PERCOBAAN IHANDLING DAN TEKNIK PENGAMBILAN
SAMPEL DARAH PADA HEWAN COBA
I. TUJUAN PERCOBAAN
Tujuan praktikum ini adalah praktikan dapat mempelajari dan
memahami prinsip penanganan hewan coba terutama pemberian perlakuan
secara oral serta pengambilan sampel darah.II.DASAR TEORIHewan coba
atau sering disebut hewan laboratorium adalah hewan yang khusus
diternakkan untuk keperluan penelitian biologik. Hewan
labboratorium tersebut digunakan sebagai model untuk peneltian
pengaruh bahan kimia atau obat pada manusia. Beberapa jenis hewn
dari yang ukurannya terkecil dan sederhana ke ukuran yang besar dan
lebih komplek digunakan untuk keperluan penelitian ini, yaitu:
Mencit, tikus, kelinci, dan kera. Mencit merupakan hewan yang
paling umum digunakan pada penelitian laboratorium sebagai hewan
percobaan, yaitu sekitar 40-80%. Mencit memiliki banyak keunggulan
sebagai hewan percobaan, yaitu siklus hidup yang relatif pendek,
jumlah anak per kelahiran banyak, variasi sifat-sifatnya tinggi dan
mudah dalam penanganannya (Moriwaki, 1994).Mencit harus diberikan
makan dengan kualitas tetap karena perubahan kualitas dapat
menyebabkan penurunan berat badan dan tenaga. Seekor mencit dewasa
dapat mengkonsumsi pakan 3-5 gram setiap hari. Mencit yang bunting
dan menyusui memerlukan pakan yang lebih banyak. Jenis ransum yang
dapat diberikan untuk mencit adalah ransum ayam komersial (Smith,
1988).
Hewan percobaan yang dipelihara untuk tujuan penelitian, umumnya
berada dalam suatu lingkungan yang sempit dan terawasi. Walaupun
kehidupannya diawasi, namun diusahakan agar proses fisiologis dan
reproduksi termasuk makan, minum, bergerak dan istirahat tidak
terganggu. Hewan percobaan ditempatkan dalam kandang-kandang yang
disusun pada rak-rak didalam suatu ruangan khusus. Kandang harus
dirancang untuk dapat memberikan kenyamanan dan kesejahteraan bagi
hewan tersebut (Anggorodi, 1973)
Peningkatan perkembangan ilmu pengetahuan dan teknologi bidang
kesehatan dibarengi dengan peningkatan kebutuhan akan hewanuji
terutama mencit. Penggunaan mencit ini dikarenakan relatif mudah
dalam penggunaanya, ukurannya yang relatif kecil, harganya relatif
murah, jumlahnya peranakannya banyak yaitu sekali melahirkan bisa
mencapai 16-18 ekor, hewan iotu memiliki sistem sirkulasi darah
yang hampir sama dengan manusia serta tidak memiliki kemampuan
untuk muntah karena memiliki katup dilambung. Sehingga banyak
digunakan untuk penelitian obat (Marbawati, 2009).Semankin
meningkat cara pemliharaan, semakin sempuran pula hasil percobaan
yang dilakukan. Dengan demikian, apabila suatu percobaan dilakukan
dengan hewan percobaan yang liar, hasilnya akan berbeda bila
menggunakan hewan percobaan konvensional ilmiah maupun hewan yang
bebas kuman. Masih dalam rangka pengelolaan hewan percobaan secara
keseluruhan, cara memegang hewan perlu diketahui. Cara memegang
hewan dari masing-masing jenis hewan adalah berbeda beda dan
ditentukan oleh sifat hewan, keadaan fisik (besar atau kecil) serta
tujuannya. Kesalahan dalam caranya akan dapat menyebabkan
kecelakaan atau hips ataupun rasa sakit bagi hewan (iniakan
menyullitkan dalam melakukan penyuntikan atau pengambilan darah)
dan juga bagi orang yang memegangnya.(
Sulaksono,M.E.,1992)Penggunaan hewan percobaan dalam penelitian
ilmiah dibidang kedokteran/biomedis telah berjalan puluhan tahun
yang lalu. Hewan sebagai model atau sarana percobaan haruslah
memenuhi persyaratan-persyaratan tertentu, antara lain persyaratan
genetis / keturunan dan lingkungan yang memadai dalam
pengelolaannya, disamping faktor ekonomis, mudah tidaknya
diperoleh, serta mampu memberikan reaksi biologis yang mirip
kejadiannya pada manusia (Marbawati, 2009).Umumnya pengambilan
darah terlalu banyak pada hewan kecil dapat menyebabkan shok
hipovolemik, stress dan bahkan dapat menyebabkan kematian. Tetapi
bila dilakukan pengambilan sedikit darah tetapi sering, juga dapat
menyebabkan anemia. Pada umumnya pengambilan darah dilakukan
sekitar 10% dari total volume darah dalam tubuh dan dalam selang
waktu 2-4 minggu. Atau sekitar 1% dengan interval 24 jam. Total
darah yang diambil sekitar 7,5% dari bobot badan. Diperkirakan
pemberian darah tambahan (exsanguination) sekitar setengah dari
total volume darah. Contohnya: Bobot 25g, total volume darah 1,875
ml, maksimum pengambilan darah 0,1875 ml, maka pemberian
exsanguination 0,9375 ml.
Pengambilan darah dapat dilakukan pada lokasi tertentu dari
tubuh, yaitu:
- vena lateral dari ekor
sinus orbitalis mata
vena saphena (kaki)
langsung dari jantung.(Marbawati, 2009).III.METODE PENELITIANA.
Waktu dan Tempat
Praktikum ini dilaksanakan pada hari Jumat, tanggal 20 Maret
2015, pukul 14.00-17.00 WITA. Bertempat di Laboratorium Biologi
Dasar Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas
Lambung Mangkurat, Banjarbaru.
B. Alat dan Bahan
Alat yang digunakan pada percobaan ini adalah jarum suntik,
syringe dengan kanula, dan bahan yang digunakan dalam percobaan ini
adalah Tikus dewasa, mencit, ikan, katak, dan ayam.IV.PROSEDUR
KERJAHadling pada mencit
Diangkat ekornya dengan tangan kanan.
Dibiarkan mencit menjangkau kawat.
Dicubit kulit diantara 2 telinga dan 3 jari lain.
Dipegang kulit punggung dengan tangan kiri.
Dijepit ekor dengan tangan manis dan kelingking.
Hadling pada tikus
Diangkat dengan cara dipegang bagian ujung ekor
Diletakkan pada kawat kandang, tangan kiri bergerak dari
belakang dengan jari tengah dan telunjuk mengunci tengkuknya serta
ibu jari menjepit kaki depan.
Dimasukkan ke dalam holder untuk perlakuan hanya memerlukan
ekor.
Pengambilan Darah
Diambil tidak boleh terlalu besar volumenya supaya tidak terjadi
syok hipovolemik.
Diambil tidak boleh sedikit-sedikit tapi sering bisa terjadi
anemia.
Diberikan untuk mengatasi gejala tersebut.
Jumlah darah diambil 10% total volume darah/ 2-4 minggu atau 1 %
total volume darah / 24 jam.
Lokasi tempat pengambilan darah yaitu sinus orbital mata, vena
lateral pada ekor, vena saphena kaki dan intra kardial
Rute pemberian obat
Oral
Diangkat ekornya dengan tangan kanan.
Dibiarkan mencit menjangkau kawat.
Dicubit kulit diantara 2 telinga dan 3 jari lain.
Dipegang kulit punggung dengan tangan kiri
Dijepit ekor dengan tangan manis dan kelingking hingga leher
dalam keadaan lurus.
Dimasukkan suntikan oral kedalam mulut sampai esophagus ( posisi
suntikan oral dimasukkan tegak lurus).
Subkutan
Dicubit kulitnya dibawah kulit daerah tengkuk ( di leher bagian
atas )
Disuntikkan obat
Disuntik sudut 45 derajat.
Intravena
Dimasukkan didalam holder hingga ekor terjulur keluar.
Dilatasi dengan alkohol atau xylol
Disuntikan obat pada vena ekor
Intraperitoncal
Dipegang hewan sesuai ketentuan
Posisi kepala lebih rendah dari abdomen dengan menunggingkan
tubuhnya.
Disuntikkan dengan jarum membentuk sudut 46 derajat egan
abdomen, posisi jarum agak menepi dari garis tengah agar tidak
mengenai organ dalam peritoneum
V.HASIL DAN PEMBAHASAN
A. Hasil
Tabel 1. Pengamatan Hewan Coba
NoHewan CobaCara handlingFotoKeterangan
1.Mencit1. Diangkat ekornya dengan tangan kanan.
2. Dibiarkan menjangkau kawat.
3. Dicubit kulit diantara 2 telinga dan 3 jari lain.
4. Dipegang kulit punggung dengan tangan kiri.
5. Dijepit ekor dengan tangan manis dan kelingking.
1. Punggung
2. Ekor
2.Ayam1. Diangkat dengan tangan kanan pada bagian paruh hingga
menuju perut.
2. Sambil di elus pada bagian kepala.
1. Paruh
2. Perut
3.Ikan Nila1. Dipegang bagian perut hingga bagian sirip dada
dengan tangan kiri.
2. Diangakat dengan tangan kanan di bagian punggung di antara
dua sirip punggung .
1. Perut
2. Punggung
3. Sirip Pungung
4.Tikus1. Diangkat, dipegang bagian ujung ekor
2. Diletakkan di kawat kandang, tangan kiri bergerak dari
belakang dengan jari tengah dan telunjuk mengunci tengkuknya serta
ibu jari menjepit kaki depan.
1. Ekor
2. Kaki
5.Katak1. Dipegang bagian punggung.
2. Dicubit kulit bagian pungung dengan tangan kanan.
3. Diangkat dengan membalikkan badan katak.
1. Kaki
2. Perut
B. Pembahasan
Mencit adalah hewan percobaan yang sering dan banyak digunakan
di dalam laboratorium farmakologi dalam berbagai bentuk percobaan.
Hewan ini mudah ditangani dan bersifat penakut fotofobik, cenderung
berkumpul sesamanya dan bersembunyi. Aktivitasnya di malam hari
lebih aktif. Kehadiran manusia akan mengurangi aktivitasnya.
Berbeda dengan tikus yang dapat hidup sendiri, lebih cerdas, tidak
fotofobik, lebih agresif, dan aktifitasnya tidak terhambat oleh
manusia.
Pada praktikum dilakukan perlakuan pada hewan coba mencit dengan
cara, pertama-tama ekor mencit dipegang dan diangkat dengan tangan
kanan, mencit dibiarkan mencengkram alas penutup kandang ( kawat
rang), sehingga frekuensi gerak mencit dapat diminimalkan. Cengkram
kulit punggung mencit sebanyak-banyaknya dan seerat mungkin dengan
tangan kiri, hingga kepala mencit tidak dapat digerakkan ke kanan
dan kekiri. Jari tengah dan jari manis mencengkram perut mencit dan
ekor mencit dililitkan pada jari kelingking. Pada praktikum ini
juga, dilakukan perlakuan hewan coba tikus putih dan kelinci.
Perlakuan hewan coba tikus putih hampir sama mencit, namun harus
berhati hati sebab hewan coba ini lebih agresif daripada
mencit.
Pada pengambilan darah mencit dilakukan dengan metode
Intramuscular yakni darah diambil pada bagian paha, mula-mula
mencit diperlakukan senyaman mungkin dan di handling dengan benar,
Sebelumnya semprot bagian yang akan disuntik dengan Alkohol 70%.
Pembantu memegang paha, penyuntik memegang paha kiri dari depan
dengan tangan kiri. Jarum ditusukkan dari balik dengan sudut tegak
lurus terhadap permukaan kulit kira-kira ditengah paha sehingga
tusukan sampai ke otot bicep femoris. Lalu suntikkan perlahan,
tarik pengisap spoit, jika darah sudah terisi, tarik spoit dan usap
lagi bagian tubuh mencit yang disuntik dengan alkohol 70 %.
Sedangkan pada pengambilan darah tikus dilakukan dengan metode
intravena yakni pada bagian vena lateralis ekor tikus, mula-mula
tikus dipegang dengan perlakuan yang benar dan diusahakan dengan
perlakuan yang senyaman mungkin. Setelah tikus mulai tenang dan
tidak bergerak, kemudian ekor tikus dijulurkan keluar dan Vena
lateralis pada ekor di Incis (dipotong) 0,2 2 cm dari pangkal ekor
dengan silet atau gunting yang steril. Darah ditampung pada
eppendorf, kemudian usapkan kapas yang sudah diberi alkohol pada
ekor tikus.
Pada praktikum ini juga menggunakan ikan mas (Oreochromis
niloticus), ikan yang berada di dalam bak diberi aerator agar
kebutuhan oksigen tetap bersih sehingga ikan tetap segar,
selanjunya dilakukan handling dengan memegang bagian ventral ikan
dan diusahakan perlahan agar ikan tetap tenang, setelah itu ikan
diletakkan pada bak parafin secara telentang, spoit disiapkan,
carilah pada bagian linea lateralis sisik pada pangkal ekor nomor
6-8, jarum spoit ditusukkan pada pangkal ekor dengan kemiringan 450
dengan tujuan agar pada saat disuntik dengan spuit mengenai tulang
belakang ikan karena pada daerah tersebut banyak mengandung
pembuluh darh ikan, lalu perlahan-lahan diambil darah ikan dengan
spoit, sehingga didapat darah ikan yang diinginkan dan didapat
hasilnya. Darah dimasukkan kedalam tabung.
Pengambilan sampel darah pada ayam terletak di bagian sayap, di
bagian sayap merupakan pembuluh darah yang cukup besar untuk bisa
di ambil darahnya. Setelah ayam sudah disiapkan di sekitar pembuluh
darah di bersihkan menggunakan kapas yang dibasahi dengan alcohol
guna untuk mengetahui pembuluh darah lebih jelas, setelah
dibersihkan pengambilan darah terletak dipercabangan dari pembuluh
darah tersebut, kemudian masukkan jarum suntik diantara percabangan
kapiler darah tersebut, setelah masuk tarik jarum suntik (darah
agar terhisap) dengan pelan-pelan. Pengambilan darah jangan terlalu
banyak sesuaikan dengan kebutuhannya. Setelah darah diambil langkah
selanjutnya adalah darah tersebut masukkan ke botol yang sudah di
sediakan kemudian campur dengan bubuk koagulasi.V.KESIMPULAN
Kesimpulan yang didapat dari praktikum tentang fungsi urinee
(kualitas urinee ini adalah sebagai berikut :1. Pada penganan
mencit dan tikus hampir sama, tetapi tikus lebih agresif sehingga
lebih sulit dalam pengambilan darah dan penganganannya.2. Pada
pengambilan darah ikan dilakukan dibagian linena lateralis pangkal
ekor karena pada bagian ini terdapat banyak pembuluh darah.3. Pada
pengambilan darah ayam dilakukan pada bagian ketiak atau bawah
sayap karena bagian inilah dijumpai banyak pembuluh darah dan tidak
tertutup oleh bulu yang tebal tetapi ditutupi oleh rambut sehingga
pembuluh darahnya terlihat.
4. Pada penanganan hewan coba dilakukan dengan baik agar hewan
coba yang ingin diperlakukan tidak stres sehingga hasil yang
diinginkan lebih maksimal
DAFTAR PUSTAKA
Anggorodi, R. (1973). Ilmu Makanan Ternak Umum. Jakarta:
Gramedia.
Marbawati , Dewi., dan Bina Ikawati, Kolonisasi Mus musculus
albino Di Laboratorium loka Litbang P2B2 Banjarnegara, Balaba Vol.
5, No.01 Moriwaki, K. (1994). Genetic in Wild Mice. Its Application
to Biomedical Research. Tokyo: Karger.
Smith, B. (1988). Pemeliharaan, pembiakan, dan Penggunaan Hewan
Coba di Daerah Tropis. Jakarta: UI Press.
Sulaksono, M.E.,1987, Peranan,Pengelolaan dan pengembangan Hewan
Percobaan , Jakarta
Mencit
Hasil
Tikus
Hasil
Darah
Cairan exsanguinis
Darah
Mencit & tikus
Hasil
Mencit & Tikus
Hasil
Mencit & Tikus
Hasil
Mencit & Tikus
Hasil
Mencit & Tikus
Hasil
2
1
2
1
1
3
2
2
1
2
1
