BAB IIIMETODE KERJA

III.1 ALAT DAN BAHANIII.1.1 ALAT Alat-alat yang digunakan pada praktikum isolasi dan inokulasi yaitu tabung reaksi, cawan petri, pingset, gelas ukur, rak tabung reaksi, bunsen, ose bulat dan ose lurus.III.1.2 BAHANBahan-bahan yang digunakan pada praktikum isolasi dan inokulasi yaitu sampel yang telah dibagikan tiap kelompok, bakteri Escherichia coli, Salmonella thyposa, Streptococcus mutans, Pseudomonas aeruginosa. Bacillus subtillus, Proteus vulgaris, Staphylococcu aureus, alcohol 70 %, kertas, karet gelang dan spiritus.

III.2 CARA KERJAIII.2.1 ISOLASI JAMUR ENDOFITAdapun cara kerja yang dilakukkan dalam isolasi dan inokulasi jamur endofit, yaitu:1. Ambil satu helaian daun sampel yang telah dipotong-potong kecil sebanyak 2 potongan.2. Masukkan 2 potongan tersebut ke dalam etanol 70% diamkan beberapa menit3. Setelah itu, masukkan 2 potong daun sampel tersebut ke dalam air steril, diamkan beberapa menit.4. Benamkan potongan tersebut pada cawan petri yang berisi medium PDA yang telah padat pada masing-masing cawan petri berisi 1 potong daun sampel yang telah disterilkan.5. Inkubasi selama 3x24 jam pada suhu kamar.

III.2.2 INOKULASI BAKTERI ESCHERICHIA COLI Metode Agar Tegak1. Sentuhkan ose lurus pada sampel bakteri di medium lama2. Tusuk 2/3 medium yang telah berisi medium NA padat3. Bungkus dari inkubasi selama 1x24 jam Metode Agar Miring1. Sentuhkan ose bulat pada sampel bakteri di medium lama2. Gores pada permukaan medium NA yang telah padat3. Bungkus dan inkubasi selama 1x24 jam

Metode Medium Cair s1. Sentuhkan ose bulat pada sampel bakteri di medium lama2. Celupkan ke dalam medium cair 3. Homogenkan 4. Bungkus dan inkubasi selama 1x24 jam Inokulasi pada cawan petri dengan metode gores kuadran dan sinambung1. Buat pola pada cawan petri yang telah disterilkan2. Masukkan medium NA steril ke dalam 2 cawan petri masing-masing secukupnya 3. Tunggu medium sampai memadat4. Sentuhkan ose bulat pada sampel bakteri yang ada di medium lama5. Lakukan penggoresan pada medium NA yang telah padat dengan menggunakan metode gores sinambung, radian, kuadran dan T6. Setelah itu bungkus cawan petri dan inokulasi selama 1x24 jam