Le rôle du foie dans le stockage du glucose.

Vincent MarieCéliaCharlesMorganClément

Introduction

La glycémie diminue après l’ablation du foie → mort du sujet : Le foie est donc un organe

vital. Comment intervient-il dans la

régulation de la glycémie ? L’organisme a besoin de

sucres pour fonctionner, l’alimentation ne suffit pas dans cet apport.

On suppose que le glucose peut être stocké dans un organe.

Quel est le rôle du foie dans le stockage du glucose ?

Observation de l’emplacement du foie chez une souris a jeun.

Foie

Observation de l’emplacement du foie chez une souris normale.

Observation de la rate

FoieFoie

Rate

Observation du foie

expérience 1 : on cherche à savoir si le foie contient du glucose

Expérience du Foie lavé

Protocole :

Prélèvement d’organes :- rate chez la souris : contrôle négatif- foie de souris à jeun / non à jeun- foie de veau

Comparaison de la présence de glucose dans les bains de ces organes à différents intervalles de temps.

Résultats obtenus.Temps 1.

Bain d’eau distillée

Utilisation de bandelettes de détection de glucose

Les tests sont négatifs : la coloration ne change

pas on suppose qu’il n’y a

pas de glucose

Temps 2.

Pas de changement de couleur :

Tests négatifs.

Temps 3.

Conclusion: pas de détection de glucose dans les bains aux trois temps.

Conclusion

Aux trois temps on détecte aucune trace de glucose :

Problème technique ?Sensibilité de la

bandelette

Remarque : une légère coloration apparaît environ 30 minutes après avoir trempé la bandelette.

Expérience 2 : observation des cellules du foie

Protocole de coloration des coupes de foie :

Réhydratation (acétone)

Coloration : Hématoxyline : noyau Éosine : cytoplasme/noyau

Déshydratation (bains successifs d’alcools à différentes concentrations)

Montage des lames/lamelles Observation au microscope

Résultat : Observation au microscope d’une coupe de foie (x40).

Cellules à plusieurs noyaux : particularité du foie.

Coloration hématoxyline/éosine

Hypothèse : le glycogène est stocké dans le foie ?

Expérience 1 : La digestion enzymatique.

Protocole : Incubation des coupes de foie et de coupes de pancréas avec de l’amylase (1h, 37°C).

Coloration des coupes au réactif de Schiff et à l’hématoxyline. Détection de glycogène. Déshydratation (bains successifs d’alcools à différentes concentrations) Montage des lames/lamelles Observation au microscope

Expérience 1 : hydrolyse de glycogène sur des coupes de foie

Coupes de pancréas = contrôle négatif

Coloration intense = présence abondante de glycogène

Coloration faible = glycogène digéré

Coupes de foie non digérées

Coloration intense → grande quantité de glycogène

x20 x40

Résultats 1 :

Coupes de foie digérées dans l’amylase

Coloration moins intense → Le glycogène a été clivé par l’amylase.

x20 x40

Résultats 2 :

Protocole 1 : Prélèvement du foie et de la rate :

broyage Centrifugation et récupération du

surnageant Extraction du glycogène à partir d’alcool

à 95 % Centrifugation et conservation du culot Coloration au Lugol (glycogène)

Expérience 2 : extraction du glycogène à partir du foie de la souris

Résultats :

Coloration brune = détection de glycogène

Le foie stocke du glycogène.

Protocole 2 :

Hydrolyse totale du glycogène extrait à partir du foie et de la rate de la souris.

Utilisation de l’acide chlorhydrique.

Incubation 2 heures à 100°C.

Neutralisation de la réaction avec de la soude.

Coloration à la liqueur de Fehling.

Résultats

Coloration orangée = présence de glucose

Conclusion : la présence de glucose implique que la digestion du glycogène donne bien du glucose

Conclusion Générale

Le foie contient du glucose.

Le glycogène est stocké dans le foie.

Le glucose est stocké sous forme de glycogène.