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TCNICA DE

MANABIFACULTA DE CIENCIAS DE LA SALUDCARRERA LABORATORIO CLINICO

catedra: BIOLOGIA MOLECULAR IIDocente: Dra. Mayra Parraga

Aula: 2do NIVEL Paralelo APerid acad. Oct. 2!"#$e% 2!&

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TEMA:

Integrantes: Yadira Arana Z.Alexandra Santana Rosa Guanoluisa R Vinicio Cedeo M. Liz Castro PNatacha Lez A. !essica "ern#ndez $e%in Za&'rano V.

RU!

"#

$%&r%dac%'n de (c%dosnucle%cos)

Sondas de ant%cuer*o*ara *rote+nas)

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!ALABRAS

CLAVES:$%&r%dac%'n ant%genos

In,uno*rec%*%tac%'n Sondas

Frag,entos deADN

ADN clonado

eno,a $u,ano!lacas de -ago

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trans-erenc%a .estern: es una tcnica analtica usada paradetectar protenas especfcas en una muestra determinada Mediante

una electrooresis en gel se separan las protenas

In,uno*rec%*%tac%'n: Este mtodo detecta interaccin entreprotenas endgenas sin marcar), de modo que tiene la misma fabilidadque la coinmunoprecipitacin, aunque depende tambin de ladisponibilidad de anticuerpos adecuados.

$%&r%dac%'n: La hibridacin de cidos nucleicos es un proceso por elcual se combinan dos cadenas de cidos nucleicos antiparalelas ! consecuencias de bases complementarias en una "nica molcula de doblecadena, que toma la estructura de doble hlice, donde las bases

nitrogenadas quedan ocultas en el interior.

LOSARIO:

ADN clonado: son un con#unto de mtodos e$perimentalesutili%ados en biologa molecular que se utili%an para ensamblar

molculas de &'( ! lograr su copiado dentro de organismosreceptores.n un e$perimento conencional de clonado molecular, el&'( que se desea clonar se obtiene del organismo ob#eto del traba#o,luego se lo trata con en%imas en un tubo de ensa!o para producirragmentos ms peque*os de &'(.

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$%&r%dac%'n de (c%dos

nucle%cos)

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La clae para la deteccion desecuencias especifcas de cidosnucleicos es el apareamiento de

bases entre hebrascomplementarias de &+( o &'(

Las hebras complementarias de&'( se separan

desnaturali%acin) dandomolculas de cadenas simple

-i dichas hebras desnaturali%adasde &'( se incuban en

condiciones adecuadas /0c), renaturali%an para ormar

molculas de doble cadena porapareamiento complementario debases 1 un proceso denominado

/%&r%dac%'n de (c%dosnucle%cos)

2omo se ha descritoanteriormente, la hibridacin ente

cebadores ! &'( moldeproporciona la especifcidad a la

ampliacin por 32+

El &'( clonado es marcado connucletidos radioactios o connucletidos modifcados que

puede detectarse por4uorescencia o

quimioluminiscencia.

Este &'( marcado es marcado esdespus empleado como sondapara la hibridacin con

secuencias de &'( o &+(complementario, que se son

detectadas medianteradioactiidad, 4uorescencia o

luminiscencia de los hbridos dedoble cadena resultantes

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EL *r%,er *aso en el a%sla,%entotanto de ADN gen',%co o declones de ADNc es-recuente,ente la *re*arac%'n

de &%&l%otecas de ADNreco,&%nante0 colecc%ones declones 1ue cont%enen todas lassecuenc%as gen',%cas o de ARN, de un t%*o celular concreto2)!or e3e,*lo4 una &%&l%oteca de

ADN /u,ano gen',%co *uede*re*ararse clonando -rag,entosaleator%os de ADN de unas 567&en un 8ector A9

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Microarra!s de &'(

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SONDAS DE ANTICUER!OS !ARA!ROTENAS

Los anticuerpos sonprotenas sinteti%adas

por determinadasclulas del sistemainmune linocitos 5)que reaccionan conmolculas que el

organismo husped hareconocido comoe$genasantgenos).

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La ariacin da unresultado de

linocitos

6enes distintos

2odifcantes de

anticuerpo segeneran medianteinoculacin de unaprotena animal)

+esponden a

distintos antgenos

3roporciona un reactante inmunolgico de alta

especifdad.

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(atacha

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Une a ,uc/as ,ol;culas deldetergentes4 1ue desnatural%

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El inhibidor de la ribonucleasa enorma de herradura orma unainteraccin protena7protena conla protena de la propiaribonucleasa. Los contactos de lasdos protenas se muestran como

manchas coloreadas

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