Introducción al estudio de la Histología y Morfología Celular Professor: Verónica Pantoja. Lic. MSP. “Kinesiologia” IPCHILE - DOCENTE: Veronica Pantoja

Introducción al estudio de la Histología y Morfología Celular

Professor: Verónica Pantoja . Lic. MSP.

“Kinesiologia”

IPCHILE - DOCENTE: Veronica Pantoja S. 2014

Objetivo : Especificar las herramientas que utiliza la histología para el estudio ultraestructural de tejidos y de la célula como unidad morfológica y funcional del organismo

Etimológicamente: histo= tejido logos: estudio

Es la rama de la biología encargada del análisis microscópico de la anatomía celular y tisular de los tejidos biológicos.

Marcello Malpighi es reconocido como el fundador de la Histología

Las primeras investigaciones histológicas se hicieron en el siglo XVII gracias a la invención del microscopio óptico por Antonio Van Leeuwenhoek


¿Qué es la Histología?¿Qué es la Histología?

Obtención de la muestra de material humano: El material humano puede provenir de tres fuentes: Las necropsias, las biopsias y las piezas operadas.


NecropsiasSon las piezas que se obtienen de un cadáver.

NecropsiasSon las piezas que se obtienen de un cadáver.

Piezas operadas

Los tejidos que han sido extraídos de las intervenciones quirúrgicas, generalmente tumores u órganos inflamados, también pueden darnos material de investigación.

Piezas operadas

Los tejidos que han sido extraídos de las intervenciones quirúrgicas, generalmente tumores u órganos inflamados, también pueden darnos material de investigación.

BiopsiasSon trozos de tejido que se obtienende un sujeto con vida con el objeto deestudiarlos al microscopio y efectuar un diagnóstico histopatológico.

BiopsiasSon trozos de tejido que se obtienende un sujeto con vida con el objeto deestudiarlos al microscopio y efectuar un diagnóstico histopatológico.


METODOS HISTOLOGICOS:

a) En fresco: animales unicelulares y células libres.

b) Coloración vital: usando soluciones de colorantes no tóxicos (colorantes vitales), coloración intravital o in vivo, y la coloración supravital, donde pueden colorearse células libres o porciones de órganos.

Requiere de la muerte celular y supone seguir una serie de pasos, la Técnica histológica

1-Examen inmediato o in vivo: 2- Examen mediato o post-morten:



PASOS DE LA TECNICA:

1.Obtencion del material2.Fijacion 3.Inclusion 4.Obtencion del corte5.Coloracion6.Montaje

DeshidrataciónAclararamiento

Pueden provenir de: * biopsias quirúrgicas * material obtenido de necropsias * utilizando animales de laboratorio * estudios experimentales en animales * material de cultivos de tejidos * frotis o extendidos

1- Obtención del material:1- Obtención del material:


Es el proceso Físico (Histoquímico) que logra una situación estable de los constituyentes tisulares, interrumpiendo las reacciones enzimáticas de autólisis.

2- Fijación2- Fijación


Cualidades de un buen fijador:

1) Actuar con rapidez y detener los procesos autolíticos.

2) Poder de penetración.3) Conservación4) No interferir y facilitar los

procesos posteriores.5) Endurecer el tejido y darle

mayor consistencia.6) Insolubilizar los componentes

de los tejidos.7) No producir estructuras

artificiales.



Mecanismo de acción de los fijadores:Mecanismo de acción de los fijadores:

Por coagulación de lasproteínas, sincombinarse con ellas:alcohol, formol, ácidoPícrico, etc.

Formando combinaciones químicas con las sustancias orgánicas: ácido crómico, bicromato de potasio, de amoniaco, etc

Por reducción, al contacto cola sustancias orgánicasFormando un precipitado fino:Ácido ósmico,bicloruro de

mercurio.

Por oxidación: bicromato de potasio.

FIJADORES


Es impregnar la pieza con una sustancia que le confiere dureza y permite obtener cortes uniformes y delgados.

En la técnica corriente, se utiliza la parafina; que es insoluble en agua, está condicionada por la extracción de toda el agua del material a incluir. Los pasos de la inclusión son los siguientes:

3- Inclusión3- Inclusión

XILOL


Confección del taco: Es la inclusión definitiva del trozo de tejido. Se utiliza un molde metálico especial denominado barras de Leuckart, donde se vierte parafina liquida (60°C).


Para obtener cortes finos se utilizan aparatos denominados micrótomos, hay varios tipos.

4- Obtención del corte4- Obtención del corte

Tipo Minot: (Mas Usados) dispone de 4 posiciones de ajuste, según el corte sea de 1-10 µm, 11-20 µm, 21-30 µm o 31-40 µm así como ajuste del ángulo de la cuchilla graduado, inmovilización de la rueda y mecanismo de avance de gran precisión


Montaje del corte:

Se colocan sobre una platina con agua caliente. Luego se levantan los cortes con un portaobjeto, se extiende sobre una película de Albúmina de Mayer, que es una mezcla de partes iguales de albúmina de huevo, glicerina con un cristal de timol. Los portaobjetos con los cortes adheridos se llevan a la estufa.


Los colorantes se pueden clasificar de diferente manera:1-Colorantes naturales: a) animales: carmín. b) vegetales: hematoxilina, orceina. 2-Colorantes artificiales o sintéticos: (colorantes de anilina). a) ácidos: Son colorantes citoplasmáticos. b) básicos: Son colorantes nucleares. c) neutros: Tiñen citoplasma y núcleo de diferente color3-Colorantes indiferentes: no forman sales. Sudan III, rojo escarlata, etc.

Sustancias basofilas se tiñen con los colorantes básicos Sustancias acidofilas se tiñen con los colorantes ácidos Sustancias neutrofilas se tiñen con los colorantes neutros.

5 COLORACION:5 COLORACION:


Los pasos de la coloración son:a) Desparafinización:

b) Hidratación: c) Coloración propiamente dicha


Las fases del montaje final son:

a) Deshidratación: mediante la acción de alcoholes de gradación creciente: 70°, 80°, 90° y 100°, sucesivamente.

b) Homogenización o aclaración: se emplea el benzol o xilol a los que se le puede agregar ácido carbónico o fénico para aumentar su eficacia, estos son muy ávidos de agua.

c) Colocación del cubreobjeto: con el objeto de proteger el preparado, se la recubre con una laminilla de vidrio de 0,2 mm de espesor, o cubreobjeto. Para adherir el cubreobjeto al portaobjeto, se emplea una resina, el Bálsamo de Canadá.

6) Montaje final6) Montaje final


Antes de evaluar

¿PREGUNTAS, DUDAS, COMENTARIOS?


Responda


1.Nombre dos pasos de la técnica histológica.

2.De dos características de un buen fijador

3.¿Cual es la función de un fijador?

4.¿Como se llama el instrumentos para cortar el taco con la muestra.?

5.Nombre un colorante

6.Nombre una fase del proceso de montaje final y explíquela.

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