HIDROLISIS ENZIMTICA DE LOS LIPIDOSCmo se lleva a cabo la hidrlisis de lpidos en el organismo?IntroduccinEn los lpidos lo que ms interesan son los cidos grasos. El metabolismo lipdico es fundamentalmente energtico. Tiene caractersticas estructurales y reguladoras, pero lo ms importante es la energa de almacenamiento porque en casi todo el cuerpo se puede almacenar en forma de grasa de forma muy cmoda.Desde el punto de vista metablico lo ms importante son de los glicridos porque en dietas normales lo que ms digerimos son grasas.A ciencia cierta es un metabolismo complejo, no bioqumicamente, s para el cuerpo. Son sustancias lipfilas entonces tienen una serie de incovenientes que aqu se traducen en una digestin ms lenta que la de los hidratos o protenas que son lipfobas. Principios generalesPor qu pasa?La lipasa es una enzima de la clase de las hidrolasas, que se usa en el organismo para disgregar los lpidos (grasas) de los alimentos de manera que se puedan absorber. La degradacin de los triacilglicridos depende de la actividad de la Lipasa Pancretica (Triacilglirido Hidrolasa, EC:3.1.1.3) enzima que se libera al intestino y cataliza la hidrlisis de triacilglicridos en las posiciones 1 y 3, formado 2- monocilglicridos y cidos grasos libres. La enzima, necesita de otra protena, llamada Colipasa , que le facilita la unin en la interfase lpido-agua.Para que la actividad de la lipasa sea significativa se precisa que la grasa forme una emulsin fina gracias a la accin de la masticacin, actividad motora gstrica, y las sales biliares. Estas ltimas tienden a interponerse entre la lipasa y su sustrato y es necesario un cofactor (colipasa) que permita actuar a la lipasa. La colipasa se une a la regin del enlace ester del triglicrido y posteriormente a la lipasa mediante interacciones electrostticas.Los cidos grasos y monoacilglicridos producidos por la lipasa, y el Colesterol, son absorbidos por las clulas del epitelio intestinal, donde se utilizan para volver a formar los triacilglicridos.Las lipasas se encuentran en gran variedad de seres vivos, al igual que las esterasas hidrolizan grasas y aceites en los procesos digestivos; tambin estn involucradas en el rompimiento y movilizacin de los lpidos dentro de las clulas de un organismo y de la transferencia de lpidos de un organismo a otro.

PrincipiosComo pasa?Las lipasas y las esterasas catalizan la hidrlisis de enlaces ster que se encuentran en un gran nmero de lpidos saponificables. Las lipasas son enzimas lipoliticas que hidrolizan las uniones esteres de los trigliceridos,Estas enzimas estn ampliamente distribuidas en la naturaleza y son especialmente importantes en el tracto gastrointestinal donde funcionan en la digestin y absorcin de grasas. Debido a que las grasas no son solubles en agua, las enzimas deben actuar en la interfase lpido-agua, lo cual trae como consecuencia una disminucin de la actividad enzimtica.Consecuentemente, ser necesario el empleo de los agentes emulsificantes tales como las sales biliares que producen a menudo una estimulacin marcada de la hidrlisis enzimtica de los lpidos, debido al incremento de la interfase lpido-agua. En la leche homogeneizada los glbulos de grasa estn en un estado muy finamente dividido y este material sirve como sustrato excelente para las lipasas. En este experimento se emplea como enzima una lipasa muy potente que se encuentra en el pncreas desecado.Conceptos Enzima: Las enzimas son protenas que ayudan a que las reacciones qumicas ocurran con mayor rapidez. Las enzimas actan sobre lasmolculas conocidas como sustratos y permiten eldesarrollode los diversos procesos celulares Acido graso: Uncido grasoes unabiomolculade naturalezalipdicaformada por una larga cadenahidrocarbonada lineal, de diferente longitud o nmero de tomos de carbono, en cuyo extremo hay ungrupo carboxiloTriacilglicrido: sonacilgliceroles, un tipo delpidos, formados por unamolculadeglicerol, que tieneesterificadossus tres gruposhidroxlicospor trescidos grasos, ya seansaturadosoinsaturados.Los triglicridos forman parte de lasgrasas, sobre todo de origen animal. Losaceitesson triglicridos en estado lquido de origen vegetal o que provienen del pescado.Los triglicridos son el principal tipo de grasa transportado por el organismo. Estos son transportados a todo el organismo para dar energa o para ser almacenados como grasa.Emulsin: Es unamezcladelquidosinmisciblesde manera ms o menos homognea. Laemulsin es unprocesoque consiste en la mezcla de dos lquidos diferentes que no se puedan mezclar, es decir, que sean inmiscibles entre s. Uno de los lquidos se encontrar formando la fase, conocida con el nombre dedispersa, que se encontrar constituida por el lquido que ser dispersado dentro del otro lquido que conforma la mezcla, el cual ser el formador de la fase conocida como, continua, o tambin,dispersante.

PRACTICA:

Procedimiento:MATRAZ NMERO

Reactivos mlT1123456T2

Leche homogenizada 55555555

Extracto neutro de pancreatina al 1%01.51.51.51.51.51.50

Extracto de pancreatina caliente a ebullicin por 3 minutos 1.50000001.5

Bilis 00001111

Tiempo de incubacin a 37C4515304515304545

Registro de datos VolmenesT15.9

17.5

27.8

38.4

411.3

511.9

614.2

T28.6

Matraces 1, 2,3

Matraz 4, 5,6

Cuestionario1.- Cul es la interpretacin de las graficas obtenidas?De acuerdo a las graficas, podemos observan que la grafica 1 correspondiente a los primeros tres matraces (a los cuales no se les agrego bilis) el gasto de KOH fue menor en comparacin a la grafica 2, esto se debe a que la reaccin de digestin por la lipasa se lleva a cabo de forma ms lenta.En la grafica 2, el gasto de KOH aumenta, es por esta razn que podemos decir que la hidrlisis se est llevando a cabo en mayor cantidad, y por lo tanto se produce mayor cantidad de H+. Esto es causado porque al agregar la bilis, se forma una emulsin fina que permite que la accin de la lipasa sea significativa.2.- Cul es el objeto de agregar bilis en el experimento?Es usado como agente emulsificante, para producir una estimulacin de la hidrlisis enzimtica de los lpidos, debido al incremento de la interfase lpido-agua.

3.- Cmo se clasifican los lpidos?

4.- Cules son los acidos grasos mas importantes de la grasa humana ?Los cidos grasos de importancia para los humanos tienen configuraciones relativamente sencillas, aparecen comnmente insaturaciones con hasta seis dobles enlaces por cadena, siendo casi siempre los enlaces, los cidos grasos ms comunes de los sistemas biolgicos que tienen un nmero par de tomos de carbono (ver Rutas 14, 15, 16 y 18).La mayor parte de los cidos grasos del cuerpo humano tienen 16, 18 20 tomos de carbono, si bien hay varios con cadenas ms largas que se encuentran principalmente en los lpidos del sistema nervioso.Los cidos grasos se encuentran principalmente en forma de steres del glicerol, como se muestra en la figura:

5.- Cul es la importancia clnica de la lipasa en un diagnostico?La Lipasa es una enzima secretada por el Pncreas que tiene como funcin iniciar el proceso de digestin de las grasas, las cuales sin ser preparadas por esta enzima no podran ser absorbidas por el organismo.En la practica clnica tiene importancia sobre todo en el diagnostico de la pancreatitis.La Pancreatitis aguda es un cuadro caracterizado por la inflamacin del pncreas, puede estar originada principalmente por 4 problemas:La obstruccin del conducto pancretico (litiasis de vas biliares, tumoraciones)Elevacin sostenida de TriglicridosConsumo elevado de Alcohol.Obesidad.El diagnostico se puede sospechar a nivel Bioqumica por la elevacin de la Amilasa (Enzima digestiva presente en pncreas y glndulas salivales) y la Lipasa.6.- Cul es la composicin y el funcionamiento del tejido adiposo?El tejido adiposo est formado por clulas adiposas (adipocitos) y un componente estromtico/vascular en el que residen los preadipocitos.Los cidos grasos libres son liberados de liporportenas por una enzima llamada lipasa lipoprotena; stos cidos grasos libres entran al adipocito, donde son re ensamblados en triglicridos para poder convertirlos en glicerol. Aproximadamente el 87% del tejido graso de los humanos est compuesto por lpidos.Existe un constante fluido de cidos grasos libres entrando y saliendo del tejido adiposo. Dicho fluidos es controlado por la insulina y la leptina. En humanos, la liplisis (hidrlisis de triglicridos en cidos grasos) es regulada por el balance controlado de los receptores andrgeno-B lipoltico y el receptor andrognico a2A, mediando la anti-liplisis. Los adipocitos tienen un papel fisiolgico importante en la regulacin de los niveles de los triglicridos y los cidos grasos libres, as mismo determinan la resistencia a la insulina.El tejido adiposo es una gran fuente de aromatasa, que tanto en hombres como en mujeres contribuye a la produccin de estradiol. Las hormonas derivadas de adipocitos incluyen:Adiponectina , Resistina , Activador e inhibidor de plasmingeno (PAI-1) TNF ,IL-6 ,Leptina y EstradiolEl tejido adiposo tambin secreta un tipo de citosinas, llamadas adupocinas, el cual acta en las complicaciones asociadas a la obesidadConclusinDentro del organismo, la hidrlisis de los lpidos se lleva a cabo por un proceso que implica la participacin de varias sustancias entre ellas, la lipasa, encargada de la ruptura de los enlaces. No menos importante es la bilis (sales biliares) que facilitan o impiden la hidrlisis, cuando impide la interaccin de la lipasa con los lpidos se presenta la colipasa que inhibe esta accin.

DiscusinLa pancreatina es un preparado enzimtico obtenido del pncreas bovino o porcino, en cuya composicin se incluyen proteasas, amilasas, lipasas, fosfolipasas y otras enzimas. Su pH de accin oscila entre 7.5-8; su temperatura ptima es de 37 C y se requiere una emulsificacin eficiente de la grasa para ser hidrolizada.Los matraces que contenan Pancreatina fueron colocados el mismo lapso de tiempo en el bao mara y el gasto de KOH fue mayor en el que contena bilis, ya que sta facilita la formacin de unas estructuras denominadas micelas, las cuales favorecen la accin de las enzimas lipolticas pancreticas. Adems, se puede hacer una comparacin con el matraz 6 y el T2, ya que los dos se encontraban en las mismas condiciones (temperatura y tiempo en el bao mara), pero el matraz 6 con usencia de extracto de pancreatina, y los resultados demuestras que en el matraz T2, hubo un mayor gasto de KOH, a consecuencia de que haba ms cidos grasos libres en disolucin.

Material que deber traer el alumno

Leche homogenizada

Bilis

REACTIVOS

Pancreatina al 1% en agua

KOH 0.05 N

Etanol al 95%

Fenoltalena

MATERIAL

NO.NO.

8Matraces Erlenmeyer de 125 ml1Soporte universal

1Pinzas para bureta 1 Termmetro

1Pipeta de 10 ml1 Bao Mara a 37 C

1Pipeta de 1ml

1 Pipeta de 5 ml

1 Bureta de 25 ml