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Villa de Álvarez, Col., junio de 2013 Evaluación de la actividad antimicrobiana del compuesto “SMBRFLX” en coco fresco para empacado. Nombre del Residente Dr. Francisco Javier Delgado Virgen. Nombre del Asesor interno. Lic. Fernando Morett Mendoza. Nombre del Asesor externo. Nombre de la Carrera Ingeniería Bioquímica. Villa de Álvarez, Col., a 8 de enero de 2018. INFORME TÉCNICO DE RESIDENCIA PROFESIONAL QUE PRESENTA: Citlalin Lizbeth Benicio García.

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Page 1: INFORME TÉCNICO DE RESIDENCIA PROFESIONAL QUE …

Villa de Álvarez, Col., junio de 2013

Evaluación de la actividad antimicrobiana del compuesto “SMBRFLX” en coco fresco para empacado.

Nombre del Residente

Dr. Francisco Javier Delgado Virgen.

Nombre del Asesor interno.

Lic. Fernando Morett Mendoza.

Nombre del Asesor externo.

Nombre de la Carrera

Ingeniería Bioquímica.

Villa de Álvarez, Col., a 8 de enero de 2018.

INFORME TÉCNICO DE RESIDENCIA PROFESIONAL QUE PRESENTA:

Citlalin Lizbeth Benicio García.

Page 2: INFORME TÉCNICO DE RESIDENCIA PROFESIONAL QUE …
Page 3: INFORME TÉCNICO DE RESIDENCIA PROFESIONAL QUE …

JUSTIFICACIÓN.

INTRODUCCIÓN.

El presente proyecto aborda el tema de la evaluación de la actividad antimicrobiana

explícitamente de un compuesto químico conocido por sus siglas como “SMBRFLX”, el cual

es utilizado como conservador en coco fresco para su empacado y exportación. Mediante

la evaluación se determinará la viabilidad del compuesto y la inocuidad que presenta el

alimento para así documentar y registrar el compuesto químico ante el Instituto Mexicano

de la Propiedad Industrial (IMPI).

La inocuidad de un alimento puede tener muchos significados; se puede definir

como todas las medidas encaminadas a garantizar que los alimentos no causarán daño al

consumidor si se preparan y/o ingieren según el uso al que estén destinados. (Salud, 2007)

La FAO/OMS define la inocuidad alimentaria como la garantía de que un alimento

no causará daños al consumidor cuando el mismo sea preparado o ingerido de acuerdo al

uso a que se destine. (Alimentarius, 2003).

Las diferentes definiciones que aportan las organizaciones sobre la inocuidad de un

alimento se centran en asegurar que los alimentos no ocasionen daños en su consumo, pero

todas con diferentes palabras dictaminan con beneficiar al consumidor determinando

calidad, no obstante, aun así se puede encontrar con alimentos que contribuyan a daños.

Los peligros que puede aportar un alimento se clasifican en tres tipos: Biológicos,

físicos y químicos. Siguiendo el orden, en los biológicos se incluyen virus, bacterias,

parásitos patógenos, toxinas naturales, toxinas microbianas, metabolitos tóxicos de origen

microbiano, entre otros. Los físicos incluyen elementos como vidrio, metales, madera,

piedras u otros objetos que pudiesen generarle un daño físico al consumidor; y por último,

los de tipo químico engloban medicamentos veterinarios, dioxinas, plaguicidas y

fertilizantes, compuestos naturales como micotoxinas o toxinas marinas, metales pesados,

aditivos alimentarios, entre otros.

Haciendo un enfoque en los peligros biológicos los microorganismos son

considerados la base de este tipo de problema, los cuales son seres vivos muy pequeños,

tanto que son invisibles al ojo humano, siendo con esto de los más difíciles de evaluar

debido a su diversidad y naturaleza. También son considerados la principal causa de

enfermedades trasmitidas por los alimentos.

Page 4: INFORME TÉCNICO DE RESIDENCIA PROFESIONAL QUE …

Hay tres tipos diferentes de microorganismos: buenos, malos y peligrosos:

Los microorganismos buenos son útiles: están presentes en el

proceso de elaboración de ciertos alimentos y bebidas (por ejemplo, el queso, el

yogur, la cerveza y el vino); se utilizan en la fabricación de medicinas (como la

penicilina); y ayudan a digerir los alimentos en el intestino.

Los microorganismos malos, o microorganismos de alteración, no

suelen provocar enfermedades a las personas, pero pueden hacer que los alimentos

huelan y sepan mal y tengan un aspecto repulsivo.

Los microorganismos peligrosos causan enfermedades a las personas

y pueden incluso matar. Se denominan “patógenos”. La mayoría de ellos no altera

el aspecto de los alimentos.

Ejemplos de microorganismos son las bacterias, los virus, las levaduras, los mohos y

los parásitos. El olor, el sabor y la apariencia de los alimentos no son indicadores fiables de

su inocuidad. Algunos microorganismos de alteración cambian efectivamente el aspecto de

los alimentos y son peligrosos. Algunos de los microorganismos de transmisión alimentaria

peligrosos más comunes son: bacterias como Salmonella, Shigella, Campylobacter y E. coli;

parásitos tales como; Giardia y Trichinella; y Virus como Hepatitis A y Norovirus. (Salud,

2007).

Con lo anterior podemos decir que un alimento inocuo es aquel que esté libre de

peligros físicos, químicos y biológicos, definiendo peligro como un agente de cualquiera de

estos tipos o bien la condición en que este se halla y que pueda causar efecto adverso a la

salud.

La microbiología, procede del vocablo griego Micro= pequeño, Bios=vida, Logos=

estudio, tratado, es la ciencia que estudia a esos organismos vivos invisibles a simple vista.

Para prolongar el estudio de determinados microorganismos existen las normas de calidad

microbiológicas.

Una norma microbiológica es un criterio microbiológico que forma parte de una ley

o reglamento y es de tipo obligatorio utilizada para determinar las condiciones

microbiológicas durante la elaboración, distribución y venta de los alimentos. Dentro de las

normas microbiológicas se encuentran los análisis microbiológicos, que son ese conjunto

de procedimientos para determinar la presencia, identificación y cantidad de

microorganismos e indicadores de contaminación. Por consiguiente, es sobre todo un

criterio consultivo, son útiles en la evaluación de: la inocuidad y la duración de los alimentos

almacenados, la aplicación de las buenas prácticas de manufactura y la idoneidad de los

alimentos; definen la aceptabilidad de un producto, un lote de productos alimenticios o un

Page 5: INFORME TÉCNICO DE RESIDENCIA PROFESIONAL QUE …

proceso, basándose en la ausencia, presencia o número de microorganismos y/o en la

cantidad de toxinas/metabolitos por unidad de masa, volumen, superficie o lote.

Hay varios microorganismos concernientes a la inocuidad alimentaria, pero en este

trabajo nos enfocaremos a mohos, levaduras y Salmonella.

Cabe mencionar que este proyecto tiene el interés de constatar que el compuesto

químico desarrollado por la empresa comercializadora de Cihuatlán S.A de C.V. es un

compuesto aceptable para utilizarlo como conservador en sus productos, cuidando las

características que presenta su producto, de tal manera que esto propicie al desarrollo de

la empresa con el registro del compuesto ante el IMPI, implicando que la empresa crezca

en todos sus ámbitos como empresa exportadora.

El Instituto Mexicano de la Propiedad Industrial es un organismo público

descentralizado con personalidad jurídica y patrimonio propio y con la autoridad legal para

administrar el sistema de propiedad industrial en nuestro país, garantiza que la intervención

del Estado en el campo de la protección de los derechos de propiedad industrial, otorgue a

sus titulares la seguridad jurídica necesaria para que el aprovechamiento legítimo de su

capacidad creativa e inventiva promueva la inversión privada, la creación de empleos, el

desarrollo económico, y en general, la competitividad del país, dentro del IMPI se postula

la Ley de la Propiedad industrial de las atribuciones ; Otorgar protección a través de

patentes, registros de modelos de utilidad y diseños industriales; registros de marcas y

avisos comerciales y publicación de nombres comerciales; autorizar el uso de

denominaciones de origen y proteger los secretos industriales; Prevenir y combatir los actos

que atenten contra la propiedad industrial y constituyan competencia desleal, así como

aplicar las sanciones correspondientes. (Industrial, 2016)

JUSTIFICACIÓN.

Los análisis a desarrollar en este proyecto se pretenden utilizar para la

documentación sobre la capacidad conservadora del compuesto químico “SMBRFLX”

utilizado en diferentes presentaciones de coco fresco exportado, para proceder

posteriormente a su registro ante el IMPI (Instituto Mexicano de la Propiedad Industrial).

Page 6: INFORME TÉCNICO DE RESIDENCIA PROFESIONAL QUE …

OBJETIVOS.

Objetivo General.

Evaluar los parámetros microbiológicos de mohos y levaduras y presencia de

Salmonella en las diferentes presentaciones de coco fresco bañado con el compuesto

“SMBRFLX”.

Objetivos Específicos.

Investigar la presencia de Salmonella en coco fresco.

Determinar mediante el método de cuenta en placa el número de

mohos y levaduras presentes en el coco fresco.

Page 7: INFORME TÉCNICO DE RESIDENCIA PROFESIONAL QUE …

PROBLEMAS A RESOLVER, PRIORIZÁNDOLOS.

Primeramente, se debe de conocer cuáles son las diferentes presentaciones de coco

las cuales son procesadas con el compuesto químico “SMBRFLX” así como conocer la

manipulación adecuada que se les debe dar a cada uno de las presentaciones, seguido de

estudiar los procedimientos, materiales y métodos adecuados para desarrollar los análisis

previamente seleccionados para comprobar la eficacia de su conservación con ayuda de

artículos, normas y tecnologías que ya estén implementadas.

Determinar cuántas pruebas se harán de los diferentes análisis bioquímicos

mencionados, evaluando si se le harán pruebas por duplicado/ triplicado según convenga y

a partir de esto tomando en cuenta el número aproximado de pruebas realizar cotizaciones

con diferentes proveedores acerca de los materiales que se necesitan para comenzar a

desarrollar los análisis, continuar con la elaboración del diseño y la experimentación de los

métodos seleccionados, ejecutando y documentando las pruebas realizadas, determinar si

existen fallas durante el proceso de experimentación y en caso de que las hubiera revisar

donde y por qué han ocurrido; y regresar a la parte experimental para realizar las

correcciones determinadas.

Finalmente establecer los resultados obtenidos y desarrollar un artículo con base a

lo adquirido en la elaboración de dicho proyecto.

Page 8: INFORME TÉCNICO DE RESIDENCIA PROFESIONAL QUE …

PROCEDIMIENTO Y DESCRIPCIÓN DE LAS ACTIVIDADES REALIZADAS.

Fundamento teórico.

Dado que la mira central de este proyecto estará puesta en la determinación de la

viabilidad del compuesto químico para conservar las distintas variedades de coco fresco

inocuo; sin presencia de microorganismos como Salmonella, Mohos y levaduras, será

necesario definir algunos conceptos que apoyen la interpretación del proyecto.

Mohos y Levaduras. Las levaduras y mohos son un tipo de hongos de la clase

eucariotas, son organismos que poseen un núcleo celular y organelos rodeados por una

membrana. En ambos casos se trata de organismos oportunistas, los cuales de alguna

manera actúan como parásitos en fuentes de materia orgánica, es decir se pueden

reproducir en los alimentos; sin embargo, estas dos formas de vida son distintas en su

estructura, así como en su crecimiento y sus modos de reproducción.

Mohos. Los mohos son hongos multicelulares filamentosos, lo cual quiere decir que

tienen un micelio vegetativo aéreo y otro profundo, los cuales suelen aparecer

generalmente en los alimentos. Este micelio posee ciertas estructuras denominadas "hifas"

las cuales pueden o no ser divididas, dando una apariencia de filamentosos, entre los cuales

tenemos a Penicillium sp., Aspergillus flavus, etc, que puede presentar macroscópicamente

un aspecto algodonoso, velloso, mate, plegado, etc... Estas características fenotípicas sirven

para una aproximación taxonómica en la identificación. En él se producen los elementos de

propagación que pueden ser esporas, conidios, fragmento de micelio, etc. En microbiología

a este conjunto visible sobre el medio de cultivo se le denomina “colonia”.

Levaduras. Las levaduras son mucho menos complejas, son hongos unicelulares,

redondos o elipsoides que se reproducen por gemación. Se encuentran en colonias típicas,

las cuales son como las de las bacterias. Las levaduras que se encuentran en los alimentos

pueden ser de dos tipos: las benéficas y las perjudiciales. Las benéficas se utilizan en la

elaboración de algunos alimentos como lo son el pan, cerveza, vino, vinagre, quesos, en la

obtención de enzimas y alimentos fermentados, mientras que las levaduras son

perjudiciales cuando producen la alteración de los zumos de frutas, jarabes, de la carne y

otros alimentos.

Los caracteres morfológicos de las levaduras se realizan mediante la observación

microscópica, determinándolos por su forma, la cual puede ser desde redonda hasta

elipsoide. En los cultivos en placas de agar es difícil diferenciar las colonias de levaduras de

las colonias bacterianas; la observación microscópica de los microorganismos es la única

forma segura de diferenciarlas. La mayoría de las colonias jóvenes de levaduras son

Page 9: INFORME TÉCNICO DE RESIDENCIA PROFESIONAL QUE …

húmedas y algo mucosas; blancuzcas, aunque algunas tienen un color crema o rosado. Son

oxidativas, fermentativas, o bien su actividad metabólica es a la vez de ambos tipos. Cabe

mencionar que la mayoría de las levaduras crecen mejor con un alto contenido de

humedad.

La norma de calidad microbiológica establecida para la determinación de la

presencia o ausencia de mohos y levaduras es la NORMA OFICIAL MEXICANA NOM-111-

SSA1-1994, BIENES Y SERVICIOS. MÉTODO PARA LA CUANTA DE MOHOS Y LEVADURAS EN

ALIMENTOS.

Salmonella. Salmonella es una bacteria, más específicamente es un tipo de bacteria

llamado bacilo, un nombre dado porque tiene forma de varilla, está clasificado dentro de

las bacterias Gram-negativas, tiene una tasa de crecimiento de 40 minutos, lo cual indica

que es capaz de multiplicarse a una velocidad muy elevada dependiendo a la temperatura

que se encuentre. Su temperatura óptima de crecimiento es de 37 °C, pero tiene la

capacidad de crecer a una amplia gama de temperaturas, que va desde los 30°C hasta los

46°C. Por tanto, la temperatura y el tiempo son dos factores claves en el desarrollo de

Salmonella.

Esta bacteria está presente en el intestino de personas y animales sanos, de forma

que las heces son el principal foco de contaminación a los alimentos y al agua. Cuando llega

a los alimentos frescos, tiene la habilidad de multiplicarse muy rápidamente, y cuando una

persona ingiere dicho alimento contaminando, el gran número de bacterias provoca

“salmonelosis”, infección gastrointestinal provocada por dicha bacteria.

La Norma de calidad microbiológica establecida para la determinación de Salmonella

es la NORMA OFICIAL MEXICANA NOM-114-SSA1-1994, BIENES Y SERVICIOS. MÉTODO

PARA LA DETERMINACIÓN DE SALMONELLA EN ALIMENTOS.

En cuanto a la Norma Oficial Mexicana NOM093-SSA1-1994, BIENES Y SERVICIOS.

PRÁCTICAS DE HIGIENE Y SANIDAD EN LA PREPARACIÓN DE ALIMENTOS QUE SE OFRECEN

EN ESTABLECIMIENTOS FIJOS, de ella se plantea lo más relevante para evitar cualquier tipo

de contaminación externa; nos indica que realizar una desinfección reduce el número de

microorganismos presentes en una superficie o alimento vegetal, a un nivel que no dé lugar

a contaminación nociva, mediante agentes químicos, métodos físicos o ambos.

La Higiene de los alimentos, las medidas necesarias que se realicen durante el

proceso de los alimentos aseguren la inocuidad de los mismos, las características

organolépticas de los productos frescos de origen vegetal se deben controlar rechazando

aquellos que presenten mohos, coloración extraña, magulladuras o mal olor; así como que

ningún alimento preparado debe contener microorganismos patógenos.

Page 10: INFORME TÉCNICO DE RESIDENCIA PROFESIONAL QUE …

Ejemplos de límites permisibles para alimentos.

NORMA MEXICANA NMX-F-455-1984 ALIMENTOS - ESPECIAS Y

CONDIMENTOS - NUEZ MOSCADA. Especificaciones microbiológicas. El producto

objeto de esta norma no debe contener microorganismos patógenos, toxinas

microbianas e inhibidores microbianos ni otras sustancias tóxicas que puedan

afectar la salud del consumidor o provocar deterioro del producto.

NORMA MEXICANA NMX-FF-093-SCFI-2011 PRODUCTOS

ALIMENTICIOS NO INDUSTRALIZADOS PARA CONSUMO HUMANO – NUEZ

PECANERA] SIN CASCARA – ESPECIFICACIONES Y MÉTODOS DE PRUEBA (CANCELA A

LA NMX-FF-093-1996-SCFI).

Especificaciones microbiológicas. En todas las clases, tipos o presentaciones

comerciales, y sin perjuicio de las disposiciones especiales establecidas para cada una de las

tolerancias admitidas, las nueces sin cáscara deben cumplir con las siguientes

especificaciones:

Especificaciones microbiológicas y aflatoxinas para la nuez sin cáscara.

Parámetros Especificaciones Métodos de ensayo.

Mohos y Levaduras < 200 UFC/g NOM-111-SSA-1994

Salmonella Ausente en 25g NOM-114-SSA-1994

Page 11: INFORME TÉCNICO DE RESIDENCIA PROFESIONAL QUE …

NORMA MEXICANA NMX-FF-060-SCFI-2009 PRODUCTOS

ALIMENTICIOS NO INDUSTRIALIZADOS PARA CONSUMO HUMANO- FRUTA FRESCA

– DURAZNO Y NECTARINA (Prunus persica L.) BATSCH – ESPECIFICACIONES Y

MÉTODOS DE PRUEBA (Cancela a la NMXFF-060- 1993-SCFI)

Parámetros Especificaciones Métodos de ensayo.

Salmonella Ausente en 25g NOM-114-SSA-1994

NORMA MEXICANA NMX-F-029-1968 COCTEL DE FRUTAS 38 FRUIT

COCKTAIL.

Especificaciones microbiológicas. El "Coctel de Frutas", deberá estar exento de

parásitos o restos de parásitos, mohos, levaduras y microorganismos patógenos o

cualquier otro microorganismo capaz de causar alteración del producto.

Page 12: INFORME TÉCNICO DE RESIDENCIA PROFESIONAL QUE …

PROCEDIMIENTO METODOLÓGICO.

Dentro de este apartado se describe de manera puntual los pasos a realizar para desarrollar

las metodologías de las pruebas microbiológicas de Salmonella, Hongos y levaduras en las

presentaciones de coco obtenidas de la comercializadora de Cihuatlán Jalisco, para llevar a cabo

estas metodologías se empleó la Norma Oficial Mexicana NOM-210-SSA1-2014, productos y

servicios. Métodos de prueba microbiológicos. Determinación de microorganismos indicadores.

Determinación de microorganismos patógenos. Para la determinación de Salmonella.

Al igual que se aprovecharon las nuevas tecnologías de productos 3M para la determinación

de las pruebas microbiológicas de Hongos y levaduras.

Page 13: INFORME TÉCNICO DE RESIDENCIA PROFESIONAL QUE …

Figura 1.Proceso metodológico de salmonella.

Agua peptonada amortiguada a

temperatura ambiente, incubarla

por 18 hrs +- 2hrs a 35°C+- 1°C.

Tomar 0.1mL del cultivo + 10 mL de caldo

RVS.

Incubar por 24 hrs +- 3hrs a 41.5°C+- 1°C

Para la confirmación, tomar de cada agar

selectivo al menos 1 colonia considerada como

típica o en total 3 colonias sospechosas si no

existe la primera posibilidad.

Tomar 1mL del cultivo +10 mL de caldo

MKTTN.

Incubar por 24 hrs +- 2 hrs a 36°C +- 1° C.

En agar XLD para el aislamiento de colonias

típicas y ASB para aislamiento de colonias lactosa

positivas y cualquier otro medio selectivo solido

complementario.

Incubar por 24 hrs +-3hrs a 36°C +-1°C.

Algún agar que sea nutritivo.

Incubar por 24 hrs +-3 hrs a 36°C+-1°C

Confirmación Bioquímica Confirmación Serológica

Expresión de Resultados

Page 14: INFORME TÉCNICO DE RESIDENCIA PROFESIONAL QUE …

EQUIPO. MATERIALES.

MEDIOS DE CULTIVO.

Autoclave Asa Agua peptonada amortiguada

Horno Pipetas de diferentes capacidades.

Caldo lactosado simple

Incubadora Frascos de vidrio RVS (Rappaport Vassiliadis )

Baño de agua (maría) Cajas Petri MKTTn (Tetrathionate Broth Base )

Potenciómetro Tubos de ensaye XLD (Xylose-Lysine-Desoxycholate)

Homogeneizador Gradilla para tubos de ensaye

EH (Hektoen Enteric)

Mechero bunsen o Fisher

Pinzas estériles

Guantes

Cubre bocas

Esponja

Cocos

DESARROLLO DEL PROCESO METODOLOGICO. El procedimiento se realizó de la misma manera para dos cocos de diferente presentación los cuales tienen el conservador y por duplicado. Están clasificados por las denominaciones de: coco fresco destopado #28 y coco sazón destopado #28.

1. Dentro de un frasco estéril se colocó una esponja la cual se encuentra previamente esterilizada; se le añadió 10ml de agua peptonada; esto para humedecer la esponja, tal como se muestra en la figura 2.

Figura 2. Agua peptonada.

Page 15: INFORME TÉCNICO DE RESIDENCIA PROFESIONAL QUE …

2. En la figura 3 se puede observar que con

ayuda de la esponja se palpa el coco para tomar lo más posible de muestra.

3. En la figura 4 se exprimió la esponja dentro del frasco estéril para obtener la muestra posible absorbida.

4. Como se ve en la figura 5 dentro de un frasco se colocó caldo lactosado simple previamente preparado.

Figura 3. Coco y esponja.

Figura 4. Obtención de muestra.

Figura 5. Caldo

lactosado.

Page 16: INFORME TÉCNICO DE RESIDENCIA PROFESIONAL QUE …

5. En el frasco con caldo lactosado se vació la muestra obtenida de la esponja esto se puede ver en la figura 6 seguido de una incubación a 36°C durante 24 horas. (Cultivo)

6. Transcurridas las 24 horas, se retiró el frasco de la incubadora y como se muestra en la figura 7 se puso sobre un homogeneizador para ser agitado.

7. En la figura 8 se muestran dos tubos de ensayo, en donde se pusieron 10 mL de caldo de RVS y se le agregaron 0.1 mL del cultivo, incubándolo durante 24 horas a una temperatura de 41.5°C.

Figura 6. Muestra de cultivo.

Figura7. Homogenizar.

Figura 8. RVS.

Page 17: INFORME TÉCNICO DE RESIDENCIA PROFESIONAL QUE …

8. En la imagen 9 se puede observar dos tubos de

ensayo en donde se le coloco 10 mL de caldo

MKTTn y se le agregaron 1 mL del cultivo,

incubándolo durante 24 horas a una temperatura

de 36 °C

9. Se dividieron las cajas Petri con Agar XLD y las de Agar EH como se indica en la figura 10 debido a que en la mitad se puso muestra de caldo de RVS con el cultivo y en la otra mitad se colocó muestra del caldo MKTTn ambos tenían el cultivo realizado en los pasos 7 y 8.

10. En las cajas tanto de agar EH como en de

XLD se realizó un aislamiento por estría

pudiéndose observar en la figura 11 y se

incubaron por 24 hrs +-3 hrs a 36°C+-1°C.

Figura 9. MKTTn.

Figura 10. Agar XLD/ Agar MKTTn.

Figura 11. Estriamiento.

Page 18: INFORME TÉCNICO DE RESIDENCIA PROFESIONAL QUE …

HONGOS Y LEVADURAS. Figura 12. Proceso metodológico de Hongos y Levaduras.

Preparar la muestra de manera

aséptica, agregar la cantidad

necesaria de agua peptonada a la

muestra de coco

Coloque la plantilla 3M para recuento de

mohos y levaduras en una superficie plana y

nivelada. Levantar la película superior y con

ayudad e una pipeta agregar 1ml de la muestra

en el centro de la película inferior

Bajar la película superior sobre la

muestra

Con ayuda de un difusor plano

presione firmemente el centro de

la placa para distribuir la muestra

de manera uniforme

Retirar el difusor y dejar la placa

sin mover por lo menos un minuto

para permitir que se forme el gel.

Incubar la placa a 25-28°C durante

48+-2 horas en posición

horizontal, con la parte de

transparencia para arriba.

Leer los resultados para los mohos

y levaduras a las 48 horas.

1 2

3 4

5

6

7

Page 19: INFORME TÉCNICO DE RESIDENCIA PROFESIONAL QUE …

EQUIPO. MATERIALES.

MEDIOS DE CULTIVO.

Autoclave Pipetas de diferentes capacidades.

Agua peptonada amortiguada.

Incubadora Frascos de vidrio

Homogeneizador Plantillas 3M

difusor Mechero bunsen o Fisher

Campana de laboratorio Guantes

Cubre bocas

Esponja

Cocos

DESARROLLO DEL PROCESO METODOLÓGICO. El procedimiento se realizó de la misma manera para tres cocos de diferente presentación de los cuales 2 tienen el conservador y 1 no lo tiene, las muestras se hicieron por triplicado. Los cocos con conservador están clasificados por las denominaciones de; coco tierno destopado #28 y coco sazón destopado #28. El coco que no tiene conservador se le conoce como coco sazón destopado #28.

1. En la figura 13 se muestra la PREPARACION

DE AGUA PEPTONADA, para esto Se pesaron

1.27G gramos de 3M buffered peptone en

50 ml de agua destilada, se mezcló y se puso

a Incubar a 121°C durante 15 min.

2. Se preparó el material tal como se puede ver en la figura 14 para colocarlo en la incubadora a una temperatura de 121°C durante 15 minutos.

Figura 13. Agua Peptonada.

Figura 14. Material.

Page 20: INFORME TÉCNICO DE RESIDENCIA PROFESIONAL QUE …

. }

3. En la figura 15 se puede observar 3 frascos, dentro de cada uno de los frascos estériles se colocó una esponja la cual se encuentra previamente esterilizada; se le añadió 10ml de agua peptonada. Esto para humedecer la esponja.

4. En la figura 16 se muestran las

presentaciones de cocos que se analizaran. Con ayuda de la esponja palpar el coco para tomar lo más posible de muestra.

5. Se Exprimió la esponja dentro del frasco estéril para obtener la muestra posible absorbida la cual se puede ver en la figura 17

Figura 15. Frascos y esponjas estériles.

Figura 16. Presentación de Cocos.

Figura 17.Obtención de muestra.

Page 21: INFORME TÉCNICO DE RESIDENCIA PROFESIONAL QUE …

6. En la figura 18 se muestran las plantillas 3M que están listas para colocárseles la muestra; para esto se tomó 1ml de muestra y se colocó en la plantilla 3M.

7. Se incubó a una temperatura de 25-28°C

durante 48+-2 horas

Figura 18. Plantillas.

Page 22: INFORME TÉCNICO DE RESIDENCIA PROFESIONAL QUE …

RESULTADOS, PLANOS, GRÁFICAS, PROTOTIPOS, MAQUETAS,

PROGRAMAS, ENTRE OTROS.

OBSERVACIONES.

RESULTADOS DE ANALISIS BACTERIOLOGICO SALMONELLA.

Después de la incubación de 24 horas se revisaron las cajas de EH y de XLD, no mostraron

crecimiento, por lo cual se procedió a dejarlas incubar durante 48 horas para ver si había algún

crecimiento y en efecto no se dio ningún crecimiento.

DATOS DE LA MUESTRA

TIPO DE MUESTRA. COCO TIERNO DESTOPADO No. 28 TRATADO CON CONSERVADOR

ANALISIS BACTERIOLOGICO SALMONELLA

EXAMEN RESULTADO UNIDAD REFERENCIA

Salmonella ssp. AUSENTE AUSENTE/COCO NOM-210-SSA-2014

DATOS DE LA MUESTRA

TIPO DE MUESTRA. COCO SAZON DESTOPADO No. 28 TRATADO CON CONSERVADOR

ANALISIS BACTERIOLOGICO SALMONELLA

EXAMEN RESULTADO UNIDAD REFERENCIA

Salmonella ssp. AUSENTE AUSENTE/COCO NOM-210-SSA-2014

Figura 19. Cajas Petri EH y XDL ausentes en Salmonella.

Page 23: INFORME TÉCNICO DE RESIDENCIA PROFESIONAL QUE …

RESULTADOS DE ANALISIS MICROBIOLOGICOS DE HONGO Y LEVADURAS.

OBSERVACIONES.

Después de la incubación de 48 horas se revisaron las plantillas 3M.

DATOS DE LA MUESTRA

TIPO DE MUESTRA. COCO TIERNO DESTOPADO No. 28 TRATADO CON CONSERVADOR

ANALISIS HONGOS Y LEVADURAS

EXAMEN RESULTADO TOTAL HONGOS LEVADURAS

1 6 0 6

2 7 0 7

3 6 0 6

Figura 20.Recuento total en coco tierno.

Page 24: INFORME TÉCNICO DE RESIDENCIA PROFESIONAL QUE …

DATOS DE LA MUESTRA

TIPO DE MUESTRA. COCO SAZON DESTOPADO No. 28 TRATADO CON CONSERVADOR

ANALISIS HONGOS Y LEVADURAS

EXAMEN RESULTADO TOTAL HONGOS LEVADURAS

1 2 0 2

2 5 0 5

3 4 0 4

Figura 21. Recuento total coco sazón.

Page 25: INFORME TÉCNICO DE RESIDENCIA PROFESIONAL QUE …

DATOS DE LA MUESTRA

TIPO DE MUESTRA. COCO SAZON DESTOPADO No. 28 SIN CONSERVADOR

ANALISIS HONGOS Y LEVADURAS

EXAMEN RESULTADO TOTAL HONGOS LEVADURAS

1 15 0 15

2 25 0 25

3 29 0 29

Figura 22. Recuento total coco sazón sin conservador.

Page 26: INFORME TÉCNICO DE RESIDENCIA PROFESIONAL QUE …

CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES.

Como resultado de lo realizado en el presente documento, es posible concluir y presentar la evidencia que muestra la actividad que presenta el conservador sobre las diferentes presentaciones de coco; dicho conservador elaborado por la empresa comercializadora de Cihuatlán; mostrando que funciona como un protector para evitar la proliferación de Salmonella, mohos y levaduras. En cuanto a los análisis bacteriológicos de Salmonella se obtuvo un resultado ausente, lo

que indica que los consumidores no corren algún riesgo de contraer alguna infección

gastrointestinal provocada por dicha bacteria. De igual manera evita la contaminación hacia

otros alimentos que pudieran estar en contacto con el mismo coco.

Al realizar los análisis para determinar la presencia de hongos y levaduras, se obtuvo como resultado que al aplicar el conservador al coco este lo protege de la presencia de hongos y al mismo tiempo disminuye la probabilidad de obtener un mayor porcentaje de humedad y por ende el crecimiento de levaduras es mínimo; puesto que se sabe que las levaduras crecen mejor con un alto contenido de humedad. Lo que nos muestra evidencia clara del buen funcionamiento que tiene el conservador para el coco, pues minimiza la presencia y el deterioro causado por dichos microorganismos (Salmonella, hongos y levaduras) , evitando con ello producir pérdidas económicas para la comercializadora así como para distribuidores, ya que retrasa el deterioro de los alimentos causado por los microorganismos al mismo tiempo que ofrece alimentos más seguros a los consumidores previniendo la acción de agentes biológicos.

Page 27: INFORME TÉCNICO DE RESIDENCIA PROFESIONAL QUE …

COMPETENCIAS DESARROLLADAS Y/O APLICADAS.

- Aplicar los conocimientos relacionados con la organización estructural de los microorganismos, identificando sus características químicas, físicas y metabólicas para su clasificación y manejo, resaltando su importancia en los ecosistemas y la industria.

- Manejo y función de los equipos y material de laboratorio para la realizar los análisis establecidos.

- Desarrollo en habilidades para el análisis de información establecida en idiomas diferentes al español.

- Habilidad de comunicación de manera clara y eficiente. - Trabajar en colaboración.

- Aplicar las normas adecuadas a utilizar durante los análisis microbiológicos realizados, manejo y manipulación adecuada de los alimentos.

- Manejo de nuevas tecnologías aplicadas al análisis de microorganismos como lo es las plantillas 3M petrifilm.

- Realizar cotizaciones de los reactivos y materiales necesarios para los diversos análisis y seleccionar lo conveniente.

Page 28: INFORME TÉCNICO DE RESIDENCIA PROFESIONAL QUE …

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