Pertanyaan1. Ada berapa pita yang terbentuk ? Jelaskan !
Pita yang terbentuk pada sampel ada 1 yaitu 3,3 cm. Sedangkan
pita marker yang terbentuk mulai dari 1-7 adalah 1,5 cm, 2,1 cm,
2,7 cm, 2,9 cm, 3,2 cm, 3,4 cm, dan 4 cm. Panjang pita yang
terbentuk tergantung dari kecepatan migrasi protein pada sampe,
dimana protein-protein pemisah berdasarkan berat molekulnya.
Protein dengan berat molekul yang lebih kecil akan bergerak lebih
cepat dibandingkan protein dengan berat molekul yang lebih
besar.
2. Apakah kepekatan warna pita berkaitan dengan konsentrasi
protein ?
Iya, larutan pewarna dapat berikatan dengan asam amino, sehingga
konsentrasi protein dapat dilihat dari kepekatan warna pada pita
oleh karena itu semakin pekat warna pada pita maka konsentrasi
protein semakin tinggi, dan sebaliknya apabila warna pita tidak
pekat, maka konsentrasi protein rendah (Ripani, 2010).
3. Bagaimana cara mengidentifikasi jenis protein yang membentuk
pita pada gel elektroforesis?
Menggunakan marker protein, yaitu dengan melihat bentuk molekul
pada marker dan mencocokannya dengan sampel serta literatur. Marker
merupakan senyawa yang terdapat dalam bahan alam dan dideteksi
untuk keperluan khusus , yang merupakan campuran molekul dengan
ukuran berbeda-beda dapat digunakan untuk menentukan ukuran molekul
dalam pita sampel dengan meng-elektroforesis marker tersebut pada
lajur di gel yang paralel dengan sampel. Pita-pita pada lajur marka
tersebut dapat dibandingkan dengan pita sampel untuk menentukan
ukurannya. Jarak pita dari sumur gel berbanding terbalik terhadap
logaritma ukuran molekul (Ripani,2010).
4. Apakah fungsi penambahan merkaptoetanol pada persiapan sampel
?
Pengikatan protein dengan SDS akan menyebabkan dua hal. Yang
pertama yaitu terputusnya ikatan disulfida yang menentukan protein
folding dengan kata lain struktur sekunder protein rusak. Yang
kedua yaitu akan menyebabkan bagian luar molekul protein
terselubungi oleh muatan negatif dari SDS sehingga molekul protein
akan terseparasi semata-mata berdasarkan berat molekulnya saja
bukan berdasarkan besar dan jenis muatannya karena semua molekul
protein sekarang bermuatan negatif. Disosiasi ini terjadi dengan
bantuan pemanasan dan penambahan disulfide reducing agent seperti
-merkaptoetanol atau 1,4-dithiothretol (Fatchiyah, 2012).
5. Apakah fungsi pemanasan sampel protein ?
Fungsi pemanasan sampel protein adalah untuk mempercepat proses
denaturasi protein pada sampel atau bertujuan untuk mengoptimalkan
pendenaturasian protein pada sampel (Anam,2009).
6. Mengapa pH sangat berpengaruh pada metode elektroforesis
protein ?
pH sangat berpengaruh pada metode elektroforesis protein karena
pH mempengaruhi titik isoelektrik pada protein sehingga
mempengaruhi tingkat dan arah pergerakan protein. apabila pH
larutan berada di atas pI akan mempengaruhi waktu perpindahan
protein dan pH larutan berada di atas pI protein akan bermuatan
negatif. Sementara itu, apabila pH larutan berada di bawah pI maka
protein akan bermuatan positif (Anam,2009).
7. Reagen apa yang berfungsi untuk mempolimerisasi gel ?
Untuk polimerisasi gel, digunakan beberapa reagen yang fungsinya
saling berhubungan satu sama lain yaitu akrilamida, APS, dan TEMED.
Akrilamid dapat membentuk rantai polimer panjang yang dikenal
sebagai poliakrilamida, yang juga karsinogenik. Polimer ini dipakai
dalam pengental karena ia akan membentuk gel bila tercampur air.
Dalam laboratorium biokimia poliakrilamida dipakai sebagai fase
diam dalam elektroforesis gel (PAGE atau SDS-PAGE) (Fatchiyah,
2012). Elektroforesis untuk makromolekul memerlukan matriks
penyangga untuk mencegah terjadinya difusi karena timbulnya panas
dari arus listrik yang digunakan. Gel poliakrilamid dan agarosa
merupakan matriks penyangga yang banyak dipakai untuk separasi
protein dan asam nukleat. Akrilamid ini dikatalisator oleh TEMED
sehingga dapat digunakan dalam pemisahan protein. Sedangkan peran
APS adalah sebagai inisiator yang mengaktifkan akrelamid supaya
bereaksi dengan akrelamid lainnya
8. Faktor-faktor apa yang mempengaruhi pergerakan protein dalam
gel elektroforesis ?
Faktor faktor yang mempengaruhi pergereakan protein dalam gel
elektroforesis adalah: Suhu : memepengaruhi denaturasi protein ,
dimana protein dengan struktur primer akan lebih cepat
pergerakannya Ukuran dan berat molekul: semakin besar ukuran
molekul semakin lambat pergerakan molekul. Dibandingkan dengan
ukuran molekul yang lebih kecil. Bentuk molekul tersier atau
sekunder akan lebih lambat daripasa bentuk primer. pH :
mempengaruhi titik isoelektrik protein sehingga mempengaruhi
tingkat dan arah pergerakan protein. Voltase: semakin tinggi
voltase maka semakin cepat pergerakan protein, dan sebaliknya,
semakin rendah voltasenya maka pergerakan protein semakin lambat.
Konsentrasi enzim: konsentrasi enzim bertambah dengan bertambahnya
kecepatan reaksi pada konsentrasi substrat tertentu. Konsentrasi
substrat : umumnya konsentrasi substrat akan menaikkan kecepatan
reaksi, akan tetapi pada batas tertentu tidak mengalami peningkatan
reaksi meskipun konsentrasi substrat diperbesar. Inhibitor : adanya
zat inhibitor ini akan menghalangi sisi aktif enzim untuk bergabung
dengan substrat enzim, sehingga reaksi terganggu (Anam,2009).
4. Hasil dan Pembahasan
Pembuatan Gel
Dalam praktikum kali ini Hal yang pertama dilakukan adalah
pembuatan gel. Pada pembuatan gel ini dilakukan 2kali, yaitu
pembuatan gel Separating (gel yang berada dibawah) dan gel Stacking
(gel yang berada diatas). Pada pembuatan gel separating ,
pertama-tama yang dilakukan adalah menyiapkan alat dan bahan dahulu
setelah itu dilakukan persiapan bahan APS dengan pertama-tama
menimbang ammonium perisulfat yang diletakkan dalam alumunium foil
(APS 10%) sebanyak 0.1 gram menggunakan timbangan analitik, sebelum
digunakan timbangan dikalibrasi terlebih dahulu agar didapatkan
hasil yang sesuai. Setelah ditimbang, APS dimasukan kedalam
mikrotube kemudian ditambahkan akuades sebanyak 1mL dengan
menggunakan pipet ukur dan bulb. Setelah itu digojok hingga APS
tercampur jadi satu dengan akuades, tujuan digojok agar homogen.
Setelah menyiapkan APS kemudian ambil 1700l larutan APS yang ada di
dalam mikrotube kedalam gelas beaker yang berukuran 100mL, lalu
ambil akrilamid sebanyak 2000l dimasukkan kedalam gelas beaker yang
berukuran 100mL, lalu ditambahkan 1300l LGB dengan menggunakan
mikropipet (untuk mengambil bahan cair atau larutan secara tepat
dan pas ukuran mL yang dibutuhkan). Setelah itu dikocok dengan
memutar-mutarkan beaker glass, tujuannya adalah agar larutan
homogen. Setelah itu ditambahkan dengan APS 10% sebanyak 400l dan
ditambahkan TEMED sebayak 350l secara bersamaan dengan menggunakan
mikropipet kedalam gelas beaker ukuran 100 ml. Penambahan APS 10%
dan TEMED ke dalam gelas beaker ini dilakukan secara bersama-sama,
karena apabila dilakukan satu persatu / tidak dilakukan secara
bersamaan maka akan terbentuk gel lebih cepat atau terlebih dahulu.
Setelah ditambahkan APS 10% dan TEMED gelas beaker dikocok selama
20 detik agar larutan homogen, dan gel separating pun sudah jadi
dan siap untuk dimasukkan kedalam laca loading. Untuk memasukkan
gel separating dalam kaca loading dilakukan dengan mengambil secara
cepat larutan gel separating menggunakan mikropipet kemudian
dimasukkan kedalam kaca loading yang telah disiapkan, memasukkannya
dilakukan dari bagian ujung kaca loading dan dibiarkan selama 15
menit dalam suhu ruang agar gel terpolimerisasi. setelah itu gel
separating diberi akuades diatas permukaan yang bertujuan untuk
meratakan gel separating. Setelah itu akudes dihilangkan dengan
menyerapnya dengan tissue. . Fungsi dari bahan-bahan yang digunakan
antara lain Amonium Perisulfat (APS) sebagai inisiator yang
mengaktifkan akrilamid agar bereaksi dengan muatan akrilamid
lainnya sehingga membentuk rantai polimer yang panjang. TEMED,
berfungsi sebagai katalisator reaksi polimerisasi akrilamid menjadi
gel poliakrilamid sehingga dapat digunakan dalam pemisahan protein.
Akrilamid, berfungsi sebagai mencegah terjadinya difusi karena
timbulnya panas dari arus listrik yang digunakan. LGB dan UGB
berfungsi sebagai memberikan muatan negatif pada protein karena
mengandung SDS. Yang selanjutnya adalah membuat stacking gel
prosedurnya sama dengan pembuatan separating gel, hanya beda pada
separating gel menggunakan LGB tapi dalam stacking gel menggunakan
UGB sebanyak 625 l.Hasil dari pembuatan gel separating ini adalah
setelah mengalami proses pencampuran seperti tahapan diatas menjadi
larutan kental hampir membentuk gel, dengan memasukkan larutan
kental tersebut kedalam kaca loading dan didiamkan selama 15 menit
akhirnya terbentuk gel berwarna putih bening yang padat dalam kaca
loading. Akan tetapi pada percobaan kami, pembuatan gel separating
ini dilakukan pengulangan karena pada pembuatan gel yang pertama
terjadi kesalahan kurang rapatnya kaca loading sehingga menyebabkan
kebocoran yang mengharuskan untuk mengulang untuk kedua
kalinya.Literatur:
Menurut literatur wujud dari separating gel juga padat setelah
dimasukkan dalam kaca Larutan gel yang telah dibuat dimasukkan
dalam plate untuk mencetak gel, lalu pemberian aquades diatas
separating gel yang setengah padat bertujuan untuk membuat
permukaan separating gel datar. Setelah padat aquades diserap agar
dapat dilakukan proses selanjutnya yaitu penambahan stacking gel
diatas separating gel Separating gel ini berfungsi untuk memisahkan
atau menseparasi protein berdasarkan berat molekulnya, bahan yang
digunakan dalam praktikum yaitu akrilamid 30% sebagai bahan untuk
membentuk pori-pori dalam gel agar protein dapat terpisah
berdasarkan ukurannya (Sudarmanto,2008).
(Pembentukan Gel Poliakrilamid melalui Inisiasi TEMED dan
Ammonium Persulfat)
(Skema Mekanisme Separasi Protein Berdasarkan Berat Molekul
dengan SDS PAGE) (Fatchiyah, 2012).
Persiapan Sampel Setelah mempersiapkan separating dan stacking
gel, dilanjutkan dengan pembuatan sampel. Langkah pembuatan sampel
ini diawali dengan mempersiapkan pepsin yang telah terbungkus oleh
aluminium foil dengan konsentasi yang berbeda-beda
(0,005;0.0075;0.01;0.0125;0.015), larutan buffer, mikropipet, dan
mikrotube. Pepsin yang terbungkus oleh aluminium foil dibuka, lalu
ambil larutan buffer sebanyak 500 l menggunakan mikropipet. Lalu
alirkan larutan buffer pada masing-masing pepsin dengan konsentrasi
yang berbeda-beda menuju mikrotube. Pembilasan langsung dengan
sampel buffer pada aliminium foil bertujuan untuk mencegah adanya
kehilangan berat sampel meskipun hanya sedikit karena dapat
mempengaruhi hasil. Sedangkan penambahan sampel buffer itu sendiri
bertujuan untuk mereduksi protein dalam sampel pepsin.
Masing-masing mikrotube yang telah berisi sampel dengan sampel
buffer ditempatkan pada gabus agar mikrotube dapat mengambang
ketika ditempatkan dalam permukaan air. Setelah mikrotube terpasang
dengan baik dalam gabus, dimasukkan kedalam air dan dipanaskan
diatas kompor listrik dengan suhu 90 C selama 5 menit. Pemanasan
sampel ini bertujuan untuk denaturasi protein yang memilki struktur
sekunder atau tersier menjadi struktur primer agar lebih mudah unuk
dianalisis dengan metode SDS-PAGE ini. Setelah pemanasan selesai
dikakukan, dilakukan pendinginan pada sampel sebelum siap untuk
digunakan. Sampel yang telah siap untuk digunakan dimasukkan pada
sumuran yang ada pada gel. Analisis hasil Dari persiapan sampel
yang dilakukan didapatkan hasil sampel yang baik dan sesuai dengan
yang dinginkan karena telah melakukan preparasinya sesuai dengan
prosedur yang telah didapatkan. Sampel yang dibuatpun telah
memiliki konsentrasi yang sesuai dengan yang diinginkan.
Pewarnaan ProteinSetelah dilakukan pemisahan protein dengan
elektroforesis, dilanjutkan dengan pewrnaan gel. Pewarnaan gel ini
bertujuan untuk membantu dalam pengamatan band protein.
Pertama-tama menyiapkan alat dan bahan terlebih dahulu, kemudian
dihentikan listrik pada elektroforesis, diambil kaca loading dari
tank, lalu gel diambil secara perlahan agar tidak sobek sehingga
hasil yang didapatkan nanti maksimal dan diletakkan kedalam sebuah
wadah. Setelah itu dituangkan larutan pewarna bromophenol blue
hingga gel terendam, larutan pewarna ini dibuat dengan mencampurkan
0.125 gram croomasic brilliant blue, 22.7 ml methanol, 4.6 ml asam
asetat glasial, dan aquabides hingga volume total 50 ml. Setelah
dituangkan larutan pewarna diletakkan diatas shaker selama 15menit,
dilakukan shaker pada gel ini bertujuan agar warnanya meresap
kedalam gel . Kemudian, larutan pewarna dibuang hingga hanya
tersisa gel dalam wadah. Selanjutnya, dimasukkan larutan penghilang
warna, yang berfungsi untuk menghilangkan warna dari larutan
pewarna Bromophenol Blue. Larutan penghilang warna dibentuk dari
metanol sebanyak 14 ml, asam asetat glasial 14 ml, dan ditambahkan
aquades hingga volume total 200 ml. Setelah dilakukan penambahan
larutan penghilang warna, wadah berisi gel diletakkan pada shaker
kembali selama 10 menit yang bertujuan untuk memaksimalkan dalam
penghilangan warna. Selanjutnya, larutan penghilang warna dibuang
dan gel dibilas menggunakan aquades. Kemudian, larutan pembilas
dituang pada gel dan diberi beberapa potong kertas saring kecil
untuk membantu mengikat sisa-sisa pewarnaan dari Bromophenol Blue
tadi kemudian didiamkan selama 10-15 menit. Terakhir, larutan
pembilas yang lama diganti dengan yang baru hingga terlihat
pita-pita protein pada gel, gel pun jadi dan dapat diamati
hasilnya.Pada pewarnaan protein pada gel ini menggunakan larutan
pewarna bromophenol blue, serta melakukan pembilasan dengan larutan
penghilang warna dan larutan pembilas didapatkan warna dari sampel.
Dapat dilihat hasil yang didapatkan terbentuk 7 pita yang terbentuk
sebagai hasil separasi elektroforesis oleh matriks penyangga gel
poliakrilamid dibawah pengaruh tegangan listrik, dimana protein
protein pemisah berdasarkan berat molekulnya. Protein dengan berat
molekul yang lebih kecil akan bergerak lebih cepat dibandingkan
protein dengan berat molekul yang lebih besarLiteratur:Dalam satu
sampel protein bisa lebih dari satu bahkan puluhan band dalam gel
poliakrilamida. Dalam kondisi tidak diwarnai, protein tersebut
tidak terlihat karena memang protein dalam sampel tidak berwarna.
Setelah diwarna dengan staining solution yang mengandung Coomassie
brilliant blue R-250, protein yang tidak berwarna tersebut menjadi
berwarna biru karena mengikat Coomassie blue. Dalam kondisi ini
kita bisa mengetahui keberadaan dan mengukur mobilitas protein
untuk kemudian ditentukan berat molekulnya (Fatchiyah, 2012).
Data Hasil Praktikum (DHP)
Protein MarkerBM (Kda)Panjang PitaLog BMRf
12251,52,3520,288
21502,12,1760,403
31002,720,461
4752,91,8750,557
5503,21,6980,615
6353,41,5440,653
72541,3970,769
Gambar Gel SDS PAGE
Perhitungan Data Hasil Praktikum (DHP)
Panjang Separating Gel = 5.2 cmRumus (RF) = Perhitungan RF1. RF
= 2. RF = 3. RF = 4. RF = 5. RF = 6. RF = 7. RF =
Panjang pita sampel = 3.3 cmRF =
Y= -2.081 x + 2.976= -2.081 (0.634) + 2.976= 1.656
Y= log BM= antilog 1.656= 45.2 kDA
Kurva standar
RfLog BM
0.2882.352
0.4032.176
0.4612
0.5571.875
0.6151.698
0.6531.544
0.7691.397
PembahasanDari data hasil praktikum, dapat dilihat bahwa ada 7
protein marker yang digunakan. Protein marker digunakan sebagai
standart untuk menentukan berat molekul dari sampel. Pada protein
marker 1 didapat berat molekulnya sebesar 225 kDA, pada protein
marker ke 2 didapatkan berat molekulnya sebesar 150 kDA, lalu pada
protein marker yang ke-3 dihasilkan berat molekul sebanyak 100 kDA
pada protein marker yang ke-4 berat molekulnya sebesar 75 kDA,
sedangkan pada protein marker yang ke-5 didapat berat molekulnya
sebesar 50 kDA, pada protein marker yang ke-6 berat molekulnya
sebesar 35 kDA dan yang terakhir pada protein marker yang ke-7
dihasilkan berat molekul sebesar 25 kDA. Pergerakan dari protein di
dalam gel mengikuti persamaan Rf = 1 / BM (berat molekul) dimana Rf
adalah mobility. Intrepetasi dari SDS-PAGE dapat dibaca dengan
membuat persamaan regresi linier dari pita marker sebagai standart
acuan setelah mendapatkan persamaan regresi linier dari marker.
Kita dapat menghitung berat molekul dari sampel dengan cara
memasukkan pada persamaan tersebut. Persamaan regresi linier dari
marker : y = -2.081 x + 2.976. Y menunjukkan panjang jarak dari
bagian atas gel sampai pita protein yang akan diukur. Sedangkan x
menunjukkan Rf. Dengan panjang pita sampel 3,3 cm maka dapat kita
hitung Rfnya dengan cara :
Dan didapatkan hasil Rfnya sebesar 0,634. Lalu nilai Rf yang
didapat ini dimasukkan ke persamaan y = -2.081 x + 2.976 sehingga
diperoleh nilainya sebesar 1.656. Karena y = log BM, maka untuk
mencari berat molekulnya kita harus menganti log y dan didapatkan
antilog y sebesar 45.2 kDA. Lalu dari kurva hubungan antara berat
molekul dan nilai rf dapat kita simpulkan bahwa semakin besar nilai
rfnya maka akan semakin kecil log berat molekulnya.Literatur:Pada
saat elektroforesis berlangsung, protein akan bergerak dari
elektroda negatif menuju elektroda positif sampai pada jarak
tertentu pada gel poliakrilamid tergantung pada berat molekulnya.
Semakin rendah berat molekulnya maka semakin jauh pula protein
bergerak dengan kata lain mobilitisnya tinggi. Sebaliknya, protein
dengan berat molekul lebih besar akan bergerak pada jarak yang
lebih pendek dengan kata lain mobilitisnya rendah. Berbagai jenis
protein pada suatu sampel akan terseparasi (terpisah-pisah) pada
gel poliakrilamida tergantung pada mobilitasnya. Protein dengan
mobilitas tinggi akan berhenti bergerak pada bagian yang lebih
bawah gel, sedangkan protein dengan mobilitas rendah cenderung
berhenti bergerak pada bagian atas gel. Dengan demikian, pada jalur
pergerakan protein akan didapatkan jajaran protein (disebut sebagai
band atau pita protein) yang sudah terseparasi berdasarkan berat
molekulnya (Fatchiyah, 2012).
. (Estimasi Berat Molekul menggunakan SDS-PAGE)(Fatchiyah,
2012).
KesimpulanKesimpulan dari praktikum kali ini adalah didapatkan 7
pita yang terbentuk. Panjang pita masing- masing yang diukur dengan
menggunakan penggaris yaitu 1,5 cm, 2,1 cm, 2,7 cm, 2,9 cm, 3,2 cm,
3,4 cm, dan 4 cm. Tiap pita terbentuk karena adanya perbedaan berat
molekul sehingga protein berhenti di posisi masing- masing sesuai
berat molekulnya dan apabila kita lihat grafik yang terbentuk dapat
kita simpulkan bahwa semakin besar nilai rfnya maka akan semakin
kecil log berat molekulnya.Prinsip elektroforesis SDS-Page adalah
memisahkan protein berdasarkan berat molekul dengan menggunakan
matrik penyangga akrilamid, protein terseparasi dalam medan listrik
dan melanjutkan dengan pewarnaan, penghilangan warna, dan
pembilasan gel. Pembacaan berat molekul dilakukan dengan melihat
pita yang terbentuk oleh marker.
Faktor-faktor yang mempengaruhi pergerakan protein dalam gel
elektroforesis yaitu Ukuran dan bentuk molekul, Konsetrasi gel, pH,
voltase, Suhu.
Daftar Pustaka Tambahan
Fatchiyah. 2012. Analisis Biologi Molekuler. Laboratorium
Biomol: Malang
Ripani, M. 2010. Diagnostik Molekuler. Teknologi Laboratorium
Kesehatan (TLK) di FakultasFarmasi Universitas Hasanuddin:
Makassar
Sudarmanto, Arie. 2008. Protein. www.ariebs.staff.ugm.ac.id.
Diakses tanggal 25 Mei 2014pukul 7.08Penilaian
KomponenNilai
Pre-test
Aktivitas
Hasil dan Pembahasan
B. Diagram Alir Elektroforesis1. Pembuatan separating gel
12%
Aquadest 1700 L
30% akrilamid 2000 LLGB 1300L
APS 10% 35 LDimasukkan ke beaker glass dan diaduk
TEMED 3,5 L
Diaduk hingga tercampur merata
dituang pada cetakan gel dengan mikropipet hingga tinggi
tertentu (beri sisa tempat untuk stacking gel)
dibiarkan hingga 15-30 menit pada suhu ruang
dituang aquades dengan mikropipet pada permukaan gel
aquadest dibuang dengan menyerapkan tissue
Hasil
2. Persiapan sampel
Sampel 0,1 %
dilarutkan dalam sampel buffer
dipanaskan suhu 900 C selama 5 menit
Hasil3.
Aquadest 1475 LPembuatan stacking gel 3%
UGB 625L30% akrilamid 400 L
APS 10% 20 LDimasukkan ke beaker glass dan diaduk
TEMED 2 L
aduk hingga tercampur merata
dituang diatas gel pemisah
sisipkan gigi sisir pada stacking gel dalam perlahan jangan
sampai terbentuk gelembung
biarkan hingga 15-30 menit pada suhu ruang
ambil sisir secara perlahan dari gel
pindahkan gel secara perlahan dalam tank elektroforesis
masukkan buffer tank ke dalam tank elektroforesis
Hasil
4. Pemisahan protein dengan elektroforesis
10 L sampel
dimasukkan dalam sumuran
pasang elektroda sesuai dengan warnanya
gel dijalankan pada tegangan 200 v selama 45 menit atau hingga
sampel mencapai bagian dasar
Hasil
5. Pewarnaan gel
Hentikan listrik
pindahkan gel dari tank
pindahkan glass plate dari gel kedua sisi
tuangkan larutan pewarna pada gel dalam wadah
tutup dengan plastik dan letakkan diatas shaker selama 15-30
menit
pindahkan larutan pewarna dari sel
bilas gel dengan aquadest
tuangkan larutan pembilas
biarkan selama 10-15 menit diatas shaker
ganti larutan pembilas dengan yang baru hingga terlihat pada gel
adalah pita protein
Hasil
