PRAKTIKUM PK BLOK 17Uji Widal

Mukaddimah

• Wajib baca slide WIDAL nya dr. Rini sebelum belajar slide prakum ini (dengerin rekamannya kalo sempat)

• Disini cuma bahas widal slide test aja. Yg cara tabung, baca slide dr rini. (sapa tau keluar)

• Utk selanjutnya, antigen disingkat Ag. Dan antibodi disingkat Ab.

Apa itu widal slide test?

• Suatu metode diagnostik serologi untuk deteksi demam tifoid.

• Keuntungannya murah, mudah, dan hasilnya cepet diketahui

• Tp kelemahannya banyak. (Ag kurang terstandar, ada fenomena prozone,

dan sifatnya sangat subjektif). Hasilnya dipengaruhi banyak faktor (lihat +/- palsu).

• Makanya widal tidak dianjurkan sebagai penentu diagnosis tifoid (hanya penunjang diagnosa) karena punya sensitivitas dan spesifisitas yg rendah.

• TujuanUntuk mengetahui adanya Absalmonella (typhi/paratyphi) dalam sampel serum

• Prinsip Uji WidalAg S.typhi/paratyphi + Ab serum aglutinasi (kompleks Ag-Ab)

• Alat-Bahan- Sampel serum (darah vena tanpa anti koagulan)- Reagen Ag (macamnya dijelaskan dislide berikutnya)

- Mikropipet + tip- Lidi- Objek glass

1. Pada obyek glass,, berikan reagen yang akan diperiksa ( O,H S.thypii, dan antigen O pada S. parathypii) dan tambahkan serum penderita gunakan mikropipet…1/20 R= 25 µl dan S= 40 µl1/40 R= 25 µl dan S= 20 µl1/80 R= 25 µl dan S= 10 µl1/160 R= 25 µl dan S=5 µl

1/320 R= 50 µl dan S= 5 µl5

Cara kerja…..

2. campurkan dengan pengaduk lidi hingga merata..

3. setelah diaduk,, di “goyang-goyangkan”

selama 1 menit (gag boleh nambah,atau kekurangan)

4. Lihat pada mikroskop dengan perbesaran 10 x 10

DIKATAKAN POSITIF jika ada terbentuk aglutinasi seperti butiran pasir

6

HASIL POSITIF

Terdapat bentukan seperti PASIR

Reagen

• S. Typhi-O (u/ mendeteksi Ab somatik dari S. typhi)

• S. Typhi-H (u/ mendeteksi Ab flagelar dari S. typhi)

• S. Paratyphi A-O (u/ mendeteksi Ab somatik dari S. Paratyphi A)

• S. Paratyphi B-O (u/ mendeteksi Ab somatik dari S. Paratyphi B)

• S. Paratyphi A-H (u/ mendeteksi Ab flagelar dari S. Paratyphi A)

• S. Paratyphi B-H (u/ mendeteksi Ab flagelar dari S. Paratyphi B)

Note: Yg 2 terakhir tdk ada diprakum kemaren. Tp itu penting juga, soalnya kalo cek Ab S. Paratyphi cuma O nya aja itu kurang bermakna karena perjalanan penyakit (akut/kronis)nya tdk dapat dinilai. Jd H nya jg harus dicek juga

bedanya O dan H

O H

Asal somatik Asal flagelar

Marker akut, masa infeksius. Muncul pd hari ke3/5.

Marker infeksi yg telah lalu.

Ab yg ditimbulkan muncul lebih dulu, dan cepat menghilang dr serum.

Ab yg ditimbulkan muncul lebih lebih lama, dan bertahan dlm serum lebih lama.

Titer +dalam serum selama 3-6bulan Titer +dalam serum selama 6-12 bulan

Kriteria diagnosis

• Klinis. Klinis. dan KLINIS. (tanpa adanya keterangan gejala klinis, hasil widal tdk memiliki arti diagnostik)

• Bila titer dari aglutinin O dan atau H > 2x batas atas titer normal

• Bila dlm jangka waktu 5-7 hari, ada kenaikan titer 4x.

Jenis Aglutinin Titer normal

O 1/80

H 1/40

A 1/40

B 1/80

Titer normal ditiap negara beda2. kenapa di Indonesia kok nilenya segitu? kok tinggi?Soalnya salmonella endemis di Indonesia. artinya tiap orang pernah terpapar tapi subklinis.

Cara baca• Bacalah pengenceran paling tinggi yang hasilnya masih (+)• Penyebab demam typhoid bukan salmonella typhi aja, Salmonella paratyphi jg bisa. Jadi untuk

mendukung diagnosis, harus diketahui semua.• Jangan lupa, lihat ada keterangan gejala klinis apa ndak.

Conto : sampel diuji dg Ag S. Typhi O

Titer Aglutinasi

1/20 +

1/40 +

1/80 +

1/160 +

1/320 -

1/640 -

Brarti S. Typhi O positif (pada titer 160)

Positif palsu

• Imunisasi dg Ag salmonella• Infeksi salmonella yg telah lalu• Reaksi silang dg salmonella non-typhoid• Peny. Lain (DHF,Sirosis,Hepatitis)• Status Karier

^mnurut who karier itu masuk +palsu, dislide dr rini masuk –palsu. kalo dilogika karier itu +palsu loo, jd bener yg who menurutku.. tp sesuai keyakinan msg2 dah amannya kalo disuruh nyebutin +/-palsu pas ujian, jangan nulis yg karier, tulis yg lainnya kan masih banyak. Hyohoho..

Negatif palsu

• Pasien dg antibiotik• Pengambilan sampel terlalu awal (demam baru sehari

udah mintak dites widal)

• Ag salmonella belum adekuat memicu pembentukan Ab

• Kesalahan teknis (reagennya ndak dikocok dulu, padahal itu suspensi)

contoJoko, 21 taun, demam sejak kemarin, dokter curiga typhoid, dilakukan widal test. Ini hasilnya :

1/20 1/40 1/80 1/160 1/320 1/640

S. Typhi O + - - - - -

S. Typhi H + + - - - -

S typhi O negatif (nilai yg masih positif ada dibawah titer normal)

S typhi H negatif (nilai yg masih positif masih berada pd titer normal)

Interpretasi:Meskipun negatif semua, kemungkinan demam tifoid tdk dapat disingkirkan.Kenapa?- penyebab demam tifoid bukan S. Typhi aja, kemungkinan infeksi S. Paratyphi juga bisa.

Jd bisa saja si joko ini demam typhoid et causa S. Paratyphi.- Pengambilan sampel terlalu awal (disoal : demam sejak KEMARIN) ya jelas aja negatif,

wong antibodinya belum terbentuk

Conto lagiMiska, 37 taun, dokter curiga typhoid, dilakukan widal test. Ini hasilnya : 1/20 1/40 1/80 1/160 1/320 1/640

S. Typhi O + + + - - -

S. Typhi H + + + + - -

S typhi O negatif (nilai yg masih positif ada pd titer normal)

S typhi H positif pd titer 160 (nilai yg masih positif ada diatas titer normal)

Interpretasi:Di soal ada keterangan demam atau tidak?•Tidak demam mungkin infeksi S. Typhi yg telah lalu.

Q : kok bisa? A : Bisa saja fase akut telah terlewati (titer O negatif). Sdh tdk demam, tp titer H msh positif, kan titer H turunnya lama (6-12 bulan).

•Demam sejak 7hr yglalu kemungkinan demam tifoid tdk dapat disingkirkan.

Q : kok tdk dapat disingkirkan? Kan negatif titer O nya? A : ingat, miska demam 7hr, tp data paratyphi belum dicek.

Satu lagi..Carles, 21 taun, demam sejak 4hari yglalu dokter curiga typhoid, dilakukan widal test. Ini hasilnya :

1/20 1/40 1/80 1/160 1/320 1/640

S. Typhi O + + - - - -

S. Typhi H + + + - - -

S. Paratyphi AO + + + + + -

S. Paratyphi BO + + + - - -

S. Paratyphi AH + + + + - -

S. Paratyphi BH + - - - - -

S. typhi : O negatifH negatif

S. Paratyphi A : O positif pd titer 320H positif pd titer 80

S. Paratyphi B : O negatifH negatif

Interpretasi:• Infeksi Salmonella typhi dan S. paratyphi B dapat disingkirkan.• Kemungkinan Infeksi S. Paratyphi A tidak dapat disingkirkan,

untuk menentukan diagnosis perlu dilakukan kultur (Gall Cultur)

Apa yg harusnya dilakukan, kalo kamu curiga demam typhoid?

Ambil sampel darah pasien

Eramkan darah pake Gall Cultur 370C,24 jam

Tanam di media SS

Koloni tidak tumbuh(Ulangi tanam di media SS lagi

pd hari ke 3, 5, 7,14)

Tumbuh koloni(transparan,opak, halus, tak berwarna)

Cat gram

Ketemu batang gram (-)

Uji biokimia (utk bedakan shigella/S.typhi/S.Paratyphi)

Uji sensitifitas antibiotik

(+) S. Typhi/ S.Paratyphi