LOREM IPSUM DOLOR SIT AMET CONSECTETUER ADIPISCING LOREM … · 2016-03-28 · ©2016 Waters Corporation 7 I. 柱效与柱长和粒径的关系：N 正比于 L/dp。 ——柱压

©2016 Waters Corporation 1

如何合理的使用与维护<3µm小颗粒色谱柱

沃特世消耗品部门

王悦 [email protected]

Webinar, 2016-3-23


为什么要用<3µm颗粒色谱柱？ ——在现有LC上提速增效，未来升级UPLC

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12.0 14.0 16.0 18.0 20.0 22.0 24.0 26.0 28.0 30.0

3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 6.0 6.5 7.0 7.5 8.0

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3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 6.0 6.0 7.0 7.5 8.0

Minutes

1.8 2.0 2.2 2.4 2.6 2.8 3.0 3.2 3.4 3.6

CORTECS C18, 1.6 µm

2.1 x 50 mm 0.65 mL/min H-Class

原始方法 HPLC+5µm柱

2.7µm柱+UPLC/UHPLC

UPLC+1.6µm柱提速x9

溶剂节约x15

HPLC+2.7µm柱提速x4

溶剂节约x2

Fully Porous C18, 5 µm

4.6 x 150 mm 1.00 mL/min Alliance HPLC

CORTECS C18, 2.7 µm

4.6 x 75 mm 1.85 mL/min Alliance HPLC

CORTECS C18 2.7 µm

4.6 x 75 mm 1.85 mL/min H-Class


Agenda

小颗粒色谱柱的使用与维护要点

具有应用特色的Waters小颗粒色谱柱系列介绍【略】

小颗粒色谱柱的项目选择与实施策略【略】

Waters相关工具集锦


Agenda


—— Analytical Chemist：“用得好，才敢用！”

具有应用特色的Waters小颗粒色谱柱系列介绍

小颗粒色谱柱的项目选择与实施策略



关注问题：

如何更好的使用与维护小颗粒色谱柱

——柱效与粒径和柱长的关系

——系统死体积对柱效的影响

——色谱柱的连接问题

——检测频率对柱效的影响

——污染与堵塞问题

——保护柱





I. 柱效与柱长和粒径的关系：N 正比于 L/dp。 ——只有柱效水平相当，才能相当的分离度！


I. 柱效与柱长和粒径的关系：N 正比于 L/dp。 ——柱压正比于 L/dp^2。

粒径柱规格 L/dp（柱效水平）柱压

5µm 4.6x250mm 50,000 正比于柱长反比于粒径^2！

3.5µm 4.6x150mm 42,857

2.7µm 4.6/3.0/2.1 x150mm 55,556

2.5µm 4.6/3.0/2.1 x150mm 60,000

1.7µm 2.1x100mm 58,823



3.5µm 4.6x100mm 28,600

2.7µm 4.6/3.0/2.1 x75mm 27,778

2.5µm 4.6/3.0/2.1 x75mm 30,000

1.7µm 2.1x50mm 29,400


II. 系统死体积对柱效的影响（柱外扩散！） ——在哪里发生谱带展宽/系统扩散?

谱带展宽: 1) 从进样器开始 2) 进入、流经以及流出色谱柱 3) 进入检测器

柱外扩散柱内扩散


比较同一色谱柱在HPLC和UPLC上的柱效


各品牌LC系统的谱带展宽 ——系统扩散体积大的，选配较大内径色谱柱

Chromatographic System Band Spread* Recommended Column ID

Primary Secondary

Shimadzu Prominence UFLC 41 µL

4.6 mm （5/3.5/2.xµm)

3.0 mm Alliance 2695 HPLC 29 µL

Agilent 1260 UHPLC (600 bar) 28 µL

ACQUITY Arc UHPLC（650bar） 25µL 3.0mm

（2.×µm） 4.6mm

Thermo Accela UHPLC 21 µL 3.0 mm

（2.x µm） 2.1 mm

Agilent 1290 UHPLC (1200 bar) 17 µL

ACQUITY UPLC 12 µL 2.1 mm

（1.6-1.8 µm） 3.0 mm ACQUITY UPLC H-Class w/Column Manager 12 µL

ACQUITY UPLC H-Class 9 µL

ACQUITY UPLC I-Class (FTN) 7.5 µL 2.1 mm

（1.6-1.8 µm） 1.0 mm

ACQUITY UPLC I-Class (FL) 5.5 µL


III. 色谱柱的连接问题

谱带展宽

连接适当

连接不妥

由于色谱柱连接不当引起的谱带展宽：柱效下降

连接不妥，造成漏液


IV. 注意采样频率对柱效的影响（峰窄快时） 1Hz vs. 20Hz （色谱柱：2.5µm, 4.6x75mm）


需要注意的问题 I~IV




——柱连接的问题



V. 污染与堵塞问题

预防污染与堵塞问题：

1. 流动相长菌

2. 滤膜问题

3. 样品溶解性

4. 溶剂瓶（高pH流动相时）


！！1. 微生物污染

系统中的微生物滋生，常导致色谱柱使用寿命缩短

在所有系统的水相管路中，都会发生微生物繁殖

并不只在中性pH条件下才发生

条件适合时15min就可能发生爆发式滋生

附着于溶剂瓶壁、溶剂过滤沉子、流动相管路

100%甲醇冲洗并不足以杀死和清除微生物（只能“休眠”）

SEM（电子显微镜成像）:

色谱柱入口端筛板外侧


！！微生物滋生——对吸滤头的污染

试管中的Milli-Q

纯水，取出培养，无微生物检出

在HPLC纯水流动相中已受污染的吸滤头，用Milli-Q纯水反向冲洗，冲洗出的水有大量微生物检出。污染源！！


案例：用户发现色谱柱寿命极短，经过排查，实际上色谱柱的入口端被

乙腈溶解的膜材料主要是聚砜严重堵塞

解决办法：更换滤膜

– 推荐使用：

o Waters P/N:186003524 0.2µm 47mm GHP （有机相、水相都兼容）

色谱柱入口端被乙腈溶解的聚砜

膜材料堵塞

！！2. 确保使用正确合格的过滤膜


Waters提供过滤膜产品与参考信息


过滤是必需的

– 总是使用0.2 µm 化学适宜的样品过滤膜

使用保护柱也会有帮助

离心对于去除微粒是必要的

– 通过离心可以去除所有的细颗粒,在4,000 到 12,000 rpm 下离心 5 到 30 分钟.

！！3. 样品溶解性与样品制备： ——避免样品不溶微粒与样品沉积

多奈哌齐(Donepezil)片剂溶于稀释剂中，按USP方法制备，

存在大量不溶性颗粒（非常糟糕）

使用0.2µm滤膜过滤，仍存在非常细微的颗粒，溶液呈雾状

(仍然糟糕)

再加以离心步骤 12,000 rpm. 溶液完全澄清 (状态良好)


案例：

UPLC 色谱柱在高pH (pH 10)条件下仅有100-200针的柱寿命

色谱柱出口端过滤片的内侧（靠近柱床一侧）被流动相溶解的硼硅玻璃严重堵塞

解决办法：

更换流动相瓶解决办法: 使用Pyrex硼硅3.3的玻璃瓶

！！4. 使用合格玻璃材质的溶剂瓶


工具资源——小颗粒色谱柱维护与使用指南


常见问题：


关注问题VI：保护柱




——色谱柱的连接问题


——污染与堵塞问题

——保护柱：精细分离项目时，需要注意柱效与连接体积！


VI. 保护柱： ——精细分离项目时，保护柱的柱效与连接

竞争品牌，C18 UHPLC保护柱, 3.0x2mm

Waters为什么要研发保护柱？对于市场既有UHPLC保护柱本身进行柱效测试，

发现保护柱本身质量可能存在问题（装填不足够好）


保护柱——品质不佳对分析质量的影响

Conditions: 竞争品牌 C18, 4.6 x 50 mm, 2.6 µm column with and without a 竞争品牌 UHPLC C18 guard column; mobile phase: 75% acetonitrile/25% water (v/); flow rate: 1.7 mL/min.; temperature: 30oC.

Waters为什么要研发保护柱？装填效果不佳的保护柱，会影响分离分析效果！


VanGuard Cartridges

2.1mmid UPLC 一体式

2015年上市

2.1/3.9mmid UHPLC/HPLC分体式


VanGuard——不影响分离度！

2.5µm, 4.6x150mm 不带保护柱

2.5µm, 4.6x150mm 带保护柱3.9x5mm


VanGuard——不影响峰容量！

2.5µm, 4.6x100mm 不带保护柱

2.5µm, 4.6x100mm 带保护柱 3.9x5mm


VanGuard分体式保护柱（UHPLC/HPLC)


Agenda



– 2.7µm CORTECS柱

– 2.5µm XP柱 [BEH][HSS][CSH]




CORTECS Solid-Core Technology

柱效与分离度更高

通量更高

2013

可无忧转换HPLC/UHPLC/UPLC的颗粒平台

BEH Technology

第一个 ACQUITY UPLC颗

粒

宽pH和温度范围

2004

HSS Technology

保留更长

颗粒与键合相更多选择

2006

CSH Technology

设计提供更多选择性

碱性峰形更佳

2010




通量更高

2013


BEH Technology


粒


2004

HSS Technology

保留更长


2006

CSH Technology


碱性峰形更佳

2010

1.7/1.8µm UPLC 2.5µm XP

3.5,5,10µm HPLC

1.6µm UPLC 2.7um




通量更高

2013


BEH Technology


粒


2004

HSS Technology

保留更长


2006

CSH Technology


在低pH条件下碱性峰形更佳

2010


2013推出： CORTECS 1.6µm UPLC ——推升UPLC柱效，同时柱压不变

2.1 x 50 mm column. A standard ACQUITY UPLC I-Class using 70% Acetonitrile in H2O at 30 °C

with 0.5 µL injections from a 1 µL FL injector






CORTECS™实心核硅胶色谱柱

2014最新产品！ CORTECS 2.7µm HPLC柱

1.6 µm UPLC 2.7 µm HPLC/UHPLC

表面多孔，

扩散快，谱带展宽窄

柱背压控制理想

Waters独家优势实心核颗粒设计

柱效比全多孔颗粒高


与其它品牌小颗粒色谱柱的柱压比较

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3500

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Co

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n P

ressu

re (

psi)

Backpressure Advantage of CORTECS 2.7µm Columns

CORTECS C18+, 2.7 µm

Fully Porous C18, 2.5 µm

Competitor A Solid-Core C18, 2.6µm

Competitor B Solid-Core C18, 2.7µm

....at 25% lower backpressure than the competitor's 2.6µm Solid-Core

5.0 10.0 15.0 20.0 25.0 30.0

2.1x50mm 0.2 0.3 0.5 0.7 0.9 1.0

3.0x50mm 0.4 0.7 1.1 1.4 1.8 2.1

4.6x50mm 0.8 1.7 2.5 3.3 4.2 5.0

LV (cm/min)

Flo

w

(mL/m

in)


高柱效，低背压：允许HPLC系统配置4.6x150mm获得最高柱效

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Minutes

1.50 2.00 2.50 3.00 3.50 4.00 4.50 5.00 5.50

1

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Rs

4.9

Rs

6.3

Rs

8.2

Fully Porous C18 5 µm

psi 1900 N peak 4 10,400

Fully Porous C18 3.5 µm

psi 2900 N peak 4 17,600

CORTECS C18 2.7 µm

psi 3200 N peak 4 23,600

1. Estradiol 2. Ethinyl estradiol 3. Estrone 4. Levonorgestrel

Configuration: 4.6 x 150 mm


porous C18 300A, 5μm，4.6x250mm;

CORTECS C18 +, 2.7μm，4.6x150mm;

Pressure 3100psi

Pressure 3500psi

客户数据：CORTECS C18+ 2.7µm 4.6*150mm: 肽谱分析，常规HPLC系统上的分离效果与压力对比（相同梯度）


应用示例：CORTECS C18+ 2.7µm 4.6*150mm: 奥美拉唑强降解物分析（Alliance HPLC系统/QDa检测器）

应用文献号：720005103ZH


CORTECS 颗粒平台：

实心核硅胶颗粒： – UPLC 1.6µm，进一步提升UPLC性能 – HPLC 2.7µm，提高HPLC分析性能

关键优点:

– 更高柱效、较低背压 – 提高分离度 – 加快分析速度 – 无缝方法转换

5种键合相: – C18+ : 适用于碱性分析物

– C18 : 适用于酸性/中性分析物

– HILIC : 适用于高极性分析物

– C8，Phenyl 【New！】




通量更高

2013


BEH Technology


粒


2004

HSS Technology

保留更长


2006

CSH Technology


碱性峰形更佳

2010

1.7/1.8µm UPLC 2.5µm XP，配置建议：

HPLC<=75mmL; UHPLC长度不限 3.5,5,10µm HPLC

1.6µm UPLC 2.7um


使用超低死体积的UPLC柱硬件 – 归属于XBridge 和XSelect HPLC柱系列

设计用于承受较高压力

– 2.1 和3.0mm 可兼容UPLC压力15,000psig（1034Bar），有eCord，可配合UPLC无纸化追踪

– 4.6mm 内径柱耐压上限9,000psig(620Bar)，没有eCord

异常丰富的柱规格品种

– 柱内径：2.1, 3.0 and 4.6 mm ID – 柱长：30, 50, 75，100 and 150mm lengths

完整的键合相品种，便于方法无忧转换！ – [BEH] C18, Shield RP18, C8, Phenyl, HILIC and Amide – [CSH] C18, Phenyl-Hexyl and Fluoro-Phenyl – [HSS] C18, T3, C18 SB, Cyano and PFP

2.5 µm eXtended Performance XP

Columns compatible with HPLC and UPLC

Technology

2.5 µm eXtended Performance Columns


Compounds

1. 10-hydroxymorphine

2. Morphine-3β-D-glucuronide

3. Morphine-6β-D-glucuronide

4. Morphine

5. Morphine N-oxide

6. 6-acetylmorphine

Minutes 0.20 0.40 0.60 0.80 1.00 1.20 1.40 1.60 1.80 2.00 2.20 2.40 2.60 2.80 3.00 3.20 3.40 3.60 3.80

%

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低pH条件 0.1% HCOOH

高pH条件 0.1% NH4OH

5

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10-hydroxymorphine

Morphine-3ß–o-glucuronide

Morphine-6ß–o-glucuronide

Morphine N-oxide

6-acetylmorphine

Morphine

【应用示例】氨水体系提高碱性分析物的保留与MS响应 ——吗啡及其代谢物LCMS分析，XBridge[BEH] C18柱


阿米替林肝细胞代谢物分析：

Amitriptyline + 16 Metabolites on

2.1 x 100mm ACQUITY UPLC™ BEH C18

Amitriptyline + 16 Metabolites on

2.1 x 100 mm ACQUITY UPLC™ HSS T3

保留时间几乎增加1倍

【应用示例】T3有效增加极性分子的反相保留 ——阿米替林肝细胞代谢物，[HSS] T3 vs BEH C18


Mobile Phase A: 0.1% FA in H2O Mobile Phase B: 0.1% FA in ACN Flow Rate: 0.6 mL/min Gradient: 0 to 40% B in 6 min, hold Injection Volume: 0.5 µL Column Temperature: 30°C Detection: UV @ 210/254 nm Instrument: Waters ACQUITY UPLC® ACQUITY UPLC® TUV detector Sample: Goldenseal extract Column: 2.1 x 50mm, 1.7 um 1. Hydrastine 2. Canadine 3. Canadaline 4. Berberine

Particle size alone does not dictate separation

performance.

Interaction between stationary phase and

analytes is critical.

【应用示例】CSH改善甲酸体系下的碱性物载量与峰形 ——白毛茛根提取物（甲酸体系） [CSH] vs BEH


XBridge [BEH] 颗粒平台: 亚乙基桥杂化颗粒：

– ACQUITY UPLC BEH 1.7µm：首个也是最常应用的UPLC颗粒！ – HPLC XBridge BEH 2.5，3.5，5, 10µm：广受赞誉的HPLC分析柱与制备柱！最大

可至50x250mm制备柱。

关键优点:

– 化学稳定性强，宽pH使用范围，有利于方法开发 – 通用性极佳、柱寿命强 – 有基于BEH颗粒的HILIC亲水作用色谱柱及生物制药分析专用柱 – 多种键合相选择性，UPLC-HPLC方法无缝转换

多种键合相: – BEH C18 : pH 1-12 – BEH RP18 ： pH 2-11 – BEH C8: pH 1-12 – BEH Phenyl: pH 1-12 – BEH HILIC： pH 1-9 – BEH Amide： pH 2-11 – 氨基酸分析专用柱：Ultra AccqTag – 肽分析专用柱：BEH130 C18, BEH300 C18 – 蛋白分析专用柱：BEH300 C4， BEH125 SEC，BEH200 SEC, BEH Glycan Amide

亲水作用色谱（HILIC）


ACQUITY UPLC® BEH HILIC XBridgeTM HILIC (pH 1-9)

ACQUITY UPLC® BEH Amide XBridgeTM Amide (pH 2-11)

糖糖醇

有机膦酸胍

合成氨基酸门鸟氨酸

精赖氨酸

核苷酸胆碱

三聚氰胺

水苏碱

茶碱

嘌呤糖肽

高极性分析物，或是考虑样品制备/LCMS工作流程最简化 ——HILIC保留分离策略：XBridge[BEH]具有最强耐受性


XSelect [HSS] 颗粒平台：高强度硅胶颗粒：

– ACQUITY UPLC HSS 1.8µm;

– HPLC XSelect HSS 2.5，3.5，5µm

关键优点:

– T3有效增强对极性分析物的反相保留，极性分析首选柱

– T3平衡保留极性与非极性分析物，杂质方法开发首选柱（T3也是C18柱）

– 多种键合相选择性，UPLC-HPLC方法无缝转换

5 种键合相:

– T3（具有应用特色的C18）：极性保留或方法开发首选柱之一

– C18：选择性与常规硅胶C18接近，便于既有QC方法提速或转换至UPLC

– C18SB：未封端，中-低pH条件下对碱性分析物有更好的保留和峰形

– PFP：对平面芳香化合物、卤代、位置异构、极性化合物的独特选择性

– CN：即可用于正相也可用于反相


XSelect [CSH] 颗粒平台：表面带电杂化颗粒：

– ACQUITY UPLC CSH 1.7µm;

– HPLC XSelect CSH 2.5，3.5，5µm，最大至50x250mm规格制备柱

关键优点:

– 对碱性分析物的峰形与载量极佳，首选柱

– C18与Phenyl，pH1-11，耐受性强，允许宽pH筛选

– 无缝方法转移

– 可放大制备

3 种键合相: – C18 : pH 1-11

– Phenyl : pH 1-11 ，对芳香化合物有独特选择性

– 氟苯基 : pH 1-8，对芳香化合物、卤代有独特选择性


Waters UHPLC柱手册


工具资源——Waters UPLC/HPLC柱选择卡工具资源——Waters消耗品指南【实验室工具书】 http://www.waters.com/waters/library.htm?cid=134618172&lid=10009750&locale=zh_CN


微信：色谱柱选择工具

关注“沃特世”微信

在底部菜单找到“资源中心”


应用资料——Waters网站


Agenda






项目选择与实施策略

常规HPLC系统

o 项目选择：“清洁”样品优先！

• 制药分析：原料药/生产中控/清洁验证；

• 环境/食品：饮用水/饮料；样品SPE处理后

o 项目选择：等度条件优先！【梯度条件，需要根据色谱柱大小进行转换】

o 根据项目需要，给予合适的柱效水平（L/dp）规格配置

o 分离度足够时，使用更短的色谱柱（降低压力、进一步提速）

o 有质谱检测器（QDa）时，可使用更短的色谱柱

UHPLC与UPLC系统

o 需要更高分离度时：没有与MS串联/样品复杂/异构体时

o 不需要那么高的分离度时：有MS选择/分析目标相对较为简单时


柱效与柱长和粒径的关系：N 正比于 L/dp。 ——只有柱效水平相当，才能相当的分离度！



3.5µm 4.6x150mm 42,857

2.7µm 4.6/3.0/2.1 x150mm 55,556

2.5µm 4.6/3.0/2.1 x150mm 60,000

1.7µm 2.1x100mm 58,823



3.5µm 4.6x100mm 28,600

2.7µm 4.6/3.0/2.1 x75mm 27,778

2.5µm 4.6/3.0/2.1 x75mm 30,000

1.7µm 2.1x50mm 29,400


应用示例：CORTECS C18 2.7µm 4.6x150mm ——HPLC系统上提速齐多夫定USP方法，分离度对比（I）

流动相体系：甲醇：水 20：80 柱温 30度

应用文献号： 720005157ZH


应用示例：CORTECS C18 2.7µm 4.6x100mm ——HPLC系统上提速齐多夫定USP方法，分离度对比（II）

如流速=1mL/min 则压力～2533psig

应用文献号： 720005157ZH


客户实例： ChP2015，盐酸溴己新（杂质分析系统适应性）

16.804min

Symmetry C18, 3.5µm, 4.6x150mm

<6min

XBridge C18, 2.5µm XP, 4.6x75mm



常规HPLC系统

o 项目选择：“清洁”样品优先！

• 制药分析：原料药/生产中控/清洁验证；

• 环境/食品：饮用水/饮料；样品SPE处理后

o 项目选择：等度条件优先！【梯度条件，需要根据色谱柱大小进行转换】

o 根据项目需要，给予合适的柱效水平（L/dp）规格配置

o 分离度足够时，使用更短的色谱柱（降低压力、进一步提速）

o 有质谱检测器（QDa）时，可使用更短的色谱柱

UHPLC与UPLC系统

o 需要更高分离度时：没有与MS串联/样品复杂/异构体时

o 不需要那么高的分离度时：有MS选择/分析目标相对较为简单时



19,700

14,150

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8,000

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16,000

20,000

0.00 0.25 0.50 0.75 1.00 1.25

Pla

tes (

4 s

igm

a)

Flow Rate (mL/min)

柱效提高 39%

或流速提升3倍!

CORTECS UPLC 1.6 µm C18+

ACQUITY UPLC 1.7 µm BEH C18




【应用实例】血浆里的合成大麻定量分析 ——CORTECS UPLC C18的杰出分离 vs BEH C18 UPLC

Time0.60 0.80 1.00 1.20 1.40 1.60 1.80 2.00 2.20 2.40 2.60 2.80 3.00 3.20 3.40

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9

1) AM 2223 2) RCS-4, M10 3) RCS-4, M11 4) AM 1248 5) JWH-073 4-butanoic acid

metabolite 6) JWH-073 4-hydroxybutyl

metabolite 7) JWH-018 5-pentanoic acid

metabolite 8) JWH-073 (+/-) 3-

hydroxybutyl metabolite 9) JWH-018 5-hydroxypentyl

metabolite 10) JWH-018 (+/-) 4-

hydroxypentyl metabolite

CORTECS UPLC C18 2.1 x 100 mm 1.6 µm

ACQUITY UPLC BEH C18 2.1 x 100 mm 1.7 µm

峰对5/6, 7/8 和 9/10 (同分异构体) 的完全分离，允许精确定量

CORTECS C18 vs ACQUITY UPLC BEH C18

Minutes

ACQUITY UPLC with Xevo TQD MS


【提速增效】对于大批量样本项目 ——进一步提高流速，加快速度，而不牺牲柱效/分离度

19,700

14,150

4,000

8,000

12,000

16,000

20,000

0.00 0.25 0.50 0.75 1.00 1.25

Pla

tes (

4 s

igm

a)

Flow Rate (mL/min)

39% higher efficiency

或者，提速3倍！

CORTECS UPLC 1.6 µm C18+

ACQUITY UPLC 1.7 µm BEH C18




【应用实例】使用CORTECS UPLC C18+ ——提高流速、提高磺胺类检测通量，而不牺牲分离度

应用文献号： 720004736ZH


分离度要求不高的项目 XP 2.5µm vs UPLC 1.7um ——压力降低40%！

A: water with 0.1% formic acid B: acetonitrile with 0.1% formic acid Flow rate: 0.54 mL/min NSAID mixture (50-100 ug/mL) UV detection at 270 nm Gradient: 35%B to 65%B over 4.85 min, hold for 0.66 min, re-equilibrate at 35%B. Both columns were run on ACQUITY UPLC H-Class system

AU

0.00

0.05

0.10

0.15

0.20

0.25

0.30

0.35

Minutes 0.00 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 6.00 7.00

XSelect CSH C18 XP 2.1 x 75 mm, 2.5 µm

Flow rate = 0.54 mL/min

Pressure = 5,300 PSI

Peak Capacity = 34

AU

0.00

0.05

0.10

0.15

0.20

0.25

0.30

0.35

Minutes 0.00 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 6.00 7.00

ACQUITY UPLC CSH C18 2.1 x 75 mm, 1.7 µm

Flow rate = 0.54 mL/min

Pressure = 9,200 PSI Peak Capacity = 40

Tolm

eti

n

Nap

roxe

n

Fen

op

rofe

n

Ind

om

eth

acin

Dic

lofe

nac

Rs = 5.5

Rs = 6.3

UPLC柱：

分离度高15%

峰容量多20%

XP柱：

vs UPLC柱

压力降低40%！！

允许更高流速！！



常规HPLC系统

UHPLC与UPLC系统

丰富的应用实例【药物质量，生物样本分析，食品安全，环境】

http://www.waters.com/waters/library.htm?cid=511436&lid=134883268&locale=zh_CN

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LOREM IPSUM DOLOR SIT AMET CONSECTETUER ADIPISCING LOREM … · 2016-03-28 · ©2016 Waters Corporation 7 I. 柱效与柱长和粒径的关系：N 正比于 L/dp。 ——柱压