Upload
others
View
6
Download
0
Embed Size (px)
Citation preview
HRANLJIVE PODLOGE
Hranljive podloge obavezno sadrže:
• Vodu
• Izvor ugljenika
• Esencijalne minerale
• Faktore rasta (vitamini, aminokiseline, purini...)
Moraju da budu:
• Sterilne
• Bistre
• Dovoljno vlažne
• Optimalnog pH
Na osnovu sastava razlikuju se:
• Prirodne → pripremljene od sastojaka
nepoznatog sastava (ekstr. goveđeg mesa, ekstr.
kvasca...)
• Veštačke → pripremljene od prečišćenih
jedinjenja poznatog hemijskog sastava
Na osnovu namene razlikuju se:
• NESELEKTIVNE → kompleksne podloge koje omogućuju rast MO sa različitim potrebama u ishrani (LA, hranljivi agar...)
• SELEKTIVNE → sadrže bar jedan sastojak (boje, antibiotici...) koji inhibira rast nepoželjmih MO (minimalna podloga, Simonsov citratni agar...)
• DIFERENCIJALNE → sadrže sastojke koji na neki način omogućuju razlikovanje nekih MO od ostalih, ali ne inhibaraju rast nijedne grupe MO (endo agar)
Neselektivne podloge:
K 12
SY
252
Citrobacter sp.
LA podloga – očekuje se rast svih zasejanih bakterija
Uvr A
Neselektivne podloge:
Selektivne podloge:
Minimalna podloga (MM) – sadrži samo mineralne soli i glukozu
kao izvor ugljenika i služi za diferenciranje mutanata u ishrani.
PROTOTROFI → MO koji ne nose mutacije za sinteze hranljivih
materija, mogu da rastu na MM podlozi.
AUKSOTROFI → mutanti u ishrani, ne mogu da sintetišu sve
nutrijente, te ne mogu da rastu na minimalnoj podlozi. Dodavanjem
jednog po jednog nutrijenta u MM podlogu može se zaključiti za šta je
MO auksotrof (bakterije koje nisu izrasle na MM podlozi, a izrasle su
na MM sa argininom su auksotrofi za arginin).
Podloge sa antibioticima- Rastu samo mikroorganizmi koji su
rezistentni na antibiotik koji je stavljen u podlogu.
Selektivne podloge:
LA + tetraciklin – na podlozi će izrasti samo bakterije koje su rezistentne na tetraciklin
K 12
SY
252
Citrobacter sp
.
Uvr A
Selektivne podloge:
K12
SY
252
Citrobacter sp
.
K12
SY
252
Citrobacter sp.
Uvr A
Uvr A
MM
MM+arg
MM
MM+arg
Selektivne podloge: SCA
Simonsov citratni agar (SCA) – omogućuje rast samo bakterijama koje
mogu da koriste citrate kao izvor ugljenika, koriščenje citrata menja pH
podloge iz kisele u baznu što dovodi do promene boje iz zelene u plavu.
Bacillus subtilis
Selektivne podloge: SCA
Bacillus subtilis
Diferencijalne podloge:
Endo agar → podloga služi za razlikovanje bakterija koji fermetišu laktozu
od onih koji je ne fermentišu, laktoza i pepton - izvor ugljenika. Kiseli
produkti pri fermentaciji laktoze snižavaju pH podloge i menjaju boju
indikatora.
Bacillus subtilis
Diferencijalne podloge:
Specijalne podloge:
• Proizvođači hranljivih podloga kombinuju različite selektivne i
diferencijalne sastojke i tako dobijaju podloge za precizniju izolaciju
pojedinačnih hrupa MO ili čak određene grupe.
Eozin-metilensko plavo (eosin
methylene blue - EMB) → izoluje
koliformne bakterije, odnosno G-
bakterije koje fermentišu laktozu.
Sadrži boje eozin i metilensko plavo
koje inhibiraju rast većine G+
bakterija i u kiseloj sredini stvaraju
kompleks tamne boje i metalno-
zelenog sjaja.