FACULDADE DE EXCELÊNCIA EDUCACIONAL DO RIO GRANDE DO NORTE - FATERN UNIVERSIDADE GAMA FILHO - UGF DISCIPLINA DE CITOLOGIA,EMBRIOLOGIA E HISTOLOGIA MICROSCOPIA

FACULDADE DE EXCELÊNCIA EDUCACIONAL DO RIO GRANDE DO NORTE - FATERNUNIVERSIDADE GAMA FILHO - UGF

DISCIPLINA DE CITOLOGIA,EMBRIOLOGIA E HISTOLOGIA

MICROSCOPIA CELULAR: TEORIA E PRÁTICA 1

MICROSCOPIA CELULAR:TEORIA E PRÁTICA

PROFESSORAS: ADRIANA MOTTA MONARA BITTENCOURT DE AMORIM

Profª Monara Bittencourt de AmorimFarmacêutica-Bioquímica 2

BIBLIOGRAFIA CONSULTADA:

1.JUNQUEIRA e CARNEIRO, L.C. Histologia Básica. 9ed.Rio de Janeiro:Guanabara Koogan, 2004.2.Manual de Instruções da BIOVAL, 2007.

MICROSCÓPIO

“APARELHO COM LENTES ÓPTICAS QUE MAXIMIZA UM SER OU ESTRUTURAS MINÚSCULAS A UM TAMANHO DE BOA OBSERVAÇÃO”

BACTÉRIAS

CÉLULAS SANGUÍNEAS

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CÉLULALEUCÓCITOS

Profª Monara Bittencourt de AmorimFarmacêutica-Bioquímica

PRINCIPAIS COMPONENTES DE UM MICROSCÓPIO

O MICROSCÓPIO ÓPTICOMICROSCÓPIO ÓPTICO, É TAMBÉM CONHECIDO COMO MICROSCÓPIO DE LUZ

COMPÕE-SE DE UMA PARTE MECÂNICAPARTE MECÂNICA

QUE SERVE DE SUPORTE PARA A PARTE ÓPTICA

PARTE ÓPTICAPARTE ÓPTICA

É CONSTITUÍDA POR TRÊS SISTEMAS DE LENTES:

O CONDENSADOR, AS OBJETIVAS E AS OCULARES.

4Profª Monara Bittencourt de AmorimFarmacêutica-Bioquímica

PRINCIPAIS COMPONENTES DA PARTE ÓPTICA

CONDENSADORCONDENSADORCONDENSADORCONDENSADOR

SUA FINALIDADE É PROJETAR UM CONE DE LUZ SOBRE AS CÉLULAS

QUE ESTÃO SENDO EXAMINADAS AO MICROSCÓPIO.

APÓS ATRAVESSAR AS CÉLULAS, ESSE FEIXE LUMINOSO, EM FORMA DE

CONE, PENETRA NAS OBJETIVAS.

OBJETIVASOBJETIVASOBJETIVASOBJETIVAS

PROJETAM UMA IMAGEM AUMENTADA , NO PLANO FOCAL DAS

OCULARES, QUE NOVAMENTE A AMPLIA.

OCULARESOCULARESOCULARESOCULARES

AS IMAGENS FORNECIDAS PELA OCULARES PODEM SER PERCEBIDAS PELA RETINA.


CONDENSADOR

OCULARES

OBJETIVAS

LÂMPADA

BASE


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PLATINA

BRAÇO

PINÇA

PARAFUSO MACROMÉTRICO

PARAFUSO MICROMÉTRICO

REVÓLVER

PARAFUSO MACROMÉTRICO

PARAFUSO MICROMÉTRICO

CONDENSADOR

OBJETIVAS

OCULARES

BRAÇO OU SUPORTE

PLATINA

BASE

LÂMPADA


PODER DE RESOLUÇÃO X LIMITE DE RESOLUÇÃO

O PODER DE RESOLUÇÃO DE UM SISTEMA ÓPTICO É A SUA CAPACIDADE DE

SEPARAR DETALHES.

• É EXPRESSO PELO LIMITE DE RESOLUÇÃO.

É A MENOR DISTÂNCIA QUE DEVE EXISTIR ENTRE DOIS PONTOS PARA QUE

ELES APAREÇAM INDIVIDUALIZADOS.

PODER DE RESOLUÇÃOPODER DE RESOLUÇÃO

LIMITE DE RESOLUÇÃOLIMITE DE RESOLUÇÃO



EXEMPLO DE LIMITE DE RESOLUÇÃO::

O QUE DETERMINA, A RIQUEZA DE DETALHES DA IMAGEM FORNECIDA POR UM SISTEMA ÓPTICO É O SEU LIMITE DE RESOLUÇÃO, E NÃO O SEU PODER DE AUMENTAR O TAMANHO DO OBJETO.

É A MENOR DISTÂNCIA QUE DEVE EXISTIR ENTRE DOIS PONTOS PARA QUE ELES APAREÇAM INDIVIDUALIZADOS.

HEMÁCIAS


MICROSCOPIA ÓPTICA EM LÂMINA DE TECIDO

SANGUÍNEO

HEMÁCIAS MICROSCOPIA ELETRÔNICA (ME) DE BACTÉRIAS COMENSAIS

EOSINÓFILOS

LEUCÓCITO

LINFÓCITO

DIFERENÇAS DE IMAGENS ENTRE UM MICROSCÓPIO ÓPTICO (MO) E UM MICROSCÓPIO ELETRÔNICO (ME)

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PLAQUETAS


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DETERMINE QUAL O TIPO DE MICROSCÓPIO QUE SE UTILIZOU NA OBSERVAÇÃO DESSAS IMAGENS


PRINCIPAIS UNIDADES DE MEDIDAS USADAS NA MICROSCOPIA

ESTA UNIDADE ESTÁ SENDO SUBSTITUÍDA PELO NANÔMETRO

MICRÔMETRO (µm) MICRÔMETRO (µm)

NANÔMERO (nm)NANÔMERO (nm)

1mm = 1.000 μm

1μm = 1.000 nm

1nm = 10 ÅÂNGSTROM (Å)ÂNGSTROM (Å)


ESPECIFICAÇÕES DAS OBJETIVAS E SUAS AMPLIAÇÕES

OBJETIVAS(COM OCULAR DE 10X)

AMPLIAÇÃO TOTAL(VER SEMPRE AS OCULARES)

04 x 40 X

10 x 100 X

40 x 400 X

100 x (Sempre usar com óleo de Imersão)

1000 X


OPERAÇÃO (PRÁTICA LABORATORIAL)

NORMAS E CONDUTAS NA PRÁTICA LABORATORIAL

1. OBEDECER TODAS AS NORMAS DE BIOSEGURANÇA (EPI/EPC).

2. LAVAR AS MÃOS NA ENTRADA E NA SAÍDA APÓS A PRATICA.

3. É OBRIGATÓRIO QUE VOCÊ CONHEÇA AS PARTES ÓPTICAS E

MECÂNICAS DOS MICROSCÓPICOS ANTES DE USÁ-LO.

4. NÃO MANUSEAR O APARELHO COM AS MÃOS SUJAS OU MOLHADAS

5. NUNCA DESLOQUE O APARELHO COM A LÂMPADA ACESA.

6. NA REMOÇÃO DO EQUIPAMENTO, SEGURE-O FIRMEMENTE COM UMA

DAS MÃOS NO BRAÇO E A OUTRA NA BASE.

7. É PROIBIDO O USO DE CÂMARAS FOTOGRÁFICAS DURANTE A

EXPOSIÇÃO DA AULA PRÁTICA.


COMO USAR O MICROSCÓPIO

USANDO A OBJETIVA 100x

1. INICIE SEMPRE PELA OBJETIVA DE MENOR AUMENTO.

2. NA OBSERVAÇÃO DE UMA PREPARAÇÃO, OLHE PELA OCULAR

E MOVA O MACROMÉTRICO MUITO LENTAMENTE, ASSIM QUE A

IMAGEM APARECER, MESMO CONFUSA, PARE E COMPLETE A

FOCALIZAÇÃO COM O MICROMÉTRICO.

O USO DA OBJETIVA DE IMERSÃO É MAIS DELICADA POIS, A

DISTÂNCIA FOCAL ENTRE A FACE DA OBJETIVA E A PARTE SUPERIOR

DA LAMÍNULA, DIMINUI QUANDO A AMPLIAÇÃO É AUMENTADA.


COLORAÇÃO

QUASE TODAS AS ORGANELAS SÃO TRANSPARENTES E INCOLORES, O QUE DIFICULTA SEU ESTUDO MICROSCÓPICO, LOGO A COLORAÇÃO FACILITA A

VISUALIZAÇÃO DAS ESTRUTURAS DOS TECIDOS.

PARA VENCER ESSA DIFICULDADE, FORAM CRIADOS NUMEROSOS PROCESSOS DE COLORAÇÃO QUE TORNAM VISÍVEIS OS DIVERSOS COMPONENTES

CELULARES.


SÃO OS COMPONENTES DOS TECIDOS QUE SE CORAM FACILMENTE COM CORANTES ÁCIDOS (Ex:EOSINA)

EX: ESTRUTURAS BÁSICAS (ORGANELAS CITOPLASMÁTICAS)

A MAIORIA DOS CORANTES COMPORTA-SE COMO ÁCIDOS OU BASES

SÃO OS COMPONENTES DOS TECIDOS QUE SE CORAM FACILMENTE COM CORANTES BÁSICOS (Hematoxilina)

EX: ESTRUTURAS ÁCIDAS (NÚCLEOS)

ESTRUTURAS BASOFÍLICAS: ESTRUTURAS BASOFÍLICAS: ESTRUTURAS ACIDÓFILAS: ESTRUTURAS ACIDÓFILAS:


TÉCNICAS DE COLORAÇÃO MAIS USUAIS, TÉCNICA DE IMPREGNAÇÃO PELA PRATA E ALGUNS DOS RESULTADOS OBTIDOS COM ELAS:

TÉCNICAS CONSTITUINTES NÚCLEOS CITOPLASMA FIBRAS

COLÁGENASFIBRAS

RETICULARES

HE

HEMALÚMEN (Hematoxilina),

EOSINAHEMATOXILINA

FÉRRICA

AZUL

PRETO

ROSA ROSA

TRICRÔMICO DE MASSON

FUCCINA ÁCIDAE PONCEAU DE

XILIDINA,

VERDE-LUZ VERMELHO

VERDE

IMPREGNAÇÃOARGÊNTICA

PARA FIBRAS RETICULARES

SOLUÇÕES DE SAIS DE PRATA PRETO


OS MICROSCÓPIOS MODERNOS UTILIZAM LASERS COMPLEXOS, DETECTORES EXTREMAMENTE SENSÍVEIS, OBJETIVAS PODEROSAS.

PERMITEM FILMAR DIVISÃO CELULAR, O TRÁFICO DE MOLÉCULAS DENTRO DAS CÉLULAS, PERMITEM OBSERVAR CERTAS PROTEÍNAS NO CÉREBRO DE ANIMAIS VIVOS ETC.


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EXERCÍCIOS DE FIXAÇÃO

1.Defina microscópio, suas principais estruturas ópticas e mecânicas, observando os cuidados a serem utilizados no manuseio deste aparelho.2.Diferencie Poder de Resolução de Limite de Resolução.3.Quais as características para cada parte do Microscópio óptica ?4.Quais os cuidados a serem observados antes de manusear o aparelho?5.De acordo com as oculares de 22x, calcule a ampliação total de uma imagem observada por objetivas de : 05x,10x,20x,40x e 100x.Jamais esqueçam de acrescentar os cálculos destas respostas na prova 6.Defina Ampliação Total.7.Cite 6 elementos estruturais de um Microscópio Óptico.8.Quais os dois principais corantes da Técnica de coloração por HE?9.Quais os cuidados individuais que se deve ter ao uso dos laboratórios?10.Defina Equipamento de Proteção Individual (EPI).11.Qual a importância dos Equipamento de Proteção Coletiva (EPC)?12.Cite 5 condutas inapropriadas dentro de um laboratório.13.Quais as vacinas que devem ser tomadas antes de se adentrar dentro de um laboratório com riscos biológicos?14. O que são riscos e quais os principais relacionados com a área da saúde?15. Qual a única objetiva que só deve ser usada com óleo de imersão?

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