HONGOS DEL MEDIO AMBIENTALES MEDIANTE TECNICA DE PRECIPITACION

8/20/2019 HONGOS DEL MEDIO AMBIENTALES MEDIANTE TECNICA DE PRECIPITACION

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UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE CHIHUAHUA

FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS

REPORTE DE LABORATORIO

PRÁCTICA NO.2“HONGOS DEL MEDIO AMBIENTALES MEDIANTE TECNICA

DE PRECIPITACION”

TITULAR: M.E. ISKRA REYES HERNÁNDEEQUIPO ! "INTEGRANTES:VANESA MU#O HUERTA 2$22$%CARLOS CHAIRE PEREAG&'(): $*

A 02 de marzo del 2014 Chihuahua, Chih

Resumen

En la presente practica se aislaron hongos y levaduras ambientales por medio de latécnica de precipitación para lo cual se expuso una caja Petri con agar papa dextrosa al

LABORATORIO DE MICOLOGÍA M+DICA


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medio ambiente por 20 minutos . la toma de muestra se realizo en la recepción deledificio de laboratorios de la acultad de !iencias "uimicas de la #$!%. Posteriormentese procedio a serrar y cellas la caja con papel parafilm para incubarla a &0'c por ( dias.

)ranscurrido el tiempo de incubación se evaluo la presencia u ausencia de coloniaslevadriformes y filamentosas *ue de estar precentes se evaluaron macroscópicamente ymicrosopicamente. +a preparación de la muestra a observarse al microscopio se realizopor medio de la técnica de la cinta scotch y la técnica de aguja de diceccion , ambas encaso de tratarse de una colonia filamentosa . mientras *ue las colonias levaduriformesse prepararon con una tinción de -ram. los resultados obtenidos fueron la presencia dedos colonias una con aspecto filamentoso y otra con aspecto levaduriforme .en lo *uerespecta a la colonia filamemntosa se corroboro *ue efectivamente se trataba de unhongo puesto *ue al microscopio se observaron las estructuras representativas de estas

hifas/ las cuales se describen ampliamente en los resultados. ientras *ue la colonia deaspecto levaduriforme denotaron estar formadas por bacterias cuya forma fueron bacilosen cadena -ram positivos.

OBJETIVO

• $islar y evaluar macroscópicamente y microscópicamente mohos y levaduras

presentes en el ambiente.• amiliarizarse con la técnica de precipitación para la toma de muestra as1 como

con la utilización de agares como medios de cultivo.

INTRODCCION

+os hongos son organismos cosmopolitas *ue pueden desarrollarse en los sustratos

ms variados, en todos los climas de la tierra e incluso en condiciones extremas. 3u

mbito es tan amplio, *ue sus esporas incluso sobrepasan la atmósfera $ira et

al., 200&/. El desarrollo f4ngico est supeditado a ciertas condiciones ambientales tales

como la humedad relativa, temperatura, precipitación, inversiones térmicas,contaminación, disponibilidad de sustrato y actividades humanas, las *ue influyen de

manera determinante en la proliferación y propagación de las part1culas f4ngicas hacia

los espacios interiores -uerrero et al., 200&/. +os hongos se propaga y reproducen por

esporas, las cuales sobreviven en condiciones ambientales *ue no favorecen el

crecimiento normal de hongo, permaneciendo dormantes hasta *ue las condiciones

ambientales se tornen favorables.+as esporas f4ngicas son componentes normales de

ambientes externos y pueden ser la fuente contaminante de los ambientes internos ymuchos de estos pueden servir como sitios de amplificación para el crecimiento de los

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hongos 5ueno et al., 200&/. +a mayor6a de los hongos presentes en los ambientes

internos son saprof6ticos, por*ue ellos obtienen lo *ue necesitan para su metabolismo de

materiales muertos, materia orgnica o sustratos como madera, papel, pintura, suelo,polvo, piel y alimentos. $l aire libre pueden encontrarse en reas o lugares h4medos

sombreados donde hay descomposición de hojas o de otro tipo de vegetación. En los

interiores pueden encontrarse en lugares donde los niveles de humedad son altos como

los sótanos o las duchas.

+a inhalación sistémica de esporas y fragmentos de micelio de hongos puede inducir

una afección alérgica respiratoria, tanto en las v1as aéreas superiores como en las

inferiores. +os componentes alergénicos de hongos contienen moléculas, como

glucoprote1nas, prote1nas y polisacridos, *ue pueden desencadenar reacciones de

hipersensibilidad tipo 7 8uiz et al., 2009/.

+os tipos ms comunes de mohos ambientales son Cladosporium sp, Penicillium sp,

Aspergillus sp, Mucor sp y Aternaria sp. -uerrero et al., 200&/

!ATERIA"E# $ !ETODO#

!a%erial

• $guja de disección

• $sa micológica

• !inta adhesiva transparente

• Porta objetos

• !ubre objetos

• )ijeras

• echero 5unsen

E&ui'o

• icroscopio óptico de campo claro

• 7ncubadora a &0'!

Rea(%i)os

$zul de algodón de lactofenol

!edios de (ul%i)o*

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• $gar papa dextrosa

!e%odolo+a

Dia 1

Ino(ula(i-n en medio de (ul%i)o 'or %.(ni(a de 're(i'i%a(i-n

:. Elegir un punto determinado del ambiente de estudio.2. ;estapar la caja Petri exponiendo el medio de cultivo al aire. El tiempo de

exposición puede ser de 20 a &0 minutos. )ranscurrido el tiempo tapar la placa y

rotular.

&. 3ellar con papel parafilm la caja Petri e incubar a &0'! de < a ( d1as.

Da 2

An/lisis ma(ros(-'i(o

:. 5uscar colonias filamentosas y levaduriformes2. ;efinir las caracter1sticas macroscópicas de las colonias presentes en el agar,

describiendo su forma, color, consistencia, textura y de ser posible el aspecto.

$notar sus observaciones

An/lisis mi(ros(-'i(o

8ealizar las siguientes técnicas de preparación de muestra para las colonias

filamentosas mediante las condiciones asépticas adecuadas encendiendo los mecheros

y manteniendo un per1metro de esterilización adecuado.

$/ )écnica con aguja de disección

:. !olocar una gota de azul de algodón de lactofenol en un portaobjetos

2. )omar muestra de la colonia del hongo con la aguja de disección previamenteEsterilizada el asa colocndola a la flama hasta el rojo vivo/

&. !olocar la muestra en el portaobjeto con la gota de azul de algodón de lactofenol.

=. !olocar un cubre objeto evitando la formación de burbujas.

bservar al microscopio a =0?

9. 8ealizar las anotaciones pertinentes.

5/ )écnica de cinta scotch

:. !ortar un trozo de cinta adhesiva y pegar una es*uina en el $sa micológica

previamente Esterilizada el asa colocndola a la flama hasta el rojo vivo/

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2. Poner en contacto la cara adhesiva de la cinta con la parte de la muestra donde

se encuentran los hongos.

&. Poner una gota de azul de algodón de lactofenol en el portaobjetos.=. !olocar la cinta adhesiva sobre la gota de azul de lactofenol.

bservar al microscopio a =0x

(. 8ealizar las anotaciones pertinentes.

8ealizar las siguientes técnicas de preparación de muestras para las colonias

levaduriformes mediante las condiciones asépticas adecuadas.a/ Elaboración de frotis

:. arcar las reas de frotis con un sharpie en la parte posterior del portaobjeto2. !oloca una gota de solución salina en el portaobjetos&. )omar una porción de la colonia levaduriforme con un asa estéril. ezcla con la

solución salina.=. Permitir *ue los frotis se se*uen al aire.


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!ORO"O3A !ACRO#C5ICA 6Des(ri'(i-n es(ri%a e ima+en7

Colonia I!AEN

orma !ircular

Tama8o :cm

Color de la (olonia $marilla a blanca delcentro hacia afuera /

Di9usi-n de 'i+men%o @egativo

#u'er9i(ie Plana

Te:%ura Aellosa

As'e(%o @o aplica

!ORO"O3A !ICRO#C5ICA

Colonia

!i(elio

)abicado

8amificado

%ialino!lamidoconidias y ra*uetas

Es%ru(%uras dere'rodu((i-n

!onidios

+agrima

%ialinos

icroaleurioconidios

3olitarios

#


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$


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Colonia No2

!ORO"O3A !ACRO#C5ICA

Colonia I!AEN

orma 7rregular

Tama8o < mm

Color de la (olonia 5lanca

Di9usi-n de 'i+men%o @egativo

#u'er9i(ie !onvexa

Te:%ura !remosa

As'e(%o @o aplica

!ORO"O3A !ICRO#C5ICA

Colonia

!i(elio $usente

"e)adura $usente

Ba(%erias 5acilos -ram positivos

%


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Dis(usi-n

En la presente practica se corroboro *ue tal como lo menciona la literatura los hongosson organismos cosmopolitas los cual *uiere decir *ue los podemos encontrar prcticamente en cual*uier lugar y *ue estos se pueden propagar de un medio externo auno interno por medio de esporas por lo cual los podemos encontrar distribuidos de unaforma incre1ble en el medio ambiente de modo *ue aun*ue no los veamos estos seencuentran precentes en sus formas de resistencia esperando las condicionesadecuadas para crecer .;e este modo *ue se puede definir a las esposras comoestructuras de resistencia *ue permiten al hongo sobrevivir y propagarse de un lugar aotro . Por otro lado se puede anexar *ue las condiciones de temperatura de 22'c y unahumedad de B(C son favorables para *ue coexistan los hongos ambientales puesto *ueestas fueron las condiciones de temperatura y humedad a las *ue se encontraba elestado de chichuahua chuhauahua el dia de la toma de muestra *ue dio como resultadola presencia de un hongo, estos datos se tomaron de la pagina denominada Del tiempoen chihuahua mexicoD. Por otro lado se puede establecer *ue los hongos *uepredominaron son a*uellos cuyas caracter1sticas son la presencia de hifas septadas ,hialinas con modalidades de clamidioconidias y cullas conidiaas ten1an la forma demicroaleurioconidias tal como lo revelo la observación al microscopio con un objetivo de=0 x .sin embargo tenemos *ue los hongos no son el 4nico tipo de microorganismos *uepodemos encontrar inmersos en el medio ambiente , en este caso el microorganimo *ueacompaaba a nuestro hongo fue una bacteria gram positiva, de esto es importantedestacar *ue nuestro agar no era un medio selectivo de modo *ue no contaba con

antibióticos *ue nos permitieran inhibir el crecimiento de este tipo de microorganismos.en lo *ue respecta a las técnicas utilizadas para la preparación de las muestras aobservar en el microscopio se puede decir *ue se mejoraron ya *ue la aparición deburbujas en nuestras muestras fueron escasas lo *ue habla de un buen manejo de latécnica.

C),*-'/0,

Bi;lio+ra9a

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