β-Catenin

LRP5/6

LRP5/6

SOST

Pβ-Catenin

APC

GSK3

Axin

Proteasomaldegradation

p300/CBP

TCF/LEF

Kremen

DKK

LR

P5/6

WIF-1Wnt

sFRPWntWnt

Axin Frat-1

Dsh

GSK3

β-Catenin

β-Catenin

β-Catenin

Wnt Regulated Gene Expression

Frizzled

Frizzled

NuclearLocalization

図 1, 古典的 Wnt シグナル経路とその構成因子細胞培養培地へ外因性 Wnt タンパク質 /Wnt アゴニストもしくは Wnt アンタゴニスト (Dkk) を加えると、本キットに含まれている細胞株のレポーター遺伝子由来のルシフェラーゼ活性が量依存的にアップ / ダウンレギュレートします。

Wnt 非活性化状態 Wnt 活性化状態

図 2、Leading LightTM Wnt レポーター細胞における Wnt3a および Dkk-1 タンパク質の量応答( 左 ) 細胞を 200ng/ml Wnt-3a 存在下で上図に記載された量の Dkk-1 で処理した。Dkk-1 は Wnt-3a により増加したルシフェラーゼレベルを量依存的に阻害した。( 中央 ) Leading LightTM Wnt レポーター細胞を、上図に記載された量の Wnt-3a タンパク質を加えて 6時間インキュベートした。Wnt-3a 処理細胞の化学発光は量依存的に増加した。( 右 ) 細胞を上図に記載された量の LiCl で処理した。LiCl 処理してから 6 時間後にルシフェラーゼ活性を測定したところ、LiCl 処理細胞の化学発光は量依存的に増加した。

構成内容特長

品名 品番 包装 希望販売価格

Leading LightTM Wnt Reporter Assay Starter Kit ENZ-61001-0001 1kit \157,000

Enzo Life Sciences, Inc.　　メーカー略号：ENZ

● Leading LightTM Wnt レポーター細胞株 ( 品番 ENZ-61002-0001)

● Leading LightTM Wnt レポーター細胞株培地パック ( 品番 ENZ-60003-0001)　濃縮成長培地 / 濃縮アッセイ培地 / 凍結培地

● Leading LightTM Wnt レポーター細胞株分析試薬 ( 品番 ENZ-60004-0001)　ルシフェラーゼ基質 / ルシフェラーゼアッセイバッファー /2M 塩化リチウム

　マウス Wnt-3a/ マウス Dkk-1

TCF/LEF の縦列反復 TATA box

ホタルルシフェラーゼ

アッセイの原理

品名 品番 包装 希望販売価格

ENZ-61002-0001

ENZ-60003-0001

ENZ-60004-0001

ENZ-60001-C001

ENZ-60002-C005

1ml （2x106 cells）

1kit

1kit

1μg

5μg

￥87,000

￥56,000

￥61,000

￥24,000

￥34,000

Leading LightTM Wnt Reporter Cell Line

Leading LightTM Wnt Cell Line Medium Pack

Leading LightTM Wnt Cell Line Assay Reagents

Wnt-3a, Mouse

Dkk-1, Mouse

【関連商品】

Life Sciences

®

scientists enabling scientists.化学発光プレートリーダーによる判定

Leading LightTM Wnt レポーターアッセイ

Wnt シグナリングはガンなどの疾患を引き起こすことや胚発生 ( 神経発達・可塑性、骨発生・形成 ) に多様な役割を果たしている為、非常によく研究されています。Wnt シグナリング経路には、ガン、パターン形成、骨形成に関わる古典的経路 (β- カテニン経路 )、脂質形成、カルシウム恒常性、アポトーシスに関わる非古典的経路 ( 平面内細胞極性経路：PCP)、原腸成中の細胞接着や移動に関わる Wnt/Ca+2

経路の 3 つに枝分かれした経路があります。

Wnt シグナリング：Wnt signaling

本システムでは、古典的 Wnt シグナリングの様々な Wnt 関連リガンド（Wnt、Dkk など）の機能や活性の解明に有用

です。また、Wnt のアゴニスト又はアンタゴニストとして機能する小分子や抗体の活性スクリーニングにもお使いいた

だけます。

●トランスフェクションは不要：　細胞株、培地、試薬、コントロールが入っています！　

●真のエンドポイント検出システム：　完全なパスウェイ研究を可能にするインタクトなパスウェイ

●高感度（Wnt3a EC50 = 45.9nm/mL）

●高い再現性（Z 値 0.74）

●高いシグナルノイズ比：　シグナル強調のためのリチウムクロライドは不要！

●ハイスループットスクリーニング対応

Res

pons

e R

atio

[Wnt3a]

Wnt3a EC50=46ng/ml

Z’=0.74

Maximum Response Ratio=12.4

Am

ount

of

Wnt

Indu

ced

activ

ity r

emai

ning

[Dkk1 (ng/ml)]

Dkk1 EC50=51.5ng/ml

Z’=0.81

LiCl EC50=21.9mM

Z’=0.66

Fold

Incr

ease

in S

igna

l

[LiCl]

本アッセイにはルシフェラーゼレポーター遺伝子を持つ改変型 3T3 マウス線維芽細胞株が入っています。この Wnt経路に焦点を当てた転写因子応答レポーターシステムでは、ルシフェラーゼレポーター遺伝子は基本的なプロモーター要素 (TATA box) の制御下にあり、また特許取得済みのWnt 応答要素 （TCF/LEF） の縦列反復と接合しています。ルシフェラーゼ活性は細胞培養培地に外因性の Wnt タンパク質、アゴニスト、アンタゴニストを加えることで量依存的に制御されます。

　● 希望販売価格 ･･･ 「希望販売価格」は参考であり、販売店様からの販売価格ではございません。 記載の希望販売価格は２０１3年8月１日現在の希望販売価格です。 予告なしに改定される場合がありますので、ご注文の際にご確認下さい。消費税は含まれておりません。　● 使 用 範 囲 ･･･ 記載の商品は全て、「研究用試薬」です。 人や動物の医療用・臨床診断用等としては使用しないよう、十分ご注意下さい。

Wnt 経路化合物ライブラリ

Wnt 関連 ELISA

仕様Wnt 経路ライブラリーは定義されている様々な Wnt 経路活性に

関わるアクチベータやインヒビターが 70 種類以上集められた化

合物コレクションです。

化合物例 ) Wnts、Dishevelled (Dsh)、GSK-3β、

TCF/β-catenin、DKK、LRP、Axin、Porcupine

品名 品番 包装 希望販売価格

Wnt Pathway Compound Library BML-2838J-0100

BML-2838J-0500

100μℓ/well

500μℓ/well

ご照会

ご照会

●容量：100μL/well もしくは 500μL/well

●濃度：10mM もしくは 1mM

●溶媒：DMSO

●構成内容：70 以上の化合物のセット

Enzo Life Sciences, Inc.　　メーカー略号：ENZ

ヒト、マウスおよびラットサンプル中のβ- カテニン、トータル / リン酸化

GSK-3β、DKK-1 の免疫学的検出によって定量データを得ることができます。

特長

Enzo Life Sciences, Inc.　　メーカー略号：ENZ

Dkk-1

ADI-900-151

ADI-900-172

ADI-900-171

GSK-3β

ADI-900-144

[pSer9] GSK-3β

ADI-900-123A

β-catenin

ADI-900-135

0.98

116.7

26.1

74.4

9.0

26.8

7.81 - 500

125 - 4,000

39.1 - 1,250

78.1 - 5,000

62.5 - 2,000

125 - 8,000

血漿

●

●

●

血漿

血漿

血漿

血清

●

●

●

血清

血清

血清

培養上清

●

●

●

培養上清

培養上清

培養上清

細胞溶解液

細胞溶解液

●

細胞溶解液

●

細胞溶解液

●

ラット

●

ラット

●

ラット

●

ラット

●

マウス

●

マウス

マウス

●

マウス

●

ヒト

●

ヒト

●

ヒト

●

ヒト

●

\112,000

\90,000

\90,000

\112,000

\110,000

\104,000

96 wells

96 wells

96 wells

96 wells

96 wells

96wells

商品 / 品番 包装 希望販売価格 感度(pg/ml)

測定範囲(pg/ml) 交差性 サンプルタイプ

●高感度アッセイのため、ウェスタンブロットのマイクログラムレベルとは異　なりピコグラムレベルで測定

●細胞溶解液、培養上清、血漿、血清サンプルタイプに最適

●ハイスループットフォーマットなので 3 時間以内で 39 ～ 40 サンプル (2 重測定 ) の解析が可能

●簡便なプロトコールおよび液体に色づけされた試薬が用いられているので、　時間の節約、エラーを減少させます。

β-Catenin

p300/CBP

TCF/LEF

LR

P5/6

Wnt

Axin Frat-1

Dsh

GSK3

β-Catenin

β-Catenin

β-Catenin

Wnt Regulated Gene Expression

Frizzled

NuclearLocalization

（11896）