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FAR178 – IMUNOLOGIA DAS DOENÇAS INFECCIOSAS Imunoensaio enzimátio !e "a#tu$a% #a$a a !ete$mina&'o !e anti I(M #a$a Ru)*o+a ,-$us em so$o e #+asma .umano /it0 Dia#$o Adicionar 10 μL de cada amostra em tubos de ensaio, em seguida adicionar 1 mL de diluente de amostra dentro do tubo Adicionar 100 μL de cada amostra diluída, CP em simplicata e CN em Incubar à 37°C por 60 Cubra os poços com adesivo Lava em dos oços : 5 a 6 vezes com 30 μL de solu ão de lavagem em c Adicionar !00 μL do conjugado Incubar à 37°C por 60 Cubra os poços com adesivo Lava em dos oços : 5 a 6 vezes com 30 μL de solu ão de lavagem em c Adicionar !00 μL de Crom"geno#$ubstrato %&' em todos os Incubar à temperatura ambiente protegido da "uz Adicionar !00 μL de $olução $%(P )*$(+ em todos os %edir absorb&ncia no interva"o 50' A itar cuidadosamente em

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FAR178 IMUNOLOGIA DAS DOENAS INFECCIOSASImunoensaio enzimtico de captura para a determinao de anticorpos IgM para Rubola Vrus em soro e plasma humanoKit: Diapro

Interpretao dos resultados:

Critrios de Validao:CONTROLEDO

NEGATIVO< 0.150

POSTIVO> 0.750

CLCULO DO CO (CUTT-OFF):

INTERPRETAO DOS RESULTADOS:

AMOSTRA/COINTERPRETAO

< 1.0NEGATIVO

1.0 1.2INDERTEMINADO

> 1.2POSITIVO

Adicionar 10 L de cada amostra em tubos de ensaio, em seguida adicionar 1 mL de diluente de amostra dentro do tubo

Agitar cuidadosamente em vortex

Medir absorbncia no intervalo 450-620 nm.

Adicionar 100 L de Soluo STOP H2SO4 em todos os poos

Incubar temperatura ambiente protegido da luz por 20 min.

Adicionar 100 L de Cromgeno/Substrato TMB em todos os poos

Lavagem dos poos : 5 a 6 vezes com 340 L de soluo de lavagem em cada poo

Lavagem dos poos : 5 a 6 vezes com 340 L de soluo de lavagem em cada poo

Cubra os poos com adesivo autocolante

Incubar 37C por 60 minutos

Cubra os poos com adesivo autocolante

Adicionar 100 L do conjugado enzimtico

Incubar 37C por 60 minutos

Adicionar 100 L de cada amostra diluda, CP em simplicata e CN em duplicata

Cutt-Off = Mdia CN + 0.250