Hoja Guia 2015 2015 Biotecnología

Universidad Central del Ecuador

Facultad de Ingeniera Qumica

Profesor: Ing. Lorena Villareal

Ayudante de Ctedra: Andino Noroa Edwin Rodrigo



Laboratorio de Biotecnologa Industrial

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INTRODUCCION

La biotecnologa se define como una tcnica aplicada que utiliza sistemas biolgicos y

organismos vivos o sus derivados, para la creacin o modificacin de productos o procesos

para usos especficos. Como tal, la biotecnologa ha existido desde que el hombre por

primera vez utiliz la fermentacin para preparar pan, queso y bebidas alcohlicas.

Hoy, la biotecnologa constituye una promesa para consumidores que buscan calidad,

seguridad y sabor en sus alimentos preferidos; para los agricultores que buscan nuevos

mtodos para incrementar la productividad y la renta de sus explotaciones; y para quienes,

desde el gobierno o instituciones privadas, tratan de terminar con el hambre en el mundo,

asegurar la calidad del medio ambiente, preservar la biodiversidad y promover la sanidad y

la seguridad de los alimentos.

La biotecnologa tiene aplicaciones en importantes reas industriales como lo son la

atencin de la salud, con el desarrollo de nuevos enfoques para el tratamiento de

enfermedades; la agricultura con el desarrollo de cultivos y alimentos mejorados; usos no

alimentarios de los cultivos, como por ejemplo plsticos biodegradables, aceites vegetales y

biocombustibles; y cuidado medioambiental a travs de la biorremediacin, como el

reciclaje, el tratamiento de residuos y la limpieza de sitios contaminados por actividades

industriales. A este uso especfico de plantas en la biotecnologa se llama biotecnologa

vegetal. Adems se aplica en la gentica para modificar ciertos organismos. La

biotecnologa tiene aplicaciones en importantes reas industriales como lo son la atencin

de la salud, con el desarrollo de nuevos enfoques para el tratamiento de enfermedades; la

agricultura con el desarrollo de cultivos y alimentos mejorados; usos no alimentarios de los

cultivos, como por ejemplo plsticos biodegradables, aceites vegetales y biocombustibles; y

cuidado medioambiental a travs de la biorremediacin, como el reciclaje, el tratamiento de

residuos y la limpieza de sitios contaminados por actividades industriales. A este uso

especfico de plantas en la biotecnologa se llama biotecnologa vegetal. Adems se aplica

en la gentica para modificar ciertos organismos.




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Generalidades

1.1. Manual de Redaccin

1.1.1. Estructura de un informe

Un informe debe contar con la siguiente estructura:

1 Ttulo

2 Resumen

3 Introduccin

4 Objetivos

5 Teora

6 Parte Experimental

6.1 Materiales y Equipos

6.2 Sustancias Empleadas

6.3 Procedimiento

7 Procesamiento de Datos

7.1 Datos Experimentales

7.2 Mtodos de procesamiento de datos

7.3 Clculos

7.4 Resultados y Discusin

7.4.1 Anlisis de la validez de mtodo

7.4.2 Errores sistemticos y aleatorios

8 Conclusiones

9 Recomendaciones

10 Referencias Bibliogrficas

11 Anexos




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1.2. Gua de Redaccin de los informes

1.2.1. Ttulo

Es la carta de presentacin del informe. Se utiliza para identificar y diferenciar el

trabajo prctico realizado de cualquier otro.

El ttulo debe considerar los siguientes aspectos:

Debe ser conciso, especfico.

Debe ser poco extenso (mejor recordacin)

Debe ser descriptivo

Se debe evitar que el ttulo comience con: Cuantificacin, Determinacin,

Experimentacin, Comprobacin, ya que esto le hace redundante al trabajo

prctico.

Se debe evitar colocar abreviaturas o cualquier cosa que no sea evidente para el

lector.

Ejemplo:

Determinacin del modelo matemtico de la viscosidad de la glicerina. (Incorrecto)

Modelo matemtico para la viscosidad de la glicerina. (Correcto)

1.2.2. Introduccin

En esta seccin se hace una breve descripcin sobre el fundamento terico del

trabajo prctico a realizar.

Consiste de tres partes: el propsito, la importancia y el conocimiento actual.

El propsito indica la razn o el porqu de la realizacin del trabajo prctico.

La importancia indica la relevancia del trabajo prctico en una aplicacin industrial.

El conocimiento actual hace referencia al fundamento terico aprendido en clases.

1.2.3. Objetivos

Es lo que se piensa que se puede obtener, comprobar, analizar de los ensayos.

Por ejemplo, en trabajos experimentales, los objetivos estn orientados a comprobar

interacciones de compuestos, fenmenos fsicos y qumicos.




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Se debe evitar que el objetivo trate de alcanzar efectos que no se pueden medir

(entendimiento, aplicacin de conocimientos, etc.).

1.2.4. Teora

Est enfocada a dar una idea del fundamento terico base del experimento a

realizar. Es lo que sustenta, en este caso, lo que est sujeto a comprobacin o

determinacin.

La teora debe considerar los siguientes aspectos:

Debe ser concisa (fcil lectura, mejor entendimiento).

Debe explicar aspectos no tan evidentes para el lector y que se deben conocer

para comprender de una mejor forma el experimento.

Se debe evitar que la teora sea redundante sobre el tema.

Para ubicar la teora en su informe trate de definir en forma resumida.

En el espacio interlineado poner el trmino a definir y a continuacin su concepto.

Ejemplo

3.1. Definicin de levadura.- La levadura es.

1.2.5. Parte Experimental

Esta seccin est compuesta de 3 partes fundamentales:

Materiales y Equipos

Lista todos los elementos utilizados para que la prctica pueda llevarse a cabo y

reproducirse cuantas veces sea necesario por cualquier persona.

Sustancias Empleadas

Indica todo material qumico que se utiliz para que la prctica pueda llevarse a

cabo y reproducirse cuantas veces sea necesario por cualquier persona.

Procedimiento

Es una secuencia de actividades realizadas que permiten ejecutar el experimento

mediante el uso de los materiales, equipos y sustancias mencionadas anteriormente.

El procedimiento debe considerar los siguientes aspectos:

Debe estar redactado en voz pasiva refleja.




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Debe permitir que la persona que quiere ejecutar el experimento est en toda

la capacidad de obtener los mismos resultados.

Debe ser claro y especfico.

Se debe evitar redactar vivencias personales al realizar el experimento.

(colocar en el vaso de precipitacin pero tener cuidado porque se me reg).

1.2.6. Procesamiento de Datos

Datos Experimentales

En esta parte se registran las mediciones obtenidas de las variables que definen el

experimento al ejecutar el procedimiento.

Tambin pueden existir datos adicionales como constantes, valores tabulados, entre

otros, que se requieren para poder realizar las siguientes secciones del informe.

Mtodos de Procesamiento de Datos

En esta seccin se hace referencia a los mtodos utilizados para el tratamiento de los

datos experimentales obtenidos con el fin de consolidar resultados.

Existen entre otros los siguientes mtodos de procesamiento de datos:

Mtodos Estadsticos (Promedios, Desviacin Estndar, Distribucin Normal, etc.)

Mtodos de Clculo (Frmulas derivadas de la teora)

Mtodos Cualitativos (Observacin de propiedades fsicas)

Mtodos Cuantitativos (Cuantificacin de propiedades fsicas y qumicas)

Clculos

Con los datos obtenidos y el/los mtodo(s) escogido(s), se procede a obtener

resultados que permitirn definir si los objetivos se cumplieron o no y por qu.

1.2.7. Resultados y Discusin

Resultados

En esta seccin se publican los resultados obtenidos por el procesamiento de los

datos obtenidos en la experimentacin.

Esta es la parte fundamental del trabajo, aqu se debe tener en cuenta 2 aspectos:




7

Anlisis de la validez del mtodo utilizado

Se debe indicar si el mtodo utilizado para la experimentacin fue adecuado o no

para obtener los resultados esperados. En caso afirmativo o negativo, se debe

argumentar el porqu de cada decisin.

Errores sistemticos y aleatorios

Aqu se deben indicar los errores que se observaron en la realizacin de la

experimentacin y en qu grado afect a los resultados que se obtuvieron, y en qu

se evidenci dicha influencia.

1.2.8. Conclusiones

Basado en los resultados y la discusin, se analizan las relaciones, los rangos, las

tendencias, las contrastaciones, las semejanzas o las diferencias entre los resultados

obtenidos y lo esperado de la teora, y otros experimentos u otras mediciones

realizadas en la misma prctica.

Una buena conclusin debe considerar:

Explicar las observaciones realizadas de una forma concisa y fundamentada en

la teora.

Indicar las relaciones entre las variables o las tendencias de stas en el

fenmeno observado, cmo afectan, y cmo se evidencian las variables en el

fenmeno.

Se debe evitar concluir que se realizaron las actividades con xito, o comentar

errores, esto se debe hacer en la discusin.

Se debe evitar explicar tendencias basadas en el modelo matemtico solamente,

sino interpretar la influencia de esa tendencia en el fenmeno.

1.2.9. Referencias Bibliogrficas

Debido a que se hace una consulta de literatura especializada para redactar la teora

y entender el fenmeno es de vital importancia colocar las citas bibliogrficas y

bibliografa en un informe. De lo contrario se asume que todo lo que se redact es

de su autora, lo que no es cierto y por ende se est cometiendo una COPIA.




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Cita Bibliogrfica

La cita bibliogrfica es una referencia que indica que se tom textualmente o utiliz

el sentido completo de un texto para incorporarlo en el informe.

Una cita bibliogrfica consta de dos partes: La primera es la cita, que va entre

comillas en el texto del informe; y la segunda es la referencia bibliogrfica que va

ubicada en el apartado correspondiente.

Una referencia bibliogrfica correcta contiene toda la informacin que ms pueda

para permitir que la persona que desee pueda encontrar esta informacin sin

ninguna dificultad.

Una referencia bibliogrfica correcta tiene la siguiente estructura:

Nombre del Autor

Ttulo de la Obra

Si se trata de una traduccin

Edicin o Reimpresin

Editorial

Lugar de Impresin

Fecha de impresin

Pgina(s)

Ejemplo:

Perry, R., Greene D., Manual del Ingeniero Qumico, trad. del ingls, Sptima

Edicin, Editorial McGraw-Hill, Mxico, 2010, p.30.

Bibliografa

La bibliografa es el material que se utiliz para sustentar ideas propias redactadas

que se incorporan en el informe.

Estas no se redactan como citas, sino solo como referencias bibliogrficas.




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1.2.10. Resumen

El resumen es la parte final de la redaccin del informe, curiosamente este se

encuentra siempre al principio del mismo.

El resumen sirve para indicar a un lector a breves rasgos todos los puntos que se

trataron anteriormente en la realizacin del informe.

El tamao del resumen no debe tener menos de 80 palabras y no debe exceder las

110 palabras.

Un resumen debe contener las siguientes partes:

Qu se hizo?

Se indica cual fue el objetivo primario de la experimentacin.

Se determin., Se realiz, Se comprob (Incorrecto)

Determinacin, Realizacin., Comprobacin (Correcto)

Cmo se hizo?

Se indica de forma resumida el procedimiento utilizado en la experimentacin.

Qu se obtuvo?

Se indica que resultados de la experimentacin (que definen el propsito) se

obtuvieron.

Qu se concluye?

Se redacta una conclusin general del experimento, que permita observar la validez

del trabajo realizado (Si cumpli o no con los objetivos y por qu).




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INDICACIONES GENERALES PARA EL LABORATORIO DE

BIOTECNOLOGA INDUSTRIAL

1. Asistir al laboratorio puntualmente, si el estudiante llega por ms de 5 minutos tarde no

puede realizar la prctica.

2. Traer mandil, guantes, cofia, alcohol, fsforos y mascarilla individual.

3. Llevar los materiales que sea necesarios para el desarrollo la prctica correspondiente.

4. No se permitir el consumo de alimentos en el interior del laboratorio.

5. Los informes se deben presentar a mano cada 15 das, en algunos casos se los realizara

de acuerdo al horario que predisponga la Ingeniera.

6. Los informes se calificarn sobre 20 puntos y en la nota final tendrn un valor de 3

puntos.

7. En el resumen responder a las preguntas

a. Qu se hizo? Objetivos

b. Cmo se hizo? Procedimiento Resumido

c. Qu se obtuvo? Resultados

d. Qu se concluy? Conclusiones

8. Toda ecuacin o frmula debe estar numerada, as como las materiales y equipos con su

apreciacin y rangos y los reactivos con su frmula molecular.

9. Las conclusiones basadas en los resultados y la discusin, se analizan las relaciones, los

rangos, las tendencias, las contrastaciones, las semejanzas o las diferencias entre los

resultados obtenidos y lo esperado de la teora, y otros experimentos u otras mediciones

realizadas en la misma prctica.

10. Los anexos debern ser fotografiados o si se desea graficar a mano.

11. Cuidar la presentacin del informe.




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Prctica 1: ESTERILIZACIN Y PREPARACION DE MEDIOS DE CULTIVO

RESUMEN

INTRODUCCION

Los Microorganismo como otros seres vivos, son susceptibles a los cambios de condiciones

ambientales y en la medida en que se han podido adaptar a estos cambios, se han

distribuido en gran diversidad de hbitats incluyendo los cambios de condiciones extremas

sobre todo de tipo fsico y qumico.

Se han desarrollado y aplicado diversos procesos de desinfeccin y esterilizacin para

limitar su presencia o eliminarlos. La esterilizacin es un mtodo de eliminacin total de

todo tipo de organismo y asegura la ausencia absoluta de cualquier forma viviente, mientras

que la desinfeccin es un proceso que solamente elimina formas vegetativas de los

microorganismos.

Los procesos de calor hmedo se aplican para esterilizar medios de cultivo, soluciones, y

cultivos bacterianos que se desechan, el ms recomendable es el autoclave en el que se

utiliza vapor de agua a presin para alcanzar temperaturas de 121C. El material se deja a

esta temperatura durante 15 minutos para asegurarse de la destruccin de endoesporas, que

son las estructuras bacterianas ms resistentes al calor.

Existen diferentes tipos medios de cultivo, y dependen del microorganismo a aislar o a

sembrar, por ejemplo: Agar de Eosina azul de metileno (EMB-agar) para identificacin de

enterobacterias, Agar para Estafilococos No. 110, Czapek-Dox Agar (CDA) para cultivo de

hongos, Caldo Urea diferenciacin de Proteus de Salmonella y Shigella, etc.

1. OBJETIVOS

1.1.Conocer los principios generales de las tcnicas de esterilizacin de materiales y

medios de cultivo.

1.2.Preparar adecuadamente un medio de cultivo.




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1.3.Evidenciar el efecto de las condiciones de asepsia en el control de la contaminacin

microbiana.

2. TEORIA

2.1.Medio de Cultivo

2.1.1. Definicin y Caractersticas

2.1.2. Tipos de Medios de Cultivo

2.2. Esterilizacin

2.2.1. Definicin y Mtodos de Esterilizacin

2.3.Agar


2.4.Agar Nutritivo


2.4.2. Composicin




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3. PARTE EXPERIMENTAL

3.1.Materiales y Equipos

3.1.1. Autoclave

3.1.2. Ph metro

3.1.3. Mecheros de alcohol

3.1.4. 2 Vasos de Precipitacin

3.1.5. Reverbero

3.1.6. 3 Cajas Petri

3.1.7. 3 Tubos de ensayo

3.1.8. Papel Aluminio

3.2.Sustancias y Reactivos

3.2.1. Agua Destilada (200 ml)

3.2.2. Carne cruda (5g)

3.2.3. Agar

3.2.4. Peptona de Casena

3.2.5. Cloruro de Sodio

3.2.6. cido Clorhdrico

3.2.7. Hidrxido de Sodio

3.2.8. Alcohol antisptico

3.3.Procedimiento

3.3.1. PARTE A: Preparacin de material de vidrio y medios de cultivo

3.3.1.1.Lavar las cajas petri, y dems materiales de vidrio con detergente. Enjuagar

con abundante agua.

3.3.1.2.Escurrir el exceso de agua y volver a enjuagar con agua destilada las

paredes interiores.

3.3.1.3.Dejar secar el material sobre papel aluminio.

3.3.1.4.Una vez seco el material, colocar en la estufa a 150 C durante dos horas,

dejarlo enfriar.

3.3.2. PARTE B: Preparacin del medio de cultivo (Agar Nutritivo)

3.3.2.1.Pesar los reactivos necesarios para preparar 100 mL del medio. Colocarlos

en el vaso de precipitacin, en el orden de la tabla siguiente, con excepcin

del agar.

3.3.2.2.Aforar el vaso con agua destilada hasta 100 mL

3.3.2.3.Ajustar el pH de la solucin de 6,5 a 7 con una solucin de de HCl 0,1 M o

con una solucin de NaOH 0,1 M.

3.3.2.4.Adicionar el agar, agitar y calentar a ebullicin por un minuto.




14

3.3.2.5.Vaciar enseguida 5 mL del medio en un tubo con rosca, enjuagar

inmediatamente la pipeta.

3.3.2.6.Despus vaciar otros 5 mL del medio en un tubo pero tapado con algodn.

3.3.2.7.Introducir el resto del medio en el autoclave a 121 C durante 15 minutos.

3.3.3. PARTE C: Preparacin de cajas petri y tubos con medio de cultivo.

3.3.3.1.A los tubos con medios de cultivo, se los coloca en una superficie inclinada

de tal modo que el medio solidifique a una distancia de 2 cm de la boca del

tubo.

3.3.3.2.Dejar que los medios de cultivo que se han sacado del autoclave se enfren.

3.3.3.3.Cerca del mechero etiquetar las tres cajas petri de la siguiente manera

CONTROL, AL AIRE, AMBIENTE ASPTICO.

3.3.3.4.Distribuir el medio de cultivo en volmenes de 30 mL a las tres cajas petri,

en zona asptica cerca del mechero.

3.3.3.5.Dejar que solidifiquen los medios (por lo menos 30 minutos) y

posteriormente colocar las cajas de forma invertida.

3.3.3.6.Guardarlas en refrigeracin por 24 horas junto con los tubos de ensayo.

3.3.4. PARTE D: Pruebas de esterilizacin

3.3.4.1.Sacar los medios de cultivo de refrigeracin y colocarlos en la estufa a 30

C por 24 a 48 horas, as como los tubos de agar.

3.3.4.2.Verificar que no exista algn indicio de contaminacin (aparicin de

turbidez, nata superficial, depsitos en el fondo de los tubos, formacin de

colonias en la superficie del medio slido)

3.3.4.3.Si no hay contaminacin, abrir una de las cajas al aire por un minuto, la

segunda abrirla cerca del mechero por 30 s y la tercera mantenerla cerrada

(control).

3.3.4.4.Dejar incubar por dos horas ms en la estufa, sacarlas y hacer una

descripcin morfolgica de las mismas.

3.3.4.5.Ingresar los medios de cultivo con crecimiento microbiano en el autoclave

por 15 minutos y desecharlos.

4. PROCESAMIENTO DE DATOS

4.1.Datos Experimentales




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Tabla 4.1-1

Composicin de 100 mL de Medio de Cultivo

Composicin del Medio g/mL

Peptona de Casena 0,5

NaCl 0,8

Extracto de carne 0,3

Agar 1,5

4.2.Datos Adicionales

Tabla 4.2-1

Composicin de Medio de -Cultivo (Agar Nutritivo)

Composicin del

Medio

g/L

Peptona de Casena 5

NaCl 8

Extracto de carne 3

Agar 15

Fuente: http://www.mcd.com.mx/pdfs/AGAR%20NUTRITIVO.pdf

4.3.Mtodos de procesamiento de datos

El mtodo utilizado es el cualitativo ya que observamos y comparamos los diferentes

medios.

4.3.1. Observaciones

Tabla 4.3.1-1

Observaciones Experimentales

Procedimiento Observacin

Tabla 4.3.1-2

Descripcin morfolgica de microorganismos en caja petri

Medio de Cultivo Abierta al Aire Abierta en rea

asptica

Control

Agar Nutritivo




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4.4.RESULTADOS Y DISCUSIN

Tabla 4.4-1

Reporte de crecimiento microbiano

Tiempo de

incubacin, h

CRECIMIENTO

Al aire Asptico Control

Simbologa

(-) No hay crecimiento

(+) Poco Crecimiento

(++) Crecimiento regular

(+++) Crecimiento abundante

5. CONCLUSIONES

6. RECOMENDACIONES




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7. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

7.1. Citas bibliogrficas

7.2. Bibliografa

8. ANEXOS

8.1. Reporte fotogrfico del Diagrama del Equipo

8.2. Reporte fotogrfico de Medios de Cultivo




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19

Practica 2: CRECIMIENTO MICROBIANO: Elaboracin de Cerveza

RESUMEN

INTRODUCCIN

El crecimiento es el incremento ordenado de todos los constituyentes celulares a lo largo

de un determinado tiempo que conducen a un aumento de biomasa y de metabolito. Para

que el crecimiento microbiano tenga lugar es necesario un aporte adecuado de nutrientes;

Todos los m/o necesitan Carbono, nitrgeno, hidrgeno, Oxgeno, Azufre, Fsforo y

diversos minerales para crecer. Muchos necesitan adems nutrientes especiales, y

condiciones adecuadas o ptimas de pH, temperatura, un sistema de agitacin, y si crecen

en un ambiente anaerobio o aerobio. Todos estos requisitos hacen que nuestro

microorganismo crezca con cierta singularidad, esta se llama CURVA DE CRECIMIENTO

MICROBIANO, y es caracterstica de cada microorganismo y nos ayuda a determinar el

comportamiento y la cantidad de m/o que se reproducen en un determinado tiempo

colaborando con datos importantes para la elaboracin de ciertos productos alimenticios,

biorremediacin o la reproduccin de cierta cepa.

1. OBJETIVOS

1.1. Elaborar la curva de crecimiento microbiano para la levadura Saccharomyces

Cerevisiae.

1.2. Identificar las variables que involucran en una fermentacin discontinua.

1.3. Obtener cerveza casera tipo ale plida.

2. TEORIA

2.1. Curva de Crecimiento Microbiano y sus fases (identificar cada fase)




20

2.2. Saccharomyces Cerevisiae

2.2.1. Caractersticas

2.2.2. Condiciones ptimas de crecimiento

2.3. Fermentador

2.4. Tiempo de Duplicacin (resumido)

2.5. Velocidad Especfica de Crecimiento (resumido)

2.6. Ecuacin de Monod




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3.1. Materiales y Equipos

3.1.1. Estufa MEMMERT

3.1.2. Balanza Analtica

3.1.3. Fermentador Industrial de acero inoxidable alcohlico (anaerobio)

3.1.4. Analizador del grado de fermentacin

3.1.5. Medidor de pH de mesa HI2211

3.1.6. Brixmetro

3.1.7. Cajas petri

3.1.8. Papel aluminio (2m2)

3.1.9. Vasos de precipitacin (V=450ml)

3.1.10. Pipetas (V=10ml)

3.1.11. Reverberos

3.1.12. Algodn

3.2. Sustancias y Reactivos

3.2.1. Extracto de malta

3.2.2. Lpulo

3.2.3. Saccharomyces cervisae, levadura ale.

3.2.4. Agua destilada

3.3. PARTE A: PREPARACIN DEL SUSTRATO E INOCULO

3.3.1. Pesar 200 gramos de extracto de malta.

3.3.2. Disolver en 6 litros de agua destilada estril con calentamiento y agitacin.

3.3.3. Dejar hervir por 45 minutos, adicionar 4 gramos del lpulo.

3.3.4. Dejar enfriar en una cama de hielo por 10 minutos hasta que el mosto este a

temperatura ambiente.

3.4. PARTE B: INOCULACIN

3.4.1. Alimentar todo el sustrato al fermentador.

3.4.2. Encender una lmpara de alcohol cerca de la boquilla de alimentacin y

adicionar el inoculo antes preparado.

3.4.3. Adicionar la levadura

3.4.4. Esperar que se homogenice el caldo de fermentacin.

3.5. PARTE C: MEDICIONES DE PESO SECO

3.5.1. Pesar una caja petri en la balanza analtica.

3.5.2. Sealar 20 cajas petr en funcin de la hora de toma de muestra.

3.5.3. Despus que se ha homogenizado el caldo (primera medicin), en un vaso de

precipitacin se toma un volumen por la zona de descargar del fermentador.




22

3.5.4. A este volumen se lo regresa al fermentador.

3.5.5. Nuevamente se vuelve a obtener un volumen de caldo en el vaso de

precipitacin.

3.5.6. De este volumen se toma 5 mL y se coloca en la caja petr.

3.5.7. A la caja petri se la coloca en la estufa a una temperatura de 100 C.

3.5.8. Se repite el procedimiento durante cada hora.

3.5.9. Ya que cada caja petri este seca, se registra el nuevo peso.

3.5.10. Con el mismo volumen extrado, medir BRIX y pH y consecuentemente en

su analizador de fermentacin del equipo correspondiente.

RECOMENDACIN: EN CADA MEDICIN EN NECESARIO QUE SE

PESEN ANTES Y DESPUS LAS CAJAS PETRI CON LA MAYOR

PRECISION, YA QUE LA VARIACIN DE PESO SOLO OCURRE EN

DECIMAS DE MILIGRAMO.

4. DATOS

4.1. Datos experimentales

Tabla 4.1-1


Tiempo, h Peso seco

X, g/mL

BRIX pH




23

4.2. Datos Adicionales

Tabla 4.2-1

Propiedades del Sustrato

Sustrato Malta

Preparacin 10 % p/v

Aditivos Lpulo 4 g/6000 mL

Densidad 1,16

BRIX

pH

Fuente: Datos analizados antes de la inoculacin en el Laboratorio de

Biotecnologa

Tabla 4.2-2

Caractersticas del fermentador

Tipo de fermentador Fermentador Discontnuo, BATCH

Capacidad, L

Sistema de Calefaccin Provisto de Focos con regulacin para

el control de temperatura

Flujo de aire, L/s 2,354 L/min

Tabla XYZ

Condiciones ptimas de crecimiento de levadura Saccharomyces Cerevisiae

5. CLCULOS

5.1. Clculo de la velocidad especfica de crecimiento

Considerndose que X es peso seco

Ec.: 123

Para esto realizar la curva Peso seco=f(t) y se linealiza aplicando logaritmo al peso

seco.

En la ecuacin obtenida, despejar la pendiente.

Ec.: 123

Ec.:




24

5.2 Clculo del tiempo de duplicacin.

Ec.:

Ec.:

Ec.:




25

6. RESULTADOS Y DISCUSIN

Tabla 6.1-1

Datos registrados para Linealizacin

Tiempo, h Peso seco X,

g/mL

Ln X

Tabla 6.1-2

Resultados Finales

Fermentacin Microorganismo Velocidad

Especfica de

crecimiento, ( )

Tiempo de

duplicacin, h

Aerbica Saccharomyces

Cerevisiae

Tabla 6.1-3

Identificacin de Fases

Fase Tiempo de fermentacin

Fase de Latencia

Fase logartmica o exponencial

Fase estacionaria

Fase de muerte




26

*Para la identificacin de las fases, se debe observar en el grfico

7. CONCLUSIONES

8. RECOMENDACIONES

9. BIBLIOGRAFA


9.2. Bibliografa




27

10. ANEXOS

10.1. Grfica X=f(t) con fases identificadas

10.2. Grfica

10.3. Fotografa del fermentador.




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Prctica 3: FERMENTACIN LCTICA: ELABORACIN DE YOGURT (LECHE

EN POLVO Y GELATINA SIN SABOR)

RESUMEN

INTRODUCCIN

La fermentacin cido lctica es aquella que se lleva a cabo por las bacterias cido lcticas

cuya actividad se desarrolla en ausencia de oxgeno (anaerobiosis), y se manifiesta en la

transformacin de los azcares presentes en el vegetal, en cido lctico, etanol y dixido

de carbono. Estos productos finales son los caracterizan los diversos tipos de

fermentaciones. Fue descubierta por Louis Pasteur. La fermentacin lctica es causada por

algunos hongos y bacterias; el cido lctico ms importante lo producen las bacterias es el

LACTOBACILLUS. Otras bacterias que producen el cido lctico son: Leuconostoc,

Pediococcus, Estreptococo lactis, y Bifidobacterium.

La fermentacin Lctica es usada en todo el mundo para producir variedad de comidas:

Mundo Occidental: yogurt, panes, chucrut, encurtidos de pepino y aceitunas, Medio

Oriente: Verduras en ecabeche, Corea: kimchi, Rusia: Keffir, Egipto: rayah de lavan y

zzeer de lavan, kishk.

1. OBJETIVOS

1.1. Obtener yogurt por inoculacin de un cultivo madre

1.2. Evidenciar la variacin de pH durante el proceso de fermentacin.

1.3. Comparar el producto obtenido con normas de calidad

1.4. Compara la calidad de yogures obtenidos con diferentes materias primas

2. TEORIA

2.1. Yogurt

2.1.1. Definicin y caractersticas




30

2.1.2. Tipos de yogurt (realizar un cuadro conceptual)

2.2.Fermentacin Lctica

2.2.1. Definicin

2.2.2. Parte de la fermentacin lctica (con reacciones qumicas)

2.2.3. Variables que inciden en la fermentacin

2.3.Cultivo Pro bitico





31



3.1.1. Balanza

3.1.2. Estufa

3.1.3. Vasos de precipitacin

3.1.4. Termmetro

3.1.5. Recipiente de vidrio/ Matraz 1000 ml

3.1.6. Pipeta

3.1.7. Olla de acero inoxidable


3.2.1. Leche Cruda

3.2.2. Inoculo de yogurt

3.2.3. Fenolftalena

3.2.4. Hidrxido de Sodio

3.2.5. Azcar

3.2.6. Fruta

3.2.7. Keffir

3.3.Procedimiento

3.3.1. PARTE A: PASTEURIZACIN DE LA LECHE (PARA LECHE

CRUDA)

3.3.1.1. Colocar 1 Litro de leche cruda en calentamiento hasta que llegue a una

temperatura entre 85 C por 15 minutos.

Nota: Considerar que un calentamiento insuficiente produce un yogurt con baja

viscosidad, mientras que el sobrecalentamiento ocasiona un producto con

textura granular y separacin del suero de la leche.

3.3.1.2. Enfriar la leche hasta una temperatura de 42 a 45 C.

3.3.1.3. Con una pipeta, tomar 3% en volumen de inoculo del cultivo de yogurt y

mezclarlo bien en la leche pasteurizada.

3.3.1.4. A partir de este momento, y a una temperatura de 45 C, medir el pH del

yogurt cada 30 minutos hasta que alcance un pH de 4,6 a 3,7.

3.3.1.5. Ya que se lleg a este valor, enfriar al yogurt hasta una temperatura de 12

C por dos horas para detener poco a poco la fermentacin

3.3.1.6. Mantener en refrigeracin a una temperatura recomendada de 5C.

3.3.2. PARTE B: DETERMINACIN DE CIDEZ TITULABLE




32

3.3.2.1. Tomar en un matraz erlenmeyer 20 g de muestra homogenizada y diluir el

contenido del matraz con un volumen dos veces mayor de agua destilada.

3.3.2.2. Agregar 2 cm3 de solucin indicadora de fenolftalena (0,5 g de

fenolftalena en 100 mL de alcohol etlico al 95 %)

3.3.2.3. Agregar lentamente y con agitacin una solucin de 0,1 N de NaOH

justamente hasta conseguir un color rosado que persista por 30 s.

3.3.2.4. Leer el volumen de solucin empleada.

3.3.3. PARTE C: ELABORACIN DE LA MERMELADA

3.3.3.1. Mezclar la pulpa de fruta con azcar el relacin 1:1 y mezclar hasta que se

disuelva completamente el azcar.

3.3.3.2. Someter a calor a la mermelada preparada y evaporarla hasta que esta gane

viscosidad.

3.3.3.3. Mezclar con el yogurt cuidadosamente para que no pierda el yogurt su

viscosidad.

4. PROCEDAMIENTO DE DATOS


Tabla 4.1-1

Caractersticas Iniciales

Tipo de Leche

Agente Estabilizante

Inculo

Tabla 4.1-2

Valores de ph obtenidos

Tiempo, h pH

Tabla 4.1-3

Volumen de NaOH utilizado para la titulacin

Masa de muestra, g Volumen de NaOH, mL

20




33


Tabla 4.2-1

Norma INEN para leches fermentadas

Fuente: Norma INEN, Leches fermentadas.

4.3.Mtodo de procesamiento de datos

Se utiliz el mtodo de clculo para titulacin, balances de masa y determinacin

de costos de produccin pero en general se puede decir que se utiliz en mtodo

cualitativo y cuantitativo para las diferentes propiedades a medir.

4.4.Clculos

4.4.1. Clculos de Acidez Titulable

Ec.

4.4.1-1

A: Acidez Titulable de la leche fermentada en % en masa de cido lctico

V: Volumen de la solucin de NaOH empleado en la titulacin

N: Normalidad del NaOH




34

4.4.2. Balance de Masa (De acuerdo al tipo de yogurt)

4.4.3. Estimacin de Costos de Produccin

Tabla 4.4.3-1

Costos de elaboracin del queso

Materia Prima Costo por unidad Costo Total




35


Tabla 4.5-1

Caractersticas Finales del Producto

Tipo de Leche

Agente Estabilizante

Inculo

Acidez Titulable

Tabla 4.5-2

Comparaciones entre productos obtenidos

Tipo de Leche Agente

Estabilizante Inoculo

Caractersticas

Organolpticas

Tabla 4.-3

Comparacin con Keffir

Producto Obtenido

Keffir

5. CONCLUSIONES




36

6. RECOMENDACIONES



7.2. Bibliografa

8. ANEXOS

8.1. Diagrama del Equipo (fotografa)

8.2. Reporte fotogrfico de Productos obtenidos




37




38

Prctica 4: ELABORACIN DE QUESO FRESCO Y RICOTTA

RESUMEN

INTRODUCCION

La definicin admitida internacionalmente es la siguiente: Queso es el producto fresco o

madurado obtenido por coagulacin y separacin del suero de cualquiera de los siguientes

productos: leche, nata, leche desnatada (total o parcialmente), suero de mantequilla o de

una mezcla de cualquiera de ellos.

Cultivo de bacterias lcticas, cuya misin es transformar el azcar de la leche (lactosa)

en cido lctico, lo que hace que la leche se acidifique con lo que coagular ms

fcilmente. La adicin de cultivos lcticos se suele realizar a una temperatura de 25-30

C y se les deja crecer durante unos minutos.

Cloruro clcico, que aadido a la leche contribuye a su acidificacin y aumenta el

contenido en calcio de la misma, lo que acelerar el proceso de coagulacin. Se suelen

aadir cantidades de 5 a 20 g de cloruro clcico por cada 100 l de leche.

Nitrato potsico, que inhibe el crecimiento en la leche de bacterias que producen gases

perjudiciales para el sabor y aroma del futuro queso. Se aade en dosis mximas de 20 g

por cada 100 kg de leche.

Colorantes naturales autorizados.

Mohos, que ayudan a desarrollar aromas y sabores durante la maduracin.

La maduracin del queso viene a ser una segunda fermentacin donde cada queso lleva un

nombre segn el microorganismo o tcnica qumica usados, como por ejemplo: Camembert

y Brie (Francia), Roquefort, Azul y Gorgonzola (Francia e Italia), Gouda (Paises Bajos),

Cheddar (Reino Unido), Gruyere (Suiza), etc.

1. OBJETIVOS

1.1. Obtener queso fresco y ricotta a partir de leche cruda.




39

1.2.Evidenciar la variacin en el tiempo de la fermentacin, al utilizar diferentes

cantidades de quimosina.

1.3.Diferenciar entre el producto obtenido con y sin la adicin de fermento lctico

2. TEORIA

2.1.Leche

2.1.1. Definicin y Protenas de la leche

2.2.Quimosina

2.2.1. Caractersticas y funcin en la elaboracin del queso

2.3.Fermento Lctico


2.4.Queso


2.5.Suero

2.5.1. Definicin y Composicin Qumica

2.6.Ricotta





40



3.1.1. Balanza

3.1.2. Ph metro

3.1.3. Probeta

3.1.4. Termmetro

3.1.5. Molde o recipiente de Plstico

3.1.6. Olla de acero inoxidable

3.1.7. Cedazo o cernedera

3.1.8. Reverbero

3.1.9. Cuchillo


3.2.1. Leche Cruda

3.2.2. Cloruro de Calcio

3.2.3. cido Ctrico

3.2.4. Yogurt (cepas de bacterias)

3.2.5. Enzima o cuajo

3.2.6. Cloruro de Sodio

3.3.Procedimiento

3.3.1. PARTE A: PASTEURIZACIN

3.3.1.1. Antes de iniciar la pasteurizacin se filtrar la leche con el objetivo de eliminar

impurezas.

3.3.1.2. Tomar los 3 L de leche cruda y calentarla hasta 63 a 65 C por 30 minutos.

3.3.1.3. Enfriar la leche hasta obtener una temperatura de 38 a 40 C

3.3.1.4. Ya alcanzada esta temperatura, adicionar 0,05 g/L de cloruro de calcio y

agitar para facilitar la disolucin.

3.3.2. PARTE EXTRA: ADICION DEL FERMENTO

3.3.2.1. Para la adicin del fermento se debe agregar 1 % p/v de yogurt natural (como

fuente de bacterias lcticas lcticos).

3.3.2.2. Mezclar y medir su pH inicial.

3.3.3. PARTE B: ADICIN DE ENZIMA, CORTE Y SALADO. (QUESO

FRESCO)

3.3.3.1. Adicionar la cantidad establecida de enzima de acuerdo a la presentacin. En

el caso de pastilla adicionar 1/16 de pastilla o en el caso de polvo, calcular

segn la concentracin sugerida.

3.3.3.2. Una vez aadido dejar en reposo y medir el tiempo de coagulacin

(separacin de 2 fases)




41

3.3.3.3. Ya que se observa la formacin de la cuajada, realizar con el cuchillo cortes

en cuadritos de 2 x 2 cm.

3.3.3.4. Adicionar sal 3% del peso en funcin si se desea un producto salado y dejar

en reposo por 15 minutos.

3.3.4. PARTE C: DESUERADO, MOLDEADO Y PRENSADO (QUESO

FRESCO)

3.3.4.1. Separar el cuajo del suero con el uso de una tela y colocar en el molde.

Considerar que le molde debe tener una base con huecos para facilitar del

desuerado.

NO ELIMINAR EL SUERO OBTENIDO

3.3.4.2. Ya en el molde y con el uso de una prensa realizar presin con el fin de

eliminar el suero presente en el cuajo.

3.3.4.3. Pesar el producto obtenido y mantenerlo en refrigeracin a 4C

3.3.5. PARTE D: ELABORACIN DE RICOTTA

3.3.5.1. Medir el volumen del suero obtenido en el proceso anterior.

3.3.5.2. El suero obtenido se debe calentar hasta una temperatura de 85 C y adicionar

cido ctrico hasta que llegue a un pH de 4,6.

3.3.5.3. Retirar del fuego y dejar en reposo por 20 minutos.

3.3.5.4. Adicionar sal 3% peso si se desea un producto salado.

3.3.5.5. Separa el Ricotta formado con telas y repetir el procedimiento antes realizado,

esto es prensado y salado.

3.3.5.6. Ya obtenido el producto, pesarlo y calcular su rendimiento.

NOTA: Para el caso del los quesos con y sin la adicin de fermento lctico, NO SE DEBE

CONSUMIR EL PRODUCTO HASTA 4 DAS DESPUES, para poder analizar la

diferencia entre estos quesos.






42

Tabla 4.1-1

Datos experimentales

Tipo de Leche Volumen de Leche,

mL Enzima, g

Tiempo de

coagulacin, min

Tabla 4.1-2


Leche, g Peso de Queso, g

Tabla 4.1-3


Volumen del suero, ml cido Ctrico, mL Peso de Ricotta, g


Tabla 4.2-1

Densidad de la leche

Leche, g Densidad de Leche, g/mL


Se utiliz el mtodo de clculo, el cualitativo y el cuantitativo.


Tabla 4.3.1-1

Observaciones Experimentales

Procedimiento Observacin




43

Tabla 4.3.1-2

Descripcin del producto

Fermento Lctico Caractersticas de Queso Caractersticas de

Ricotta

Con fermento Olor:

Color:

Textura:

Escurrido del Suero:

Olor:

Color:

Textura:


Sin fermento Olor:

Color:

Textura:


Olor:

Color:

Textura:


Para llenar esta tabla en necesario consultar con otro grupo que elaboro el queso la

condicin contraria (1) o (2)

Y colocar este como fuente.

4.4.Clculos

4.4.1. Clculo del peso de la leche

Ec. 4.4.1-1

4.4.2. Clculo del rendimiento de queso

Ec. 4.4.2-1

4.4.3. Clculo del rendimiento de la ricotta

Ec. 4.4.3-1




44

4.4.4. Balance de Materia

Ec. 4.4.4-1

Donde:

E: Entradas, g

S: Salidas, g

P: Prdidas, g

Realizar el Balance de Masa y determinar las Prdidas que existen durante el

proceso

| Ec. 4.4.4-2

4.4.5. Estimacin de costos de Elaboracin

Tabla 4.4.5-1

Costos de elaboracin del queso


Consultar y colocar la fuente





45

Tabla 4.5.1-1


Tipo de

Queso

Tipo de

leche

Enzima, g Rendimiento

de Queso

Rendimiento de

Ricotta

5. CONCLUSIONES

6. RECOMENDACIONES




46



7.2. Bibliografa

8. ANEXOS

8.1.Diagrama del Equipo Fotografas

8.2.Reporte fotogrfico de Productos obtenidos




47




48

Prctica 5: FERMENTACIN ALCOHOLICA (VINO)

RESUMEN

INTRODUCCION

La fermentacin alcohlica es un proceso anaerbico realizado por las levaduras y algunas

clases de bacterias. Estos microorganismos transforman el azcar en alcohol etlico y

dixido de carbono. La fermentacin alcohlica, comienza despus de que la glucosa entra

en la celda. La glucosa se degrada en un cido pirvico. Este cido pirvico se convierte

luego en CO2 y etanol. Los seres humanos han aprovechado este proceso para hacer pan,

cerveza, y vino. En estos tres productos se emplea el mismo microorganismo que es: la

levadura comn o lo Saccharomyces cerevisae.

Fermentacin de Pan

Durante el proceso de fermentacin de pan, el azcar es convertida en alcohol etlico y

dixido de carbono. El dixido de carbono formar burbujas, que sern atrapadas por el

gluten del trigo que causa que el pan se levante. Debido a la rapidez con que se fermenta el

pan, se requieren apenas pocas cantidades de alcohol, cuya mayora se evapora durante el

proceso de levitacin.

Fermentacin de Vino

Los responsables de la fermentacin alcohlica de los vinos son las Saccharomyces. El jugo

de uva contiene altos niveles de azcar en forma natural. Estos azcares se transformar en

alcohol y dixido de carbono. La fermentacin natural puede producir vino con alcohol de

hasta 16 por ciento.

1. OBJETIVOS

1.1.Obtener alcohol mediante la fermentacin de diferentes tipos de frutas

1.2.Evidenciar la fermentacin a partir de la variacin de los Brix de la solucin.




49

2. TEORIA

2.1.Fermentacin Alcohlica

2.1.1. Reacciones Qumicas

2.1.2. Condiciones de Operacin de un Fermentador



3.1.1. Balanza

3.1.2. Brixmetro

3.1.3. Termmetro

3.1.4. Alcoholmetro

3.1.5. Vasos de Precipitacin

3.1.6. Probeta

3.1.7. Cedazo

3.1.8. Recipiente de vidrio

3.1.9. Olla de Acero Inoxidable


3.2.1. UVAS

3.2.1.1.3 kg de uvas maduras

3.2.1.2.2 L de agua

3.2.1.3.1,5 kg de azcar

3.2.2. PASAS

3.2.2.1.2 L de agua




50

3.2.2.2.0,25 kg de pasas

3.2.2.3.0,5 kg de azcar

3.2.2.4.20 g de levadura fresca

3.2.2.5.Cuchara de palo

3.2.3. (FRESAS)

3.2.3.1.2 kg de fresas

3.2.3.2.2 L de agua

3.2.3.3.0,3 kg de azcar

3.2.3.4.1 limn

3.2.3.5.30 g de levadura

3.2.4. Agua Destilada

3.2.5. Jugo de Limn

3.2.6. Saccharomyces

3.3.Procedimiento

3.3.1. (UVAS)

3.3.1.1.Poner a calentar agua y cuando ya hierve, echar el agua sobre las uvas.

3.3.1.2.Ya cuando se haya enfriado bastante, aplastar las uvas con las manos

(tener cuidado de no triturar las pepitas)

3.3.1.3.Despus de lo cual cubrir el recipiente y tapar con un pao, dejar en

reposo de 3 a 4 das.

3.3.1.4.A ese tiempo se realiza un trasiego y se adiciona el azcar, controlar la

fermentacin durante una semana.

3.3.2. (PASAS)

3.3.2.1.Lavar bien las pasas y colocarlas en agua se mantiene en calentamiento a

ebullicin por una hora.

3.3.2.2.Despus del tiempo establecido adicionar al lquido resultante el azcar

y la levadura. Al momento de adicionar la levadura verificar que el

mosto no est a una temperatura superior de 30 C.

3.3.2.3. Al cabo tres das, filtrar la el lquido obtenido y dejar en un recipiente

(de madera preferiblemente) durante 10 das a temperatura ambiente

para que termine la fermentacin

3.3.3. (FRESAS)

3.3.3.1.Se trituran las fresas en el agua y se adiciona los 30 g de levadura.

3.3.3.2.Cubrir y dejar a temperatura ambiente.

3.3.3.3.Al siguiente da adicionar el azcar y el jugo del limn.

3.3.3.4.Dejar fermentar por una semana.




51

3.3.4. Medir grados Brix, ph y grados alcohlicos iniciales. NOTA: Dejar en un

lugar cerrado y lejos de la luz solar.

3.3.5. Durante una semana medir diariamente grados Brix y pH; al finalizar la

semana medir el grado alcohlico final.


4.1.Datos experimentales

Tabla 4.1-1

Condiciones Iniciales

Sustrato Brix Levadura, g pH GL

Tabla 4.1-2


Tiempo, h BRIX pH

4.2.Datos finales

Tabla 4.2-1

Datos Finales

Sustrato Brix GL

Tabla 4.2-2

Observaciones

Procedimiento Observaciones


El mtodo usado es el cualitativo y el cuantitativo, la utilizacin es indispensable

para la elaboracin del balance de masa.




52


4.3.2. Balance de Masa (en funcin de cada procedimiento

4.3.3. Estimacin de costos

Tabla 4.3.3-1

Costos de elaboracin de licor de frutas


4.4. RESULTADOS Y DISCUSIN




53

5. CONCLUSIONES

6. RECOMENDACIONES

7. REFERENCIA BIBLIOGRAFA


7.2. Bibliografa

8. ANEXOS

8.1. Procedimiento de la elaboracin de bebida alcohlica

8.2. Grafica GL=f(t) y Brix=f(t)




54




55

Prctica 6: DESTILACIN ALCOHOLICA

RESUMEN

INTRODUCCION

Las bebidas destiladas son las descriptas generalmente como aguardientes y licores; sin

embargo la destilacin, agrupa a la mayora de las bebidas alcohlicas que superen los 20

de carga alcohlica. El secreto de las bebidas alcohlicas destiladas, y en especial del

productor, es el de otorgarle a la bebida una fuerza alcohlica elevada y al mismo tiempo

que el producto final sea gustoso al paladar. Proceso que fue evolucionando y mejorando

con el paso del tiempo.

Es por eso que la siguiente prctica otorgar a nuestra bebida fermentada mayor

concentracin y purificacin.

1. OBJETIVOS

1.1.Obtener un tipo de alcohol producto de la destilacin de la cerveza

1.2.Determinar el tipo de bebida alcohlica destilada en funcin al punto de ebullicin.

2. Teora

2.1. Destilacin

2.2. Medicin de grados GL de Vinos




56



3.1.1. Baln de destilacin

3.1.2. Refrigerante

3.1.3. Reverbero


3.1.5. Pinzas y Soporte Universal


3.2.1. Agua

3.2.2. Licor Fermentado

3.3.Procedimiento

3.3.1. Preparar el equipo de destilacin.

3.3.2. Colocar el licor fermentado en el baln, encender el reverbero y esperar a que

se empiece a destilar.

3.3.3. Eliminar los primeros 5 ml de bebida y empezar a recolectar el resto, ntese la

diferencia en el sabor y el olor.



Tabla 3.1-1


Tipo de bebida

alcoholica

Brix pH GL

Tabla 3.1-2


Temperatura de

destilacin (C)

BRIX pH


El mtodo usado es el cualitativo y cuantitativo al determinar propiedades.




57


Tabla 3.3-1

Datos Finales

Bebida

alcohlica

destilada

Brix GL

Tabla 3.3-2

Observaciones


5. CONCLUSIONES




58

6. RECOMENDACIONES

7. REFERENCIAS BIBLIOGRAFA


7.2. Bibliografa

8. ANEXOS

8.1. Diagrama del Equipo

8.2. Reporte Fotogrfico




59




60

Prctica 8: FERMENTACIN ACTICA

RESUMEN

INTRODUCCION

Los licores de fermentacin suave, se convierten solo con la exposicin al aire. Esto es

debido a la conversin del alcohol en cido actico. El cido actico es producido mediante

la fermentacin de varios sustratos, como solucin de almidn, soluciones de azcar,

productos alimenticios alcohlicos como vino o sidra, con bacterias de Acetobacter.

Ejemplos de la fermentacin actica:

Europa Occidental: La cidra y vinagre de manzana y el vinagre de vino, kambucha

frica: vinagre de vino de palmera

Filipinas: vinagre de agua de coco.

El cido actico es utilizado como un conservante previniendo el crecimiento de las

bacterias y los hongos. As mismo, es agregado en la mayonesa para incrementar el efecto

de inactivacin contra la Salmonella, ingrediente verstil de sus comidas como resaltador

del sabor o condimento, un ablandador de las carnes, un presevante natural de alimentos, un

agente medicinal y un elemento de gran utilidad en la limpieza del hogar.

1. OBJETIVOS

1.1.Obtener vinagre por inoculacin de un cultivo madre.

1.2.Obtener vinagre a partir de diferentes tipos de vino.

2. TEORIA

2.1.Fermentacin Actica.

2.1.1. Fermentacin Oxidativa

2.1.2. Fermentacin Anaerbica




61


2.2.Accin Microbiana

2.2.1. Acetobacter

2.2.2. Clostridium



3.1.1. Termmetro

3.1.2. Ph metro

3.1.3. Brixmetro

3.1.4. Alcoholmetro

3.1.5. Recipiente de Boca Ancha


3.1.7. Pipeta

3.1.8. Pao o cedazo





62

3.2.1. Vinagre Madre o natural.

3.2.2. Licor fermentado (Vino)

3.2.3. Vinagre Comercial

3.3.Procedimiento

3.3.1. Despus de haber realizado la obtencin de licor por fermentacin, colocar el

licor obtenido colocarlo en un recipiente de boca ancha.

3.3.2. Con un vaso de precipitacin adicional el 20% v/v de inculo (vinagre) y con

ayuda de otro vaso de precipitacin trasvasar el liquido varias veces con la

intencin que tenga contacto con oxigeno todo el licor.

3.3.3. Colocarlo en un ambiente clido, considerando que la temperatura este

alrededor de 20 a 30 C.

3.3.4. Al cabo de tres das, verificar el pH final y mantenerlo alejado de la luz y

exposicin directa.

3.3.5. Almacenar el vinagre obtenido en un recipiente oscuro.

3.3.6. Comparar el vinagre obtenido utilizando herramientas sensoriales y los datos de

pH.



Tabla 4.1-1


Tipo de

Bebida

Alcohlica

Volumen, mL Cantidad de

Inculo, mL

pH GL


El mtodo cualitativo y cuantitativo, mediante la observacin y la determinacin de

reacciones, balance de masa y estimacin de costos.


Tabla 4.2.1-1

Observaciones





63


4.2.3. Balance de Masa

4.2.4. Estimacin de costos

Tabla 4.2.4-1

Costos de elaboracin de licor de frutas






64

5. CONCLUSIONES

6. RECOMENDACIONES

7. REFERENCIA BIBLIOGRAFA

7.1.Citas bibliogrficas

7.2.Bibliografa

8. ANEXOS





65




66

Prctica 8: BIOREMEDIACIN

RESUMEN

INTRODUCCION

El uso global de la energa ha ido aumentando desde la Revolucin Industrial en forma creciente. Las fuentes principales de energa son los combustibles fsiles: carbn, gas

natural y petrleo, que aportan entre el 75% y el 85% del total de la energa utilizada. Las

reservas de combustibles fsiles son limitadas y, a corto o mediano plazo, se necesitarn

fuentes alternativas de combustible. Entre ellos, los combustibles producidos

biolgicamente o biocombustibles.

Los biocombustibles son combustibles de origen biolgico obtenido de manera renovable a

partir de restos orgnicos. Estos restos orgnicos proceden habitualmente del azcar, trigo,

maz o semillas oleaginosas. Todos ellos reducen el volumen total de CO2 que se emite en

la atmsfera, ya que lo absorben a medida que crecen y emiten prcticamente la misma

cantidad que los combustibles convencionales cuando se queman, por lo que se produce un

proceso de ciclo cerrado.

El biogs se obtiene a partir de la fermentacin bacteriolgica de las cscaras frescas de

banana y de naranja. En la produccin de biogs las cscaras de banana y naranja brindan la

fuente de carbono.

Las bacterias existentes en las cscaras se multiplican y fermentan generando gas metano.

Un primer grupo de microorganismos hidroliza los biopolmeros y los lpidos en unidades

estructurales como cidos grasos, monosacridos, aminocidos y compuestos relacionados.

Un segundo grupo de bacterias anaerobias, acidgenas, fermenta los productos

descomponibles del primer grupo en cidos orgnicos simples, como el cido actico. Un

tercer grupo de microorganismos, metanognicos, convierte el hidrgeno y el cido actico

en gas metano y dixido de carbono. El biogs que sirve como biocombustible es el

metano.

1. OBJETIVOS

1.1.Construir un biodigestor para la produccin de biogas a partir de las cascaras de

banana y naranja.

1.2.Evaluar la produccin de gas metano y dixido de carbono en el proceso de

fermentacin bacteriolgica.




67

2. TEORIA

2.1.Biorremediacin

2.1.1. Definicin

2.1.2. Efectos que determinan la eficacia de la biorremediacin

2.1.3. Tipos de Biorremediacin

2.2.Biocombustible

2.3.Biogas

2.4.Metano (Aplicaciones)




3.1.2. Balanza analtica

3.1.3. Frasco





68

3.2.1. Cascaras de banana o naranja

3.2.2. Tierra

3.2.3. Urea

3.3.Procedimiento

3.3.1. Pesar 250 g de cascaras de banano o naranja

3.3.2. En un vaso de precipitacin cortar en trocitos las cascaras y realizar una mezcla

homognea con tierra hmeda.

3.3.3. Introducir la mezcla en el recipiente y sellar hermticamente para que no exista

contacto con aire, utilizando un globo.

3.3.4. Realizar observaciones da a da durante 15 das, o hasta que haya formacin de

gas.

3.3.5. Exponer el gas obtenido a la llama para verificar si existi produccin de metano o

CO2

3.3.6. Reportar las observaciones y el da en que se produjo metano.

4. OBSERVACIONES

Tabla 4.1-1

Observaciones

Da Observacin Produccin de metano

1 Si-No

5

10

15

20

25

30





69

5. CONCLUSIONES

6. RECOMENDACIONES

7. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

7.1. Referencias Bibliogrficas

7.2. Bibliografa

8. ANEXOS

8.1.Reporte fotogrfico




70




71

Prctica 9: ELABORACION DE BIODIESEL

RESUMEN

INTRODUCCIN

Actualmente el consumo de combustibles presenta un crecimiento importante por la

dependencia petrolera que se ha generado en el pas, provocando una gran cantidad de

contaminacin emitida hacia la atmsfera con la que se ha favorecido el efecto invernadero,

considerando adems que estos carburantes no son renovables. Cada litro de aceite

comestible que es tirado al drenaje contamina 1000,000 de litros de agua.

Tomando en cuenta que gran parte de la poblacin ocupa aceite para cocinar; se

implement un uso para que ste aceite quemado cree una alternativa ecolgica llamado

biodiesel.

1. OBJETIVOS

1.1. Elaborar biodiesel a partir de aceite de frituras.

1.2. Determinar el rendimiento del proceso utilizado.

2. TEORIA

2.1. Biocombustible

2.2. cido Graso

2.3. Biodiesel

2.4. Porcentajes de Mezcla de Etanol y Gasolina




72


3.1. Materiales y Equipos

3.1.1. 1 Recipiente de HDPE

3.1.2. 1 Batidora Vieja

3.1.3. 1 Balanza

3.1.4. 1 Botella Plastica de 2 Litros

3.2. Sustancias y Reactivos

3.2.1. 1 Litro de Aceite Vegetal

3.2.2. 200 ml de Metanol

3.2.3. Hidrxido de Sodio o Hidrxido de Potasio

3.3. Procedimiento

3.3.1. Medir 200 ml de metanol y se verter con un embudo dentro del recipiente de HDPE

de medio litro. 3.3.2. Con un segundo embudo en la mezcla anterior, se vierten 3.5 gramos de hidrxido

de sodio (NaOH). Conocido como sosa custica. 3.3.3. Agitar la botella unas pocas veces, de lado a lado. La botella se calienta durante la

reaccin. Se agita bien durante un minuto, a intervalos de cinco o seis minutos, el

hidrxido de sodio se disuelve en el metanol formando metxido de sodio. 3.3.4. Calentar el aceite a 55 C y se vierte dentro de la batidora. 3.3.5. Con la mquina an parada, vierte el metxido con mucho cuidado.

3.3.6. Mezclar durante 20 o 30 minutos aproximadamente.

3.3.7. Verter la mezcla en una de las botellas de dos litros y cerrarla.

3.3.8. Dejarlo reposar siete das aproximadamente.




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3.3.9. Decantar el biodiesel cuidadosamente en un frasco limpio o en una botella de

plstico, evitando que entre glicerina en el nuevo recipiente.


4.1. Datos Experimentales

Tabla 4.1-1


Aceite V, ml Titulacin


4.2.1. Rendimiento

5. CONCLUSIONES




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6. RECOMENDACIONES

7. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

7.1. Citas Bibliogrficas

7.2. Bibliografa

8. ANEXOS





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