control 0 0 0
4,6 mg/l 3 2 3
0,46 mg/l 2 2 2
0,046 mg/l 1 1 0
0,0046 mg/l 0 0 0
144 HORAS
TRATAMIENTOS I II III
control 0 0 0
4,6 mg/l 5 5 5
0,46 mg/l 3 3 2
0,046 mg/l 1 1 1
0,0046 mg/l 0 0 0
192 HORAS
TRATAMIENTOS I II III
control 0 0 0
4,6 mg/l 7 7 6
0,46 mg/l 4 4 3
0,046 mg/l 2 1 2
0,0046 mg/l 0 0 0
240 HORAS
TRATAMIENTOS I II III
control 0 0 0
4,6 mg/l 7 7 7
0,46 mg/l 4 4 4
0,046 mg/l 2 1 2
0,0046 mg/l 0 1 1
84
Anexo D. Eficiencia del control biológico y químico en campo
Control químico
Tratamiento Concentración
(conidios/ml)
N° Total
tubérculos
N° Tubérculos
sanos
N° Tubérculos
infectados
Eficiencia
(%)
Maceta 1 420 11 8 3 73
Maceta2 42 12 5 7 42
Maceta 3 4,2 9 4 5 44
Maceta 4 0,42 9 2 7 22
Maceta 5 Testigo 10 0 10 0
Metarhizium anisopliae
Tratamiento Concentración (conidios/ml)
N° Total tubérculos
N° Tubérculos sanos
N° Tubérculos infectados
Eficiencia (%)
Maceta 1 6,1 x 105 10 8 2 80
Maceta2 6,1 x 104 12 6 6 50
Maceta 3 6,1 x 103 10 3 7 30
Maceta 4 6,1 x 102 8 2 6 25
Maceta 5 Testigo 13 0 13 0
85
Anexo E. Resultados estadísticos para la comparación entre condiciones de laboratorio e
invernadero
Control biológico
Control químico
Análisis de varianza de dos factores con una sola muestra por grupo
RESUMEN Cuenta Suma Promedio Varianza
Fila 1 2 0,091 0,0455 0,0041405
Fila 2 2 0,886 0,443 0,074498
Fila 3 2 1,127 0,5635 0,0534645
Fila 4 2 1,227 0,6135 0,0257645
Fila 5 2 1,709 0,8545 0,0059405
Columna 1 5 1,95 0,39 0,088
Columna 2 5 3,09 0,618 0,096624
ANÁLISIS DE VARIANZA
Origen de las variaciones Suma de cuadrados Grados de libertad Promedio de los cuadrados F Probabilidad Valor crítico para F
DOSIS 0,704648 4 0,176162 20,81801 0,006109614 6,388232909
CONDICIONES 0,12996 1 0,12996 15,358071 0,017263144 7,708647422
Error 0,033848 4 0,008462
Total 0,868456 9
Análisis de varianza de dos factores con una sola muestra por grupo
RESUMEN Cuenta Suma Promedio Varianza
Fila 1 2 0 0 0
Fila 2 2 1,327 0,6635 0,0080645
Fila 3 2 0,989444444 0,494722222 0,00505571
Fila 4 2 0,723 0,3615 0,0156645
Fila 5 2 0,318272727 0,159136364 0,009285128
Columna 1 5 1,721717172 0,344343434 0,054705438
Columna 2 5 1,636 0,3272 0,0932662
ANÁLISIS DE VARIANZA
Origen de las variaciones Suma de cuadrados Grados de libertad Promedio de los cuadrados F Probabilidad Valor crítico para F
DOSIS 0,554551458 4 0,138637865 14,85335617 0,011434593 6,388232909
CONDICIONES 0,000734743 1 0,000734743 0,078718788 0,79295459 7,708647422
Error 0,037335095 4 0,009333774
Total 0,592621296 9
86
Anexo F. Memoria de cálculo de CL 50
87
88
89
