Inseminace hospodářských zvířat

BIOTECHNOLOGIE V REPRODUKCI HZ

Hana Potočková

Význam biotechnologií

● vyšší využití nejlepších plemenic a plemeníků

● možnost využití po

porážce

● vyšší efektivita prevence

chorob

● vyšší ekonomika chovu

● vyšší náchylnost ke specifickým nemocem

● snížení genetické

variability

● vyšší cena

● etické otázky

Biotechnologie používané v chovu

● IVF

● Sexace a separace embryí

● ET, OPU, IVP

● Klonování a štěpení embryí

● Kryokonzervace embryí

● jiné (transgenní organismy, chiméry...)

IVF

● oplození „ve zkumavce“

● předchází hormonální terapie - superovulace

● odběr zralých vajíček - stadium meioze I

● uchování v živném mediu, 37°C, 100% RVV, 5% CO2

● narušení Z.p.: kyseliny, enzymy, propíchnutí mikropipetou

● spermie, sekundární spermatocyt, promární spermatocyt,

samčí somatická buňka

Sexace a separace embryí

● PCR

● odběr buňky z embrya, namnožení DNA

● násl. detekce Y chromozomu

● separace dle magnetických částic nesoucích monoklonální

protilátku

● umožní vyšší odchov požadovaného pohlaví

Embryotransfer

● umožní vysoké využití nejkvalitnějších zvířat● výběr dárkyně - geneticky cenná plemenice, gen. rezerva..● superovulace - FSH, LH● inseminace - 6-12h po začátku projevů říje● získání embryí - chirurgicky / nechirurgicky, 7. den po

inseminaci● výběr příjemkyň - zdravé, v kondici, ne prvorodičky / staré● příprava příjemkyň - synchronizace, 2x luteolytika● přenos embryí - 7. den - stejné podmínky● kryokonzervace - dlouhodobé uchování

IVP, OPU

● IVP - in vitro produkce embryí● z oocytů uhynulých plemenic● OPU - transvaginální aspirace oocytů z folikulů živých

dárkyň● možnost využití březích plemenic (Bo v 2.-4. měsíci

gravidity● lze získat až 3x více přenosuschopných embryí než z ET

Klonování a štěpení embryí

● klon - genet. informace identická s rodičovským organismem

● lze použít:

– nezralé kmenové buňky– dozrálé krevní buňky– zralé bílé krvinky– somatické buňky

● bisekce - přirozeně - jednovaječná dvojčata● uměle - odstranění jádra z poškozeného oocytu, přenos

poloviny buněk ze zdravého embrya

Kryokonzervace embryí

● dlouhodobé uchování, pro potřeby ET● časná stadia, uchování v tekutém dusíki● kryoprotektiva - glycerol, ethylenglykol, propandiol,

diethylsulfoxid

● vitrifikace - odvodnění kontaktem s vysoce koncentrovaným roztokem

● kryoprotektiva v přírodě - některé ryby, žáby..

Další technologie● Transplantace jádra / cytoplazmy

– při poškození cytoplazmy, u HZ se nevyužívá● Transgenní organismy - aplikace DNA přímo do ranného

embrya

– jen 1% injektovaných organizmů bude produkovat transgenní potomstvo

● Chiméry - laboratorní účely

– spojení dvou ranných embryí– „tetraparentální“ organismus– jen někdy jsou životaschopné– samovolně vzniklé chiméry zaznamenány i u člověka

DĚKUJI VÁM ZA POZORNOSTPoužitá literatura:

● Linhartová, E., 2008: Hospodářská zvířata v lidské péči - Skot. Olomoucký biozpravodaj 3/2008● Lopatářová, M. et al., 2006: Určení pohlaví raných embryí skotu v podmínkách praxe.

Vetrinářství 2006:56, str. 696-699● Machatková, M., 2006: Vývojové trendy v produkci geneticky cenných embryí skotu

superovulací a metodou in vitro. Veterinářství 2006:56, str. 299-301● Petelíková, J., 2008: Přenos embryí skotu v České Republice v roce 2007; výroční zpráva.

Českomoravská společnost chovatelů, a.s., 2008

● Petr, J., 2003: Klonování - hrozba, nebo naděje? Paseka, 2003

● Petr, J., 2007: Terapeutické klonování úspěšné u makaka. Nature, BBC● Řezáčová, J., 2005: Asistovaná reprodukce v léčbě neplodnosti. Moderní babictví, 8, str. 1-5

Internetové zdroje:● http://www.agroweb.cz/BIOTECHNICKE-METODY-V-CHOVU-SKOTU__s45x8531.html

● http://www.agroweb.cz/BIOTECHNICKE-METODY-V--REPRODUKCI-OVCI-A-KOZ__s45x8329.html

● http://akademon.cz/article.asp?source=klem● http://www.bovet.cz ● http://www.lekari-online.cz/lecba-neplodnosti/zakroky/mimotelni-oplodneni-ivf● http://www.osel.cz/index.php?clanek=5312