Kultur Jaringan
Kultur JaringanPengertian Kultur Jaringan Tanaman merupakan
Penanaman jaringan tanaman secara aseptis pada media buatan yang
aseptis dan lingkungan yang terkontrol
Teori Dasar Kultur JaringanSel dari suatu organisme multiseluler
di mana pun letaknya, sebenarnya sama dengan sel zigot karena
berasal dari satu sel tersebut (Setiap sel berasal dari satu
sel).
Teori Totipotensi Sel (Total Genetic Potential), artinya setiap
sel memiliki potensi genetik seperti zigot yaitu mampu memperbanyak
diri dan berediferensiasi menjadi tanaman lengkap. Sifat
totipotensi merupakan potensi pada setiap sel penyusun jaringan
dewasa untuk mengadakan pmbelahan & membentuk individu baru.
Jadi pada intinya, setiap sel pada jaringan dewasa dapat dbentuk
menjadi suatu individu baru. Sedangkan teknik kultur jaringan
sendiri merupakan salah satu cara dalam hal rekayasa genetika yang
diilhami dari sifat totipotensi tersebut.
B. KEGUNAAN UTAMA KULTUR JARINGAN Kegunaan utama dari kultur
jaringan adalah untuk mendapatkan tanaman baru dalam jumlah banyak
dalam waktu yang relatif singkat, yang mempunyai sifat fisiologi
dan morfologi sama persis dengan induknya. Dari teknik kultur
jaringan tanaman ini diharapkan juga memperoleh tanaman baru yang
bersifat unggul. Secara lebih rinci dan jelas berikut ini akan
dibahas secara khusus kegunaan dari kultur jaringan terhadap
berbagai ilmu pengetahuan.Tahapan yang dilakukan dalam perbanyakan
tanaman1. Pembuatan media2. Sterilisasi3. Inisiasi4. Inokulasi5.
Multiplikasi6. AklimatisasiPembuatan Media Tanam Kultur
JaringanUnsur-unsur yang Dibutuhkan TanamanGaram-garam
AnorganikZat-zat Organik
b) Kegunaan Setiap Unsur Bagi TanamanUnsur Nitrogen (N)Unsur
Fospor (P)Unsur Kalium (K)Beberapa media dasar yang banyak
digunakan antara lain:Media dasar Murhasige dan skoog (1962) yang
dapat digunakan untuk hampir semua jenis kultur, terutama pada
tanaman herbaceous.Media dasar B5 untuk kultur sel kedelai, alfafa,
dan legume lain.Media dasar White (1934) yang sangat cocok untuk
kultur akar tanaman tomat.Media dasar Vacin dan Went yang biasa
digunakan untuk kultur jaringan anggrek.Media dasar Nitsch dan
Nitsch yang biasa digunakan dalam kultur tepung sari (pollen) dan
kultur sel.Media dasar schenk dan Hildebrandt (1972) atau media SH
yang cocok untuk kultur jaringan tanaman-tanaman monokotil.Medium
khusus tanaman berkayu atau Woody Plant Medium (WPM)Media N6 untuk
serealia terutama padi.
Dari sekian banyak media dasar yang paling sering dan banyak
digunakan adalah komposisi media dari Murashige dan Skoog.
Kadang-kadang untuk kultur tertentu, kombinasi zat kimia dari
murashige dan Skoog masih tetap digunakan tetapi konsentrasinya
yang diubah. Sebagai contoh media MS, berarti konsentrasi
persenyawaan yang digunakan adalah setengah konsentrasi media MS.
Tabel 2. memperlihatkan sususnan persenyawaan dalam beberapa
komposisi media dasar.Teknik Sterilisasi1. STERILISASI RUANGAN 2.
STERILISASI ALAT 3. STERILISASI BAHAN TANAM4. STERILISASI MEDIA1.
STERILISASI RUANGAN Ruangan disterilisasi dengan menggunakan
larutan Formalin Sterilisasi dilakukan dengan cara penyemprotan ke
seluruh bagian/sudut ruangan dan diamkan selama beberapa hariUji
kesterilan ruangan dengan melakukan uji aseptisitas2. STERILISASI
ALAT dan MEDIAPeralatan dan Media Tanam disteril dengan menggunakan
Autoclave, dengan tekanan 15 Psi dan Suhu 121C.
3. STERILISASI BAHAN TANAMSebatas sterilisasi permukaan atau
desinfestasi (menghilangkan infestasi kontaminan). Bukan disinfeksi
(menghilangkan infeksi kontaminan dalam eksplan). Membersihkan
debu, cendawan dan bakteri atau kontaminan dari bagian permukaan
eksplan.
Bahan Tanam AnggrekPROSEDUR STERILISASI BAHAN TANAMEksplan
dicuci dibawah air kran yang mengalir dengan diberi sedikit
deterjen. Eksplan dipotong-potong menjadi bagian yang kecil,
sekitar 0,5-2cm.Cuci potongan eksplan dengan air kran, untuk
mencegah pencoklatan dipermukaan, eksplan dapat direndam dalam
larutan asam sitrat 50ml/l dan asam askorbat sebagai inti oksidan
150mgKhusus untuk tanaman berkayu, eksplan biasanya dicelupkan
kedalam alkohol 70% selama beberapa detik. Tujuannya untuk
menghilangkan gelembung udara disamping untuk mematikan sebagian
kontaminan dipermukaan.Tahap InisiasiInisiasi adalah tahap
pengambilan eksplan dari tanaman induk yang akan diperbanyak secara
kultur jaringanBahan yang akan digunakan sebagai eksplan sebaiknya
berasal dari bagian tanaman yang masih muda dan sehat.
Kultur jaringan dari jaringan floemIndividu (wortel)Jaringan
floemMedia Embrio (eksplan)Jaringan yg ditumbuhkan (PLB)Kultur
jaringan dari daun
Kultur jaringan dari akarInokulasi adalah kegiatan penanaman
eksplan ke dalam botol kultur atau penanaman ulang eksplan pada
media dengan jenis yang sama atau tahap pertumbuhan
selanjutnya.InokulasiMultiplikasimerupakan tahap penumbuhan tunas
hasil inisiasi yang dirangsang dengan memotong plantlet dengan
media kultur baru. Tahap ini dilakukan dengan metode subkultur
yaitu usaha untuk menggantikan media tanaman kultur jaringan dengan
media yang baru, sehingga kebutuhan nutrisi untuk pertumbuhan kalus
dapat terpenuhi.
Designed by :Moch. RamadhoniTeknik Inokulasi Tanaman Pisang
Secara Kultur Jaringan
MELAKUKAN AKLIMATISASIMerupakan masa adaptasi tanaman hasil
pembiakan secara kultur jaringan yang semula kondisinya terkendali
(in vitro), kemudian berubah pada lingkungan lapangan yang
kondisinya tidak terkendali lagi (ex vitro). Disamping itu tanaman
juga harus mengubah pola hidupnya dari tanaman heterotrof ke
autotrof.
Planlet Pisang Siap di AklimatisasiZAT PENGATUR TUMBUH
TANAMANDalam kultur jaringan, dua golongan zat pengatur tumbuh yang
sangat penting adalah sitokinin dan auksin. Zat pengatur tumbuh
mempengaruhi pertumbuhan dan morfogenesis dalam kultur sel,
jaringan dan organ. Penambahan auksin atau sitokinin eksogen,
mengubah level zat pengatur tumbuh endogen sel.
Kekurangan Kultur JaringanBibit hasil kultur jaringan sangat
rentan terhadap hama penyakit dan udara luarBagi orang tertentu,
cara kultur jaringan dinilai mahal dan sulit.Membutuhkan modal
ivestasi awal yang tinggi untuk bangunan (laboratorium khusus),
peralatan dan perlengkapan.Diperlukan persiapan SDM yang handal
untuk mengerjakan perbanyakan kultur jaringan agar dapat memperoleh
hasil yg memuaskanProduk kultur jaringan pd akarnya kurang
kokoh
Sterilisasi eksplan
Inisiasi
Enam kalisubkultur
Sterilisasi planlet
Siap tanam
Aklimatisasi dalamseedbed
Tanamansehat
Designed by:Agus Sutanto
