Indice mitotico en Cebolla

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Deteminación del indice mitótico y fasico en allium cepa

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Ao de la Diversificacin Productiva y del Fortalecimiento de la EducacinFACULTAD DE CIENCIAS BIOLGICASESCUELA ACADMICA DE GENTICA Y BIOTECNOLOGAINFORME: CICLO CELULAR

NOMBRE: ASTRID CAROLINA FLORES NUEZCDIGO: 12100023CICLO:VII CICLOCURSO:BIOLOGA DE DESARROLLOPROFESOR: FERNANDO RETUERTO

2015

EL CICLO CELULAR

El ciclo celular es uno de los fascinantes procesos que llevan a la divisin celular y a la generacin de dos nuevas clulas, nuevos organismos genticamente idnticos a su progenitor. Se produce en cualquier tipo de clula eucariote, ya sea diploide o haploide Algunas clulas no realizan mitosis y permanecen en un estado interfasico pero otras la realizan frecuentemente (clulas embrionarias, clulas de zona de crecimiento y clulas de tejido sujetas a desgaste). Estas, que integran la mayor parte de los tejidos de un organismo sufren un proceso de renovacin debido a la continua multiplicacin y muerte celular. La divisin celular se observa en un proceso llamado Mitosis, durante el cual, la clula madre se divide en dos. Este proceso consiste en la duplicacin de los cromosomas y la distribucin equitativa de este material gentico en las clulas hijas. Este proceso de divisin celular se lleva a cabo mediante mecanismos precisos, los cuales ocurren dentro de una fases llamadas fase G1t S, G2 y M (Mitosis). En cada fase suceden de manera general los siguientes acontecimientos:Fase G1: En esta fase, se censan los factores nutricionales y ambientales para seguir el curso del ciclo celular. .Fase S: La clula duplica su DNAFase G2: En esta fase se censa nuevamente el ciclo celular, en esta se censa si los cromosomas tienen el tamao adecuado, si el huso mittico esta listo, y si los factores nutricionales y ambientales siguen favorables para continuar con la siguiente etapa del ciclo celular. Fase de Mitosis: En esta fase la clula pasan por diferentes etapas: Profase, Metafase, Anafase, Telofase, en donde los cromosomas se condensan con sus homlogos, se alinean en el plano ecuatorial, se separan y se dirigen hacia los polos celulares para formar dos nuevos ncleos y luego dividir el citoplasma en una etapa final muy breve llamada citocinesis. Profase: En esta, la cromatina se condensa para formar los cromosomas y los dos centrolos migran a polos opuestos organizando un sistema de microtbulos (Aparato Mittico), para permitir la migracin de los cromosomas.

El Aparato Mittico est constituido por: * Centrolos: Estn rodeados por el centrosoma. A medida que cada centriolo migra produce otro y cuando llega al polo se ven dos.* Asteres: Conjunto de microtubulos cortos que se extienden desde cada centriolo.Huso Acromtico: Tiene forma ovoide y formado por muchos microtubulos sin ramificaciones. Cada cromosoma est constituido por dos cromatidas unidas por el centrmero. La envoltura nuclear se desorganiza y sus fragmentos no se distinguen del retculo endoplasmtico desaparece el nuclolo. Prometafase: Los cromosomas Los cromosomas condensados migran hacia la placaecuatorial del huso acromtico. Metafase: Los cromosomas se alinean en el plano ecuatorial, y cada uno esta unido por su centrmero a una fibra del huso acromtico. Anafase: Las dos cromatidas de cada cromosoma se separan por fisin del centrmero y se dirigen hacia polos opuestos. El movimiento de los cromosomas hijos hacia los polos se debe a un acortamiento de las fibras cromosomicas y se alargan las fibras interzonales.Telofase: El huso mittico y los asteres se desorganizan. Alrededor de cada grupo cromosmico se organiza una envoltura nuclear a partir del retculo endoplasmtico y de la envoltura original. Los cromosomas se dispersan y retornan el aspecto de cromatina que tenan antes de iniciarse la divisin. Los nucleolos reaparecen a partir de sus organizadores nucleonales.

MATERIALES Races de bulbos de Allium cepa colocados a germinar a temperatura ambiente durante 3 das, tiempo suficiente para que las races adquieran el tamao necesario y exista un equilibrio celular dinmico con relacin al ciclo celular de proliferacin. Portaobjetos. Cubreobjetos. Lpiz Papel filtro Hoja de afeitar. Orcena aceto-clorhdrica al 2%. Pinzas finas Goteros MicroscopioMTODOSe realiz la fijacin en fro con carnoy por 2 das de races de bulbos de Allium cepa. Las races obtenidas para el tratamiento procedieron de cebollas que posean diferentes tamao de races, as el tamao de las races tratadas estuvieron dentro de los siguientes rangos: 1-2mm 6mm 1cm 2-3cm 10cm, Luego de su fijacin se procedi a su coloracin con orcena, para lo cual se cort 1cm de la raz, se la coloc en una luna de reloj con orcena y se la expuso al mechero 3 veces, con el fin que el colorante penetre a todas las clulas de nuestra muestra. Luego, se deja que enfre, se coloca 1mm-2mm del pice en una lmina cubrindola con la laminilla, inmediatamente se realiza el punteo y el aplastado final.MODELO DE CEBOLLA EN PROCESO DE GERMINACIN

RESULTADOSSe observ clulas de races de Allium cepa a 400X luego del tratamiento dado para la observacin de las clulas en las diferentes etapas del ciclo celular. A continuacin campos obtenidos de clulas de cebollas con raices de 2-3cm.CAMPO I

CLULAS DEL CAMPO72

CLULAS EN MITOSIS5

CLULAS EN PROFASE3

CLULAS EN METAFASE2

CLULAS EN ANAFASE0

CLULAS EN TELOFASE0

CAMPO 2CLULAS DEL CAMPO67

CLULAS EN MITOSIS4

CLULAS EN PROFASE1

CLULAS EN METAFASE1

CLULAS EN ANAFASE1

CLULAS EN TELOFASE1

CAMPO IIICLULAS DEL CAMPO116

CLULAS EN MITOSIS9

CLULAS EN PROFASE4

CLULAS EN METAFASE3

CLULAS EN ANAFASE1

CLULAS EN TELOFASE1

TABLA 1: RESULTADOS DE LOS 5 TRATAMIENTOSTRATAMIENTOTOTAL DE CLULASCLULAS EN MITOSISCLULAS EN PROFASECLULAS EN METAFASECLULAS EN ANAFASECLULAS EN TELOFASE

1-2mm1051237556

6mm995763919176

1cm104612083101611

2-3cm765642813815

10cm1118873710918

INDICE MITTICO E NDICE DE FASESPara el clculo del DICE MITTICO (IM) y del NDICE DE FASES (IF) se emplearon las siguientes frmulas:

Tomamos en cuenta los tres campos analizados y obtenemos los siguientes resultados:Tabla 2: Indices mitticos e ndices de fasesTRATAMIENTONDICE MITTICOINDICE DE FASES

PROFSICOMETAFSICOANAFSICOTELOFSICO

1-2mm2.1930.4321.7421.7426.09

6mm7.6351.322522.377.89

1cm11.4769.178.3313.339.17

2-3cm8.443.7520.3112.523.4

10cm7.7842.5311.4910.3420.69

Discusin de resultadosLos resultados no van de acuerdo con los esperados, entre las causas pueden ser la poca cantidad de campos analizados, las diferentes condiciones en que se mantuvieron las races (algunas expuestas a mayor estrs que otras), las variedades de cebollas trabajadas no fueron las mismas, entre otros factores. As, el tamao de raz que present mayor ndice mittico fue la de 1cm, seguida por la de 2-3cm; mientras que las races de 6mm y 10cm presentaron ndices mitticos muy similares; y finalmente las races de 1-2mm su ndice mittico fue el menor de todos (Tabla 2). A partir de estos resultados, se puede decir que las races de 1cm son un buen candidato para estudios donde se requiere un ndice mittico alto, y las races de 1-2mm son el tamao menos recomendable. Segn Sans et al. 1980, el equilibrio dinmico y un ndice mittico de 13% se alcanzan en races con 2-3 cm de longitud y despus de 48h-72h de colocarlo a germinar; en nuestro caso, el tamao de raz que ms se aproxim a estos resultados fueron las races con 1cm de longitud (IM= 11.47%). En el trabajo de San et al. 1980, se menciona que en todos los tiempos de colocado a germinar, el ndice profsico es mayor que el ndice telofsico, siendo este ltimo, mayor que el ndice mittico; y ste, del ndice anafsico. Lo anteriormente mencionado se cumple en las races de 1-2mm, 2-3 cm y 10cm, en los que no se cumple son las races de 6mm y 1cm (Tabla 2); las causas pueden ser las mismas mencionadas inicialmente u otras.Finalmente se puede mencionar, que aunque la muestra no fue la adecuada, se logr en los resultados una tendencia hacia los resultados obtenidos en trabajos ms elaborados.

CUESTIONARIO1) Estn las clulas repartidas en forma homognea en el preparado que Ud. ha realizado? Explique.No, porque al realizar la dispersin con el lpiz, las clulas se distribuyen de forma heterognea, esto hace que existan en lugares de la muestra mayor concentracin que en otras.

2) Al comparar los ndices mitticos y las fases de sus compaeros qu conclusiones puede obtener?Los ndices mitticos y de fases encontradas por mis compaeros son similares al resultado encontrado por mi persona, esto se debe a que todos usamos races de una misma muestra tratada bajo el mismo procedimiento, adems los experimentos se llevaron a cabo en el mismo espacio y tiempo.Conclusiones El ciclo celular es un proceso de suma importancia y conocer los acontecimientos que ocurren en ste nos ayudan a comprender su dinmica. El realizar un experimento y compararlo con valores tericos nos ayud a comprender mejor el ndice mittico e ndice de fases. Como la duracin de las fases de la mitosis son diferentes esto hace que los ndices de fases sean todos diferentes.

Bibliografa Sans J., Gimenez-Martin, De la Torre C., Onset of cell proliferation in dormant roots of Allium cepa L. bulbs kinetic analysis. 1980Pginas web: http://www.fca.uner.edu.ar/investigacion/publicaciones/rca/Volumenes%20Anteriores/Vol%20Ante%209/rca_9_1_pdf/NRCA_90_F.pdf http://www.ciens.ucv.ve:8080/generador/sites/labbiolvegetal/archivos/Division%20celular%202007.pdf