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Les -carraghénases :
Un modèle de dégradation en phase
hétérogène
Etienne Rebuffet Février 2008
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OSO3-
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OHO
OSO3-
Les galactanes d’algues rouges
Agarose
κ-carraghénane
ι-carraghénane
λ-carraghénane
de lacharge négative
Applications des carraghénanes
Médecine
Anti-coagulant Anti-viral
Cosmétique Agriculture
Agroalimentaire
Gélifiant Emulsifiant
Stimulent les défenses des plantes
Dentifrice
La dégradation en phase hétérogène
Collaboration entre différentes enzymes pour la dégradation d’un substrat récalcitrant
ENDO
EXO
PROCESSIVE
La ι-carraghénase d’A. fortis
Michel, G. et coll. The structural bases of the processive degradation of iota-carrageenan, a main cell wall polysaccharide of red algae. Journal of molecular biology 334, 421-33 (2003).
Domaine B Domaine A
Hélice β
Topologie du site actif de type tunnel
=> Dégradation processive
Résultats et perspectives
Boucle formée par les résidus 343 à 349.
Mutants catalytiques obtenus
(E245, D247, E310)
■ Biochimie
■ Cocristallisation
Zobellia galactanivorans
Delesseria sanguinea
Isolé à Roscoff depuis une algue rouge : Delesseria sanguinea
Décrite par T. Barbeyron
CgiA_Af
CgiA_Zg
CgiB_Zg
CgiC_Zg
Les ι-carraghénases de Z. galactanivorans
Domaine B
Domaine AHélice β
Les ι-carraghénases de Z. galactanivorans
CgiA_Zg
CgiB_Zg
CgiC_Zg
Synergie entre les trois enzymes ?
Stratégie
■ Surexpression et purification des ι-carraghénases de Z. galactanivorans
■ Identification des produits de dégradation de ces iotases
■ Détermination des paramètres cinétiques (kcat, Vm)
■ Structures cristallographiques
Remerciements
Equipe de glycobiologie marine
CZJZEK Mirjam
MICHEL Gurvan
BARBEYRON Tristan
JAM Murielle
Région Bretagne
CNRSFinancement ARED du projet Iotase3D