Embed Size (px)
Citation preview
LAPORAN AKHIR
KEGIATAN
PEMBUATAN BIBIT TANAMAN HUTAN MELALUI KULTUR JARINGAN DAN AKLIMATISASI
KERJASAMA KOREA – INDONESIA
RUMPIN SEED SOURCES AND NURSERY CENTER
JAKARTA
2015
i
KATA PENGANTAR
Laporan akhir ini berisikan tentang kegiatan pembuatan bibit tanaman
hutan melalui kultur jaringan dan aklimatisasi dalam penyediaan bibit
bermutu secara genetik, fisik, dan fisiologis. Pada kesempatan ini, jenis
tanaman yang akan dikembangkan diantaranya varietas Jati (Tectona
grandis) dari beberapa klon dan bibit unggul dari sumber lainnya.
Dengan selesainya laporan kegiatanini, diharapkan RSSNC dapat
menghasilkan bibit unggul yang bermanfaat untuk meningkatkan nilai
ekonomi tanaman.
Jakarta,Desember 2015
Penyusun,
Assisten Lab Kultur Jaringan RSSNC
Yuli Fitriani, S. Hut
ii
DAFTAR ISI
COVER
KATA PENGANTAR ....................................................................... i
DAFTAR ISI ................................................................................... ii
DAFTAR TABEL ............................................................................. iv
DAFTAR GAMBAR ........................................................................ v
DAFTAR LAMPIRAN ..................................................................... vi
I. PENDAHULUAN .................................................................. 1
A. Latar Belakang ................................................................ 1
B. Maksud dan Tujuan ......................................................... 1
C. Ruang Lingkup Kegiatan ................................................. 1
D. Sasaran ........................................................................... 2
II. RENCANA KERJA ............................................................... 3
A. Kondisi Umum ................................................................. 3
B. Indikator Kerja ................................................................. 3
III. PELAKSANAAN ................................................................... 5
A. Dasar Pelaksanaan ......................................................... 5
B. Persiapan Pelaksanaan .................................................. 5
C. Organisasi Pelaksana. .................................................... 5
D. Metodologi ...................................................................... 5
E. Sasaran dan Lokasi ........................................................ 10
F. Waktu dan Tempat Pelaksanaan .................................... 10
G. Rencana Anggaran dan Biaya ........................................ 10
IV. HASIL KEGIATAN ................................................................ 12
A. Inisiasi lima klon jati unggul Purwobinangun .................. 12
B. Pembuatan stek jati Purwobinangun .............................. 12
C. Pengambilan materi genetik Meranti dan benih
kayu putih dari Purwobinangun ...................................... 13
D. Pengambilan materi genetik jati Cepu
(PHT 1 dan PHT 2) ........................................................ 14
iii
E. Sterilisasi dan inisiasi berbagai jenis tanaman
hutan dari berbagai klon ............................................... 14
F. Multiplikasi eksplan tahun 2015 dan tahun sebelumnya 18
G. Inventarisasi eksplan terkontaminasi ............................ 20
H. Aklimatisasi ................................................................... 2I
I. Pembuatan bibit kultur jaringan melalui micro cutting .... 24
J. Pemeliharaan Uji Lapang Tahun 2013 – 2014 .............. 28
K. Pengukuran Uji Lapang Tahun 2014 ............................. 29
V. KESIMPULAN DAN SARAN .............................................. 32
A. Kesimpulan ................................................................... 32
B. Saran ............................................................................. 32
VI. PENUTUP ........................................................................... 33
iv
DAFTAR TABEL
Tabel 1. Organisasi pelaksana pembuatan bibit tanaman hutan ............ 5 Tabel 2. Prediksi penanaman eksplan .................................................... 6 Tabel 3. Rancangan formulasi media kulturjaringan …. ......................... 7 Tabel 4. Anggaran biaya pembuatan bibit kultur jaringan …. ................. 10 Tabel 5. Anggaran biaya aklimatisasi ................................................... 11 Tabel 6. Klon bibit meranti yang dibawa ke RSSNC ...................................... 13 Tabel 7. Beberapa jenis media inisiasi untuk beberapa tanaman
yang telah diinisiasi .................................................................. 17 Tabel 8. Jenis dan jUmlah tanaman hasil inisiasi .................................. 17
Tabel 9. Jenis dan jumlah tanaman yang disubkultur ..................................... 19
Tabel 10. Rekapitulasi data akhir kontaminasi ...................................... 20
Tabel 11. Jenis tanaman yang berhasil diaklimatisasi ................................... 24
Tabel 12. Media micro cutting ................................................................ 25
Tabel 13. Beberapa jenis tanaman yang diperbanyak melalui stek mikro ............................................................................... 25
Tabel 14. Tanaman hasil stek mikro ...................................................... 26
Tabel 15. Beberapa tempat penyimpanan stek mikro ........................... 27 2 2 26
Tabel 16. Data hasil pengukuran uji lapang ........................................... 29
Tabel 17. Rekapitulasi data hasil kegiatan di laboratorium RSSNC ............... 30
v
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1. Eksplan jati Purwobinangun yang terkontaminasi
jamur dan bakteri ......................................................................... 12 Gambar 2. Hasil stek jati Purwobinangun pada awal penanaman ................... 13 Gambar 3. Bibit meranti berasal dari Cepu .................................................... 14 Gambar 4. a. Benih kayu putih ........................................................................ 14 b. Bibit kayu putih siap tanam Gambar 5. a. Jati PHT 1 yang ditanam di bedeng kebun pangkas ................... 14 b. Jati PHT 2 yang ditanam di bedeng kebun pangkas Gambar 6. Pembengkokan pada tanaman induk ............................................. 15 Gambar 7. Tahapan sterilisasi eksplan jati (Tectona grandis) .......................... 16 Gambar 8. Beberapa tanaman hasil inisiasi (2-MST) ....................................... 16 Gambar 9. Elongasi tunas eksplan Jati ........................................................... 18 Gambar 10. Multiplikasi eksplan Jati ............................................................... 19 Gambar 11. Eksplan yang mengalami pencoklatan ........................................ 19 Gambar 12. Tahap pembuatan pupuk eceng gondok ..................................... 23 Gambar 13. Beberapa jenis tanaman hasil aklimatisasi .................................. 24 Gambar 14. Tahapan pembuatan stek mikro (Micro cutting) ............................ 27 Gambar 15. Beberapa jenis tanaman hasil micro cutting ................................ 28 Gambar 16. Perbedaan pertumbuhan tanaman jati pada tiga macam
media stek mikro pada umur 3 minggu ....................................... 28 a. Media eceng gondok + pasir b. Media tanah top soil + kompos + pupuk kandang sapi + sekam bakar
(langsung di polibag) c. Media eceng gondok + pasir + pupuk kandang sapi d. Media cocopeat + sekam bakar
Gambar 17. Kegiatan pemeliharaan uji lapang .............................................. 29 a. Pembabatan b. Pendangiran c. Pemupukan pertama d. Pemupukan kedua e. Penyulaman
vi
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1.Tata Waktu Kegiatan Kultur Jaringan .................................. 34
Lampiran 2.Distribusi HOK setiap Bulan................................................. 35
Lampiran 3. Pembelian Alat Dan Bahan Kimia Tahap Pertama ............. 36 Lampiran 4. Pembelian Alat Dan Bahan Kimia Tahap Kedua .............. 37
1
I. PENDAHULUAN
A. Latar Belakang
Program Pemerintah dalam upaya menekan laju degradasi hutan dan
meningkatkan perbaikan lingkungan telah dimulai sejak lama, diantaranya melalui
kegiatan rehabilitasi hutan dan lahan, pengelolaan hutan berbasis masyarakat (Hutan
Rakyat, HKM, Hutan Desa, dan lain-lain), dan peningkatan kesadaran serta peran
aktif masyarakat untuk menanam pohon melalui program Gerakan One Man One
Tree dan One Bilion Indonesian Trees. Hal tersebut tentunya perlu diapresiasi dan
didukung dengan ketersediaan bibit tanaman yang cukup dan berkualitas.
Dalam mensukseskan program penanaman tersebut, kesulitan mendapatkan
bibit tanaman yang seragam dengan kualitas baik dalam jumlah banyak dan dalam
waktu singkat, merupakan permasalahan umum terjadi di hampir setiap wilayah.
Perbanyakan tanaman secara generatif memerlukan waktu cukup lama dan harus
menunggu musim berbuah. Perbanyakan tanaman secara vegetatif merupakan
alternatif terbaik untuk mengatasi permasalahan tersebut. Saat ini, kultur jaringan
telah berkembang menjadi bioteknologi yang bermanfaat untuk memproduksi bibit-
bibit unggul, pemuliaan tanaman, pelestarian plasma nutfah, dan kreasi varietas baru
untuk perbaikan kualitas tanaman.
Perbanyakan atau pengembangan secara kultur jaringan merupakan upaya
pengembangan tanaman melalui pembiakan sel-sel meristematis dari jaringan
tanaman, seperti pucuk/tunas. Kultur jaringan bukan merupakan metode pemuliaan,
tetapi hanya merupakan suatu metode perbanyakan biasa sehingga tidak dapat
memperbaiki kualitas genetik bibit. Oleh karena itu, diperlukan bahan tanaman dari
klon terpilih.
B. Maksud dan Tujuan
Maksud dari pembuatan bibit kultur jaringan adalah untuk memperbanyak bibit
unggul tanaman hutan melalui teknik in vitro. Adapun tujuannya adalah tersedianya
bibit unggul dari jenis yang dikembangkan, yang secara genetik dan fenotip identik
dengan induknya untuk pembangunan kebun pangkas atau kebutuhan lainnya.
C. Ruang Lingkup Kegiatan
Ruang lingkup pembuatan bibit tanaman hutan melalui kultur jaringan
pada tahun 2015 adalah membuat bibit unggul mulai dari tahap karantina mother
2
plant, pembuatan media, sterilisasi media, sterilisasi eksplan, inisiasi, multiplikasi, dan
pembesaran planlet dalam botol.
D. Sasaran
Sasaran kegiatan pembuatan bibit kultur jaringan adalah tersedianya bibit
unggul tanaman hutan untuk dikembangkan dan disebarluaskan sebagai tanaman
kebun pangkas di seluruh Indonesia.
Jenis tanaman yang dikembangkan diantaranya varietas Jati (Tectona
grandis) dari beberapa klon terpilih, diantaranya yaitu RSSNC, Biotrop, LIPI dan
Pupuk Kaltim, Benuang Bini dari Ambon, Tembesu dari Palembang, Bentawas dari
Bali serta jenis lainnya dari berbagai klon.
3
II. RENCANA KINERJA
A. Kondisi Umum
RumpinSeed Source and Nursery Centre (RSSNC) merupakan tempat
pengembangan benih yang berada di bawah Direktorat Bina Perbenihan Tanaman
Hutan Kementerian Lingkungan Hidup dan Kehutanan, terus berusaha
mengembangkan teknik perbanyakan dan pemuliaan tanaman baik secara
konvensional maupun modern. Kultur jaringan merupakan teknologi modern yang
telah lama dikembangkan di RSSNC sejak tahun 2007.
Sampai saat ini RSSNC telah mampu mengembangbiakan 50 jenis tanaman
hutan melalui kultur jaringan pada tingkat subkultur dan 17 jenis pada tingkat
aklimatisasi. Tanaman yang berhasil diaklimatisasi diantaranya jati, jabon merah,
jabon putih, gaharu, sengon merah, cendana, pulai, duabanga, dan lain-lain.
Pada tahun 2015, RSSNC ditugaskan mengembangkan jenis tanaman hutan
melalui kultur jaringan untuk kebutuhan pembuatan kebun pangkas guna
memproduksi bibit unggul. Tanaman yang dikembangkan diantaranya jati varietas
PHT 1 dan PHT 2 dari Puslitbang Perum Perhutani, dan jenis tanaman lainnya
dengan target pencapaian sebanyak 15.000 planlet.
B. Indikator Kinerja
1. Input
Kegiatan pembuatan bibit tanaman hutan melalui kultur jaringan dan
aklimatisasi dalam Proyek Pengembangan Sumber Benih Kerjasama Indonesia –
Korea berasal dari Annual Budget Of Rumpin Seed Sources and Nursery Center
(RSSNC), Korea Indonesia Forest Center (KIFC) tanggal 01 Januari s.d 31
Desember 2015 masing-masing sebesar Rp. 91.650.000,- (Sembilan Puluh Satu
Juta Enam Ratus Lima Puluh Ribu Rupiah) dan Rp. 14.250.000,- (Empat Belas
Juta Dua Ratus Lima Puluh Ribu Rupiah).
2. Output
Output dari pembuatan bibit tanaman hutan melalui kultur jaringan pada
tahun 2015 adalah memproduksi bibit sampai pada tahap pembesaran planlet
sebanyak 15.000, sedangkan untuk aklimatisasi pada tahun ini sebesar 8.500
bibit.
4
3. Outcome
Hasil pembuatan bibit tanaman hutan kultur jaringan adalah berupa bibit
vegetatif mikro berkualitas untuk tujuan pembuatan kebun pangkas dan uji coba
tanaman.
4. Benefit
Tersedianya klon tanaman hutan bermutu yang secara genetik dan fenotip
identik dengan induknya dalam jumlah banyak dan waktu cepat.
5. Impact
Tersedianya kebun pangkas sebagai sumber pengembangan bibit
tanaman hutan berkualitas untuk dikembangkan di masyarakat.
5
III. PELAKSANAAN
A. Dasar Pelaksanaan
Dasar pelaksanaan pembuatan 15.000 planlet tanaman hutan hasil kultur
jaringan dan aklimatisasi adalah Annual Budget Of Rumpin Seed Sources and
Nursery Center, Korea Indonesia Forest Center tanggal 01 Januari s.d 31 Desember
2015 dan Daftar Isian Pelaksanaan (DIPA) SATKER Direktorat Bina PTH tahun 2014
No.029-04.1.439536/2015 tanggal 05 Desember 2014.
B. Persiapan Pelaksanaan
1. Penyusunan Rencana Kerja dan Rencana Anggaran Biaya.
2. Penyusunan Petunjuk Teknis Kegiatan.
3. Persiapan administrasi.
4. Pengambilan mother plant untuk dikembangkan.
5. Persiapan fasilitas, alat-alat, dan operasional laboratorium kultur jaringan RSSNC
untuk kelancaran kegiatan.
C. Organisasi Pelaksana
Organisasi pelaksana dalam pembuatan bibit tanaman hutan melalui kultur
jaringan adalah sebagai berikut :
Tabel 1. Organisasi Pelaksana pembuatan bibit tanaman hutan
1. Penanggung Jawab : Direktur Bina PTH dan Direktur KIFC
2. Ketua : Ir. Benny Subandi, M.Sc
3. Tim Pelaksana : Yuli Fitriani, S. Hut Agung Widodo, S. Hut Isnawati Rochimah, S. Hut Cecep Subarnas
D. Metodologi
1. Prediksi Produksi Bibit
Pembuatan bibit melalui kultur jaringan terdiri dari empat kegiatan yaitu
inisiasi, subkultur, multiplikasi, dan pembesaran planlet. Sumber eksplan untuk
inisiasi direncanakan diperoleh dari BBPTH, Jogjakarta sebanyak ± 500 tanaman,
namun dalam pelaksanaannya sumber eksplan ini belum bisa digunakan untuk
inisiasi, sehingga inisiasi dilakukan dengan menggunakan sumber eksplan dari
jenis lain klon terpilih.Prediksi penanaman eksplan dapat dilihat pada tabel 2.
6
Tabel 2. Prediksi penanaman eksplan
Kegiatan Produksi/Bulan Persen
Kegagalan (%) Hasil Akhir Bulan Ke- Jumlah
Inisiasi
3 200 70 60
4 200 70 60
5 400 70 120
6 300 60 120
7 400 60 160
8 300 60 120
9 300 50 150
10 400 50 200
11 300 50 150
12 400 40 240
1.380
Subkultur 1 5 - 3 - 1 180 50 90
2 4 270 40 162
3 8 648 30 454
4 12 1814 20 1.452
Subkultur 1 6 - 4 - 1 180 50 90
2 4 270 40 162
3 8 648 30 454
4 12 1814 20 1.452
Subkultur 1 7 - 5 - 1 360 50 180
2 3
4 540 40 324
8 1296 30 907
4 12 3629 20 2.903
Subkultur 1 8 - 6 - 1 360 50 180
2 4 540 40 324
3 8 1296 30 907
4 12 3629 20 2.903
Subkultur 1 9 - 7 - 1 480 50 240
2 4 720 40 432
3 8 1728 30 1.210
4 12 4838 20 3.871
Subkultur 1 10 - 8 - 1 360 50 180
2 4 540 40 324
3 8 1296 30 907
4 12 3629 20 2.903
Subkultur 1 11 - 9 - 1 450 50 225
2 4 675 40 405
3 8 1620 30 1.134
4 12 4536 20 3.629
Subkultur 1 12 - 10 - 1 600 50 300
2 4 900 40 540
3 8 2160 30 1.512
4 12 6048 20 4.838
Total 23.950
7
2. Rancangan Formulasi Media
Pembuatan formula media kultur jaringan menggunakan bahan kimia
makro dan mikro, vitamin, zat pengatur tumbuh, gula, dan agar-agar. Jenis bahan
yang dibutuhkan disajikan pada Tabel 3.
Tabel 3. Rancangan formulasi media kultur jaringan
No Jenis Barang Stok
(Gram) Kebutuhan Per Ltr (g/L)
Kebutuhan Total (g/L)
Bahan Kimia
Makro
1 NH4NO3 100 1,2 1560
2 KNO3 1000 3,03 3939
3 KH2PO4 600 0,17 221
4 MgSO4 750 0,37 481
5 CaCl2 500 0,44 572
Mikro
6 FeNaEDTA 100 0,37 481
7 H3BO3 500 0,0062 8,06
8 Na2MoO4 25 0,00025 0,325
9 CoCl2 25 0,00025 0,325
10 KI 125 0,000083 0,1079
11 MNSO4 50 0,0223 28,99
12 ZnSO4 125 0,0086 11,18
13 CuSO4 200 0,00025 0,325
Vitamin
14 Nicotinic acid 10 0,0005 0,65
15 Pyorodoxine 10 0,0005 0,65
16 Thyamine HCl 2,5 0,0001 0,13
17 Glycine 25 0,002 2,6
Antibiotik
18 PPM (ml) 0 0,5 650,0
Zat Pengatur Tumbuh
19 BAP 25 0,0001 0,13
Bahan lainnya
25 CAP 50 0,6 780,0
26 PVP 250 1,2 1560,0
27 Casein Hydrolisate 500 0,0001 0,1
28 Agar-Agar 1500 8 10400
29 Gula 0 30 39000
8
3. Persiapan bahan dan alat
3.1. Bahan-bahan kimia yang dipersiapkan untuk inisiasi, multiplikasi dan
pembesaran eksplan adalah :
a. Garam makro-mikro
b. Vitamin
c. Zat pengatur tumbuh/hormon
d. Antibiotik
e. Penstabil pH (HCl dan NaOH)
f. Agen gel (agar)
g. Alkohol
h. Spiritus
i. Air steril
3.2. Alat-alat utama yang perlu disiapkan untuk inisiasi, subkultur, dan
multiplikasi antara lain :
a. Autoclave
b. Dispenser elektrik
c. Waterbath
d. Microwave
e. Pipet kapiler
f. Pipet miliopore
g. Laminar hood
h. Alat potong (scalpel, pinset, gunting)
i. Rak inkubasi
j. Magnetic stirrer
k. Botol kultur dan tutup
l. Gelas ukur
m. Petridish
n. Botol scott
4. Prosedur kerja
a. Pembuatan Media Kultur
b. Karantina Mother Plant
Perlakuan tanaman induk untuk sumber eksplan antara lain :
9
Mother plant dipelihara di green house untuk mendapatkan tumbuhan
optimum sehingga dapat dijadikan sebagai sumber eksplan.
Mother plant diberi perlakuan hormon untuk mempercepat respon
pertumbuhan sebagai bahan tunas eksplan.
Tunas eksplan disemprot dengan fungisida, insektisida, dan bakterisida agar
menghasilkan tunas sehat dan bebas penyakit.
c. Sterilisasi dan Inisiasi Eksplan
Beberapa tahapan sterilisasi eksplan sebagai berikut :
Pencucian eksplan dengan air mengalir.
Pencucian eksplan dengan larutan sabun atau tween.
Perendaman eksplan dalam larutan fungisida dan bakterisida.
Perendaman dalam larutan desinfektan.
Eksplan yang sudah disterilisasi ditanam di media yang mengandung Zat
Pengatur Tumbuh sitokinin yang dapat merangsang tumbuhnya tunas in vitro
pertama. Biasanya setelah 3-4 minggu akan tumbuh tunas aksiler baru.
d. Penggandaan Tunas
Penggandaan tunas bertujuan untuk menggandakan eksplan hasil inisiasi yang
dilakukan dengan cara merangsang terjadinya pertumbuhan tunas cabang atau
merangsang terbentuknya tunas pucuk tanaman secara adventif, baik secara
langsung maupun melalui induksi kalus terlebih dahulu pada media induksi
tunas. Tunas-tunas tersebut disubkultur ke media elongasi tunas agar
mengalami pertumbuhan tinggi. Setelah itu, tunas dipotong kembali dan
disubkultur ke media induksi tunas.
Pada tahap ini biakan tunas akan tumbuh dengan rentan waktu 3 sampai 4
minggu. Proses ini dilakukan secara terus menerus sampai target yang
diinginkan jumlah planletnya. Setelah biakan berumur 4 minggu dengan
panjang tunas 5-8 cm dan jumlah buku minimal 4 ruas maka dapat dipindahkan
ke lapangan untuk diaklimatisasi.
Botol-botol kultur yang telah berisi ekplan diletakkan pada rak yang steril
dengan suhu kamar. Pengamatan dilakukan setiap hari untuk melihat
perkembangan eksplan serta adanya kontaminasi oleh bakteri ataupun jamur.
e. Aklimatisasi
Tahapan dalam aklimatisasi adalah sebagai berikut :
1. Tunas dikeluarkan dari botol, kemudian cuci di air mengalir untuk
membersihkan agar yang menempel kemudian kalusnya dipotong.
10
2. Tunas direndam dalam larutan fungisida sesaat kemudian ujung tunas
bagian bawah dicelupkan ke pasta ZPT penumbuh akar. Setelah itu tunas
ditanam pada media aklim yang telah disiapkan.
3. Bak plastik ditutup dengan plastik transparan, kemudian bak tersebut
disimpan dibawah disungkup plastik besar yang dinaungi paranet.
4. Setelah 4-6 minggu plantlet pasca aklimatisasi siap di tanam di polibag.
E. Sasaran dan Lokasi
Sasaran dan lokasi pengambilan mother plant untuk pembuatan bibit tanaman
hutan melalui kultur jaringan diantaranya :
1. RSSNC
2. Perum Perhutani
3. Litbang Jogja
4. Biotrop
5. Ambon
6. Palembang
7. Carita
8. Bali
F. Waktu dan Tempat Pelaksanaan
Kegiatan pembuatan bibit tanaman hutan kultur jaringan dilaksanakan dari
bulan Januari s.d Desember 2015 di laboratorium RSSNC.
G. Rencana Anggaran dan Biaya
Kegiatan pembuatan bibit tanaman hutan kultur jaringan sebesar Rp.
91.650.000,- dan aklimatisasi sebesar Rp. 14.250.000,- yang dibiayai dari Annual
Budget Of Rumpin Seed Sources and Nursery Center (RSSNC), Korea Indonesia
Forest Center (KIFC) tanggal 01 Januari s.d 31 Desember 2015 Penggunaan
anggaran selengkapnya tertuang pada Tabel 4 dan 5.
Tabel 4. Anggaran biaya pembuatan bibit kultur jaringan
No Jenis Kegiatan Volume
Kegiatan
Biaya Satuan
Jumlah Biaya
(Rp) (Rp)
1 Belanja Bahan
Pembelian Bahan 1 Paket 52.500.000 52.500.000
2 Honor
Upah Pembuatan Bibit Kultur 870 HOK 45.000 39.150.000
11
Jaringan
Total 91.650.000
Tabel 5. Anggaran biaya akilmatisasi
No Jenis Kegiatan Volume
Kegiatan Biaya
Satuan (Rp) Jumlah Biaya
(Rp)
1 Belanja Bahan dan Honor Kegiatan aklimatisasi tahun 2015 dan sebelumnya
1 Paket 12.750.000,- 12.750.000,-
2 Belanja Bahan dan Honor Kegiatan aklimatisasi tahun 2015
1 Paket 1.500.000,- 1.500.000,-
Total 14.250.000,-
12
IV. HASIL KEGIATAN
Kegiatan yang telah dilaksanakan selama tahun 2015 ini yaitu :
A. Inisiasi lima klon jati unggul Purwobinangun
Direktorat Bina PTH tengah menjalin kerjasama dengan Balai Besar Penelitian
Bioteknologi dan Pemuliaan Tanaman Hutan Yogjakarta dalam rangka meningkatkan
kualitas kayu rakyat Penandatangan Material Transfer Agreement (MTA) telah
ditandatangi di Yogya tanggal 15 Mei 2015. Pada tahap awal yang akan diserahkan
untuk kemudian dikembangkan dan diperbanyak oleh RSSNC adalah Klon unggul jati
Purwobinangun, meranti, dan kayu putih. Perbanyakan materi genetik unggul
rencananya akan dijadikan sebagai materi genenik untuk kebutuhan kebun pangkas
untuk memproduksi bibit unggul dan sebagian dibagikan kepada masyarakat.
Kegiatan inisiasi 5 klon jati unggul dilakukan di laboratorium kultur jaringan
BBPTP Jogjakarta. Sumber eksplan berasal dari Watusipat, Gunung Kidul dan 1 klon
berasal dari Wonogiri, Jawa Tengah yang ditanam di kebun pangkas BBPBPTH
Purwobinangun. Eksplan hasil inisiasi ini tidak berhasil dikembangkan (eksplan
terkontaminasi jamur dan bakteri setelah dibawa ke RSSNC).
Gambar 1. Eksplan jati Purwobinangun yang terkontaminasi jamur dan bakteri
B. Pembuatan stek jati Purwobinangun
Bahan stek yang dibawa dari Yogyakarta juga tidak berhasil dikembangkan di
RSSNC (bahan stek mengalami busuk batang setelah ditanam pada media stek),
sehingga kelima klon jati tersebut belum bisa dikembangakan melalui kultur jaringan di
RSSNC. Pembuatan stek kemudian dilakukan di Purwobinangun, hasilnya lalu dibawa
ke RSSNC untuk dikembangkan, baik untuk kebun pangkas, penanaman uji lapang,
ataupun untuk diperbanyak melalui kutur jaringan dan stek.
13
Gambar 2. Hasil stek jati Purwobinangun pada awal penanaman
C. Pengambilan materi genetik Meranti dan benih kayu putih dari Purwobinangun
Bibit meranti merah yang dibawa ke RSSNC berasal dari 25 klon yang
berbeda, setiap klon berjumlah satu bibit. Bibit ini direncanakan akan dijadikan sebagai
pohon induk untuk diperbanyak melalui kultur jaringan. Jumlah dan jenis klon terdapat
pada tabel 6 di bawah ini :
Tabel 6. Klon bibit meranti yang dibawa ke RSSNC
No Nama Klon Jumlah Ket : B ; Populasi Berau, Kalimantan Timur C ; Poopulasi Carita, Pandeglang K ; Populasi Kenangan, Kalimantan Timur KB ; Populasi Kalimantan Barat WL ; Populasi Muara Wahau, Kalimantan Timur Nomor pertama ; Nomor Familly Nomor Kedua ; Nomor Pohon
1 B 8 – 9 1
2 B 11 – 1 1
3 B 22 – 7 1
4 C 11 – 2 1
5 C 12- 8 1
6 K 03 – 1 1
7 K 13 – 1 1
8 K 13- 9 1
9 K 14 – 5 1
10 K 26 – 9 1
11 K 26 – 9 1
12 K 28 - 5 1
13 K 28 – 9 1
14 K 30 – 9 1
15 KB 01 – 5 1
16 KB 18 - 2 1
17 KB 20 – 7 1
18 WL 01 – 2 1
19 WL 01 – 5 1
20 WL 01 – 9 1
21 WL 06 – 3 1
22 WL 11 – 3 1
23 WL 14 – 1 1
24 10-10 1
25 11-8 1
14
Gambar 3. Bibit meranti berasal dari Cepu
Benih Kayu Putih yang diberikan ke RSSNC sebanyak 2 gram berasal dari
kebun benih F1, Gunung Kidul, Yogyakarta. Benih tersebut diunduh pada bulan Mei
2015. Setiap 1 gram benih Kayu Putih dapat menghasilkan ± 6.000 bibit. Benih ini
direncanakan akan ditabur dalam bedeng tabur RSSNC.
a b Gambar 4. a. Benih kayu putih b. Bibit kayu putih siap tanam
D. Pengambilan materi genetik jati Cepu (PHT 1 dan PHT 2)
Jati yang dibawa dari Cepu sebanyak 200 bibit jati PHT 1 dan 200 bibit PHT 2.
Kedua klon jati ini ditanam di kebun pangkas, di tempat uji lapang, dan untuk dijadikan
bahan indukan perbanyakan secara kultur jaringan maupun stek pucuk.
a b Gambar 5. a. Jati PHT 1 yang ditanam di bedeng kebun pangkas b. Jati PHT 2 yang ditanam di bedeng kebun pangkas
E. Sterilisasi dan inisiasi berbagai jenis tanaman hutan dari berbagai klon
Jenis tanaman hutan yang berhasil diinisiasi dari pucuk yang berasal dari
beberapa daerah, yaitu bentawas (Bali), Benuang Bini (Ambon), Eboni (Ambon), Jati
15
klon 3 (Biotrop), Jati Solomon (RSSNC), Jati Prima (Pupuk Kaltim), Sengon (Papua),
Tembesu (RSSNC), Mindi Besar, dan Panggal Buaya (Bali).
Bahan eksplan yang digunakan adalah bagian tanaman yang masih aktif
membelah seperti bagian pucuk tanaman dari pohon induk. Untuk meningkatkan
jumlah tunas juvenil, dilakukan pembengkokan pada tanaman induk. Dari setiap ruas
batang tumbuh tunas baru setelah dua minggu dari pemangkasan tunas apikal, yaitu
sebanyak 3-4 tunas setiap tanaman, lebih banyak jika dibandingkan dengan tanaman
tanpa pembengkokan (1-2 tunas).
Pada tanaman tahunan dewasa, tunas muda yang memiliki daya tumbuh tinggi
(juvenil) sering muncul pada bagian tanaman yang dekat dengan tanah atau sering
disebut tunas air. Fase juvenil dapat juga diinduksi dengan cara melakukan
penyemprotan tanaman dewasa dengan GA3 atau campuran antara auksin dan GA3.
Gambar 6. Pembengkokan pada tanaman induk
Sterilisasi bahan tanaman (eksplan) merupakan langkah awal yang cukup
penting dan dapat menentukan keberhasilan penanaman secara in vitro. Eksplan yang
akan ditanam pada media tumbuh harus bebas dari mikroorganisme kontaminan.
Jaringan tanaman seperti meristem apikal dan kambium mungkin bebas dari
mikro-organisme, tetapi jaringan lain sering terkontaminasi cendawan dan bakteri,
terutama jaringan yang berasal dari tanaman yang ditumbuhkan di lapangan.
Sterilisasi permukaan dari eksplan diawali dengan pencucian menggunakan tween,
kemudian perendaman dengan fugisida dan bakterisida ditambah dengan tween-80
selama masing-masing 1 jam, lalu dilakukan perendaman menggunakan larutan clorox
& tween-80. Penggunaan Tween 80 sebagai surfactan sangat membantu penetrasi zat
desinfektan masuk ke dalam jaringan eksplan. Selain itu eksplan dapat juga direndam
dalam 70 % ethanol selama 30 -60 detik. Sterilisasi setiap bagian tanaman yang akan
dikulturkan berbeda-beda. Untuk daun/pucuk yang sangat muda hanya menggunakan
clorox satu tingkat selama 5-10 menit, sedangkan untuk batang muda dapat
Tanaman tidak dibengkokan Tanaman dibengkokan
16
menggunakan dua tingkat konsentrasi clorox dengan waktu 10-20 menit. Di bawah ini
merupakan salah satu contoh tahapan dari sterilisasi eksplan tunas jati :
Gambar 7. Tahapan sterilisasi eksplan jati (Tectona grandis)
Inisiasi merupakan penanaman eksplan ke dalam media kultur yang akan
menghasilkan kultur yang aseptik. Dalam tahap ini eksplan yang dikulturkan akan
menginisiasi pertumbuhan baru, sehingga akan memungkinkan dilakukannya
pemilihan bagian tanaman yang tumbuhnya paling kuat untuk perbanyakan
(multiplikasi) pada kultur tahap selanjutnya.
Gambar 8. Beberapa tanaman hasil inisiasi (2-MST)
Pencucian dengan aquadest (3X) Perendaman dalam larutan tween (20 menit))
Perendaman dalam larutan fungisida (0,2 g/100ml) (1 jam)
Bilas dengan air destilasi (3x)
Perendaman dalam larutan bakterisida (0,2 g/100ml) (1 jam)
LAF :Perendaman dalam larutan clorox (15%) (15 menit)
Bilas dengan air steril (4x)
LAF :Perendaman dalam larutan clorox (10%) (10 menit)
Bilas dengan air steril (4x) LAF :Perendaman dalam alkohol 70% (1 menit)
Bilas dengan air steril (4x)
Bilas dengan air destilasi (3x)
Bilas dengan air destilasi (3x)
Jati Bentawas Mindi besar Panggal Buaya
Biji Embrio Tunas
Sengon
17
Tabel 7. Beberapa jenis media inisiasi untuk beberapa tanaman yang telah diinisiasi
No Jenis Tanaman Jenis Media Keterangan
1 Jati (Tectona grandis)
MS + BAP 1 mg/l
Kalus → tunas, Pertumbuhan lambat, Kalus lebih banyak (media inisiasi dan subkultur)
MS 60 + BAP 1 mg/l
Kalus → tunas, Pertumbuhan lambat, Kalus lebih sedikit (media inisiasi), untuk media subkultur lebih bagus
WPM + BAP 1 mg/l Pertumbuhan sangat lambat (media inisiasi dan subkultur)
DKW + BAP 1 mg/l
Pertumbuhan lebih cepat (Kalus dan tunas seimbang), untuk media inisiasi
2 Bentawas (Wrightia religiosa)
MS 60 + BAP 1 mg/l
Pertumbuhan cepat ( 2 HST), batang besar, daun berwarna hijau tua, tidak ada kalus
3 Mindi Besar (Melia azedarrach)
MS 60 + BAP 1 mg/l
Pertumbuhan lebih lambat ( 14 HST), langsung terbentuk akar→tunas, tidak ada kalus
4 Panggal Buaya (Zanthoxylum rhetsa)
MS 60 + BAP 1 mg/l Belum ada perkembangan
5 Sengon (Paraserianthes falcataria)
MS 60 + BAP 1 mg/l Pertumbuhan cepat ( 2 HST), tidak ada kalus
MS + BAP 1 mg/l Pertumbuhan lebih lambat ( 2 HST), tidak ada kalus
DKW Pertumbuhan lambat ( 2 HST), tidak ada kalus
Jumlah dan jenis eksplan yang diinisiasi selama tahun 2015 adalah sebagai berikut :
Tabel 8. Jenis dan jumlah tanaman hasil inisiasi
No Nama Jenis ∑ Eksplan
1 Jati 3 167
2 Jati Solomon 128
3 Jati Prima 17
4 Pulai 10
5 Tembesu 147
6 Eboni 5
7 Mindi Besar 59
8 Benuang Bini 140
9 Bentawas 63
10 Sengon merah 60
11 Panggal Buaya 33
Total 829
18
F. Multiplikasi eksplan tahun 2015 dan tahun sebelumnya
Multiplikasi dilakukan pada berbagai jenis tanaman yang telah ada di lab.
RSSNC ataupun yang telah berhasil diinisiasi, antara lain Jati, Gaharu, jabon, jabon
merah, bentawas, cendana, duabanga, senngon dan tembesu. Kegiatan multiplikasi
dilakukan setelah eksplan melalui tahap induksi tunas dan elongasi.
Pada tahap induksi tunas, penggunaan media tumbuh merupakan salah satu
faktor yang menentukan keberhasilan perbanyakan tanaman melalui kultur jaringan.
Media yang digunakan adalah MS modifikasi + BAP 0,1 mg/l. Media kultur dibuat
padat dengan penambahan 8 g/l agar dan 30 g/l gula serta pH media 6,0. Eksplan
yang digunakan pada tahap induksi berupa tunas apikal atau tunas adventif yang
berasal dari batang satu buku dengan ukuran 1-2 cm. Indikasi lain pada tahap induksi
tunas yang dapat mempengaruhi kecepatan pertumbuhan pada tahap selanjutnya
(tahap elongasi) adalah terbentuknya kalus kompak pada bagian dasar batang
eksplan. Umur eksplan pada tahap induksi tunas sekitar 3-4 minggu.
Elongasi tunas dilakukan pada media MS modifikasi tanpa zat pengatur
tumbuh. Namun di laboratorium kultur jaringan RSSNC elongasi tetap dilakukan pada
media awal inisiasi sampai eksplan siap dimultiplikasi (± 6-8 minggu).
Gambar 9. Elongasi tunas eksplan Jati
Multiplikasi bertujuan untuk menggandakan propagul atau bahan tanaman
yang diperbanyak seperti tunas atau embrio, serta memeliharanya dalam keadaan
tertentu. Pada tahap ini, perbanyakan dapat dilakukan dengan cara merangsang
terjadinya pertumbuhan tunas cabang dan percabangan aksiler atau merangsang
terbentuknya tunas pucuk tanaman secara adventif, baik secara langsung maupun
melalui induksi kalus terlebih dahulu.
Seperti halnya dalam kultur fase inisiasi, di dalam media harus terkandung
mineral, gula, vitamin, dan hormon dengan perbandingan yang dibutuhkan. Hormon
yang digunakan untuk merangsang pembentukan tunas tersebut berasal dari golongan
sitokinin, yaitu BAP (Benzyl amino purine).
19
Gambar 10. Multiplikasi eksplan Jati
Multiplikasi pada perkembangan selanjutnya melngalami penurunan yang
signifikan, baik dari segi jumlah eksplan hidup maupun dari perkembangan dan
pertumbuhannya. Hal ini kemungkinan dikarenakan terlalu banyaknya unsur Fe yang
terakumulasi dalam eksplan (human error). Unsur Fe merupakan hara mikro bagi
tanaman yang dibutuhkan dalam jumlah kecil, antara lain berfungsi dalam proses
sintesis klorofil dan oksidasi-reduksi dalamrespirasi. Kelebihan Fe dapat menghambat
penyerapan hara serta menurunkan daya oksidasi yang berada di akar. Gejala awal
dari keracunan unsur ini antara lain daun berwarna coklat, selanjutnya daun dan
batang menjadi busuk hingga akhirnya eksplan mati. Unsur Fe pada media diperoleh
dari larutan FeNaEDTA. Larutan ini dibuat terlalu pekat dan terlalu banyak
pengambilannya dalam satu liter media, sehingga eksplan mengalami pencoklatan
hingga akhirnya mati.
Gambar 11. Eksplan yang mengalami pencoklatan
Jenis dan jumlah eksplan hasil Multiplikasi :
Tabel 9. Jenis dan jumlah tanaman yang disubkultur
No Nama Jenis ∑ Eksplan Awal ∑ Eksplan Akhir
1 Alpukat 12 64
2 Anggrek 12 36
3 Anthurium 24 47
4 Bentawas 27 27
5 Cendana 20 96
6 Duabanga 1.291 1.254
7 Gaharu AB 188 620
8 Gaharu AC 133 1.052
20
No Nama Jenis ∑ Eksplan Awal ∑ Eksplan Akhir
9 Gaharu AF 48 120
10 Gaharu AM 1.218 6.642
11 Gaharu GD 1.816 7.366
12 Jabon 200 210
13 Jabon Merah 1.659 2.088
14 Jati 3 7.271 16.967
15 Jati Solomon 1.965 4.201
16 Jati Mas 1.008 1.819
17 Jati Berlian 1.325 2.418
18 Jati Prima 2.266 4.772
19 Jati Platinum 700 1.155
20 Mahoni 4 1
21 Mindi besar 80 14
22 Tembesu 148 134
Total 21.415 51.103
G. Inventarisasi eksplan terkontaminasi
Kegiatan inventarisasi kontaminasi eksplan dilakukan setiap satu minggu sekali.
Kontaminasi eksplan disebabkan oleh beberapa hal yaitu jamur, bakteri, dan
pencoklatan (browning). Rekapitulasi data kontaminasi dapat dilihat pada tabel 10.
Tabel 10. Rekapitulasi data akhir kontaminasi
No Nama Jenis Asal Tanaman Total Eksplan Terkontaminasi
Kering/coklat Jamur Bakteri
1 Alpukat 36 0 0
2 Cendana Santalum album NTT 63 0 2
3 Bentawas 0 12 8
4 Benuang bini 43 0 0
5 Duabanga Duabanga mollucana
RSSNC 696 67 0
6 Eboni Diospyros celebica
Palu 1 4 0
7 Gaharu AB Aquilaria becarriana
RSSNC 76 18 0
8 Gaharu AC Aquilaria crassna RSSNC 39 12 7
9 Gaharu AF 4 0 0
10 Gaharu AM Aquilaria mallacensis
RSSNC 531 128 9
11 Gaharu GD Gyrinops decipiens
RSSNC 729 225 1351
12 Gmelina Gmelina arborea 6 1 1
13 Jabon Anthochepalus cadamba
RSSNC 0 27 42
21
No Nama Jenis Asal Tanaman Total Eksplan Terkontaminasi
Kering/coklat Jamur Bakteri
14 Jabon Merah Anthochepalus macrophylla
Manado 75 33 828
15 Jati 3 Tectona grandis Biotrop 5237 520 645
16 Jati Solomon Tectona grandis RSSNC 2336 271 134
17 Jati Prima Tectona grandis PT Pupuk Kaltim 1285 156 16
18 Jati Mas Tectona grandis Biotrop 1077 33 233
19 Jati Berlian Tectona grandis LIPI 1227 14 185
20 Jati Platinum Tectona grandis LIPI 373 0 40
21 Khaya 2 0 0
22 Mahoni Swietenia macrophylla
Carita 15 9 1
23 Mindi besar 21 20 1
24 Trembesu Fragraea fragrans RSSNC 103 6 0
25 Sengon merah
3 18 0
TOTAL 13978 1574 3503
H. Aklimatisasi
Aklimatisasi adalah tahap pemindahan plantet dari kondisi in vitro ke kondisi ex
vitro, baik secara fisiologi maupun morfologinya. Pada kondisi ini, planlet harus
sepenuhnya mampu memproduksi kebutuhannya sendiri terhadap karbon dan
nitrogen Tahap ini sangat penting dan harus dilakukan secara hati-hati, karena jika
tidak dilakukan dengan baik maka sebagian besar planlet yang dihasilkan dapat
mati/musnah. Dari 28 jenis tanaman yang dikembangkan di lab. kultur jaringan, 14
jenis yang berhasil diaklimatisasi sampai tahap penyapihan antara lain jati, jabon,
jabon merah, bentawas, duabanga, tembesu, gaharu.
Salah satu faktor penting dalam aklimatisasi adalah penggunaan media.
Selama ini media yang digunakan untuk aklimatisasi adalah media yang memiliki sifat
penyerap air yang baik, seperti cocopeat, namun dalam penggunaannya cocopeat
tidak dapat menyimpan cadangan air, sehingga dicampur dengan arang sekam (3 : 1).
Penggunaan kedua bahan ini dalam jangka waktu lebih lama tidak mampu
mempertahankan kondisi tanaman secara optimal, tanaman menjadi busuk hingga
akhirnya mati dan media tanam berjamur. Tanaman yang mati umumnya memiliki
gejala kekeringan karena cekaman air dan busuk pada bagian batang atau akar.
Media yang paling sesuai untuk aklimatisasi planlet adalah campuran media yang
memiliki unsur kemampuan menahan air, aerasi yang baik, dan suplai hara yang
22
memadai bagi pertumbuhan dan perkembangan planlet. Salah satu alternatif untuk
mengganti kedua bahan tersebut adalah penggunaan pasir dan eceng gondok (3 : 4).
Eceng gondok (Eichonia crassipes) yang selama ini dikenal sebagai tanaman
gulma banyak mengandung asam humat yang menghasilkan fitohormon yang mampu
mempercepat pertumbuhan akar tanaman. Selain itu eceng gondok juga mengandung
asam sianida, triterpenoid, alkaloid dan kaya kalsium. Sehingga tanaman ini dapat
dijadikan sebagai pupuk organik, salah satunya sebagai media aklimatisasi. Eceng
gondok dapat mencegah busuk batang dan akar. Dalam pemanfaatannya, eceng
gondok sering diiris-iris menjadi banyak bagian. Untuk menghilangkan bahan yang
tidak diinginkan, seperti bakteri dan jamur, sebaiknya bahan diberi trichoderma pada
proses dekomposisi. Trichoderma merupakan agen hayati yang berfungsi sebagai
biofungisida dan dekomposer alami. Sebelum digunakan, bahan ini dijemur sampai
warna hijau berubah jadi coklat gelap dan menghitam (sampai kering). Setelah itu,
bahan baru bisa digunakan.
Hal yang perlu diperhatikan dalam pembuatan pupuk eceng gondok adalah
memastikan tidak adanya kandungan logam berat seperti timah hitam dan merkuri
pada tanaman eceng gondok. Hindari pemanfaatan eceng gondok yang berasal dari
kolam-kolam pengolahan air limbah pabrik yang menghasilkan limbah logam berat.
Secara sederhana, pembuatan pupuk organik berbahan eceng gondok menggunakan
Trichoderma adalah sebagai berikut :
1000 Kg Eceng gondok (Dapat dicincang atau digiling halus jika ingin mendapatkan
kompos ‘halus’).
5 Kg Trichoderma
2 Buah Pagar bambu berukuran Panjang 1 Meter, Tinggi 1½ Meter
2 Buah Pagar bambu berukuran Panjang 2 Meter, Tinggi 1½ Meter
Cara Pembuatan :
1. Rangkai pagar bambu berbentuk ‘kandang’ berukuran 1 x 2 x 1½ Meter sebagai
tempat pembuatan kompos
2. Masukkan eceng gondok
3. Lakukan pemadatan dengan cara menginjak-injak tumpukan hingga setinggi ± 20
cm
4. Taburkan Trichoderma secara merata di atas tumpukan
5. Masukkan kembali eceng gondok
6. Lakukan pemadatan dengan cara menginjak-injak tumpukan hingga timbunan
bertambah tinggi ± 20 cm
23
7. Taburkan Trichoderma secara merata di atas tumpukan
8. Ulangi cara di atas sampai timbunan eceng gondok setinggi 60 cm – 1 Meter
9. Tutup timbunan dengan plastik
10.Pada hari ke dua, suhu timbunan akan mulai meningkat sampai
proses pembuatan kompos pupuk selesai setelah 14 hari dan suhu telah turun
menjadi ± 30° celcius.
Catatan :
Pagar bambu yang menjadi ‘cetakan’ dapat dilepaskan pada saat proses
penutupan timbunan dengan plastik untuk digunakan pada pembuatan timbunan
berikutnya (jika material eceng gondok lebih dari 1 ton).
Penutupan plastik pada material bertujuan untuk menciptakan temperatur ‘tinggi’
yang diperlukan untuk mempercepat proses pelapukan.
Trichoderma ini adalah cendawan agenhayati yang berfungsi sebagai biofungisida
dan dekomposer alami.
Penggunaan media eceng gondok dan pasir (4:3) dapat mengoptimalkan
persentase hidup dan tumbuh planlet serta dapat mencegah tumbuhnya jamur pada
media. Campuran media ini dapat digunakan secara berulang kali dengan disterilkan
terlebih dahulu, sehingga akan memperkecil biaya produksi aklimatisasi. Saat ini di
RSSNC belum dilakukan pembuatan pupuk eceng gondok secara langsung, namun
penggunaannya telah diterapkan untuk aklimatisasi dan micro cutting.
Gambar 12. Tahap pembuatan pupuk eceng gondok
24
Tabel 11. Jenis tanaman yang berhasil diaklimatisasi
No Nama Tanaman ∑ Awal ∑ Di Box ∑ Disapih
1 Alpukat 1 - -
2 Bentawas 20 - 20
3 Duabanga 270 - 90
4 Gaharu AB 101 27 32
5 Gaharu AC 43 4 6
6 Gaharu AM 4.985 604 607
7 Gaharu GD 631 79 39
8 Jabon Putih 62 - 24
9 Jabon Merah 326 - 165
10 Jati 3 4.029 69 126
11 Jati Berlian 60 - 18
12 Jati Mas 324 2 43
13 Jati Platinum 6 - -
14 Jati Prima 555 134 25
15 Jati Solomon 1.018 77 621
16 Tembesu 31 - 6
Total 12.462 996 1.822
Gambar 13. Beberapa jenis tanaman hasil aklimatisasi
I. Pembuatan bibit kultur jaringan melalui micro cutting
Kegiatan mikro cutting merupakan kelanjutan dari teknik kultur jaringan, yaitu
setelah tahapan aklimatisasi tanaman dilakukan penyetekan pada media padat. Stek
mikro merupakan teknik stek pucuk muda tanaman menggunakan 1 ruas potongan
kecil pucuk yang diambil dari tanaman induknya.Melalui teknik ini, sejumlah besar bibit
dapat tersedia dalam jumlah yang besar dan dengan biaya yang murah. Bahan stek
yang digunakan berasal dari planlet jati yang berumur ± 1-2 bulan (masih dalam
propagation box). Stek mikro hanya mengandalkan fenomena pembuluh kapiler yang
hanya dapat mengantarkan sedikit nutrisi ke daun, untuk inilah media tanam stek
mikro perlu mengandung unsur hara makro dan mikro yang cukup yang diperlukan
tanaman untuk bertahan hidup.
Bentawas Jati Gaharu
25
Langkah awal dalam melaksanakan stek mikro adalah menyiapkan potongan-
potongan pucukyang memiliki ruas yang memiliki 2 lembar daun dengan ukuran
panjang sekitar 5 cm. Luas permukaan daun perlu diperkecil hingga tinggal 1/3
dengan menggunakan gunting untuk memperkecil jumlah penguapan air. Daun
diperlukan dalam proses stek mikro karena daun akan menghasilkan karbohidrat dari
proses fotosintesis yang akan diperlukan tanaman sebagai energi untuk
menumbuhkan akarnya.
Langkah berikutnya adalah menyiapkan propagation boxyang diisi dengan
media stek. Media yang digunakan dalam micro cutting antara lain :
Tabel 12. Media micro cutting
No Jenis Media % Hidup
(Per 100 individu) Perkembangan (4-mst)
1 Cocopeat + sekam bakar (3 : 1)
10
Tanaman mengalami kekeringan hingga akhirnya mati
2 Eceng gondok + pasir (4 : 3) 50 Tanaman busuk
3 Tanah top soil + kompos + pupuk kandang + sekam bakar ( 1 : 2 : 2 : 1)
90
Tanaman lebih cepat berakar (± 3 minggu), lebih subur, warna daun lebih hijau
4 Eceng gondok + pasir + pupuk kandang sapi (4 : 3 : 1)
70 Tanaman berakar ± 4 minggu
Sebelum digunakan, media disteril terlebih dahulu kemudian disemprot dengan larutan
fungisida dan didiamkan selama satu hari.
Bahan stek direndam terlebih dahulu dalam larutan fungisida, bakterisida dan
hormon akar sebelum ditanam dalam media stek. Setelah satu bulan di media stek
(tanaman sudah berakar), tanaman siap disapih ke dalam polibag dan disimpan dalam
propagation box. Untuk tanaman gaharu, siap disapih pada umur dua bulan. Tanaman
siap dipindahkan ke open area setelah berumur satu bulan.
Tabel 13. Beberapa jenis tanaman yang diperbanyak melalui stek mikro
No Jenis Tanaman Jenis Media
1 Jati (Tectona grandis) Tanah top soil + kompos + pupuk kandang + sekam bakar ( 1 : 2 : 2 : 1)
2 Pulai (Alsonia scholaris) Cocopeat + sekam bakar ( 3 : 1 )
3 Mahoni (Swietenia macrophylla) Cocopeat + sekam bakar + pupuk kandang ( 1 : 2 : 1)
4 Gaharu (Aquilaria spp.) Cocopeat + sekam bakar + pupuk kandang ( 1 : 2 : 1)
26
5 Jabon putih (Anthocephallus cadamba)
Tanah top soil + kompos + pupuk kandang + sekam bakar ( 1 : 2 : 2 : 1)
6 Jabon merah (Anthocephallus macrophylla)
Tanah top soil + kompos + pupuk kandang + sekam bakar ( 1 : 2 : 2 : 1)
7 Duabanga (Duabanga mollucana)
Tanah top soil + kompos + pupuk kandang + sekam bakar ( 1 : 2 : 2 : 1)
8 Benuang bini (Octomeles sumatrana)
Tanah top soil + kompos + pupuk kandang + sekam bakar ( 1 : 2 : 2 : 1)
9 Tembesu (Fragraea fragrans) Tanah top soil + kompos + pupuk kandang + sekam bakar ( 1 : 2 : 2 : 1)
Jumlah tanaman setiap bulan yang berhasil diperbanyak melalui stek mikro dapat
dilihat pada tabel sebagai berikut :
Tabel 14. Tanaman hasil stek mikro
No Nama Tanaman ∑ Awal ∑ Di Box ∑ Disapih
1 Benuang bini 40 0 40
2 Duabanga 315 38 101
3 Gaharu AM 9 0 0
4 Gaharu GD 27 0 4
5 Jabon Putih 199 59 90
6 Jabon Merah 827 135 93
7 Jati 3 5471 958 1245
8 Jati Berlian 28 28 0
9 Jati Mas 20 17 0
10 Jati Prima 61 23 0
11 Jati Solomon 6190 1449 1606
12 Mahoni 84 69 15
13 Pulai 124 104 0
14 Tembesu 231 216 15
Total 13626 3096 3209
Naungan dan media tanam mempengaruhi keberhasilan micro cutting. Intensitas
naungan berpengaruh positif terhadap keberhasilan tanaman bertahan hidup. Semakin
teduh tempat sungkup diletakkan, maka kemungkinan planlet bertahan hidup semakin
besar. Pada kondisi tersebut pemberian naungan paranet tidak berpengaruh signifikan
pada intensitas cahaya yang masuk ke sungkup.
27
Tabel 15. Beberapa tempat penyimpanan stek mikro
No Tempat penyimpanan Keterangan
1 Propagation box (dalam sungkup di tempat aklimatisasi)
70 % eksplan mengalami kematian
2 Pot ray (dalam sungkup di tempat aklimatisasi, dengan lantai berkerikil)
50 % eksplan mengalami kematian
3 Pot ray (dalam sungkup di tempat aklimatisasi, dengan lantai tanah tanpa kerikil)
30 % eksplan mengalami kematian
Gambar 14. Tahapan pembuatan stek mikro (Micro cutting)
28
Gambar 15. Beberapa jenis tanaman hasil micro cutting
a b c d Gambar 16. Perbedaan pertumbuhan tanaman jati pada tiga macam media stek mikro
pada umur 3 minggu: a. Media eceng gondok + pasir b.Media tanah top soil + kompos + pupuk kandang sapi + sekam bakar
(langsung di polibag) c. Media eceng gondok + pasir + pupuk kandang sapi d. Media cocopeat + sekam bakar
J. Pemeliharaan Uji Lapang Tahun 2013 - 2014
Pemeliharaan uji lapang tahun 2015 dilaksanakan terhadap uji lapang yang
ditanam tahun 2013 dan 2014. Pemeliharaan dilakukan sebanyak 2 kali, yaitu bulan
Mei dan November 2015. Kegiatan yang dilakukan yaitu :
Pembabatan dan pembersihan lahan dari gulma
Pendangiran
Pemupukan dengan NPK
Penyulaman
Jabon Putih Jati Octomeles Pulai Mahoni
Jabon Merah
29
a b c d e Gambar 17. Kegiatan pemeliharaan uji lapang
a. Pembabatan b. Pendangiran c. Pemupukan pertama d. Pemupukan kedua e. Penyulaman
K. Pengukuran Uji Lapang Tahun 2014
Pengukuran uji lapang tanaman hasil kultur jaringan dilakukan pada tanaman uji
lapang tahun 2014. Tanaman saat ini berumur ± 1 tahun. Berikut data hasil pengukuran
uji lapang :
Tabel 16. Data hasil pengukuran uji lapang
Nama Tanaman
Ulangan Diameter Rata-
Rata (cm) ∆ T Rata-Rata
(cm)
Jati
1 1,96 238,65
2 2,32 291,19
3 1,67 219,92
4 2,43 325,19
5 2,54 352,54
6 2,22 278,50
7 2,31 320,04
8 2,11 272,65
Duabanga
1 0 -13,2*
2 0 -35,2*
3 0 -32,2*
Gaharu
1 -6,4*
2 1 100
3 1 98
Pulai
1 -28,6*
2 -28*
3 -9*
Ket : * Jumlah tanaman berkurang
30
Tabel 17. Rekapitulasi data hasil kegiatan di laboratorium RSSNC :
No Nama Jenis Asal Tanaman
Kegiatan
Inisiasi
Subkultur kontaminasi ∑ Steril Aklimatisasi Micro Cutting
∑ Awal
∑ Akhir
∑ Kering
∑ Jamur
∑ Bakteri
∑ Eksplan
∑ Planlet
∑ Awal
∑ Hidup
∑ Awal
∑ Hidup
1 Alpukat Persea gratisima RSSNC 12 64 36 0 0 6 1 0 0 0
2 Anggrek Cattleya sp. Bogor 12 36 36 0 0 0 0
3 Anthurium Bogor 24 47 24 0 0 0 0
4 Bentawas Wrightia religiosa Bali 63 27 27 0 12 8 148 20 20 0 0
5 Benuang Bini
Octomees sumatrana Ambon 140 43 0 0 97 0 0 40 40
6 Cendana Santalum album NTT 20 96 63 0 2 31 0 0 0 0
7 Duabanga Duabanga mollucana RSSNC 1.291 1.254 696 67 0 88 270 90 315 139
8 Eboni Diospyros celebica Palu 5 1 4 0 0 0 0 0 0
9 Gaharu AB Aquilaria becarriana RSSNC 188 620 76 18 0 162 684 101 59 0 0
10 Gaharu AC Aquilaria crassna RSSNC 133 1.052 39 12 7 1000 0 43 10 0 0
11 Gaharu AF Aquilaria fillaria RSSNC 48 120 4 0 0 0 76 0 0 0 0
12 Gaharu AM Aquilaria mallacensis RSSNC 1.218 6.642 531 128 9 3079 2442 4985 1211 9 0
13 Gaharu GD Gyrinops decipiens RSSNC 1.924 7.762 729 225 1351 7148 713 631 118 27 4
14 Jabon Anthochepalus cadamba
RSSNC 200 210 0 27 42 0 0 62 24 199 149
15 Jabon Merah
Anthochepalus macrophylla
Manado 1.659 2.088 75 33 828 1 326 165 827 228
16 Jati 3 Tectona grandis Biotrop 167 7.271 16.967 5237 520 645 4794 24 4029 195 5471 2203
17 Jati Solomon
Tectona grandis RSSNC 128 1.965 4.201 2336 271 134 664 340 1018 698 6190 3055
18 Jati Mas Tectona grandis Biotrop 1.008 1.819 1077 33 233 307 0 324 45 20 17
19 Jati Berlian Tectona grandis LIPI 1.421 2.464 1227 14 185 283 176 60 18 28 28
20 Jati Prima Tectona grandis PT Pupuk Kaltim
17 2.798 5.012 1285 156 16 1561 243 555 160 61 23
21 Jati Platinum
Tectona grandis LIPI 760 1.247 373 0 40 33 100 6 0 0 0
22 Lontar Borassus flabelifer Litbang 11 0 0 0 0 0
31
23 Mahoni Swietenia macrophylla Carita 4 1 1 0 0 0 84 84
24 Mindi besar Melia azedarach Garut 59 80 14 21 20 1 45 0 0 0 0 0
25 Panggal buaya
Zanthoxyllum rhetsa Bali 33 33 0 0 0 0 0
26 Pulai Alstonia scholaris Sumatera Selatan
10 0 0 0 0 124 104
27 Sengon Paraserianthes falcataria
Papua 60 3 18 0 39 0 0 0 0 0
28 Tembesu Fragraea fragrans Palembang 147 148 134 103 6 0 31 6 231 231
Total 829
22.211
51.877
13.955
1.564
3.501
19.591
4.798
12.462
2.819
13.626
6.305
32
V. KESIMPULAN DAN SARAN
A. Kesimpulan
Pembuatan bibit tanaman hutan menghasilkan 19.591 eksplan yang siap
untuk diperbanyak dari 15.000 eksplan yang ditargetkan (130% target
terpenuhi).
Target aklimatisasi dan micro cuttingyang dicapai sebanyak 5.031 bibit yang
telah disapih (59.19 % dari target 8.500 bibit), dan 4.093 bibit yang masih
dalam polybag (siap sapih). Jenis tanaman aklimatisasi dan micro cutting
antara lain Benuang Bini, Duabanga, Jabon Putih, Jabon Merah, Jati, Mahoni,
Pulai, dan Tembesu.
Naungan dan media tanam mempengaruhi keberhasilan perbanyakan setiap
jenis tanaman melalui micro cutting.
Intensitas naungan berpengaruh positif terhadap keberhasilan tanaman
bertahan hidup. Semakin teduh tempat sungkup diletakkan, maka
kemungkinan planlet bertahan hidup semakin besar.
Media tumbuh untuk aklimatisasi berupa campuran pupuk eceng gondok dan
pasir dengan komposisi yang sesuai akan memberikan nutrisi bagi
pertumbuhan planlet.
Kelebihan Fe pada media kultur dapat menghambat penyerapan hara serta
menurunkan daya oksidasi yang berada di akar.
Penanganan dalam aklimatisasi dan micro cutting sebelum ditanam di lapang
berpengaruh terhadap pertumbuhan planlet.
B. Saran
Konsentrasi yang tepat dari setiap unsur kimia yang diperlukan dalam media
sangat berperan penting dalam kebutuhan hidup tanaman, sehingga
penggunaannya harus diperhatikan.
Perlu dilakukan percobaan yang lebih intensif dalam penggunaan media
tanam untuk micro cutting.
Perlu adanya studi lliteratur yang lebih banyak dalam menentukankomposisi
dan kadar media kultur, aklimatisasi, dan micro cutting.
Regenerasi eksplan yang baru harus selalu dilakukan.
Perlu adanya penanganan yang lebih intensif dalam aklimatisasi sebelum
planlet ditanam di lapang.
Perlu adanya studi banding terhadap laboratorium kultur jaringan lain untuk
melihat perbedaan dalam setiap tahap kegiatan kultur jaringan dan hasilnya.
33
VI. PENUTUP
Laporan akhir dari kegiatan di laboratorium kultur jaringan ini merupakan
acuan bagi pelaksana kegiatan pembuatan bibit tanaman hutan hasil kultur jaringan
yang diharapkan dapat berjalan dengan baik, tepat waktu, efektif, efisien dan dapat
dipertanggung jawabkan secara fisik dan akuntabel.
34
Lampiran 1. Tata Waktu Kegiatan Kultur Jaringan
Kegiatan
Bulan
Februari Maret April Mei Juni Juli Agustus September Oktober November Desember
Persiapan
Rencana
Kerja
Persiapan
Alat dan
Bahan
Persiapan
Bahan
Eksplan
Karantina
Bahan
Eksplan
Pembuatan
Media
Inisiasi
Multiplikasi
Pembesaran
Pembuatan
Laporan
Culture
Ready
Stock
Subkultur
Dari Ready
Stock
Pembesaran
Pembuatan
Laporan
Note : Karantina dilakukan setiap minggu dengan bergantian antara penyemprotan fungisida, bakterisida, dan hormon tunas
35
Lampiran 2. Distribusi HOK setiap Bulan
No Kegiatan Bulan Bulan Total
HOK Total (Rp)
Januari Februari Maret April Mei Juni Juli Agustus Sept Okt Nov Des
I Aklimatisasi dan Produksi 56 56 56 167 78 71 64 67 67 67 59 62 870 39.150.000
1 Aklimatisasi 2 2 2 12 22 24 20 20 19 18 16 19 176 7.920.000
- Pembuatan Media Aklim 0 0 0 0 2 3 2 2 2 2 2 2
- Aklimatisasi 0 0 0 0 6 7 5 5 4 4 3 3
- Pembuatan Media Sapih 0 0 0 2 3 3 2 2 2 2 2 2
- Penyapihan 0 0 0 3 3 3 3 3 3 3 3 4
- Pemeliharaan 2 2 2 7 8 8 8 8 8 7 6 8
2 Produksi 54 54 54 155 56 47 44 47 48 49 43 43 694 31.230.000
- Inisiasi 10 10 10 15 16 12 12 15 15 16 10 10
- Subkultur 20 20 20 60 20 21 19 19 19 19 20 20
- Inventarisasi 8 8 8 25 4 2 2 2 2 2 2 2
- Pembuatan Media 8 8 8 30 8 4 3 3 4 4 3 3
- Sterilisasi (Alat, Ruangan) 8 8 8 25 8 8 8 8 8 8 8 8
36
Lampiran 3. Pembelian Alat Dan Bahan Kimia Tahap Pertama
No Nama Barang Jumlah Satuan Harga Satuan (Rp) Total (Rp)
1 PPM 30 ml 1 Btl 1,350,000 1,350,000
2 PVP (250 gram) 1 Botol 2,050,000 2,050,000
3 NH4NO3 1 Kg 1,950,000 1,950,000
4 KNO3 1 Kg 1,100,000 1,100,000
5 CaP 250 gram 1 Botol 1,150,000 1,150,000
6 FeNaEDTA (500 Gram) 1 Botol 2,300,000 2,300,000
7 Fungisida 3 Pcs 60,000 180,000
8 Alkohol 96% 30 Liter 30,000 900,000
9 Spritus 20 Liter 25,000 500,000
10 Teepol 20 Liter 15,000 300,000
11 Clorox 20 Liter 33,000 660,000
12 Botol Kultur 3000 Buah 3,000 9,000,000
13 Botol Schoot 1000 ml 3 buah 120,000 360,000
14 Pinset bengkok 3 Buah 45,000 135,000
15 Gunting bengkok 3 Buah 35,000 105,000
16 Petridish besar 5 Buah 75,000 375,000
17 Gunting Stek 1 Buah 50,000 50,000
18 Plastik Gulung N0.7 3 Kg 65,000 195,000
19 Karet 3 Kg 80,000 240,000
20 Masker 2 Box 50,000 100,000
Total 23,000,000
37
Lampiran 4. Pembelian Alat Dan Bahan Kimia Tahap Kedua
No Kebutuhan Jumlah Satuan Harga Satuan
(Rp) Total (Rp)
I Produksi 29.500.000
1 Agar-Agar 3 Kg 1.000.000
3.000.000
2 Bakterisida 6 Pcs 70.000
420.000
3 Insektisida 500 ml 5 Btl 139.000
695.000
4 Fungisida 5 Pcs 95.000
475.000
5 Hormon Tunas 20 Liter 146.000
2.920.000
6 Hormon Akar 15 Liter 146.000
2.190.000
7 PPM (30 ml) 2 Botol 1.300.000
2.600.000
8 PVP (250 gram) 1 Botol 1.700.000
1.700.000
9 KNO3 1 kg 1 Botol 1.200.000
1.200.000
10 CaP 100 gram 1 Botol 1.300.000
1.300.000
11 Clorox 20 Liter 33.000
660.000
12 Teepol 25 Liter 15.000
375.000
13 Alkohol 96% 30 Liter 30.000
900.000
14 Gula Pasir 20 Kg 15.000
300.000
15 Spiritus 20 Liter 20.000
400.000
16 Asam Arkorbik 100 gram 1 Btl 800.000
800.000
17 BAP 5 gram 1 Btl 1.500.000
1.500.000
18 Myo inositol 100 gram 2 Btl 1.600.000
3.200.000
19 Cawan Petri Ø 15 cm 10 Buah 80.000
800.000
20 Botol Schoot 1 L 5 Buah 130.000
650.000
21 Pinset 20 cm ujung bengkok 4 Buah 280.000
1.120.000
22 Gunting Bedah Bengkok 5 Buah 45.000
225.000
23 Gelas Ukur 100 ml (Jerman) 2 Buah 200.000
400.000
24 Gunting Stek 2 Buah 75.000
150.000
25 Isi Scalpel No.23 4 Pak 100.000
400.000
26 Personal use (Jas lab, dll) 1 Paket 1.500.000
1.500.000
27 Bulb germany 1 Buah 250.000
250.000
28 Brown bottle 2 Buah 75.000
150.000
38
